液相色谱密封清洗系统

我用的戴安液相色谱仪清洗液明明没有用完，确出现“后置密封垫清洗系统已经用完清洗液”是怎么回事，求高手指教！！！！！

新手，求助液相色谱手动进样阀转子密封垫更换方法。

液相色谱仪使用时间久了必须进行清洗，仪器在使用过程中会出现各种故障，以下是色谱仪的常见故障及清洗。 色谱仪器控制的冲洗要比手动冲洗更好，进样阀切换到进样位置后，要在此位置上保持一段时间，使流动相充分冲洗样品定量管，这样可以保证有较高的精确度，而且不用另外再冲洗样品定量管。 每进样10次，或20次最好冲洗一下注射针导入口，这样可以保证注射针导入管内充满流体。在注射针插入或拔出的过程中，清洗注射针头或稀释污染这一区域的样品的同时也使注射针导入口和样品溢出口充满流体，从而防止空气进入样品管。 当样品定量管经过充分的冲洗后，可以将旋柄转回取样位置（Load），也可以继续保持在进样位置，到下次取样前才切换回取样位置。在切换回取样位置时，将样品进样针或微量样品进样针从进样阀中拔出。 如果已发现有严重的交叉污染现象，请检查是否有下列原因造成： 1.注射针没有充分插入注射针导入口。2.使用的注射针头长度不够（针头的长度至少5cm），注射针末端不能到达定子表面。3.注射针导入口的污染物或针头密封磨损下来的削片，使注射针末端不能接触定子表面。

高效液相色谱换了新密封垫泵头还在漏液是怎么回事?

液相色谱最大的故障是漏液问题 液相色谱现在在分析实验室应用的很多，对样品分析分析做出了巨大的贡献。当然由于这种仪器的固有特性（高压或超高压），在实验过程中也可能会出现很多故障问题，给实验带来很多麻烦，给操作者带来很多烦恼。 液相色谱在使用中可能会出现很多问题，其中最常见的故障那肯定是漏液问题了。由于系统长期处于高压状态，那很多部件漏液就在所难免了。再就是液相泵是在线输液，在高压状态下动态工作也是漏液的有一大因素。另外液相可能会用到酸碱盐溶液，这些溶液可能会对系统造成污染或堵塞等，这就使得系统的压力更高，造成漏液。 液相色谱溶液漏的地方有泵头处（密封圈或柱塞杆损伤所致），单向阀处，阻尼器处，混合器处，进样阀处，放空阀处，色谱柱处，检测池处，接头处等等。 漏液是液相常见的问题，不够是进口仪器还是国产仪器，只要是液相仪器就都可能会漏液，只是漏液的程度和频率问题。这个问题我们只能是竭力控制或减少缺很难彻底解决，尤其是寿命较长的老仪器，那就更难避免了。 其实漏液、漏气问题在其它分析类产品中也可能会出现，只是可能没有液相这么严重。 液相色谱漏液问题解决办法一般都是换件，比如密封圈、密封垫、柱塞杆，刃环、滤片、接头等。另外清洗、疏通管路、液路也是常见的解决办法。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至只是由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此，必须泵入纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。

今看到高效液相色谱(HPLC)系统的酸清洗和钝化，给大家分享一下

液相色谱仪是一种高精密仪器，在日常使用中仪器的维护保养工作是需要注意的。下面就液相色谱仪的日常维护保养工作做一个简单的介绍。　　1、日常贮液瓶的维护　　保持流动相贮液瓶正常使用的关键就是清洁，使用LCMS级的溶剂和试剂。陈旧的流动相和用久了的试剂应定期废弃，为了预防生长微生物和组分的改变。需要定期清洗贮液瓶的内壁，流动相滤头定期清洗或更换。　　2、液相泵的日常维护　　泵的密封圈是最易磨损的部件，密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动；单向阀的正常工作至关重要，它若发生故障，将直接影响流速的稳定性。　　日常维护应注意以下几点：　　①使用LCMS级的溶剂和试剂；　　②确保系统压力在正常范围；　　③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净，防止盐沉积，系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中；　　④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。

三 清洗硅胶基质的色谱柱 恢复一根已受污染的高效液相色谱柱的关键在于了解污染物的性质，然后寻找一种合适的溶剂将其去除。如果污染物是由于一些强保留物质的多次进样积聚而产生，一个除去这些污染物的简单的冲洗过程往往会使色谱柱恢复性能。有时，在经过了等度操作之后，用20个柱体积的90％～100％的溶剂B（二元反相体系中较强的溶剂）将会除去这些污染物。（表二列出了各种型号的高效液相色谱柱的柱体积，所以读者可以很轻易地确定色谱柱的冲洗体积。）例如，脂质类的化合物可以使用一些非水性的溶剂来去除，如甲醇、乙睛、四氢呋喃。如果你正在使用含水的缓冲流动相，则千万不能将流动相直接跳到强溶剂中。将流动相猛然间改到高比例有机相的举动会导致高效液相色谱流动体系的缓冲沉淀，这将会造成更加严重的问题，如使筛板堵塞，接口管路堵塞，泵的密封垫失效，刮伤泵的柱塞杆，使进样阀转子失灵。相反，应使用非缓冲的流动相来冲洗色谱柱（就是用水来代替缓冲液）。在经过了5～10个柱体积的非缓冲溶剂冲洗之后才能允许较强的溶剂流经色谱柱。 有时，流动相中的强溶剂组分是不能充分去除色谱柱中的污染物的。必须另外使用一种更强的溶剂或一系列的溶剂才能清洗色谱柱。假如污染物是非生物性的，则使用者可以通过一种或更多的其他有机溶剂来去除不需要的化合物。可以使用许多种的溶剂和溶剂组合方式。访问一些色谱柱生产厂商的网站可以浏览到一些推荐使用的溶剂系统。 一般来说，所有的清洗都会遵循一个相似的模式。清洗过程中的溶剂浓度是增加的，通常最后都是使用一些非极性的溶剂（例如：乙酸乙酯，乃至碳氢化合物），它将会有助于溶解一些脂质类和油类化合物。重要的是要确保这一系列的每个溶剂都能与所使用的下一个溶剂互溶。一个清洗循环的结论是，在回到初始的流动相系统之前，可通过中间的可互溶的溶剂反向走。例如，异丙醇就是这个中间步骤的一个极好的溶剂，因为它能够同有机溶剂互溶，如正己烷和二氯甲烷，而且同样也能够和水相溶剂互溶。因为异丙醇有很大的粘度，所以必须确保清洗时流速不能太高，否则会引起泵的压力过载。同样，如果使用了紫外检测器，则需避免使用在紫外光谱区有吸收的溶剂，因为这样会需要大量的清洗溶剂才能去除所有吸收的溶剂以得到一个稳定的基线。对于典型的键合硅色谱柱和无缓冲液的流动相的一个推荐使用的清洗系统就是：l100％甲醇；l100％乙睛；l75％乙睛——25％异丙醇；l100％异丙醇；l100％二氯甲烷；l100％正己烷； 当使用了二氯甲烷或正己烷作为冲洗溶剂后，由于溶剂的不互溶性，需要先用异丙醇冲洗色谱柱，而后才能使用含水的流动相。冲洗色谱柱的清洗溶剂的体积最小为柱体积的十倍。对于一根250mm×4.6mm的色谱柱，分析者可以使用经典的1～2mL/min的高效液相色谱流量。为了要回到原来的流动相，色谱工作者可以跳过颠倒使用该系列的清洗溶剂。推荐使用异丙醇为中间的清洗溶剂，然后用不含缓冲液的流动相冲洗，最后再用最初使用的流动相进行冲洗。四氢呋喃是另一个使用广泛的溶剂，它可以被用来清洗受污染的色谱柱。如果使用者怀疑色谱柱受到了比较严重的污染，则可以用二甲亚砜或二甲基甲酰胺与水以50：50的比例，以小于0.5mL/min的流速进行清洗。成功的反向液相色谱柱的再生需要花费相当多的时间，使用溶剂进行冲洗可以设置梯度程序来进行通宵操作。* 在清洗过程中产生了是否应该将色谱柱颠倒过来冲洗的问题。因为大部分的强保留的污染物都会留在色谱柱的前端，将色谱柱颠倒过来清洗会减少已被溶解的污染物流出色谱柱的迁移距离。就填料层的稳定性而言，大部分的现代高效液相色谱柱都是用比普通操作压要高得多的压力装填的；因此，色谱柱的填料层应该不会受到反向的流速的干扰。然而，如果色谱柱顶端的筛板的空隙要比底部的来得大，这种反向的方式则是有害的。比如说，如果底部筛板的空隙为2µ m，则足够容纳装填有平均填料粒径为5µ m的色谱柱。（含有粒径5±2µ m的尺寸分布）。然而生产商往往在色谱柱的顶端安装空隙度比较大的筛板，以防止其被样品或流动相颗粒所堵塞。如果这种筛板的空隙度要比粒径大小分布的最小微粒大，部分填料会经筛板而流出色谱柱，这样就会产生中空。如果色谱柱上有一个箭头来提醒色谱柱的流向，我觉得应该在反向使用色谱柱之前参考说明使用书，浏览生产商的网站，或与技术支持组进行商讨，以确定这是否是一个安全的举动。无论你是否将色谱柱反向使用，最好要将色谱柱同高效液相色谱检测器断开，使污染物或者颗粒留在筛板上而不流经检测池，因为这些物质会污染检测池。 清洗污染的反相色谱柱的频率依懒于有多少不明物质被注射到柱子中，因为反相色谱柱有时在分辨率损失和外来物质的洗脱前可以忍受大量的污染物, 使用者往往等到他们观察到一些异常现象才对柱子进行清洗。然而，长时间累积的污染物会使色谱柱的清洗工作变得更难。正因为如此，如果你知道自己的色谱柱很容易受到脏的样品基体的污染时，我建议定期清洗你的色谱柱。清洗的次数越多，清洗条件也就越简单。反相硅胶基质色谱柱中残留蛋白质的清洗 如果一些如血浆、血清的生物物质留在了反相液相色谱柱上，色谱工作者必须使用一些不同的清洗程序。在大部分情况下，一些比较纯的有机试剂如乙睛或甲醇是不能溶解肽和蛋白质的，所以它们不能有效清洗反相液相色谱柱。然而加入了缓冲液、酸或者一些离子对试剂的混合有机溶剂能够有效清洗这些物质。起初，可以尝试含比较高浓度的溶剂B的流动相来冲洗色谱柱。Freiser和他的同事（4）发现来回反复地梯度洗脱，使用三氟乙酸的水溶液和三氟乙酸—正丁醇可以使污染的反相液相色谱柱再生。Bhadway和Day（5）建议进样100µ L的三氟乙醇到250mm×4.6mm色谱柱可以达到清洗的目的。如果这些方案都失败了的话，推荐使用Cunico和他的同事们（6）的强洗脱液和溶解性的试剂（见表三）。然而，在用这些试剂冲洗色谱柱之前，应该参考色谱柱的手册，或和生产商进行商议，以确保其不会破坏色谱柱的填料。硅键合色谱柱的填料往往能够与这些试剂共存，而聚合物色谱柱可能会因为与特定溶剂结合而使填料产生膨胀或收缩，从而影响到色谱柱的性能。表三 用于HPLC反相色谱柱蛋白质物质除去的清洗溶剂溶剂组成乙酸1%的水溶液三氟乙酸1%的水溶液0.1%三氟乙酸-异丙醇40：60（V：V）（粘稠的，通常降低流速）TEA-异丙醇40：60（V：V）（在三乙胺混合前用0.25N的磷酸调节pH到2.5）尿素或胍的水溶液5-8M（调节pH到6-8）NaCl，Na3PO4，Na2SO4水溶液0.5-1.0M (Na3PO4 pH 7.0)DMSO-水 或 DMF-水50：50（V：V）来自参考文献6。如果使用了早期的一系列溶剂，则必须确保表三中的溶剂与这个系列中的溶剂都是互溶的。异丙醇是一个良好的中间冲洗溶剂。在体系中的清洗体积最少为20个柱体积。由于一些溶剂清洗系统具有一定的粘滞性，所以必须调整冲洗流速以避免产生超压。在清洗完一根含有胍和尿素的色谱柱后，需要用至少40～50柱体积的色谱级的水进行冲洗。对于反相高效液相色谱柱来说使用一些如十二烷基磺酸钠（SDS）和Triton的清洗剂来清洗是不妥的，因为这些化合物会强烈地吸附在硅胶基质的表面而难以去除。这些试剂会影响填料表层，改变填料的性质。然而，分离小组的研究发现，肽合成过程中保护基团和净化剂产物对柱子的污染，可以通过在流动相中注射500µ L的1％SDS溶液以1mL/min的流速进行冲洗（7）。如果接下来使用含0.1％(V/V)三氟乙酸的5％～95％乙睛的梯度，在开始的条件下进行平衡，多肽的分离效果则可恢复。

液相色谱部分常见问题1 压力波动原因: 1.系统有气泡； 2.泵前流路系统堵塞； 3.主动阀阀芯，入口单向阀或者出口单向阀污染或故障 4.主动阀故障 5.泵头密封圈磨损 解决方法： 1.通过液相的排空阀将气泡排出系统；安装在线脱气机或者在流动相中通入氦气实现在线脱气； 2.清洗溶剂瓶中溶剂滤头（如果为玻璃滤头，用30%稀硝酸浸泡）；分别用60度热水异丙醇冲洗从溶剂瓶到泵头管线（包括脱气机和比例阀） 3.超声清洗主动阀阀芯（入口单向阀）及出口单向阀阀（注意超声清洗时注意阀会散开）；或者更换单向阀； 4.更换主动阀 5.更换泵头密封圈

仪器：最重要的是仪器的检定/校准。使用前确保仪器在有效期内正常运行，可以进行期间核查来保证仪器的正常运行状态。色谱条件：a.水要求用超纯水或一级水，试剂要求色谱级别。b.色谱柱：根据说明书进行使用和清洗，特别注意避免纯水相造成色谱柱塌陷、柱效下降和色谱柱使用寿命缩短等危害。c.检测器：注意观察检测器氘灯能量的变化，比如基线波动大，响应值突然变小等，都有可能是氘灯的能量不足所引起的，需要根据实际情况进行更换。环境：[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]应安装于水平、远离振动、电磁干扰的室内台面上，保持温度、湿度在仪器要求的范围内。人员：认真学习[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的说明书，掌握[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]硬件和软件的操作，掌握日常的维护保养，掌握最基础故障的排除和维修。重点关注：1.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用前a.流动相使用与储存：有机相（色谱纯）密封，避光保存。盐溶液现用现配，防止长时间使用，微生物生长堵塞吸滤器，影响[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统的正常运行。b.流动相过滤：杂质微粒会磨损柱塞杆、密封圈、单向阀等。可采用抽滤装置过滤，过滤装置应及时清洗。C.流动相排气：流动相中气泡会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。流动相使用前超声排气，仪器准备时打开排液阀，使用注射器吸液排除气泡。2.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用中a.流动相走空：泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞杆、缸体和密封圈，造成漏液。b.漏液与堵塞：检查色谱柱、管路、接头是否漏液，仪器运行压力是否正常。c.废液排放及储存：注意排废管路流通正常，无漏液，废液桶标识清晰。3.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用后a.清洗色谱系统：含有缓冲盐液的流动相在停泵长时间后可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和固体微粒一样损坏密封圈和柱塞杆等。因此，必须使用大比例水相将泵及仪器管路充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的有机溶剂（可以是甲醇或甲醇-水）。b.仪器长期不用：将滤头浸泡在甲醇里，色谱柱用有机相保存，堵头密封。总结：需要特别指出的是——[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的日常维护保养很重要，比如流动相的过滤、脱气、泵密封圈的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等，倘若不坚持，很容易导致色谱柱堵塞、系统压力过大、色谱峰异常等不必要的故障，浪费时间。操作人员在配制[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]分析用样品溶液时，最好由同一个人单独完成，以免不必要的偶然误差。

[font=宋体][font=宋体]超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]是在传统高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的基础上升级改进，使之获得更高的系统耐受压力。这样就可以适配更小填料粒径的色谱柱，因为越小粒径的色谱柱，柱效越高，反压也越高。常规的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统无法承受亚[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]微米的色谱柱带来的高反压。超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]搭配小粒径色谱柱，能够提供更高的分辨率、更快的分离速度和更高的灵敏度，是搭载质谱检测器的理想分离系统。目前超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]国产与进口品牌种类繁多，如何选择合适的设备，这里谈谈我的经验。[/font][/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]输液系统[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]输液泵[/font][font=宋体]目前市面上主流的是凸轮往复泵和直线电机泵两种。凸轮泵因为设计上的原因需要加装阻尼器来稳定压力脉冲，系统的延迟体积要大于电机泵。流量的准确度与精密度上电机泵也要更出色。但成本上电机泵会更高一些。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]泵组合[/font][font=宋体][font=宋体]分为二元泵系统和四元泵系统，二元泵是两组输液泵分别控制有机相与水相流路，混合比例靠控制[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]泵跟[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]泵的流量，混合点位于泵后，属于高压混合，混合效果更好，不足是只能同时使用四路溶剂中的两路。四元泵系统只有一组输液泵，通过控制比例阀的开合时间，控制溶剂混合比例，混合器位于泵前段，属于低压混合，混合精度上不如二元泵系统。但四元泵可以灵活使用四路流动相中的任意[/font][font=Calibri]1-4[/font][font=宋体]种，更适合方法开发。因为四元泵系统中，有机相和水相共用一组输液泵，泵内更容易析出结晶盐损害密封组件。所以在使用四元泵时，需要特备注意缓冲盐溶液与有机相的混合比例，避免结晶盐析出。[/font][/font][font=宋体]3）[/font][font=宋体]电动放空阀，手动是真的不方便。溶剂压缩补偿技术，这也是很重要的参数，但各厂家技术的优劣难以把握。各厂商一般都会提供流量准确度与紧密度参数，但测试条件各厂家都不一样。漏液传感器、真空脱气、柱塞清洗等功能基本都是标配了。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]自动进样器[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]进样器[/font][font=宋体]主要关注的就是进样误差和进样重复性，这两个厂商基本都会提供，可比性还是很高的。虽然各厂家都会提供交叉污染的测试数据，但我们用户在选择时，更应该关注进样针时流路设计还是旁路设计。旁路设计的进样方式有个天然缺陷，就是无法清洗进样口，导致交叉污染会比流路设计大。而流路针也有缺陷，因为针跟针座会在运行样品时连接到流路中，针座密封就需要做到耐高压。但是在反复进样的过程中，针座密封圈不不断磨损而漏液。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]附加功能[/font][font=宋体][font=宋体]类似于瓶位检测、顶针堵针保护等附加功能可以很好避免误操作时带来的仪器损害。温控功能主要考虑组件的耐用程度，温控的准确度和稳定性在[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]℃以内都是可接受的。[/font][/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]柱温箱[/font][font=宋体]主要关注温控范围、准确度、稳定性，最关键的参数是温度的稳定性，这将直接影响分析测试时保留时间的稳定性与峰面积的重现性。流动相预加热功能可以保障进入色谱柱的流动相与色谱柱的温差尽可能小，提供更好的色谱峰重现性。温控组件目前市面上性能最好的是帕尔帖元件。[/font][font=宋体]近年来国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的发展越来越好，性能上并不比进口产品差。但是由于超高效设备主要配置质谱检测器，进口质谱厂商多有配套[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]设备，加上国产质谱发展水平受限，国产超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的市场占有率并不高。希望此次分享能为大家在今后的仪器选购中提供帮助，也祝愿国产仪器越来越好。[/font]

液相色谱老是有一个杂峰清洗不掉

液相色谱清洗液 液相色谱的清洗液，也就是液相泵柱塞清洗液，大家一般采用10%的有机试剂。有人选择10%的甲醇水溶液，说甲醇水溶液接近流动相，粘度也小，更适应系统。有人用10%的异丙醇水溶液，说10%的异丙醇溶液粘度大，清洗能力强，更适合清洗。也有少数人用10%的乙醇水溶液，说乙醇毒性小，便宜，粘度也小，清洗能力也还不错。当然也有人采用纯净水，说纯净水更便宜，更环保。 大家都知道，液相泵柱塞清洗，主要是清洗柱塞往复运动带出的缓冲液（当然有时也要清洗流动相中的酸、碱性溶液），理论上采用纯净水就可以，但纯净水时间长了会有细菌滋生，污染系统。一般大家都会在纯净水中加入一定量的有机试剂，有机试剂一般加5-20%。5%以上的有机溶液具有较强的杀菌功能，20%以下的有机溶液，缓冲液不至于析出。至于加甲醇还是乙醇还是异丙醇、丙酮那就得看实际需要和实际情况了，各有优缺点。 当然这个清洗液远不止这些。如果是正向色谱，流动相是极性较弱的试剂，那样清洗液也尽量选择极性较弱的试剂，比如正己烷、正丁烷等。有时使用树脂填料类的色谱柱，清洗液中最好不要加有机试剂，用纯净水或在纯净水中加一点酸或碱。这个也得看具体要求和具体情况了。 所以液相色谱柱塞清洗液的选择有一些说法。我们常用的是反相色谱，清洗液一般采用10%的甲醇水溶液，10%的乙醇水溶液，10%的异丙醇水溶液，纯净水等。其它色谱法或色谱柱如有特殊需要，那就得特殊处理。这个得看具体要求和实际情况，折优选择。

高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]泵泄露测试通过是证明单向阀密封性良好吗？

高效液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 今天泰坦化学就列出几个常见故障现象，并附最全可能性建议，让你把故障挨个排除，重拾信心，玩转液相色谱不是梦!现象1：出现基线不平的现象，后经过冲洗正常，后又出现柱塞杆漏液，换了密封圈后正常，接着测样品时，泵发出很大的噪音，立即停止泵的运行，对泵进行了润滑后，噪音消失，进样后又发现出的峰峰高都特别低，又试了几次最后竟然什么峰也不出了，为什么?建议：1,检查液路是否正常,保证流量,密封性都对的2,不接柱子进纯品看看检测器有没有响应,如果没有就是检测器出问题了3,检查你的样品是不是正常的现象2：液相色谱六合进样器，最近堵住了，启动泵进样阀就开始漏液，有人说是进完样后没用甲醇去进样清洗堵掉了，我想知道每次走完样后是不是需要进几针甲醇去清洗，而漏液什么原因?建议：其实要知道六通阀有没有堵，你可以在停泵的状态下，用有机相来清洗，如果能够正常清洗的话，那应该没堵，如果溶剂打不进去，那应该是堵了，或者你可以看看漏液的地方是不是有螺丝松了。现象3：使用液相色谱，将一个样品连进六针，峰面积差异很大，忽高忽低，这是为什么?建议：1、进样器有的时候会出现气泡，如果此时连续进一个样品就会出现峰面积忽高忽低，多做几次purge injector就OK了。2、用标准品试一下看是不是样品的问题;然后再看看柱压柱温、流速、进样器、氘灯有没有问题。3、查看定量环是否有气泡4、进样的六通阀、色谱柱接口、泵至色谱柱接口的管路中是否有泄漏现象其实，说到底一般是两种情况，要么是样品的原因，要么是仪器原因。如果是样品，建议换一下其他物质试一下;如果是仪器原因，可能是进样器、定量环、比例阀等等问题。附常见故障排除方法，不收藏就太亏了：1、操作过程若发现压力很小，则可能管件连接有漏，注意检查。当出现错误警告(各组件指示灯均为红色)，一般为漏液，其中一个感应器中已有溶剂，漏液故障排除后，擦干，点击On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。2、连接柱子与管线时，应注意拧紧螺丝的力度，过度用力可导致连接螺丝断裂。柱接头处易发生漏液，可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异，最好不要混用，必要时可使用PEEK管及活动接头;3、操作过程若发现压力非常高，则可能管路已堵，应先卸下色谱柱，然后用分段排除法检查，确定何处堵塞后解决。若是保护柱或色谱柱堵塞，可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗，还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡)，若还是无法通畅，则需换柱;4、运行过程中自动停泵，可能为压力超过上限或流动相用完;5、样品瓶中样品较少，自动进样器进样针无法到达液面，可采用调低进样针进样高度的办法，注意设置时不要使进样针碰到瓶底，微量样品分析应使用微量样品瓶;6、自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时，需重新定位。7、泵压不稳或流量不准，可能为柱塞杆密封圈问题或seal wash垫圈问题，需更换;8、基线产生不规则噪声，可能原因为系统不稳定或没达到化学平衡(使其平衡，若用离子对试剂，在首次使用使需要足够的时间和溶剂体积，色谱柱才能达到足够的平衡)，流动相被污染(更换流动相，清洗储液器、过滤器，冲洗并重新平衡系统)，色谱柱被污染(为证明可能的原因更换系统的色谱柱或使用一根同类的被证明性能好的色谱柱)，检测器不稳定;9、短期有规则的噪声，可能原因为泵压不稳或泵脉冲，调节溶剂不适当(如两种溶剂的互溶性问题)，泵入口管路松或堵塞，泵太脏，泵柱塞磨损，检测器不稳定;10、长期有规则噪声，可能原因为室温不稳(未使用柱温箱)或使用柱温箱不当;11、基线漂移，可能原因为系统不稳或没有达到化学平衡，室温不稳(未使用柱温箱)，流动相污染或分解，柱污染，检测池泄漏，系统泄漏，固定相流失(另选流动相，另选色谱柱)，测定的波长选择错误(对溶剂有吸收)，样品组分保留太长(用强度合适的溶剂清洗色谱柱)，检测器不稳定;12、每次进样时的保留时间不重复，可能原因为系统不稳或未达到化学平衡，由于气泡、各部件磨损等原因引起的泵压或泵脉冲输液不稳定，进样体积太大或样品浓度太高平衡被破坏，溶剂配比不合适，柱被污染;13、无峰，可能原因为检测器选择错误，使用错误的流动相，样品降解;14、色谱峰比预计的小，可能原因为进样体积错误，检测器灯故障，进样问题(瓶号错、进样体积不合适、进样错误、针头堵塞);15、峰变宽，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高，过滤器、保护柱入口、柱入口或连接管路有部分堵塞，检测器时间常数设置错误，进样器问题(如阀漏、针头堵塞或损坏)，柱或保护柱被污染，对流动相来说样品溶剂太强，使用错误的色谱柱，温度变化;16、出现双峰/肩峰，可能原因为保护柱或柱入口部分阻塞，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏;17、前沿峰，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏，对于流动相来说样品溶剂非极性太强(对于反相柱)，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效;18、脱尾峰，可能原因为柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样器问题(如阀漏等)，检测器时间常数设置错误;19、出现鬼峰，可能原因为流动相被污染，样品预处理时产生降解或混入杂质，先前进样的流出物，样品定量管清洗不当，注射器脏，柱被污染，进样装置被污染，流动相中含有稳定剂/稳定剂变化。水膜和油膜的外壳有标示的。

HPLC系统 (高效液相色谱系统) (一) --转自来宝网HPLC系统 HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。 最早的液相色谱仪由粗糙的高压泵、低效的柱、固定波长的检测器、绘图仪，绘出的峰是通过手工测量计算峰面积。后来的高压泵精度很高并可编程进行梯度洗脱，柱填料从单一品种发展至几百种类型，检测器从单波长至可变波长检测器、可得三维色谱图的二极管阵列检测器、可确证物质结构的质谱检测器。数据处理不再用绘图仪，逐渐取而代之的是最简单的积分仪、计算机、工作站及网络处理系统。 目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters公司、Agilent公司（原HP公司）、岛津公司等，国内有大连依利特公司、上海分析仪器厂、北京分析仪器厂等。　　一、输液泵 　　1．泵的构造和性能 输液泵是HPLC系统中最重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可靠性。输液泵应具备如下性能：①流量稳定，其RSD应＜0.5%，这对定性定量的准确性至关重要；②流量范围宽，分析型应在0.1~10 ml/min范围内连续可调，制备型应能达到100 ml/min；③输出压力高，一般应能达到150~300kg/cm2；④液缸容积小；⑤密封性能好，耐腐蚀。 泵的种类很多，按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响，流量不稳定；螺旋泵缸体太大，这两种泵已被淘汰。目前应用最多的是柱塞往复泵。 柱塞往复泵的液缸容积小，可至0.1ml，因此易于清洗和更换流动相，特别适合于再循环和梯度洗脱；改变电机转速能方便地调节流量，流量不受柱阻影响；泵压可达400kg/cm2。其主要缺点是输出的脉冲性较大，现多采用双泵系统来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式，一般说来并联泵的流量重现性较好（RSD为0.1%左右，串联泵为0.2~0.3%），但出故障的机会较多（因多一单向阀），价格也较贵。　　2．泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作： ①防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore滤膜（0.2µ m或0.45µ m）等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。输液泵的滤器应经常清洗或更换。 ②流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不应保留在泵内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至只是由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此，必须泵入纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。 ③泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。 ④输液泵的工作压力决不要超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏液。 ⑤流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量气泡，泵就无法正常工作。　　如果输液泵产生故障，须查明原因，采取相应措施排除故障： ①没有流动相流出，又无压力指示。原因可能是泵内有大量气体，这时可打开泄压阀，使泵在较大流量（如5ml/min）下运转，将气泡排尽，也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损，需更换。 ②压力和流量不稳。原因可能是气泡，需要排除；或者是单向阀内有异物，可卸下单向阀，浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡，或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞，这时，可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡，或将砂滤棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）内迅速除去微生物，或将盐溶解，再立即清洗。 ③压力过高的原因是管路被堵塞，需要清除和清洗。压力降低的原因则可能是管路有泄漏。检查堵塞或泄漏时应逐段进行。　　3．梯度洗脱 HPLC有等强度(isocratic)和梯度(gradient)洗脱两种方式。等度洗脱是在同一分析周期内流动相组成保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成，如溶剂的极性、离子强度和pH值等，用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。采用梯度洗脱可以缩短分析时间，提高分离度，改善峰形，提高检测灵敏度，但是常常引起基线漂移和降低重现性。 梯度洗脱有两种实现方式：低压梯度（外梯度）和高压梯度（内梯度）。 两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合，即有多种洗脱曲线：线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。线性梯度最常用，尤其适合于在反相柱上进行梯度洗脱。 在进行梯度洗脱时，由于多种溶剂混合，而且组成不断变化，因此带来一些特殊问题，必须充分重视： ①要注意溶剂的互溶性，不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶，超出范围后就不互溶，使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时，还可能析出盐的晶体，尤其使用磷酸盐时需特别小心。 ②梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高，以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辨认溶剂杂质峰，因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气，以防止混合时产生气泡。 ③混合溶剂的粘度常随组成而变化，因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小，当二者以相近比例混合时粘度增大很多，此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。 ④每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理，使其恢复到初始状态。需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱，使固定相与初始流动相达到完全平衡。

问题: 有谁遇到过液相也给流速就进行密封清洗这种情况呢回复: Hclass会出现，与残留有关

[em04] 求助各位大哥：请问液相色谱仪的进样系统漏液怎么办？是不是密封圈坏了啊？维修大概要好多ＭＯＮＥＹ？谢了

[align=center]液相色谱常见故障的维护与保养（洗洗更健康）[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部：牛晓[/align]在当今社会中我们能够接触到的食品种类之多，一般食品基质比较复杂，因此我们在日常检测中用到的精密仪器高效液相色谱仪也就显的格外较弱，在使用过程中稍不注意便发脾气罢工，其最常见的症状便是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题，在此情况下你还hold住不？高效液相色谱仪一般由贮液瓶、泵、进样器、色谱柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成，对于整个系统而言，泵、色谱柱、检测器是核心部件，同时也是平常最易出问题的部位。一、柱压问题一般所指的压力稳定并不是指压力稳定于一个恒定值，而是压力波动范围在2Mpa左右，压力过高或过低都属于柱压问题。1、 柱压过高一般是由于流路堵塞或色谱柱在堵塞造成。1）、首先断开色谱柱，如果系统压力超过1.0Mpa则流路堵塞，此时要分段检查。处理办法：A、先打开Purge阀，如果压力没有明显下降，则是过滤头脏了，将过滤头取出用异丙醇超声清洗10min。B、设流速1.0mL/min，系统压力在走纯水时超过0.3Mpa时，则泵流出口的密封垫脏了，拆洗柱塞密封垫、主单向阀密封垫和辅单向阀密封垫均取出用异丙醇超声清洗半小时。2）、其次是如果系统流路压力正常则是色谱柱堵塞，一般将预柱和色谱柱分开，色谱柱用10%甲醇（或10%乙腈）小流速冲洗过夜，预柱用50%甲醇（50%乙腈）大流速冲洗2到3个小时。2、压力过低处理办法：1）、系统漏液，将漏液部分拧紧即可。2）、泵里进了空气，此时一般表现为压力不稳，忽高忽低，打开purge阀，用5.0mL/min的流速进行排气，如果还不行，则要用专用针筒在排气阀出借助外力吸出气泡。3）、由于操作时的大马虎而未关闭参比阀，此时将流速设为小流速后关闭参比阀即可。二、基线问题基线一般在开机后大概要平衡30min，如果用用到缓冲液或缓冲盐之类，还有在低于220nm下平衡时时间要相对较长，如果出现基线漂洗，则可能是以下方面的原因。处理办法：1、 柱温波动，即使很小的温度变化也会引起基线的波动的，通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器，一般要控制好柱温和流动相温度，室温便可避免这类情况的发生。2、 流通池污染或有气体，用甲醇冲洗流通池（断开柱子）。3、 紫外灯能量不足，更换新的紫外灯。4、 流动相污染、变质或由于使用低品质的溶剂，流动相必须现用现配，使用高品质的化学试剂及HPLC级的试剂，对贮液瓶要定期的用异丙醇清洗。三、峰型异常峰型问题是液相的主要问题，我们在操作过程中需要变换不同条件来改善不好的峰型。处理办法：1、 色谱图中未出峰：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因最相对应的调整即可。2、 所有峰均为负峰：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。3、 所有峰均为宽峰：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。4、 所有峰比预想的小：样品粘度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确，定量体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。5、 出现双肩峰：进样量过大；样品浓度过高；保护住或色谱柱柱头堵塞；保护柱或色谱柱污染或失效；柱塌陷。6、 前伸峰：进样量或样品浓度高（可以减低样品量来解决），溶解样品的溶剂较流动相极性强（使用流动相作为样品溶剂）；保护柱或色谱柱污染或失效（更换色谱柱）；柱温低（升高柱温）。7、 拖尾峰：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；柱效下降，更换新的色谱柱。8、 出现平头峰：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度高9、 出现鬼峰：进样阀残余峰，可能为上次样品的残余，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的前处理；流动相污染，更换流动相（一般要求现用现配）；流路中有小气泡，打开purge阀，加大流速排气。10、峰分叉：保护柱或分析柱污染(取下保护柱再进行分析，如果必要时更换保护住，分析柱堵塞，拆下来清洗)；样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为溶剂。11、峰变形：样品过载，减少进样体积。 以上只是最常见的问题，以我多年的操作经验来看，想要液相好好地工作，就需要我们平时对其做好相对应的维护与保养，常言道：洗洗更健康，做好平时的维护与保养可以为我们长久的使用高效液相色谱仪节省大量的时间，提高工作量，愿大家的老伙计（高效液相色谱仪）能够健康工作。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]日常的维护与保养：?1、储备液（流动相） 首先要使用HPLC级的溶剂和试剂，同时要保持流动相储存液的清洁，特别是储液器内的过滤头要定期清洗，必要时进行更换。在使用含有缓冲盐的流动相后一定要时进行相应比例的水和有机溶剂进行充分的冲洗。正反相流动相相互交换时要用互溶的中性溶剂进行中介替换。另外：流动相不可长期储存，要用多少配多少以防生长微生物和组分改变。?2、泵 泵内的密封圈、单向阀、柱塞杆及在线过滤器都是易磨损的部件，特别是密封圈的损坏可引起系统的许多故障。所以有人建议定期更换但也不能一概而论，要看垫圈的材料质量，使用压力的大小以及缓冲液用后的处理情况而定。?3、进样系统 对进样器首先注意严禁用尖针头的针进样，以防划坏转子密封垫。另处使用后要充分清洗进样器，将进样器内沉积的样品以及无机盐清洗干净。对自动进样器要定期对针定量环和进样密封垫进行清洁，更换以保证进样量的准确一致。?4、色谱柱 在色谱柱的使用中要注意：①轻拿轻放以防破坏柱内固定相的粒子。②在柱前安装预柱，防止柱污染，延长色谱柱的使用寿命。③最大限压不要设的太高，防止柱压力过高冲击过大。④使用的溶剂要符合色谱柱使用的各种要求。?5、检测器 首先要保证检测池的清洁，不仅每天用后要对检测器进行充分的冲洗，而且还要定期的用强溶剂反向冲洗检测池。另外，检测器用的灯是有一定寿命的，在清洗泵等其它不用检测器时可将检测器关上。使用脱过气的流动相，防止池内进入气泡。

高效液相色谱的使用和维护 随着现代化社会的不断进步和需求，科学技术的不断发展和提升，各种高尖端产品及技术如春雨后竹笋般蓬勃发展。高效液相色谱产品及高效液相色谱技术就是为了适应和满足这种社会需要悄然而生，并逐渐成长发展直至壮大起来。 作为先进、精密的仪器，高效液相色谱仪是用于尖端的科学研究，用于复杂的化学分析，用于关于民生问题的监测、检测等。仪器的正常运行，准确的结果数据是每个操作者所期待并向往的。那么仪器的正确使用和正确维护就显得尤为重要。 下面就一一介绍下高效液相色谱使用和维护中的几个重要环节吧。实验前的准备工作1. 过滤流动相。为了保证流动相洁净，流动相使用前都必须微膜过滤。2. 流动相脱气。为了避免流动相中气泡对仪器（气泡可能会对仪器及相关设备的正常使用及寿命产生一定影响）及分析结果的影响。3. 运行液相泵前尽量先清洗泵柱塞部件。清洗液一般采用10%甲醇溶液，也有采用10%异丙醇溶液（5%甲醇或异丙醇等有机相溶液能避免微生物污染，但浓度不能太高，高于20%缓冲液可能会导致盐结晶析出，碰到酸碱类物质可能会有比较强烈的反应；另外异丙醇粘度较大，清洗能力较强；也有采用纯水清洗的，这样如果仪器每天使用还行，如果长期不用，为了防止微生物繁殖，纯水还得用含有有机相的清洗液置换出去）冲洗，这是为了保护泵柱塞和密封圈等部件在泵运行时不被结晶盐等磨损而导致泵头漏液。4. 每天运行仪器前先排气。一般的液相色谱仪都有排气功能，没有的可以不接色谱柱开机运行几分钟排气。5. 泵运行时尽量不采用大流量模式（主要是换流动相或排气泡等，流量尽量设为3.0ml/min以内，这样更有利于保护泵柱塞杆和密封圈等部件的寿命）。6. 分析前先对色谱系统（整个流路）进行冲洗及平衡，尤其是色谱柱。先用纯甲醇冲洗30分钟，再换10%甲醇水溶液冲洗30分钟，最后换含缓冲盐或酸碱类物质的流动相平衡30分钟。色谱柱如果长期没用，每一步冲洗、平衡量尽量为色谱柱柱容量20倍以上）。如果流动相中不含缓冲盐或酸碱类物质，纯甲醇冲洗完可直接换为流动相。使用色谱柱前知道或怀疑色谱柱中残留有或酸碱盐类物质，在用纯甲醇冲洗前增加一步10%甲醇水溶液冲洗。7. 如果色谱柱需要控温（升温），要先运行泵后再设柱温箱温度。8. 待仪器运行稳定后（基线基本走平后，这个是经验值），方可进样。样品前处理1.样品浓度不要太大，杂质不要太多，否则色谱柱处理起来压力很大。2.进样前样品一定得先经微膜（一般采用0.22um或0.45um微膜）过滤。实验过程中注意事项1.为了避免进样器残留影响，进样前先对进样器进行清洗（这个不是必须的，但最好是每进一针样品或标准品前都清洗进样器和进样针，当然同一样品也可以不洗，不同样品尽量洗），清洗顺序为纯水、甲醇、流动相。2.每进一针样品后要对系统进行一次冲洗、平衡后再进下一针样品（等度要求不高，梯度要求相对高，主要是冲洗色谱柱中残留的强保留物质）。[s

[size=4]我有个试验要用的流动相为乙睛-甲醇-水-乙酸（2：2：9：0.2）。现在我们的仪器是waters2695 HPLC，色谱柱为C18柱，请问：柱塞密封清洗溶剂、针头清洗溶剂和关机前清洗系统溶剂我该分别选用什么溶剂？ [/size]谢谢大家。以下是我看的资料举例说明中得到的东西：1.柱塞密封清洗溶剂（成份：80％水:20%甲醇）2.针头清洗溶剂（成份：比例接近流动相，1.8:1.8:9.42:0.18，乙睛-甲醇-水-乙酸配在一起）3.流动相（乙睛-甲醇-水-乙酸，2:2:9:0.2）3.1乙睛(2)3.2甲醇-水-乙酸(11.2)4.关机前系统清洗溶剂（成份：超纯水/HPLC级水，水-甲醇）4.1超纯水/HPLC级水4.2 水-甲醇（80％水:20%甲醇）加上废液瓶，共需7个容器。各位大侠，不知道我能不能按照上面那样用？

1、液相色谱仪—气泡溢出 流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。 2、液相色谱仪—柱压高原因 (1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内; (2)样品污染沉积。处理对于第一种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。 3、液相色谱仪—既无压力指示,又无液体流过 (1)泵密封垫圈磨损; (2)大量气泡进入泵体。处理对于第一种情况,更换密封垫圈;对于第二种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气。 4、液相色谱仪—压力波动大,流量不稳定 原因系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使得两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。 5、液相色谱仪—出峰不佳,峰分叉 (1)色谱柱被污染; (2)柱头填料塌陷。处理对于第一种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。 6、液相色谱仪—峰面积重复性不佳 (1)进样阀漏液; (2)加样针不到位。 (3)液量不足. 处理对于第一种情况更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。

http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C12456%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 上海伍丰科学仪器有限公司 的 LC-100高效液相色谱系统(LC-100（梯度配置）)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来，这款产品已经被多家单位采用，如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解，欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动，并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介： 仪器简介： 上海伍丰从1999年开始研发液相色谱仪，于2004年底以LC-100的型号投入市场，LC-100代表了当时国产液相色谱仪的最新技术和品质的标杆：具有软件全面反控、性能稳定的特点。同时从泵、检测器、到工作站软件，伍丰仪器都具有100%知识产权。 投放市场后，产品的技术含量和品质迅速获得了肯定，无论从名誉上，还是在销售业绩上都是全面开花，获得了BCEIA金奖，年度产品奖等，销量稳步增长，通过几年的不懈努力，成为了国内最主要的液相色谱仪的生产厂家，在国内外有数以千计的用户正在使用着伍丰的LC-100。 此次的升级换代是全方位的，包括产品配置、技术指标、智能化、外形。用户单单从看得见的外表上，就能实实在在的感受到伍丰仪器在国内无人能比的精湛的加工工艺。 为了让产品卓越的品质、品牌的内涵以及伍丰仪器的创新精神能够延续和发扬光大，此次产品升级我们继续沿用了LC-100作为产品型号。 欢迎垂询，并敬请浏览www.wufengtech.com。 一、LC-P100型 高压恒流泵 被用户广泛称赞的产品 1.此次升级延续了经典的往复式并联泵设计，具有流量精度高，压力脉动小的特点同样输液量的前提下，密封圈的使用寿命比串联泵长一倍。 2.独创的单向阀设计，由阀芯体，宝石球座和宝石球构成一个整体结构，具有结构简单，密封性好的优点，提高了泵的流量精度及系统的测试精度。 3.此次升级增加柱塞杆自动缩进功能，不用打开机箱就可以轻松的实现密封圈的更换。 4.采用全进口管路及接头，具有极佳的互换性，并能够最大程度上避免由于泵的管路系统而导致的非正常工作。 5.针对使用缓冲盐系统的用户，专门推出了带柱后清洗功能的液相泵，采用双密封圈设计。可以延缓密封圈的磨损，延长使用寿命。 6.增加半制备泵，四元低压系统供用户选择。. 二、LC-UV100型紫外检测器 UV100紫外检测器的升级导入了伍丰仪器超高压，超快速液相色谱仪的设计理念，最大程度上避免了由于系统误差而导致的失真。 1. 全数字交换系统，避免了一般紫外检测器的色谱信号需要多重模-数转换带来的信号畸变与干扰。 2. 流通池采用平行双锥孔的专利设计，信噪比相对传统流通池大幅提高，检测效果更佳。 3. 氘灯全面升级为2000小时进口氘灯，使用寿命更长，提供更加的检测灵敏度。 4. 最新推出可选配钨灯光源，全面覆盖可见光检测范围 三、色谱工作站....【了解更多此仪器设备的信息】

[align=center][b]如何避免液相色谱柱的损坏呢？[/b][/align]在高效液相色谱的使用中，我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。[b]损坏的来源[/b]首先，需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面：1、泵头密封圈的磨损2、进样阀转子密封圈的磨损3、析出的缓冲盐4、样品中的复杂易吸附基质其实，在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善，因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。[b]预防措施[/b]为了降低色谱柱的损伤问题，我建议大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如：[b]1在液相系统中加入在线过滤器[/b]在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米，对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。所以，在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物，以防止柱头过滤筛板的堵塞。注意：但是对于非常低死体积的液相系统，在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言，色谱图不会有太大变化。[b]2在柱子前端使用保护柱[/b]保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式，但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因为它具有和分析柱相同的内部填料，所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。注意：由于保护柱中可能有大量的强保留组分，在用强溶剂清洗系统时请取下保护柱，以防止这些强保留组分被洗脱进分析柱。保护柱如果出现吸附饱和也可能会对分离效果有影响，[b]3对样品进行净化处理[/b]有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化，但我希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化，常用的方案是对样品进行过滤。[b]色谱柱的储存[/b]在实际工作中，色谱柱的储存也会影响柱子的使用寿命。那么对于色谱柱的储存，也有以下建议：[b]短期储存时[/b]应该保存在最接近常用的流动相条件下。并且，一定要移除系统中的缓冲盐、酸等。[b]长期储存时[/b]将色谱柱按照说明书的要求保存在对应的溶剂中，并且将色谱柱从系统中取下两头用堵头堵死。本文来源于微信公众号《色谱学堂》，本文对内容进行了部分修改

[b]一、基本原理[/b]高效液相色谱（HPLC）法是以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。 高效液相色谱和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]在基本理论方面没有显著不同，它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。 [b]二、高效液相色谱分析原理[/b]（1）、高效液相色谱分析的流程：由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的程序升温类似，不同的是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。 （2）、高效液相色谱的分离过程：同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。 开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，A、B和C，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分A不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。分配系数大的组分C在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。组分B的分配系数介于A，C之间，第二个流出色谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离之目的。不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。所以分离最终效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。[b]三、工作原理[/b]储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。[b]四、HPLC的特点和优点 [/b]HPLC有以下特点： 高压——压力可达150~300 Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。 高速——流速为0.1~10.0 ml/min。 高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 速度快——通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。 灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。 柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。 样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。[b]五、液相色谱的五大系统1、进样系统[/b]进样系统分为手动进样阀和自动进样器。[color=red]手动进样阀[/color]对于手动进样阀使用过程中需要注意每个样品进样完成后应对进样阀进行清洗，防止残留对下一个样品分析的影响。还需要注意进样方式，以20μL定量环为例，我们可以选择完全充满定量管或部分充满定量管。为了保证进样的重复性，选择完全充满定量管进样方式时，需要注入定量环体积3倍以上的样品 选择部分充满定量管进样方式时，进样体积应在定量管体积一半以下，即1-10μL。[color=red]自动进样器[/color]如果采用自动进样器进样，首先需要保证注射器里面没有气泡存在，否则影响进样量准确性 其次是样品瓶里面有足够的样品，保证进样针能够吸到样品。为了避免交叉污染需要定期对样品瓶、盖和垫进行清洗。若自动进样器长时间不使用，应该注意：腐蚀性的流动相或洗液(例如，碱性或酸性缓冲溶液)必须完全从系统中置换出来。同时，为了避免细菌的生长，应将一个样品瓶中充满甲醇，并重复几次进样操作。[b]2、输液系统[/b]输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说，输液泵的流量稳定性更为重要，这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化，而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此，恒流泵的应用更广泛。输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类。机械泵中又有螺旋传动注射泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵。HPLC使用的高压泵应满足下列条件：a 流量恒定，无脉动，并有较大的调节范围（一般为1～10ml/min）；b 能抗溶剂腐蚀；c 有较高的输液压力；对一般分离，60×105Pa的压力就满足了，对高效分离，要求达到150～300×105Pa。（1）往复式柱塞泵结构和原理当柱塞推入缸体时，泵头出口（上部）的单向阀打开，同时，流动相进入的单向阀（下部）关闭，这时就输出少量的流体。反之，当柱塞向外拉时，流动相入口的单向阀打开，出口的单向阀同时关闭，一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整个色谱体系中其余部分阻力稍有变化的影响，连续供给恒定体积的流动相。（2）气动放大泵结构和原理其工作原理是：压力为p1的低压气体推动大面积（SA ）活塞A，则在小面积（SB ）活塞B输出压力增大至p2的液体。压力增大的倍数取决于A和B两活塞的面积比，如果A与B的面积之比为50：1 ，则压力为5×105Pa的气体就可得到压力为250×105Pa的输出液体。这是一种恒压泵。泵头通常由两部分组成--单向阀和密封圈-柱塞杆.单向阀一般由阀体\塑料\或陶瓷阀座和红宝石球组成.在压力的作用下宝石球离开阀座,流动相流过单向阀 反之,在反向力的作用下,宝石球回到阀座上,此时流动相不再流过单向阀.显然宝石球与阀座之间的配合必须非常适合才能防止流动相的泄漏.为了保证单向阀不发生泄漏,一些单向阀中安装了两套宝石球和阀座,也有一些单向阀是将宝石球用一个合适的弹簧压在阀座上.在不同的应用领域,单向阀阀体的材料有所不同,例如考虑生物兼容性的系统,单向阀的阀体往往采用金属钛,而不用不锈钢.为了降低成本和减少维护费用,一些生产厂商还采用了可置换式的卡套式塑料单元件,当然其功能仍保持不变[color=red]输液系统即是指高压恒流泵，其作用是能提供稳定准确的流速。[/color][color=red]溶剂过滤头[/color]：吸液过滤头，或称沉子，主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。长时间使用后，杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙 或长时间使用缓冲液，过滤头表面容易产生一层膜，阻碍流动相正常通过。严重时，即使是已超声过的溶剂，泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生，因此应经常对过滤头进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇或者30%稀硝酸溶液，正相系统需注意滤头的烘干处理。[color=red]单向阀[/color]：单向阀的作用是确保液体向一个方向流动，是高压恒流泵稳定输液的保证。日常使用过程中，可以通过观察压力的情况，初步判断流量是否正常。如果系统已经平衡一段时间，压力应该是稳定的。但如果压力存在波动，则表明流量不稳定 如果无压力，则表明无流量。这两种情况大多是因为单向阀里混入了气泡或杂质。混入气泡的情况，应把放空阀打开，按冲洗键将里面的气泡排出。单向阀混入杂质的情况，须对其进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇，安装时注意标记环的方向。[color=red]密封圈[/color]：密封圈是固定在柱塞杆上防止泵腔内的液体泄漏，是保证泵头输液正常的关键部件。但柱塞杆和柱塞密封圈长期使用会发生磨损，主要与流量、操作压力和所使用的流动相有关。当使用含盐的流动相时，由于脱水或蒸发，可能形成盐结晶，而泵运动时盐结晶会导致密封圈和柱塞杆的磨损。因此，每天实验前和实验后都需用纯水冲洗一次密封圈(在柱塞密封圈和二级密封圈之间)，保持清洗管内有水以防止形成晶体，延长柱塞杆和密封圈的使用寿命。在线过滤器：为了防止由于流动相杂质微粒进入色谱系统，泵在放空阀内安装了在线过滤器，经泵出口流出的液体通过在线过滤器，经排空管流出的液体不通过在线过滤器。仪器使用一定时间后，建议用户清洗在线过滤器的烧结不锈钢过滤片。用扳手卸下压帽，将密封环和烧结不锈钢过滤片一同取出清洗，清洗后按原位装上。清洗溶剂可以选择30%稀硝酸溶液，正相系统需注意滤头的烘干处理。[b]3、分离系统[/b]分离系统包括色谱柱、保护柱以及柱温箱。[color=red]色谱柱[/color]：色谱柱是样品分离的核心。色谱柱在使用前必须仔细阅读说明书，了解色谱柱使用的pH值范围、溶剂耐受范围、压力范围和维护方法等事项。色谱柱使用完后，需及时对色谱柱进行冲洗。冲洗完成后，应该将色谱柱从仪器上拆下来，两端用厂家配的堵头密封后，保存在色谱柱盒里。[color=red]保护柱[/color]：保护柱的作用主要是防止吸附性强的杂质对色谱柱污染，从而延长色谱柱的寿命。针对不同型号的色谱柱，应选择相对应填料的保护柱。应注意柱芯也是有寿命的，应该定期进行更换。[color=red]柱温箱[/color]：色谱柱温度变化，可能会导致保留时间的变化。为了避免这个问题，建议使用柱温箱。[b]4、检测系统[/b]高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。（1）紫外检测器该检测器适用于对紫外光（或可见光）有吸收性能样品的检测。其特点是，使用面广（如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）、灵敏度高（检测下限为10-10g/ml）、线性范围宽、对温度和流速变化不敏感、可检测梯度溶液洗脱的样品。（2）示差折光检测器凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但灵敏度低（检测下限为10-7g/ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。（3）荧光检测器凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物（如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等）的测定，其灵敏度很高（检测下限为10-12～10-14g/ml），痕量分析和梯度洗脱样品的检测均可采用。HPLC常用的检测器是紫外检测器。在日常使用过程中紫外检测器主要需要注意检测池和氘灯的使用与维护。[color=red]检测池[/color]：检测池长时间使用可能会造成污染，如果仪器的参比能量(REF ENERGY)正常，测量能量(SMPENERGY)偏低，可能为检测池污染导致，可以对检测池进行清洗。对检测池零件的进行清洗，一般先采用约1：4的硝酸溶液超声清洗，分别用纯水和甲醇溶液清洗，然后重新组装并将检测池池体推进池腔内，拧紧池板螺丝。注意组装中，池玻璃及垫片一定要放正，以免压碎池玻璃，造成检测池泄漏。[color=red]氘灯[/color]：氘灯正常使用寿命可在1500小时以上。灯的使用寿命与检测器的使用时间和开启频率有关，因此使用过程中应尽量节省不必要的开机时间，减少开关频率，以延长氘灯的使用寿命。如果准确地判断出氘灯已经不能点亮或能量太低，则需要更换新的氘灯。在购买氘灯时，应注意咨询和核对氘灯的型号与仪器型号是否匹配。更换到氘灯时，参照仪器说明书中的相关内容，特别要注意氘灯连接线的位置顺序。[b]5、数据处理系统[/b]该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。[b]六、色谱法的常用基本术语[/b][color=black]1[/color][color=black]、色谱图（chromatogram）：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，或者通过适当的方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。[/color][color=black]2[/color][color=black]、（色谱）峰（chromatographic peak）：色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。[/color][color=black]3[/color][color=black]、峰底（peak base）：峰的起点与终点之间的连接的直线。[/color][color=black]4[/color][color=black]、峰高（h ，peak height）：色谱峰最大值点到峰底的距离。[/color][color=black]5[/color][color=black]、峰宽（W ，peak width）：在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点的距离。[/color][color=black]6[/color][color=black]、半高峰宽（W h/2 ，peak withd at half height）：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离。[/color][color=black]7[/color][color=black]、峰面积（A ，peak area）：峰与峰底之间的面积。[/color][color=black]8[/color][color=black]、拖尾峰（tailing peak）：后沿较前沿平缓的不对称的峰。[/color][color=black]9[/color][color=black]、前伸峰（leading peak）：前沿较后沿平缓的不对称的峰。（又叫伸舌峰、前延峰）[/color][color=black]10[/color][color=black]、假峰（ghost peak）：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。这种色谱峰并不代表具体某一组分，容易给定性、定量带来误差。（又叫鬼峰）[/color][color=black]11[/color][color=black]、畸峰（distrorted peak）：形状不对称的色谱峰，前伸峰、拖尾峰都属于这类。 [/color][color=black]12[/color][color=black]、反峰（negative peak）：也称倒峰、负峰，即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。[/color][color=black]13[/color][color=black]、原点（origin）：纸或薄层板上滴加试样部位的中心点。[/color][color=black]14[/color][color=black]、区带拖尾（zone tailing）：由于物理、化学等作用的影响，一种组分在展开后形成的彗星形状斑点。[/color][color=black]15[/color][color=black]、基线（base line）：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的响应信号曲线。[/color][color=black]16[/color][color=black]、基线漂移（baseline drift）：基线随时间定向的缓慢变化。[/color][color=black]17、基线噪声（N　，baseline noise）：由于各种原因而引起的基线波动。[/color][b]七、应用领域[/b]环境：常见无机阴阳离子、多环芳烃、多氯联苯、硝基化合物、有害重金属及其形态、除草剂、 农药、酸沉降成分。 农业：土壤矿物成分、肥料、饲料添加剂、茶叶等农产品中无机和有机成分。 石油：烃类族组成、石油中微量成分。 化工：无机化工产品、合成高分子化合物、表面活性剂、洗涤剂成分、化妆品、染料。 材料：液晶材料、合成高分子材料。 食品：无机阴阳离子、有机酸、氨基酸、糖、维生素、脂肪酸、香料、甜味剂、防腐剂、人工色素、病原微生物、霉菌毒素、多核芳烃。 生物：氨基酸、多肽、蛋白质、核糖核酸、生物胺、多糖、酶、天然高分子化合物。 医药：人体化学成分、各类合成药物成分、各种天然植物和动物药物化学成分。