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新型细胞培养系统研制成功作者:张笑 来源:科学网美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统,有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。领导这项研究的Laura Kiessling教授表示这套系统并不昂贵,可承担多能细胞培养中的大量预估工作。这项技术“很简单”,“任何人都能使用”。目前,大部分人类胚胎干细胞的培养都是作为实验室研究用途的,而通常所采用的培养方法又容易造成各种污染。这套新系统采用一种化学合成制得的可与干细胞相结合的蛋白片段底物,并通过与特定培养基结合,可将细胞培养固定在未分化阶段达三个月或者更长时间。据报告显示,该系统亦可用于诱导多功能干细胞培养。“科学家现在普遍采用的培养系统都有着非特定的缺点,并且缺乏一致性,以致出现质量差异”, 领导这项研究的Laura Kiessling教授解释,“我们研发的这套系统特定性很好,而且并不贵”。(科学网 张笑/编译)相关仪器及方法:新型细胞培养系统 IX81显微镜 7500 Fast实时PCR系统 发光光度计
[url=http://www.f-lab.cn/microscope-incubators/mio.html][b]显微镜活细胞培养箱[/b]([b]Microscope Incubation Chamber[/b] )[/url]是欧盟专业为生物,生命科学,医学等科学实验而设计的[b]显微镜CO2培养箱[/b]和[b]显微镜活细胞培养系统[/b],它为科学家提供CO2浓度,O2浓度,温度和气流可调的环境用于显微镜观察实验。[img=显微镜活细胞培养箱]http://www.f-lab.cn/Upload/Mio2.jpg[/img][img=显微镜活细胞培养箱]http://www.f-lab.cn/Upload/MOFI-600_.jpg[/img][b]显微镜活细胞培养箱[/b]可匹配全世界所有品牌所有型号的商用显微镜,为实时活细胞实验提供理想可控的环境。科学家拥有这种显微镜活细胞培养箱可观察细胞内和细胞为发成的变化,以往,没有这种CO2显微培养箱时,科学家需要对死亡细胞染色后在显微镜下观察,现在, 这种显微镜CO2培养箱可以架设到显微镜上直接观察培养中的活细胞,它可以控制温度,气流,湿度,CO2浓度,氧气浓度等,为细胞实验创造出局部可控环 境[img=显微镜活细胞培养箱]http://www.f-lab.cn/App/Tpl/Home/Default/Public/images/grey.gif[/img]显微镜活细胞培养系统是全球唯一做到100%可控的封闭空间,其它同类显微镜活细胞培养箱的控制是被动的,随机的,热空气扩散从一个热源发出以维持设定 温度,而这套显微镜活细胞培养箱没有热空气回风口问题,加热空气从培养箱与显微镜结合处的预留缝隙中自然随机逸出,使得腔内的热空气和温度更加均匀,克服 了其它产品温度不均匀问题。即使电流不稳或振动干扰,热点也不漂移,规避了剧烈温度漂移对环境的干扰。[img=显微镜活细胞培养箱]http://www.f-lab.cn/Upload/Mio.jpg[/img][b][b]显微镜活细胞培养箱[/b]特色[/b]独特的热扩散机制,结合领先空气导入和回风机制,提供连续稳定的气流,腔内温度均匀,没有局部温度热点和冷点外部加热器可以远离这个显微镜CO2培养箱,消除电干扰和振动干扰超高温度精度控制和温度稳定性具有最小的温度漂移,达到缓解平衡点后,样品处的温度精度高达±0.1º C,腔内平均温度精度高0.2º C即使开门,领先的气流流型和温度均匀性控制能力也消除剧烈的环境温度变化人体工程学设计,操作方便,XY位移台和聚焦控制器外置于腔体外,大面积开门设计,更为方便操作操作样品,试管等超精密封闭温度探针实时探测内部温度CO2浓度和O2浓度可调高精度控制器控制气流,CO2,O2和温度,并显示当前监测到的浓度数据和温度数据显微镜活细胞培养箱:[url]http://www.f-lab.cn/microscope-incubators/mio.html[/url]
体外神经细胞的培养已成为神经生物学研究中十分有用的技术手段。神经细胞培养的主要优点是:(1)分散培养的神经细胞在体外生长成熟后,能保持结构和功能上的某些特点, 而且长期培养能形成髓鞘和建立突触联系,这就提供了体内生长过程在体外重现的机会。(2)能在较长时间内直接观察活细胞的生长、分化、形态和功能变化,便于使用各种不同的技术方法如相差显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、同位素标记、原位杂交、免疫组化和电生理等手段进行研究。(3)易于施行物理(如缺血、缺氧)、化学和生物因子(如神经营养因子)等实验条件, 观察条件变更对神经细胞的直接或间接作用。(4)便于从细胞和分子水平探讨某些神经疾病的发病机制,药物或各种因素对胚胎或新生动物神经细胞在生长、发育和分化等各方面的影响。 我们实验室从80年代始开展了神经细胞的体外培养工作,取得了一些经验,现将培养细胞分类及方法简要介绍如下:一.鸡胚背根神经节组织块培养 主要用于神经生长因子(NGF)等神经营养因子的生物活性测定。在差倒置显微镜下观察以神经突起的生长长度和密度为指标半定量评估NGF的活性。1. 材料和方法 (1)选正常受精的鸡蛋,置于37℃生化培养箱内孵化,每日翻动鸡蛋一次。 (2)取孵化8-12 d 的鸡蛋, 用70% 酒精消毒蛋壳,从气室端敲开蛋壳,用消毒镊剥除气室部蛋壳。(3)用弯镊钩住鸡胚颈部,无菌条件下取出鸡胚置小平皿内,除去头部后,腹侧向上置 灭菌毛玻璃片上,用眼科弯镊子打开胸腹腔,除去内脏器官。(4)在解剖显微镜下,小心除去腹膜,暴露脊柱及其两侧,在椎间孔旁可见到沿脊柱两侧 排列的背根节(图1),用一对5号微解剖镊小心取出。(5)置背根节于解剖溶液内,用微解剖镊去除附带组织,接种于涂有鼠尾胶的玻璃或塑料 培养瓶中,在DMEM无血清培养液中培养。2. 结果鸡胚背根神经节在含神经生长因子(NGF, 2.5S,20ng/ml)的无血清培养液中培养24 h,神经节长出密集的神经突起。而未加NGF的神经节培养24 h, 未见神经突起生长。二.新生大鼠、新生小鼠及鸡胚背根神经节分散细胞培养背根神经节(DRG)细胞起源于神经嵴,NGF研究先驱Levi-Montalcini的实验表明,外原性NGF能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。在体外,分离培养的神经节在NGF存在的情况下,神经突起的生长在一天之内可长达数毫米,因此,利用培养的DRG细胞,进行轴突生长发育的研究,是最为经典而常用的方法之一。