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高效液相色谱紫外-可见光检测器参数设置对分析结果的影响
原理: 基于Lambert-Beer定律,即被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团,有较强的紫外或可见光吸收能力,因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度,也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感,所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时,为了得到高的灵敏度,常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长,但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长,另外,应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。 二极管阵列检测器(diode-array detector, DAD): 以光电二极管阵列(或CCD阵列,硅靶摄像管等)作为检测元件的UV-VIS检测器(图8-15)。它可构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号,然后,对二极管阵列快速扫描采集数据,得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通UV-VIS检测器不同的是,普通UV-VIS检测器是先用单色器分光,只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检直接紫外检测: 所使用的流动相为在检测波长下无紫外吸收的溶剂,检测器直接测定被测组分的紫外吸收强度。多数情况下采用直接紫外检测。 间接紫外检测: 使用具有紫外吸收的溶液作流动相,间接检测无紫外吸收的组分。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中使用较多,如以具有紫外吸收的邻苯二甲酸氢钾溶液作阴离子分离的流动相,当无紫外吸收的无机阴离子被洗脱到流动相中时,会使流动相的紫外吸收减小。 柱后衍生化光度检测: 对于那些可以与显色剂反应生成有色配合物的组分(过渡金属离子、氨基酸等),可以在组分从色谱柱中洗脱出来之后与合适的显色剂反应,在可见光区检测生成的有色配合物。
试验室准备搞芯片液相色谱,初期打算使用试验室的芯片色谱柱结合商用现成的液相色谱泵和紫外可见光检测器进行试验,所以想调研一下这两样东西。小弟在这方面完全是新手,网上扒拉了两天也没有什么头绪,特来向大家请教!!目前对液相色谱整个系统也没有怎么具体了解,只是我们做的是芯片色谱,柱子比较细。不过我看现在商用的色谱柱也已经到了几十um了,所以泵的流量范围下限越小越好吧,可以进行梯度洗脱(二元泵?);检测器也一样,流通池的体积越小越好。另外,想做试验的话有了泵、自己的柱子、手动进样器、检测器和其他管路配件外,还需要其他仪器么?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif要求:泵:(1)最低流速要在纳升级;(2)可以进行梯度洗脱;紫外可见光检测器:(1)流通池体积越小越好,纳升级现在我只看到了安捷伦的一个1260 Infinity纳流泵,还没找到详细资料(安捷伦的网页真够卡的……),他提到最小流速100nL/min,可是他说可以接最小流速10nL的柱子,怎么实现的呢?分流?关于检测器,也只看到了安捷伦的1260系列的检测器,最小流通池80nL,感觉还可以,不知道有没有类似的,小弟愚笨,没有找到。对于以上问题,麻烦各位了,先谢过了http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1004.gif!!