液相色谱定量面积归法

普通最小二乘（OLS）线性回归法被广泛用于逼近线性外部校准数据。然而，高方差假设通常不被认为是正确数据近似的要求，这可能导致较差的回归拟合，这点在浓度较低的区间范围往往更为突出。电感耦合等离子体中的异方差?质谱（ICP-MS）数据已在文献中作为一个固有问题进行了讨论，通过在多个研究中使用加权最小二乘（WLS）回归可以更好地解决。在这项研究中，通过激光剥蚀进样系统（LA）的方法，研究了OLS和WLS线性回归模型对定量成像实验的影响——使用矩阵匹配标准的ICP-MS。发现该技术产生的校准数据在所有60个分析数据集中都是异方差的，这导致OLS线性回归的回归拟合较差。与传统的ICP-MS分析相比，由于回归线截距的估计不准确，在LA-ICP-MS成像中，所产生的负面影响变得更加明显。此外，计算选定感兴趣区域（ROI）的平均浓度会在校准范围的低端产生不正确的量化结果。WLS线性回归的应用导致了拟合优度（GOF）的提高，尽管权重因子应谨慎选择。除了每个校准标准的方差倒数（1/si2）之外，还评估了文献中讨论的关于GOF的更多经验加权因子。

采用柱前衍生反相高效液相色谱法分析棉籽粕中十八中氨基酸，衍生试剂为优选的某专用试剂，流动相为醋酸盐缓冲溶液、乙腈、水，二元梯度洗脱，色谱柱为AAK氨基酸专用柱，紫外检测。该方法使用LC-5500液相色谱仪，定性重复性好，定量准确。

本文参考2020版《中国药典》中记载的中药材当归液相色谱分析方法，筛选合适的色谱柱，并参照0512通则进行UHPLC方法转换。实验结果显示，可以实现当归样品中阿魏酸与杂质峰的良好分离，目标峰峰形良好，阿魏酸峰理论塔板数大5000，满足药典要求。

采用柱前衍生反相高效液相色谱法分析棉籽粕中十八中氨基酸，衍生试剂为优选的某专用试剂，流动相为醋酸盐缓冲溶液、乙腈、水，二元梯度洗脱，色谱柱为AAK 氨基酸专用柱，紫外检测。该方法使用LC-5500 液相色谱仪，定性重复性好，定量准确。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定化妆品中溴米索伐和卡溴脲的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL，检测器为二极管阵列检测器，检测波长为210nm。实验结果：溴米索伐和卡溴脲的分离度为13.51，其理论塔板数分别为14956和17920，拖尾因子分别为1.12和1.09；重复性测试中，将混合标准溶液连续进样7针，溴米索伐保留时间的RSD为0.142%，峰面积的RSD为0.429%，卡溴脲保留时间的RSD为0.113%，峰面积的RSD为0.410%；灵敏度测试中，溴米索伐的仪器检出限为0.014μg/mL，仪器定量限为0.046μg/mL，卡溴脲的仪器检出限为0.035μg/mL，仪器定量限为0.115μg/mL；溴米索伐和卡溴脲在测定浓度范围内均具有良好的线性关系，确定系数R2均＞0.999；对啫喱面霜试样进行测定，溴米索伐和卡溴脲均未检出，加标回收率分别为104.4和101.6%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪满足《GB/T 40899-2021 化妆品中禁用物质溴米索伐、卡溴脲和卡立普多的测定 高效液相色谱法》中溴米索伐和卡溴脲含量测定的需求。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定木贼中山奈酚的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL，检测波长为365nm。实验结果：山奈酚峰的理论塔板数为16783，拖尾因子为1.13；在连续进样7针的重复性测试中，山奈酚保留时间的RSD为0.210%，峰面积的RSD为0.237%；山奈酚的仪器检出限为0.013μg/mL，仪器定量限为0.042μg/mL；对木贼样品进行测定，木贼中山奈酚的含量为0.10%，加标回收率为100.5%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪可以满足《中国药典（2020年版）》一部中木贼中山奈酚含量测定的需求。

本文建立了使用液相色谱仪-三重四极杆质谱仪测定婴幼儿配方奶粉中甲基香兰素和乙基香兰素的方法。通过高效液相色谱分离，三重四极杆质谱仪进行定量分析两种香兰素，甲基香兰素和乙基香兰素在1~500 μg/L 浓度范围内线性良好，标准曲线相关系数均在0.999以上；重复性实验表明2.5 μg/L，25 μg/L 和250 μg/L 混合标准溶液连续进样6 次，保留时间和峰面积相对标准规偏差分别在0.5%和2%以下；甲基香兰素和乙基香兰素的最低定量限分别为1.00 μg/L 和0.80 μg/L；空白样品中加入50 μg/kg 甲基香兰素和乙基香兰素，回收率分别为87.2%和79.8%。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定饲料中五种磺胺类药物的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为40℃，进样量为20μL，检测器为紫外检测器，检测波长为270nm。实验结果：重复性测试中，将磺胺类药物混合标准溶液连续进样7针，保留时间的RSD范围为0.000%~0.040%，峰面积的RSD范围为0.061%~0.201%；磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉的仪器检出限均不大于0.010μg/mL，仪器定量限均不大于0.034μg/mL；五种磺胺类药物在测定浓度范围内均具有良好的线性关系（R2≥0.9999）。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪满足《GB/T 19542-2007 饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法》中五种磺胺类药物含量测定的需求。

该资料全面，准确的讲解了高效液相色谱在日常工作中的应用。详细说明了，使用高效液相时应当注意的事项。内容讲到：高效液相色谱（HPLC）分析中，流动相溶剂的纯度和质量对分析结果和仪器本身都有重要影响。溶剂中的各种痕量杂质不仅会造成较高的基线和鬼峰，进而影响定性定量分析结果，而且可能会污染分离柱和堵塞系统，造成仪器出现故障。了解HPLC溶剂规格和相关的测试方法，可以帮助HPLC 用户评价和筛选HPLC溶剂，减少溶剂杂质对应用造成的负面影响。本文介绍了基于紫外（UV）吸收和HPLC梯度确定HPLC级乙腈纯度和质量的两种规范方法及其对HPLC分析的意义，并探讨了这两种方法的实际应用。

本文建立了高效液相色谱仪分析牛肉中肌苷酸的分析方法。结果表明：仪器定量限低于0.02 μg/mL 0.55-221.28 μg/mL浓度范围内，校准曲线线性良好，相关系数为0.9999；11.06 μg/mL标样连续6针测试结果显示，肌苷酸保留时间和峰面积RSD值分别不高于0.20%和0.22%，仪器精密度良好；牛肉样品加标（50 μg/mL肌苷酸）平行测定三次，平均回收率为104.5%，相对标准偏差为1.58%。该方法快速简单，灵敏度高，重复性和回收率好，适合牛肉中肌苷酸含量的检测。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定化妆品中卡立普多的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL，检测器为蒸发光散射检测器。实验结果：卡立普多的理论塔板数为17399，拖尾因子为1.05；重复性测试中，将卡立普多标准溶液连续进样7针，卡立普多保留时间的RSD为0.051%，峰面积的RSD为2.697%；灵敏度测试中，卡立普多的仪器检出限为6.674μg/mL，仪器定量限为22.248μg/mL；卡立普多在测定浓度范围内具有良好的线性关系，确定系数R2大于0.99；对护手霜试样进行测定，卡立普多均未检出，加标回收率为114.2%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪满足《GB/T 40899-2021 化妆品中禁用物质溴米索伐、卡溴脲和卡立普多的测定 高效液相色谱法》中卡立普多含量测定的需求。

电位滴定法原理：非水滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法，主要用于测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机盐。糖精钠属于有机弱碱，利用冰醋酸做酸性溶剂，使其显著增强相对碱性，利于使用高氯酸进行滴定。电位滴定法无需使用指示剂，依据溶液电位值突越来判定终点。高效液相色谱法原理：样品加温除去二氧化碳和乙醇，调pH近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性定量。

本文使用岛津超高效液相色谱仪建立化妆品中38种准用着色剂的测定方法。本方法参考GB/T37545-2019《化妆品中38种准用着色剂 高效液相色谱法》标准中的液相色谱法，建立一针分析38种着色剂的定量方法；同时展示了iPDeA的功能在多物质分析中的应用。本实验结果显示38种组分的校准曲线相关系数均在0.997以上；对不同浓度的混合标准溶液，各平行测试6次，各化合物的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.02%~ 0.45%和0.14%~3.16%；并对实际样品进行测试。方法可靠，供相关人士参考。

为探究不同产地当归活性成分的差异，采用全谱二维液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用非靶向代谢组学测定方法，对甘肃、云南当归中的活性成分进行比较。采集后数据经MS-DIAL软件进行峰提取和对齐后，采用Metaboanalyst进行统计学分析，经数据库比对、Labsolutions Insight Explore鉴定差异活性成分。结果表明，全谱二维液相色谱（Polarity-Extended Liquid Chromatography-PELC）方法相对于一维液相色谱（One-Dimensional Liquid Chromatography -1D-LC）方法可提高当归成分的分析覆盖率；通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)发现不同产地的当归存在显著差异；经数据库比对、Labsolutions Insight Explore软件预测共鉴定出43种差异性化合物，包括苯酞类、有机酸类等天然活性物质。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定头孢克洛的有关物质。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为35℃，进样量为20μL，检测器为紫外-可见光检测器，检测波长为220nm。实验结果：头孢克洛峰的保留时间为23.742min；头孢克洛峰与头孢克洛δ-3-异构体峰之间的分离度为10.92；头孢克洛峰的拖尾因子为0.96；峰面积小于对照溶液主峰面积0.5倍且大于对照溶液主峰面积0.1倍的杂质峰共有10个，且各杂质含量在0.11%~0.29%之间，总杂的含量为1.76%；对照溶液连续进样7针重复性测试中，头孢克洛保留时间的RSD为0.099%，峰面积的RSD为0.083%；头孢克洛灵敏度溶液的信噪比S/N为101.7。

本文利用高效液相色谱仪，建立了一种水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的测定方法。本方法参考《HJ1192-2021水质 9种烷基酚类化合物和双酚A的测定 固相萃取/高效液相色谱法》，以外标法定量，双酚A、4-叔丁基苯酚、4-丁基苯酚、4-戊基苯酚、4-己基苯酚、4-叔辛基苯酚、4-庚基苯酚、4-支链壬基酚、4-辛基苯酚、4-壬基酚在20~1000 µ g/L浓度范围内各组分线性关系良好，各组分相关系数均达到0.9999以上，方法检出限为0.05 μ g/L，方法定量限为0.1 μ g/L。对高中低三个水平的混合标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积重复性良好。加标回收实验中，各组分回收及精密度良好。该方法简单方便，能有效检测水质中9种烷基酚类化合物和双酚A的含量。

本文参考2020版《中国药典》中记载的中药材桂枝液相色谱分析方法，筛选合适的色谱柱。实验结果显示，可以实现桂枝样品中桂皮醛与杂质峰的良好分离，目标峰峰形良好，桂皮醛峰理论塔板数大于3000，满足药典要求。

本文参考2020版《中国药典》中记载的中药材肉桂液相色谱分析方法，筛选合适的色谱柱，并参照0512通则进行UHPLC方法转换。实验结果显示，可以实现肉桂样品中桂皮醛与杂质峰的良好分离，目标峰峰形良好，桂皮醛峰理论塔板数大于3000，满足药典要求。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定苦杏仁中苦杏仁苷的含量。色谱条件：色谱柱为C18 色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量为10μL，检测波长为207nm。实验结果：苦杏仁苷的理论塔板数为9572；苦杏仁苷标准溶液连续进样7针，保留时间的RSD为0.130%，峰面积的RSD为0.709%；苦杏仁苷在测定浓度范围内具有良好的线性关系（R2=0.9997）；苦杏仁苷的仪器检出限为0.271μg/mL，仪器定量限为0.904μg/mL，满足《中国药典（2020年版）》中使用高效液相色谱法测定苦杏仁中苦杏仁苷含量的要求。

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪和三重四极杆质谱仪联用测定动物源性食品中14种喹诺酮类抗生素的方法。样品经处理后，用超高效液相色谱LC-30A在7 min内实现快速分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8040进行定量分析。使用外标法内绘制14种喹诺酮类抗生素的校准曲线，线性良好，相关系数为0.999以上；对不同浓度的标准溶液进行精密度实验，连续6次进样保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.437 %和4.937%以下，表明仪器精密度良好。

本方案建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪和三重四极杆质谱仪联用测定动物源性食品中7种四环素类抗生素残留的方法。样品经处理后，用超高效液相色谱LC-30A快速分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8040进行定量分析。使用外标法内绘制7种四环素类抗生素的校准曲线，线性范围宽，校准曲线的相关系数均在0.999以上。对20 μg/L、50 μg/L和100 μg/L混合标准溶液进行精密度实验，连续6次进样保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.014%~0.122%和2.459%~3.987%之间，系统精密度良好。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定氟苯尼考粉中氟苯尼考的含量。色谱条件：色谱柱为C18 色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量为10μL，检测波长为224nm。实验结果：甲砜霉素峰与氟苯尼考峰的分离度为18.85；氟苯尼考峰的理论塔板数为16754；重复性测试中，将氟苯尼考标准溶液连续进样7针，保留时间的RSD为0.000%，峰面积的RSD为0.119%；灵敏度测试中，氟苯尼考的仪器检出限为0.029μg/mL，仪器定量限为0.096μg/mL；氟苯尼考在测定浓度范围内具有良好的线性关系，确定系数R2为0.9999；对氟苯尼考粉进行含量测定，其氟苯尼考的含量为22.9%，加标回收率为96.4%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪满足《中国兽药典（2020年版）》中氟苯尼考粉中氟苯尼考含量测定的需求。

本文建立使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8045联用技术测定鲮鱼罐头中9种生物胺的方法。通过深度的方法优化，使用该方法分析9种生物胺，8种生物胺线性相关系数均大于0.9950, 仅精胺因碱性过大，其线性相关系数为0.9920。该方法测试的灵敏度高，各化合物仪器定量限在1.01 μg/L~7.52 μg/L之间，大大高于常规液相色谱法的灵敏度。各化合物的峰形良好，精密度高，不同浓度水平的标准溶液连续进样7次，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.18%和5.76%以下。本测试方法灵敏度高、分析简单、快速，可满足食品类样品中生物胺的检测需求。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定苍耳子中绿原酸的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为5μL，检测波长为327nm。实验结果：绿原酸峰的理论塔板数为9948；在连续进样7针的重复性测试中，绿原酸保留时间的RSD为0.162%，峰面积的RSD为0.391%；绿原酸的仪器检出限为0.104μg/mL，仪器定量限为0.345μg/mL；对苍耳子样品进行测定，苍耳子中绿原酸的含量为0.54%，加标回收率为87.9%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪可以满足《中国药典（2020年版）一部》中苍耳子中绿原酸含量测定的需求。

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定饲料中含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸）的含量。首先将饲料中的含硫氨基酸用过甲酸溶液水解为磺基丙氨酸和蛋氨酸，再通过异氰酸苯酯将其衍生为带紫外吸收的衍生物后，采用反相色谱法进行测定，色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.0mL/min，柱温为40℃，进样量为10μL，检测器为紫外-可见光检测器，检测波长为254nm。实验结果：磺基丙氨酸的理论塔板数为15275，拖尾因子为0.99；蛋氨酸砜的理论塔板数为245479，拖尾因子为0.87；混合标准溶液连续进样7针，磺基丙氨酸保留时间的RSD为0.296%，峰面积的RSD为0.543%；蛋氨酸砜保留时间的RSD为0.045%，峰面积的RSD为0.533%；磺基丙氨酸的仪器检出限为0.103µg/mL，仪器定量限为0.345µg/mL；蛋氨酸砜的仪器检出限为0.022µg/mL，仪器定量限为0.073µg/mL；磺基丙氨酸和蛋氨酸砜在测定浓度范围内，曲线的确定系数R2均大于0.999；饲料试样测试中，豆粕试样中胱氨酸和蛋氨酸的含量分别为0.59%和0.65%，平行样间的偏差分别为0.89%和1.93%；葵饼试样中胱氨酸和蛋氨酸的含量分别为0.52%和0.70%，平行样间的偏差分别为1.78%和1.48%；加标回收实验中，胱氨酸的回收率范围为93.7%~94.7%，蛋氨酸的回收率范围为99.0%~101.1%。

本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A 和三重四极杆质谱仪LCMS-8040 联用建立一种外标法测定化妆品中丙烯酰胺的方法。借助超高效液相色谱LC-30A 在2.5 min 内实现快速分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8040 进行定量分析，因此可以快速、准确地测定丙烯酰胺。丙烯酰胺的线性良好，相关系数0.9999；不同浓度的精密度实验结果表明：其保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.09 ~ 0.28%和1.35 ~ 1.54%之间，仪器精密度良好；丙烯酰胺的检出限为0.11μg/L，定量限为0.42 μg/L；样品加标回收率为75.5 ~ 112.2%之间。

本研究参考《GA/T 1787-2021法庭科学疑似毒品中苄基哌嗪、1-(3-氯苯基)哌嗪、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪检验液相色谱和液相色谱-质谱法》，采用岛津高效液相色谱仪对疑似毒品中的哌嗪类新精神活性物质进行定性和定量分析。以外标法定量，1-(3-氯苯基)哌嗪（mCPP）、1-(3-三氟甲基苯基)哌嗪（TFMPP）在考察范围内线性相关系数R均高于0.998，准确度在87.0-110.0%之间；对高中低三个水平的混合标准溶液连续进样6次，重复性结果（RSD%表示）：目标物保留时间和峰面积的RSD分别在0.02-0.05%和0.20-0.74%之间，仪器的重复性良好；加标回收率在80.0 ~95.2%之间，同时样品测试结果良好。

本文使用岛津双进样液相色谱仪建立了快速测定对苯二胺等32种染发剂含量的方法。32种染发剂组分10-400 m/L浓度范围内，其相关系数大于0.999，各浓度点的回读准确度在91.0%~113.6%之间，线性相关性良好。稳定性考察中，32种组分的保留时间相和峰面积的相对标准偏差分别在0.012~0.17%和0.039~2.88%之间，仪器精密度良好；并对实际样品进行分析。双进样液相色谱仪可以实现一次进样同时分析两组样品，分析快速，能满足国家药监局（2021年第17号）通告发布的《化妆品中对苯二胺等32种染发剂的检测方法》中液相方法的检测需求。

本文参照2020版《中国药典》记载的中药材当归液相色谱分析方法，进行供试品的制备，从实验结果可知，华谱Alphasil VC-C18（4.6× 250 mm，5 μ m）色谱柱可以实现当归样品中阿魏酸与杂质峰的良好分离，目标峰峰形良好，阿魏酸保留时间为18.20分钟，按阿魏酸色谱峰计算的理论板数为23118，满足药典要求。

本检测方案使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8030联用，建立了水产品中氯霉素类药残留的分析方法，借助超高效液相色谱LC-30A在2.5 min内实现快速分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8030进行定量分析，因此可以快速、准确地测定甲砜霉素、氟甲砜霉素和氯霉素。这3种物质的线性良好，相关系数均大于0.999；不同浓度的精密度实验结果表明：其保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.13 ~ 0.54%和1.68 ~ 4.31%之间，仪器精密度良好；甲砜霉素、氟甲砜霉素和氯霉素的检出限分别为0.10、0.04 和0.04 μg/L，定量限分别为0.41、0.17和0.15 μg/L；样品加标回收率为81.5 ~ 105.5%。