液相色谱溶剂超声方法

[size=3]在使用液相色谱时，经常会碰到溶剂过滤头被污染或堵塞的现象。[/size][font=宋体][size=3] 当使用水或缓冲盐做流动相时，一定要经常更换流动相，水最好每天更换，至少两天换一次，缓冲盐最好现配现用。如果不及时更换容易变质的流动相，很容易滋生微生物，这样会影响基线的稳定，甚至发生过滤头堵塞。[/size][/font][font=宋体][size=3]测试过滤头是否堵塞，可以将过滤头从瓶盖组件处拔下，如果管线中充满溶剂，当过滤头没有堵塞，溶剂会自由滴出；如果过滤头已经堵塞，则没有溶剂或只有很少的溶剂滴出。[/size][/font][size=3][font=宋体] 玻璃材料的过滤头发生堵塞，不推荐超声清洗，因为超声很容易破坏玻璃过滤头的过滤板，只推荐用稀硝酸（[/font][font=Times New Roman]35%[/font][font=宋体]左右）浸泡，浸泡大约一个小时后，再用水洗净过滤头；不锈钢材料的过滤头是可以超声清洗的。[/font][/size]

小白求助：使用液相色谱，样品的溶剂需要与做标线的标液溶液完全相同吗？如果不相同，会影响出峰和积分结果吗？比如说，我的标液是乙腈中的，流动相也是乙腈和水，我现在接到一个甲醇或二氯甲烷等其他溶剂的样品，我需要换标液，换方法，重新做线，还是可以直接进样？

可否用分析纯的溶剂代替色谱级的溶剂来作为液相色谱的流动相？

可否用分析纯的溶剂代替色谱级的溶剂来作为液相色谱的流动相？

用于液相色谱的各种溶剂的性质[~95083~]

各位大侠，用液相色谱做样品时，对样品中的溶剂和我使用的稀释剂有要求么？有不能使用的试剂么，类似于二氯甲烷，四氢呋喃，丙酮等？如果使用那些溶剂对机器有什么影响？

[color=#444444]我在做合成实验中，用不同的溶剂去溶解样品，做高效液相色谱分析，流动相为甲醇和水，发现有的溶剂会出现溶剂峰，有的溶剂就不会出，这是为什么呢？求大神指教迷津，另外有没有相关专著讲述HPLC中溶剂峰出峰时间的[/color]

由于HPLC应用最多的检测器是紫外检测器，用于检测有紫外吸收的样品。紫外检测器灵敏度高，不破坏样品，能与其他检测器有串联，可用于制备；对温度及流动相流速波动不敏感，可用于梯度洗脱。但只能检测具有π-π或p-π共轭结构的化合物。 使用紫外检测器时应考虑溶剂的截止波长。例如，当检测波长为220nm时，只能选用小于此截止波长的溶剂，如正戊烷、水、甲醇、乙腈等溶剂，而不能用截止波长小于220nm的溶剂，如二氯甲烷、氯仿等。 紫外截止波长定义为：“以空气作为参考物，在1cm吸收池内溶剂测得与参照物相等吸收的吸收波长”。 当某溶剂在流动相中占较小比例时则应根据具体情况决定。如浓度为10%（体积分数）或更低的溶液在截止波长附近检测仅会有一个0.1AU（吸收单位）的背景吸收。除了随之产生的噪声水平增加，线性工作范围减小和稳定性变差外，多数情况是可以接受的。 应该值得重视的是不同液相色谱厂家不同批号溶剂的光谱特性可能存在明显的差异。由于杂质种类和含量的区别，紫外截止波长及吸收系数都会有差异。空气中氧气溶解量的区别会明显产生不同的基线噪声。因此，除了尽可能使用符合色谱标准的溶剂外，溶剂使用前应该仔细过滤，用超声脱气，甚至用吹氦气的方法处理，以尽量去除杂质以及可挥发的溶解气体。

有人说液相色谱所用的有机溶剂，如甲醇、乙腈等，要用进口的，这样不会有杂峰，本底也低，这样对吗？国产的哪个牌子最好。

液相色谱中流动相和样品溶剂可否一样？

液相色谱流动相小议一、液相色谱流动相的性质要求 一理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面： ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。 ②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。 ③必须与检测器匹配。使用UV检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收，或吸收很小。当使用示差折光检测器时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。 ④粘度要低（应正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。 反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性调整剂的性质及其所占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。一般情况下，甲醇-水系统已能满足多数样品的分离要求，且流动相粘度小、价格低，是反相色谱最常用的流动相。但Snyder则推荐采用乙腈-水系统做初始实验，因为与甲醇相比，乙腈的溶剂强度较高且粘度较小，并可满足在紫外185~205nm处检测的要求，因此，综合来看，乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。 在分离含极性差别较大的多组分样品时，为了使各组分均有合适的k值并分离良好，也需采用梯度洗脱技术。 反相色谱中，如果要在相同的时间内分离同一组样品，甲醇/水作为冲洗剂时其冲洗强度配比与乙腈/水或四氢呋喃/水的冲洗强度配比有如下关系： C乙腈＝0.32C 2甲醇＋0.57C甲醇 C四氢呋喃＝0.66C甲醇 C为不同有机溶剂与水混合的体积百分含量。100%甲醇的冲洗强度相当于89%的乙腈/水或66%的四氢呋喃/水的冲洗强度。 四、液相色谱流动相的滤过 所有溶剂使用前都必须经0.45μm（或0.22μm）滤过，以除去杂质微粒，色谱纯试剂也不例外（除非在标签上标明"已滤过"）。 用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液，严禁用于有机溶剂，否则滤膜会被溶解！溶有滤膜的溶剂不得用于HPLC。对于混合流动相，可在混合前分别滤过，如需混合后滤过，首选有机相滤膜。现在已有混合型滤膜出售。 五、液相色谱流动相的脱气 所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来误差。 溶解氧能与某些溶剂（如甲醇、四氢呋喃）形成有紫外吸收的络合物，此络合物会提高背景吸收（特别是在260nm以下），并导致检测灵敏度的轻微降低，但重要的是，会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰（假峰）。在荧光检测中，溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象，特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等。在某些情况下，荧光响应可降低达95%。在电化学检测中（特别是还原电化学法），氧的影响更大。 除去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能，也将改善在一些荧光检测应用中的灵敏度。常用的脱气方法有：加热煮沸、抽真空、超声、吹氦等。对混合溶剂，若采用抽气或煮沸法，则需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化。超声脱气比较好，10~20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了（一般500ml溶液需超声20~30min方可），此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触，以免玻璃瓶破裂，容器内液面不要高出水面太多。 离线（系统外）脱气法不能维持溶剂的脱气状态，在你停止脱气后，气体立即开始回到溶剂中。在1~4小时内，溶剂又将被环境气体所饱和。 在线（系统内）脱气法无此缺点。最常用的在线脱气法为鼓泡，即在色谱操作前和进行时，将惰性气体喷入溶剂中。严格来说，此方法不能将溶剂脱气，它只是用低溶解度的惰性气体（通常是氦）将空气替换出来。此外还有在线脱气机。 一般说来有机溶剂中的气体易脱除，而水溶液中的气体较顽固。在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法，这种连续脱气法在电化学检测时经常使用。但氦气昂贵，难于普及。 六、液相色谱流动相的贮存 流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。 磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应尽量新鲜配制使用，不要贮存。如确需贮存，可在冰箱内冷藏，并在3天内使用，用前应重新滤过。容器应定期清洗，特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。因甲醇有防腐作用，所以盛甲醇的瓶子无此现象。

请问什么是质子化溶剂？液相色谱中加入质子化溶剂的用途是什么？

请问大侠们，如何测定香精中未知增溶剂？（定性&定量）如果已经知道是PC309，用液相色谱怎么定量？P.S. 没用过液相色谱，只用过GC和GCMS。。。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=53286]用于液相色谱的各种溶剂的性质[/url]

安捷伦1100液相色谱如何设置溶剂延迟？这样可以避开溶剂峰，哪位大侠可以帮助，谢谢

看到一个少见的问题，液相色谱中，正相溶剂是不是不导电？

[color=#d801e5][size=4][b]请问大家在液相色谱测定样品过程中，标准曲线配置时是用纯有机试剂呢？还是按照流动相的配比来做溶剂呢？打个比方：我用乙腈和水6：4做流动相测多环芳烃，那么我的多环芳烃是用纯乙腈溶呢？还是用二者混合溶剂溶呢？在文献上看到好多都用纯有机试剂溶的，但是waters公司提供的测定方法，是用乙腈和水6：4来溶的，我该如何选择呢？希望大家积极给予回应！‘期待大侠们的建议哦[/b][/size][/color][img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif[/img]

前两天看到有的同行问有关溶剂的性质问题,决定自己将整理的一些数据上传,以飨同行，有不对的地方，请指正。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15786]用于液相色谱的各种溶剂的性质[/url]

液相色谱，不同样品浓度时 溶剂峰会变化吗？

用高效液相色谱仪测多环芳烃菲，标线用甲醇配制，上机样品的溶剂为水和甲醇的混合溶液，且绝大部分为水，流动相用甲醇：水=90：10.试问这样是否可以？

液相色谱仪流动相需要的温度为40℃，提前对其进行超声处理时，温度也需要达到40℃吗？要是达不到，假如室温为20℃，超声后放入水浴当做流动相，是否会因为温度的升高而重新产生气泡呢

[color=#444444]做液相色谱，流动相是70:30的乙腈水溶液，样品是纯水配的糖液，检测器为示差折光检测器，为什么出来的溶剂峰有时正，有时重新冲洗样品池后变成负峰呢？[/color]

高效液相色谱仪超声脱气时试剂瓶应打开口吗？

液相色谱部分常见问题1 压力波动原因: 1.系统有气泡； 2.泵前流路系统堵塞； 3.主动阀阀芯，入口单向阀或者出口单向阀污染或故障 4.主动阀故障 5.泵头密封圈磨损 解决方法： 1.通过液相的排空阀将气泡排出系统；安装在线脱气机或者在流动相中通入氦气实现在线脱气； 2.清洗溶剂瓶中溶剂滤头（如果为玻璃滤头，用30%稀硝酸浸泡）；分别用60度热水异丙醇冲洗从溶剂瓶到泵头管线（包括脱气机和比例阀） 3.超声清洗主动阀阀芯（入口单向阀）及出口单向阀阀（注意超声清洗时注意阀会散开）；或者更换单向阀； 4.更换主动阀 5.更换泵头密封圈

[color=#444444]用液相色谱同时分析甲醛和乙醛，流动相为已腈，用的2.4二硝基苯肼做衍生剂，溶剂峰居然峰高可以达到700-1000，这也太高了了嘛，如何变小呢[/color]

跟大家分享一本书《高效液相色谱方法及应用》第二版，感兴趣的版友可以下载附件查阅，也欢迎补充。全书的目录如下：作 者： 于世林出 版 社： 化学工业出版社 本社特价书所属丛书： 色谱技术丛书 册 数： 条 形 码： 9787502569068 ; 978-7-5025-6906-8I S B N ： 7502569065 出版时间： 2005-6-1开 本： 小16开 页 数： 333定 价： 39 元第一章 绪论第一节 高效液相色谱法的特点一、与经典液相(柱)色谱法比较二、与气相色谱法比较三、高效液相色谱法的优点四、高效液相色谱方法发展简介第二节 高效液相色谱法的分类一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性一、应用范围二、方法的局限性参考文献第二章 高效液相色谱仪简介第一节 流动相及储液罐一、储液罐二、流动相脱气第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置一、高压输液泵二、输液系统的辅助设备三、梯度洗脱装置第三节 进样装置一、停流进样装置二、六通阀进样装置三、自动进样器第四节 色谱柱一、柱材料及规格二、柱填料三、保护柱四、柱连接方式五、柱温控制第五节 检测器一、检测器的分类和响应特性二、紫外吸收检测器三、折光指数检测器四、电导检测器五、荧光检测器六、蒸发光散射检测器第六节 色谱数据处理装置一、微处理机二、色谱工作站参考文献第三章 液固色谱法和液液色谱法第一节 分离原理一、吸附系数二、分配系数第二节 固定相一、液固色谱固定相二、液液色谱固定相第三节 流动相一、表征溶剂特性的重要参数二、液固和液液色谱的流动相第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律一、溶质保留值的基本方程式二、液固色谱的保留值方程式三、液液色谱的保留值方程式参考文献第四章 键合相色谱法第一节 分离原理一、正相键合相色谱法的分离原理二、反相键合相色谱法的分离原理第二节 固定相一、键合固定相的制备及分类二、键合固定相的性质三、使用键合固定相应注意的问题第三节 流动相一、溶剂的选择性分组二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则三、改善色谱分离选择性的方法四、多元混合溶剂的多重选择性五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相一、新型高效化学键合固定相二、化学键合固定相分类方法简介三、整体色谱柱四、超热水流动相第五节 离子对色谱法一、分离原理二、固定相、流动相和对（反）离子三、影响离子对色谱分离选择性的因素参考文献第五章 梯度洗脱第一节 基本原理一、等度洗脱二、梯度洗脱第二节 影响梯度洗脱的各种因素一、梯度洗脱时间(tG)对分离的影响二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响三、梯度陡度对保留值的影响四、柱温变化对保留值的影响五、梯度洗脱程序曲线形状的影响六、影响梯度洗脱的其他变量第三节 优化梯度洗脱的方法一、建立梯度洗脱方法的一般步骤二、梯度洗脱中的实验条件第四节 梯度洗脱的图示方法一、二元溶剂梯度洗脱二、三元溶剂梯度洗脱三、四元溶剂梯度洗脱四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱参考文献第六章 体积排阻色谱法第一节 分离原理一、分布系数二、体积排阻色谱法的特点第二节 固定相一、固定相的分类二、凝胶固定相的特性参数三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点第三节 流动相一、凝胶渗透色谱的流动相二、凝胶过滤色谱的流动相第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理参考文献第七章 高效液相色谱法的基本理论第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数一、总孔率二、柱压力降三、柱渗透率第二节 高效液相色谱的速率理论一、影响色谱峰形扩展的各种因素二、范第姆特方程式的表达及图示第三节 诺克斯方程式一、描述色谱柱性能的折合参数二、诺克斯方程式第四节 色谱柱操作参数的优化一、三个柱操作参数的表达式二、HPLC中实用柱操作参数的优化三、柱操作参数优化的图示表达方法第五节 “无限直径”效应和柱外效应一、“无限直径”效应二、柱外效应第六节 超高效液相色谱一、超高效液相色谱的理论基础二、实现超高效液相色谱的必要条件三、超高效液相色谱的应用参考文献第八章 高效液相色谱分离条件的优化第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性一、色谱参数的分类二、色谱参数的相关性第二节 色谱分离条件优化标准的选择一、难分离物质对的峰对分离优化标准二、整体色谱图的优化标准第三节 色谱响应函数和色谱优化函数一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数二、Watson和Carr提出的色谱响应函数三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数四、Berridge提出的色谱响应函数第四节 色谱分离条件的优化方法一、单纯形法二、窗图法三、混合液设计实验法四、重叠分离度图法五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法一、实验设计系统二、人工智能系统第六节 高效液相色谱专家系统简介一、专家系统的组成二、专家系统的使用方法参考文献第九章 微柱液相色谱法第一节 方法简介一、微型柱的分类二、微柱液相色谱法的优点和缺点第二节 基本理论一、柱外效应二、管壁效应三、稀释效应四、分离阻抗第三节 仪器装置一、输液泵系统二、进样系统三、柱系统四、检测器系统五、连接管和接头第四节 微柱的制备一、评价微柱性能的重要参数二、影响微柱分离效率的相关参数三、微柱的制备方法第五节 微柱液相色谱的新技术一、纳米液相色谱技术二、超高压液相色谱技术参考文献第十章 二维高效液相色谱法第一节 描述分离体系效能的参数一、峰容量二、信息量第二节 二维高效液相色谱的技术功能一、切割功能二、反冲洗脱功能三、痕量组分的富集功能第三节 二维高效液相色谱的流路系统一、多通路切换阀二、二维高效液相色谱的流路系统第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用参考文献第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术第一节 样品的性质及柱分离模式的选择一、样品的溶解度二、样品的分子量范围三、样品的分子结构和分析特性第二节 分离操作条件的选择一、容量因子和死时间的测量二、色谱柱操作参数的选择三、样品组分保留值和容量因子的选择四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择第三节 高效液相色谱法的实验技术一、溶剂的纯化技术二、色谱柱的装填技术三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术四、梯度洗脱技术五、色谱柱前和柱后的衍生化技术六、样品的预处理技术参考文献符号表