高灵敏荧光玻片扫描仪

荧光芯片扫描仪 　　由于杂交时产生序列重叠，会有成百上千的杂交点出现在图谱上，形成极为复杂的杂交图谱。序列重叠虽然可为每个碱基的正确读出提供足够的信息，可提高序列分析的可靠性，但同时信息处理量也大大增加了。一般说来，这些图谱的多态性处理与存储都由专门设计的软件来完成，而不是通过对比进行人工读谱。用计算机处理即可给出目的基因的结构或表达信息。扫描一张10cm2的芯片大概需要2-6分种的时间。目前专用于荧光扫描的扫描仪根据原理不同大致分为两类：一是激光共聚焦显微镜的原理, 是基于PMT（photomultiplier tube，光电倍增管）的检测系统（另文介绍）；另一种是CCD（charge-coupled devices，电荷偶合装置）摄像原理检测光子。CCD一次可成像很大面积的区域，而以PMT为基础的荧光扫描仪则是以单束固定波长的激光来扫描，因此或者需要激光头，或者需要目的芯片的机械运动来使激光扫到整个面积，这样就需要耗费较多的时间来扫描；但是CCD有其缺点：目前性能最优越的CCD数字相机的成像面积只有16×12mm（像素为10μm），因此要达到整个芯片的面积20×60mm的话，需要数个数码相机同时工作，或者也可以以降低分辨率为代价来获得扫描精度不是很高的图像。由于灵敏度和分辩率较低，比较适合临床诊断用。 　　生产商业化扫描仪的公司包括：Genomic Solutions公司、Packard公司、GSI公司、Molecular Dynamics、Genetic Microsystems公司、Axon ?Instruments公司等。其中GSI Lumonics 公司ScanArray 系列一直是生物芯片扫描检测系统中的领头产品。2000GSI并入著名的Parkard公司后ScanArray的软、硬件都得到进一步加强。 　 ScanArray利用其专利的激光共聚焦光学系统，通过计算机控制，对生物芯片的荧光杂交信号进行全自动的扫描采集，并通过分析软件对数据结果进行定量分析。 　最高灵敏度高：0.1荧光分子/μm 　扫描精度可从5μm-50μm分级调整 　全范围扫描时间仅需5分钟，快速方便 　多达十种检测滤光片，涵盖所有生物芯片荧光染料的检测，适用于多种荧光标记探针 　　不同波长依次扫描避免交叉光污染　　扫描后的图像还需要进一步的处理，这要求一定的软件支持。现有的分析软件包括：Biodiscovery的ImaGene系列，Axon Instruments的GenePix系列，GSI的QuantArray等　　3. 基因芯片上各克隆荧光信号的分析原理 　　用激光激发芯片上的样品发射荧光，严格配对的杂交分子，其热力学稳定性较高，荧光强；不完全杂交的双键分子热力学稳定性低，荧光信号弱（不到前者的1/35~1/5），不杂交的无荧光。不同位点信号被激光共焦显微镜，或落射荧光显微镜等检测到，由计算机软件处理分析，得用激光激发芯片上的样品发射荧光，严格配对的杂交分子，其热力学稳定性较高，荧光强；不完全杂交的双键分子热力学稳定性低，荧光信号弱（不到前者的1/35~1/5）（2），不杂交的无荧光。不同位点信号被激光共焦显微镜，或落射荧光显微镜等检测到，由计算机软件处理分析，得到到有关基因图谱。美国GSI ?Lumonics 公司开发出专专业基因芯片检测系统(ScanArray 系列),采用激光共聚焦扫描原理进行荧光信号采集，由计算机处理荧光信号，并对每个点的荧光强度数字化后进行分析。利用QuantArray软件包对扫描的荧光信号进行分析，比　　较每个克隆在不同组织间表达水平的差别。软件具体分析步骤如下： 　　首先，同时导入同一区域两个channel扫描的图像文件；将两个channel扫描的图像用不同的颜色显示并重叠；选择拟分析的区域，输入矩阵的行数及列数以及矩阵的个数等参数；在计算机给出的该区域信号图片上标定网格，使得网格中所包含的横线和竖线的交点个数同每个区域点样的克隆数相同，调整网格，使每个交点均位于点样克隆信号的中心；信号的中心确定后，计算机将自动以交点为中心，按照设定的半径圈定各克隆，并将其内部区域作为待分析的信号，同时在圈定的各克隆周围再按照预设的值圈定一定范围的区域，将该区域内的信号作为背景噪音；计算机分析每个克隆扣除背景噪音后的信号强度，并按照不同的要求对数据进行分析；利用GenePie方式对两个channel信号的进行定量比较分析，此时计算机根据各克隆两个channel扫描的信号，以饼图的形式给出两个channel信号强度的相对比例，同时可以逐个克隆读取计算机分析出的两个channel信号的值及所占的比例，进而确定各克隆在两种组织间的表达差异。　　4. Microarray数据分析 　　Microarray数据分析简单来说就是对Microarray高密度杂交点阵图象处理并从中提取杂交点的荧光强度信号进行定量分析，通过有效数据的筛选和相关基因表达谱的聚类，最终整合杂交点的生物学信息，发现基因的表达谱与功能可能存在的联系。 　　Microarray数据分析主要包括图象分析(Biodiscovery Imagene 4.0\Quantarray分析软件)、标准化处理（normalization）、Ratio值分析、基因聚类分析（Gene Clustering）。 　　1. 图象分析：激光扫描仪Scaner得到的Cy3/Cy5图象文件通过划格（Griding），确定杂交点范围，过滤背景噪音，提取得到基因表达的荧光信号强度值，最后以列表形式输出。 　　2. 标准化处理（Normalization）：由于样本差异、荧光标记效率和检出率的不平衡，需对cy3和cy5的原始提取信号进行均衡和修正才能进一步分析实验数据，Normalization正是基于此种目的。Normalization的方法有多种：一组内参照基因（如一组看家基因）校正Microarray所有的基因、阳性基因、阴性基因、单个基因。 　　3. Ratio分析(Ratio Analysis)：cy3/cy5的比值，又称R/G值。一般0.5-2.0范围内的基因不存在显著表达差异，该范围之外则认为基因的表达出现显著改变。由于实验条件的不同，此域值范围会根据可信区间有所调整。处理后得到的信息再根据不同要求以各种形式输出，如柱形图、饼形图、点图、原始图象拼图等。将每个Spot的所有相关信息如位标、基因名称、克隆号、PCR结果、信号强度、Ratio值等自动关联并根据需要筛选数据。每个Spot的原始图象另存文件，可根据需要任意排序，得到原始图象的拼图，对于结果分析十分有利。 　　4. 聚类分析(Clustering Analysis)：实际是一种数据统计分析。通过建立各种不同的数学模型，可以得到各种统计分析结果，确定不同基因在表达上的相关性，从而找到未知基因的功能信息或已知基因的未知功能。Gene Clustering就是根据统计分析原理，对具有相同统计行为的多个基因进行归类的分析方法，归为一个簇的基因在功能上可能相似或关联。目前以直观图形显示GeneCluster结果的程序已有人开发出来，可将抽象的数据结果转化成直观的树形图，便于研究人员理解和分析。　　尽管基因芯片技术受到了广泛关注，但在基因表达谱分析中起着关键作用的生物信息学却没能引起大家的足够重视，认为简单人工处理一下原始数据就可以得到有价值的生物学信息，大量有价值的信息就这样被浪费和湮没了。可以肯定地说，没有生物信息学的有效参与，基因芯片技术就不能发挥最大效能。加大基因芯片技术中生物信息学的研究开发力度已成为当务之急。国内外已经进行了有益的尝试，初步开发出供芯片平台管理实验数据的软件包，就目前实际情况来看，生物信息学在基因芯片研究开发中介入的程度已经越来越深，主要涉及基因表达信息分析管理系统及其分析工具和分析方法，简单概括为以下几个方面：

[b]孚光精仪：[url]http://www.f-lab.cn/[/url]微阵列芯片扫描仪：[url]http://www.f-lab.cn/microarray-manufacturing/innoscan.html[/url]微阵列芯片扫描仪[/b],[b]innoscan[/b]专业为[b]扫描基因芯片[/b],[b]扫描蛋白质芯片[/b]等[b]微阵列芯片扫描[/b]而设计，是功能强大的高分辨率[b]荧光扫描仪[/b]，适合所有[b]微阵列芯片扫描，[/b]如DNA芯片，蛋白质芯片和细胞和组织。[b]微阵列芯片扫描仪[/b]是完全开放的系统，兼容任何标准的显微镜载玻片25x75mm（玻璃基板，塑料，透明和不透明），适用于各类型的应用研究，如基因表达，基因分型，aCGH，芯片分析片内，微RNA检测的SNP，蛋白质组学和微阵列的方式。[img=微阵列芯片扫描仪]http://www.f-lab.cn/Upload/innoscan-scanner.jpg[/img][b]微阵列芯片扫描仪[/b]可以扫描生物芯片，有3 1.mu.m/像素的分辨率，同时保持高图像质量。能够同时扫描两个检测通道3.5分钟（10.mu.m/像素，最大扫描区域），InnoScan900是市场上最快的扫描器，扫描速率可调节，达10到35行每秒。

cs-9000薄层扫描仪 荧光扫描按要求应打开汞灯，可是不知道光源选择是哪个位置啊？ 是不是将光源调至氘灯，将滤光片调到3，选择荧光扫描即可？

用平板硫化机将TPS样品条压成薄片进行红外扫描，但是红外扫描无法透过薄片，我想请问各位高手TX一下，红外扫描仪对样品厚度的要求是什么？所用仪器为BIO-RAD FTS3000型红外光谱扫描仪。 另外麻烦把这个仪器的使用说明、对样品的要求及相关参数告知一下，多谢！！！

薄层扫描仪跟薄层色谱扫描仪是同一种仪器吗？其工作原理一样吗？

目前正在做Ｆ１８检查项目中的放化纯度项目，以前用NaI做的，现在要用mini-scan TLC放射性薄层扫描仪做，不知道如何处理Ｒf值，有哪位大师帮帮我，万分感谢啊

薄层色谱技术（TLC）作为一种简单、快速、低成本的分析方法，一直是中药研究、天然产物提取和化学合成等领域研究人员以及食品安全、农药残留分析人员最喜爱的工具。 如果加上可定量分析的薄层色谱扫描仪，就能实现更加精细的研究，提高开发的效率。但是传统的薄层色谱扫描仪由于投资巨大（约10万元人民币），严重阻碍了薄层色谱技术的应用。 随着成像技术的发展，新型的薄层色谱分析仪器快速发展。它保留了薄层色谱分析中最重要的254nm淬灭荧光和365nm特征荧光成像，再加上通常可见光的成像，可满足所有薄层色谱的定量分析。由于去除了传统薄层色谱扫描仪中意义不大的双波长扫描，因此仪器成本降低7成以上。 目前，国际上发表的学术文章采用成像技术的已经超过传统的薄层色谱扫描，而且有替代的趋势。

如题，薄层扫描仪工作原理是什么？仪器内部是如何进行扫描的？

我们习惯说定量用SIM做,定性用Scan做,无疑这是合理而正确的做法.但大家有没有比较过SIM的灵敏度和从全扫描中提取特征离子的灵敏度哪个高呢?比如SIM只采集238,Scan从30-500,其他质谱参数都是优化后的，在数据处理是提取238离子，是SIM的灵敏度高呢，还是Scan的高？欢迎大家各抒己见。

薄层扫描仪的价格一般是多少啊？谢谢回帖！！！

做益母草膏检测，需要薄层扫描仪，不知道各位大侠都使用过哪些牌子的机子，准确率和精度怎么样？谈谈吧！国产的机子，价位在多少？

急需岛津930薄层扫描仪操作说明多谢

[em11] 岛津薄层扫描仪钨灯坏了，不知哪里可买到？请各位指点！万分感谢！！！

我单位需购买薄层扫描仪，想了解日本岛津公司 CS-9301(pc)s、瑞士卡玛 TCL SCANNER 3、德国DESAGA（迪赛克）CD 60薄层扫描仪的性能指标及基本报价。

请教：色素如何用薄层色谱扫描仪做，主要是食品中的色素，有哪位高手作过这方面的工作吗。可以用薄层色谱扫描仪检测多种色素吗。

请问薄层扫描仪用来做什么检测,有何用途?多谢

由中国计量院和广州计量检测技术研究院联合起草的《薄层色谱扫描仪校准规范》（JJF 1712-2018），经国家市场监管总局批准，于今月开始实施。该规范自16年获总局批准起草，经过多次的意见收集及整理，标准物质的研制，从规范立项到获批历时两年半。 薄层色谱扫描仪是薄层色谱分析法使用的主要仪器，广泛应用于中草药、中成药的成分分析和合成药物分析。随着医药工业、临床医学、环境科学、食品化工等行业的快速发展，薄层色谱扫描仪使用越来越广泛。由于目前没有国家检定和校准规程，薄层色谱扫描仪长期不能得到有效的量值溯源，给薄层色谱法的测定结果带来极大风险。《薄层色谱扫描仪校准规范》的颁布实施，弥补了我国薄层色谱扫描仪校准方法的空白，为此类仪器提供了统一、规范的量值溯源方式，为保证食品药品、生命科学、环境保护、石油化工、精细化工等领域所用薄层色谱扫描仪量值准确、可靠提供了计量技术支持。

岛津CS-9301型薄层扫描仪维护保养规程1.仪器的维护。1.1仪器室的温度控制在18～30℃；湿度为30%～60%。1.2仪器使用完毕，要用保护罩遮盖以防尘。1.3样品室要保持清洁干净，使用完毕，要以纱布擦干净。1.4样品台避免与酸、碱及有机溶剂接触，使用完毕可用乙醇擦干净。1.5低压汞灯的维护：凡需使用低压汞灯，均需记录使用时间。1.6仪器运作过程中，切勿打开主机盖。1.7仪器主机盖不能用力上拉或下压。1.8仪器性能要定期检定，保证仪器的准确性。2.仪器的保养。2.1仪器波长准确度的检查：用低压汞灯在200～700nm波长范围内以荧光方式对空白的硅胶薄层板扫描零吸收图谱。图谱中峰位波长与相应已知波长（253.6，313.0，334.2，365.0，404.7，435.8，546.1，578.0nm）的差值，应不大于±8nm。2.2薄层斑点扫描积分值重视性的考核：于硅胶G薄层板上点样2ml波度约为0.5mg/ml。甲基黄的甲醇溶液，以苯为展开剂，展开50cm后晾干，扫描10次，波长为λs=400nm，λR=600nm，以甲基黄斑点的吸收度积分值计算相对标准偏差。

求助：我想了解一下国产薄层扫描仪与进口仪器在功能上大致有哪些区别，请您说的详细点。我没有使用过薄层扫描仪，想购买一台，也请大家帮我参谋一下哪个公司的仪器好，谢谢各位了。[em0715] [em0715]

请问各位，使用薄层色谱（TLC）进行定量分析检测，对薄层扫描仪的结果（或计算结果）的相对标准偏差是否有要求，如果有，RSD一般要求多少？

有人用过科哲的薄层扫描仪吗？比卡玛的差很多吗？请用过的朋友说一下，枪手勿入，谢谢。

怎么总找不到薄层色谱扫描仪检定规程，哪位朋友那里有，最好是完整的，需要规程号JJG???,谢了啊！

[em09] 哪个网站可以下载关于薄层扫描仪的工作原理图??[em07] 拜托!!!

摘要：薄层扫描法及影响定量的因素何丽一（中国医学科学院药物研究所，北京）薄层色谱法是一种简便、快速、灵敏的分离分析方法，但由于仪器自动化程度、分辨率及重现性等方面的不足，较长时期停留在定性及半定量的水平。为了发挥这一技术的优势，七十年代开始为薄层色谱技术的仪器化、高效化、定量化进行了大量工作。目前已进入分离高效化、定量仪器化、数据处理自动化的阶段，从而使薄层色谱技术在色谱领域中又重新被重视起来。这一讲将讨论薄层色谱定量用的仪器及有关内容。2-1 薄层扫描法用于薄层定量的仪器称薄层扫描仪（TLCScanner）或薄层光密度计（TLC Densitometer），用这种仪器对薄层上被分离的物质进行直接定量的方法称薄层扫描法。目前各国生产的薄层扫描仪规格不同，性能各异，但其基本测定原理是一样的，即用一束长宽可以调节的一定波长一定强度的光照射到薄层斑点上，进行整个斑点的扫描，用仪器测量通过斑点时光束强度的变化从而达到定量的目的。根据测定方式及扫描方式的不同，薄层扫描仪有：（1） 吸收测定法和荧光测定法吸收测定法凡在可见光及紫外光区有吸收的化合物，分别用钨灯或氘灯为光源，在波长200～« 800nm范围内选择合适波长进行测定。荧光测定法凡对紫外光有吸收并能`````````````````全文请下载附件[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=68301]薄层扫描法及影响定量的因素[/url]

做薄层想保留照片，所以我想咨询下用过暗箱薄层扫描仪的人，用的是什么牌子，有国产还比较好用的吗？？

本公司欲购一台薄层扫描仪，请各位兄弟姐妹推荐哪家的比较好。

求购１００００-２００００元左右的薄层扫描仪.请帮助

请教大家一个问题：薄层色谱的启动包是不是就可以在有机合成中够用了，不用买那个贵的扫描仪之类的？我们不需要定量，只要能定性，鉴别就可以了。谢谢各位大侠！[em09505]

请教高手：我现在使用一台cd60的双波长扫描仪，遇到的问题：在扫描过程极其不稳定，有时在样品点会出峰，但有时基本没有峰，想问是哪里出了问题？请不吝赐教

薄层扫描仪，你了解有多少？其维护保养要注意哪些呢？[em09511]