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紫外可见全波长酶标仪

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紫外可见全波长酶标仪相关的论坛

  • 紫外-可见分光光度计与酶标仪问题

    要测胆汁酸含量,我的样品量比较少,想用酶标仪测,但是不知道具体用哪个波长,打算用紫外-可见分光光度计做全波长扫描,请问在酶标仪上可以直接用紫外-可见分光光度仪全扫描的最大吸收波长吗?

  • 有关能否用酶标仪代替紫外分光光度计

    因检测通量较大,最终老板决定买一台全波长的酶标仪缓解分光光度计的压力。前几天设备终于来了是MD的190全波长酶标仪,来了时候就开始测试。因设备自带pathcheck功能可将结果转化成1cm光径OD,但是使用以来发现问题来了:1在利用全波长酶标仪测定磷含量的的时候(波长700nm)测定的结果和紫外分光光度计比较(标曲浓度0.2、0.4、0.6...1.4mg/L)后面几个点数据基本没问题,但是0.2、0.4浓度的点两边数据差别较大,在低浓度下酶标仪检测OD值较分光光度计检测ABS值明显低了很多。然后用酶标仪测定植物酶活(两组实验,分别设置灭活组和非灭活组测定两者吸光值只差),波长为540nm,结果发现用紫外测定时灭活组和非灭活组数据有明显差异且两组数据正常,但是用酶标仪的话灭活组和非灭活组数据差别不大,数据都偏小。所以不敢使用酶标仪检测,还是使用分光光度计检测。等弄清楚问题在用酶标仪,群里有人对这一块熟悉么?

  • 酶标仪单、双波长检测的比较

    在用酶联免疫法测定抗原或抗体时,不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式,并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择,对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解,并且实际工作中也出现了使用单波长检测导致抗HCV部分弱阳性的漏检。因此,本人就酶标仪在选择单、双波长使用方面谈谈个人的体会,供同道参考。一 材料和方法1.材料 由上海科华公司提供的乙肝表面抗原测定试剂盒;eppendorf 20-20ul的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。2.仪器 上海科华公司的ST-360酶标仪和BIO-RAD 550酶标仪。3.方法 底物液配制:底物液A、B各5ml混合,加入微量酶标记物,再加入5ml终止液,呈微黄色,混匀待用;利用上海科华公司提供的乙肝表面抗原试剂盒的酶标板,用94孔中准确加入150ul配制好的上述底物液,另2孔中加入150ul已终止的空白底物液作空白。在BIO-RAD 550酶标仪上分别进行450nm单波长和450nm及655nm(无630nm)的双波长检测,在ST-360上分别进行450nm单波长和450nm及630nm的双波长检测吸光度各两次。二 结果  1.分别对所得结果进行统计,发现单、双波长测定结果有较大的差异,双波长测定结果的CV值远小于单波长测定,结果见表1。2.对ST-360两次重复测定结果进行分析,结果基本一致,见表2。表1酶标板吸光度在两台酶标仪上的测定统计结果酶标仪 BIO-RAD550 ST-360 波长 450nm 450nm+655nm 450nm 450nm+630nm 最小值 0.125 0.126 0.130 0.131 最大值 0.154 0.139 0.153 0.141 均值 0.1356 0.1329 0.1399 0.1361 标准差 0.00671 0.00267 0.00467 0.00247 CV(%) 4.94 2.01 3.34 1.82 最大值/最小值 1.232 1.103 1.177 1.076 表2 ST-360酶标仪两次吸光度测定统计结果波长 450mnm 450nm+630nm 1 2 1 2 最小值 0.130 0.129 0.131 0.131 最大值 0.153 0.152 0.141 0.141 均值 0.1399 0.1391 0.1361 0.13711 标准差 0.00467 0.00495 0.00247 0.00229 CV(%) 3.34 3.56 1.82 1.67 三 讨论  1.酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同,一般分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路,但测定原理相同,都是使用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。2.酶标仪在用单波长测定吸光度时,除受到测定干扰(样本的浊度、干扰色等)和电路干扰(包括噪音、漂移、电压等)等因素外,受液体表面张力的影响也很大。在检测过程中,由于液体表面张力的作用,液体的表面不是一个平面,而是形成一个凹面,从侧面看似凹透镜,这样不可避免会影响光路的正常通过。由于凹液面的影响,光线在通过液体时,除正常被液体吸收一部分外,尚有部分被折射和反射(如光线通过凹透镜那样),影响吸光度的检测。而酶标仪使用的又是通过光导纤维传播的点光源,如果每次能在同一部位检测,吸光度的重复性将得到保证,但由于机械运动等造成的误差,不可能保证每孔都在相同部位被检测,因此造成了孔与孔之间有一定的差异。结果见表1,整块板单波长检测的CV在3%以上,吸光度最高值和最低值的相对误差达17%以上。3.在双波长测定中,减少了测定干扰和电路干扰,因此测定结果明显好转,结果见表1,整块板样本的CV在2%以下。ST-360在进行稳定性观察中,如表2所示,两次检测结果基本一致,这表明ST-360的稳定性较好。同时,从表1也可以看到,科华公司生产的ST-360与BIO-RAD 550的检测结果一致,两者的检测性能基本相同。4.由于液体表面张力的不同,导致单波长测定时的误差较大。并且用不同的洗涤剂会影响到最后加入底物和终止液后的液面情况,用加入表面活性剂的洗涤液清洗后,形成的液面更凹,对单波长检测的影响更大,并且与表面活性剂的浓度成正比。而且中性蒸馏水洗涤后,单、双波长检测的结果基本一致。5.在酶联免疫法测定抗原抗体中,由于所使用的底物不论是邻苯二胺(OPD)-H2O2,还是四甲基联苯胺(TMB)-H2O2,显色终止后,在630nm和655nm处的吸光度值都只有吸收峰处(492nm/450nm)吸光度值的1%以下,因此,利用双波长检测,不会影响检测灵敏度。建立在进行酶联免疫检测时,酶标仪比色应该首选双波长。这样可以提高临界值处标本的分析正确度,减少实验误差。

  • 全波长扫描(紫外)

    [color=#444444]我打算做某物质的液相色谱,但看其他相关文献说,要做一个全波长扫描,我做的液相色谱流动相是甲醇比水(60:40),那我的紫外全波长扫描溶剂也用这个吗?还是用甲醇,还有我的物质为有机弱酸一,不同浓度,不同酸度,水溶液中,物质存在也不同,我还怎么做全波长扫描呢?[/color]

  • 测量薄膜的紫外可见最大吸收波长的对薄膜的要求?

    测量薄膜的紫外可见最大吸收波长的对薄膜的要求?

    请问各位大侠,在测量薄膜的紫外可见最大吸收波长时,要求薄膜时透明的吗?乳白的的可以吗?我的是PET薄膜,通过不同的溶解方法再旋转涂膜得到两种完全不同的薄膜,见图,一种是乳白色不透明,一种无色透明我的实验目的是在PET薄膜中加入一种染料使其变色,以不加染料的PET薄膜作为参比,测量加染料薄膜的紫外可见最大吸收波长请问各位大侠前辈哪种才适用于我的目的呢?现在还没有做出加染料的薄膜。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304122026_435158_2341438_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304122026_435159_2341438_3.jpg

  • 分光光度计和酶标仪

    分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

  • 【第三届原创参赛】分光光度计和酶标仪差异解析

    【第三届原创参赛】分光光度计和酶标仪差异解析

    维权声明:本文为xuru560原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的,均属侵权违法行为,我们将追究法律责任. 分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯

  • 【原创】买哪一款酶标仪呢

    公司想近期买一款酶标仪可能买低端的(滤波片的)也可能买全波长的(具紫外的)但是,听说有些酶标仪在紫外下检测OD值不准?本来想考虑Thermo来着但是看帖子都说thermo产地上海,质量烂,有点怕怕Biotek的人说他们品牌是最好的,可上来一看,他们的市场占有率也非常有限么Biorad好像还挺贵,比上面两款都贵大家都说MD的好,MD的是不是价格上要贵些,还有我在南方,它售后怎么样究竟买哪个牌子的呢苦死了

  • 紫外全波长扫描分析

    用Agilent 8453做紫外全波长扫描时,出来的吸收图谱开始时一条直线,后来就下降,很不规则,没有波峰、波谷,请问是哪里出了问题?

  • 酶标仪用于测定溶液中有紫外吸收溶质的浓度

    酶标仪可以看成一台分辨率不太高的紫外分光光度计,用酶标仪测定溶质的浓度,首先要配置标准样品,当然加样品到孔板也要避免气泡的产生,这种方法较紫外拉杆更便捷,高效,在能达到精度的情况下,节省了时间,提高了效率。

  • 【求助】蛋白质在紫外可见光波长范围内是否有明显吸收

    大家好! 我初学使用紫外可见分光光度计,有一些问题想请教一下大家.望大家不吝赐教! 我用紫外可见分光度计在波长为190~400nm扫描蛋氨酸,想确定其最大吸收波长.但是发现吸收峰并不明显,从190~230吸收逐渐下降,之后就像基线一样平缓,这样的图谱怎样来确定其最大吸收波长呢. 谢谢各位!

  • PE Lambda 35紫外可见分光仪 波长偏差怎么调节

    仪器用氧化钬标块测试发现紫外和可见光波长与检定过的标块波长偏差4~5个nm。想问下要怎么调节,感谢大家!钨灯和氘灯照射光斑入口狭缝都正常。有处理过这个问题吗?麻烦大家了[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402220739355571_1576_6360819_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402220739357000_7033_6360819_3.png[/img]

  • 有人用紫外检测器来做物质的全波长扫描吗?

    偶尔看见版面有人发帖询问,紫外检测器可以做全波长扫描吗?事实上有很多单波长或者双波长的检测器都可以实现这个功能,只是操作起来很不方便,我们就一起来聊聊这个功能吧。1、再购买液相色谱的时候,你考虑过用紫外检测器来做物质的全波长扫描吗?2、你有用紫外检测器这么做过全波长扫描吗?都是如何来操作的呢?效果又如何呢?

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