紫外可见连续分析监测

IC检测器的紫外或可见光一般是在什么时候打开呢？是不是在我们开机时就自动打开呢?检测器的氘灯或钨灯又是何时打开，开关在哪？当我们关机时，是不是都自动关呢？谢谢！平时在做样时也没有太注意，今天看了下面一段话，感觉这些都不明白，谢谢各位大侠的指点！4) 检测器1. 检测器的紫外或可见灯在长长期打开的情况下，一定要保证有溶液流经检测池。若不需要做样，可设置一个较低的流速（如0.05ml/min）或关闭灯的电源。2. 检测器的灯一般是在流通池有溶液连续流动几分钟后才开的。如果流动池中有气泡，则会提示漂移过大无法通过自检和校正。3. 检测器的氘灯或钨灯不要经常开关，每开关一次灯的寿命约损失30小时。若仪器经常使用，可几天开关灯一次。

我在药厂，目前在做一杂质检测，按相关规定，杂质检测分析方法要提供相应的检测限、定量限，检测限要在信噪比1：3下做，对于HPLC和GC方法，这个容易理解，可是紫外信噪比怎么看呢？我对紫外可见分光光度仪操作得较少，目前要做方案，在这里卡住了，请大家指点一下。

紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点。理解：物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。了解：了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。二、 基本概念与重点内容A概述 1．紫外—可见分光光度法的特点 灵敏度与准确度较高；选择性较好；设备简单、操作简便。 2．分光光度法的发展过程 目视比色法 光电比色法 分光光度法 3． 分子的紫外—可见吸收光谱 分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光，其外层电子跃迁而成，又称分子的电子跃迁光谱。紫外—可见分光光度法是基于物质分子的紫外—可见吸收光谱而建立的一种定性、定量分析方法。4． 光的基本性质 5．物质对光的吸收及吸收光谱6．紫外—可见吸收光谱与电子跃迁类型7．生色团与助色团B 光的吸收定律1．光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律）2．吸光度与透光率、百分透光率之间的关系3．工作曲线的绘制与应用4．吸光系数、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度5． 偏离朗伯-比尔定律的因素C紫外-可见分光光度计1． 分光光度计的主要部件2． 在紫外和可见光区进行测量时，分别选择何种光源3． 单色器的主要元件 光栅；棱镜4． 分光光度计中的检测器类型早期：光电池；光电管；光电倍增管。 5．紫外-可见分光光度计的类型及特点D显色测定试样的制备和光度测定条件的选择、1．显色反应及其影响因素2．测定读数误差和测定条件的选择 5．入射波长的选择E 分光光度定量测定方法与其他应用 1．单组分的测定 通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 2.多组分的同时测定 3．紫外可见吸收光谱在有机化合物结构解析中的作用 了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。在有机化合物结构解析中，紫外可见吸收光谱没有红外吸收光谱提供的结构信息多。 4．紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律

1．基本原理不同分子的前线轨道的类型不同。位于最高占有的分子轨道上可为?，?键电子，也可为孤对电子n或d电子等。最低空轨道可为?*，?*或d轨道，因此前线轨道间的跃迁能不一。烷烃类分子为?→?*迁，跃迁能在远紫外区。当分子中含有电负性大的带有孤对电子的杂原子（卤素、O、S、N等）、含这些杂原子的基团（—OH，—NH2，—SH等）或不饱和基团（如 http://www.hyswz.com/biexu/7-1.gif等）时，便出现n→?*，n→?*，?—?*的跃迁。这些跃迁都出现在紫外及可见光区，通常这种基团被称作生色基团。不同取代基的吸收特性——最大光吸收波长不同： http://www.hyswz.com/biexu/7-2.gif 的约为270nm， http://www.hyswz.com/biexu/7-3.gif的约为204nm，—N==N—的约为410nm， http://www.hyswz.com/biexu/7-4.gif的约为193nm，—C≡N的约为160nm。配位化合物常常具有特征的d－d跃迁光谱也在此区。因此当分子吸收紫外可见光辐射即可产生分子前线轨道中各种电子能级的跃迁从而形成特征光谱，利用这些特征光谱可对物质进行定性分析。紫外-可见分光光度法也像原子吸收光谱法一样，遵循比尔-兰伯特吸收定律：A=lg（I0／I）=?cb它说明了，在指定的光程b及被测物的摩尔消光系数?（对各物种是特定的常数）下，吸光度A正比于被测溶液浓度c。与同时在这特定波长下测量不同浓度的已知标准试样的吸光度所得的工作曲线相比较，可得到定量分析的结果。紫外-可见分光光度计常常是利用热致辐射的钨丝灯或卤钨灯作为产生可见光区的光源。而用氢灯或氘灯作为产生紫外区的光源。光源经过一旋转的色散元件（单色器）使复合光分解成为波长连续变化的单色光，经过盛放着试样的石英（适用于紫外及可见光区）或玻璃（只适用于可见光区）的样品吸收池，由检测系统接收并记录相应波长下透射光的强度的谱图。

高效液相色谱紫外-可见光检测器参数设置对分析结果的影响

[b][b][color=#008000]设计原理[/color][color=#008000]:[/color][/b][/b]紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池，紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种：按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计；按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计；按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。[align=left]可见分光光度计（又名可见光度计、分光光度计）是可见光分光光度法是采用新型单片机技术，开发出能够进行定量测量（标准曲线测量，可对物质进行浓度直读）；OD值直接测量（吸光度、透过率和能量等直读）；动力学测试（测出物质浓度随时间变化OD值的变化）；光谱扫描（可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差）；多波长测试（可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性）；还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/align] [b][color=#008000]波长范围[/color][/b]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[b][color=#008000]光源不同[/color][/b]可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[b][b][color=#008000]光学器件不同[/color][/b][/b]由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。 [b][color=#008000]接收器不同[/color][/b]由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

二极管阵列检测器比较两个峰的紫外可见光谱图？可以定性分析？？？怎么操作？

小弟对高效液相不太了解，由于要定量，扫了样品的紫外吸收，发现并没有紫外吸收，看文献上此样品定量用的是高效液相，检测器用的紫外检测器，不明白了，难道紫外可见吸收光谱扫的没有紫外吸收的样品在高效液相的紫外检测器上能检测到？望高手指点。

原理： 基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外，应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。　　二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）： 以光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的UV-VIS检测器（图8-15）。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通UV-VIS检测器不同的是，普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入流动池。而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检直接紫外检测： 所使用的流动相为在检测波长下无紫外吸收的溶剂，检测器直接测定被测组分的紫外吸收强度。多数情况下采用直接紫外检测。　　间接紫外检测： 使用具有紫外吸收的溶液作流动相，间接检测无紫外吸收的组分。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中使用较多，如以具有紫外吸收的邻苯二甲酸氢钾溶液作阴离子分离的流动相，当无紫外吸收的无机阴离子被洗脱到流动相中时，会使流动相的紫外吸收减小。　　柱后衍生化光度检测： 对于那些可以与显色剂反应生成有色配合物的组分（过渡金属离子、氨基酸等），可以在组分从色谱柱中洗脱出来之后与合适的显色剂反应，在可见光区检测生成的有色配合物。

紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

[color=#d40a00]维权声明：本文为3859085原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/color][align=center][size=3][font=宋体]紫外[/font][font=Times New Roman]-[/font][/size][size=3][font=宋体]可见吸光光度法[/font][font=宋体]在微流控分析上的应用[/font][/size][/align][size=3][font=宋体]记得有版友发帖担心紫外[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]可见吸光光度法的应用前景，其实有一定的道理，但是也并不是前途一片渺茫的，下面我就说一下自己对紫外[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]可见吸光光度法在微流控分析领域的应用上的一些愚见，希望和大家共同学习一下。[/font][/size][font=宋体][size=3]吸收光度检测法包括直接吸收法和间接消逝波吸收法两种，通常所说的吸收光度检测都[/size][/font][font=宋体][size=3]是指直接吸收法探测。直接吸收光度检测是使光路直接穿过液体，然后检测液体的吸收光谱。我们熟知的紫外一可见分光光度法一般指的就是直接吸收光度检测。紫外一可见分光光度法因具有可测定的物质种类多、结构较简单且仪器价格相对低廉的优点而得到了广泛的应用。[/size][/font][font=宋体][size=3]分光光度法是最早用于全微分析系统的检测方法之一。但由于微流控芯片通道检测区的检测体积小、吸收光程短，导致检测的相对灵敏度低，其在微流控分析上的应用受到很大的限制。但随着微光机电技术的发展，通过合理的微型化结构设计可以增加检测池的吸收光程，使直接吸收光度检测的灵敏度有所提高，从而提高[/size][size=3]微流控吸光光度法检测系统的灵敏度[/size][size=3]。[/size][/font][size=3][font=宋体]近年来研究者广泛采用液芯波导技术（[/font][font=Times New Roman]LCW[/font][font=宋体]）来提高微流控吸光光度法检测系统的灵敏度。[/font][size=3][font=宋体]Fuwa[/font][/size][/size][size=3][font=宋体]等首先将LCW技术应用于吸收光谱研究中，LCW管可以增加光程，减少光在传播中的损失，进而提高检测的灵敏度。其具体原理如下：[/font][/size][size=3][font=宋体][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007151120_230788_1651669_3.gif[/img][/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][font=宋体]我们在毛细管的外壁引入一种折射率低于内芯溶液折射率的外衬材料，这样我们就得到了液芯波导管，此时，光以一定的角度射入内芯时会以全内反射的形式在液芯内传播，如图中的绿线所示。由于多次反射，因而增加了吸收光程，根据朗伯比尔定律，[/font][font=Times New Roman]A=[/font][font=宋体]ε[/font][font=Times New Roman]bc[/font][font=宋体]，光程增加进而能够提高检测的灵敏度。同时，由于是全反射，减少了光在传播过程中的损失，进而也提高检测的灵敏度。[/font][font=宋体]如果我们将这种液芯波导原理恰当地有效地应用于微流控分析中，就可以克服分光光度法在微流控分析中吸收光程短的缺点，进而提高微流控分析吸光光度法的检测灵敏度。[/font][font=宋体]其实现在的问题是，微流控分析的应用还没有达到像紫外[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]可见分光光度计那样的普遍而已。相信，在不远的将来，通过大家的共同努力，微流控分析紫外[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]可见吸光光度法会走进实验室，得到广泛应用的。紫外[font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]可见吸光光度法的应用也会更加广泛。[/font][/font][size=3][font=宋体][/font][/size][font=Times New Roman][/font][size=3][font=Times New Roman][/font][/size]

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用：紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

①紫外检测器与示差检测器原理是什么？紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。示差检测:是通用型检测器，凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统（当然现在糖类elsd很普遍）。紫外：只要具有光吸收的都可以.示差： 存在光的对比差或折射率任意一束光有一种介质射入另一种介质时，由于两种截至的折射率不同而发生折射现象。折射率的大小表明了截至光学密度的高低。介质的折射率随温度升高而降低。一般选用20度时两纳线的平均值589.3nm为检测波长测定溶剂的折射率。示差折光检测器是通过连续测定色谱柱流出液体折射率的变化而对样品浓度进行检测的。检测器的灵敏度与溶剂和溶质的性质都有关系，溶有样品的流动相和流动相本身之间折射率之差反映了样品在流动相中的浓度。紫外检测器的工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比.示差检测器是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的，属偏转式类型。光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像，并作为检测池的入射光，出射光照在反射镜上，光被反射，又入射到检测池上，出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂，当参比池和测量池流过相同的溶剂时，使照在双光敏电阻的光量相同，此时桥路平衡，输出为零。当测量池中流过被测样品时，引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转，使双光敏电阻阻值发生变化，此时由电桥输出讯号，即反映了样品浓度的变化情况。示差检测器主要是依据不同溶液的折光率来鉴定的，当浓度不紫外检测器:基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外

紫外可见分光光度分析基础知识总结绝大多数的物质都有其本身的特征光谱，利用物质的特征光谱对光的吸收来测量物质的含量可称为比色分析和分光光度分析。承担这些分析的仪器有光电比色计、紫外可见分光光度计、红外分光光度计及原子吸收分光光度计。液相色谱仪中的紫外检测器实际上就是一种特殊的紫外分光光度计，其工作原理与紫外分光光度计完全相同。紫外分光光度分析的特点 灵敏度高，最小检测浓度约10－5～10 －6mol/L相当于1ppm 准确度高，相对误差约2％～3％ 操作简便、分析速度快，一个分析结果约 应用广泛，有机物和无机物均可分析 缺点：对复杂有机物的分析能力

紫外检测器与示差检测器原理是什么？ 　　紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。示差检测:是通用型检测器，凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统（当然现在糖类elsd很普遍）。　　紫外：只要具有光吸收的都可以.　　示差： 存在光的对比差或折射率　　任意一束光有一种介质射入另一种介质时，由于两种截至的折射率不同而发生折射现象。折射率的大小表明了截至光学密度的高低。介质的折射率随温度升高而降低。一般选用20度时两纳线的平均值589.3nm为检测波长测定溶剂的折射率。示差折光检测器是通过连续测定色谱柱流出液体折射率的变化而对样品浓度进行检测的。检测器的灵敏度与溶剂和溶质的性质都有关系，溶有样品的流动相和流动相本身之间折射率之差反映了样品在流动相中的浓度。　　紫外检测器的工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比.示差检测器是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的，属偏转式类型。光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像，并作为检测池的入射光，出射光照在反射镜上，光被反射，又入射到检测池上，出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂，当参比池和测量池流过相同的溶剂时，使照在双光敏电阻的光量相同，此时桥路平衡，输出为零。当测量池中流过被测样品时，引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转，使双光敏电阻阻值发生变化，此时由电桥输出讯号，即反映了样品浓度的变化情况。　　示差检测器主要是依据不同溶液的折光率来鉴定的，当浓度不紫外检测器:基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。　　很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外，应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。　　示差检测器:对于偏转式示差折光检测器，光路在通过两个装有不同液体的检测池时发生偏转，偏转的大小与两种液体之间折光率的差异成比例。光路的偏转由光敏元件上的位移测得，显示了折光率的不同。 在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器更加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检.在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检测池、狭缝2、准和零位玻璃调节器后在光敏元件上显示出狭缝1的影象 光敏元件上有两个并排的光敏接收元件。 当检测池中的样品和参比的折光率变化时，光敏元件上的影象水平移动。光敏接收元件各自发出的电信号的变化与影象的位例。因此，与折射率的差异相对应的信号可由两信号输出的差异获得。　　紫外检测器的原理：被检测物质具有特定的吸收波长，在该波长下，响应值与浓度成正比。示差检测器原理：被测物质具有一定的折光系数。　　各自的用途？　　紫外检测器使用于大部分常见具有紫外吸收有机物质和部分无机物质.示差检测是凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测.　　示差折光检测器对没有紫外吸收的物质，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等都能够检测。在凝胶色谱中示差折光检测器是必不可少的，尤其对聚合物，如聚乙烯、聚乙二醇、丁苯橡胶等的分子量分布的测定。另外在制备色谱中也经常用到。还适用于流动相紫外吸收本地大，不适于紫外吸收检测的体系。　　示差折光检测器与紫外可见检测器相比，灵敏度较低，一般不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱。　　紫外检测器对占物质总数约80%的有紫外吸收的物质均可检测，既可测190--350 nm范围的光吸收变化，也可向可见光范围350---700 nm延伸。　　示差检测器属于通用性检测器，如果选择合适的溶剂，几乎所有的物质都可以进行检测。　　紫外检测器适用于有机分子具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力的物质检测.　　示差检测器属于通用性检测器，可以分析绝大多数的物质.　　用途：一般当物质在200-400nm有紫外吸收时，考虑用紫外检测器。无吸收或吸收弱时可以考虑示差检测器。　　它们有什么各自优点？　　紫外吸收检测器它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。示差折光检测器这一系统通用性强、操作简单.　　示差检测器属于总体性能浓度型检测器，其响应值取决于柱后流出液折射率的变化，采用含有样品的流出液和不含样品的流出液的同一物理量的示差测量。其响应信号与溶质的浓度成正比。属于中等灵敏度检测器，检测限可达1mg/ml－0.1mg/ml。　　紫外检测器灵敏度高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度均不敏感，可于制备色谱。由于灵敏高，因此既使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。　　示差折光检测器是目前液相色谱中常用的一种检测器，它可与输液泵，色谱柱，进样器等组成凝胶渗透色谱仪或高速液相色谱仪系统，也可以配置适当的进样系统作为单独的分析仪器使用。对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等，可用示差检测器检测。由于不同的液体折光不同，因此本检测器通用性强，可广泛地应用于化工、石油、医药、食品等领域为科研、生产服务。　　紫外检测器有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱，示差检测器几乎对所有溶质都有响应.　　紫外优点：常用、方便。示差检测器：弱吸收物质定量准确。　　它们之间的区别？　　示差折光检测器这一系统灵敏度低（检测下限为10-7g／ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。1.紫外是选择性检测器，示差是通用性检测器；2.紫外检测器灵敏度高，示差检测器灵敏度低；3.紫外检测器可进行梯度洗脱，示差检测器不能进行梯度洗脱；4.紫外检测器对压力和温度不敏感，示差检测器很敏感。　　示差检测在原理上虽然是通用型检测器，但是它的灵敏度低，和梯度脱洗不相容，因此它对于HPLC来说不是理想的检测器。　　而紫外检测器既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱.（来自网络，侵删）

请教一下，如何计算紫外可见分光光度法的检测限

紫外可见吸收光谱法 利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。 该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。 其测定波长范围为200-1000nm。 原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。 某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。 分子光谱特点： 分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。 紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。 应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。 紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=82979]用紫外光度计检测水质的常用分析波长[/url]经常做紫外/可见光分析实验的人员，对于大多数的分析物质应该选用的波长都不太清楚，结合多年来的研究与资料整理。现将紫外光度计检测水质的常用分析波长列下来，供大家参考！ 见附件浊度 660nm 430余氯、总氯 510铝 630镉 518 480总铬及六价铬 540铜 440 457铅 510汞 485锰 525钙 590碘 520铁 470溶解氧 660锌 620 535砷 530 520氰化物 638 580氟化物 620 520 570 610总氮 425 总磷 525臭氧 510氨氮 420 430 625硝酸盐氮 410 220亚硝酸盐氮 520 543 PH 430硫化物 665 630油 256 3.5微米酚 460苯胺类 545硝基苯类 545 磷酸盐 700阴离子洗涤剂 652铍 526 520二价锰 525三硝基化分物 465化学耗氧量(COD) 610 Chemical Oxygen Demand (COD) Analyzer

摘要：本文介绍美、日等国立法防污，推动紫外在线连续监测仪发展的历程，对几种类型的紫外在线连续监测仪予以简介，进而通过对我国削污减排大计的技术解读，探讨我国CODuv在线连续监测系统发展的技术关键及其应用前景。关键词：紫外在线连续监测仪 CODuv在线连续监测系统 削污减排[B]一、立法防污，指定监控技术[/B]上世纪六十年代，美国水污染相当严重。为严控水污染，美国于1974年颁布了“清水法”与“安全用水法”。在清水法中，美国EPA公布了129种优先控制水污染物黑名单及作为环境判据的水质基准数据，并明令要求各州政府结合本州实际，据此制定严格的优先控制水污染物排放标准。超标者，课以重罚。 在安全用水法中，指定采用CODuv（用紫外技术测定的COD）作为监控有机污染物的综合指标。同时还颁布了水中总悬浮物TSP的排放标准。上世纪七十年代，日本水污染已相当严重。为严控水污染，日本于1984年出台了总量控制与浓度控制相结合的控制措施，并指定采用UV法作为有机污染综合指标的测量技术。欧洲情况也很类似，欧共体在上世纪七十年代末公布了以有毒有机污染物为主的黑名单与灰名单，并指定采用UV法作为有机污染综合指标的测量技术。我国上世纪九十年代初即在引滦入津工程中引进了欧洲生产的CODuv在线仪来监控有机污染。 立法防污，指定CODuv在线监测仪作为有机污染综合指标的监控技术。为CODuv在线连续监测技术创造了机遇，赢得了市场。 [B]二、CODuv在线监测仪的测量原理及仪器类型[/B]1、测量原理根据比尔定律，水样中有机物的浓度C与吸光度A成比例：C=K1A （1）另一方面，水样中有机物的浓度与化学需氧量CODuv成比例。C=K2CODuv （2）合并二式，可得：CODuv=KA （3）（3）式表明，水样的化学需氧量CODuv与吸光度A成正比，因此，通过 测定吸光度A可算出CODuv值。2、CODuv仪的类型 迄今为止，CODuv在线连续监测仪大体可分为两类，一是双波长测量方式，一是连续扫描方式。1）双波长测量型此类仪器基本上覆盖了市场，由法国、日本、新加坡等国最先研发，图1所示为这类仪器的测量原理示意图。[IMG]http://www.ewaii.com/uploadpic/zwsbc.jpg[/IMG]图1 双波长仪的测量原理示意图光源（氙灯）发出的连续光1投射到盛有水样的流动池2上，经水样吸收后光能减弱，出射光1'投射到半透镜3上，之后分成二路，一路透过3后，经滤光片（254mm）4，照射在检测器5上，转化为电信号；一路由3反射后经滤光片6，照射在检测器7上，转化为电信号，将二路电信号进行调制比较放大后，获得样品吸光度A，进而按（3）式转化为CODUV值。双波长仪的另一种方式是：以光栅代替半透镜3，通过光栅移动，分离出测量长波254nm的紫外光和补偿波长为546nm的可见光。2）连续扫描测量型这种仪器源于美国技术，我国聚光科技也有生产。图2所示为这类型仪器的原理示意图[IMG]http://www.ewaii.com/uploadpic/zwlxs.jpg[/IMG] 图2 连续扫描型仪器测量原理示意图由光源发出的光线1 投射到旋转光栅2上，依次分出200-400nm的紫外光和400-800nm的可见光，聚焦过的光线射到流动池 4上，而后依次投射到高质量的光电倍增管5上，产生光电信号。这种仪器从不同有毒有机物吸收不同的实际出发，将扫描整个紫外波段的吸收和作为测量基础数据，而以扫描整个可见波段的吸收和作为补偿用基础数据。进而通过数学模型对两组基础数据进行处理，获得测量水样的吸光度A值并转化为CODuv。[B]三、削污减排大计在监控方面的技术解读 [/B]“十一五”规划明确指出：“严禁向江河湖海排放超标水污染物，到2010年底，COD排放总量要削减10%”；“各国控污染源必须在2008年底前安装完COD在线监控仪”。技术层面上如何解读国家这项大政策呢？其一，严禁向江河湖海排放超标水污染物，意指必须做到随时都能监控排污状况，随时都能测量出COD实时浓度。这就要求监控仪器必须做到在线连续监测，只有连续监测才能发现排污异常情况，才能严禁偷排或非法排放，才能为环境执法提供有效数据。其二，到2010年底COD排放总量要削减10%，意指在线监控仪本身必须能测定COD排放总量。这就要求监控仪器必须做到：a、能长期稳定运行，数据捕捉率高（一般不低于85%），决不允许仪器经常出毛病或经常维护。b、监控仪能按下式独立测定COD总量 T2CODT＝∫ CODi • ui• dt　　　　　　　　　 （4） T1式中，CODT为在时间段T1~T2范围内COD的排放总量； CODi为i时刻的COD瞬时值； Ui为i时刻的流量。（4）式告诉我们：a、仪器自身应按（4）式设计总量测量软件。b、时间段T1—T2可以是任意时间段，也可以是1年。这就要求仪器自身能储存1年的历史数据。c、仪器应留有流量数据接口。d、仪器应设数字接口232或485，以按要求将数据传输至中心站。通过技术解读，可以发现：a、化学法仪器因其为间歇式监测（有的6小时1次，最快为1小时1次）而不能满足连续监测需要，不能满足环境执法的需要。b、进口的UV仪器多为一台在线监控仪，没有考虑总量监测之一根本需要，没有设计总量控制软件，也没有针对我国污水较沾的实际，配套相应的采样单元、清洗单元，而不能完成总量监测任务。 [B]四、CODuv在线连续监测系统[/B]从中国水情实际情况出发，研发满足国家“十一五”规划要求的CODuv在线连续监测系统是完成水污染监控的关键。本文推荐的EW-2100型CODuv在线连续监测系统就是这样一个系统，如图3所示[IMG]http://www.ewaii.com/uploadpic/uvxtkt.gif[/IMG] 图3 CODuv在线连续监测系统框图系统由4个单元组成：采水单元、清洗单元、uv测量单元、控制与数据处理单元。四个单元相互独立，相互依存，通过系统集成，在PC机软件控制下，协同动作，对CODuv实时浓度与总量实施连续监控。 a、采水单元：由双泵、采样管、溢流池及隔栅组成，按监测技术规范要求，，泵取水样送入溢流池采样箱，再由二级泵将新鲜水样送入测量单元供测量用，隔栅用以除去漂浮物和杂物。b、清洗单元 清洗单元由输液泵、电磁阀、管路、盛液桶组成采用5%工业硫酸，对流路系统进行定时高效清洗。对于特别沾的污水，可再加一级清洗，即压缩空气吹扫。c、测量单元 本系统采用双波长测定方式，如图1所示。测量单元受控于“控制与数据处理单元”，考虑到与中心站的对接，其上装有232或484接口；考虑到总量监测，其上留有流量数据接口。d、控制与数据处理单元本系统是一套集成度非常高的完整系统，通过自主研发的软件将几个单元集合起来，构成一体，对各单元、各部件实施集成控制。数据处理部分同时兼顾了实时浓度控制与总量控制数据处理。e、应用现状2005年，国家环保总局颁布了行标HJ/T191—2005，对UV在线连续监测仪规定了相关技术要求。为CODuv在线监控仪的应用奠定了法律基础。适逢国家“十一五”规划的颁布，更为CODuv在线监测技术的发展开辟了更为广阔的市场前景。据不完全统计，迄今为止，已有约1千台CODuv在线仪投放市场，并正在削污减排水污染物监控中发挥重大作用。笔者深信，基于光电法的CODuv在线监控系统必将逐步发挥其技术优势，为水污染物排放监控，为削污减排做出越来越大的贡献，而不能满足国家要求的仪器，必将最终被历史淘汰。

今天用紫外可见分析仪扫了全波长，结果标品和样品的曲线是一样的，都没有明显的波峰波谷，不知道是什么原因。另外，扫描的峰值高低是不是和浓度大小有关呢？

问专家几个关于酶标仪的问题：1。微孔板式紫外可见连续波长酶标仪和连续光谱荧光仪，全自动多功能酶标仪 ，光栅式酶标仪 ，连续光谱扫描式酶标仪，化学发光酶标仪 ，它们有哪些具体不同，应用上有些什么不同2。什么叫终点法检测，动力学法检测3。振板功能作用是什么4。什么叫OD值，测核酸，蛋白质OD值是多少？5，什么是线形回归，多顶式回归，阀值吸光率，多点吸光率2。

【资料】“紫外可见光谱法”最佳课件！ [em17] [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=32880]《紫外可见光谱法》 清华大学[/url]4.1.0紫外可见光谱法概述4.1.1 电磁辐射的特性4.1.2 电磁辐射与光谱分析法4.1.3 紫外-可见吸收光谱法概述4.2.1 分子结构与吸收光谱 4.2 紫外-可见吸收光谱14.2 紫外-可见吸收光谱24.2.2 影响紫外-可见吸收光谱的因素14.2.2 影响紫外-可见吸收光谱的因素24.2 紫外-可见吸收光谱1 4.2 紫外-可见吸收光谱24.2 紫外-可见吸收光谱3 4.2 紫外-可见吸收光谱44.3 吸收定律4.3.2 吸收定律的适用性比尔定律在有化学因素影响时不成立解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。比尔定律在有仪器因素影响时也不成立非单色光对比尔定律的偏离杂散光(非吸收光)也会对比尔定律产生影响其他影响因素包括溶剂、光效应等也应考虑4.4 紫外-可见分光光度计4.4.1 紫外-可见分光光度计的基本结构4.4.2 紫外-可见分光光度计的工作原理14.4.2 紫外-可见分光光度计的工作原理24.4.3 分光光度计的校正4.5.1 分光光度滴定4.5.2 差示分光光度法4.5.3 导数分光光度法4.5.4 双波长分光光度法4.5.5 胶束增溶分光光度法4.5.6 动力学分光光度法4.5.7 反射光谱法4.5.8 光声光谱法光声效应光声光谱仪光声光谱法的定量基础光声光谱法的特点及应用4.6.1 定性分析4.6.2 单组分定量分析溶剂的选择测定浓度的选择测定波长的选择标准曲线法标准加入法4.6.3 混合物分析4.6.4 平衡常数的测定4.6.5 络合物结合比的测定摩尔比法连续变换法或JOB法斜率比法B-H方程4.7.1 分子荧光、磷光和化学发光 4.7.2 发光参数4.7.3 影响物质发光的因素4.7.4 荧光定量关系式4.7.5 荧光和磷光分析仪器4.7.6 荧光和磷光分析应用4.7.7 化学发光简介 [em17]

请问紫外可见分光光度计在食品（果蔬类、肉制品类、食用菌）检测中应用于哪些方面？

在选择高效液相时，对于紫外可见检测器的噪音指标有一厂家说可小于等于0.35*10-5AU；可另一厂家说电子芯片的静态噪声就是1*10-6AU了，在实际使用中根本不可能达到这个数量级。是不是这样？请高手帮忙。还有检测器噪音是不是重要指标？

紫外可见分光光度计的组成和应用紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。②单色器。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。仪器类型则有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。应用范围包括：①定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。②定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。③反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。④研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。

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紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用郑　健　陈焕文　刘宏伟　李宝华　张寒琦　于爱民　金钦汉(长春分析仪器研究和技术开发中心,吉林大学化学系分析教研室,长春,130023)摘　要：本文着重评述了1998年以来国内紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用,展望了其在该领域的发展趋势。关键词:紫外-可见分光光度分析法 药物分析 综述中图分类号:O657.32 R917　　　文献标识码:A　　以分子吸收光谱为基础的紫外-可见区分光光度分析法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点,已在地质[1]、环境[2]、能源[3]、材料[4]、食品[5]等科学中发挥着重要作用,尤其是随着多元络合物、胶束增敏光度法、有机试剂等的发展,它已经成为应用最广泛的分析手段之一[6]。分光光度法的早期应用集中在无机分析化学领域,即对为数众多的无机离子和化合物进行定性分析或定量测定[7]。　　有机物的光度分析较无机物的开展晚,但发展十分迅速,已经从定性、半定量分析发展到定量分析,方法的灵敏度和选择性也有了很大的提高,能够用光度法进行分析测定的物质种类也在不断增多[8-10]。近几年来,随着生命科学的发展,有机物光度分析的研究和应用热点主要集中在生物[11]、临床、药物[12]等方面。光度法在药物分析中的应用历来受到大家的广泛关注和重视,世界各国都进行这一领域的相关研究[13,14]。据统计,在药物分析中,分光光度法占29.1%,色谱法占25.5%,荧光、化学发光法占2.4%,与光度法有关的方法共计占31.5%,由此可见,光度法是药物分析最常用的方法之一[12]。研究结果表明,光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相蓖美[15],但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的。因此,可以相信,光度法在药物分析中将大有作为。　　我国学者在药物光度分析领域开展了大量工作,取得了喜人的成果。建立了紫外-可见分光光度法[16]、发光光度法[17]、荧光光度法[18]等许多新的测量方法和体系[12,19],测定的药物涉及生物碱、苯磺酰胺、芳胺、芳烃、巴比妥、甾体激素、咪唑、噻吩、吡啶、季胺盐、磺酰胺、氯胺酮类、醇、醛、醚、某些杂环化合物、某些糖及苷、抗生素和维生素等几大类。本文只评述1998～2000年间紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用和进展,在药物分析中的其它光度分析方法,如荧光光度法[20-22]、发光分析[23],可以参阅相应的近期综述。