液相色谱平衡柱子流量

新手做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]，在毕业师兄临走前现学的色谱仪操作。流动相是纯乙腈-30mM磷酸盐缓冲液PH2.3，梯度洗脱程序。自己做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]前，先把流速调到1ml/m，两个流动相各脱气几分钟（因为使用比较频繁，一个星期用三四次），再分别用100%的A/B相冲柱子，冲到基线平了之后再上样，一般每个流动相都会冲十来分钟。参考文献里的梯度洗脱程序有28分钟，每个样结束后有14分钟平衡柱子，而我平衡柱子的方法是每个样跑结束后，就有梯度洗脱程序继续跑，等基线平了之后加下一个样，不知道我的操作是不是对的。还有就是所有样品测完之后，等用梯度洗脱程序把基线冲平之后，一般冲十多分钟，再用100%的甲醇冲20多分钟，最后关闭仪器。不知道我的平衡方法是不是有问题，希望各位大佬们帮我看看。

大家好！我使用高压液相色谱不久，有些问题想请教下大家。 我在平衡柱子时，流动向由98%的乙腈平衡到50%的乙腈，为什么在平衡的过程中会有峰出现呢？

大家好，我在做液相色谱分析产品以后，已经用水和甲醇冲洗柱子了，但是当我下次再用的时候，我用流动相平衡柱子的时候怎么检测器总是有吸收呀？而且基线一直向上漂。请专家帮助解决，谢谢！

高效液相色谱仪的使用过程中，若遇到使用不当的情况，会大大缩短色谱柱的使用寿命。为了延长色谱柱的使用寿命，应对色谱柱进行适当的保护。 　　反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈-水中的；由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干掉，这会引起键合相的空间结构发生变化。因此，新的色谱柱在用来分析样品之前，请一定要充分平衡色谱柱。反相色谱柱的平衡方法是：以纯乙腈或甲醇作流动相，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡过夜，然后，将流速增加到0.8mL/min冲洗30min以便将色谱柱的填料充分平衡至最佳状态。平衡过程中，将流速缓慢地提高直到获得稳定的基线，这样可以保证色谱柱的使用寿命，并且保证在以后的使用中，获得分析结果的重现性。请一定确保所使用的流动相和乙腈-水互溶。如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意首先用20倍柱体积的5%的乙腈-水流动相“过渡”，然后使用分析样品的流动相直至得到稳定的基线。 　　对于正相色谱柱来讲，硅胶柱或极性色谱柱需要更长的时间来平衡。这些色谱柱在出厂测试后是保存在正庚烷中的，如果极性色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。当使用乙醇、异丙醇、乙酸等粘度大的流动相时，色谱柱的平衡时间要延长，甚至要加倍。

大家好，本人是做液相色谱研发工作的，最近在做泵的研发测试时，观察到泵的一些问题，欢迎大家知道讨论。（注：高效液相泵采用双柱塞串联模式）通常来说，我们都称液相色谱泵为高压恒流泵，所谓的恒流即流量不随压力改变，固定转速下，每个周期输出相同体积的液体。但在实际中真的是恒流吗？在这一点上，我认为所谓的恒流只是在一定的压力范围内泵的流量输出是恒定的。对于通常的液相色谱泵，使用ODS柱规格Φ4.6,5μ，250mm的柱子，最佳流速1.000ml/min，压力在8MPa左右。色谱说明中对于流量精准性的描述也是在给定的压力下（通常8.5MPa），1.000ml/min流量下的准确性和精确性。所以在其他流量下，或者压力不同时真实的流量值不一定和设定值相符，有可能偏离较大。我认为这是正常的。而且从色谱分析的角度，随着使用中色谱柱压力升高，柱效下降，柱子的分离能力，保留能力变差，这种改变也是相适应的（即压力升高，流量会偏小）。同一流量，在0~25MPa压力范围内都满足指标是不容易达到的，也是没有意义的。对于研发，生产，测试都增大的成本和难度。而上层认为，恒流泵就是恒流，出现流量的较大偏移是不对的（偏移：1.5的流量下，0MPa和20MPa下的实际流量偏差25%，我认为在这么大的流量下且压力变化范围也大，这种偏差是避免不了的）。所以要考虑加压力补偿。这时问题来了，加压力补偿的话，以什么作为流量反馈信号？考虑用压力作为反馈，但我认为这种方式不确定度大，而且采用的是正反馈（即：压力升高，补偿流量，压力又会升高，在补偿的循环），补偿没有必要。流量的精准度只要在最频繁使用的流量和压力条件下满足标准就可以。不知道我的想法对不对，希望从事液相研发的大神给点意见。欢迎大家发表意见。

[color=#444444]首先是平衡柱子的时候基线会一直往下走 检测的时候基线也是不平[/color][color=#444444]然后是 检测的物质是一个分子量在5000左右PEG和PEG修饰后的一个短肽 [/color][color=#444444]色谱条件色谱柱：Diamonsil C18 (5um ,200×4.6mm) 流动相A：0.1%三氟乙酸（水） 流动相B: 0.1%三氟乙酸（乙腈） 流速：1ml/min 检测波长：220nm [/color][color=#444444]进样量：20ul 柱温：25℃左右 梯度 0-30 min ：A 95-5%、 B 5-95% 30-35 ，30-35 min ：A 5-95% B 95-5%[/color][color=#444444]求大神指导有什么方法可以让分离度提高，基线平稳点。[/color][color=#444444]还有工程师说灯的使用寿命到了，这些20分钟后的的小峰会是这个原因吗?[/color][img=,690,355]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906111605423501_7371_1823055_3.gif!w690x355.jpg[/img][img=,690,355]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906111605426472_8627_1823055_3.gif!w690x355.jpg[/img][img=,690,294]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906111605428553_299_1823055_3.gif!w690x294.jpg[/img]

在换液相色谱柱子的之前跟之后应注意哪些问题，请高手指点一下，谢谢！

高效液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 今天泰坦化学就列出几个常见故障现象，并附最全可能性建议，让你把故障挨个排除，重拾信心，玩转液相色谱不是梦!现象1：出现基线不平的现象，后经过冲洗正常，后又出现柱塞杆漏液，换了密封圈后正常，接着测样品时，泵发出很大的噪音，立即停止泵的运行，对泵进行了润滑后，噪音消失，进样后又发现出的峰峰高都特别低，又试了几次最后竟然什么峰也不出了，为什么?建议：1,检查液路是否正常,保证流量,密封性都对的2,不接柱子进纯品看看检测器有没有响应,如果没有就是检测器出问题了3,检查你的样品是不是正常的现象2：液相色谱六合进样器，最近堵住了，启动泵进样阀就开始漏液，有人说是进完样后没用甲醇去进样清洗堵掉了，我想知道每次走完样后是不是需要进几针甲醇去清洗，而漏液什么原因?建议：其实要知道六通阀有没有堵，你可以在停泵的状态下，用有机相来清洗，如果能够正常清洗的话，那应该没堵，如果溶剂打不进去，那应该是堵了，或者你可以看看漏液的地方是不是有螺丝松了。现象3：使用液相色谱，将一个样品连进六针，峰面积差异很大，忽高忽低，这是为什么?建议：1、进样器有的时候会出现气泡，如果此时连续进一个样品就会出现峰面积忽高忽低，多做几次purge injector就OK了。2、用标准品试一下看是不是样品的问题;然后再看看柱压柱温、流速、进样器、氘灯有没有问题。3、查看定量环是否有气泡4、进样的六通阀、色谱柱接口、泵至色谱柱接口的管路中是否有泄漏现象其实，说到底一般是两种情况，要么是样品的原因，要么是仪器原因。如果是样品，建议换一下其他物质试一下;如果是仪器原因，可能是进样器、定量环、比例阀等等问题。附常见故障排除方法，不收藏就太亏了：1、操作过程若发现压力很小，则可能管件连接有漏，注意检查。当出现错误警告(各组件指示灯均为红色)，一般为漏液，其中一个感应器中已有溶剂，漏液故障排除后，擦干，点击On line操作界面中的Instrument/System Off，然后再点击操作界面中的Instrument/System On即可。2、连接柱子与管线时，应注意拧紧螺丝的力度，过度用力可导致连接螺丝断裂。柱接头处易发生漏液，可能情况为接头Fittings中间的管子未和接口处贴紧。不同厂家的管线及色谱柱头结构有差异，最好不要混用，必要时可使用PEEK管及活动接头;3、操作过程若发现压力非常高，则可能管路已堵，应先卸下色谱柱，然后用分段排除法检查，确定何处堵塞后解决。若是保护柱或色谱柱堵塞，可用小流量流动相或以小流量异丙醇冲洗，还可采用小流量反冲的办法(新柱不提倡)，若还是无法通畅，则需换柱;4、运行过程中自动停泵，可能为压力超过上限或流动相用完;5、样品瓶中样品较少，自动进样器进样针无法到达液面，可采用调低进样针进样高度的办法，注意设置时不要使进样针碰到瓶底，微量样品分析应使用微量样品瓶;6、自动进样器进样针未与样品瓶瓶口对准时，需重新定位。7、泵压不稳或流量不准，可能为柱塞杆密封圈问题或seal wash垫圈问题，需更换;8、基线产生不规则噪声，可能原因为系统不稳定或没达到化学平衡(使其平衡，若用离子对试剂，在首次使用使需要足够的时间和溶剂体积，色谱柱才能达到足够的平衡)，流动相被污染(更换流动相，清洗储液器、过滤器，冲洗并重新平衡系统)，色谱柱被污染(为证明可能的原因更换系统的色谱柱或使用一根同类的被证明性能好的色谱柱)，检测器不稳定;9、短期有规则的噪声，可能原因为泵压不稳或泵脉冲，调节溶剂不适当(如两种溶剂的互溶性问题)，泵入口管路松或堵塞，泵太脏，泵柱塞磨损，检测器不稳定;10、长期有规则噪声，可能原因为室温不稳(未使用柱温箱)或使用柱温箱不当;11、基线漂移，可能原因为系统不稳或没有达到化学平衡，室温不稳(未使用柱温箱)，流动相污染或分解，柱污染，检测池泄漏，系统泄漏，固定相流失(另选流动相，另选色谱柱)，测定的波长选择错误(对溶剂有吸收)，样品组分保留太长(用强度合适的溶剂清洗色谱柱)，检测器不稳定;12、每次进样时的保留时间不重复，可能原因为系统不稳或未达到化学平衡，由于气泡、各部件磨损等原因引起的泵压或泵脉冲输液不稳定，进样体积太大或样品浓度太高平衡被破坏，溶剂配比不合适，柱被污染;13、无峰，可能原因为检测器选择错误，使用错误的流动相，样品降解;14、色谱峰比预计的小，可能原因为进样体积错误，检测器灯故障，进样问题(瓶号错、进样体积不合适、进样错误、针头堵塞);15、峰变宽，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高，过滤器、保护柱入口、柱入口或连接管路有部分堵塞，检测器时间常数设置错误，进样器问题(如阀漏、针头堵塞或损坏)，柱或保护柱被污染，对流动相来说样品溶剂太强，使用错误的色谱柱，温度变化;16、出现双峰/肩峰，可能原因为保护柱或柱入口部分阻塞，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏;17、前沿峰，可能原因为进样体积太大或样品浓度太高(样品过载)，平衡破坏，对于流动相来说样品溶剂非极性太强(对于反相柱)，柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效;18、脱尾峰，可能原因为柱或保护柱被污染，柱性能下降，保护柱失效，进样器问题(如阀漏等)，检测器时间常数设置错误;19、出现鬼峰，可能原因为流动相被污染，样品预处理时产生降解或混入杂质，先前进样的流出物，样品定量管清洗不当，注射器脏，柱被污染，进样装置被污染，流动相中含有稳定剂/稳定剂变化。水膜和油膜的外壳有标示的。

对于液相色谱柱而言，每根色谱柱在装运之前都经过了测试，并存放在测试洗脱液中进行运输。因此，在首次使用时，没有必要用水进行冲洗，只要用流动相彻底地平衡色谱柱即可。如果使用流动相添加剂（如缓冲液或离子对试剂），建议使用含原有比例但不含这些添加剂的流动相进行中间过渡。使用10至20个色谱柱体积进行冲洗将有助于过渡到流动相。对于具有较短化学链（例如C8、苯基、CN）键合相的色谱柱，应小心确保在使用色谱柱之前对其进行彻底的平衡。这样可确保重复性，并有助于防止保留时间的漂移。正相溶剂和反相溶剂是不互溶的，这一点不能忽略。对于新购柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相不互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压升高，适当调低流速。如果流动相中含有缓冲盐类，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，避免缓冲盐的析出。

液相色谱柱的柱效与柱子的内径有关？

对于液相色谱柱而言，每根色谱柱在装运之前都经过了测试，并存放在测试洗脱液中进行运输。因此，在首次使用时，没有必要用水进行冲洗，只要用流动相彻底地平衡色谱柱即可。如果使用流动相添加剂（如缓冲液或离子对试剂），建议使用含原有比例但不含这些添加剂的流动相进行中间过渡。使用10至20个色谱柱体积进行冲洗将有助于过渡到流动相。对于具有较短化学链（例如C8、苯基、CN）键合相的色谱柱，应小心确保在使用色谱柱之前对其进行彻底的平衡。这样可确保重复性，并有助于防止保留时间的漂移。 正相溶剂和反相溶剂是不互溶的，这一点不能忽略。对于新购柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相不互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压升高，适当调低流速。如果流动相中含有缓冲盐类，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，避免缓冲盐的析出。

[color=#444444]求助：液相色谱柱，柱子为 waters Sunfire TM C18，柱子堵了，之前做的是丙烯腈的水溶液，每次做完之后用纯甲醇冲洗的。然后发现装上柱子之后，流量为1ml纯甲醇的时候，柱子压力达到了150多，不装柱子的话压力很小。今天我用纯甲醇，甲醇：水=3:7，还有超纯水依次超声了很久，发现压力更大了，变成180多了。我该如何是好，我能反冲洗吗？或者我应该用什么溶剂超声柱子？[/color]

液相色谱柱的日常维护：　　　　(1)每次开机时，流速和柱压要逐渐增加，突然迅速增加，会使柱床受到冲击，引起紊乱，产生空隙　　　　(2)在进样前使色谱系统充分平衡，是否平衡可由基线加以判断　　　　(3)在进样前，检查色谱系统的各个接头，通常由此能发现是否有漏液现象。如有漏液，空气会从漏缝进入系统引起基线漂移，影响峰高和峰面积的重复性　　　　(4)不要把柱接头上得太紧，否则易损坏接头螺纹，引起渗漏　　　　(5)不要把柱子放在有气流的地方或直接放到阳光下，气流和阳光都会使柱子产生温度梯度造成基线漂移；如果怀疑基线漂移是由温度梯度引起的，可以设法使柱子恒温　　　　(6)若仪器用做常规分析，样品种类有限，但分析次数很多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱寿命　　　　(7)如果怀疑样品会污染色谱柱，可以用合适的溶剂(几百毫升)慢慢冲洗柱子过夜，第二天早晨再用流动相重新平衡柱子(约3min)　　　　(8)在因装卸、更换、贮存等而挪动柱子时，动作要轻，不要使其受到碰撞，以免柱床因震动产生空隙或通道　　　　(9)柱要加标签，新旧分开，不要放在温度变化很大的地方　　　　(10)柱子不用或贮藏时，应封闭并贮存在惰性溶剂中

液相色谱的柱效与柱子的内径有关吗？

这两天做方法的时候遇到一个问题，就是液相梯度平衡时间长用的是2695液相色谱仪，色谱柱是5um*2.1*150mm的柱子，0.3ml/min的流速做完样后从100%甲醇变到60%水/40%甲醇，需要12min以上压力才稳而从60%水/40%甲醇变到100%甲醇，也需要8-9min以上才能平衡好重复做了好几次实验，都是这个结果这个平衡时间是不是有点长了，液相方法才跑11min，半小时才能进一针，影响效率啊另外我从70%水/30%甲醇变到70%甲酸水（甲酸0.1%）/30%甲醇，压力竟然要半小时才能稳本人做液相的经验比较少，不知道这些是不是正常现象，大家能不能帮我看看，谢谢！

液相色谱的柱效与柱子的内径有关吗？

最近岛津LC-10A液相频频出问题，一进样泵压力就超20MPa，报警停机。样品保证没有杂质，而且也拿到其他液相色谱仪上检测没有一点问题。柱子保证也没有问题，拿到其他液相色谱仪上可以正常使用。在柱子平衡的过程中，压力正常，流动相是甲醇，柱压在4.7-4.9MPa，一进样压力马上升高，是不是自动进样器有问题呀？请教各位大虾，我该怎么处理呢？

问题: 兄弟们，我用的安捷伦1260液相色谱，冲洗的时候基线可以平衡是直的，打开循环以后就平衡不了，而且就绪不了显示RID未平衡！这是什么情况啊？有了解的嘛回复: 示差检测器需要单独对检测器排气才可以就绪；回复2: ?我用的是赛默飞的示差检测器；你去软件检测器模块你看看有木有排气操作；回复3: 打开循环20分钟以上，然后再关闭，待基线平了就可以进样了

用的岛津LC-20AD。有几个问题：1. 平衡柱子需要在初始流动相比例从低流速升至高流速吗？2. 平衡柱子如果需要从低流速升至高流速，那就需要在local模式手动去升，但是我需要调成remote模式准备进样的话，local模式下pump停了再remote，然后进样，不也是直接升高至高流速了吗？3. 如果在第2步，不先停pump而是直接remote的话，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]会变成上一位使用仪器的人的方法的流速，我曾经就因为上一位使用的流速过大导致我remote之后压力过大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]报警，不知道有没有什么解决办法呢？4. 我曾经就“[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]remote之后变成上一位使用的人的分析方法的流速”这个问题请教工程师，工程师教我的是保持remote，然后在软件上的equilibrium那里选自己的分析方法和平衡时间，这样子就可以解决这个问题，但是按照这个方法的话，就无法做到“平衡柱子从低流速升至高流速”，而是直接升到我的分析流速，如0.8 ml/min这样的。

姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。

最近在学习用UPLC，样品一个一个的做，流动相选择的都不同，我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子（反向柱），然后执行下一个样，流动相往往立刻切换。 昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念，请问这个是什么时候用，作用大吗？我的理解是一个样品测完，改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品，对不？

每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------ 一定得做！ 　　新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见下图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 5．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见下图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将"子弹头"预柱放入卡套片内 5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 7．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱） 注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。 1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端 2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧 3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网 4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料 5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平 6．照（下图）装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端 7．柱芯顶端套上2，然后参照（下图）将滤网放入 8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平 平衡色谱柱 　反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。 　　硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡 如何平衡色谱柱？ 　　平衡过程中，将流速缓慢地提高 　　用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡） 色谱柱的再生 　　进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。 表1　建议用来冲洗的溶剂体积 色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法： 极性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色谱填料）的再生： 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水** 非极性固定相（如反相色谱填料RP－18，RP－8，CN等）的再生： 水→乙腈→氯仿（或异丙醇）→乙腈→水 0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱 注意： 在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。 色谱柱的维护 1．使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度） 2．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围 3．避免流动相组成及极性的剧烈变化 4．流动相使用前必须经脱气和过滤处理 5．如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中 6．压力升高是需要更换预柱的信号

请问各位高手老师们，有没有专用于邻苯检测的液相色谱柱，或者说用什么样的柱子检测邻苯比较好！真心求教了

液相色谱洗柱子，用1:9有机相和水洗过之后，第二天还用，可以不走纯的有机相了吗？

waters1525高效液相色谱仪系统平衡时总是斜向下的直线，流动相：乙腈/0.01mol/L-磷酸二氢钠=3/7（pH=2.5），另外，这台仪器平衡系统到什么程度或者是什么指标达到什么程度就可以进样了？

我是准备用生理盐水对硝酸甘油溶液稀释后用液相色谱进行分析，流动相甲醇：水，215nm波长，应该如何清洗柱子呢？还有NaCl会不会在此处有峰，谢谢。

在使用新的液相色谱柱之前需要对柱子进行处理吗？

问题: 请教：液相色谱实验中，流动相对柱子压力有什么影响呢回复: 粘度影响压力，流速相同的情况下

分离酚酸、醇用的HSS T3柱子是超高效液相柱子，可以用于高效液相色谱的仪器吗？