液相色准曲线绘制方法

请问各位大佬，怎么用绘制高效液相色谱仪的标准曲线呀

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]软件的标准曲线绘制方法

[color=#444444]标准品实在少得可怜，所以想问问能否只在第一次做一条标准曲线，以后再进样测量时不用绘制标准曲线了，仍然使用原标准曲线。当然，每一次的色谱流动相、柱子等外部条件不变。[/color]

药典方法示例：[b]黄曲霉毒素测定法[/b]混合对照品溶液的制备:精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0μg／ml、0.3μg／ml、1.0μg／ml、0.3μg／m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。[b]硫酸依替米星[/b]第二法 照高效液相色谱法（通则 0512）测定测定法:取依替米星对照品适量，精密称定，分别加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含依替米星1.0mg、0.5mg和0.25mg的溶液作为对照品溶液（1）、（2）、（3）。精密量取上述三种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品溶液浓度的对数值对相应的峰面积的对数值计算线性回归方程，相关系数（r）应不小于0.99；[b]蜂蜜[/b]标准曲线的制备:分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。精密吸取混合对照品溶液各15μl，注入液相色谱仪，分别测定。以对照品浓度为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。[b]制作方法总结如下：[/b]1.称一份对照品制备作为对照品储备液；2.稀释成系列梯度浓度，取相同的进样量上机检测或配制一份对照品溶液取不同的进样量。 有一个系统风险在里面，就是对照品如果称量不准确，整个标准曲线就不准确。一般外标法都要求配制两份标准溶液，标准曲线法也应该配制两份标准溶液，一份用于制作标准曲线，另一份标准溶液用于标准曲线的校验，以减少系统风险。最准确的方法应该是每一个标准浓度点都应从称量开始，但也是成本最高的方法。

在建立方法后绘制校准曲线时，第一个要先做个BLK嘛，然后在将各个浓度标液依次进入得到曲线？？

用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计（单火焰）在测试矿泉水中的微量元素时，需要先用标准溶液绘制标准曲线，请问所配制的标准溶液的浓度有什么要求吗？检验方法上只给出了浓度范围，其最大值必须取吗？

向大佬们求教一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]绘制标准曲线的详细步骤

[size=15px]用一系列被测物标准溶液，按照标准方法规定的步骤，将被测物转变为[color=var(--weui-LINK)]有色溶液[/color]。制备好的标准系列和空白，在方法选定的波长下，测定吸光度。已被测物浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。[/size][size=15px]对标准系列，溶液以纯溶剂为参比进行测量后，应先作空白校正，然后绘制标准曲线。[/size][size=15px]标准溶液一般可直接测定，但如试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，应和试样同样处理后再测定。[/size][size=15px]校准曲线的斜率常随环境温度、试剂批号和贮存时间等实验条件的改变而变动。[/size][size=15px]因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对，其相对差值根据方法精密度不得大于5%-10%，否则应重新绘制校准曲线。[/size]

因为本人的论文正在修改，其中审稿人提到关于标准曲线绘制方法，包括standard addition method和external standards method。由于我的研究方向是偏物理方面，对这两种方法不是很了解，所以希望了解的同学给我介绍一下两者的异同点，多谢了。另外还有一个问题，就是matrix effects所指的是背景干扰吗。（比如说我测的实际样品为尿液，然后尿液本身对实验结果就有影响。）

因为本人的论文正在修改，其中审稿人提到关于标准曲线绘制方法，包括standard addition method和external standards method。由于我的研究方向是偏物理方面，对这两种方法不是很了解，所以希望了解的同学给我介绍一下两者的异同点，多谢了。另外还有一个问题，就是matrix effects所指的是背景干扰吗。（比如说我测的实际样品为尿液，然后尿液本身对实验结果就有影响。）

杨老师，我想请教标准曲线绘制的问题：1、平时我们在配制标准溶液时，均使用一定浓度的酸溶液作为标准工作溶液的介质，该介质（我姑且称之为标准空白），我想问的是在实际工作中要不要扣除该标准空白的吸收值？2、书上说，在使用标准曲线法测量样品溶液时，希望标准溶液和样品溶液的成分相一致，但实际上，标准工作溶液是不大可能与样品溶液的成分相一致的，比如土壤样品，我想在实际测量过程中，如何做才能达到书上所说的要求？3、在实际测量过程中，经常会遇到加入基体改进剂的问题。但所加的基体改进剂并不是一个，而是有多种多样，那么在绘制标准曲线时，怎么加基体改进剂才比较好？才符合绘制标准曲线的要求？另外，我想问一个很基本的问题，那就是有关信噪比的问题，能用例子讲一讲吗？谢谢了！

如何配制标准溶液？如何绘制标准曲线？

大家好，在进行挥发性有机物测定，标准曲线时，碰到一些问题，希望大家不吝指教，仪器：安捷伦5799-7820A，买了24种物质的有机物，溶剂是甲醇，怎样绘制标准曲线。 我是新手，之前只接触过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]。不太明具体操作，请大神们指导指导，有无具体的方法。

配置标液或者绘制标准曲线的时候，用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]的精度够吗？朋友们是偏向[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]还是移液管呢？

分析检测中绘制标准曲线目的是可以根据标准曲线查出待测物质的含量，所以标曲的制定是实验室工作中必不可少的工作。做标准曲线真的那么简单？你所做的标曲真的做好了吗?导致标准曲线弯曲的原因是啥？RSD值、线性相关系数和线性方程如何？线性好与不好分别由于哪些原因造成的？是仪器、标液，还是配制的问题？ 前期测定时注意： 1、仪器校验好。 2、移取液体体积要精确，保证迅速准确，尽可能用一根移液管；为减小人为误差，同一种液体要一个人操作。 3、保证标准品的纯度，所用标准品最好是新打开的，纯度较高的固体或溶液，防止污染。 4、容器要保证洁净。 5、根据标准品理化性质注意加样的先后顺序。 6、如果要测OD值，应保证测前各管液体充分混匀。 7、若还是有某个点误差较大，应舍弃。 另外： 1.样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈s型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。 3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。 4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。 5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。 6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数r至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。 分光光度法绘制标准曲线所遇问题？ 1、单色光纯度不够 问题：标准曲线上端向下弯曲。 措施：光度法中要求在最大吸收峰处测定吸光度，光度计的有效谱带宽度越窄越好，有利于获得纯度高的单色光。 2.比色皿的厚度或光学性能不一致 如果装试剂空白液的比色皿较其它比色皿薄或对光的吸收和反射少一些，则曲线的延线与纵坐标相交；反之，与横坐标相交。 3.显色反应和反应条件的问题 当显色反应的灵敏度不高时，被测物低于某一浓度就不能显色，当浓度不同时，溶液对光的吸收、散射的程度不同，低浓度段往往弯曲，加上浓度高时部分胶体颗粒的聚沉，致使测定的吸光度降低，曲线上端向下弯曲。 4.操作上的原因 问题：褪色反应，显色溶液的颜色不稳定、易褪色，若比色时间超过了稳定时间，标准系列中高浓度溶液颜色减褪，致使曲线上端向下弯曲。 措施：控制好显色剂的加入时间，可以每加3份，停3～3min，再加上3份，依次进行，以使每支比色管的显色时间相近。 5、干扰物质的影响 标准曲线绘制完毕了，该如何检验？ 标准曲线的检验是实际操作中最大的难点，也是工作中误区和争议最多的话题了！ 先来了解下最重要的三大检验项目： 1.精密度检验 标准曲线的精密度检验：精密度检验就是看试验点距离拟合的直线的距离有无异常，所以也称线性检验（拟合检验），需用F检验，P0.05作为线性检验合格的标准。 2.截距检验 3.斜率检验 标准曲线的截距检验和斜率检验分别考察Y=a+bX中a和b与0的统计学差异，a与0有差别说明有试剂空白或系统误差，而b若与0没差别说明仪器的灵敏度根本达不到分析要求。 标准曲线的检验应该是线性检验结合失拟检验，以及残差的正态性检验结合才是统计学上比较完备的。 标准曲线常见问题汇总 问题一：标准曲线需要人为的增加（0,0）点吗？ 答：不能。通常的标准系列多是配制0,1,2,3mg/L系列这样的说法，没做实验人为添加（0,0）很不妥，因为很多时候0管进入仪器可能也有响应值，这也是我们考察试剂空白的一个重要步骤。这个0管在某些时候非常重要，如，全血铅测定，我们采用牛血清来基体匹配标准系列，如果此时你用酸做空白或没做实验人为添加（0,0），那你就很难做好标准曲线，所以，标准曲线的0管也是做好标准曲线的重要考虑点。 问题二：标准曲线需要减掉试剂空白来做吗？ 答：不需要。仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做，工作中我们也常用0管来做仪器调零。其实没有必要那么麻烦，即使空白或0管有响应值，在构建标准曲线时，我们已经认为该响应值就是0浓度，也就是扣除了这个空白的。 问题三：什么时候用Y=bx和二次曲线呢？ 答：标准曲线我们通常采用的是Y=a+bX，曲线拟合完必须要做统计检验且要做统计完备的线性检验和失拟检验，然后再做a与0的差别检验，如果a与0的统计学上无差异，你就可以考虑用Y=bX的拟合曲线，拟合出来后同样做线性检验和失拟检验，如果线性检验合格（P0.05）此时你就可以采用Y=bX。二次曲线的采用同样是这样的道理，如果你Y=a+bX时拟合不合格，你就考虑用Y=a+bX+cX2，同样做失拟检验，考察拟合的符合情况。如果Y=a+bX和Y=a+bX+cX2都满足拟合检验和失拟检验合格，则采用Y=a+bX形式，这样符合统计学上参数最少的统计简洁性原则。 问题四：标准曲线去查含量时是先减空白信号算样品含量还是先算出空白含量相减呢？ 答：工作中我们常要减掉空白得到样品含量，现有国家标准方法有的推荐先算出空白含量，用样品含量相减，也有推荐先用样品信号减空白信号然后去标准曲线推算含量。而且这两种算法常常差距很大。其实这种差距往往是低含量水平时才出现，在低含量水平通过标准曲线推算含量时，本身不确定度就很大。这两种方法都可以。个人推荐先用样品信号减空白信号然后去标准曲线推算含量，因为这样出来的含量不确定度要小一些，而先算出空白含量再相减就增加了1次标准曲线推算含量时的不确定度，因为好的测量永远是不确定度小的测量。 结语 要想绘制出合格的标准曲线、使用好标准曲线，真心不易，必须将以上各个方面的条件都考虑进去，即对标准曲线的绘制也实行质量控制，只有这样,才能得出理想的标准曲线。

各位你们好！我们是耐火材料行业的化学分析实验室，主要是进行高铝矾土，硅砖，铝砖等建筑材料的化学元素分析，对于铁，钛等含量较低的元素要使用可见分光光度法，对于如何绘制工作标准曲线，最近我产生了疑问：以前的实验室前辈们，是通过在坐标纸上手绘含量和吸光度的曲线，然后在测量时通过测得的吸光度值，在绘制的曲线上查到，测试样品的含量。这种方法使用了很长时间，但是最近上一级实验室过来检查要求我们：在实验原始记录上要，写上工作曲线的方程，由于原来的曲线是通过手绘的，没有曲线方程。为了迎合检查的需要，我们把建立曲线时每相邻的两个数值建立一个方程，这样一个曲线就有好几个方程，我内心觉得这种方法不科学。但也没有更好的方法，请问同行们你们是怎么做的？比如下面这个曲线含量mg0.05吸光度0.0560.10.090.20.1280.30.2170.40.2730.50.346惠临指导，不胜感激

卤乙酸的水溶液可以直接进HP-5色谱柱吗？ 测定水中卤乙酸含量，可以用卤乙酸的标准品的水溶液做浓度梯度，绘制标准曲线吗？ 问题补充： 使用的是ECD检测器。需要绘制卤乙酸的标准工作曲线。是卤乙酸用水溶，还是卤乙酸用甲醇做溶剂？能直接水溶卤乙酸进HP-5的色谱柱吗？

要做HJ605-2011方法确认，标准中两种标准曲线的绘制方法两种，大家一般是采用[font=Calibri][/font]用平均相对响应因子绘制校准曲线，还是[font=Calibri][size=10.5pt][font=宋体]用最小二乘法绘制校准曲线。[/font][/size][/font]

方法：邻菲罗啉分光光度法。请帮我看一下1、第三步中的定量转移大约要转多少毫升 1、定量转移后的质量梯度如何计算，是不是还是用第一步的质量梯度？标准曲线的绘制 步骤:(1)依次移取铁标准使用液0,2.00,4.00,6.00,8.00,10.0mL置150mL锥形瓶中,加入蒸馏水至50.0 mL;(2)再加1+3盐酸1mL,10%(m/v)盐酸羟胺1mL,玻璃珠1~2粒.然后,加热煮沸至溶液剩15mL左右,冷却至室温;(3)定量转移至50mL具塞刻度管中.加一小片刚果红试纸,滴加饱和乙酸钠溶液至试纸刚 刚变红,加入5mL缓冲溶液,0.5%(m/v)邻菲罗啉溶液2mL,加水至标线,摇匀.显色15min后,用10mm 比色皿,以水为参比,在510nm处测量吸光度,由经过空白校正的吸光度对铁的微克数作图.

关于紫外分光光度法绘制标准曲线问题，我们都知道好多曲线是需要用水或者其他基体做零浓度空白来计算校正吸光度，那么绘制标准曲线的时候包不包括坐标点（0，0）？

Excel绘制标准曲线全图片教程随着计算机的日益普及，越来越多的检验工作者希望能从一些烦琐的工作中解脱出来，如：绘制标准曲线、绘制质控图、计算检测值等等。当然借助检验科办公系统理论上是最方便的，但很多单位是没有检验科办公系统的。其实借助Microsoft的Excel电子表格工具对检验工作也会带来很大的便利。　　Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。　　现就先介绍一下如何使用Excel绘制标准曲线。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64708]Excel绘制标准曲线全图片教程[/url]

方法：邻菲罗啉分光光度法。请帮我看一下1、第三步中的定量转移大约要转多少毫升 1、定量转移后的质量梯度如何计算，是不是可以用第一步的质量梯度？标准曲线的绘制 步骤:(1)依次移取铁标准使用液0,2.00,4.00,6.00,8.00,10.0mL置150mL锥形瓶中,加入蒸馏水至50.0 mL;(2)再加1+3盐酸1mL,10%(m/v)盐酸羟胺1mL,玻璃珠1~2粒.然后,加热煮沸至溶液剩15mL左右,冷却至室温;(3)定量转移至50mL具塞刻度管中.加一小片刚果红试纸,滴加饱和乙酸钠溶液至试纸刚 刚变红,加入5mL缓冲溶液,0.5%(m/v)邻菲罗啉溶液2mL,加水至标线,摇匀.显色15min后,用10mm 比色皿,以水为参比,在510nm处测量吸光度,由经过空白校正的吸光度对铁的微克数作图.

仪器分析一系列梯度浓度的标准曲线，仪器自动绘制的曲线跟我们用excel表X轴浓度，Y轴强度绘制的曲线有微小差异（包括曲线方程跟相关系数），是什么原因呢？

用紫外做标准样时，各位用什么方法绘制标准曲线的？我是在Excel上做的。

我采用关松荫主编的《土壤酶及其研究方法》书中所述方法测量土壤中的脱氢酶，在绘制TTC还原产物TPF标准曲线的过程中遇到了难题。书中的方法是：“加NaHSO3(亚硫酸氢钠）还原TTC。”我加NaHSO3后溶液不显色。 试了几次仍然是不显色。 后来又查了些资料，用保险粉可以使TTC还原但是要用乙酸乙酯定容。试了一下保险粉果然可以显色，但是，当向显色后的溶液里加甲醇定容的时候，颜色又都消失了。现在这个很麻烦，向各位求助。

RT：新的GB 50325-2010上写的绘制苯.TVOC的液体的标准曲线是取一定量的标液注入吸附管内，然后通氮气活化，制成标注管，然后通过热解析直接进样绘制标准曲线我现在的问题是：1.这种方法需要测定解析率吗？2.标液就用甲醇中的苯就可以吗（我们试验室是把甲苯 对间临二甲苯 苯 都买回来）还是按一定的比例混合出标液啊？3.我们单位现在的热解析仪是XY-2002A 我问厂家说可以支持直接进样，热解析仪后面接了个三通阀，连接色谱仪和氮气发生器。可是我解析了后却不出曲线，我后来问上海天普（色谱仪厂家）他们说这热解析仪不支持直接进样。我现在也很糊涂。如果说我用热解析仪上那100ml的注射器采集一定质量的解析后气体手动进样到色谱仪中，绘制标准曲线可以吗？4.苯应该是用面积外标法。请各位大大说下你们具体做法。5.在弱弱的问句，TVOC也用面积外标法吗？哎。。。提出这么多问题。想想各位大大回答要累坏手指，小弟在这里先帮各位大大揉手指啦http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gif

[color=#444444]30 g HPA（固体）溶解于500 mL 乙醇中作为原料进入加氢反应器，HPA加氢生成NPG，也就是说乙醇作为溶剂不参与反应，最终如果完全转化的话，出料组成应该是30g NPG + 500 mL 乙醇，现在想绘制NPG的标准曲线，是不是最大浓度的应该配置30g /500 mL ，然后依次递减吗？如果标准曲线的纵坐标是NPG浓度的话，横坐标用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]打出来的NPG峰面积还是NPG峰面积/乙醇的峰面积之比呢？哪个更好？[/color]

现采用液体外标法绘制标准曲线，那么若使用直接进样的方式绘制标曲时，是不是要求所有点的进样量必须一致？