液相色谱冲柱子保护柱

液相色谱柱，如果柱子取下来放置一段时间，需要做什么保护吗?

各位大侠; 因为我刚接触到液相色谱，很多方面都不懂，现请教一下：做样前后柱子的冲洗程序在哪儿设定？我们买的是岛津LC-20A，谢谢了哈！

C18柱有吸收峰冲不出 我的迪马的C18液相色谱柱子，用纯甲醇冲基线是平的，但是用90的水到纯甲醇走梯度，在35分问题补充：我的迪马的C18液相色谱柱子，用纯甲醇冲基线是平的，但是用90的水到纯甲醇走梯度，在35分钟以后会出来很多峰，基线还会漂！我试过走我要测样品的流动相，会对我的样品有很大干扰！我想请教一下，有什么方法，可以把那些峰冲走？我已用90的水到纯甲醇走梯度冲了好久了，没有一点改观！

液相色谱仪用甲醇充柱子，结果甲醇用光了，仪器不工作了，怎么弄。脱气也没有用

在换液相色谱柱子的之前跟之后应注意哪些问题，请高手指点一下，谢谢！

新手做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]，在毕业师兄临走前现学的色谱仪操作。流动相是纯乙腈-30mM磷酸盐缓冲液PH2.3，梯度洗脱程序。自己做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]前，先把流速调到1ml/m，两个流动相各脱气几分钟（因为使用比较频繁，一个星期用三四次），再分别用100%的A/B相冲柱子，冲到基线平了之后再上样，一般每个流动相都会冲十来分钟。参考文献里的梯度洗脱程序有28分钟，每个样结束后有14分钟平衡柱子，而我平衡柱子的方法是每个样跑结束后，就有梯度洗脱程序继续跑，等基线平了之后加下一个样，不知道我的操作是不是对的。还有就是所有样品测完之后，等用梯度洗脱程序把基线冲平之后，一般冲十多分钟，再用100%的甲醇冲20多分钟，最后关闭仪器。不知道我的平衡方法是不是有问题，希望各位大佬们帮我看看。

液相色谱柱的柱效与柱子的内径有关？

液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3／16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7／16英寸外螺纹与1／4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3／16英寸的内螺纹与1／16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2．5mm长或其他固定尺寸)。 在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。 b、柱填料： 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。 正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10 μm之间。 2，色谱柱的安装： a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保护柱)；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，再用扳手继续顺时针拧1／4-1／2圈，切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，请用扳手继续顺时针拧1／4圈，直至不漏液为止。二、液相色谱柱的使用： 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 2、流动相的配制：

液相色谱的柱效与柱子的内径有关吗？

老师您好，请问新买的液相色谱柱，需要经过怎样的冲洗后，使用起来效果最佳？比如C18的柱子、凝胶色谱柱。我看了柱子的说明书，只是说使用后的保存，并没说使用前的。谢谢。

液相色谱的柱效与柱子的内径有关吗？

液相色谱一个样做完以后换另一个样，改变流动相，需要用第二个样的流动相冲洗多久呢，做液相老是出现同样方法同样东西，却不出峰，是哪里有问题呢，

[color=#444444]求助：液相色谱柱，柱子为 waters Sunfire TM C18，柱子堵了，之前做的是丙烯腈的水溶液，每次做完之后用纯甲醇冲洗的。然后发现装上柱子之后，流量为1ml纯甲醇的时候，柱子压力达到了150多，不装柱子的话压力很小。今天我用纯甲醇，甲醇：水=3:7，还有超纯水依次超声了很久，发现压力更大了，变成180多了。我该如何是好，我能反冲洗吗？或者我应该用什么溶剂超声柱子？[/color]

在使用新的液相色谱柱之前需要对柱子进行处理吗？

请问各位高手老师们，有没有专用于邻苯检测的液相色谱柱，或者说用什么样的柱子检测邻苯比较好！真心求教了

液相色谱洗柱子，用1:9有机相和水洗过之后，第二天还用，可以不走纯的有机相了吗？

高效液相色谱仪纯甲醇冲柱子得时候压力184 觉得不正常 为什么？

分离酚酸、醇用的HSS T3柱子是超高效液相柱子，可以用于高效液相色谱的仪器吗？

[align=center][b]谈一谈对液相色谱及其柱子的看法[/b][/align]2010年，我来到单位上班，彼时的单位有一台液相和一台[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，上班一个月以后，我被领导安排到省局技术中心去学习。学习液相色谱的感觉是什么呢？就是看两遍就八九不离十了，我曾经听别人说过，学习液相色谱对于一个外行来说，如果做的样品很单一，一天就差不多了。其实，液相色谱是一项好学难用的仪器。液相色谱的维护是需要相当的细致的。液相色谱涉及的领域很多，标准品、溶剂、色谱柱等诸多环节，每一个环节处理不好都有可能出问题。由于仪器复杂，所以保养不易，高压系统出故障的可能性也很大。液相色谱柱是液相色谱的核心，作为分离通道，非常重要！液相色谱柱的保养才是大学问，有的人使用色谱柱的时候不会保养或者不懂得保养，往往是使用几次以后就峰拖尾很厉害了。早些年我参加液相色谱的能力验证，那个时候能力验证允许的误差还是比较大的，所以色谱柱稍微有点问题，出现轻微的前伸或者拖尾的现象，能力验证还是可以通过的。随着形势的发展，能力验证的D值越来越小，要求越来越高。对色谱柱的要求也越来越高！所以我想借助本论坛，[b]向kromasil的专家提议，能否搞一个色谱柱保养的线上讲座，或者准备一些色谱柱保养的方法文件，以飨读者！色谱柱如果保养的好，是非常得心应手的！如果有系统性生物色谱柱保养手册是非常好的！各位做分析测试的老师也殊为不易，尤其是检测机构混岗很厉害，大家都是全能型选手，全能型选手的另一方面就是整体基础薄弱，很多只涉猎皮毛，这个就需要大家多学多问，我认为仪器信息网论坛的出现也是大家的福音，我们也希望kromasil论坛能够成为大家交流的通道。[/b]

我是准备用生理盐水对硝酸甘油溶液稀释后用液相色谱进行分析，流动相甲醇：水，215nm波长，应该如何清洗柱子呢？还有NaCl会不会在此处有峰，谢谢。

问题: 请教：液相色谱实验中，流动相对柱子压力有什么影响呢回复: 粘度影响压力，流速相同的情况下

正相液相色谱一般用什么柱子？流动相？

[color=#444444]各位：BioRad Aminex 液相色谱柱HPX-87H，在使用前需要用其他的流动相冲洗吗？[/color][color=#444444]之前一直用0.005的稀硫酸作流动相，都还正常。[/color][color=#444444]后来有个老师叫我们上硫酸流动相和使用完了都要用甲醇冲洗柱子以保护！[/color][color=#444444]这么做对吗？我看有些资料说，这柱子碰不得甲醇乙腈的。[/color][color=#444444]现在柱子一上硫酸0.2的流速都200的压力直接爆掉啊……[/color][color=#444444]求指导[/color]

高效液相色谱其他柱子的分析的样品类型？c１８应用很广泛，其他柱子在分析什么样品时使用？请高手指教

1.使用”保护柱”，能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说，”保护柱”即是很短的色谱柱，填装和所使用液相色谱柱相同的填料。正确使用装在液相色谱柱前面的”保护柱”，可以阻拦一些容易损坏液相色谱柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用”保护柱”不当。会造成反效果。因为在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此。使用”保护柱”时，最重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。 2.选择高品质的柱子，并注意使用方法；可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以，选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子，我们知道，任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，柱子更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时，许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变；如此一来，使用旧柱子开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新柱子；并且一支柱子最好使用在一种分析方法上；则柱子寿命可以延长。 3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来，自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。最好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐最好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗，而直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议最好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地最后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前，最好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子，使柱子的寿命延长，最好是使用”保护柱”和定期冲洗柱子

我们有一台岛津10A的液相色谱，平时使用的都很正常，最近总是出现峰型拖尾的现象，排除柱子与样品的问题，检测器的流通池也洗过了，还有检测器的能量有800，基线正常，不知道是什么原因

[align=left] 1.使用”保护柱”，能够延长色谱柱的使用寿命。简单的说，”保护柱”即是很短的色谱柱，填装和所使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱相同的填料。正确使用装在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱前面的”保护柱”，可以阻拦一些容易损坏[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱的物质。而达到延长柱子寿命的效果。如果使用”保护柱”不当。会造成反效果。因为在保护柱使用过程中。如污染达到一定程度而没有及时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此。使用”保护柱”时，最重要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必须要立即更换。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left] 2.选择高品质的柱子，并注意使用方法；可以延长柱子的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的柱子之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但如果厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新柱子之间的品质也有差异。所以，选用柱子时必须选择管理严格的高品质柱子，我们知道，任何柱子使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，柱子更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的柱子。在开发新分析方法时，许多专家建议不要使用旧柱子。因柱子一经使用。柱性会改变；如此一来，使用旧柱子开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新柱子分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新柱子；并且一支柱子最好使用在一种分析方法上；则柱子寿命可以延长。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left] 3.定期冲洗柱子可以延长柱子使用寿命。我们知道柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内。这些杂质不会随着流动相出来，自然会逐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上出现。而造成出现怪峰、基线不平等现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。最好是在每次分析某一产品完成后冲洗。如果分析时使用缓冲剂时﹐最好用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。如果不先用有机和水的混合溶液冲洗，而直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏柱子的品质。使用10-20倍柱体积的量来冲洗基本就足够了。专家建议最好将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析实验程序完毕地最后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将柱子倒反接后再冲洗。打算使用反冲洗处理前，最好先参考柱子的保养说明书。所以要真正保护柱子，使柱子的寿命延长，最好是使用”保护柱”和定期冲洗柱子[/align]转自食品伙伴网

求教高效液相色谱的柱子该如何购买

大家好，我在做液相色谱分析产品以后，已经用水和甲醇冲洗柱子了，但是当我下次再用的时候，我用流动相平衡柱子的时候怎么检测器总是有吸收呀？而且基线一直向上漂。请专家帮助解决，谢谢！

[color=#3e3e3e]摘 要:介绍了影响色谱柱使用寿命的几个因素,探讨了色谱柱规范化管理和保养的经验。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　关键词:高效液相色谱 柱 管理 保养[/color][color=#3e3e3e]　　高效液相色谱法是20世纪70年代急剧发展起来的一项高效、快速的分离、分析技术。液相色谱法是指流动相为液相的色谱技术,在经典的液相色谱法基础上,引入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法理论,在技术上采用高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,实现了分析速度快、分析效率高和操作自动化,它具有高压、高速、高效、高灵敏度等特点。它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂,缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后依次进入检测器,色谱信号由记录仪、积分仪或色谱工作站记录。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　高效色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。因此,有必要加强和规范色谱柱的管理,从而延长[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　色谱柱的使用寿命。本文从影响色谱柱使用寿命的几个因素出发,从管理的角度,探讨色谱柱的维护与保养。[/color][b][color=#3e3e3e]1 色谱柱的类型[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶、离子交换树脂、凝胶或玻璃微球等填充剂。在化学键合硅胶中以十六烷基硅烷键合硅胶最常用,辛基硅烷键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用。近年来,由于蛋白质等生物大分子物质分离提纯技术的飞速发展,离子交换色谱柱、凝胶色谱柱的应用也越来越广。[/color][b][color=#3e3e3e]2 影响色谱柱使用寿命的因素[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]2.1 流动相[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。[/color][color=#3e3e3e]2.2 样品和固定相[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　如果有少量或微量的样品不能够溶解在流动相中,在通过固定相会堵塞柱子。样品中的颗粒杂质也会堵塞柱子。样品组分例如糖、蛋白质等通过柱子时会产生不可逆吸附,这样固定相的活性点被覆盖。样品组分还会与固定相产生反应,尤其是对于氨基柱的影响较为严重,因为氨基易与酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点,使保留时间缩短。色谱柱键合相基团脱落、固定相分解和活性基团变性以及会影响柱效和保留时间的显著改变。大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上,形成带有有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为CnH2n+1),硅氧硅键可能在水溶液中水解而断裂,使键合基团脱落。[/color][b][color=#3e3e3e]3 高效液相色谱柱的管理[/color][/b][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]3.1 色谱柱的管理[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　制定色谱柱管理的标准操作规程并严格执行。每一根新购进的色谱柱必须造册登记,内容包括:生产公司、品名、型号、规格、购进时间、启用时间、单价、柱内保护溶液等。色谱柱分类存放,硅胶柱、化学键合硅胶柱、氰基或氨基柱、离子交换树脂柱、凝胶柱各用一个色谱柱盒,盒上贴上标签,注明类别。随柱说明书装入密实袋附在登记本上。每启用一根色谱柱,在色谱柱上贴上标签,注明启用日期。每根柱子每两个月保养一次,特别是对于一些使用频率少的柱子,因为放置时间长,容易干柱,每一次做好保养记录。对于确已失效的柱子,做好停用记录,不能随意丢弃,专门存放,如果现用的柱子的填料需要填补,可以用存放的柱子的填料。在从事生产的单位的质检部门,对于使用时间较长柱效降低的柱子,可把它用于检测产品的中间体。[/color][color=#3e3e3e]3.2 色谱柱的保养[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　色谱柱使用一段时间后,常遇到柱子被污染,柱效会有一定程度的下降,采用适当的方法对色谱柱进行保护,可以延长色谱柱的使用寿命。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　样品和流动相的处理:溶解的样品进样前用滤膜过滤,以除去不溶物。如果必要,需进行样品的预处理。流动相中如有不纯物质将影响柱效,所以溶剂尽量使用色谱级别的,至少是分析纯级别,流动相使用前用微孔薄膜过滤。在流动相的输液管前安装过滤器。过滤器定期用甲醇超声清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。对于堵塞严重的过滤器,可在火焰上灼烧后再清洗。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　保护柱(预柱)的使用:对于较昂贵的色谱柱,可以在柱前加一保护柱,防止样品中杂质污染分析柱,对于制备柱,因其进样量大,使用保护柱尤为重要。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗 键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→左)和净化(左→右)两种。硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按下列顺序冲洗:三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。键合相硅胶柱:蒸馏水←→甲醇(冲洗过程中可加入少量二甲基甲酰胺)。离子交换树脂柱:高浓度的NaCl溶液(1-2molL的NaCl溶液)可使大部分树脂再生,油脂等少数与树脂紧密结合的物质可用低浓度碱溶液(如0.1molL的NaOH溶液)冲洗,酸性有机物吸附在固定相的用低pH缓冲液冲洗,碱性有机物用高pH缓冲液冲洗,然后再用蒸馏水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸馏水冲洗。凝胶色谱柱:由于凝胶色谱柱是根据被分离物质的分子量大小而分离物质,通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂(0.2%-1%NP-40或Lubrol)冲洗可除去大部分的结合物质,如果一些污染物仍然不能清除时,用24%或30%乙腈冲洗过夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去亲水蛋白,用蛋白水解酶处理可分解凝胶中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸馏水←→甲醇←→蒸馏水冲洗。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　已污染的色谱柱的处理:因保留强的物质污染,流动相或样品中不溶物沉积于柱头,可用下列方法洗涤:去除脂类可用四氢呋喃、乙腈或甲醇洗涤 去除蛋白质可用乙腈、丙醇和1%三氯乙酸进行梯度洗脱 一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脱,同时反复注入100-200ml的四氢呋喃。[/color][color=#3e3e3e][/color][color=#3e3e3e]　　柱头处理:对于柱头堵塞污染严重的情况而且用溶剂冲洗无效的色谱柱,只有打开柱子去除柱顶的填料重装:先拆下不锈钢烧结过滤器,检查柱床,常见凹陷或受污染的带色填料,剔去不规则床层和带色填料,使柱床显白色并完全水平,再用甲醇作糊状填料匀浆液,将糊状填料匀浆液滴在柱上靠重力从匀浆液中排出甲醇液,重复直到填料水平。[/color][color=#3e3e3e]　　柱子的贮存:首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。极性色谱柱可用适当溶剂如二氯甲烷冲洗 键合相色谱柱用甲醇冲洗 阴离子交换色谱柱用0.002%洗必泰(双氯苯双胍己烷)的缓冲液冲洗,阳离子交换色谱柱用0.005%硫柳汞缓冲液冲洗 凝胶色谱柱用缓冲液中加0.02%叠氮化钠或用20%乙醇冲洗。再将柱子两头密封,以防止溶剂蒸发使柱子干燥而引起柱子结构的几何学改变。[/color]