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微毛细管细胞分析平台

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微毛细管细胞分析平台相关的资讯

  • 密理博推出新一代微毛细管细胞分析平台
    密理博微毛细管细胞分析平台:突破传统,新一代流式技术革命   今年初,密理博成功收购了Guava Technologies后,又对“guava 微毛细管细胞分析平台”进行了创新和升级。为了让更多的用户体会新一代流式技术带来的科技震撼,Millipore推出了中国第一个以微毛细管技术为核心的细胞分析平台。   在这个平台上,您不仅可以领略革命性的 “微毛细管技术”,也可以感受细胞分析平台内部的精密构造、精细光路和精确检测。   欢迎进入guava平台!平台网址:http://tong.dxy.cn/upload/2009/guava/welcome.html
  • 密理博新一代微毛细管细胞分析仪绚丽登场
    密理博新一代微毛细管细胞分析仪绚丽登场!   密理博公司日前宣布新一代Guava easyCyte™ 8HT 微毛细管细胞分析仪绚丽登场!这款紧凑集约型,并拥有六种颜色检测系统的细胞分析仪能进行96孔板自动化检测,能让科学家轻轻松松在个人实验室完成“流式”全过程。该系统是今年密理博公司收购Guava Technologies之后,第一台由密理博公司设计制造的“流式”细胞仪。   Guava easyCyte™ 8HT 能帮助科学家同时检测1个细胞的8个生物指标(包括6种荧光颜色)。除此之外,六色检测系统能让科学家自由地选择荧光素,在最合适的荧光通道中进行数据获取,以此降低了检测信号重叠的机会,从而提高了数据质量。      休斯敦大学运动生理、营养和免疫副教授Brian K. McFarlin 指出“细胞分析仪是我们实验室非常重要的研究仪器。Guava 使我的实验室研究比从前更有效,更方便。传统流式细胞仪需要全职人员操作和维护,成本较高。但Guava细胞分析仪只需要进行样品上样。在过去两年中,我们已经分析过30,000多个样品且没有出现问题。”   McFarlin博士强调:“Guava系统还能分析比传统流式小20倍的血液样品, 不仅减少了样品体积,而且减少了抗体和试剂消耗。因此,在过去的两年中,我们实验室为此节省了约60,000美金的抗体试剂费用。”   和其他的Guava微毛细管细胞分析/计数仪一样,EasyCyte 8HT系统应用了专利的微毛细管技术,减少了上样的细胞数量和产生的废液量,从传统的几升/天到小于50 毫升/天。由于减少了复杂的液流系统,使得仪器所占空间缩小,维护成本下降。   EasyCyte 8HT 的InCyte 新软件显著改善了数据分析。InCyte 软件让科学家能同时查看、对比和分析多组数据,也就是说对比传统软件分析单个样本,现在整块96孔板的数据能在较短时间内分析完成。   除新的仪器外,Millipore将向广大科研用户提供整体解决方案,包括生命科学的试剂盒、临床应用以及技术支持服务。
  • Guava 微毛细管式细胞分析/计数仪新品发布会圆满召开
    Millipore公司携手Guava Technologies公司共同推进微毛细管式细胞分析/计数仪在生命科学领域的应用。2008年9月24日至27日,Millipore与联科生物,普飞生物以及麦约尔生物技术有限公司一起,共同为Guava 微毛细管式细胞分析/计数仪新品发布揭幕。 Guava微毛细管式细胞分析/计数仪 微毛细管核心技术   此次发布会暨学术研讨会在上海第二军医大学、交通大学、中科院和华山医院共举办四场,吸引约300名专家学者参与。Millipore公司中国总经理陈亮致开幕词,并为莅临研讨会的来宾介绍了Millipore的公司文化,运营策略以及发展蓝图。Millipore已经逐步从传统的膜技术,过滤和超纯水为业务主导的公司,过渡到以推进生命科学发展为己任,涵盖抗体,试剂等业务多元化发展的生物科技行业领先者。 Millipore公司中国总经理陈亮致开幕词 Millipore公司亚洲总裁Ray Shin揭幕   Millipore公司Bioscience市场部经理吴波博士为大家详细介绍了新一代“流式”技术—Guava微毛细管式细胞分析/计数仪。该系统摈弃了传统流式技术使用了近40年之久的鞘液流体系统,创新采用了专利的微毛细管技术,具有实验体系要求少(无鞘液);系统使用与维护需求少;体积小;分析功能更强大(能做绝对计数,更精细细胞活力分析等)等超越传统流式细胞仪(三多一少)的特点。该系统新颖的设计和突出的优势吸引了广大专家学者的关注。在环保意识深入人心的当今社会,相信会有越来越多的人会对无鞘液细胞分析技术给予重视。 Millipore市场部经理吴波博士介绍 Millipore亚洲区技术经理章芳博士 Guava微毛细管式细胞分析/计数仪 Epigenetics 精彩演讲 Millipore亚洲技术支持详细介绍操作   许多来宾纷纷表示,参加这次学术研讨会的另一大收获就是与Millipore公司亚洲区技术经理章芳博士在Epigenetics领域进行了现场讨论和交流。随着核功能研究的不断深入,不少实验室的研究已经达到基因水平。癌症以及遗传疾病依然是临床研究的重要方向。章博士讲了组蛋白修饰, DNA甲基化,ChIP(染色质免疫沉淀)的艺术和MSP (DNA甲基化特异性PCR)等专题,带来了当今表观遗传学最前沿的发展趋势和研究热潮。   会后,Millipore亚洲技术支持中心的专业技术人员详细地为各位专家学者进一步介绍Guava微毛细管式细胞分析/计数仪的具体操作以及软件应用,为该次发布会上海站画上圆满的句号。
  • 密理博新一代微毛细管细胞分析仪绚丽登场
    密理博公司日前宣布新一代Guava easyCyte 8HT 微毛细管细胞分析仪绚丽登场。这款紧凑集约型,并拥有六种颜色检测系统的细胞分析仪能进行96孔板自动化检测,能让科学家轻轻松松在个人实验室完成“流式”全过程。该系统是今年密理博公司收购Guava Technologies之后,第一台由密理博公司设计制造的“流式”细胞仪。   Guava easyCyte 8HT 能帮助科学家同时检测1个细胞的8个生物指标(包括6种荧光颜色)。除此之外,六色检测系统能让科学家自由地选择荧光素,在最合适的荧光通道中进行数据获取,以此降低了检测信号重叠的机会,从而提高了数据质量。   休斯敦大学运动生理、营养和免疫副教授Brian K. McFarlin 指出“细胞分析仪是我们实验室非常重要的研究仪器。Guava 使我的实验室研究比从前更有效,更方便。传统流式细胞仪需要全职人员操作和维护,成本较高。但Guava细胞分析仪只需要进行样品上样。在过去两年中,我们已经分析过30,000多个样品且没有出现问题。”   McFarlin博士强调:“Guava系统还能分析比传统流式小20倍的血液样品, 不仅减少了样品体积,而且减少了抗体和试剂消耗。因此,在过去的两年中,我们实验室为此节省了约60,000美金的抗体试剂费用。”   和其他的Guava微毛细管细胞分析/计数仪一样,EasyCyte 8HT系统应用了专利的微毛细管技术,减少了上样的细胞数量和产生的废液量,从传统的几升/天到小于50 毫升/天。由于减少了复杂的液流系统,使得仪器所占空间缩小,维护成本下降。   EasyCyte 8HT 的InCyte 新软件显著改善了数据分析。InCyte 软件让科学家能同时查看、对比和分析多组数据,也就是说对比传统软件分析单个样本,现在整块96孔板的数据能在较短时间内分析完成。   除新的仪器外,Millipore将向广大科研用户提供整体解决方案,包括生命科学的试剂盒、临床应用以及技术支持服务。
  • 毛细管电泳技术在蛋白药物分析中的应用
    毛细管电泳技术在蛋白药物研发和质量控制中的发展 随着蛋白药物的开发热潮在全球兴起,毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)作为一种新兴的研发和质控的分析技术也越来越受到各大生物制药公司的青睐和法规机构的重视。全球大部分生物制药公司均已使用毛细管电泳系统用于蛋白药物的研发及质量控制分析。从培养基优化、克隆筛选、配方稳定性研究和纯化过程监测,到蛋白表征、相关杂质检测、蛋白结构鉴定和蛋白质药物产品的质量控制,蛋白药物的各个环节都需要使用到毛细管电泳。例如蛋白的纯度测定,已经从SDS-PAGE转变为十二烷基硫酸钠-毛细管凝胶电泳(CE-SDS)方法;蛋白质的等电点测定,毛细管等电聚焦(CIEF)比传统胶条方法更为准确;糖蛋白药物的糖基异质性表征,毛细管电泳是高分辨率分析方法之一。在各国药典中,毛细管电泳技术用于蛋白药物的检测方法也不断丰富与发展。药典中最早出现其对蛋白药物检测方法是促红细胞生成素(EPO)的糖异构体测定。糖蛋白的异构体差异小,普通的分析方法很难将EPO中的多种异构体分离定量。欧洲药典和美国药典将毛细管电泳方法确定为EPO异构体分析的标准,解决EPO产品中各种糖基化异构体的分离和定量问题。此外,生长激素的相关杂质检测标准也采用了毛细管电泳的方法。对于单克隆抗体药物的分析,在2006年,由惠氏、安进、基因技术、礼来、辉瑞、强生及加拿大卫生署等十几个实验室对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了联合验证。他们对方法的稳定性、可靠性、准确性等多方面进行了研究和考察。研究结果表明CE-SDS方法比传统的SDS-PAGE更适合单抗药物的表征与质量控制,其结果的稳定可靠性要远远超过SDS-PAGE,建议各生物制药公司使用CE-SDS代替原有的SDS-PAGE作为研发与质量分析的平台。随后,上述生物制药公司及机构又针对“CIEF方法进行单抗药的等电点测定及电荷异质性分析”、“CZE方法快速分析单抗药的电荷异质性”,“毛细管电泳技术进行单抗药中的糖基分析”进行了多实验室联合验证,结果展现了CE技术用于单抗药质量控制的优势及可行性。美国药典于2013年发布了利妥昔和曲拓珠等单克隆抗体药物的纯度检测、等电点/电荷异质性分析和糖基分析采用毛细管电泳方法。在中国,中国食品药品检定研究院于2012年联合国内外生物制药机构对“CE-SDS方法对单抗药物纯度分析”进行了验证,确认了CE-SDS方法在分辨率、定量准确性及自动化程度等方面的优势,并指出CE可以对单抗非糖基化重链进行准确定量。基于以上工作以及毛细管电泳技术在单抗药分析中的强大优势,中国药典2015版的第三部中增加了CE技术,明确了CE是单克隆抗体药物大小变异体、电荷变异体、鉴别与一致性和糖基化修饰分析中的重要方法。随着CE技术在生物制药领域的快速发展,以及新的蛋白质药物的不断上市,将会有更多的CE方法出现在各国药典中。毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用(1)单克隆抗体药物的纯度及大小异质性分析SDS-PAGE方法对单抗药物进行纯度分析,在分辨率、定量准确性和自动化程度上,已经不能满足生物制药研发和质量控制的要求。CE-SDS方法基于蛋白分子量的差异分离,用于还原和非还原单抗药物的纯度分析,免去了复杂的人工操作、定量更加准确,具有更高的分辨率,在还原模式中可对非糖基化重链进行分离和准确定量。图1. CE-SDS对还原单克隆抗体药物的纯度分析[1]选用不同的毛细管长度,可以实现高分辨率模式和快速模式的纯度分析。高分辨模式的CE-SDS方法提供最高的分辨率,快速模式的CE-SDS方法提供更短的冲洗和分离时间,提高了分析的通量。CE-SDS结合激光诱导荧光检测器(CE-SDS-LIF),通过5-Tarma或FQ染料对蛋白进行标记,可以获得更高的灵敏度,可以检测到含量在0.01%的杂质碎片。此外,LIF检测器的使用,可以最小化基线波动,使积分和定量更加准确。(2)单克隆抗体药物等电点的测定和电荷异质性的分析单抗药物在结构上会发生糖基化、脱酰胺化、异构化、氧化等翻译后修饰,造成蛋白表面电荷的改变,引起单抗的电荷异质性。每个变异体具有不同的等电点。基于等电点分离的毛细管等电聚焦技术(cIEF),可以对单抗药物的变异体进行高分辨率的分离和定量,可分离0.03个pI差异的变异体。方法使用等电点Marker制作校准曲线,对变异体的等电点进行准确的测定。是单抗药物等电点测定和电荷异质性分析的重要方法。图2. CIEF方法对单克隆抗体药物的等电点和电荷异质性分析[5]针对不同pI范围的蛋白样品,可以通过选用适当的两性电解质来实现高分辨率的分析。如对于大部分单抗,其pI值位于7-10之间,可使用pH 3-10范围的两性电解质;对于pI 在5-7范围内的蛋白样品,可使用pH 5-8的窄范围两性电解质;而对于pI 小于5的酸性蛋白,则可以使用反向聚焦和迁移模式,实现更好的分析。 (3)CZE方法对单克隆抗体药物电荷异质性的快速分析毛细管区带电泳(CZE)基于分析物电荷/体积的比进行分离,是毛细管电泳技术中最简单、快速的模式。由于单抗药物的各个变异体分子体积近乎相同,因此在CZE分离模式中,电荷变异体的分离取决于表面电荷的差异,与CIEF模式的变异体分离相一致。因此,CZE成为快速电荷异质性分析的平台方法被生物制药行业所使用。此外,由于CZE方法简单快速的特点,它也被用于单抗药的鉴别分析中。图3. 同一种CZE方法对23种单抗药物的电荷异质性分析[3](4)单克隆抗体药物的糖基异质性分析单克隆抗体等糖蛋白药物中,糖基的种类和排列顺序会导致糖基异质性。单抗药物的糖基化修饰对其安全性和药效有着很大的影响。因此对糖基异质性的质量控制十分重要。毛细管电泳方法对糖基异质性分析的流程包括糖蛋白中糖基的释放、糖基的标记和毛细管电泳分离。磁珠辅助的糖基释放和标记,使得前处理可在1小时内完成,加快了前处理的时间。采用APTS作为荧光标记物,不仅可以通过增加电荷提高分离效率, 还通过LIF检测实现了高灵敏的糖基分析。毛细管电泳技术对糖基分析的优势在于分辨率高,速度快。不但可以区分出一个糖基的差别,相同分子量的糖基异构体也可以得到分离,整个分离过程可在5-20分钟内完成。图4. CE-LIF方法对单抗药糖基分析的电泳图毛细管电泳技术在重组蛋白类药物分析中的应用重组人促红细胞生成素(rhEPO)是高度糖基化的蛋白药物。糖基化的异质性导致了多种变异体的存在。采用CZE方法可对EPO的变异体进行分离和定量,该方法已经成为欧洲药典中EPO变异体分析的标准方法。此外,CIEF方法也可以实现对EPO中各个变异体的高分辨分离,不但可以获得与CZE方法相同的变异体数目和定量信息,还可以提供每个变异体的精确的等电点数值。在对不同来源的EPO产品与参考品的比较中,可使用等电点对变异体进行鉴定。图5. CZE方法对EPO变异体的分析重组人生长激素(rhGH)的纯度及异质性分析中,CZE方法分离度高、定量准确,也已为欧洲药典所采用。图6 CZE方法对rhGH的电荷异质性分析总结在蛋白药蓬勃发展的今天,毛细管电泳技术以其分辨率高、模式多等优势,在蛋白药研发和质控的过程中起到了不可或缺的作用,被越来越多的企业和监管机构所认可,用于蛋白药的纯度、等电点及电荷异质性、糖基等分析中。随着蛋白药物、细胞/基因治疗以及新型疫苗等生物制品的不断发展,毛细管电泳技术将会具有更大的应用空间,在蛋白、核酸及病毒颗粒等分析中,发挥它的优势,提高生物制品的质量控制标准。
  • 毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪研制成功
    由中科院长春应化所完成的中科院科研装备研制项目“毛细管电泳电化学微型综合分析仪”,12月25日在长春通过了以张玉奎院士为首的专家组验收。专家组认为,该仪器性能良好、灵敏度高、稳定性强、国内外目前尚无该种仪器。   毛细管电泳技术和微流控芯片分析方法由于其分别具有分离效率高、生物兼容性好、利于微型化、集成化等特点而被广泛应用于分析科学领域,日益引起国内外的广泛关注。而将二者有机结合,优势互补,搭建一个便捷式经济型多功能生物分析平台??毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪,进一步拓展其分析对象和应用范围,更是国际电分析化学领域竞相研发的重要前沿方向。   中科院长春应化所汪尔康院士和徐国宝研究员等聚焦这一重要的国际前沿发展方向,在中国科学院科研装备专项的支持下,于2007年2月开始了“毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪”的研发。研发中,他们注重发挥在毛细管电泳检测技术和微流控芯片分析方法中的积累和优势,创新性地将电化学发光、电化学等检测技术与毛细管电泳、微流控芯片等分析工具有机结合在一起。在此基础上,由西安瑞迈分析仪器公司配合,进一步微型化、集成化,研发出具有我国自主知识产权的毛细管电泳电化学发光微型综合分析仪样机,属国际首创。   与此同时,他们还结合该分析仪器的研发,研制出5种具有生物应用前景的电化学发光探针,并应用于生物分子检测分析 建立了一系列固定电化学发光探针的新方法,并发展出相关电化学发光固体检测器。这些创新成果,为研制的样机在科学研究及临床中推广应用奠定了重要的基础。   该仪器是由多通道数据采集分析仪、多功能化学发光监测仪、数控电化学分析恒电位仪、数控毛细管/芯片电泳高压电源等控件所组成的专用系统 系统成功构建了基于WINDOWS操作系统的多窗口、多界面分析化学数据采集与处理平台,实现了多种控制部件的系统连接与控制 在硬件设计中,系统采用了分布式微处理器结构,集成了多个通用或专用处理器管理各控制部件,使系统具有了很高的灵活性和可靠性 由于采用了较为合理的总线连接方式和订制了完善的通讯协议,整个系统具有硬件简单,扩展方便,功能齐全和便于组合等优点。系统中的所有部件既可组合使用,也可单独作为具备相应功能的单项仪器使用。在软件设计中,充分考虑了多参数分析的特点,设计了完善的同步测试功能 针对化学动力过程测试的特点,系统还开展了具有独特功能的以谱图加亮区为主的谱图处理及动态背景扣除等功能 特别设计的样品测试界面,则可使批量样品测试变得简单容易。   该仪器的研发成功,丰富了基础科学的研究手段,为蛋白质、DNA、细胞、免疫等前沿领域的科学研究提供了一个新的多功能分析平台,也为一些重大疾病的早期诊断和医治提供了有力的支撑,是我国电分析化学领域取得的又一重要的创新性成果。
  • 赛默飞推出采用最新毛细管电泳技术的遗传分析系统
    p   5月22日,赛默飞世尔科技宣布推出最新的毛细管电泳(CE)系统,该技术主要是为Sange测序和片段分析提供低通量、cartridge-based系统。Applied Biosystems& #8482 SeqStudio& #8482 遗传分析系统可用于肿瘤学研究、基因组编辑、物种鉴定和人体细胞系鉴定等应用,能够支持日益增长的追求经济性和易用性的CE平台的需求。 br/ /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201705/insimg/c04800fe-65d7-4d53-b5b4-49dbca56fd71.jpg" title=" 未标题-1.jpg" / /p p style=" text-align: center " SeqStudio遗传分析系统 /p p   新的SeqStudio遗传分析系统采用独特的一体式盒式cartridge,结合毛细管阵列,聚合物储存器和阳极缓冲液,极大地简化了实验准备和实际操作时间。此外,该系统其他创新功能允许客户访问个性化协议,直观的触摸屏和连接到Thermo Fisher Cloud,可用于远程设置和监控以及轻松的数据分析和协作。 /p p   “采用CE系统的Sanger测序是40周年庆典推出的新品,是测序科技的金标准。帮助发现新的生物学发现,并在2003年用于完成人类基因组计划。” 赛默飞世尔科技公司遗传分析副总裁兼总经理Kim Kelderman说。“SeqStudio遗传分析仪是一款为研究人员提供真正即插即用功能的智能和先进系统。 /p p   此前,SeqStudio遗传分析系统已经在北美、欧洲、中东、非洲、日本和中国地区选择部分用户使用,在该系统上已经有超过2000个组合的运行结果。该系统将于2017年下半年向全球用户供应。 /p p   “我积极推荐新的CE系统,它降低了毛细管电泳平台的运行成本,并且容易操作。” MRC Holland首席执行官Jan Schouten表示。“该系统可以处理一个完整的微量滴定板样品,并具有足够的容量用于中低通量遗传实验室。” /p p   SeqStudio遗传分析系统将在2017年5月27日至30日在丹麦哥本哈根举行的年度欧洲人类遗传学协会(ESHG)大会上首次展出。 /p p   更多信息,请访问www.thermofisher.com/seqstudio。 /p p br/ /p
  • 默克密理博发布新一代微毛细管流式细胞仪guava easyCyte系列
    价格合理的台式流式细胞仪让所有人都能体验到流式技术的强大威力 复杂的液流系统精简后占用面积更小,需要的维护更少。 Guava不仅仅带来空间上的节省及可承受的价格,更能加深研究者对细胞功能的认知。 2010年8月5日,Billerica, MA。默克密理博&mdash &mdash 德国默克KGaA的生命科学部门,于今日正式宣布扩增业界领先的产品线&mdash &mdash guava easyCyteTM 台式流式细胞仪。此新一代的guava easyCyte家族产品为紧凑型单进样系统,这使得前所未有之多的科学家可将他们的科学研究从中心实验室搬到他们自己的实验室中。 新推出的easyCyte机型提供多达8个检测参数、单个进样的规格。默克密理博的流式细胞产品经理Jason Whalley谈到:&ldquo 此系列功能强大的产品易于使用,再加上占用体积小,价格合理,能够让研究者们更多关注于单细胞层面上的细胞功能和机制&rdquo 。新系列的机型扩充了以高通量(HT)系列为旗舰的96孔板进样的产品线,之前的产品线发布于2009年7月。 新品为4款单进样的型号:2个单激光型号可检测5~6个参数,2个双激光型号可检测6~8个参数。双激光使得研究者选择不同荧光染料的余地更大,同时所选的荧光染料发射谱的区分度会更好。 如同之前guava流式系统一样,新机型也采用专利的微毛细管技术,降低分析所需的细胞数目,以及所产生的废液&mdash &mdash 传统方法每天数升废液,减少到每天低于50ml。复杂液流系统的精简,使得guava仪器体积更小,大大减少用户的维护成本。 EasyCyte流式细胞仪特备InCyteTM软件,相比传统软件包,极大的便利了数据分析。InCyte软件让研究者同步查看、比较和分析多达6组数据,这意味着多细胞群或多细胞参数的分析将更快。 除了流式仪器外,默克密理博提供给用户完整的工作流程方案,其中包括用于生命科学和临床应用的优化试剂盒,也提供现场支持服务。 关于guava easyCyte的更多信息,请访问:http://www.millipore.com/easy
  • 毛细管电泳专家莅临海能仪器,聚焦毛细管电泳仪国产化发展与推广
    毛细管电泳技术具有高效分离、快速分析、试剂和样品用量少、绿色环保、前处理简单等优势,并使分析化学研究应用从微升水平进入纳升水平。毛细管电泳技术在生物制药、临床医学、手性药物、食品饮料、环境分析、法医鉴定等领域具有广泛应用,是蛋白质、核酸、有机物的有效分析技术,也使单细胞及单分子分析成为可能,并有更多应用领域尚待开发。作为新型微量分析技术,其应用领域十分广泛。 2017年,海能仪器与欧洲DL公司签署战略合作协议,购买了“高效毛细管电泳仪”相关专利实施许可权及非专利技术、软件所有权等全部技术产权。2019年,海能仪器历时2年完成了毛细管电泳仪全部技术的国产化,并实现了国产毛细管电泳仪的批量化生产。为推动毛细管电泳技术的应用普及,加快国产毛细管电泳仪器的发展和应用推广,由北京理化分析测试技术学会主办,于2019年8月21至22日在海能仪器产业园举行了“毛细管电泳应用技术研讨会”。十余位长期从事毛细管电泳技术研究和应用的专家莅临海能,参加此次研讨会,就毛细管电泳技术的应用以及国产化仪器的发展与推广进行研讨交流。 专家一行详细了解了海能仪器全产业链的生产模式,参观了海能文化馆,核心部件事业部、电路板车间、精加工车间、模塑车间、钣金喷涂车间,了解海能仪器为提升科学仪器品质和水平所做出的举措,并对国产毛细管电泳仪的发展寄予厚望。 与会专家围绕毛细管电泳技术应用的热点和国产毛细管电泳仪的未来发展前景进行充分交流,分享技术经验,提出有益建议。希望海能毛细管电泳仪为相关行业的分析人员提供更多的选择和更好的服务。
  • “国产”难进高校—全国仪器共享资源调查之毛细管电泳仪
    高端科研仪器是高校及科研院所培养人才和科学研究的技术支撑,也是国家科技基础条件资源的重要组成部分。但由于管理模式及制度,毛细管电泳仪等科学仪器设备不对外开放,大多养在“深闺”,大量科研资源潜能没有得到充分发挥。为解决这个问题并加速释放科技创新的动能,中央及各级政府在近几年来制订颁布了关于科学仪器、科研数据等科技资源的共享与平台建设文件。2021年1月22日,科技部和财政部联合发布《科技部 财政部关于开展2021年度国家科技基础条件资源调查工作的通知(国科发基〔2020〕342号)》,全国众多高校和科研院所将各种科学仪器上传共享。仪器信息网对平台高校和科研院所上传的毛细管电泳仪资源进行统计分析,在一定程度上可反映科研用毛细管电泳仪的使用情况。(注:本文搜集信息来源于重大科研基础设施和大型科研仪器国家网络管理平台,不完全统计分析仅供读者参考)。什么是毛细管电泳仪?毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE),又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以弹性石英毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。CE实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。CE的分离范围覆盖离子、化合物等小分子,蛋白、核酸、糖类等大分子,甚至到细胞和病毒等,具有高效、快速、成本低、应用模式多等显著优势,广泛地应用于生物、化学、医药、食品、卫生防疫等领域。毛细管电泳仪资源分布不均统计高校和科研院所在全国仪器共享平台上传的数据,截止2021年6月3日,平台上毛细管电泳的总数量为191台,涉及33个省份、直辖市、自治区。其中,北京、江苏、山东、浙江、湖北的毛细管电泳数量大于10台,分别为24台、19台、15台、12台、12台。从全国共享毛细管电泳分布图不难看出,仪器资源集中分布在高等教育强省,这一方面与各省份的高校数量和质量有关,另一方面则是受到国家科研经费的制约。共享平台的开放正是为了解决仪器资源分布不均的问题,提升科研设施与仪器服务能力。全国共享毛细管电泳地区分布图这191台毛细管电泳的单位来源共涉及164所高校及研究院所,且985和211高校的仪器资源更强,其中,北京涉及的单位数量最多共18所,分别为北京大学、中国检验检疫科学研究院、首都医科大学、北京农学院、北京理工大学、中央民族大学、北京农业大学、中国科学院植物研究所等。北京18所共享毛细管电泳单位高校毛细管电泳100%进口从全国共享平台统计的毛细管电泳品牌分布来看,贝克曼、安捷伦、SCIEX、AATI、ABI、PE、通用电气占据了95%的市场,其中,贝克曼以绝对的优势占比61%,安捷伦和SCIEX约占总数量的四分之一。从现阶段数据来看,高校和科研院所用的毛细管电泳被国外垄断。一方面是出于科研需求,科研团队需要采购技术更高,准确度更精密的高端仪器,而大部分国外高端科研仪器的水平比较高,这也导致了目前的垄断局面。另一方面,是国产仪器被整体的制造技术水平制约,在进口技术垄断的前提下,自身仪器研发硬实力上不去,所以高校和科研院所在仪器选择上就更倾向进口品牌,例如毛细管电泳仪,98%都来源于美国。全国共享毛细管电泳品牌分布全国共享毛细管电泳产地分布结语随着仪器共享政策的不断实施,高端科研仪器开放共享的良好氛围在逐渐形成,有助于达到专业化、网络化的仪器管理服务体系的建设,从而解决高端仪器资源浪费和分布不均的问题。同时,我们注意到高校和科研院所在使用高端科研仪器时更依赖进口,例如毛细管电泳,在采购选择上更倾向于贝克曼、安捷伦、SCIEX等知名品牌,对国产仪器的认可度较低,国产高端仪器想要走进高校仍有很长的路要走。更多毛细管电泳讯息,点击专场查看。
  • 毛细管气相色谱仪对复杂样品的定性定量分析
    在现代分析化学领域,毛细管气相色谱技术因其分离效率和精确的分析能力而被广泛应用。尤其在面对组成复杂的样品时,毛细管气相色谱仪显示出其优势。本文将深入探讨它在处理复杂样品时的定性和定量分析能力,以及其在实验过程中的应用策略和注意事项。   毛细管气相色谱仪的核心部分是长而细的毛细管柱,内壁涂有固定相。这种设计极大地增加了相互作用的表面积,使得样品分子能在气相和固定相之间进行成千上万次的交互作用。通过精准控制色谱条件如载气流速、温度程序等,可以实现复杂混合物中各组分的有效分离。   在进行定性分析时,毛细管气相色谱通常与质谱(MS)或傅里叶变换红外光谱(FTIR)联用,以增强识别未知化合物的能力。例如,气相色谱-质谱联用技术可以提供样品中每个峰的质谱图,通过数据库比对实现快速鉴定。这种方法尤其适用于石油产品、植物提取物、香精香料等复杂样品的分析。   定量分析方面,仪器通过与标准物质的保留时间和峰面积或峰高对比,实现高精度的定量测定。使用内标法或外标法定量,可以根据实际需要选择最合适的方法。内标法通过添加已知浓度的内部标准物来校正样品处理过程中可能出现的损失,从而提高定量的准确性。外标法则依赖于标准曲线,适用于可以精确控制样品进样量的情况。   操作时,需特别注意温度的控制和优化。升温程序必须精心设计以确保所有组分都能得到有效分离而不致于峰展宽或峰形失真。载气的选择和流速的调整也至关重要,氮气和氦气是常用的载气,它们具有化学惰性,不会与样品发生反应。   维护和日常检查对于保持设备的最佳性能也是必要的。定期检查和更换进样口的隔垫、衬管和色谱柱,可以防止样品交叉污染并保证分析的重现性。   综上所述,毛细管气相色谱仪是分析复杂样品的强有力工具。通过优化分析条件和适当的操作维护,可以实现对复杂样品中各个组分的高效、准确的定性和定量分析。
  • 苏州大学附属第一医院630.00万元采购基因测序仪,流式细胞仪,毛细管电泳仪
    html, body { -webkit-user-select: text } * { padding: 0 margin: 0 } .web-box { width: 100% text-align: center } .wenshang { margin: 0 auto width: 80% text-align: center padding: 20px 10px 0 10px } .wenshang h2 { display: block color: #900 text-align: center padding-bottom: 10px border-bottom: 1px dashed #ccc font-size: 16px } .site a { text-decoration: none } .content-box { text-align: left margin: 0 auto width: 80% margin-top: 25px text-indent: 2em font-size: 14px line-height: 25px } .biaoge { margin: 0 auto /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 25px } .table_content { border-top: 1px solid #e0e0e0 border-left: 1px solid #e0e0e0 font-family: Arial /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 10px margin-left: 15px } .table_content tr td { line-height: 29px } .table_content .bg { background-color: #f6f6f6 } .table_content tr td { border-right: 1px solid #e0e0e0 border-bottom: 1px solid #e0e0e0 } .table-left { text-align: left padding-left: 20px } 详细信息 苏州大学附属第一医院关于4K荧光胸腔镜系统等设备的招标公告 江苏省-苏州市-姑苏区 状态:公告 更新时间: 2023-10-17 苏州大学附属第一医院关于4K荧光胸腔镜系统等设备的招标公告 2023年10月17日 16:12 公告信息: 采购项目名称 4K荧光胸腔镜系统等设备 品目 其他医疗设备 采购单位 苏州大学附属第一医院 行政区域 江苏省 公告时间 2023年10月17日 16:12 获取招标文件时间 2023年10月17日至2023年10月24日每日上午:08:30 至 11:30 下午:13:00 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 招标文件售价 ¥.05 获取招标文件的地点 苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 开标时间 2023年11月07日 15:00 开标地点 开标室1 预算金额 ¥630.000000万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 卫康01 项目联系电话 15995885894 采购单位 苏州大学附属第一医院 采购单位地址 江苏省苏州市十梓街188号 采购单位联系方式 0512-67780793 代理机构名称 苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 代理机构地址 苏州市干将西路120号3幢401室 代理机构联系方式 卫康01 项目概况 4K荧光胸腔镜系统等设备招标项目的潜在投标人应在苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层(苏州市卫康招投标咨询服务有限公司)获取招标文件,并于2023年11月7日15点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:JSZC-320000-SZWK-G2023-0042号 项目名称:4K荧光胸腔镜系统等设备 预算金额:第一标段200万元、第二标段170万元、第三标段120万元、第四标段140万元 最高限价:无 1.采购需求: 标段 名称 数量 预算价(万元) 简要说明 是否接受进口产品投标 1 4K荧光胸腔镜系统 1套 200 摄像系统主机1套、摄像头1套、医用内窥镜光源系统1套、胸腔镜3根、医用≥32寸监视器1台、专用设备台车1台 否 2 流式细胞仪 1套 170 配置三根激光器,分别为488nm蓝色固体激光器,638±5nm红色固态激光器,405nm紫色固态激光器。且最少可同时检测10色荧光,12个参数。三根固态激光器功率≥40mW 是 3 毛细管电泳基因分析仪 1套 120 可应用于DNA序列测定,片段分析,适用的检测项目至少包括HLA基因分型、药物相关基因检测、人类STR基因分型检测、肿瘤基因突变检测等 否 4 基因测序仪 1套 140 毛细管电泳方法,光学系统可同时采集至少4色荧光信号 否 2.售后服务要求:整体提供不低于三年的免费原厂售后服务。 3.合同履行期限:合同签订后60天内送货到位并完成安装调试。 4.本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定: (1)具有独立承担民事责任的能力; (2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度; (3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力; (4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录; (5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录; (6)法律、行政法规规定的其他条件。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无 3.本项目的特定资格要求: 具有医疗器械经营资格; 三、获取招标文件 时间:2023年10月17日至2023年10月24日,每天上午08:30至11:30,下午13:00至17:00(北京时间,法定节假日除外)。 地点:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层(苏州市卫康招投标咨询服务有限公司)。 方式: 提供以下材料现场获取 (1)营业执照副本复印件; (2)法人授权委托书; (3)医疗器械经营资格证明材料复印件; 上述材料每页均须加盖单位公章。 售价:工本费人民币伍佰元整,售后不退。 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 时间:2023年11月7日15点00分(北京时间) 地点:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本次采购的有关信息将在以下网站上发布:江苏政府采购网、中国政府采购网。 2.未依照采购公告要求依法获取采购文件的供应商,视为未参加该项政府采购活动,不具备对该政府采购项目提出质疑的法定权利。但因供应商资格条件或获取时间设定不符合有关法律法规规定等原因使供应商权益受损的除外。 3.单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。 4.本项目为非专门面向中小企业采购项目,所属行业为工业行业。 5.为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商,不得再参加该采购项目的其他采购活动。 6.根据《关于贯彻执行绿色采购、促进残疾人就业和支持监狱企业发展有关政策的通知(苏财购〔2019〕10号)》的通知规定,本次采购的产品不属于《节能产品政府采购品目清单》范围内强制或优先采购的产品。本次采购的产品不属于《环境标志产品政府采购品目清单》范围内优先采购的产品。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:苏州大学附属第一医院 联系人:张永刚 联系电话:0512-67780793 地址:苏州市姑苏区平海路899号 2.采购代理机构信息 名称:苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 地 址:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 联系人:周依雯、齐一豪 联系方式:0512-69165616、69165625 3.项目联系方式 项目联系人:周依雯、齐一豪 电 话:0512-69165616、69165625 苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 2023年10月17日 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 $('.clickModel').click(function () { $('.modelDiv').show() }) $('.closeModel').click(function () { $('.modelDiv').hide() }) 基本信息 关键内容:基因测序仪,流式细胞仪,毛细管电泳仪 开标时间:2023-11-07 15:00 预算金额:630.00万元 采购单位:苏州大学附属第一医院 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 苏州大学附属第一医院关于4K荧光胸腔镜系统等设备的招标公告 江苏省-苏州市-姑苏区 状态:公告 更新时间: 2023-10-17 苏州大学附属第一医院关于4K荧光胸腔镜系统等设备的招标公告 2023年10月17日 16:12 公告信息: 采购项目名称 4K荧光胸腔镜系统等设备 品目 其他医疗设备 采购单位 苏州大学附属第一医院 行政区域 江苏省 公告时间 2023年10月17日 16:12 获取招标文件时间 2023年10月17日至2023年10月24日每日上午:08:30 至 11:30 下午:13:00 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 招标文件售价 ¥.05 获取招标文件的地点 苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 开标时间 2023年11月07日 15:00 开标地点 开标室1 预算金额 ¥630.000000万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 卫康01 项目联系电话 15995885894 采购单位 苏州大学附属第一医院 采购单位地址 江苏省苏州市十梓街188号 采购单位联系方式 0512-67780793 代理机构名称 苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 代理机构地址 苏州市干将西路120号3幢401室 代理机构联系方式 卫康01 项目概况 4K荧光胸腔镜系统等设备招标项目的潜在投标人应在苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层(苏州市卫康招投标咨询服务有限公司)获取招标文件,并于2023年11月7日15点00分(北京时间)前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号:JSZC-320000-SZWK-G2023-0042号 项目名称:4K荧光胸腔镜系统等设备 预算金额:第一标段200万元、第二标段170万元、第三标段120万元、第四标段140万元 最高限价:无 1.采购需求:标段 名称 数量 预算价(万元) 简要说明 是否接受进口产品投标 1 4K荧光胸腔镜系统 1套 200 摄像系统主机1套、摄像头1套、医用内窥镜光源系统1套、胸腔镜3根、医用≥32寸监视器1台、专用设备台车1台 否 2 流式细胞仪 1套 170 配置三根激光器,分别为488nm蓝色固体激光器,638±5nm红色固态激光器,405nm紫色固态激光器。且最少可同时检测10色荧光,12个参数。三根固态激光器功率≥40mW 是 3 毛细管电泳基因分析仪 1套 120 可应用于DNA序列测定,片段分析,适用的检测项目至少包括HLA基因分型、药物相关基因检测、人类STR基因分型检测、肿瘤基因突变检测等 否 4 基因测序仪 1套 140 毛细管电泳方法,光学系统可同时采集至少4色荧光信号 否 2.售后服务要求:整体提供不低于三年的免费原厂售后服务。 3.合同履行期限:合同签订后60天内送货到位并完成安装调试。 4.本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定: (1)具有独立承担民事责任的能力; (2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度; (3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力; (4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录; (5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录; (6)法律、行政法规规定的其他条件。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 无 3.本项目的特定资格要求: 具有医疗器械经营资格; 三、获取招标文件 时间:2023年10月17日至2023年10月24日,每天上午08:30至11:30,下午13:00至17:00(北京时间,法定节假日除外)。 地点:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层(苏州市卫康招投标咨询服务有限公司)。 方式: 提供以下材料现场获取 (1)营业执照副本复印件; (2)法人授权委托书;(3)医疗器械经营资格证明材料复印件; 上述材料每页均须加盖单位公章。 售价:工本费人民币伍佰元整,售后不退。 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 时间:2023年11月7日15点00分(北京时间) 地点:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本次采购的有关信息将在以下网站上发布:江苏政府采购网、中国政府采购网。 2.未依照采购公告要求依法获取采购文件的供应商,视为未参加该项政府采购活动,不具备对该政府采购项目提出质疑的法定权利。但因供应商资格条件或获取时间设定不符合有关法律法规规定等原因使供应商权益受损的除外。 3.单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。 4.本项目为非专门面向中小企业采购项目,所属行业为工业行业。 5.为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商,不得再参加该采购项目的其他采购活动。 6.根据《关于贯彻执行绿色采购、促进残疾人就业和支持监狱企业发展有关政策的通知(苏财购〔2019〕10号)》的通知规定,本次采购的产品不属于《节能产品政府采购品目清单》范围内强制或优先采购的产品。本次采购的产品不属于《环境标志产品政府采购品目清单》范围内优先采购的产品。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:苏州大学附属第一医院 联系人:张永刚 联系电话:0512-67780793 地址:苏州市姑苏区平海路899号 2.采购代理机构信息 名称:苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 地 址:苏州市干将西路1296号(深业姑苏中心)1幢17层 联系人:周依雯、齐一豪 联系方式:0512-69165616、69165625 3.项目联系方式 项目联系人:周依雯、齐一豪 电 话:0512-69165616、69165625 苏州市卫康招投标咨询服务有限公司 2023年10月17日
  • SCIEX:生物制药质量控制体系中的毛细管电泳技术
    p style=" text-align: justify " strong ——生物制药质量控制体系中的毛细管电泳技术 /strong /p p style=" text-align: justify "    span style=" font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai color: rgb(0, 112, 192) " 近年来,我国生物制药行业发展正如火如荼,研发投入、生产能力、产业集中度均进一步提升。同时,国家政策积极,出台了一系列优惠政策,为我国生物制药产业发展提供了良好的大环境。为了帮助来自生物制药领域的用户学习、了解生物制药分析表征、质量控制工作流程相关内容,仪器信息网特别策划了 /span a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target=" _blank" span style=" font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai text-decoration: underline color: rgb(192, 0, 0) " i strong “生物制药分析、表征与质量控制”专题(点击查看) /strong /i /span /a span style=" font-size: 14px font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai color: rgb(0, 112, 192) " 并邀请 strong SCIEX CE& amp Biopharma市场开发经理赵鹏 /strong 谈谈对生物制药分析、表征与质量控制的看法。 /span /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/5c472894-74c3-419c-8122-b8b64f4c9dd6.jpg" title=" 赵鹏.jpg" alt=" 赵鹏.jpg" width=" 222" height=" 306" style=" width: 222px height: 306px " / /p p style=" text-align: center " strong SCIEX CE& amp Biopharma市场开发经理 赵鹏 /strong /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 仪器信息网:请介绍贵公司在生物制药分析、表征和质量控制方面仪器产品或产品组合?相比于同类产品,在技术上有哪些优势? /strong /span /p p style=" text-align: justify "    strong 赵鹏: /strong 生物制药市场,作为公司最重要的一个发展行业,SCIEX在此领域内已经耕耘多年。作为最早开发毛细管电泳技术的企业,SCIEX针对毛细管电泳技术也做了很多的开发。最为广大生物制药用户熟知的是我们的拳头产品——PA800 Plus制药分析系统。该系统基于毛细管电泳的技术,具有强大的分析功能及易于使用的特性,可对蛋白纯度、电荷异构体和糖类进行自动化定量及定性分析。目前,已有上百家全球领先生物制药企业使用PA800 Plus,该系统为他们提供了对蛋白特性分析的自动化定量综合解决方案。而且PA800 Plus创新型的设计体系确保其操作的可靠性和持久性,是用户值得信赖的产品。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/0a2ef248-ac20-4fa0-b599-4f3c322ba57a.jpg" title=" 02.png" alt=" 02.png" width=" 375" height=" 250" style=" width: 375px height: 250px " / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C317284.htm" target=" _blank" style=" font-size: 14px text-decoration: underline " span style=" font-size: 14px " strong SCIEX PA800 PLUS 生物制药分析系统(点击查看仪器信息) /strong /span /a /p p style=" text-align: justify "   糖谱分析是生物制药中非常重要的环节,其能够预测药物的有效性及帮助优化细胞培养条件,但是在生物制药分析和表征中的大规模克隆筛选和细胞培养中存在一些挑战,比如实验流程太复杂,数据分析太复杂且耗费时间等。为了帮助客户解决此问题,SCIEX在2018年推出了C100HT 生物制品分析系统,其具有12通道分离模块, 96孔样品板上样装置,每天最多可运行5块96孔板。软件中具有快速分析的可视化图谱,可以通过颜色编码来判断通过/失败追踪。C100HT 生物制品分析系统可以帮助用户进行高通量的糖基筛选和分析。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/a2d172fe-b075-4b01-84be-851fc5f1f560.jpg" title=" SCIEX C100 HT生物制品分析仪.jpg" alt=" SCIEX C100 HT生物制品分析仪.jpg" width=" 370" height=" 370" style=" width: 370px height: 370px " / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C317286.htm" target=" _blank" style=" font-size: 14px text-decoration: underline " span style=" font-size: 14px " strong SCIEX C100HT 生物制品分析仪(点击查看仪器信息) /strong /span /a /p p style=" text-align: justify "   在生物样品表征中质谱已成为不可或缺的手段。如何提升质谱的灵敏度,降低离子抑制效应一直是人们关注的重点。SCIEX的CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统,将毛细管电泳(CE)的高效分离和超低速流的特性与电喷雾离子源(ESI)完美结合,从而显著提升灵敏度,降低离子抑制效应,为蛋白药物表征,蛋白组学鉴定,蛋白翻译后修饰分析和代谢组学指纹图谱表征等领域带来了全新的分析方法。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/947b1f7e-1741-4b17-92df-49482c10efd7.jpg" title=" Sciex CESI 8000 高性能电喷雾离子化系统.jpg" alt=" Sciex CESI 8000 高性能电喷雾离子化系统.jpg" / /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C208633.htm" target=" _blank" textvalue=" SCIEX CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统(点击查看仪器信息)" span style=" font-size: 14px " strong SCIEX CESI 8000 Plus 高效毛细管电泳分离和电喷雾离子化系统(点击查看仪器信息) /strong /span /a /p p style=" text-align: justify "   相对于同类型的产品,SCIEX不仅在产品上具有很强的技术领先型,并有广大的用户基础,而且拥有一支单独的团队针对毛细管电泳技术进行技术应用的开发,新方法的研究,以及市场开发和售后保障等,能够快速响应客户的需求。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 仪器信息网:您觉得国内企业在生物制药分析表征和质量控制方面存在哪些不足? /strong /span /p p style=" text-align: justify "    strong 赵鹏: /strong 国内企业在生物制药分析表征和质量控制方面的不足主要有两点。 /p p style=" text-align: justify "    strong 1、表征方法建立及数据解读能力较弱。 /strong 国内生物药企对于生物制药表征分析方法一般都是照搬国外方法,自己缺乏能力去进行新方法建立。特别是对于创新药的新特征,如何找到一种合适的表征方法,常常依赖于仪器制造公司。数据解读能力也比较薄弱,由于生物药的复杂性,常常会出现与预期不符的情况,如何从数据中找出样品相关信息,如何进行下一步的表征,也是国内生物药企需要提高的地方。 /p p style=" text-align: justify "    strong 2、质量控制体系中细节的把控。 /strong 质量控制不仅包括常规的实验检测,规范性文件体系的建立,也包括细节上的把控。如有时候实验结果会受到环境、人员及检测平台的影响,前期制定的质量标准随着实验条件的改变有可能后期无法达到,所以在标准建立时就需要多环境,多人员,多方位的去测试。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 仪器信息网:贵公司在生物制药分析、表征和质量控制方面可以提供哪些解决方案? /strong /span /p p style=" text-align: justify "    strong 赵鹏: /strong SCIEX研发生产的 PA800 Plus生物制药分析系统,为生物制药企业提供在一个平台上实现多重表征与应用的解决方案,该系统全面支持监管合规,可为用户从研发到质控的成功保驾护航。 /p p style=" text-align: justify "   SCIEX的分析结果值得信赖,用户可以借助SCIEX使用经行业和监管部门认可的 CE 技术对任意分子进行表征。这正是几乎所有商用治疗性单克隆抗体制造商都使用SCIEX CE 的众多原因之一。 /p p style=" text-align: justify "   另外,用户借助SCIEX可以全面实现对单克隆抗体的分析:如通过金标准 CE-SDS 方法在数分钟内完成纯度/ 异质性分析 通过屡获殊荣的快速糖基化分析技术进行糖基化分析 通过简单快速的 CZE 或高分辨率毛细管等电聚焦 (cIEF) 分析电荷异质性。与此同时,SCIEX可为用户提供单克隆抗体以外的多肽和蛋白质、质粒和核酸治疗性药物的表征方案。 /p p style=" text-align: justify "   SCIEX依托遍布全球的专家支持网络,在所有地区可持续提供世界一流的全球性支持,有效助力制药用户开发相应的治疗药物。 /p p style=" text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target=" _blank" span style=" color: rgb(192, 0, 0) " i span style=" text-decoration: underline " strong 点击图片进入专题,给你“好看” /strong /span /i /span /a /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/zt/swzybz" target=" _blank" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/c1a19013-a9fc-4e5d-9fea-ed1433e82a86.jpg" title=" 企业微信截图_20190426142814.png" alt=" 企业微信截图_20190426142814.png" width=" 551" height=" 228" style=" width: 551px height: 228px " / /a /p p style=" text-align: center " span style=" text-decoration: underline " & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp /span br/ /p p style=" text-align: center " strong span style=" text-decoration: none " 关注 span style=" text-decoration: none color: rgb(0, 112, 192) " 3i生仪社 /span ,找到更多生命科学干货 /span /strong /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/68e891ee-311c-4b84-bb77-984298436020.jpg" title=" 小icon.jpg" alt=" 小icon.jpg" / /p
  • 人类巨细胞病毒疫苗全球临床实验新进展|全自动毛细管Western技术再次助力Merck公司疫苗研究
    继全自动毛细管Western Blot助力Merck公司全球首个预防埃博拉病毒病的商品化疫苗ERVEBO上市后,近日,Merck公司疫苗分析研究进展与疫苗工艺开发部门再发文章:利用还原全自动毛细管Western Blot技术,定量人巨细胞病毒疫苗多种抗原水平,同时利用非还原的方法表征抗原蛋白额外二硫键和MW信息(多聚体抗原水平)。同时Merck公司还利用此方法确定了一些HCMV病毒中以前未知的生化特征:非还原条件中,病毒表面蛋白的三重gH峰,这可能会为HCMV病毒抗原的特异性测试提供一种新的策略。1人类巨细胞病毒人类巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus, HCMV),属于β疱疹病毒亚科。根据地域的不同,世界上50%到90%的成年人口曾感染过HCMV。尽管感染HCMV很少会在健康成人中引起症状,但它却是引起移植受者器官衰竭的主要原因。同时感染HCMV会对人类整个生命周期的健康造成威胁:对先天性感染的儿童造成神经系统异常;对免疫抑制患者(移植病患或者免疫缺陷疾病AIDS患者)出现较高的发病率和死亡率;同时还会增加老年人死亡率、心血管疾病和癌症的风险。2人类巨细胞病毒结构HCMV具有一个二十面体衣壳,其中包含双链DNA,编码165种蛋白质。衣壳被蛋白质包膜包围,外部被一个脂质包膜包围,其糖蛋白通过与细胞膜融合进入宿主细胞。融合后,DNA和被膜蛋白被释放到细胞中。该病毒包含不同类型的糖蛋白复合物(glycoprotein complexes, gC),用于感染宿主细胞:gC-I是由糖蛋白B(glycoprotein B, gB)的同源三聚体组成的复合物,糖蛋白B(gB)是一种泛疱疹病毒科保守的糖蛋白,介导膜融合过程:即介导病毒进入细胞期间从融合前的构象重新排列为融合后的构象;gC-II是含量最丰富的gC,由糖蛋白M(glycoprotein M, gM)和N(glycoprotein N, gN)组成,有助于与细胞膜的初始结合,并在病毒复制中起作用;gC-III,现在称为三聚体复合物(Trimer complex, TC),是一种异源三聚体复合物,其中糖蛋白H(glycoprotein H, gH)、L(glycoprotein L, gL)和O(glycoprotein O, gO)连接在一起,gH和gL参与激活gB的融合活性,gO作为共同受体。还有一种五聚体复合物(Pentameric complex, PC)由gH/gL与UL128、UL130和UL131蛋白(pUL128–pUL131)组成,主要感染上皮细胞和内皮细胞,有研究发现这种五聚体复合物(PC)对于引发保护性体液免疫反应很重要,在自然感染中占85%的中和活性。3全球HCMV疫苗临床实验进展4全自动毛细管Western Blot定量HCMV减毒活疫苗抗原全自动毛细管Western Blot:基于毛细管电泳的免疫学检测方法,只需3μL样本,一次性加好样本和反应试剂(blocking液、一抗、二抗、显色液、洗液),开始上机实验,仪器自动上胶、加样、跑胶、紫外交联蛋白、一抗二抗孵育、显色定量,CCD相机直接获取化学信号,不出3小时直接获得24个样本定量结果。此过程除手动加样后,无需任何手动操作,数据稳定重现性佳(Merck结果CV10%:见文章:全自动毛细管Western Blot助力全球首款埃博拉疫苗ERVEBO上市)。Merck公司正在进行的减毒活病毒HCMV疫苗(V160)的II期临床试验中,在减毒活AD169病毒株表面恢复了五聚体复合物。因此重建的HCMV病毒含有多种表面糖蛋白:五聚体gH/gL/gUL128-131复合物、三聚体gH/gL/gO复合物、gB糖蛋白和gM/gN异二聚体复合物。因此Merck公司利用全自动毛细管Western Blot定量的方法,监测在疫苗开发过程中的多种病毒表面抗原。还原毛细管Western Blot法鉴定9种抗原蛋白在无(-)和有(+)PNG-F酶处理的情况下,还原毛细管Western Blot法鉴定HCMV中的9种糖蛋白:gH、gL、UL128、UL130、UL131、gO、gB、gM和gN。原始峰形图(PNG-F酶处理前为蓝色峰,PNG-F酶处理后绿色峰)显示,PNG-F处理后的MW shift 取决于每个糖蛋白上有多少N-连接的聚糖位点。N-连接的聚糖位点越多,偏移越大。例如有18个N-连接的聚糖位点的gO(偏移很大)和不含N-聚糖位点UL128(两峰趋近一致)。非还原毛细管Western Blot法鉴定不同聚体复合物毛细管Western Blot可以提供特定病毒抗原的额外二硫键和MW信息。例如用非还原毛细管Western Blot检测发现,用抗gH抗体观察到~90kDa、~120kDa和~205kDa的三重峰。当使用抗gL抗体时,仅观察到120kDa和205kDa处的两个峰。当用抗UL128和抗gO抗体探测时,分别检测到120 kDa和205kDa处的峰。这些数据明确表明,120kDa处的峰分配是由于gH-gL-UL128复合物,它是五聚体复合物(gH-gL-UL128-UL130-UL131)的一部分,其中UL130和UL131是非共价结合的。在205kDa处观察到的峰被确认为gH-gL-gO三聚体复合物。在原始峰形图上观察到的三联体的gH峰,并不是HCMV疫苗病毒(V160)独有的,因为两个临床分离株的HCMV也显示了三联体的gH峰。因为AD169病毒株没有五聚体复合物(gH-gL-UL128-UL130-UL131),所以不显示~120kDa的峰。同时结果也表明V160中gH单体(~90 kDa)和gH-gL-gO三聚体复合物(~205 kDa)的相对ratio与亲本病毒AD169相当。用抗gM和gN抗体检测到,在~138kDa 和236kDa处具有相同的两个峰:138kDa峰可能是实际的gM/gN复合物,而236kDa为二聚体(gM/gN)2。毛细管Western Blot监测疫苗发酵工艺利用特异性的三重gH峰面积可用于评估发酵过程中对五聚gH复合物的潜在影响。对九个开发批次的V160中,对五聚体gH复合物百分比进行了比较。第1至第4批是在工艺优化之前生产的,与工艺优化后生产的第5至第9批相比,其gH-gL-UL128(五聚体复合物)含量较低。同时毛细管Western Blot结果表明,五聚体的产量在感染后11-13天开始趋于稳定。此外与生物反应器3和4相比,生物反应器1和2提供了更好的五聚体表达。这一观察结果与微流式细胞仪测量的病毒颗粒浓度相吻合。毛细管Western Blot绝对定量五聚体抗原毛细管Western Blot绝对定量法的线性、R2、精密度、准确度如图所示,揭示了毛细管Western Blot绝对定量法可以用于定量HCMV的糖蛋白。用重组五聚体蛋白作为标准品,利用毛细管Western Blot绝对定量法绘制标准曲线(图A-C),用此方法定量疫苗样本中的五聚体抗原(图D)。与Elisa法定量疫苗样本中的五聚体抗原相关性R2=0.9941.结论:利用毛细管Western Blot方法检测抗原蛋白,不需要纯化样品,因此该方法适用于分析多种样品类型中的目标蛋白,例如来自感染细胞培养物的上清液、纯化中间体、浓缩液和最终疫苗产品。同时此方法不只可以定量抗原蛋白,还可以利用非还原的方法表征抗原蛋白额外二硫键和MW信息。在此方法中还确定了一些HCMV病毒中以前未知的生化特征:非还原条件中,病毒表面蛋白的三重gH峰,这可能会为HCMV病毒抗原的特异性测试提供一种新的策略。参考文献:1. Characterization of gH/gL/pUL128-131 pentameric complex, gH/gL/gO trimeric complex, gB and gM/gN glycoproteins in a human cytomegalovirus using automated capillary western blots, Vaccine. 2021 Jul 3.2. Cytomegalovirus as an immunomodulator across the lifespan, Curr Opin Virol. 2020 Oct.3. Development of a Vaccine against Human Cytomegalovirus: Advances, Barriers, and Implications for the Clinical Practice, Vaccines (Basel). 2021 May 25.
  • 药典委:0542 毛细管电泳法标准草案的公示
    2022年底,国家药典委员会发布《中国药典》(2025年版)编制大纲的通知。《通知》显示,到2025年,全面完成新版《中国药典》编制工作。符合中医药特点的中药标准进一步完善,化学药品、生物制品、药用辅料和药包材标准达到或基本达到国际先进水平,药品质量控制和安全保障水平明显提升。近日,国家药典委员会公布了一批方法通则的修订草案,涉0512高效液相色谱法标准草案、毛细管电泳法标准草案、0931溶出度与释放度测定法标准草案、分析仪器确证指导原则标准草案、光学分析法标准草案、扫描电子显微镜法标准草案等。  其中,0542 毛细管电泳法标准草案,是参考 ICH Q4B 附录 11 毛细管电泳法,对《中国药典》 0542 毛细管电泳法进行修订。  此次修订调整了部分内容和实验参数,主要修订内容如下: 1. 原理部分进行详述,增加了毛细管电泳法的理论描述和计算公式; 2. 仪器的一般要求中增订了需要给出具体规定的毛细管电泳法条件,以及试验过程中需要注意的相关事项; 3. 分离模式部分中对毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳和胶束电动色谱等四种方法进行详 2023 年 9 月 2 / 2 述,包括原理、条件优化、仪器参数等内容; 4. 增加定量内容,对定量的相关要求和结果计算进行描述; 5. 对个别文字表述进行规范。关于0542 毛细管电泳法标准草案的公示编号:Fg2023-0162号  我委拟修订0542毛细管电泳法。为确保标准的科学性、合理性和适用性,现将拟修订的0542毛细管电泳法公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期自发布之日起三个月。请认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见,并附相关说明、实验数据和联系方式。相关单位来函需加盖公章,个人来函需本人签名,同时将电子版上传至【公示反馈】附件中。   公示期满未回复意见即视为对公示标准草案无异议。0542毛细管电泳法修订说明.pdf0542毛细管电泳法公示稿(第一次).pdf
  • 阎超教授所著《毛细管电色谱》发表于《国际分析化学百科全书》!
    近期,由通微董事长阎超教授撰写的《Capillary Electrochromatography》(《毛细管电色谱》)一章发表于《Encyclopedia of Analytical Chemistry》(《国际分析化学百科全书》,DOI: 10.1002/9780470027318)。 该文章主要介绍了加压毛细管电色谱技术的理论知识、仪器特点、色谱柱技术和应用发展。此外,文章还介绍了基于毛细管电色谱(CEC)和加压毛细管电色谱(pCEC)的梯度洗脱和二维分离技术。获取此文可至Wiley Online Library(DOI: 10.1002/9780470027318 .a9434),或与我司联系。
  • 毛细管电泳-质谱技术在手性化合物分离分析中的研究进展
    手性是自然界和生命体的基本属性之一,诸如生物结构中的核酸、蛋白质及糖类等都具有手性。目前绝大多数药物都是以手性形式存在,这些药物在生命体内的药理活性、代谢作用和速率及毒性等方面均存在显著差异,比如一种对映体有活性,而另一种无显著的药理活性,甚至有毒副作用或可发生拮抗作用。除了旋光性上的差异,手性药物具有相同的物理和化学性质,故对其分离分析一直都是药物分析、分离纯化领域研究的重点和难点。新药的研发和应用亦需要研究人员继续开发新的高效手性分析方法,以实现高选择性和高灵敏度的手性化合物定量和定性分析。高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)具有较高的灵敏度和重现性,是目前手性药物分离分析的主要方法。然而,HPLC-MS需要昂贵的手性柱和与MS兼容的色谱柱流动相,而且手性色谱填料的柱效和拆分能力仍有待提高。毛细管电泳(CE)技术凭借其高效、低样品消耗、分析快速、分离模式多样化等诸多优势,已经发展成为手性分离研究领域极具吸引力和应用前景的分析方法之一。紫外可见检测器(UV-Vis)是CE最常用的检测器,但是毛细管的光程长度较短,导致灵敏度较低,因此难以满足生物样品中痕量手性化合物的分析要求。激光诱导荧光检测器(LIF)可以提高检测的灵敏度,但是只适用于本身带有荧光或被荧光标记的物质。而毛细管电泳-质谱联用技术结合了CE的分离效率高、分析速度快、样品消耗低以及MS的高灵敏度和强结构解析能力,近些年来在蛋白质组学和代谢组学等领域发挥了重要作用。CE杰出的手性拆分能力与MS优势的结合,亦使CE-MS成为实现手性化合物高效分离分析的完美组合,尤其是在复杂生物基质中手性化合物分析的灵敏度和分辨率方面,为药物、医学以及食品科学等领域重要手性分子分析提供了新视角。手性CE-MS联用技术,在一次分析中能同时得到样品的迁移时间、相对分子质量和离子碎片等定性信息,解决了实际样品中未知手性化合物(包括无紫外吸收基团或荧光基团的手性化合物)的识别问题,在减少生物样品基质效应的同时,可以对多组手性对映体实现高通量分析。在过去的十几年里,基于不同CE-MS分离模式的高性能手性分析体系层出不穷,并成功应用于医药、生物、食品和环境科学等领域的手性化合物分析中。这篇综述着重评述了电动色谱-质谱(EKC-MS)、胶束电动色谱(MEKC-MS)和毛细管电色谱-质谱(CEC-MS)手性分离模式从2011年到2021年的最新发展和应用。综述介绍了CE-MS各种手性分析模式下的分离原理、手性选择剂以及在医药等领域中重要手性化合物的分析应用,并讨论了不同手性分析模式的局限性。最后总结了CE-MS联用模式在手性化合物分离分析中的应用前景。相比于广泛应用的HPLC-MS, CE-MS凭借其高效率、低消耗、高选择性、分离模式多样化等诸多优势,已发展成为手性分析领域应用前景广阔的分析方法之一,并且已成为HPLC-MS等其他经典手性分离方法的一个强有力补充技术。目前CE-MS手性分析的研究挑战之一是实现快速和超灵敏的手性分析。采用基于短毛细管的快速毛细管电泳(HPCE)结合在线样品富集有望解决这个难题。此外,CE-MS的不同手性分析模式大多数采用的是三管设计的鞘状流动界面,灵敏度较低。新进研发的新型界面技术,如通过微瓶辅助的界面流动、无套多孔尖端的设计以及CE-MS离子源的引入等,在提高手性化合物分析灵敏度方面显示出巨大应用前景。另一方面,开发同时对多种手性药物进行对映体分离、检测和定量的CE-MS手性分析方法,也是目前研究的重点和难点。这些研究将对开发制药工业中的通用方法和高通量分析生物样品中的手性药物及其手性代谢物具有重要意义,对手性药物和代谢物的药物-药物相互作用和毒性研究也具有指导价值。EKC-MS和MEKC-MS应用中的手性选择剂具有多样性,使其在新药开发和药物质量控制、药代动力学以及药效学研究中具有巨大的潜力。进一步开发MS友好、绿色和高选择性的手性选择将拓宽待分离手性化合物的应用范围。目前,CEC-MS手性分析研究中,研究者更多致力于开发用于整体柱或填充柱的新型毛细管手性固定相。使用功能化纳米颗粒增加CEC手性柱表面积以及CE-MS的微型化微芯片设备的研发,目前仍是尚未充分探索的领域,尤其在实际应用方面与相对更加通用的手性分离模式相比仍有较大差距。文章信息:色谱, 2022, 40(6): 509-519DOI: 10.3724/SP.J.1123.2021.11006迟忠美1, 杨丽2*1. 渤海大学化学与材料工程学院, 辽宁 锦州 1210132. 东北师范大学化学学院, 吉林 长春 130024
  • “高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用”学习班通知
    北京市疾病预防控制中心 关于继续举办&ldquo 高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用&rdquo 学习班的通知(第一轮) 各有关单位: 高效毛细管电泳技术因所需样品量少、检测成本低、分离效率高、低碳环保、几乎可以分离(除挥发性和难溶物之外的)各种化合物及新方法开发的周期较短等优点,正逐渐成为卫生检验中不可缺少的分析技术。但由于该技术对操作者的经验要求较高(与液相色谱技术相比较),毛细管电泳仪的性能在许多单位未得到充分发挥。 我中心在保健品、化妆品、消毒产品、盲样考核、标物定值、食物中毒样品及乳品中蛋白分析等方面积累了较丰富的毛细管电泳分析经验。为搭建毛细管电泳技术交流平台,充分发挥各单位毛细管电泳仪的性能,我中心已于2011年5月在北京成功举办了&ldquo 高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用&rdquo 第一期学习班,从毛细管电泳的过去、现在及未来;毛细管电泳理论及应用技巧、毛细管电泳技术在蛋白质和核酸分析中的应用;毛细管电泳技术在药品分析中的应用;CE-PCR-SSCP快速鉴定肺炎支原体耐药性;仪器结构、维护与保养、工作站的高级应用及如何获得准确可靠的毛细管电泳分析结果的授课内容中,学员普遍认为学习班实践性强,对日常和科研工作有很大指导作用。应学员要求,我中心拟定于2012年10月中旬在四川成都举办国家级继续医学教育项目&ldquo 高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用&rdquo 第二期学习班【项目编号:2012-12-06-022 (国)】,参加培训并且考试合格者将获得Ⅰ类学分6分。 一、培训内容: 本次学习班继续邀请该领域的专家授课,具体内容根据学员的反馈有所调整。 二、培训对象: 学习班的招生对象是各省、市、区、县从事理化卫生检验专业或相关专业技术人员。 三、培训费用:参加学习班专业技术人员需交纳会务费和学习资料费1200元/位,普通在校学生800元/位(不含在职攻读学位人员),食宿费自理。 四、具体培训时间、地点及其它相关事宜见第二轮通知。 五、本次培训班由北京市疾控中心主办、成都疾控中心承办。为便于统计人数,请将回执同时发至北京及成都联系人邮箱。 六、联系方式: 地址及邮编:北京市东城区和平里中街16号,100013 电话及传真: 64407087或64407088,64407210(传真) E-mail: 北京:dingxiaojing@gmail.com;llp9312@yahoo.com.cn 成都:zhanglichun001@126.com 有意参加者请于2012年8月30日前将回执寄送、Email或传真至北京市疾病预防控制中心或成都市疾病预防控制中心联系人邮箱。 二&Omicron 一二年五月三十日 二&Omicron 一二年六月六日 北京市疾病预防控制中心 成都市疾病预防控制中心
  • 高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用学习班(第一轮通知)
    各有关单位: 高效毛细管电泳技术因所需样品量少、检测成本低、分离效率高、低碳环保、几乎可以分离(除挥发性和难溶物之外的)各种化合物及新方法开发的周期较短等优点,正逐渐成为卫生检验中不可缺少的分析技术。但由于该技术对操作者的经验要求较高(与液相色谱技术相比较),毛细管电泳仪的性能在许多单位未得到充分发挥。 我中心在保健品、化妆品、消毒产品、盲样考核、标物定值、食物中毒样品及乳品中蛋白分析等方面积累了较丰富的毛细管电泳分析经验。为搭建毛细管电泳技术交流平台,使该技术在各个应用领域得到更好运用,充分发挥各单位毛细管电泳仪的性能,我们特邀请国内从事多年毛细管电泳技术研究的专家,讲授该技术的基本理论、前沿技术及应用进展,我中心拟定于2011年5月11-13日在北京举办国家级继续医学教育项目&ldquo 高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用&rdquo 学习班【项目编号:2011-12-06-006 (国)】,参加培训并且考试合格者将获得Ⅰ类学分6分。具体事宜如下: 一、培训内容: 本次学习班邀请该领域的专家授课,具体内容如下: 内 容 主 讲 人 毛细管电泳的过去、现在及未来 中科院化学所 陈义 研究员 毛细管电泳的手性分析及药物分析 中科院上海有机化学所 康经武 研究员 核酸及蛋白的毛细管电泳分析 军事医学科学研究院 郭磊 副研究员 如何获得准确可靠的毛细管电泳分析结果 北京市疾病预防控制中心 丁晓静 博士 毛细管电泳技术在药品分析中应用实例 贝克曼库尔特有限公司 陈泓序 博士 仪器结构、维护保养、工作站的高级应用 贝克曼库尔特有限公司 张鹏 高工 二、培训对象: 学习班的招生对象是各省、市、区、县从事理化卫生检验专业或相关专业技术人员。 三、培训费用:参加学习班人员需交纳会务费和学习资料费880元/位,食宿费自理。 四、具体培训时间、地点及其它相关事宜见第二轮通知。 五、联系方式: 地址及邮编:北京市东城区和平里中街16号,100013 电话及传真: 64407087或64407088,64407210(传真) E-mail: dingxiaojing@gmail.com;llp9312@yahoo.com.cn 有意参加者请于2011年4月30日前Email或传真至北京市疾病预防控制中心。 北京市疾病预防控制中心 2011年2月23日
  • 中科院生态环境研究中心在毛细管电泳-单分子成像分析研究中取得重要进展
    单个DNA分子不连续运动成像揭示场强变化的等速电泳动力学   中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室汪海林课题组在高灵敏分析的基础研究方面取得重要进展。他们利用先进的单分子成像技术研究并揭示了独特的等速电泳聚焦和分离的机理,其有关“DNA单分子不连续运动成像揭示场强变化的等速电泳动力学”的研究发表在国际著名化学期刊《美国化学会志》(J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 4644 - 4647)上。   带电组分在均一和非均一电场中的运动是电泳应用于化学、物理学、生命科学以及新兴的纳米科技领域的基础。目前,人们对带电组分在均一电场中的运动已经有了充分的认识,而对其在非均一电场中运动的了解却有限。事实上,通过巧妙设计非均一电场,可实现其它技术难以分离的超大DNA分子(80 kb) 的分离和多种分析物的高倍浓缩(可达百万倍)。因而,认识非均一电场中带电组分的运动机制对发展高灵敏的生物分子分析技术和方法具有特殊意义。尽管非均一电场的使用已有百年历史,但对于其形成机理的认识由于存在技术瓶颈而踯躅不前。   为了解决这一学科难题,汪海林课题组通过改造全内反射荧光显微成像仪器,首先实现了毛细管电泳-单分子荧光成像分析。在此基础上,以毛细管等速电泳(cITP)作为非均一电场模型,对流经毛细管检测窗口处单个DNA分子实时成像。由于每一幅像记录了单个DNA分子在50 毫秒内的运动轨迹,因此可以计算出每一时间点DNA单分子的运动速度。而DNA运动速度的大小直接与电场强度相关,从而可获得毛细管中电场强度的动态分布信息。通过研究电场强度的实时变化,揭示了电渗流存在下等速电泳的动力学,并首次提出了三区带模型,突破了传统二区带模型的局限。利用这一研究成果,他们发展一种新颖的DNA单分子聚焦方法,实现对极低浓度下随机分布的、难以检测的单分子成像,可检测出4´ 10-17mol/L DNA分子。   在这项研究工作中,汪海林课题组创造性地利用单分子成像技术测定电场强度的分布,提供了一种全新的非均一电场研究方法,这对发展基于电泳分离的高灵敏生物分析技术和方法具有重要意义。   该工作得到了国家杰出青年基金、国家973计划、重点实验室等的支持。
  • 安捷伦公司推出新一代毛细管电泳系统
    安捷伦科技公司推出灵敏度提高10倍的新一代毛细管电泳系统   2009年4月28日,北京—安捷伦科技公司(NYSE:A)今日推出了新一代Agilent 7100毛细管电泳(CE)系统,其灵敏度比其他商品化的毛细管电泳仪提高10倍以上。   “我们认为电泳业务是我们的核心技术之一,并且看到很多应用领域正在对毛细管电泳技术产生浓厚的兴趣,如新型生物药物的质量保证/质量控制、环境分析、食品安全和生命科学等领域。”安捷伦公司电泳业务全球总经理Nitin Sood 说,“无论是单独使用,还是作为CE/MS的分离部分,或是作为液相色谱的互补技术,安捷伦的新型7100毛细管电泳系统都提供了类似HPLC的出色高灵敏度,可以应对众多具有挑战性的分析任务。”   毛细管电泳引人注意的另一个原因是因为该技术使用很少量的溶剂。新的7100毛细管电泳系统与其前一代产品相比,尺寸减小了25%,重量减小了30%,并且耗电量更低。   新型检测器采用了一种扩展光程的专利毛细管光路设计和另一种高灵敏度池设计,从而带来了出色的灵敏度,使Agilent 7100的灵敏度是其它毛细管电泳仪的10-20倍。   Agilent 7100提供了业界最广泛的检测器选择,具有高度的灵活性和灵敏度,并且这种新仪器能够与之前的Agilent毛细管电泳平台反向兼容,使现有的方法可以继续使用。该仪器能开展毛细管电泳分离的各项技术,包括对非常相似的相关化合物进行快速分离的毛细管电色谱技术。其标配的缓冲液补充系统能确保高通量自动运行,并且已经过改进,减少了补给缓冲液的用量。   Agilent 7100 毛细管电泳系统通过设计提高了分离效率、可靠性和易用性。新型耐用的内部加压系统和改进的毛细管冷却系统能耐受更高的电流和/或更大孔径的毛细管,既可以提高分析通量,也使应用范围得到了扩展。另外,该电泳系统应用了新型化学工作站软件,其易于使用的图形用户界面以及改进的方法设置功能,极大地缩短了启用和培训时间。   该电泳系统的模块化结构,便于快速接近电极、预穿孔器、电子元器件和管路等部件,有利于进行日常维护和保养。毛细管卡套具有自动对准功能,可以在几秒钟内得到快速毛细管更换,并能与所有商用毛细管兼容。   即插即用型毛细管电泳/质谱联用仪(CE/MS)   Agilent 7100毛细管电泳仪提供与Agilent质谱仪(MS)的即插即用式连接,将毛细管电泳的分析时间短,分离效能高的特点与质谱技术的分子量和结构信息相结合。适用的质谱仪包括单四极杆、飞行时间(TOF)、离子阱、三重四极杆(QQQ)、ICP和四极杆飞行时间质谱系统(Q-TOF)。安捷伦是唯一一家能提供完全集成化CE/MS解决方案的公司,所有系统组件均来自一个供应商。   安捷伦毛细管电泳产品经理Tobias Preckel表示,“Agilent毛细管电泳系统不仅具有一流的性能,而且我们还大力继承以往的可靠性特点, 其口碑在过去的16年里已为众人所知。”      其他信息,请访问www.agilent.com/chem/ce.   关于安捷伦科技公司   安捷伦科技公司(NYSE:A)是全球领先的测量公司,也是通信、电子、生命科学和化学分析的技术领导者。公司的19,000名员工为遍及世界110多个国家的客户提供服务。安捷伦2008财年的净收入为58亿美元。 有关安捷伦的信息,请访问www.agilent.com。
  • 程琳教授团队:毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪及其应用研究
    毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪及其应用研究邵金发,侯禹存,程琳*(北京师范大学核科学与技术学院,射线束技术教育部重点实验室 100875)摘要随着科技的发展,人们对物质的分析慢慢深入到微区领域。而微束能量色散X射线荧光作为一种高灵敏、高精度的元素分析技术,已然成为物质微区分析的有利工具。本实验室将毛细管X射线聚焦技术与能量色散X射线荧光分析技术相结合,自行设计研发了一种新型毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪。该谱仪在利用毛细管X光透镜的特点将X射线源发出的X射线束会聚到微米量级的同时,基于激光位移传感器开发了自动调整样品测量点到透镜出口端距离的闭环控制系统,有效的减少由于样品表面不平整或弧度带来的测量误差,弥补了现有微束X射线荧光谱仪在此方面的不足。因此,该微束X射线荧光谱仪为表面不平整文物样品的无损微区元素分析提供了解决方案。1. 引言微束能量色散X射线荧光光谱(Micro-energy dispersive X-ray fluorescence, µ-EDXRF)分析技术因其快速、准确、无损分析等优点,被广泛应用在考古、地质、环境、材料、生物等科学领域[1-8]。目前,基于实验室光源以获得微束入射X射线的方法主要有准直器限束和X射线光学器件聚焦两种。通过准直器限束获得微束入射X射线是最早在微束X射线荧光谱仪中使用的方法,具体为采用准直狭缝或小孔作为光阑放置在入射光路上,用以减小入射X射线的发散度。但与此同时,入射光束的强度会因为物理阻挡而降低,从而导致获得的特征X射线信息减弱。而多毛细管X光透镜利用X射线全反射原理,可将在空心毛细管内表面上的多次全反射的X射线会聚于焦点。因此可以实现以较大的角度收集从X射线源产生的X射线,且会聚后X射线的束斑大小可低至几十微米。同时,毛细管X光透镜对Cu-Kα的能量有高达2-3个数量级的放大倍数[9],且具有低的发散度。同时,可以将基于毛细管聚焦的微束能量色散X射线荧光分析技术与大面积扫描相结合,实现微米级表面结构和元素分布的分析测定。目前国内外存在部分商业化的微束X射线荧光谱仪,其中美国EDAX公司生产的Orbis系列微束X射线荧光谱仪,适用于部分地质和考古样品测试的[10];德国Bruker公司生产的M4 Tornado可移动式微束X射线荧光谱仪,适用于实验室或博物馆内各类样品的研究[11]。但由于部分文物样品表面并不平整或存在较大的弧度,若不对相对位置进行修正,这将使得样品测量点与毛细管X光透镜出口端的距离在测量过程中发生改变,从而影响测量结果的准确性和元素区域扫描的分辨率[12]。为解决上述问题,本实验室自行设计和开发一种新型的微束X射线荧光谱仪以及相应的计算机控制程序,并且开展了相关分析方法学的研究。2. 仪器组成本实验室设计的毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪结构示意图如图1所示,其主要由微焦斑X射线管(Mo靶,焦斑大小50μm×50μm,德国Röntgen公司)、毛细管X光透镜(Mo-Kα能量处束斑大小为31µm)、SDD X射线探测器(5.9keV时能量分辨率为145eV,铍窗有效面积25mm2)和PX5多道分析器、精度为20µm的激光位移传感器、激光笔、具有20倍放大功能的1400万像素固定焦距CCD摄像头、高精度XYZ三维样品台,以及在LabVIEW语言环境下开发的仪器控制程序等部分组成。仪器控制软件主要包括探测系统控制界面、X射线源高压控制界面、机械运动系统控制界面、CCD图像采集控制界面和氦气控制界面构成。其中主界面包含了各个控制功能系统的一些主要控制命令及输出,如图2所示。谱图显示区域在探测过程中实时显示X射线探测器探测到的谱图。此外,该仪器使用的高精度自动化三维运动平台可以满足微区的二维μ-EDXRFF分析的需求,以便实现对感兴趣区域内元素分布的分析。图1 微束X射线荧光谱仪的结构示意图图2 微束X射线荧光谱仪控制程序主界面3. 实验分析3.1 清代红绿彩瓷的分析为了评估本仪器对样品微区进行元素二维扫描分析的能力,选取一片清代红绿彩瓷的残片作为研究对象(图3)。选取图3中A(白釉)、B(红彩)、C(绿彩)进行微区的元素组成分析。实验测量时,X射线管电压40 kV,电流0.6 mA,探测活时间300 s。样品A(白釉)、B(红彩)、C(绿彩)三点的微束X射线荧光分析的能谱如图4所示,彩料中各元素化学成分采用基本参数法进行定量分析,所得的数据如表1所示。图3 清代红绿彩瓷残片与感兴趣区域图片图4 红绿彩中白釉、红彩和绿彩的μ-EDXRF光谱表1 白釉、红彩和绿彩的化学成分(质量分数,%)此外,选择如图3中2mm×2mm的感兴趣区域,使用微束X射线荧光谱仪进行µ-EDXRF二维扫描分析。进行µ-EDXRF二维扫描分析时,X射线管电压为40 kV,电流为0.6 mA,扫描步距为30 µm,每个点探测时间为1.5 s,扫描数据经软件处理得到如图5所示的元素分布图。图5 扫描区域内Pb、K、Fe、Ca、Cu、Al、Mn、Si元素的分布3.2 吉州窑古陶瓷的分析为评估本仪器对表面存在大弧度的样品进行微区元素二维扫描分析的能力,选取一片吉州窑古陶瓷的残片作为研究对象(图6)。实验开始前调节平移台使样品表面感兴趣区域清晰呈现在CCD图像中,并通过鼠标在控制界面的CCD视野中选择具体的目标扫描区域。选取图6中大小为10mm×10mm的区域进行元素二维扫描分析。µ-EDXRF二维扫描分析的测量条件与上文相同。同时,为验证本仪器“源-样”距离自动控制系统对测量结果的影响,分别在开启和关闭“源-样”距离自动控制系统的条件下进行元素二维扫描分析,扫描数据经软件处理得到如图7所示的元素分布图。图6 吉州窑古陶瓷样品与扫描区域图片图7 扫描区域内K、Ca、Zn、Fe元素分布图。a)关闭“源-样”距离自动控制系统,b)开启“源-样”距离自动控制系统通过图7与图6的比较可知,在关闭“源-样”距离自动控制系统的情况下进行µ-EDXRF二维扫描时,由于样品表面的弯曲,样品测量点与毛细管X光透镜出口端之间的距离发生变化,使得X射线光束的焦点无法与样品测量点重合。这导致测得元素分布图空间分辨率变差,同时生成的图像发生了扭曲。相反,当打开“源-样”距离自动控制系统进行测量时,由于该系统可实时调整平移台使X射线束准确照射在样品测量点上,显著降低由于样品表面弯曲带来的偏差。极大的改善了测量结果,表明该仪器在不平整样品的µ-EDXRF二维扫描中具有重要的应用价值。4. 结论本实验室将毛细管X射线聚焦技术与能量色散X射线荧光分析技术相结合,设计和研发了一种新型毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪。该微束X射线荧光谱仪在具备无损分析微小样品和样品微区的元素分布能力的同时,其基于激光位移传感器开发的“源-样”距离自动控制系统可实时调整样品测量点到透镜出口端距离,显著降低了由样品表面不平整或弧度带来的测量偏差,弥补了现有微束X射线荧光谱仪在此方面的不足。因此,其在材料科学、地球科学和文物保护等领域有着广泛的应用前景。参考文献[1] 戴珏,吴奕阳,张元璋,等.能量色散X射线荧光光谱法在检测仿真饰品中有害元素的应用[J].上海计量测试,2018,45(04):34-35.[2] 陈吉文,倪子月,程大伟,等.基于EDXRF的土壤中痕量镉的快速检测方法研究[J].光谱学与光谱分析,2018,38(08):2600-2605.[3] 陈曦,周明慧,伍燕湘,等.能量色散X射线荧光光谱仪在稻米中镉含量测定的应用研究[J].食品安全质量检测学报,2018,9(10):2331-2338.[4] 蒯丽君. 化学前处理—能量色散X射线荧光光谱法应用于矿石及水体现场分析[D].中国地质科学院,2013.[5] Rathod T, Tiwari M, Maity S , et al. Multi-element detection in sea water using preconcentration procedure and EDXRF technique [J]. Applied Radiation & Isotopes, 2018, 135.[6] Figueiredo E, M F, Araújo, Silva R J C, et al. Characterisation of Late Bronze Age large size shield nails by EDXRF, micro-EDXRF and X-ray digital radiography [J]. Applied Radiation & Isotopes Including Data Instrumentation & Methods for Use in Agriculture Industry & Medicine, 2011, 69(9):1205-1211.[7] Natarajan V, Porwal N K, Babu Y, et al. Direct determination of metallic impurities in graphite by EDXRF. [J]. Appl Radiat Isot, 2010, 68(6):1128-1131.[8] Li L, Huang Y, Sun H Y, et al. Study on the property of the production for Fengdongyan kiln in Early Ming dynasty by INAA and EDXRF [J]. Nuclear Instruments and Methods in Physics Research Section B: Beam Interactions with Materials and Atoms, 2016, 381:52-57.[9] Bonfigli, Francesca, Hampai, et al. Characterization of X-ray polycapillary optics by LiF crystal radiation detectors through confocal fluorescence microscopy[J]. Optical Materials, 2016, 58: 398-405.[10] Moradllo M K, Sudbrink B, Hu Q, et al. Using micro X-ray fluorescence to image chloride profiles in concrete[J]. Cement & Concrete Research, 2016:S0008884615300636.[11] Ramos I. Pataco I M, Mourinho M P, et al. Elemental mapping of biofortified wheat grains using micro X-ray fluorescence[J]. Spectrochimica Acta Part B: Atomic Spectroscopy, 2016.[12] Ricciardi P,Legrand S,Bertolotti G, et al. Macro X-ray fluorescence (MA-XRF) scanning of illuminated manuscript fragments: potentialities and challenges[J]. Microchemical Journal, 2016, 124:785-791.*通讯作者程琳,工学博士,美国加州大学尔湾分校访问学者。现任职于北京师范大学核科学与技术学院,教授,博导。长期从事毛细管聚焦的微束X射线分析技术的研究及相关设备的研发;目前已经成功研发出国内首台毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪和毛细管聚焦的X射线衍射仪等设备并开展相关的分析技术及应用研究;作为项目负责人已经承担多项国家自然科学基金、北京市自然科学基金和北京市科技计划项目等,国家自然科学基金评审专家、北京市高新技术企业评审专家和X-ray spectrometry等国际刊物审稿人。e-mail: chenglin@bnu.edu.cn
  • “高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用新进展”学习班通知
    敬爱的SCIEX毛细管电泳用户, 北京市疾病预防控制中心和北京市卫生防疫中心拟定于2016年10月下旬至11月初在北京市疾病预防控制中心联合举办国家级继续医学教育项目“高效毛细管电泳技术在卫生检验中应用新进展”学习班[项目编号:2016-12-06-003(国)],该项目由SCIEX毛细管电泳部门协助举办。学习班的招生对象是个省,市,区,县从事理化卫生检验专业或相关专业技术人员,参加培训并且考试合格者将获得I类学分8分。 北京市疾病预防控制中心在保健食品,化妆品和消毒产品;盲样考核,标物定值,食物中毒样品及乳制品中蛋白分析等方面积累了丰富的经验,为搭建毛细管电泳分析技术交流平台,使其在各个应用领域得到更好的运用,充分发挥仪器性能,特邀请国内多年从事毛细管电泳研究的专家,讲授该技术的基本理论,前沿技术及应用。 欢迎各位毛细管电泳用户及相关专业技术人员踊跃参加。 具体讲座专家信息及培训安排请参见培训通知。联系人:tingting.Li@sciex.com
  • 探索毛细管电泳技术新进展 锁定iCC2024第九届色谱网络会议
    毛细管电泳(CE,capillary electrophoresis),又称高效毛细管电泳(HPCE,high performancecapillary electrophoresis)或毛细管电分离法(CESE,capillary electro-separation method),简称 CE。毛细管电泳包括电泳、色谱及其交叉内容,是一类以毛细管为分离通道,以高压直流电为驱动力,以样品的多样特征 (如:电荷、大小、等电压、极性、亲和行为、相分配特性等)为根据的液相未分离分析技术。其自 70 年代末 80 年代初创立以来已成为近年来发展最快的分离分析技术之一。它综合了高效液相色谱和传统平板凝胶电泳二者的优点,具有快速、高效、高分辨率、重复性好、易于自动化等特点,已广泛应用于生命科学研究的各领域,尤其是对生物大分子核酸的研究,并取得了迅速进展。短短的几年内,由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对生物大分子(肽、蛋白、DNA等)的高度分离分析的要求,得到了迅速发展,正逐步成为生命科学及其它学科实验室中一种常用的分析手段。有调研指出,全球毛细管电泳市场近年来继续增长。2023年全球毛细管电泳市场的销售额达到了3.3亿美元,预计到2030年将达到4.4亿美元,年复合增长率(CAGR)为4.3%。毛细管电泳技术不断发展和创新,特别是在提高分析效率和灵敏度方面。例如,近期的一些突破包括自动化平行毛细管电泳系统的开发、高重现毛细管电泳方法的应用,以及毛细管电泳与质谱等其他技术的结合。那么近期,毛细管电泳有何突破?2024年8月26-30日,由中国化学会色谱专委会指导,仪器信息网联合北美华人色谱学会、上海分析仪器产业技术创新战略联盟、中国科学院兰州化学物理研究所、中国科学院化学所共同举办的“第九届色谱网络会议(iCC 2024)”将拉开帷幕。会议期间,2024年8月29日下午,仪器信息网特别联合中国科学院化学研究所共同筹备了毛细管电泳技术及应用进展专场,邀请多位毛细管电泳相关权威专家在云端开讲,毛细管电泳相关仪器技术及前沿应用不容错过。立即报名》》》重庆大学 夏之宁教授《毛细管电泳在分离分析上的相对优势与潜势》(2024年8月29日开讲 点击报名)夏之宁,1961年8月生,博士毕业于丹麦哥本哈根大学,重庆大学教授,博士生导师,重庆市首批学科带头人。中国色谱学会常务理事,重庆市色谱学会理事长。获教育部高校青年教师奖、全国侨联归国创业成就奖、教育部跨世纪人才。曾任重庆大学校长助理。兼任深圳万讯自动化控制股份公司分析测量仪器研究院首席科学家。研究方向为色谱与毛细管电泳、药物分析、过程分析仪器研发、分析样品前处理研究。在Angew. Chem. Int. Ed.、 Anal. Chem.、 ACS、JCA、Talanta等学术刊物上发表论文500余篇。获得专利20余项。第一作者出版学术著作3本。主持科技部国际合作、973、NSFC项目共16项。【摘要】本报告将分析并讨论毛细管电泳(CE)面对分离度、灵敏度、重现性、自动化等的现状与发展潜势。通过综述CE手性化合物分离,提出新的展望;讨论新型CEC固定相与毛细管改性,讨论CEC固定相与LC固定相的区别;讨论CE除了分离分析之外,在亲和常数、分配常数等物化参数与活性物质筛选上的进展。评价CE作为柱反应器的优点;在“脏试样”分离分析与“全极性分子”分离分析上的优点;讨论CE在细胞、细菌、纳米粒子等颗粒分离分析与识别上的优势;举例在临床检验与医学领域CE相关方法;CE在中药与天然药物研究的最新针对性特点。CE-MS技术最新发展;以及谈论在LC中引入电动力分离的情况等。中国科学院生态环境研究中心 汪海林研究员DNA/RNA修饰的精准分析与表观遗传研究(2024年8月29日开讲 点击报名)中科院生态环境研究中心研究员,杰青(优秀),基金委创新群体负责人。主要从事高灵敏DNA/RNA修饰分析新方法新技术研究,并开展表观遗传与分子毒理方面研究。发现高等生物的N6-甲基腺嘌呤(Cell, 2015, Cover),是表观遗传领域的原创性突破。发现维生素C具有增强DNA去甲基化活性的辅助因子功能,是关键性突破,推动维生素C医治癌症的热潮。首次提出“近距离作用增强荧光偏振响应”新机理,为DNA在与功能蛋白质作用过程中的构象改变及组装的研究奠定原理性的基础。已发表SCI 论文300 篇,他引10050次,包括Cell、Nature、Science、Cell Res、PNAS、JACS、Cell Discovery、Nucleic Acids Research、Anal Chem 等。先后获得中科院院长特别奖(1997),中国分析测试协会科学技术奖特等奖(2015、2020),教育部优秀成果一等奖(2007),中科院“优秀研究生导师奖”(2012),中科院“优秀研究生指导教师奖”(2013),中科院“杰出成就奖”(主要完成者)(2013)。【摘要】DNA胞嘧啶的(去)甲基化直接与多种重大疾病的发生发展密切相关,因其丰度低,通常检测需要用百万个细胞,难以应用于疾病早期样本的检测。我们先后研发出了:“细胞中DNA信号干扰物游离核苷酸的高效去除技术”、“DNA盐桥修饰磁性微纳颗粒的高效富集及原位酶解技术”、“碳酸氢铵增强质谱离子化效率技术”,并集成为一体化的分析系统,将检测限由百万个细胞降低到20个细胞。利用所建立了的方法,发现维生素C具有调控DNA去甲基化活性的辅助因子功能,是关键性突破,为维生素C及类似物的抗肿瘤、免疫治疗等新功能的研究“开启了大门”。通过建立代谢编码的示踪技术与高精准的质谱分析方法,成功地在高等生物果蝇中首次检测到复制后、可调控基因表达的DNA腺嘌呤甲基化修饰的存在 (Cell 封面论文)。该项研究赋予了DNA腺嘌呤甲基化的“第二次生命”。研制了世界先进的毛细管电泳装置,可与超灵敏的激光诱导荧光、分子转动相关的荧光偏振、单分子荧光实时成像等检测技术联用。提出了“近距离作用增强荧光偏振响应”机理;首次将荧光偏振与电泳迁移相结合在单核苷水平精细地测定核酸适配体与蛋白质相互作用;建立了可诱导基因突变、丰度极低的、肺癌标志物DNA加合物的超灵敏分析方法,较经典的32P放射性检测灵敏度提高了三个数量级,从根本上避免了放射损伤。所建立的DNA(去)甲基化的功能分析方法已成为国际上的标杆。与国际上十八家机构合作,开展了表观遗传学研究,在Science等重要影响的学术期刊上发表了系列论文。 北京理工大学 屈锋教授毛细管电泳技术和仪器的发展及重要应用(2024年8月29日开讲点击报名)研究方向为生物医学分析和毛细管电泳新技术新方法研究、基于毛细管电泳技术的核酸适配体筛选机理研究。北京理化分析测试技术学会副理事长,2019年成立中国第一个核酸适配体学会《北京核酸适配体交叉技术学会》并担任理事长,北京色谱学会副理事长。中国化学会色谱专业委员会委员,中国色谱学会理事,色谱行业女学者联谊会负责人。在毛细管电泳和核酸适配体交叉研究领域有长期积累,具有鲜明特色和行业影响力。任《Electrophoresis》,《Chin Chem Let》,《色谱》期刊编委。毛细管电泳生物分析和核酸适配体高效筛选机理和应用研究具有创新性和应用意义,是国际上进行系统研究的三个小组之一。已发表学术论文百余篇,申请发明专利10项。2017年获中国分析测试协会科学技术奖CAIA奖一等奖。2013年起在《色谱》期刊首创《毛细管电泳技术年度回顾》专栏,已出版8期年度回顾。2016年起在仪器信息网开办《神奇的毛细管电泳系列》系列网络讲座。2020年出版《生物分离工程教程》,《生物分离工程》课程入选2019年北京高校“优质本科教材课件”。【摘要】毛细管电泳是现代微量分析技术,其分辨率高,分析速度快,分析模式多,分析物广泛,样品和试剂消耗少,是生物医药分析中具有优势。国内外商品化的毛细管电泳仪品类不多,近年来国产仪器研发正在起步。毛细管电泳在单抗药物和核酸疫苗研发和质控,蛋白质组学和代谢组学研究,核酸适配体筛选研究中具有重要应用。中国科学院化学研究所 郭振朋副研究员 高重现毛细管电泳方法与应用(2024年8月29日开讲 点击报名)郭振朋,博士(中国科学院化学研究所),中国科学院化学研究所副研究员。主要研究方向是以色谱、毛细管电泳、质谱及其联用为主要工具发展面向生物活性分子的测量方法和平台技术。在Mol. Plant、Plant J.、Talanta等期刊发表SCI论文26篇,获授权专利7件。现任北京色谱学会秘书长、中国分析测试协会青年学术委员会委员,《色谱》期刊青年编委。【摘要】为解决长期困扰着毛细管电泳(CE)发展的出峰位置不重现这一严峻挑战,基于非时间测量的高重现CE(HRCE)新理论,发展了HRCE新方法、研制了新装置,并应用于血液、汗液成分的分析。HRCE保持了传统CE之微量(亚纳升级耗样)、高效、快速、功能齐全、经济环保的特点,又获得了重现、可靠、强定性能力等优势。
  • 程琳教授团队:毛细管聚焦的微束X射线衍射仪及其应用研究
    毛细管聚焦的微束X射线衍射仪及其应用研究邵金发,程琳*(北京师范大学核科学与技术学院,射线束技术教育部重点实验室 100875)摘要随着自然科学的不断进步,诸多领域都朝着微观层面发展,人们对物质的分析随之深入到微区范畴。微束X射线衍射分析技术是一种无损分析微小样品或样品微区物相结构的有利工具,凭借着无损、微区、空间分辨率高等特点被应用于诸多领域中。本实验室将毛细管X射线聚焦技术与X射线衍射分析技术相结合,自行设计研发了一种新型毛细管聚焦的微束X射线衍射仪。它利用毛细管X光透镜的特点,将X射线源发出的X射线束会聚到微米量级,从而实现对小样品或者样品微区的物相分析,为解决金属文物、陶瓷文物等的无损微区物相分析提供了解决方案。1. 引言微束X射线衍射(micro-X-ray diffraction,µ-XRD)是一种可靠的、无损的物相结构分析技术,已被广泛应用于生物化学、材料科学、地球科学、应力分析等领域[1-6]。目前获得微束入射X射线的方法主要有准直器限束和X射线光学器件聚焦两种。通过准直器限束获得微束入射X射线是最早在微束X射线衍射仪中使用的方法,具体为采用准直狭缝或小孔作为光阑放置在入射光路上,用以减小入射X射线的发散度。但是与此同时,入射光束的强度会因为物理阻挡而降低,导致获得的衍射信息变弱,难以达到理想的分析效果[3,4]。而多毛细管X光透镜利用X射线全反射原理,可将在空心毛细管内表面上的多次全反射的X射线会聚于一焦点。因此可以以较大的角度收集从X射线源产生的X射线,且会聚后X射线的束斑大小可低至几十微米。同时,毛细管X光透镜对Cu-Kα的能量有高达2-3个数量级的放大倍数[7],且具有低的发散度,非常适合微小样品和样品微区物相结构无损分析的研究。目前德国Bruker公司生产的D8系列X射线衍射仪通过添加一个由微焦点X射线源和多毛细管X光透镜集成的附加模块实现μ-XRD分析的功能[8];意大利LANDIS实验室开发了一个集成多毛细管半透镜的μ-XRD衍射[9,10]仪。但由于仪器均缺乏二维、三维自动控制平台,难以实现样品微小测量点的准确定位,更无法实现样品微区的二维μ-XRD分析。面向微小样品和样品微区µ-XRD分析的需求,本实验室自行设计和开发一种新型的微束X射线衍射仪以及相应的计算机控制程序,并且开展了相关分析方法学的研究。2. 仪器组成本实验室设计的毛细管聚焦的微束X射线衍射仪外观如图1所示,其主要由微焦斑X射线管(Cu靶,焦斑大小50 μm×50 μm)、毛细管X光透镜(Cu-Kα能量处束斑大小为100 µm)、接收狭缝、SDD X射线探测器(5.9keV时能量分辨率为145eV,铍窗有效面积25 mm2)、具有20倍放大功能的1400万像素固定焦距CCD摄像头、测角仪,XYZφ四维样品台,以及在LabVIEW语言环境下开发的仪器控制程序等部分组成。图1 微束X射线衍射仪的外观图控制程序的主界面具有微区X射线衍射分析和微区能量色散X射线荧光(micro energy dispersive X-ray fluorescence,μ-EDXRF)分析两种模式,如图2所示。谱图显示区域在探测过程中实时显示X射线探测器探测到的谱图。此外,该仪器使用的高精度自动化三维运动平台可以满足微区的二维μ-XRD分析的需求,以便实现对感兴趣区域内物相分布的分析等相关问题。图2 微束X射线衍射仪控制程序的主界面与Si (4 0 0)的X射线衍射图3. 实验分析3.1 氮化钛薄膜的分析薄膜具有强大的性能,但同时也会因为各种内部或者外部因素而发生失效。因此,薄膜微观区域特征的变化对宏观尺度特征的研究具有重要的作用。本文选择TiN薄膜作为研究对象,以期了解薄膜中TiN晶相生长的择优取向并对其进行快速评估。该TiN薄膜的是利用金属真空蒸汽电弧离子源(MEVVA)先进行离子注入,再经磁过滤真空阴极电弧沉积系统(FCVA)气相沉积而成。被测样品如图3所示,A部分和B部分是TiN薄膜,C部分为304不锈钢衬底,其中A部分更靠近整个样品的边缘,感兴趣的区域标识在中间的矩形条框中(0.5 mm×5.0 mm)。由于图中各部分形状不规则,易被常规X射线仪器的射线束无差别的覆盖,因此在这里进行微区分析十分必要。图3 TiN薄膜与304不锈钢衬底以及被测位置图片在μ-EDXRF分析模式下,X射线管电压为30 kV,管电流为0.5 mA,X射线束与样品表面的夹角θ1和X射线探测器铍窗的中心线与样品表面的夹角θ2均为45°,探测器探测活时间为60 s,测量得到的μ-EDXRF光谱见图4。同时,选择如图3中所示的感兴趣区域,使用微束X射线衍射仪进行µ-EDXRF二维扫描分析。扫描步距为50 μm,每个点的测量条件与μ-EDXRF分析保持一致,每步的探测活时间为500 ms。经过数据处理,得到扫描区域内各元素的分布如图5所示。在µ-XRD分析模式下,X射线管的设置与µ-EDXRF分析模式下相同,测角仪2θ范围为10°~120°,步距角为0.1°,每步的探测活时间为1 s,测量得到的X射线衍射图谱如图6所示。图4 TiN薄膜测量点的μ-EDXRF光谱图5 TiN薄膜扫描区域中Fe和Ti元素的分布图6 TiN薄膜测量点的μ-XRD图从图4可以看出,TiN薄膜测量点a和b的主要荧光峰来自Ti元素,同时,测得的304不锈钢衬底的主要合金元素为Fe、Ni和Cr。通过荧光峰的强度可知,a点Fe与Cr的相对含量较b点高,而b点Ti的相对含量较a点高,即b点处沉积了更多的Ti。从图5中可以看出,从中部到边缘位置Ti的含量发生了明显的改变,这主要受沉积束流在304不锈钢衬底上的覆盖面积所影响,而这种含量的改变与薄膜物相的变化有一定的联系。图6的测量结果表明,在该TiN薄膜中TiN所呈现的取向分别为(1 1 1)、(2 0 0)、(2 2 0)和(3 1 1)。在a点中最强的衍射峰来自于TiN的(2 2 0)晶面;在b点中TiN的(1 1 1)晶面呈现为最强,而(2 2 0)晶面消失了。结合图5中的元素分布可知,Ti的含量在物相变化的过程中起到了重要作用,随着沉积Ti的增加,膜内积聚的内压力促进了相变。因此,使用本微束X射线衍射仪可以实现对TiN薄膜,尤其是镀在微小零件上的薄膜的定点性能监测。同时,借助本微束X射线衍射仪,可从元素组成、元素分布、物相组成几方面对薄膜的微区进行表征。可以帮助认识了薄膜微区的性质,并为宏观的薄膜失效或者薄膜强化提供了研究数据。3.2 清代红绿彩瓷的分析为了评估本仪器对样品微区进行物相二维μ-XRD分析的能力,选取一片清代红绿彩瓷的残片作为研究对象。调节样品台使样品表面感兴趣区域清晰呈现在CCD图像中,并通过鼠标在控制界面的CCD视野中选择具体的目标扫描区域(图7)。选择图7中A(白釉),B(红彩)和C(绿彩)进行μ-XRD分析。µ-XRD分析的测量条件与上文保持一致,所得μ-XRD图如图8所示。从图8中可以看出,A点白釉XRD谱图在15 °~35 °之间出现一个驼峰,这是白釉在高温烧制过程中形成的非晶相所致;同时,经过对比ICCD PDF卡,A点白釉中主要存在的晶相为钾长石KAlSi3O8 (PDF 25-0618)、石英SiO2 (PDF 46-1045)和莫来石3Al2O32SiO2 (PDF 15-0776)等;B点红彩中主要存在的晶相为Fe2O3 (PDF 47-1409)和石英SiO2(PDF 46-1045)等;C点绿彩中主要存在的晶相为Pb8Cu(Si2O7)3 (PDF 31-0464)等。图7 清代红绿彩瓷残片与感兴趣区域图片图8 红绿彩中白釉、红彩和绿彩的μ-XRD图此外,选择如图7中2 mm×2 mm的感兴趣区域,使用微束X射线衍射仪进行µ-XRD二维扫描分析。该区域被划分为21×21个被测试点,扫描步距为100 µm,每个点的测量条件为:X射线管电压为30 kV,电流为0.5 mA,2θ探测范围为24.5°到30.5°,步距角为0.3°,每步探测活时间为0.8 s。由此得到的扫描总谱经数据处理得到的晶相分布图如图9所示。图9 扫描区域中Pb8Cu(Si2O7)3、3Al2O32SiO2、KAlSi3O8和Fe2O3的晶相分布4. 结论本实验室将毛细管X光透镜技术与X射线衍射分析技术相结合,设计和研发成一种新型微束X射线衍射仪。该微束X射线衍射仪具备无损分析微小样品和样品微区的物相结构的能力,且能实现样品微区中感兴趣区域的μ-XRD二维扫描。同时,该仪器还可实现样品的μ-EDXRF分析和μ-EDXRF二维元素分析,可为物相结构的研究提供了元素种类的参考信息,扩展了微束X射线衍射仪的功能。因此,其在材料科学、地球科学和文物保护等领域有着广泛的应用前景。 参考文献[1] Lin C , Li M , Youshi K , et al. The study of chemical composition and elemental mappings of coloredover-glaze porcelain fired in Qing Dynasty by micro-X-ray fluorescence[J]. Nuclear Inst & Methods in Physics Research B, 2011, 269(3):239-243.[2] Laclavetine K, Ager F J, Arquillo J, et al. Characterization of the new mobile confocal micro X-ray fluorescence (CXRF) system for in situ non-destructive cultural heritage analysis at the CNA: μXRF-CONCHA[J]. Microchemical Journal, 2016, 125: 62-68.[3] Figueiredo E, Pereira M, Lopes F, et al. Investigating Early/Middle Bronze Age copper and bronze axes by micro X-ray fluorescence spectrometry and neutron imaging techniques[J]. Spectrochimica Acta Part B Atomic Spectroscopy, 2016, 122:15-22.[4] Brai M, Gennaro G, Schillaci T, et al. Double pulse laser induced breakdown spectroscopy applied to natural and artificial materials from cultural heritages[J]. Spectrochimica Acta Part B Atomic Spectroscopy, 2009, 64(10):1119-1127.[5] HložEk M, Trojek T, B Komoróczy, et al. Enamel paint techniques in archaeology and their identification using XRF and micro-XRF[J]. Radiation Physics & Chemistry, 2016: S0969806X16300573.[6] Scrivano S, Ruberto C, B Gómez-Tubío, et al. In-situ non-destructive analysis of Etruscan gold jewels with the micro-XRF transportable spectrometer from CNA[J]. Journal of Archaeological Science: Reports, 2017, 16: 185-193.[7] Bonfigli, Francesca, Hampai, et al. Characterization of X-ray polycapillary optics by LiF crystal radiation detectors through confocal fluorescence microscopy[J]. Optical Materials, 2016, 58: 398-405. .[8] Berthold, C. , Bjeoumikhov, A. , & Lutz Brügemann. (2009). Fast XRD2 micro diffraction with focusing X-ray microlenses. Particle & Particle Systems Characterization, 26(3), 107-111.[9] Rotondo, G. G. , Romano, F. P. , Pappalardo, G. , Pappalardo, L. , & Rizzo, F. . (2010). Non-destructive characterization of fifty various species of pigments of archaeological and artistic interest by using the portable X-ray diffraction system of the Landis laboratory of catania. Microchemical Journal, 96(2), 252-258.[10] Padeletti, G. , Fermo, P. , Bouquillon, A. , Aucouturier, M. , & Barbe, F. . (2010). A new light on a first example of lustred majolica in Italy. Applied Physics A, 100(3), 747-761.*通讯作者程琳,工学博士,美国加州大学尔湾分校访问学者。现任职于北京师范大学核科学与技术学院,教授,博导。长期从事毛细管聚焦的微束X射线分析技术的研究及相关设备的研发;目前已经成功研发出国内首台毛细管聚焦的微束X射线荧光谱仪和毛细管聚焦的X射线衍射仪等设备并开展相关的分析技术及应用研究;作为项目负责人已经承担多项国家自然科学基金、北京市自然科学基金和北京市科技计划项目等,国家自然科学基金评审专家、北京市高新技术企业评审专家和X-ray spectrometry等国际刊物审稿人。e-mail: chenglin@bnu.edu.cn
  • 液质常见问题解析 | 如何清洗离子传输毛细管
    当您的仪器长期运行样品,可能会导致传输毛细管污染,典型现象是【调谐液各个离子灵敏度普遍下降,特别是低端离子】。安捷伦仪器目前有三种毛细管 ,请先辨别清楚您的毛细管是哪种,适用不同的清洗方法:如何清洗离子传输导电毛细管导电毛细管六孔导电毛细管(适用G6495/G6550仪器,9cm长)对于快速切换导电毛细管(包括上图两种),我们推荐下面步骤清洗:需要的工具:Alconox清洁粉末(随新仪器附带),100 mL量筒,天平,超声清洗仪,1mL移液枪头,18MΩ 高纯水等。清洗步骤:1. 称取一克Alconox清洁粉末置100 mL洁净的量筒中(建议使用聚丙烯量筒), 用高纯水充分溶解。如溶解困难,可超声使溶解。2. 如果使用聚丙烯量筒的话,可以直接将毛细管放入量筒中。如果使用玻璃量筒的话,请将毛细管两头用1 mL的移液枪枪头套住,并将枪头前端剪去如下图所示。这样可以保护毛细管在超声清洗的时候不会直接碰到玻璃量筒壁,防止毛细管破碎。3. 将毛细管竖直放入充满Alconox溶液的量筒中,确保液面没过毛细管。超声清洗5min。如果液面无法没过毛细管的话,请适量添加一些高纯水。4. 拔掉移液枪枪头,用高纯水冲洗毛细管。5. 用一个1mL的移液枪头紧紧套住毛细管的一端,然后用注射器抽吸高纯水,拔掉注射器针头,通过移液枪头处冲洗毛细管内壁。反复多次,以确保清洗剂充分冲洗干净。6. 用甲醇冲洗毛细管外表面,并用甲醇置换掉毛细管内孔的水。自然晾干。重新安装毛细管,开机。如何清洗离子传输经典透明毛细管经典玻璃透明毛细管这种毛细管可以用导电毛细管的步骤进行清洗。但推荐遵循下面的步骤进行清洗。需要的工具:棉签,用于毛细管清洁的金属丝(备件号G1946-80054),色谱级甲醇或异丙醇清洗步骤:1. 用异丙醇或甲醇/水溶液湿润清洗毛细管内壁。2. 截取约50厘米长的金属丝,把两端重叠在一起,小心穿过毛细管。直到只剩最后一小圈在外面。3. 用一小团脱脂棉穿过钢丝圈。注意,注意棉花团不要太大,必须保证其可以顺利穿过毛细管。否则金属丝可能被拉断而棉花团堵塞在毛细管内,很难去除。4. 用异丙醇或甲醇/水溶液润湿小棉花团,然后小心的慢慢拉金属丝,使棉花团穿过毛细管。5. 如果发现棉签很脏,可以重复1-2次,直到棉签完全干净为止。6. 重新安装毛细管,开机。使用异丙醇润滑毛细管外表面,会使毛细管更容易插入。后注:对于六孔导电毛细管 ,是有方向性的,标有黑色圆环一端是前端;其他毛细管在新毛细管安装时无方向性,但对于日常清洗毛细管时,建议拆下来时哪一端在前,安装时也要相同方向。收看安捷伦售后直播 学习工程师视角的“冷知识”
  • 捷报:全自动毛细管Western助力外泌体智能递送药物研究再发Nature子刊
    捷报:7月26日,中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室与北京朝阳医院、澳大利亚昆士兰大学合作,利用全自动毛细管Western技术,研究调节性T细胞外泌体智能递送VEGF抗体用于眼底新生血管性疾病联合治疗发表在Nature Biomedical Engineering(IF:18.952)。研究背景年龄相关性黄斑变性和糖尿病性视网膜病变诱发的新生血管的形成是导致失明的两个主要原因,通常的治疗方案是使用靶向血管内皮生长因子(VEGF)的抗体(anti-VEGF antibodies (aV))进行治疗。尽管治疗的早期阶段aV具有更高的有效性,但仍有50%–67.4%的aV治疗的老年性黄斑变性患者,在治疗2年后有视力恢复不佳等情况发生。在糖尿病视网膜病变中的患者中,对aV治疗的抵抗率(持续性黄斑增厚)也约为40%。这意味着aV在眼部新生血管病变中的药效不是很理想,或者还有其它致病因素如炎症等因素需要考量。有研究报道,与接受白内障手术的没有其它眼部病变的患者相比,脉络膜新生血管(CNV)或视网膜新生血管(RNV)的患者的房水中炎性细胞因子水平升高,且这些炎症标志物与眼部新生血管疾病中VEGF产生的增加呈正相关。因而,炎症不一定是新血管形成的结果,也有可能是驱动眼部新生血管形成的主要致病因素之一。而原有使用激素疗法来抗炎的案例又有不良反应发生,因此急需一种新型的联合给药方式(抗VEGF+抗炎)出现。研究内容中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室与北京朝阳医院等地的科学家,基于VEGF和炎症的协同活性促进眼部新生血管形成的机制,开发了一种针对抗VEGF和抗炎症的联合疗法。利用体内具有天然抗炎活性的Treg来源的外泌体(rEXS)为载体,通过基质金属蛋白酶(MMP)敏感肽段(cL)连接VEGF抗体(aV),创建了rEXS-cL-aV体系。当玻璃体腔注射后,利用rEXS向炎症部位的趋化性,携带aV富集于眼底新生血管病灶,随后利用病灶部位高表达的MMP酶解敏感肽段cL并释放aV。在上述时空耦合递送的基础上,分别利用rEXS的抑制炎症作用和aV的抑制血管生成作用实现协同增效。全自动毛细管Western技术鉴定调节性T细胞外泌体VEGF抗体递送系统(rEXS-cL-aV)CD9, CD47, ALIX, TSG101: 外泌体marker(鉴定外泌体)CCR6:趋化因子受体(通过炎症趋化因子的梯度增强纳米药物在新生血管病变中的积累)IL-10,CTLA-4:Treg免疫抑制蛋白(鉴定此外泌体是Treg来源)aV:VEGF(鉴定递送药物VEGF抗体)β-Tubulin:内参(蛋白定量归一化)此研究中鉴定调节性T细胞外泌体VEGF抗体递送系统(rEXS-cL-aV),利用了全自动毛细管Western技术。因常规制备方法获取外泌体样本效率不高,因此用传统Western技术会常常面临样本量不足,无蛋白表达的困境。全自动毛细管Western技术,只需3μL样本,不到3小时直接获得24个样本定量结果。且此过程除手动加样+试剂后,无需任何手动操作,数据稳定重现性佳,是微量或珍稀样本蛋白定量的不二之选。
  • 安捷伦推出自动化平行毛细管电泳系统新品 可大幅提升蛋白分析效率
    1月17日,安捷伦宣布在第23届 PepTalk 会议期间正式发布用于蛋白质分析的新型自动化平行毛细管电泳系统——Agilent ProteoAnalyzer系统。这款新平台简化并提高了复杂蛋白质混合物的分析效率,而这项分析则是制药、生物技术、食品分析和学术界分析工作流程的核心。第 23 届PepTalk会议于当地时间1月16日至19日在美国加利福尼亚州圣地亚哥举办。毛细管电泳 (Capillary Electrophoresis ,简称CE)可提供快速的高分离度分析,且样品消耗量极少,因此已成为蛋白质分离不可或缺的工具。生物制药公司对单克隆抗体以及具有潜在治疗意义的其他蛋白靶点的兴趣日益扩大,因此推动了CE解决方案需求的预期增长。用于蛋白质CE-SDS分析的Agilent ProteoAnalyzer系统外观Agilent ProteoAnalyzer系统具有更高的效率、多功能性和可靠性,尤其适用于蛋白质QC工作流程。自动执行分离、数据处理和简化前处理步骤,从而简化分析工作流程,提高效率,降低培训和相关人力成本。该系统还可以分析从粗裂解物到纯化组分的多种样品类型。它可以在单次运行中分析不同大小和类型的蛋白质,并始终提供准确的结果,减少了耗时且昂贵的重复分析。安捷伦副总裁兼生物分子分析事业部总经理Knut Wintergerst表示:“Agilent ProteoAnalyzer系统将蛋白质分析的效率、多功能性和可靠性提升至新的水平。自动化平行毛细管电泳可简化复杂混合物的分析,使从制药到学术界的各个领域均受益良多。兼具出色的精密度和可靠性,可降低人工成本,并改进分析工作流程。”安捷伦整合基因组学事业部产品经理 Kyle Luttgeharm 将于当地时间1月18日(周四)中午12:25在PepTalk 举办研讨会,主题为《了解 ProteoAnalyzer 系统:独树一帜的自动化蛋白质分析》。安捷伦是CE市场的领导企业之一,其自动化电泳系统广泛应用于核酸分析,如NGS QC和IVT RNA应用。安捷伦希望通过扩展适用于相关生物分子类别的ProteoAnalyzer CE产品组合,巩固其作为质量控制分析解决方案主要供应商的市场地位。
  • 全自动毛细管Western Blot助力全球首款埃博拉疫苗ERVEBO® 上市
    当国内抗击新型冠状病毒已经取得阶段性胜利,各地方政府推出各种积极鼓励政策,普及全民免费接种新冠病毒疫苗的时候,当地时间2021年5月3日,刚果(金)卫生部宣布,该国第12轮埃博拉疫情结束......“国民男神”张文宏医生曾与樊登对话时指出:“如果今年新冠的死亡率、病死率,是像埃博拉一样的,其实这个病还是比较容易控制的。”埃博拉病毒,一个既熟悉又陌生的名字。埃博拉病毒(EBOV)是一种膜包被的负单链RNA病毒,属于Filoviridae家族,编码7种结构蛋白。该病毒在人类和非人类灵长类动物中可引起严重的出血性发热、腹泻、呕吐、肌痛、肝肾功能损伤等临床症状。迄今为止,已确定6种埃博拉病毒,包括扎伊尔型埃博拉病毒(ZEBOV),该病毒对人类的致死率最高,死亡率为60% ~ 90%。2014年至2016年,西非国家利比亚、几内亚和塞拉利昂曾爆发了最大规模的埃博拉病毒,导致超过28000人感染,11000人死亡。这次史无前例的爆发主要是由扎伊尔型埃博拉病毒所引起,世界卫生组织(WHO)宣布进入国际关注的公共卫生紧急状态。2021年2月至5月,刚果(金)民主共和国北基伍省共发现确诊病例12例,其中死亡6例。埃博拉疫情能被一次又一次得到有效控制,死亡率降低,感染人数减少,不得不说,很大一部分原因是得益于埃博拉疫苗的普及。全球首个上市预防埃博拉病毒病的商品化疫苗ERVEBO,即rVSV∆G-ZEBOV-GP疫苗,2019年已获得欧盟EMEA和美国FDA批准使用。此疫苗由全球领先的Merck公司研发生产,采用多种创新性的技术。其疫苗分析研究进展与疫苗工艺开发和商业化部门于2020年8月发表题为Characterization of rVSV∆G-ZEBOV-GP glycoproteins using automated capillary western blotting的文章, 披露了利用全自动毛细管Western Blot技术平台表征rVSV∆G-ZEBOV-GP糖蛋白的详细技术细节。研究背景EBOV主要通过由病毒糖蛋白(GP)介导的相互作用来感染宿主细胞。EBOV基因组由于转录停顿可产生三种不同的包膜GP变体。未编辑的RNA转录编码一个非结构分泌型GP(sGP)蛋白。开放阅读框(ORF)的+1转变,可产生一个结构上重要的病毒膜结合型GP蛋白。最后,ORF的+2转变,可产生一个非结构小型分泌型GP(ssGP)。每种蛋白在致病机制方面的作用先前已经描述。EBOV GP合成为一个多肽,被一种类似呋喃的蛋白酶裂解,生成一个异质二聚体,由GP1和GP2亚基组成,通过一个二硫键连接在一起。ZEBOV包膜GP蛋白的表面含有17个N-连接糖和许多糖基化位点。GP1负责与细胞受体的结合,有三个结构域,包括一个受体结合域、一个糖帽和一个非结构性的重度O型糖基化区域(粘蛋白样结构域)。GP2有一个跨膜结构域,负责与病毒的融合。GP2∆,发现于脱落GP蛋白,是TNF-a转换酶(TACE)对GP2进行酶切的结果。EBOV的细胞进入机制,是由组织蛋白酶的半胱氨酸蛋白酶介导的,它裂解完整的EBOV GP1,去除糖帽和粘液蛋白结构域,暴露出增加受体结合和病毒感染性的氨基酸残基。该项研究阐述了在整个rVSV∆G-ZEBOV-GP疫苗生产过程中,使用全自动定量毛细管Western Blot检测平台,研究和表征ZEBOV糖蛋白。自动化Western Blot与传统手工Western Blot技术平台相比有诸多优点:线性范围增加更高的通量因自动化而增强的重复性由于该技术的高特异性,毛细管Western Blot技术已被应用于疫苗产品和治疗性蛋白质的表征。该项目中,研究人员还进行了方法学对比,对比了传统手动Western Blot技术与全自动毛细管Western Blot检测技术。研究结论我们已开发和应用基于全自动毛细管Western Blot检测方法,去开发及生产ERVEBO疫苗。使用该方法表征在疫苗生产的过程中,GP变体的类型和数量。毛细管Western Blot技术提供了与传统手动Western Blot系统相似的GP结果。但是,具有更好的重复性,更准确的定量,并更简单易用。该方法有助于表征疫苗生产中酶促反应步骤,评估下游纯化步骤中的变化,并确认多批次间的工艺稳定性。实验表明,使用VSV载体产生的GP、sGP和ssGP的相对数量与天然埃博拉病毒中观察到的不同。GP蛋白是在感染期间产生的,只有病毒粒子膜结合的GP包含在rVSVΔG-ZEBOV-GP疫苗最后的DP中。毛细管Westerns表明,ERVEBO生产过程中的每个步骤都有独特的电泳图,该方法可以作为一个有利的工具,去评估生产过程的不同阶段。方法学对比根据工序,rVSV∆G-ZEBOV-GP使用1x样品缓冲液中稀释至7倍。初步稀释后,将样品在2个混合物(含样品缓冲液、二硫苏糖醇和荧光标准品)中稀释2倍,在70℃下加热10分钟。随后,样品经短暂涡旋去除气泡后,加载到12-230 kDa的样品板上。一抗(兔抗ZEBOV-GP)母液被加载到样品板前,用抗体稀释液(终浓度为2μg/mL)稀释1000倍。毛细管Western Blot仪器采购于ProteinSimple公司(Santa Clara, CA, USA)。仪器设置定义如下:分离时间设置为30分钟,一抗体孵育时间为30至60分钟,二抗体孵育时间为30至60分钟。使用仪器的化学发光检测通道在不同的曝光长度下进行检测。除非另有规定,曝光时间为2s。所有未指定的设置均采用供应商的默认选项。Merck早在2012年就曾发表文章指出,对比传统手动WB (罗氏于2005年发表:CV 35%),ProteinSimple全自动Western Blot检测平台的数据CV值可以控制在10%以内。结果展示图1. 基于毛细管法获得的工艺步骤电泳图谱(A) 收获病毒液(HVF:Harvested virus fluid)为工艺流程中最早的步骤,即病毒转染后收获。包含:GP1(260 kDa)、未知(190 kDa)、可溶性GP(95 kDa)和GP2 + GP2∆(40 kDa);(B) 澄清病毒液(CVH:Clarified viral harvest)为工艺流程中的第二步,过死端过滤以去除细胞碎片和样品。包含:GP1(260 kDa)、可溶性GP(95 kDa)和GP2 + GP2∆(40 kDa),未知的190 kDa峰被去除;(C) 反应后病毒收获(RVH:Reacted viral harvest ),在纯化过程的酶解步骤之后。包含:由胰蛋白酶处理的GP1、可溶性GP(95 kDa)、GP2 + GP2∆(40 kDa)和较低分子量的蛋白质(12 kDa)组成,可能是胰蛋白酶处理后产生的GP1片段;(D) 超滤产品(UFP:Ultrafiltration product),样品被超滤后。包含:GP1(95 kDa)和GP2(40 kDa),所有可溶性GP和脱落的GP被去除;(E) 药物产品(DP: Drug product),通过加入Tris和rHSA (recombinant Human Serum Albumin:重组人血清白蛋白)稀释DS(Drug substance:原药)至目标浓度。包含:GP1(95 kDa)和GP2(40 kDa),由于rHSA与一抗的交叉反应,DP中观察到一个约60 kDa的rHSA峰,DP浓度比UFP中低约2-logs。原药电泳图(补充信息图.1S)与UFP相似,因为其浓度与UFP相似,尽管含有rHSA作为稳定剂。图片中的峰高经过调整,以最好地呈现出每个样品。图2. 胰蛋白酶处理步骤的过程表征(A) 胰蛋白酶处理CVH样品时间过程电泳图,GP1峰在10分钟内从260 kDa转移到95 kDa,随着时间的推移,峰面积持续减少;(B) 加入胰蛋白酶抑制剂后结果,RVH样品在室温下进行Hold Time Study。在168小时内,GP1峰值持续缓慢下降。图3. 批间工艺一致性评价:通过峰面积评估四个不同批次的GP变体的百分比,以确保工艺一致性(A) 四个不同批次的CVH中GP和可溶性GP的峰面积百分比;(B) 其中一个批次的CVH的电泳图,显示峰值积分和分配;(C) 四个不同批次的UFP样品,显示峰面积分布;(D) UFP样品的电泳图,显示峰值积分整合和分配。四个批次CVH样品中,GP(包括GP1和GP2+GP2Δ)占总峰面积的78%,可溶性GP平均占22%。全自动毛细管Western Blot技术平台展望后疫情时代,我们依然需要居安思危,对科学与自然保持敬畏之心。潜心开发传统疫苗、亚单位疫苗、联合疫苗、核酸疫苗和治疗性疫苗,惠及人民。作为地球人,疾病无国界,先进技术无国界,爱与帮助也同样无国界。国外成熟的疫苗研发与生产技术路线,值得我们学习和借鉴。ProteinSimple全自动毛细管Western Blot技术平台,已被众多科研工作者使用,从事人用和兽用疫苗相关研发、生产和质控,包括埃博拉病毒疫苗,狂犬病病毒疫苗,肺结核病病毒疫苗,新型人乳头瘤病毒疫苗,SARS-CoV-2疫苗等等。正如ERVEBO生产整个过程中,全自动毛细管Western Blot技术平台可呈现出独特的电泳图,去评估疫苗生产过程的不同阶段。其高质量高重复性数据(CV 10%)、全自动高通量快速检测流程(25个样品仅需3h,最高通量为96个样品)、超微量样品(仅需3ul)、除分子量分离外,可兼容等电点分离的灵活应用,等等诸多优势,使得全自动毛细管Western Blot技术平台逐渐取代传统手工Western Blot检测技术,被广泛应用于疫苗领域。 代表文献 1. A single-dose live-attenuated YF17D-vectored SARS-CoV-2 vaccine candidate, L. Sanchez-Felipe, T. Vercruysse, S. Sharma, J. Ma, V. Lemmens, D. Van Looveren, M. Javarappa, R. Boudewijns, B. Malengier-Devlies, L. Liesenborghs, S. Kaptein, C. De Keyzer, L. Bervoets, S. Debaveye, M. Rasulova, et al., Nature, 2021 590: 320–325.2. OvHV-2 glycoprotein B delivered by a recombinant BoHV-4 is immunogenic and induces partial protection against sheepassociated malignant catarrhal fever in a rabbit model, S. Shringi, D. O’Toole, E. Cole, K. Baker, S. White, G. Donofrio, H. Li and C. Cunha, Vaccines, 2021 9:90.3. Analysis of the antigenic properties of membrane proteins of Mycobacterium tuberculosis, H. Li, L. Liu, W. Zhang, X. Zhang, J. Zheng, L. Li, X. Zhu, Q. Yang, M. Zhang, H. Liu, X. Chen and Q. Jin, Scientific Reports, 2019 9:3042.4. Inactivated rabies virus-vectored immunocontraceptive vaccine in a thermo-responsive hydrogel induces high and persistent antibodies against rabies, but insufficient antibodies against gonadotropin-releasing hormone for contraception, X. Wu, Y. Yang, C. Kling, L. Seigler, N. Gallardo-Romero, B. Martin, T. Smith and V. Olson, Vaccines, 2019 7: 73.5. Quantitation of CRM197 using imaged capillary isoelectric focusing with fluorescence detection and capillary Western, J. Loughney, S. Ha and R. Rustandi, Analytical Biochemistry, 2017 534:19–23.6. Neutralization of diverse human cytomegalovirus strains conferred by antibodies targeting viral gH/gL/pUL128-131 pentameric complex, S. Ha, F. Li, M. Troutman, D. Freed, A. Tang, J. Loughney, D. Wang, I. Wang, J. Vlasak, D. Nickle, R. Rustandi, M. Hamm, P. DePhillips, N. Zhang, J. McLellan, et al., Journal of Virology, 2017 91:e02033-16.7. Applications of an automated and quantitative CE-based size and charge western blot for therapeutic proteins and vaccines, R. Rustandi, M. Hamm, C. Lancaster and J. Loughney, Methods in Molecular Biology, 2016 1466:197–217. 参考文献 1. Characterization of rVSVΔG-ZEBOV-GP glycoproteins using automated capillary western blotting, K. Minsker, R. Rustandi, S. Ha and J. Loughney, Vaccine, 2020 38(45):7166–7174.2. Qualitative and quantitative evaluation of SimonTM, a new CE-based automated Western blot system as applied to vaccine development, R. Rustandi, J. Loughney, M. Hamm, C. Hamm, C. Lancaster, A. Mach and S. Ha, Electrophoresis, 2012 33:2790–2797.3. Precision and variance components in quantitative gel electrophoresis, Koller, A. and H. Watzig, Electrophoresis, 2005 26(12):2470-2475.
  • 湘仪推出新款毛细管血液离心机
    毛细管血液离心机可用于测定血液血细胞比积值,微量血液和微量溶液的分离。对现代医学中临床血液学与检验具有重要作用。 新款机型较之老款机型除了个别的外观和控制面板具有重大改善,结构和功能大体一样。新款机型的外壳材质不再采用笨重的不可再生资源的钢板,而是采用高强度,耐冲击,耐热,耐化学腐蚀的工程塑料(engineering-plastics),外观结构弧度更加圆滑,颜色舒适,将实验室仪器的风格表现的淋漓尽致,触摸面板采用分层结构,与老型号的机器相比更突显出机器控制界面友好性和易操作性。 新款机型的正式推出更大的丰富了客户的选择,我们将以更优质的性价比回报您。 湘仪一直秉承专业和细节的信念,让我们的每一款产品在世界上每个实验室中安全的,高效的,稳定的运转是我们的责任。 湘仪实验室仪器开发有限公司 地址: 湖南台商投资区湘仪科技工业园 电话: 0731-2842825 联系人: 卢经理 物 流 部: 0731-2963010 公司传真: 0731-2842829 邮政编码: 410205 网  址: www.xiangyilxj.com 电子邮件: service@lxjxy.com
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