分析等度高效液相系统

请问高效液相和质谱联用的特点，如何提高高效液相的分析度。

戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱的设计和诞生是为了消除和解决由铁及其它过渡金属离子对分离柱、样品和溶剂所造成的污染而引起的各种问题，尤其是在分离过程中能保持蛋白质的完整性和其在翻译修饰后的稳定性，UltiMate3000能与戴安的领先产品ProSwift、ProPac和DNAPac离子分离柱配合使用，钛系统高效液相色谱的流路是由钛金属、陶瓷和高性能的聚合物所构成的，因此即使在高盐、强酸、强碱的恶劣条件下，系统也能可靠和长时间地工作，并延长系统的使用寿命。戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱是一套完全生物兼容的系统，为以蛋白质、多肽、抗体和核（苷）酸为基础的药品研发提供了一套完整的分析工具。高性能生物分析系统戴安UltiMate3000钛系统高压液相色谱系统拥有钛质泵头以及PEEK流路（见图1），能耐高盐、强酸以及强碱。这种特性使系统在蛋白质、单克隆抗体（MAbs）（见图2）、多肽、核酸、氨基酸以及其它生物分子的分析上拥有杰出的表现。惰性流路使系统在苛刻的环境下仍然能够长时间工作，延长系统的使用寿命，并且惰性流路能保证分离过程中保持蛋白质的完整性和翻译后的稳定性，分析结果的重复性好.[IMG]http://www.dionex.com.cn/images/Ti-1.jpg[/IMG]钛金属泵、陶瓷和高性能的聚合物流路泵单梯度和双梯度泵的选择，使戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱在应用和通量两方面都更具弹性。泵的流速范围也适合从微量、普通到半制备的应用。标准配置的主动型后密封圈清洗系统也极大地减少了活塞和密封圈的磨损。此外，它的排气装置也是非金属材质。柱温箱在柱温箱内不仅可以根据不同的应用需要而配置不同数量和种类的切换阀，如自动多步骤和多维液相分离流程，而且还拥有对分离柱的自动鉴别功能，能自动提供分离柱的使用情况和信息，从而符合药物和食品管理机构的要求。UV-Vis 和二极管阵列检测器都是高灵敏度、低噪声、低漂移，检测范围达190–900 nm和高频率采样的检测器，因此也适用于超高速液相。同时也可以选配各种生物兼容型的流通池来配合从微量、普通到半制备的应用。自动进样器和馏份收集器自动进样器配有双针头设计。进样针头为PEEK材料，确保管路没有铁及其它过渡金属离子的污染，实现完全的生物兼容。戴安独有的馏份收集器附件为它的自动进样器添加了带有温控的馏份收集和自动再进样功能，这样就能够实现先进的自动多步骤和多维液相分离流程，这些方法能够大大增强对样品的分析能力，同时也避免了大量的人力和由此而造成的结果误差。使用者可以根据时间、峰值、外部信号或手动触发等模式对留份进行收集。软件基于数据合成的二维图像有助于使用者对分析结果有直观的理解。变色龙数据处理软件变色龙数据处理软件能够在线控制UltiMate3000钛系统高效液相色谱的各个模块。易用的向导和数据挖掘工具使得应用方法的编写和开发、快速的数据和结果处理变得十分的简便。自动的系统监测和诊断功能以及在线的故障排除指南也有效地缩短了停机时间。

通常进行高效液相色谱分析是优先考虑的是样品不必进行预处理，就可经溶样来进行分析，因此样品在有机溶剂和水溶液中的相对溶解性是样品最重要的性质。由于样品在有机溶剂中溶解度的大小，初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物，进而推断用非极性溶解剂戊烷、己烷、庚烷等，还是极性溶解剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品，并通过实验判断。若样品溶于非极性溶剂，表明样品为非极性化合物，通常可选用吸附色谱法或正相分配色谱法、正相键合色谱法进行分析。若样品溶于极性溶剂或相混溶的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常可选用反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。若样品溶于水相，可首先检查水溶液的pH值，若呈中性为非离子型组分，常可用反相（或正相）键合色谱法进行分析。若pH值呈弱酸性，可采用抑制样品电离的方法，在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2~3，再用反相键合相色谱法进行分析。若pH值呈弱碱性，则可向流动相中加入阳离子型反离子，再用离子对色谱法进行分析。若pH呈强酸性或强碱性，则可用离子色谱法进行分析。对呈强离子型水溶性生物大分子的分析仍是高效液相色谱的特殊难题之一，近年随凝胶过滤色谱和高效亲和色谱的迅速发展，对解决像蛋白质、核酸等生物大分子的分析提供了有效的途径。来源：互联网

1 高效液相色谱法的特点高效液相色谱法是20世纪70年代急剧发展起来的一项高效、快速的分离分析技术。液相色谱法是指流动相为液体的色谱技术。在经典的液体柱色谱法基础上，引入了气相色谱法的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分析速度快，分离效率高和操作自动化。这种柱色谱技术称做高效液相色谱法。它可用来作液固吸附，液液分配，离子交换和空间排阻色谱（即凝胶渗透色谱）分析，应用非常广泛。高效液相色谱法具有以下几个突出的特点。1.1 高压 液相色谱法以液体作为流动相（称为载液），液体流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。在现代液相色谱法中供液压力和进样压力都很高，一般可达到150~350×105Pa。高压是高效液相色谱法的一个突出特点。1.2 高速 高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液体色谱法少得多，一般都小于1h，例如分离苯的羟基化合物七个组分，只需要1min就可完成；对氨基酸分离，用经典色谱柱，柱长约170㎝、柱径0.9㎝、流动相流速30mL·h-1，需用20多小时才能分离出20种氨基酸，而用高效液相色谱法，只需1h之内即可完成。载液在色谱柱内的流速较之经典液体色谱法高得多，一般可达1~10mL·min-1。1.3高效 气相色谱法的分离效能很高，柱效约为2000塔板/米；而高效液相色谱法的柱效更高，约可达3万塔板/米以上。这是由于近年来研究出了许多新型固定相（如化学键合固定相），使分离效率大大提高。1.4高灵敏度 高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如紫外检测器的最小检测量可达纳克数量级（10-9g）；荧光检测器的灵敏度可达10-11g。高效液相色谱的高灵敏度还表现在所需试样很少，微升数量级的试样就足以进行全分析。高效液相色谱法由于具有上述优点，因而在色谱文献中又将它称为现代液相色谱法，高压液相色谱法或高速液相色谱法。气相色谱法虽具有分析能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大（大于400以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75％~80％）原则上都可用高效液相色谱法来进行分离、分析。高效液相色谱法的基本概念及理论基础，如保留值、分配系数、分配比、分配度、塔板理论、速率理论等与气相色谱法是一致的，但有其不同之处。液相色谱法与气相色谱法的主要区别可归结于流动相的不同。液相色谱法的流动相为液体，气相色谱法的流动相为气体。液体的扩散系数只有气体的万分之一至十万分之一、液体的粘度比气体大一百倍，而密度为气体的一千倍左右。这些差别显然将对色谱过程产生影响。

8月，赛智科技隆重推出了LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统——LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，此前，公司产品已经进入清华大学、中国地质大学、南方科技大学、中国检验检疫科学研究院、中科院青岛能源所、华大基因等机构，获得了广泛认可。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561917027136.jpeg[/img]近年来，在分析测试领域，高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术的应用需求日益增长，赛智科技紧跟市场需求，通过自主研发和生产，推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，此举不仅满足了用户的多样化需求，更丰富了公司的产品线。这是赛智科技的一小步，却是国产高端分析仪器市场的一大步。[b]长期坚持自主研发，推出国产高端新品[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是重要的科研分析仪器，可以对复杂的混合物样品进行分离并分析样品的成分及含量，在食品安全、药物分析、生命科学研究、环境监测、临床检测、工业制造等多个领域都有广泛应用。但是，由于国内企业起步较晚，我国的高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]市场长期被Waters、安捷伦、岛津、赛默飞等跨国公司垄断，国产厂商只能做中低端市场，产品附加值较低。《第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》中明确提出，要深入实施制造强国战略，加强高端科研仪器设备研发制造。在此背景下，赛智科技坚持自主研发核心部件，积极公关技术难点，经过不懈努力，终于推出了拥有自主知识产权的国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，成为少数掌握高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]核心制造技术的国内企业。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561135690083.png[/img][b]深耕分析测试领域，树立中国制造业标杆[/b]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的研发和生产需要系统集成，比如，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）是由LC8100系列溶剂组织器、LC8200系列高压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器（或选配DAD检测器）等核心零部件组成，而LC8000四元低压自动系统则是由LC8245四元低压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器等核心部件组成，要想实现高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的整机研发，核心部件的制造和整机系统的设计都非常关键。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056712030640.png[/img]自成立以来，赛智科技长期专注于分析测试领域，公司创始人路文初先生拥有深厚的学术和科研背景，他和团队共同研发的N2000色谱工作站操作简单、性价比高，目前拥有的客户数已经突破十万，在国内市场的占有率高达80%以上。不仅如此，在过去的十多年时间里，赛智科技不断强化自研自产能力，多项技术打破了国外技术垄断，并且建立了全流程的自研产品线，在高壁垒的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]领域，逐步实现了溶剂组织器、高压输液泵、四元低压输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外-可见检测器等核心零部件的生产制造，实现了核心零部件全部国产化，树立了中国高端仪器制造业标杆。[b]掌握核心技术专利，积极开拓海内外市场[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是基础医学、药学、材料科学领域的基础科研仪器，随着中国产业升级的稳步推进，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]市场也从常规的色谱分离向高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析、二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析方向拓展，此次，赛智科技推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，未来将会成为市场主流。LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）具有卓越的梯度精度和优化的延迟体积，更加适合复杂的应用环境或与质谱等联用。凭借进样器带来的自动化进样便利和多种检测器，获得更多数据易如反掌，同时产品还具有超高性价比和良好的稳定性，且维护简单。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056203994952.png[/img]LC8000四元低压自动系统具有极佳的灵活性且高度自动化，可以轻松应对药物、环境、食品安全、石油化工、农林牧渔等各个领域的复杂需求。在Ultrachrom色谱工作站控制下，可以实现全自动分析、报告、系统冲洗和关机，大幅提高工作效率。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430571355364781.png[/img]虽然是国产高端新品，但是依托赛智科技长期自主研发积累的技术专利和制造能力，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，以卓越的梯度精度、高度自动化、超高性价比和功能强大的配套色谱软件，让所有用户都可以获得良好的产品性能，并能大幅提高工作效率，在药物分析、食品和环境中的污染物检测、生物医药等相关领域都有广泛的应用需求。赛智科技长期从事的是科学仪器的研发和生产，公司深知只有把核心技术掌握在自己手中，才能真正掌握竞争和发展的主动权。正因如此，赛智科技始终坚持自主研发与“产学研”相结合的创新方式，产品的国产化率一直处于国内行业前列地位，目前公司已打通了高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]研发、生产、销售、售后服务的发展全链条，未来该系统将会应用于国内的大专院校、科研单位、化工厂、医院、制药厂、生物科技公司、第三方检测机构等多个领域，并有望远销伊朗、印度尼西亚、印度、泰国等海外市场扩大销售份额。8月，赛智科技隆重推出了LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统——LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，此前，公司产品已经进入清华大学、中国地质大学、南方科技大学、中国检验检疫科学研究院、中科院青岛能源所、华大基因等机构，获得了广泛认可。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561917027136.jpeg[/img]近年来，在分析测试领域，高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术的应用需求日益增长，赛智科技紧跟市场需求，通过自主研发和生产，推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，此举不仅满足了用户的多样化需求，更丰富了公司的产品线。这是赛智科技的一小步，却是国产高端分析仪器市场的一大步。[b]长期坚持自主研发，推出国产高端新品[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是重要的科研分析仪器，可以对复杂的混合物样品进行分离并分析样品的成分及含量，在食品安全、药物分析、生命科学研究、环境监测、临床检测、工业制造等多个领域都有广泛应用。但是，由于国内企业起步较晚，我国的高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]市场长期被Waters、安捷伦、岛津、赛默飞等跨国公司垄断，国产厂商只能做中低端市场，产品附加值较低。《第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》中明确提出，要深入实施制造强国战略，加强高端科研仪器设备研发制造。在此背景下，赛智科技坚持自主研发核心部件，积极公关技术难点，经过不懈努力，终于推出了拥有自主知识产权的国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，成为少数掌握高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]核心制造技术的国内企业。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561135690083.png[/img][b]深耕分析测试领域，树立中国制造业标杆[/b]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的研发和生产需要系统集成，比如，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）是由LC8100系列溶剂组织器、LC8200系列高压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器（或选配DAD检测器）等核心零部件组成，而LC8000四元低压自动系统则是由LC8245四元低压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器等核心部件组成，要想实现高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的整机研发，核心部件的制造和整机系统的设计都非常关键。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056712030640.png[/img]自成立以来，赛智科技长期专注于分析测试领域，公司创始人路文初先生拥有深厚的学术和科研背景，他和团队共同研发的N2000色谱工作站操作简单、性价比高，目前拥有的客户数已经突破十万，在国内市场的占有率高达80%以上。不仅如此，在过去的十多年时间里，赛智科技不断强化自研自产能力，多项技术打破了国外技术垄断，并且建立了全流程的自研产品线，在高壁垒的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]领域，逐步实现了溶剂组织器、高压输液泵、四元低压输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外-可见检测器等核心零部件的生产制造，实现了核心零部件全部国产化，树立了中国高端仪器制造业标杆。[b]掌握核心技术专利，积极开拓海内外市场[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是基础医学、药学、材料科学领域的基础科研仪器，随着中国产业升级的稳步推进，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]市场也从常规的色谱分离向高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析、二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析方向拓展，此次，赛智科技推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，未来将会成为市场主流。LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）具有卓越的梯度精度和优化的延迟体积，更加适合复杂的应用环境或与质谱等联用。凭借进样器带来的自动化进样便利和多种检测器，获得更多数据易如反掌，同时产品还具有超高性价比和良好的稳定性，且维护简单。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056203994952.png[/img]LC8000四元低压自动系统具有极佳的灵活性且高度自动化，可以轻松应对药物、环境、食品安全、石油化工、农林牧渔等各个领域的复杂需求。在Ultrachrom色谱工作站控制下，可以实现全自动分析、报告、系统冲洗和关机，大幅提高工作效率。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430571355364781.png[/img]虽然是国产高端新品，但是依托赛智科技长期自主研发积累的技术专利和制造能力，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，以卓越的梯度精度、高度自动化、超高性价比和功能强大的配套色谱软件，让所有用户都可以获得良好的产品性能，并能大幅提高工作效率，在药物分析、食品和环境中的污染物检测、生物医药等相关领域都有广泛的应用需求。赛智科技长期从事的是科学仪器的研发和生产，公司深知只有把核心技术掌握在自己手中，才能真正掌握竞争和发展的主动权。正因如此，赛智科技始终坚持自主研发与“产学研”相结合的创新方式，产品的国产化率一直处于国内行业前列地位，目前公司已打通了高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]研发、生产、销售、售后服务的发展全链条，未来该系统将会应用于国内的大专院校、科研单位、化工厂、医院、制药厂、生物科技公司、第三方检测机构等多个领域，并有望远销伊朗、印度尼西亚、印度、泰国等海外市场扩大销售份额。

浅谈高效液相色谱分析中常见问题及对策高效液相色谱（HPLC）作为一种分离技术和方法，目前已经发展到一个全新的阶段。高精度的输液泵，应用广泛的色谱分离柱，低噪音、高灵敏度的各种检测器和功能强大的数据处理软件系统的出现，都推动了液相色谱技术的迅猛发展。液相色谱仪正以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐，广泛地应用于医药卫生、环境监测、食品检测等领域。作者本人从事液相色谱分析分析工作二十多年，应用HPLC技术在血药浓度、生物胺、核普酸、蛋自质浓度测定等实际工作中，积累了许多的方法和经验，在这里与大家交流，希望能对同行们有所帮助和借鉴，共同促进液相色谱分析技术的发展。1 高效液相色谱仪的基本工作原理　　高效液相色谱仪如图1所示，是由溶液贮器、高压泵、进样系统、色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。http://www.came-online.org/userfiles/090109150117044709ny0sff.jpg

在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 　　造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡;二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净;三是在注入样品时不注意混入了空气。 为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。　　常用脱气方法有以下几种：1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少;2. 加热回流法 此法的脱气效果较好;3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多体系。

制备型高效液相色谱系统的应用领域制备型高效液相色谱系统主要应用在植化、合成、制药、生物及生化等领域的产品的提取及纯化工作中。在不同的工作领域中，组份的提取和纯化量的差异是很大的。在生物技术领域中，酶的分离是微克级；在植化和合成化学领域中，为了鉴别未知成份并进行结构测定，需要得到一至若干毫克的纯品；在药品和医药学测试中，需要克级的标准品和对照品；在当今的工业级提纯中，制药成份往往需要千克级的提取。制备型高效液相的应用领域可以归纳在下表中。 成份量:所在领域 微克: 生物技术领域的酶的分离、生物学和生化学测试 毫克: 结构描述和特征鉴定，包括：生产中的副产品、生物矩阵的新陈代谢产物、天然产物 克级: 对照品（分析标准）毒物学分析所需组份：高纯品中的主要成份、副产品的分离提取 千克级:工业规模生产，活性成份，药物 制备方法的发展和扩大规模的计算　　在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级，甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:100000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积（小于1:100）。 在这种条件下，会达到很好的分离效果，峰形尖锐并且很对称。而在制备液相中，最大的区别就是超量进样。其结果，超量进样的方法和分析方法的放大将在下章内介绍。 吸附变化线　　分析液相的目的是给一种组份定性、定量。重要的色谱参数有溶解度、峰宽和峰的对称性。如果进样量越来越多，峰高和峰面积会增加，但峰的对称性和容量因子保持不变。如下图。 　 在分析液相中，最佳的峰形应是一条高斯曲线。峰的标准背离 бV 描述了其对称性和与高斯曲线的相似性。容量因子是与一种不保留物质的保留时间t0相关的保留时间。　 如果将超过一定量的样品注射进色谱柱，吸附变化线就会成非线性。这意味着峰形会变的不再对称，表现为严重的拖尾和容量因子的缩小。如下图。在制备液相中，这种效果称作浓缩超量进样。在一些情况中，根据进样量的增加，容量因子也相应变大，并造成很强的前峰。既然吸附变化线取决于组份的多少，那么液相色谱柱的载样能力就必须根据不同的制备液相实验来决定。 色谱柱载样和超量载样　　大样品量的纯化有两种可行的方法：分析系统的放大或色谱柱超量载样。分析系统的放大意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品，因此这种方法是不经济的。 因此色谱柱超量载样，暨在相同的分析条件下超量进样通常是一种很好的选择。使用色谱柱超量载样的方法，在分析柱上甚至可以进行毫克级的分离。但更大 量的样品分离就需要整个系统的放大。色谱柱超量载样可以通过两钟方法进行— 浓缩法和体积超载法。　在浓缩法中，样品的浓度会提高，但进样体积保持不变。容量因子k’降低，同时峰形从高斯曲线变为矩形。如下图。浓缩法超量载样只有在样品组份在流动相中具有良好的溶解性的条件下才有可能采用。 　　如果样品组份的溶解性很差，浓缩法超量载样不能使用。同时更多的样品体积注射到色谱柱中，这种技术称作体积法超量载样。超过一定的进样体积，峰高不变，但峰变宽并且呈矩形。在制备液相中浓缩法超量载样比体积法超量载样更受欢迎，因为可被分离的样品量更高。既然组份的溶解性通常是一个限制因素，所以两钟超量载样技术通常被结合起来使用。两种技术的概览浓缩法超量载样 　 体积法超量载样 取决于组份在流动相中的溶解性 　 取决于进样体积 吸附变化线的制备部分 　 吸附变化线的分析部分 生产效率决定于选择性 　 生产效率决定于制备柱直径 受固定相粒度大小的影响不大 　 需要小颗粒填料 方法的放大　浓缩法超量载样和体积法超量载样都会导致组份溶解性的降低。既然组份的分离需要一定的溶解性，那么在放大分析方法的时候，优化溶解性、特别是选择性就是一项很重要的工作。 　　因为选择性和超量载样潜力是相互依靠的，选择性的提高会提高一次运行中所分离的样品量，因此从分析方法到制备方法的放大和方法的优化需要三个步骤。 1. 优化分析方法的选择性。2. 在分析柱上进行超量载样。3. 放大到制备柱 制备型高效液相色谱的目的　　判断制备型高效液相色谱使用的结果有三个重要参数：产品的纯度、产量和生产效率。三个参数之间是相对独立的，因此很难同时使用这三个参数来优化制备型高效液相色谱方法。见图形6。 色谱图1显示在制备型高效液相色谱的使用中有很高的生产效率，但是两种组份的分离效果却是很差的。这种方法很可能得到两种组份的高纯品，但是产量和收率却是很低的。　 在色谱图2中峰有很好的分离，因此这种方法可以得到两种组份的高纯品和高产量，但是生产效率却很低。　 色谱图3中的情况是三个参数综合后得到的最优化的结果。峰在基线上被完全分开，这使得产品纯度、产量和生产效率都达到最高。　 在实际应用中，每个参数的重要性都是不同的。如为了进行活性或药物测试，某种组份必须被完全单独提取，那么组份的纯度是最重要的参数，产量和生产效率是其次的。如果某种合成中间体必须被纯化，并且需要有足够的量为下一步合成作准备，那么纯度就不是最重要的了。而生产效率在这种情况下就是个首先需要解决的问题，因为其直接关系到完成整个合成工作的进程和速度。同时产量也是很重要的，因为高价值组份的损失需要控制在最少的范围内。

高效液相色谱是分析界应用最广泛的仪器之一。对于高效液相色谱的应用和维护，有许多网友已经写了大量的文章，很值得学习。然而，qignqingcao这次在准备这篇文章的时候，阅读了《系统论》，突然灵感凸显，觉得我们可以用一些理论来解释来研究我们的高效液相色谱。用理论这个工具，让我们更好地认识仪器，从而上升到一个哲学的思考。 为了写这篇文章，我首先推荐一下青青草在2004年写的一篇文章。关于液相色谱一些故障的原因的查阅和排除。http://bbs.instrument.com.cn/topic/2205295_1?order=threadid 在写那篇文章的时候，我也是一种经验性的积累，今天看看，实际上，如果当时用系统观点去看，也许会更有理论性。 言归正传，我们继续用系统论去看高效液相色谱。 我们知道，基本的高效液相色谱分为五大系统：动力传输系统（流动相，泵）；进样系统；分离系统（色谱柱）；检测系统；数据采集系统。这五大系统，如果拿出一个系统来看，都可以独立形成一个系统，而我们把这五大系统整合在一起，那么就形成了一个大的高效液相色谱大系统。系统论知识告诉我们：凡是系统在一定意义上必定是整体。而系统的整体性并不是各个元素的简单加和。各组成部分和各层次的充分协调和链接，提高系统的整体运行效果。 我们可以看，泵泵出流动相会有好多因素影响。主要包括泵流速，流动相组成，流动相是否干净，流动相组成和样品的联系等等。这些因素都有可能会影响到后续的分析。举一个简单的例子：如果我用的是反相色谱柱，流动相用的是非极性溶剂（二氯甲烷，氯仿，正己烷等）那么就会影响到后续的分析。比方说，流动相在使用前经过滤膜的过滤，那么发生柱压增高的几率就减少。 我们再以进样系统为例：如果进样中有一个小气泡，那么，这个小气泡影响分析的几率会很大。而且这个小气泡在进样者看来是一个小小的问题，但是，通过系统的放大，可能就在检测器和数据采集中会有极大的显现。 这给我们一个很大的启示：系统的整合性并不是各元素的简单加和。如果某一个系统的小小疏忽，就有可能造成整个系统的极大问题。这就是“蝴蝶效应”。所以，我们在做高效液相色谱时候，一点点的马虎，可能引起很大的问题。 系统论知识还告诉我们：一个系统和包围该系统的环境之间通常都有物质、能量和信息的交换。外界环境的变化会引起系统特性的改变；相应地引起系统内各部分相关关系和功能的变化。 我记得当年检测食品中的糖，用的是示差折光检测器。一开始做的时候，总是发现基线很不稳。根本就不能很好地分析。检查了色谱柱，泵，流动相，都没有什么问题。后来，我们发现晚上测试比白天测试，基线要好很多。后来，我们立刻明白了对于示差折光检测器，对于环境是相当敏感的。而恰好头顶有一个空调，空调的运转，引起了气流的变化。而晚上，我们把空调关闭，气流影响就小，基线就变好。后来，我们通过实验，验证了我们的假设。我们就把仪器搬到一间相对封闭的屋子中，这台高效液相色谱的基线极其的好。 又有一个例子。我们单位购买了一台HPLC，放在一个狭长的单独屋子中，但是，在使用这台仪器一段时间后，仪器的电路板烧坏了。找了工程师来，更换电路板，还是在一段时间依然烧坏。尤其在夏天更容易烧坏电路板。这是什么原因呢？我和几位工程师分析了房屋的结构。终于明白了，这个狭长的屋子一面是封闭的。而仪器恰好是放在那个封闭的面。上海的夏天空气湿度很大，空调开的冷，外部的气流进入狭长的半封闭屋子，恰好把气流堵在那个封闭面上。后来，我们购买了一台空气干燥吸收器，每天开启，没到一天，就能够收集到一大桶水。而这台HPLC仪器在添加了一台空气干燥器后，从没有发生相似的故障。 对于使用高效液相色谱，我们还可以发现，一开始用仪器的时候，仪器不是很听话。原因我觉得也是可以用系统论解释。因为HPLC作为一个系统和环境之间的物质，能量，信息交换，需要有一个适应过程。操作者也需要对仪器有一个认识。而当我们用熟悉了仪器，随便怎么用，好像仪器都不会出问题。这就是系统和环境达到了一个正向反馈。 当然，系统论还告诉我们：任何物质的运动过程都包含着无序的热运动和有序的定向运动。一切物质系统都是有序和无序的对立统一。这是系统内耗的普遍性。而我们知道，hplc在用的过程中必定会有系统的内耗问题，也就是突然仪器出现故障。那么这个故障，并不是头痛医头，脚痛医脚。好多原因我们需要用系统的观点去看到。包括大到操作环境问题，小到密封圈问题。漏液问题，气泡问题。检测器污染问题，管路堵塞问题，静电问题等等。问题的产生，需要我们去研究，解决。实际上，对于初学HPLC的朋友们，遇到各种HPLC的问题，就是自己能力提升的一次机会。如果你能够用整体的观点去排查故障，那么，你就有可能掌握如何驾驭HPLC，使得仪器为你所用。 在这个炎热的夏季，qingqingcao的面前只是一台电脑，我已经离开HPLC测试了。写下这些文字，我自己也在回忆以往的点滴。也希望我们的90后的从事HPLC分析的同志们，能够有些启示。

8月，赛智科技隆重推出了LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统——LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，此前，公司产品已经进入清华大学、中国地质大学、南方科技大学、中国检验检疫科学研究院、中科院青岛能源所、华大基因等机构，获得了广泛认可。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561917027136.jpeg[/img]近年来，在分析测试领域，高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术的应用需求日益增长，赛智科技紧跟市场需求，通过自主研发和生产，推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，此举不仅满足了用户的多样化需求，更丰富了公司的产品线。这是赛智科技的一小步，却是国产高端分析仪器市场的一大步。[b]长期坚持自主研发，推出国产高端新品[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是重要的科研分析仪器，可以对复杂的混合物样品进行分离并分析样品的成分及含量，在食品安全、药物分析、生命科学研究、环境监测、临床检测、工业制造等多个领域都有广泛应用。但是，由于国内企业起步较晚，我国的高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]市场长期被Waters、安捷伦、岛津、赛默飞等跨国公司垄断，国产厂商只能做中低端市场，产品附加值较低。《第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》中明确提出，要深入实施制造强国战略，加强高端科研仪器设备研发制造。在此背景下，赛智科技坚持自主研发核心部件，积极公关技术难点，经过不懈努力，终于推出了拥有自主知识产权的国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，成为少数掌握高端[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]核心制造技术的国内企业。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430561135690083.png[/img][b]深耕分析测试领域，树立中国制造业标杆[/b]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的研发和生产需要系统集成，比如，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）是由LC8100系列溶剂组织器、LC8200系列高压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器（或选配DAD检测器）等核心零部件组成，而LC8000四元低压自动系统则是由LC8245四元低压输液泵、LC8320自动进样器、LC8400柱温箱、LC8500紫外-可见检测器等核心部件组成，要想实现高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的整机研发，核心部件的制造和整机系统的设计都非常关键。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056712030640.png[/img]自成立以来，赛智科技长期专注于分析测试领域，公司创始人路文初先生拥有深厚的学术和科研背景，他和团队共同研发的N2000色谱工作站操作简单、性价比高，目前拥有的客户数已经突破十万，在国内市场的占有率高达80%以上。不仅如此，在过去的十多年时间里，赛智科技不断强化自研自产能力，多项技术打破了国外技术垄断，并且建立了全流程的自研产品线，在高壁垒的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]领域，逐步实现了溶剂组织器、高压输液泵、四元低压输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外-可见检测器等核心零部件的生产制造，实现了核心零部件全部国产化，树立了中国高端仪器制造业标杆。[b]掌握核心技术专利，积极开拓海内外市场[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]是基础医学、药学、材料科学领域的基础科研仪器，随着中国产业升级的稳步推进，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]市场也从常规的色谱分离向高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析、二维[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析方向拓展，此次，赛智科技推出国产高端新品——LC8000系列高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统，未来将会成为市场主流。LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）具有卓越的梯度精度和优化的延迟体积，更加适合复杂的应用环境或与质谱等联用。凭借进样器带来的自动化进样便利和多种检测器，获得更多数据易如反掌，同时产品还具有超高性价比和良好的稳定性，且维护简单。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/20230831143056203994952.png[/img]LC8000四元低压自动系统具有极佳的灵活性且高度自动化，可以轻松应对药物、环境、食品安全、石油化工、农林牧渔等各个领域的复杂需求。在Ultrachrom色谱工作站控制下，可以实现全自动分析、报告、系统冲洗和关机，大幅提高工作效率。[img]http://objectmc2.oss-cn-shenzhen.aliyuncs.com/yhdoc/20230831/202308311430571355364781.png[/img]虽然是国产高端新品，但是依托赛智科技长期自主研发积累的技术专利和制造能力，LC8000二元高压自动系统（紫外/DAD）和LC8000四元低压自动系统，以卓越的梯度精度、高度自动化、超高性价比和功能强大的配套色谱软件，让所有用户都可以获得良好的产品性能，并能大幅提高工作效率，在药物分析、食品和环境中的污染物检测、生物医药等相关领域都有广泛的应用需求。赛智科技长期从事的是科学仪器的研发和生产，公司深知只有把核心技术掌握在自己手中，才能真正掌握竞争和发展的主动权。正因如此，赛智科技始终坚持自主研发与“产学研”相结合的创新方式，产品的国产化率一直处于国内行业前列地位，目前公司已打通了高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]研发、生产、销售、售后服务的发展全链条，未来该系统将会应用于国内的大专院校、科研单位、化工厂、医院、制药厂、生物科技公司、第三方检测机构等多个领域，并有望远销伊朗、印度尼西亚、印度、泰国等海外市场扩大销售份额。

[font=黑体][size=4][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法分析中不确定度的评定[/size][/font][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法在标准曲线的绘制、标准样品的使用、测定结果的输出等方面极为相似，因而，评定其分析不确定度时具有相同的数学模型，且各不确定度分项的评定可以采用相似的评定方法。本文参照有关文献，以高效液相色谱法测定胺苯磺隆为例，对其不确定度的评定进行了讨论。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=61046][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法分析中不确定度的评定[/url]

高效液相色谱法分析中药及植物药的进展植物药越来越受到人们的重视。据报道，全世界大约有70%的人口医疗依靠各种类型的植物药〔1，2〕。对植物药的兴趣主要基于以下两个原因，一是人们普遍认为植物药具有较小的毒性，二是用合成方法寻求新药物的可能性变得越来越小，同时已有的西药对一些疑难病症无能为力。随着对植物药需求的不断增长，开展植物药的药代动力学、毒理学研究和质量控制，开发快速、灵敏、具有选择性的分析方法也越来越迫切。过去20年的实践经验表明，高效液相色谱（HPLC）是一种非常有效和普遍适用的植物药分析方法。近来，由于各种分析柱、高选择性和高灵敏度的检测器和复杂的商品化仪器联用系统的出现，植物药分析领域已被大大地推进。本文就HPLC在中药及植物药研究中应用的最新进展做简要评述。

[align=center]高效液相色谱组分定性分析方法简述[/align]1、保留时间对照法（1）外标对照法 即在相同的色谱条件下，分别进样品溶液与高纯度的单一组分对照品溶液，这里推荐先进样品溶液，确定系统适应性没有问题了再进对照品溶液，对比两组分的保留时间，一般保留时间相对差异在5%以内，同时绝对误差在0.1min以内的认定为同一个物质，但仍遵守“同一组分保留时间肯定一样，但保留时间一样不一定是同一组分，保留时间不一样的肯定不是同一组分”的原则。（2）标准加入法 即在相同的色谱条件下，将高纯度的对照品加入样品溶液中再上机检测，与相同浓度未加对照品的样品溶液比较，峰高或峰面积应呈等比例增加的，可认定为是同一物质。此法比较适用于组分比较复杂，邻近有干扰组分峰时。上述方法尽量使用柱效高或长柱，峰高尽量小一些，甚至可以小到定量限浓度，一些在高响应下是单个峰的，在低响应时可能是两个峰，所以一定要注意峰形，只要峰形与对照品不一致，就要怀疑不是同一个物质。再严谨一点，还可以改变流动相组成、色谱柱、柱温等，样品中的组分峰应与对照品的组分峰有相同的变化。2、利用检测器选择性进行鉴别（1）DAD检测器波长扫描法 对于配有DAD检测器的还可以对比三维扫描图谱和峰纯度计算进行辅助定性。如果没有配DAD检测器，但有具波长扫描功能的可变波长检测器的，可以使用停泵扫描功能，查看扫描图谱进行鉴别。（2）质谱检测器鉴别法 该方法适用于联用有质谱分析仪的高效液相色谱仪，通过比较碎片峰进行比较鉴别。3、破坏法 将物质进行化学破坏，可以是酸、碱降解，也可以是衍生后再进行检测，看组分峰的变化。当然，此方法不适用于组分复杂的样品。

甜菜碱、甜菜碱盐酸盐产品怎样用高效液相色谱分析？谁有分析方法？产品是甜菜碱（三甲胺乙内酯）、甜菜碱盐酸盐，还有维生素（A\B\C\D\E），这几样产品怎么用液相色谱分析纯度（含量）？维生素系列能不能用紫外检测器全做了？

[color=#444444][color=#444444]agilent 1260高效液相色谱，[/color]因为重装了系统和工作站软件，之前进样结束后会自动[color=#444444]弹出[/color]分析报告，而且在脱机中可以找到谱图，现在分析报告和图谱都没有，请问大家要怎么设置啊？[font=&][color=#444444]谢谢各位大神！[/color][/font][/color]

[b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]与液相的概念[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url][/b][align=left][/align][align=left][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果而使不同组分得到分离。[/align][b]液相[/b][align=left][/align][align=left]高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上引用了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的理论。在技术上，流动相改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而,使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时，柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。[/align][align=left][/align][align=center][b][/b][/align][b]应用范围[/b][align=left] [/align][b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url][/b][align=left][/align][align=left]分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。。。[/align][align=left]受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法进行分析，一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。。。[/align][align=left][/align][b]液相[/b][align=left][/align][align=left]高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此，不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（些物质几乎占有机物总数的75%～80%）。原则上，都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中能用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。[/align][align=left] [/align][b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]仪器构造[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url][/b][align=left]由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。[/align][align=left][b]1.柱箱：[/b][/align][align=left]色谱柱是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的心脏，样品中的各个组份在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离，从而达到分析的目的，柱箱的作用就是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器，因此，进样器和检测器的下端（接头）均插入柱箱。柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱并且操作方便。色谱柱（样品）需要在一定的温度条件下工作，因此，采用微机对柱箱进行温度控制，并且由于设计合理，柱箱内的梯度很小。[/align][align=left]对于一些成份复杂、沸程较宽的样品，柱箱还可进行三阶程序升温控制。且程序设定后自动运行无需人工干预，降温时还能自动后开门排热。[/align][align=left][/align][align=left][b]2.进样器：[/b][/align][align=left]进样器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品，进样器还必须将其汽化。因此，采用微机对进样器进行温度控制。[/align][align=left]根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式，共有五种进样器可供选择：[/align][align=left]填充柱进样器[/align][align=left]毛细管不分流进样器附件[/align][align=left]毛细管分流进样器附件[/align][align=left]毛细管分流/不分流进样器[/align][align=left]六通阀气体进样器[/align][align=left][/align][align=left][b]3.检测器：[/b][/align][align=left]检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号（电信号）。[/align][align=left]检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作，因此，采用微机对检测器进行温度控制。[/align][align=left]根据各种样品的化学物理特性，共有五种检测器可供选择：[/align][align=left]氢火焰离子化检测器（FID）；[/align][align=left]热导检测器（TCD）；[/align][align=left]电子捕获检测器（ECD）；[/align][align=left]氮磷检测器（NPD）；[/align][align=left]火焰光度检测器（FPD）；[/align][align=left][/align][align=left][b]4.数据处理系统：[/b][/align][align=left]该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。[/align][b]高效液相仪器构造液相[/b][align=left][/align][align=left]高效液相色谱仪主要有：进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。[/align][align=left][b]1.进样系统[/b][/align][align=left]一般采用：隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。[/align][align=left][/align][align=left][b]2.输液系统[/b][/align][align=left]该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47～4.4×107Pa流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或改用。。。[/align][align=left][/align][align=left][b]3.分离系统[/b][/align][align=left]该系统包括：色谱柱、连接管和恒温器等。。。[/align][align=left]色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管）内径为2～5mm，由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，柱内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成），固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如，硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中固定相的制备一样）或者用化学法偶联各种基因（如，磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。。。[/align][align=left][/align][align=left]因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性，例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。。。[/align][align=left][/align][align=left]另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小、微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。[/align][align=left][/align][align=left]这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60℃通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。[/align][align=left][/align][align=left][b]4.检测系统[/b][/align][align=left]高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种：[/align][align=left][b](1)紫外检测器[/b][/align][align=left]该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。[/align][align=left]其特点：使用面广（如，蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；灵敏度高（检测下限为10-10g/mL）；线性范围宽；对温度和流速变化不敏感；可检测梯度溶液洗脱的样品。[/align][align=left][/align][align=left][b](2)示差折光检测器[/b][/align][align=left]凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测；糖类化合物的检测使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但是，灵敏度低（检测下限为10-7g/mL），流动相的变化会引起折光率的变化；因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。[/align][align=left][/align][align=left][b](3)荧光检测器[/b][/align][align=left]凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物（如，多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等。。。）的测定，其灵敏度很高（检测下限为10-12～10-14g/mL）痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。[/align][align=left][/align][align=left][b]5.数据处理系统[/b][/align][align=left]该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。[/align][b]高效液相色谱与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法优点和不足分析[/b][align=left][/align][align=left]只有20%样品可不经化学处理而能满意地用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离，80%的有机化合物要用高效液相色谱分析。[/align][align=left][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中流动相是惰性的，它对组分没有作用力，仅起运载作用、而高效液相色谱的流动相不仅起运载作用，而且流动相对组分有一定亲合力，可以通过改变流动相种类和组成提高分离的选择性；另外，可作流动相的化合物多，选择余地广。[/align][align=left][/align][align=left]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]相比，高效液相色谱仪的另一个优点是：样品的回收比较容易，只要开口容器放在柱子末端，就可以很容易地将所分离的各组分收集。回收是定量的，可以用来提纯和制备具有足够纯度的单一物质。[/align][align=left][/align][align=left]高效液相色谱不足的是，日前，检测器的灵敏度不及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]。必须特别注意“柱外效应”对柱效率及色谱分离的影响。[/align][align=left][/align][align=left][color=#888888](内容来源：互联网)[/color][/align]

液相：4.检测系统高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种：(1)紫外检测器该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广(如，蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用)；灵敏度高(检测下限为10-10g/mL)；线性范围宽 对温度和流速变化不敏感；可检测梯度溶液洗脱的样品。(2)示差折光检测器凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。糖类化合物的检测使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但灵敏度低(检测下限为10-7g/mL)流动相的变化会引起折光率的变化。因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。(3)荧光检测器凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物(如，多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等)的测定，其灵敏度很高(检测下限为10-12~10-14g/mL）痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。5.数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

UPLC：即超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC），是在传统的HPLC系统的基础上开发的。我们看一下UPLC的定义：基于亚二微米填料颗粒技术的液相色谱分离技术。那么为什么关注小颗粒色谱填料？1、 小颗粒填料柱效更高。改善分离度/提高灵敏度根据液相色谱分离的解析度方程，解析度正比于柱效能的平方根，而根据范迪姆特（Van Deemter）色谱理论，柱效反比于系统固定相粒度大小。UPLC系统运用的固定相粒度能达到1.7μm，根据上述方程，该系统达到的效能将比5μm粒度系统高70%，而比3.5μm高40%。2、 小颗粒填料的柱效随流速升高变化小加快分离速度 这样我们在分离的过程中就可以采用短色谱柱、采用小粒径色谱填料、高流速运行因此UPLC的技术优势就体现出来了：提高分析速度、节省化学试剂、提高工作通量、提高分离度、提高实验室效率。那我们使用中应该注意哪些问题呢？1、在高流速下用高效短柱进行快速液相色谱分离，保持分离度2、在常规流速下使用较长色谱柱进行高分离度色谱分离，可适当提高流速加快分离在流速和分离度之间会有取舍，但常常可以实现更快和分离度更高的结果。但是上述优点的代价是：更高系统压力，因此不能简单的将UPLC色谱柱使用到HPLC系统中，必须使用相匹配的耐高压系统。

液质联用仪因其对大部分化合物的高灵敏度得到越来越广泛的应用，适合于体内药物、体内有毒物质、药物的杂质等物质的定性和定量分析等领域。与传统的色谱分离检测器（紫外、荧光、视差、蒸发光散射、电化学等）检测的分析手段比较，质谱属于液相色谱的广适性检测器，具有明显的优势，该方法适用范围更广，灵敏度和高通量的特点，能够满足多个领域的定性和定量要求。 液质联用仪用于小分子化合物定性已有多年历史，普通高效液相系统只能对已知化合物（有标准品的化合物）通过峰位来定性，对于未知化合物却无能为力。而高效液相色谱—质谱联用仪可以对化合物作多级质谱，通过多级质谱的分析来推测化合物的结构，从而对已知和未知化合物均可以较准确的定性。液质联用仪还可用于小分子化合物定量，且与用普通高效液相系统对化合物进行定量相比，其不需要定量的化合物必须与样品中的其它有类似性质的成分完全分离，而高效液相色谱—质谱联用仪对化合物间的分离度没有要求，不但对保留时间不一致的物质能区分开，即使保留时间完全一致也同样互不干扰，只要过滤出想测的物质即可；且该方法可在数分钟内对几十个化合物同时定量，简便、快捷、灵敏、可靠。 质谱仪的定量原理是在电压和气流的作用下把待测物加氢离子（正离子方式）或减氢离子（负离子方式）后带电荷，仪器检测到的是一定质核比（m/z）的物质，即选择离子监测（SIM），其他质量数的物质能被滤掉，其他原理及要求同一般色谱要求。目前多使用的一般仪器是单位质量分辨，可将分子量相差1的物质完全可以区分，专属性高，用单四级杆质谱仪就可以定量；有时为了进一步保证检测的准确性，把待测物加能量打碎，产生碎片离子（子离子），对母离子和子离子同时进行检测，采用三重四级杆质谱仪，也就是用选择反应监测（SRM）定量，母离子和子离子均完全一样的物质非常少见，因此定量的准确性更好，检测限更低。

蔬菜中毒死蜱与茚虫威的高效液相色谱分析 毕业论文做这个，实在不知道怎么入手，求高手赐教！

UPLC超高效液相色谱和HPLC高效液相色谱的区别在哪里？请阐述下分离度、分析速度、柱效等等的两者间的区别。

1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。5. 程序

[font=宋体][font=宋体]超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]是在传统高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的基础上升级改进，使之获得更高的系统耐受压力。这样就可以适配更小填料粒径的色谱柱，因为越小粒径的色谱柱，柱效越高，反压也越高。常规的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统无法承受亚[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]微米的色谱柱带来的高反压。超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]搭配小粒径色谱柱，能够提供更高的分辨率、更快的分离速度和更高的灵敏度，是搭载质谱检测器的理想分离系统。目前超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]国产与进口品牌种类繁多，如何选择合适的设备，这里谈谈我的经验。[/font][/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]输液系统[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]输液泵[/font][font=宋体]目前市面上主流的是凸轮往复泵和直线电机泵两种。凸轮泵因为设计上的原因需要加装阻尼器来稳定压力脉冲，系统的延迟体积要大于电机泵。流量的准确度与精密度上电机泵也要更出色。但成本上电机泵会更高一些。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]泵组合[/font][font=宋体][font=宋体]分为二元泵系统和四元泵系统，二元泵是两组输液泵分别控制有机相与水相流路，混合比例靠控制[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]泵跟[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]泵的流量，混合点位于泵后，属于高压混合，混合效果更好，不足是只能同时使用四路溶剂中的两路。四元泵系统只有一组输液泵，通过控制比例阀的开合时间，控制溶剂混合比例，混合器位于泵前段，属于低压混合，混合精度上不如二元泵系统。但四元泵可以灵活使用四路流动相中的任意[/font][font=Calibri]1-4[/font][font=宋体]种，更适合方法开发。因为四元泵系统中，有机相和水相共用一组输液泵，泵内更容易析出结晶盐损害密封组件。所以在使用四元泵时，需要特备注意缓冲盐溶液与有机相的混合比例，避免结晶盐析出。[/font][/font][font=宋体]3）[/font][font=宋体]电动放空阀，手动是真的不方便。溶剂压缩补偿技术，这也是很重要的参数，但各厂家技术的优劣难以把握。各厂商一般都会提供流量准确度与紧密度参数，但测试条件各厂家都不一样。漏液传感器、真空脱气、柱塞清洗等功能基本都是标配了。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]自动进样器[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]进样器[/font][font=宋体]主要关注的就是进样误差和进样重复性，这两个厂商基本都会提供，可比性还是很高的。虽然各厂家都会提供交叉污染的测试数据，但我们用户在选择时，更应该关注进样针时流路设计还是旁路设计。旁路设计的进样方式有个天然缺陷，就是无法清洗进样口，导致交叉污染会比流路设计大。而流路针也有缺陷，因为针跟针座会在运行样品时连接到流路中，针座密封就需要做到耐高压。但是在反复进样的过程中，针座密封圈不不断磨损而漏液。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]附加功能[/font][font=宋体][font=宋体]类似于瓶位检测、顶针堵针保护等附加功能可以很好避免误操作时带来的仪器损害。温控功能主要考虑组件的耐用程度，温控的准确度和稳定性在[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]℃以内都是可接受的。[/font][/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]柱温箱[/font][font=宋体]主要关注温控范围、准确度、稳定性，最关键的参数是温度的稳定性，这将直接影响分析测试时保留时间的稳定性与峰面积的重现性。流动相预加热功能可以保障进入色谱柱的流动相与色谱柱的温差尽可能小，提供更好的色谱峰重现性。温控组件目前市面上性能最好的是帕尔帖元件。[/font][font=宋体]近年来国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的发展越来越好，性能上并不比进口产品差。但是由于超高效设备主要配置质谱检测器，进口质谱厂商多有配套[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]设备，加上国产质谱发展水平受限，国产超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的市场占有率并不高。希望此次分享能为大家在今后的仪器选购中提供帮助，也祝愿国产仪器越来越好。[/font]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]：[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数(溶解度)的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配使原来只有微小的性质差异产生很大的效果而使不同组分得到分离。液相：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上引用了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的理论。在技术上，流动相改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万)；同时，柱后连有高灵敏度的检测器可对流出物进行连续检测。 ?应用范围[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]:分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法进行分析，一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。液相:高效液相色谱法只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此，不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中能用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析的约占20%而能用液相色谱分析的约占70~80%。 仪器构造（一）[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。1.柱箱:色谱柱是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的心脏，样品中的各个组份在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离从而达到分析的目的，柱箱的作用就是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器，因此，进样器和检测器的下端(接头)均插入柱箱。柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱，并且操作方便。色谱柱(样品)需要在一定的温度条件下工作，因此，采用微机对柱箱进行温度控制。并且由于设计合理，柱箱内的梯度很小。对于一些成份复杂、沸程较宽的样品，柱箱还可进行三阶程序升温控制。且程序设定后自动运行无需人工干预，降温时还能自动后开门排热。2.进样器:进样器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品，进样器还必须将其汽化。因此，采用微机对进样器进行温度控制。根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式，共有五种进样器可供选择:填充柱进样器毛细管不分流进样器附件；毛细管分流进样器附件；毛细管分流/不分流进样器；六通阀气体进样器；

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。 由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。 为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。 常用的脱气方法有以下几种： 1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少； 2. 加热回流法 此法的脱气效果较好； 3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。 4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。 5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。 其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。 其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

高效液相色谱系统中气泡对检测的影响及其解决方法在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。 由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。 为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。 常用的脱气方法有以下几种： 1. 吹氦脱气法 使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好，但在国内因氦气价格较贵，本法使用较少； 2. 加热回流法 此法的脱气效果较好； 3. 抽真空脱气法 此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。显然使用水泵连接抽滤瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。 4. 超声波脱气法 它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。 5. 在线真空脱气法 把真空脱气装置串联到储液系统中，并结合膜过滤器，实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气。此法的脱气效果明显优于上述几种方法，并适用于多元溶剂体系。 其二，在液相色谱系统开始工作前，可以用注射器连接恒流泵的排空阀，抽入流动相，将流路中的空气驱赶干净。 其三，在注入样品前注意排出样品注射器中的空气。

原创与否转帖 部分高效液相色谱法及其在药物分析中的应用 法，这种色谱法的柱效能低、分离周期长。高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，简称HPLC）是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种色谱方法。与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细（一般为10µm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。目前，已经发展了多种不同的固定相，有多种不同的分离模式，使高效液相色谱法的应用范围不断扩大。下面介绍高效液相色谱法的有关知识，新的方法和技术以及在药物分析中的应用。一、分类 高效液相色谱法按分离机理的不同可分为以下几类： （一）吸附色谱法（adsorption chromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。使用最多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。组分的极性越大、固定相的吸附力越强，则保留时间越长。流动相的极性越大，洗脱力越强，则组分的保留时间越短。 （二）液-液分配色谱法（liquid- liquid chromatography)液-液分配色谱的固定相和流动相是互不相溶的两种溶剂，分离时，组分溶入两相，不同的组分因分配系数（K)的不同而被分离。目前广泛使用的化学键合固定相是将固定液的官能团键合在载体上而制成的，使用化学键合固定相的色谱方法（简称键合相色谱法）可以用分配色谱的原理加以解释。键合相色谱法在HPLC中占有极其重要的地位，是应用最广的色谱法。按照固定相和流动相极性的不同，分配色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法两类。