液相色准曲线配置方法

药典方法示例：[b]黄曲霉毒素测定法[/b]混合对照品溶液的制备:精密量取黄曲霉毒素混合标准品(黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0μg／ml、0.3μg／ml、1.0μg／ml、0.3μg／m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。[b]硫酸依替米星[/b]第二法 照高效液相色谱法（通则 0512）测定测定法:取依替米星对照品适量，精密称定，分别加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含依替米星1.0mg、0.5mg和0.25mg的溶液作为对照品溶液（1）、（2）、（3）。精密量取上述三种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，以对照品溶液浓度的对数值对相应的峰面积的对数值计算线性回归方程，相关系数（r）应不小于0.99；[b]蜂蜜[/b]标准曲线的制备:分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40%乙腈10ml，溶解，摇匀，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。精密吸取混合对照品溶液各15μl，注入液相色谱仪，分别测定。以对照品浓度为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。[b]制作方法总结如下：[/b]1.称一份对照品制备作为对照品储备液；2.稀释成系列梯度浓度，取相同的进样量上机检测或配制一份对照品溶液取不同的进样量。 有一个系统风险在里面，就是对照品如果称量不准确，整个标准曲线就不准确。一般外标法都要求配制两份标准溶液，标准曲线法也应该配制两份标准溶液，一份用于制作标准曲线，另一份标准溶液用于标准曲线的校验，以减少系统风险。最准确的方法应该是每一个标准浓度点都应从称量开始，但也是成本最高的方法。

请问：用液相做标准曲线，一种方法是进样体积相同，系列浓度和对应的峰面积得到；另一种是配制一个浓度的标准品溶液，用一系列进样体积（1、2、3、4、5、6），和对应的峰面积得到标准曲线。二者有区别吗？是不是在分析工作中都可以用？谢谢！

最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺，不知各位有否这方面的经验，能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件，谢谢！我有以下两个问题，希望大家能分享经验，谢谢大家。1、 标准曲线的建立方面，目前报道的文献大多采用溶液直接进样的方式，对于这种方法我有一点疑问：临床实际样品在处理过程中会有一个提取回收率的问题，当待测物与内标的提取回收率相同的时候，采用溶液直接进样的方式制备标准曲线或许可行，但事实上两者的提取回收率很有可能不一样（因为空白血浆不易获得，这一点无从考证），那么采用这种方法制备标准曲线的话，得到的结果肯定是不可靠的。但是我查了很多文献，包括国外的，大都采用这种方法，希望各位专家能给予指点。此外，也有一篇文献采用牛血清白蛋白配制模拟血浆来当作空白血浆，在将标准品加入其中，按照实际血浆样品处理过程同法处理来制备标准曲线。另外有文献将实际血浆用氧化铝吸附处理后的血浆当作空白血浆来制备标准曲线，但是操作很繁琐。个人觉得可以用牛血清白蛋白配制模拟血浆比较可行，但是毕竟改基质与实际的血浆不一样，这种操作是否切实可行，希望各位专家给予指点。2、 稳定性方面：大部分文献表明儿茶酚胺在室温很不稳定（但也有文献说很稳定），目前配制储备液的方法主要有以下几种：1）直接用水配制2）加盐酸3）加高氯酸，关于稳定性方面，不知各位有何经验分享。

如题，求液相维生素A标准品的配制方法

做气相的过程中，配置曲线是肯定的，在曲线的配置中，大部分都是重量法和体积法来配置的。我自己经常使用的是重量法配置的。之前还确实没有做过这两种配置曲线的对比。所以我这个没办法评说。 重量法配置过程中会产生一些挥发，因为在称量的过程中肯定会有少许的挥发。但是在体积法配置中，你首先得确保你的配置所用到的耗材，微量进样针的准备性。否则一切都是免谈。两种各有优点和缺点。但是不知道大家在自己实际过程中选的那种方法配置的曲线。一起来讨论下！

为应对盲样考核，小弟有一些思路，望朋友们指点迷津。这段时间做了不少职业卫生项目，做出来的曲线都挺不错的，3个9以上。可是盲样结果不是很理想。所以我想应该是梯度浓度配置的准确性问题。就像y=0.999x-1和y=0.999x+1，同样的斜率，盲样峰面积是一定的，得出的结果差异很大。所以标液配置的准确性直接影响盲样结果。对于标准的配置小弟考虑了很多因素，一开始我使用的是体积法配置各浓度点，这种方法一次稀释倍数不要超过100倍，比如稀释100倍，移液管的误差是0.02，一次稀释100倍那误差就是0.02，你分2次，10到100，再10到100，则误差是0.02*0.02。实际试验过程中，一来有大部分机溶剂粘性很小，移液管转移过程中会滴液，二来溶剂的使用量非常大，成本也高。所以，之后小弟改用重量法来稀释标液。重量法稀释过程中，小弟有一些心得：一开始为了节省成本，溶剂只称量到0-10g以内，加标准物也是加一滴二滴这个样子，对于后来实验中考虑到，假如说仪器的误差是0.003，那么我配置1:2，则实际是1.003:2.003=0.50074887。如果我加大称样量的话，比如10:20，则实际是10.003:20.003=0.500074988。后来小弟用后者来配置，实际试验过程中，线性都非常好。当然上网咨询，有用微量移液针的用法，不过小弟没有做好，不知哪位大哥可以分享一下移液针配置的精髓。重量法稀释小弟用的一直都很好，不过盲样考核这里有些难处需要大家帮忙看看由于我采用重量法需要的标液量很多，基本在10g左右。公司买的标液都是2ml的，比如1000ug/ml 2ml。但买的标液都有鉴定证书的，可靠性比较大，自己重量法配置可使称量误差控制到很小。自己有考虑过用色谱纯99.9%的来配置，不知采用哪种途径来配置，准确性更大一些，使盲样考核通过，请有过相关经历的前辈来指点。

[color=#444444]目前做三元物系的气液相平衡实验，三物质混溶。采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测量组分，标准曲线怎么配置呢？[/color][color=#444444]我配置一些不同质量成分的混合液，但是每种物质的质量分数和峰面积百分比都不成线性的，应该是每种物质的出峰会相互影响的吧。[/color][color=#444444]不知道有没有人做过呢？？？求解~~~[/color]

我配置了好几次都没有成功，荧光强度不成线性！各位大神能否发一份硒的标准曲线的配置方法！谢谢

请教各位大虾个问题：在做液相标准曲线时，你们是配制系列浓度，还是同一个浓度进不同的ul做标准曲线啊？请问后面这种方法可靠性好吗？谢谢

在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]中，配置标准曲线时，但是按照我目前配置方法做的话，不知道是什么原因，线性做的不好，而且总有一两个点不在线上，各位大神有什么好的配置方法和配置过程中需要注意什么的吗？

液相流动相A、B相均由乙腈-甲醇-缓冲溶液组成，只是比例不一。但是配置得到的不同批次流动相，在分离目标体系（比较复杂）时，峰的分离结果不一90min的梯度洗脱程序，在50-55min区段内两峰理想时R=1.0，不理想时两峰共洗脱成一个峰。流动相配置时：为了减少批次间的差异，用容量瓶进行缓冲盐溶液的配置（缓冲体系是KH2PO4-H3PO4)每次调节pH前均会校准pH计量取乙腈、甲醇和缓冲盐时用同一量筒以确保比例的准确因为分离结果直接与不同批次有关，不存在同一批次的流动相分离结果有好有坏，所以应该不会是柱效的降低、流动相脱气不充分等问题想请问造成不同批次流动相下分离效果差异的原因还有哪些，出现这样的问题是不是说明缓冲体系的缓冲容量不够呢？应该怎么解决？Ps：Buffer: 10.2 g of monobasic potassium phosphate in a 1000-mL volumetric flask. Dissolve in 950 mL of water. While stirring, adjust with phosphoric acid to a pH of 3.1, and dilute with water to volume.Solution A: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:5:75)Solution B: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:30:50)

[color=#444444]本人想做豆甾醇的液相色谱中的标准曲线，现需要标准液浓度1mg/ml、0.8mg/ml、0.6mg/ml、0.4mg/ml、0.2mg/ml。打算配制1mg/ml的标准母液，然后进行稀释处理，得到其他浓度的标准液。但在配置标准母液，打算用5ml的容量瓶定容，所以打算用0.01mg的电子天平称量5mg的标准品，但是很难精确称量到5.00mg。我是采用其他粉末试称了下，发现称量显示的为5.02mg，很难很准确的称量到5.00mg，所以感觉不能配制标准母液。[/color]

甲基汞用LC-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICPMS[/color][/url]检测，线性不好，求配置流动相和标准曲线的方法。求助，用LC-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICPMS[/color][/url]检测甲基汞的流动相和标准溶液如何配置，标样用的氯化甲基汞，5%的甲醇配置，不成线性。

岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]LC-16在使用过程中把泵删除了，重新添加上后显示只能是等度洗脱了，无低压梯度啦，尝试设置电磁阀，有好几个型号选择，选择了LPGE-Unit电磁阀单元，显示此方法的硬件配置与当前的仪器配置不同，应该选择哪个电磁阀单元呢？

准备买液相，不知哪种配置好些，做纺织品的

岛津[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]LC-16在使用过程中把泵删除了，重新添加上后显示只能是等度洗脱了，无低压梯度啦，尝试设置电磁阀，有好几个型号选择，选择了LPGE-Unit电磁阀单元，显示此方法的硬件配置与当前的仪器配置不同，应该选择哪个电磁阀单元呢？

准备买液相，不知哪种配置好些，做纺织品的

刚开始接触液相色谱仪，公司买的标准品有些是用丙酮配置的，可国标上写着用甲醇配，甲醇稀释。买的丙酮配的标准品能用吗？是应该用丙酮稀释还是甲醇稀释？望内行指教！

我想检测一下样品中是否存在一种毒素想知道方法的精确度和准确度，用外标法请问我的标准曲线应该做几个点？精确度和准确度怎么做刚开始做液相，请高手指教！谢谢！

[color=#444444]液相色谱走标准曲线时，标准系列溶液用配好的母液来稀释，一般是用水来稀释还是用配制母液的溶剂来稀释呢[/color]

测农残，液相标准曲线除了对R2的要求，对斜率有要求吗？文献标曲斜率为2点几，我用其他方法斜率为0.9几，斜率太低会影响检测结果吗？测试结果也用不到标曲，有固定的公式。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]ELSD做校准曲线是用线性？幂还是对数，还有就是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]FPD测硫用线性还是二次曲线

配置标液或者绘制标准曲线的时候，用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]的精度够吗？朋友们是偏向[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]还是移液管呢？

液相色谱标准曲线采用同一浓度不同进样量方法的缺点有什么？

用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]测食品中的高氯酸根，1.配置标准曲线，怎么选择5个浓度点。2.配置的时候是直接用纯水配置，还是用食品提取溶剂乙酸配置。3.曲线的线性范围怎么确定。谢谢。

请问各位大神现在国产的液相大概在什么么价位？标准配置的。

[align=center][b]苯甲酸山梨酸标准溶液的配置方法探讨[/b][/align]苯甲酸、山梨酸是常用的食品添加剂，也是液相色谱经典的检测项目。但是苯甲酸山梨酸不溶于水，溶于甲醇，所以苯甲酸、山梨酸的标准溶液如何配置也是目前的难点之一！根据 GB5009.28—2016苯甲酸、山梨酸标准溶液的配置方法有以下两种：1、 确称取苯甲酸钠、山梨酸钾,用水溶解并分别定容。2、 当使用苯甲酸和山梨酸标准品时,需要用甲醇溶解并定容。根据GB/T5009.29—2003苯甲酸、山梨酸标准溶液的配置方法为：3、 称取苯甲酸、山梨酸，加入碳酸氢钠溶液5毫升，加热溶解，随后定容。 总结这几种方法，因为标准品的溶解介质不一样，与实际样品的基质不一样，样品的检测结果还是有较大区别的。因为标准品的问题，有的能力验证甚至难以通过。我想和大家请教一下，究竟哪种标准品溶液配制更加合理。

在液相建立处理方法中，往往以较低浓度的标样为基准建立 ，在后面建立标准曲线时 怎么只显示前面用到的低浓度一个水平，并没有显示标准曲线啊？我也是一步步按照操作手册来的，但就不知道为什么，我用的是waters的液相，2998PDA的检测器！能帮忙分析一下么？是不是前面采集样品时某些格式错误啊？