光感控制波浪式混匀器

[align=center]【前处理分享】关于样品混匀的探讨[/align] 国庆节过后，我们收到上级部门的能力验证样品，两个笋瓜样品，其中一个为空白样品，两个苹果样品，其中一个为空白样品，样品量为200g，取样时，发样人员一再交待，让混匀后再称样品，自己称取平行样。 拿来的能力验证样品均为冷冻样品，我们先化冻，放温水盆里解冻，解冻后采用在混匀器上混匀5min，在超声波里超声10min，然后称取样品25g，按照NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,464,465]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310843224704_2148_1645480_3.jpg!w464x465.jpg[/img][/align] 图1：能力验证样品混匀 结果发现笋瓜样品平行性很好，苹果样品平行性不好，询问同行，认为混匀方式应该用均质器混匀，到底是样品混匀方式不对，还是前处理有问题，我做了以下试验。[color=red] 一、[/color][color=red]不同的混匀方式[/color] 1、 加标 1.1配制标液 标液敌敌畏、甲基对硫磷、异菌脲、氟氯氰菊酯为100ug/mL，用丙酮或正已烷配制为10ug/mL单标。 1.2加入标液 从超市买来苹果，苹果选取的是与能力验证的相近的品种，红牛苹果，破碎装进塑料盒里，每盒里准确称取200g，标注为A1、A2，然后加入敌敌畏2.8mL，甲基对硫磷2.0mL，异菌脲、氟氯氰菊酯2.0mL等。用封口膜将盖子四周粘住，不做任何混匀，直接放冰箱里冷冻。[align=center][img=,462,466]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310843521004_2412_1645480_3.jpg!w462x466.jpg[/img][/align] 图2：制作加标样品 2、 混匀方式 2.1 混匀器+超声波超声 把加标过的A1样品放温水盆里解冻，然后在混匀器上5min，放超声波里超声25min，然后用玻璃棒充分搅匀2min，称取平行样品25.0g，按NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,554,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310844362414_8608_1645480_3.jpg!w554x326.jpg[/img][/align] 图3：混匀器+超声波超声 2.2 匀质器混匀 把加标过的A2样品放温水盆里解冻，然后用匀质器匀浆25min，匀浆时样品粘在刀头上，用干净的玻璃棒刮进样品中，再用玻璃棒充分搅匀2min，称取平行样品25.0g，按NY/T761-2008方法进行前处理。[align=center][img=,554,326]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310844589013_3455_1645480_3.jpg!w554x326.jpg[/img][/align] 图4：匀质器混匀[color=red] 二、[/color][color=red]测定出现的问题[/color] 1、 前处理 1.1 提取出现的问题 用均质器匀浆过的样品，细度比较细，成糊状，在匀浆时粘在刀头上，不容易清洗，在静置分层时，因为含糖量高，样品不分层，需要加入纯水，重新振荡静置，分层时速度很慢，需要由原来的静置时间30min延长到1h，才能彻底分层。 用混匀器+超声波超声的样品，在静置分层时，与匀浆混匀的样品，在颜色上有明显差别，分层速度比较快，30min可以分层。[align=center][img=,553,625]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310845211654_8176_1645480_3.jpg!w553x625.jpg[/img][/align] 图5：要延长静置时间 1.2 净化出现的问题 A1两个样品，A2两个样品，按NY/T761-2008方法进行前处理，有机磷类分析步骤为提取与净化，净化需要氮吹近干，但在氮吹过程中有氮吹干的情况，当时没有记录哪个吹干了，直接上机测定。 有机氯类、拟除虫菊酯类分析步骤为提取与净化，净化时先氮吹近干，再过弗罗里析柱，50℃氮吹至小于5mL，再用正已烷定容至5.0mL。[align=center][img=,464,465]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310845471931_5294_1645480_3.jpg!w464x465.jpg[/img][/align] 图6：氮吹及氮吹后过小柱净化。 2、 测定结果 敌敌畏的加标量为0.14mg/kg，甲基对硫磷的加标量为0.10mg/kg，异菌脲的加标量为0.10mg/kg，氟氯氰菊酯的加标量为0.10mg/kg。上机时用苹果基质配制浓度与加标浓度一样，用基质配的标液计算样品含量，测定结果见表1。[align=center]表1：第一次苹果中农残测定结果（mg/kg） [table][tr][td][align=center]样品名称[/align][/td][td]敌敌畏[/td][td]甲基对硫磷[/td][td]异菌脲[/td][td]氟氯氰菊酯[/td][/tr][tr][td]A1-1[/td][td]0.10[/td][td]0.079[/td][td]0.084[/td][td]0.085[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td]0.12[/td][td]0.078[/td][td]0.080[/td][td]0.082[/td][/tr][tr][td]A2-1[/td][td]0.059[/td][td]0.069[/td][td]0.081[/td][td]0.090[/td][/tr][tr][td]A2-2[/td][td]0.12[/td][td]0.075[/td][td]0.093[/td][td]0.090[/td][/tr][/table][/align][align=center][img=,553,244]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310846140644_1681_1645480_3.jpg!w553x244.jpg[/img][/align] 图7：混匀器+超声波超声的样品[align=center][img=,553,241]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310846388883_4302_1645480_3.jpg!w553x241.jpg[/img][/align] 图8：匀浆机混匀的样品 从上表与图谱可以看出，不论是混匀器+超声波超声还是匀质器混匀，都存在着平行样品不平行的现象，在前处理过程中，氮吹时有氮吹干了情况，但当时没有记录样品号，所以把加标样品拿出来重新测定。 3、 重新测定 重新称取加标样品A1与A2，按上述步骤进行前处理，在氮吹时与同事说话，一不留神吹干了A1-2有机磷样品，只好重新再氮吹，结果见表2. 表2：第二次苹果中农残测定结果（mg/kg）[table][tr][td]样品名称[/td][td]敌敌畏[/td][td]甲基对硫磷[/td][td]异菌脲[/td][td]氟氯氰菊酯[/td][/tr][tr][td]A1-1[/td][td]0.14[/td][td]0.086[/td][td]0.088[/td][td]0.089[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td][color=red]0.071[/color][color=red]氮吹干了[/color][/td][td][color=red]0.049[/color][color=red]氮吹干了[/color][/td][td]0.084[/td][td]0.091[/td][/tr][tr][td]A1-2[/td][td][color=red]0.13[/color][color=red]重做[/color][/td][td][color=red]0.080[/color][color=red]重做[/color][/td][td] [/td][td] [/td][/tr][tr][td]A2-1[/td][td]0.14[/td][td]0.083[/td][td]0.087[/td][td]0.093[/td][/tr][tr][td]A2-2[/td][td]0.14[/td][td]0.088[/td][td]0.090[/td][td]0.096[/td][/tr][/table] 通过表2可以看出，氮吹时对有机磷的结果影响是明显的，如果氮吹时不是近干，而完全干了，测定结果会小一半，回收率减少一半，而有机氯如果第一次氮吹干了，会有影响，但影响不会这么大，回收率也不会减少的这么多，可能与农药本身性质有关。[align=center][img=,553,117]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310847095744_5371_1645480_3.jpg!w553x117.jpg[/img][/align] 图9：氮吹干与近干的图谱[color=red] 三、[/color][color=red]总结[/color] 从以上试验可以得出以下结论： 1、制作加标样品时，可以用高浓度标液，这样加标体积较小，不会影响到样品质量，但要充分混匀，让农药充分渗透到样品里，比如苹果样品比较粘稠，如果加了100-200uL标液，标液只会停留在样品表面某个点上，此时直接用匀浆机混匀，这个标液点就直接粘在刀头上，无法洗脱，也达不到混匀效果，会造成样品的不平行，像这种粘稠样品，有没有快速混匀的方法，希望高手们提供一些供参考。 2、样品混匀不论哪种方式，要有足够的时间，30min后应该可以混匀，称样前还需要用玻璃棒不停搅拌5min，再次混匀样品。 3、苹果样品如果用匀浆机混匀，前处理时还有匀浆的步骤，这时样品细度比较细，过滤静置时，液体比较混浊，需要加水或加氯化钠，还需要延长静置时间，才能彻底分层。 4、平行样品不平行，相差一半时，有很大可能是前处理过程出现问题，农药的性质不同，结果也不同，比如敌敌畏与甲基对硫磷的沸点不同，敌敌畏沸点74℃，甲基对硫磷的[url=https://baike.so.com/doc/5567907-5783065.html][color=windowtext]沸点[/color][/url]158℃，氮吹时水浴温度80℃，如果氮吹完全干，甲基对硫磷的回收率有70%以上，而敌敌畏的回收率只有50%，；其它如异菌脲、氟氯氰菊酯等农残，因为沸点和分子结构不同，损失没有敌敌畏的损失大。

PEG-20M的色谱柱，40度时基线正常，升温到230度时基线变成波浪线了，大侠们帮忙看看是为什么啊。进样器和FID都清洗过了，色谱柱也老化了，都没有效果。第一张图是40度的正常基线，第二个就是230度的波浪线基线。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308151542_457848_2433931_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308151541_457847_2433931_3.jpg

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210101340_395702_2452350_3.jpg岛津LC20A的仪器，基线走了两小时了，还是这样波浪形。在线脱气机时常报警，已经报工程师更换了，说暂时可以继续使用着。不知这波浪会不会跟脱气机有关？

[align=left] 试样制备充分混匀之我想 在化验工作中，化验时所称取的分析试样往往是几克、几百毫克或更少，而分析结果必须能代表全部样品的平均组成，因此，试样具有代表性就具有极其重要的意义。一般来说，采样误差常大于分析误差，如果采样和制样方法不正确，即使分析工作做得非常仔细和正确，也是毫无意义，在农产品农残的检测中关于试样制备也同样要求充分混匀。 一、不同以往的能力验证 NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定方法中制备样品要求按GB/T8855抽取蔬菜、水果样品，取可食部分，经缩分后，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样。放入分装容器中，于-20℃∽-16℃条件下保存，备用。标准中要求对试样充分混匀，但充分混匀的具体方法没有详细说明。在我单位刚刚结束的2018年河南省农产品质量安全检测技术能力验证中，因试样前处理过程中的充分混匀问题给我们的能力验证工作带来了很多困扰，为了圆满完成能力验证工作，我们想尽了各种解决办法，现分享给大家，敬请指正。 10月9日上午张工从省农产品质量安全检测中心领回了盲样样品A14(苹果，经我们与多个苹果品种比较，确定该苹果样品属于苹果中的花牛苹果)和B28（西葫芦），需要对样品中的90多种农药进行定性定量检测。进过3个多小时的解冻，我们于下午三点半开始盲样样品的前处理工作。 充分混匀样品是正确前处理的第一步，也是能否顺利完成这次能力验证的关键点之一。今年的盲样样品与往年不同，盲样的充分混匀工作更是重中之重。 [b] 1、苹果作为基质第一次参加能力验证[/b] B28是待测西葫芦样品，西葫芦是葫芦科南瓜属的一种，皮薄肉厚、汁多便于混匀。 A14是苹果样品，苹果的果实属于仁果类，含糖量高，破碎以后汁液少、皮多渣多，特别粘稠，特别是省站选的花牛苹果更是面甜水分少，制备后的基质黏稠度更强。 [img=,576,324]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240920402135_1042_3389022_3.png!w576x324.jpg[/img][b] 2、发放样品的数量和盛放的容器改变[/b][/align][align=left] 往年的省农产品质量安全检测技术能力验证都是每个正好用于检测的25g样品盛放在分装容器离心管中，小容器储存，然后加标冷冻保存发放给各检测单位， 各检测单位领取盲样后充分解冻后就可直接加乙腈匀浆分离。今年的能力验证加大了难度，盲样样品是用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]、液相等分别检测的样品共200克盛放在一个大的分装容器中加标冷冻保存，各检测单位在检测前还需进行多个25g的分装工作，此时的是否充分混匀决定了试样是否具有代表性，分析结果能否代表全部样品的平均组成。[/align] [img=,498,678]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240921237924_4243_3389022_3.png!w498x678.jpg[/img][align=left] 二、千计百谋、殚精竭虑[/align][align=left] 面对具有一定难度的挑战，我们实验室检测人员一致认为应付、回避不是我们的态度，发现问题、解决问题、挑战自我是我们追求的目标，为了充分混匀样品我们发挥了集体智慧。[/align][align=left] （一）用温水再次将样品充分解冻。[/align][align=left] 样品的充分解冻是实现混匀的前提。[/align] [img=,499,576]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240921588415_9351_3389022_3.png!w499x576.jpg[/img] [align=left] （二）用勺子充分搅拌。[/align][align=left] （三）用AK旋涡混匀器长时间混匀[/align] [img=,576,324]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240922322255_7952_3389022_3.png!w576x324.jpg[/img]（四）超声波超声混匀 [img=,409,576]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240923134866_8477_3389022_3.png!w409x576.jpg[/img] [align=left] （五）用勺子再次充分搅拌[/align][align=left] （六）用替代品（自备苹果）尝试用匀浆机混匀。[/align][align=left] 匀浆机以其高速（每分钟12000转）稳速的优势应是混匀样品的首选，但这次样品是大容器盛放，苹果样品还特别粘稠，在不能提前稀释的情况下进行匀浆，匀浆机头和匀浆杆壁粘附太多，样品流失太多，对盲样的考核有多大的影响我们在不知道的情况下（在后面的25g样品加入50ml乙腈稀释后再匀浆还会出现机头机壁粘附很多样品的情况），没敢贸然使用。我们取来了用于和省站盲样样品进行比对的提前自己制备的装在相同的容器中的200g苹果样品，用匀浆机进行混匀。[/align] [img=,551,576]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240923496154_7315_3389022_3.png!w551x576.jpg[/img] [img=,487,576]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240924139657_7874_3389022_3.png!w487x576.jpg[/img] 经匀浆实验证实，匀浆机在粘稠的苹果样品中，转速和匀浆效果都不能达到要求，苹果基质在高速的匀浆机下还是只能局部匀浆，全部的样品不能整体一起运转。匀浆机在粘稠的样品前也不能发挥其优势。 [img=,477,576]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810240924497114_2599_3389022_3.png!w477x576.jpg[/img][align=left] 用替代样品尝试匀浆机匀浆失败后，我们放弃了用匀浆机混匀样品的办法。[/align][align=left] 在采用了多种混匀方法和正确的后续处理后，我们的盲样样品在大家的期待中定性定量结果测定出来，B28西葫芦的两个平行样平行特别好，A14苹果的两个平行样品结果不满意，再对苹果样品取平行样进行重新测定，结果还是不理想。我们研判出现这样的结果主要还是因为①苹果这个基质的黏稠度大，混匀环节没有做到充分②过滤环节因残渣太多太硬，最后的残渣挤压过程往往造成滤纸破损，滤纸不能全部包裹残渣，残渣挤压不能充分。[/align][align=left] 三、总结[/align][align=left] 能力验证工作所说结束了，但关于这次能力验证工作我思考了很多，也查阅了不少前处理过程中的样品制备和混匀方面的资料，收获满满但困惑还在，关于像苹果之类粘稠基质的样品的检测技术我还待提高和解决，但我有信心和决心，经过我们团队下一步的探索，这个问题一定会有一个圆满的结果，敬请期待。[/align]

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210101336_395701_2452350_3.jpg岛津LC20A的仪器，基线走了两小时了，还是这样波浪形。在线脱气机时常报警，已经报工程师更换了，说暂时可以继续使用着。不知这波浪会不会跟脱气机有关？