液相色谱测核黄素含量

高效液相色谱法测定大鼠血浆和全血中核黄素的含量韦京豫， 郭长江， 杨继军， 蒋与刚， 李云峰， 徐琪寿（军事医学科学院卫生学环境医学研究所，天津）摘要：为了直接反映核黄素营养状况对血中核黄素水平的影响，建立了高效液相色谱测定大鼠血浆及全血中核黄素含量的方法。采用Diamonsil C18色谱柱250mmx4.6mm i.d.5um）分离，以甲醇5mol/l乙酸铵（体积比为1.2ml/min）为流动相，流速1.2ml/min，荧光检测器检测（激发波长450nm，发射波长：520nm）。样品经乙腈、三氯甲烷处理后进样分析。核黄素测定的线性范围5-200nmol/l，最低检测限为2.5nmol/l(s/n=2),日内测定的峰面积的相对标准偏差（RSD）为1.2%,日间测定的RSD=4.3%。核黄素在血浆样品中的加标回收率为97.0%-104%，在全血样品中的加标回收率为97.4%-104.4%.关键词：高效液相色谱法；核黄素；血浆；全血；大鼠http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241234_379356_2355529_3.jpg

作者：吴袭;（湖南省怀化市第一人民医院;）摘要：目的建立测定通经甘露丸中大黄素、大黄酚及大黄酸含量的高效液相色谱法。方法采用DiamonsilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15),流速1.0mL/min,检测波长254nm。结果大黄酸进样量在0.0924～0.2464μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为98.45%,RSD为0.82%(n=6);大黄素进样量在0.0576～0.1536μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.76%,RSD为1.15%(n=6);大黄酚进样量在0.1397～0.3725μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为99.03%,RSD为0.91%(n=6)。结论高效液相色谱法操作简便,结果准确,重现性好,适用于通经甘露丸中大黄酸、大黄素及大黄酚的含量测定。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271018_386291_1606903_3.jpg

【作者中文名】肖燕; 刘建锋;【作者英文名】XIAO Yan; LIU Jian-feng（1.Huaihua Institute for Drug Control; Huaihua Hunan 418000; 2.School of Pharmaceutical Sciences; Central South University; Changsha 410013）;【作者单位】怀化市药品检验所; 中南大学药学院;【摘要】目的建立上清丸中大黄素和大黄酚的含量测定方法。方法色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:254 nm。结果大黄素进样量在0.0576~0.153 6μg线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.49%,RSD为1.75%(n=6);大黄酚进样量在0.1397~0.3725μg线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为98.86%,RSD为1.24%(n=6)。结论该方法操作简便,结果准确,重现性好,适用于上清丸中大黄素和大黄酚的含量测定。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061211_381810_2379123_3.jpg

【作者】 韩刚； 张卫国； 王超； 李运；【机构】 华北煤炭医学院药学系； 华北煤炭医学院药学系 河北唐山063000； 河北唐山063000；【摘要】 目的:建立如意金黄散中姜黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、小檗碱含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法进行含量测定,色谱柱Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-醋酸(77∶22∶1);检测波长:428nm。结果:姜黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、小檗碱的回收率分别为96.27%,100.8%,99.21%,99.80%,102.98%;RSD分别为0.27%,0.24%,1.14%,0.55%,0.11%。结论:采用高效液相色谱法在相同的色谱条件下,同时测定多味中药中的5种成分,方法的准确度高,重现性好,可用于控制如意金黄散的质量。 【谱图】http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142223_383907_1609970_3.jpg

【作者中文名】金林生; 熊志立; 李晓红; 杨春娟; 李发美;【作者英文名】JIN Lin-sheng; XIONG Zhi-li; LI Xiao-hong; YANG Chun-juan; LI Fa-mei（School of Pharmacy; Shenyang Pharmaceutical University; Shenyang 110016）;【作者单位】沈阳药科大学药学院【摘要】目的建立反相高效液相色谱法同时测定大黄-附子药对中5个蒽醌成分——大黄酚、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素和大黄素甲醚的含量,探讨在不同配伍比例下大黄中化学成分的总体变化。方法采用反相高效液相色谱法,Diamonsil-C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相:甲醇-水(含1.0%醋酸)梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长:430 nm。结果大黄酚、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素和大黄素甲醚的线性范围分别为0.010 6~0.212 0、0.002 720~0.054 4、0.002 520~0.050 40、0.002 560~0.051 20、0.002 760~0.055 20 mg.mL-1,相关系数分别为0.999 5、0.999 3、0.999 6、0.999 7、0.999 3。平均加样回收率(n=5)分别为:(101.1%±1.8%)、(102.8%±2.6%)、(96.7%±1.5%)、(100.9%±2.1%)、(99.6%±2.4%)。通过欧式距离(又称二阶Minkowski)比较,大黄附子配伍比例1?1时与单味大黄的化学成分含量总体差异最大。结论该方法快速、准确、重...http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061202_381803_2379123_3.jpg

HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量张红霞，金艺，许海燕，赵怀清(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016)摘要：目的建立胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱：Diamonsil c18(4．6 mm×200 mm，5弘m)，以甲醇一体积分数为0．1％的磷酸水溶液(体积比为82：18)为流动相，流速：1．0 mL·min～，柱温：35℃，检测波长：254 nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在1．42～12．79、2．02～18．14、1．28～11．52、0．76～8．36 mg·Lo内呈良好的线性关系，相关系数分别为O．999 1、O．999 4、O．999 0和0．999 6，平均回收率分别为102。7％(RSD=l。0％，魁=9)、10l。2％(RSD=2．7％，露=9)、99．4％(RSD=1。6％，n=9)和97．9％(RSD=2．8％，咒=9)。结论本方法可作为胃力片质量控制方法之一。关键词：胃力片；大黄酸；大黄素；大黄酚；大黄素甲醚；高效液相色谱法http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241901_379466_2355529_3.jpg

【作者】 骆红梅； 童红； 何斌；【机构】 贵阳中医学院第二附属医院药剂科； 贵州省药品检验所； 贵州得轩堂制药有限公司 贵州贵阳550001； 贵州贵阳550004； 贵州贵阳550008；【摘要】 目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定热淋清软胶囊中槲皮素的含量。方法采用DiamonsilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相,检测波长为360nm。结果热淋清软胶囊中槲皮素线性范围为0.0164～0.1476μg,r=0.99985,平均回收率为99.54%,RSD为0.52%。结论HPLC法简单,操作方便,重现性好,能有效地控制药品质量。 更多还原【关键词】 热淋清软胶囊； 槲皮素； 高效液相色谱法； 含量测定； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271642_386527_2352694_3.jpg

作者：唐勇; 周春菊;（湖南省怀化市药品检验所;）摘要：目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定阴炎净洗液中蛇床子素含量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(70∶30∶0.1),流速为1.0mL/min,紫外检测波长为322nm,柱温为室温。结果蛇床子素进样量在0.03848～0.3848μg范围内与峰面积线性关系良好,r=1.0000(n=5),平均加样回收率为99.00%,RSD=1.04%(n=9)。结论HPLC法准确、简便、快速,可作为阴炎净洗液中蛇床子素含量的测定方法。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271106_386364_1606903_3.jpg

[align=center][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]水中低含量微囊藻毒素[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]（[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]RR[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]）[/color][/size][/font][font='helvetica'][size=21px][color=#333333]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱[/url]法检测[/color][/size][/font][/align][font='helvetica'][color=#333333]摘要[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 本文用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测水中微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]），针对水中微囊藻毒素含量低，难检出问题，对常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]做了两种优化改进，在线富集进样、大定量进样，大大降低了检出限，获得了满意的结果。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 关键词[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]在线富集[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]大定量进样[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] [/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]检出限[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]前言[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]具有[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]较强的[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]毒性及危害性。随着中国水体富营养化程度[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]加剧，蓝藻水华和赤潮的发生逐渐增加。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]80%[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]的蓝藻水华都可以检测出次生代谢产物[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]----[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]microcystins[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]MCs[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]），它对水体环境和人群健康的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 环境改善[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]检测[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]、防控[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]和治理是必不可少的工作内容。本文主要介绍水中低含量[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]的检测方法。[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333] 本方法检出限低或超低，主要针对[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]水中低含量微囊藻毒素（[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]RR[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]，[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]适用于饮用水、湖泊水、河水、地表水等[/color][/font][font='helvetica'][color=#333333]水样检测。[/color][/font] 本方法参考《GB/T 5750.8-2006 生活饮用水标准检验方法 有机物指标》中第13部分 微囊藻毒素，优化出两种检测方案。实验部分方案一：[align=left] 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测。 [/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932297209_8902_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图1 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测流程图[/align] 仪器配置：高压输液泵2台，在线脱气机（两路以上脱气）1台，六通自动进样阀2个（1个带2ml定量环1套，一个带富集柱1根），预柱1根，色谱柱1根，柱温箱1台，紫外检测器1台，三通电磁阀1个，进样泵（或高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]自动进样器）1台，工作站1套，配件1套（包括废液桶、管路、接头等）。 核心部件： 核心部件1：进样系统。进样系统包括两个进样阀，一个在定量环处连接适当的管路作为定量环，负责定量进样，另一个在定量环处连接富集柱，负责把大量的样品富集到富集柱这样一个小的容积内。两个进样阀的切换由程序按照进样过程时间表时间控制。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932300237_5409_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图2 六通自动进样阀[/align] 核心部件2：富集柱。富集柱有分体的和一体的，分体富集柱市面上较常见，包括柱体、柱芯，柱芯污染或故障后可随时更换，具有较好的性价比。选择和色谱柱相同或相近类型填料（粒径3.5μm～10μm，长度3㎝左右），能大量富集低浓度水样品。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932303506_3493_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图3 富集柱[/align] 核心部件3：色谱柱。该检测方法对色谱柱要求较高，要求色谱柱耐污染能力强，耐水性，分离速度快，分离效果好，色谱峰形好等。本文选择的这款色谱柱通过对孔径、比表面和碳含量等色谱参数的优化，绝佳的平衡了保留、分离度、耐污染关系，寿命较长。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932303235_7720_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图4 色谱柱[/align]色谱条件：色谱柱：ODS C[size=9px]18[/size]色谱柱，Venusil XBP (L) 4.6mm×150mm×5μm流动相：流动相A（色谱洗脱液）：乙腈：水：三氟乙酸=40%：60%：0.05%流动相B（富集液）：甲醇：水=15%：85%进样过程（以2ml进样体积为例）时间表，A、B输液泵保持持续运行[table][tr][td][align=center]时间（min）[/align][/td][td][align=center]进样状态[/align][/td][td][align=center]进样过程[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td]装样，进样泵启动[/td][td]样品由进样泵注入定量进样阀定量环中[/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]富集，进样泵停止[/td][td]切换定量进样阀，样品由输液泵B带入富集进样阀富集柱中[/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td]进样[/td][td]切换富集进样阀，富集柱中样品由输液泵A带入色谱柱，样品进入色谱柱由洗脱液（流动相A）洗脱后进入检测器检测，最后排入废液桶中[/td][/tr][tr][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]定量、富集进样阀恢复初始状态，进样泵启动[/align][/td][td]通过切换进样泵前三通电磁阀，进样泵将清洗液注入定量进样阀，清洗定量环[/td][/tr][tr][td][align=center]15[/align][/td][td][align=center]进样泵停止[/align][/td][td]该进样、检测周期完成[/td][/tr][/table]流速：1ml/min检测器：紫外检测器检测波长：238nm柱温：35℃ 工作流程：输赢泵A、B保持正常运行。进样泵向定量进样阀注入处理好的样品，定量后切换该进样阀，样品由流动相B（富集液，来自输液泵B）带入富集进样阀富集柱，富集在富集柱中。切换富集进样阀，样品由流动相A（洗脱液，来自输液泵A）经过预柱后带入色谱柱，样品在色谱柱中经过流动相A洗脱逐渐分离，分离后的样品由流动相A带入紫外检测器检测，检测谱图及结果在电脑工作站中显示储存，检测完成后样品及流动相A流入废液桶中。进样泵完成对管路及进样阀清洗后各工作单元恢复初始，该检测周期完成。 试验对比（进样量相同，进样体积不同）： 直接进样20μl，标准样品浓度20ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932306387_4566_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图5 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度20ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.6μAu，样品峰高32μAu，标准样品浓度20ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约6.75 ng/ml。 在线富集进样2ml，标准样品浓度0.2ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932307364_8661_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图6 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度0.2ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.5μAu，样品峰高28μAu，标准样品浓度0.2ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约0.073 ng/ml。 直接进样20μl，标准样品浓度400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932306672_3479_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图7 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度400ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测400ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.33min，峰高631，峰面积13205。 在线富集进样2ml，标准样品浓度4ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932309444_5108_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图8 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度4ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测4ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.76min，峰高542，峰面积12541。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的94.97%。 4ng/ml样品经过固相萃取、氮气吹干、定量等前处理富集后直接进样20μl，样品浓度等效直接进样400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932310791_9645_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图9 微囊藻毒素（RR）标准样品经过固相萃取等前处理色谱图[/align] 该检测方法检测，保留时间7.30min，峰高615，峰面积11495。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的87.05%。小结： 直接进样20μl，检出限约6.75 ng/ml；在线富集进样2ml，检出限约0.073 ng/ml，检出限比直接进样低92.47倍（进样量相同，进样体积相当于100倍），实现更低检出限（进样体积还可以更大，检出限会更低）检测。直接进样20μl，样品浓度400ng/ml，色谱峰面积13205；在线富集进样2ml，样品浓度4ng/ml，色谱峰面积12541，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的94.97%（该处介绍的是富集过程中样品损耗情况。色谱检测标准品和样品在同一色谱系统中进行，采用外标法分析，外标法对检测结果影响很小）；经固相萃取、氮气吹干等前处理后进样20μl，样品浓度等效400ng/ml（不考虑前处理损耗），色谱峰面积11495，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的87.05%。 在线富集高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检出限低，富集过程中的损耗较实验室富集前处理损耗低，可实现水中低含量甚至超低含量微囊藻毒素（[font='times new roman']RR[/font]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法在线检测。 该方案的优势： 检出限非常低。样品中微囊藻毒素含量如果非常低的话，常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法是根本无法检测出来的（国标《GB/T 5750.8-2006 生活饮用水标准检验方法 有机物指标》是在实验室样品经过前处理，将5L水样浓缩到1ml，进样量20μl，检出限为0.06μg/L，不考虑前处理，直接进样检出限相当于6ng/ml，这个检出限在常规方法中算是低的）。该方法可根据样品中微囊藻毒素的含量选择适当的进样量，进样量0.01ml～1000ml（甚至更大）可选，进样体积由所安装的定量环容积决定。检出限能降低几十、几百、甚至几千倍，是低含量尤其是在线低含量微囊藻毒素水样检测的好方法。方案二： 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测。 在检测允许范围内进样量尽可能大（只针对低含量样品），保证色谱峰高足够高，以减小分析误差。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法分析，进样量大会影响色谱峰宽及色谱峰形，所以进样量也只能在一个合理的范围，不能无限大。既要保证进样量大又要保证色谱峰宽及色谱峰形，色谱条件的选择非常关键，尤其是色谱柱和流动相。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932310119_8947_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图10 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测流程图[/align] 仪器配置：高压输液泵1台，六通自动进样阀1个（带1套0.5ml定量环），色谱柱1根，柱温箱1台，紫外检测器1台，三通电磁阀1个，进样泵（或高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]自动进样器）1台，工作站1套，配件1套（包括废液桶、管路、接头等）。 核心部件：色谱柱。该检测方法对色谱柱要求较高，要求色谱柱耐污染能力强，耐水性，分离速度快，分离效果好，色谱峰形好等。本文选择的这款色谱柱通过对孔径、比表面和碳含量等色谱参数的优化，绝佳的平衡了保留、分离度、耐污染关系，寿命较长。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932312862_9074_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图11 色谱柱[/align]色谱条件：色谱柱：ODS C[size=9px]18[/size]色谱柱，Venusil XBP (L) 4.6mm×150mm×5μm流动相：乙腈：水：三氟乙酸=40%：60%：0.05%进样过程（以0.5 ml进样体积为例）时间表：[table][tr][td][align=center]时间（min）[/align][/td][td][align=center]进样状态[/align][/td][td][align=center]进样过程[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td]装样，进样泵启动[/td][td]样品由进样泵注入进样阀定量环中[/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td]进样，进样泵停止[/td][td]切换定量进样阀，样品由输液泵带入色谱柱中，样品进入色谱柱由流动相洗脱后进入检测器检测，最后排入废液桶中[/td][/tr][tr][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]定量进样阀恢复初始状态，进样泵启动[/align][/td][td]通过切换进样泵前三通电磁阀，进样泵将清洗液注入定量进样阀，清洗定量环[/td][/tr][tr][td][align=center]15[/align][/td][td][align=center]进样泵停止[/align][/td][td]该进样、检测周期完成[/td][/tr][/table]流速：1ml/min检测器：紫外检测器检测波长：238nm柱温：35℃ 工作流程：输液泵保持正常运行。进样泵向进样阀注入处理好的样品，定量后切换该进样阀，样品由流动相（来自输液泵）带入色谱柱，样品在色谱柱中经过流动相洗脱逐渐分离，分离后的样品由流动相带入紫外检测器检测，检测谱图及结果在电脑工作站中显示储存，检测完成后样品及流动相流入废液桶中。进样泵完成对管路及进样阀清洗后各工作单元恢复初始，该检测周期完成。 试验对比（进样量相同，进样体积不同）： 直接进样20μl，标准样品浓度20ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932312483_9082_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图12 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度20ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.6μAu，样品峰高32μAu，标准样品浓度20ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约6.75 ng/ml。 大定量进样0.5ml，标准样品浓度0.8ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932314152_8360_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图13 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度0.8ng/ml色谱图[/align] 该检测方法噪声约3.8μAu，样品峰高33μAu，标准样品浓度0.8ng/ml，按3倍噪声计算检出限，检出限约0.28 ng/ml。 直接进样20μl，标准样品浓度400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932315266_8178_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图14 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度400ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测400ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.33min，峰高631，峰面积13205。 大定量进样0.5ml，标准样品浓度16ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932318086_573_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图15 微囊藻毒素（RR）标准样品浓度16ng/ml色谱图[/align] 该检测方法检测16ng/ml微囊藻毒素（RR），保留时间7.63min，峰高568，峰面积12779。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的96.77%。 4ng/ml样品经过固相萃取、氮气吹干、定量等前处理富集后直接进样20μl，样品浓度等效直接进样400ng/ml，色谱图情况[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209011932319756_5075_2369266_3.png[/img][/align][align=center]图16 微囊藻毒素（RR）标准样品经过固相萃取等前处理色谱图[/align] 该检测方法检测，保留时间7.30min，峰高615，峰面积11495。峰高比直接进样（等效进样量）略低，峰面积相当于直接进样的87.05%。小结： 直接进样20μl，检出限约6.75 ng/ml；大定量进样0.5ml，检出限约0.28ng/ml，检出限比直接进样低24.11倍（进样量相同，进样体积相当于25倍），实现更低检出限检测。直接进样20μl，样品浓度400ng/ml，色谱峰面积13205；大定量进样0.5ml，样品浓度16ng/ml，色谱峰面积12779，等效进样量峰面积是直接进样峰面积的96.77%（该处介绍的是常规进样和大定量进样检测的差别。色谱检测标准品和样品在同一色谱系统中进行，采用外标法分析，外标法对检测结果影响很小）。 大定量进样高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检出限低，进样过程中的损耗较实验室富集前处理损耗低，可实现水中低含量微囊藻毒素（[font='times new roman']RR[/font]）高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法在线检测。 优势：检出限低。样品中微囊藻毒素（RR）含量较低，常规高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法无法检出。该方法可根据样品中微囊藻毒素的含量选择适当的进样量（定量环），进样量在0.02 ml～0.6ml范围可选。这样检出限就能降低几倍到几十倍。仪器配置相对简单，成本低很多。该方法是样品中微囊藻毒素（RR）含量较低时比较理想（可以优先考虑）的检测方法。 结论：以上两种检测方案都能较好的检测含量较低的微囊藻毒素（RR）样品，区别是第一种方案进样量更大检出限更低，更适用于超低含量检测，但仪器配置较复杂，成本较高。第二种方案检出限没有第一种低，但仪器配置较简单，成本较低，适用于较低含量检测。具体检测时可根据实际情况选择理想的检测方法，从而达到更满意的结果。 以上两种方法检出限均较低，可供其它低含量样品高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测（在线富集进样或大定量进样）参考。参考文献[font='calibri']［[/font]1[font='calibri']］[/font][font='calibri']GB/T 5750.8-2006[/font] 生活饮用水标准检验方法 有机物指标.[font='calibri']［[/font]2[font='calibri']］[/font][font='calibri']GB/T 20466-2006 水中微囊藻毒素的测定[/font][font='calibri'].[/font][font='calibri']［[/font]3[font='calibri']］[/font][font='calibri']在线固相萃取-高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法测定水体中的多环芳烃 陈静等 分析化学（FENXI HUA XUE）研究报告 2014：[/font][font='calibri']1785-1790.[/font]

【作者】 马纪伟，闫冬良【机构】 (南阳医学高等专科学校继续教育学院，河南南阳473058)【摘要】 目的：测定天麻胶囊中天麻素的含量。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Damonsil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；乙腈-0.2% 磷酸(3：97)为流动相，流速：1.0 mL/min；检测波长221 nm。结果：天麻素在0.152～5．003 μg范围内具有良好线性关系，平均回收率为98.4%，RSD为1.4%。结论：该法可用于天麻胶囊中天麻素的含量测定。【谱图】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142043_383867_1609970_3.jpg

【作者】：何巧君，高幼衡，魏志雄【摘要】：目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定鼻炎片中升麻素苷含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为迪马Diamonsil C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(18∶12∶70);流速为1.0mL/min;检测波长为254nm。结果升麻素苷在0.1888～1.534μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,相关系数r=0.9997,加样回收率为101.74%,RSD为2.97%。结论该方法快速、准确,可用于鼻炎片的质量控制。关键词：鼻炎片；升麻素苷；高效液相色谱法【作者单位】： 广州中医药大学中药学院【关键词】：鼻炎片；升麻素苷；高效液相色谱法http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207311352_380873_1838299_3.jpg

作者：胡冠宇;夏醒醒;尹政;陈勤;（安徽大学生命科学学院;安徽省中药研究与开发重点实验室;）摘要：目的通过测定药用植物虎杖在不同季节时其不同生长部位中的有效成分大黄素含量及其变化规律,旨在为虎杖的最佳采收时间提供依据。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(80∶20)为流动相;检测波长:254nm;流速:1.0mL/min;柱温:27℃;进样量:20μL。结果通过测定不同季节虎杖的茎叶与根中的大黄素含量,发现根中大黄素含量最高,且大黄素含量在8月最高。结论虎杖在生长发育过程中,大黄素含量变化是有规律的,可根据其根中的大黄素含量确定最佳的采收时间。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131105_383412_1606903_3.jpg

【作者】 蔡兴东； 刘新；【机构】 重庆医科大学药学院； 重庆医科大学药学院 重庆400016； 重庆400016；【摘要】 目的:建立生发凝胶中辣椒素含量测定的高效液相色谱方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸(65∶35)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为280nm,柱温为40℃。结果:辣椒素在5.0~100.0mg.L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为101.32%,RSD为1.72%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为生发凝胶中辣椒素的含量测定方法。 【谱图】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142055_383881_1609970_3.jpg