质谱引导自动纯化系统检测方案_质谱引导自动纯化系统行业应用

质谱引导的纯化系统的最佳配置
因为合成化学家已经知道了药物或高通量合成化合物的分子量，所以质谱引导的馏分收集的制备型液相色谱是经常选择的纯化方法。质谱引导的收集馏分的一个重要部件是分流器，它对所收集馏分的纯度有很大影响。本应用报告讨论了分流器的设计和流速分流器的正确配置。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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高流速下质谱引导的馏分收集
通常用自动化的制备型LCMS系统对药物研发中的组合化学化合物库进行纯化。30到50 mg化合物组成的混合物在20 mm内径的色谱柱上分离，流速20到35 mL/min，采用质谱引导的馏分收集。到目前为止，需要几克起始原料进行的合成化合物库的纯化，还要靠经典的纯化方法，如结晶或硅胶上的手动flash色谱。在本应用报告中，我们报道了用Agilent 1100系列纯化系统，用质谱引导的收集馏分模式，在100 mL/min流速下，在50 mm内径柱上，一次运行就纯化了4克粗产品。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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用Agilent 6110/6120四极杆LC/MS系统进行质谱引导的馏分收集
Agilent 1200系列纯化系统是药物高通量合成小分子和大分子化合物库纯化的通用工具，能够得到高纯度馏分，获得目标化合物的高回收率。Agilent 6110/6120系列MSD是新一代单级四极杆仪器，可以进行简便而可靠的质谱引导的馏分收集，也可以完成更复杂的纯化工作，如组合离子源或使用正/负极切换等。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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药物代谢物的纯化和鉴定——安捷伦分析型纯化系统、安捷伦自动纯化软件和 Agilent 6540 精确质量四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统
药物代谢和药代动力学 (DMPK) 研究通常需要通过质谱 (MS) 鉴定药物代谢物，并在药物开发的后期阶段，通过 NMR 确认代谢物结构。为此，可能需要对代谢物进行纯化。在本应用简报中，将安捷伦自动纯化软件与 Agilent 1260 分析型纯化系统相结合对安非他酮药物代谢物进行纯化。使用通过 Agilent 6540 精确质量四极杆飞行时间 (Q-TOF) 液质联用系统和 Mass-MetaSite 软件采集到的高分辨率精确质量 MS 和 MS/MS 数据对代谢物进行鉴定。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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质谱引导的馏分收集的优化
在现代纯化系统上进行馏分收集，可以根据保留时间窗口、检测器信号，也可以根据来自MSD的目标化合物质量。MSD具有选择性更高的优点，从而使收集的馏分数量更少，馏分中肯定含有目标化合物。在本应用报告中，比较了基于色谱峰和质谱引导的馏分收集触发技术的目标产物的纯度和回收率，阐述了各种触发技术的优缺点。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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薄层色谱-质谱-Flash 纯化联用，实现合成过程中反应监控和智能快速纯化化
本应用指南中，我们演示了Advion和Interchim技术的结合是如何加快化合物的合成、纯化和鉴定的。应用中配备了Advion expression?质谱仪(CMS)，Plate Express TLC薄层色谱质谱接口，ASAP大气压固体分析探头，以及Interchim puriFlash?XS520plus纯化系统。

厂商：北京博晖创新生物技术股份有限公司

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【ISCO】手动与自动化 Flash 色谱法：合成（2S-3S）-环氧香叶醇的纯化
合成后的（2S,3S）-环氧香叶醇通过自动化 Flash 色谱法和手动玻璃柱色谱法进行了纯化。为了确定哪种纯化方法对化学家在专业和教学环境中更有益处，本文中我们对每种纯化方法的成功率、效率、质量和经济性进行了分析和比较。

厂商：培安有限公司

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分析仪器在引物探针的纯化制备分离
分析级制备纯化行业特点：大多数单次制备纯化量较少，可采用分析级纯化方案半制备级纯化平台适合大制备量核苷酸纯化，单次制备量可达200~2000 OD QC质检 HTCS核酸质谱检测系统（基于LTQ系列质谱） DEL-核酸质谱检测系统（基于LTQ质谱）基因扩增 Realtime PCR----荧光定量PCR仪核酸药物高端研究 Thermo LTQ-Orbitrap XL高分辨质谱系统

厂商：上海基泰生物科技有限公司

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天然产物的纯化
这是一个用Agilent 1100系列纯化系统AS和PS对红三叶中刺芒柄花素和其它植物性雌激素进行分析型和制备型分离的例子。分析型放大方法可用于在Agilent 1100系列纯化系统AS上分离复杂植物粗提物中的化合物。在这个方法的基础上，进行了按色谱峰收集馏分的制备型分离。• 为了获得更多的植物雌激素物质，使用了Agilent 1100系列纯化系统的馏分合并功能• 通过对馏分的再分析测定了所得化合物的纯度• 根据分析结果将方法放大• 为了在一次运行中得到更大量的目标化合物，在Agilent 1100系列纯化系统PS上用两种不同的色谱柱重复了纯化方法制备规模的结果与在分析型系统上得到的结果相当。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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使用Biotage 快速纯化制备液相色谱进行哈茨木霉菌发酵液中Peptaib抗菌肽的分离纯化
从哈恣木酶发酵液分离鉴定出Alamethicin F50等各种天然产物，利用Biotage液相色谱，对各类产物进行了纯化制备。耐士科技作为Biotage中国区总代理，以最优质的服务提供Biotage全系产品。Biotage Isolera 系列是世界上最智能的快速纯化系统，它拥有自己独创的智能参数设置，共有3个系统，多种配置可选。可以让化学家们轻松地完成对从mg级到150g以上样品的更好的分离。创新的TLC-to-gradient专利技术可以根据薄层层析色谱的数据自动产生适合样品的溶剂洗脱梯度，并建议适合该样品量的色谱柱。

厂商：耐士科技
基于UV/MS触发的LC-MS高纯度的制备纯化系统
制备LC广泛应用于制药、食品和化工等领域，用于从混合物中纯化目标化合物、寻找天然产品中的活性成分，以及对杂质或未知化合物进行结构分析等。在应用文章“01-00650-JP”中，介绍了一种分析/制备转换LC-MS系统，其制备纯化工作流程如图1所示。该系统包括：在分析模式下的分离条件研究、规模放大、馏分纯度/回收率确认等。具体来说，使用分析方法开发软件Lab Solutions MD进行分析方法的高效的分离条件优化，确保目标化合物（氢化皮质酮）及其附近共洗脱的峰之间有充分的分离。然后，进行负载量研究，规模放大，使用UV信号作为触发信号进行制备。本文为您介绍通过使用比UV更具定性能力的MS触发收集信号，可最大限度地排除杂质的混入，提高氢化皮质酮纯度的制备案例。

厂商：岛津企业管理（中国）有限公司

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全自动、非接触式、无吸头的基于磁珠的DNA 纯化
磁珠是用于生物分子简单有效分离和纯化的必不可少的实验室工具。有多种不同表面涂层和化学成分的磁珠可供选择，它们只需最少量的处理，便能用于DNA、RNA和蛋白质的磁性净化。我们提出的自动化解决方案包括创新的正排量配药技术，结合离心式液体抽空，以增压磁珠净化工作流程。

厂商：富默乐国际贸易(上海)有限公司

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蛋白质的纯化和鉴定
蛋白质的产率和纯度是衡量纯化是否成功的重要指标。除有效的色谱分离外，配置良好、可靠的仪器也能影响纯化的成功。制备型反相(RP)液相色谱由于具有高分离能力，经常被用做多肽和小分子亲水蛋白纯化流程的最后一步。虽然大家都知道反相液相色谱所用的溶剂条件会使蛋白结构变性，但也能通过调节适当的条件再使其复性，特别是小分子蛋白。Agilent 1100系列纯化系统是设计良好、合适的反相色谱的系统。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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蛋白纯化产品解决方案
对于重组蛋白的分离纯化，一般都会在进行载体构建时，选择N端或C端加上一个标签，如GST，HIS6，FLAG和MBP等，带了这些标签的蛋白就可以通过亲和吸收的填料来到达初步纯化的目的，亲和纯化相对简单，带有标签的蛋白就会吸附到相应的填料上，而不带标签的蛋白会直接流出，简单的清洗杂蛋白后，只需要再把吸附在上面的蛋白洗脱下来即可，几乎不需要摸索分离纯化的条件。含有所需蛋白的分泌液或者裂解液一般体积都相对比较大，最好使用蛋白存化系统（Clear First 2000）的上样泵上样；进完样后，进行杂蛋白的清洗，再用特异的洗脱液将蛋白洗脱，通过自动接收器接收分离后样品即可，整个过程基本可以实现自动化操作。

厂商：上海闪谱生物科技公司

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测定血清纯化所得的抗体药物偶联物的药物/抗体比率——应用自动亲和纯化、LC/MS 分析和新型 DAR 计算软件
抗体药物偶联物 (ADC) 是一类新兴生物治疗药物，旨在通过将药物与单克隆抗体相连实现靶向给药。与小分子药物不同，ADC 不是单分子实体，而是一类异质性的抗体，每种抗体所携带的药物数量以及经历的翻译后修饰都各不相同。药物/抗体比率 (DAR) 是指 ADC 偶联的药物的平均数量。DAR 是 ADC 开发过程中需要优化和密切监测的关键质量属性，因为它将影响疗效和毒性。由于药物的释放，在血液循环中 ADC 的 DAR 将随时间发生变化。因此，制定一套测定药代动力学 (PK) 研究样品中 ADC DAR 的稳定解决方案非常关键。要确定 ADC DAR，首先必须纯化血清中的 ADC，然后使用 LC/MS 对其进行分析。通常该工作流程中的样品前处理和数据分析环节需耗费大量人力，因此易受变异性和人为误差影响。本应用简报介绍了一种用于测定血清样品中 ADC DAR 的解决方案，该方案采用 Agilent AssayMAP Bravo 平台对 ADC 进行自动亲和纯化；将 Agilent 1290 Infinity UHPLC 与Agilent 6550 Q-TOF 质谱仪联用，用于采集准确的完整蛋白分子量数据；并利用 Agilent MassHunter BioConfirm 和 DAR 计算器软件确定 ADC 质量和 DAR。该工作流程可节省人力、降低变异性以及减少产生与 ADC DAR 测定相关的人为误差的可能性，而且仅需很少的工作量即可扩展样品处理量。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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Yamazen Flash自动过柱机分离纯化绿原酸和咖啡因
采用Yamazen Flash自动过柱机，配合小粒径高效Flash分离柱，可以实现咖啡中多种绿原酸类物质和咖啡因等有效成分的分离纯化。

厂商：上海通微分析技术有限公司

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自动化液质联用样品前处理：通过安捷伦 AssayMAP Bravo 平台实现高通量溶液内酶解和多肽纯化
适用于液质联用 (LC/MS) 分析的蛋白质和多肽样品前处理的工作流程由于依赖于连续的手工操作而效率低下，导致试验方案缺乏通量、可扩展性和可转移性。这类工作流程通常依赖于技能非常娴熟的从业人员以达到可接受的重现性，或者在很多情况下，鉴于工作流程的特殊性，较大的差异是可被勉强接受的。为解决这些问题，可以采用安捷伦 AssayMAP Bravo 平台及其蛋白质组学工具套件实现 LC/MS 蛋白质组学工作流程常规样品处理工作的自动化，使 LC/MS 样品前处理具有可重现性、可扩展性、方案可移植性和易用性。本平台由顶级的液体处理器、一次性微量色谱柱和简单的用户可定制方案组成，可高通量地进行蛋白质酶解和多肽纯化。BSA 经酶解后纯化所得的分析性能数据表明 25 种 BSA 目标多肽的日间重现性良好， % CV 小于 5% 此外，我们还展示了用于多肽纯化的 AssayMAP RP-S 和 C18 反相柱的所有特性。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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水纯化系统中的紫外线技术（RD009）
由于紫外线的杀菌作用及降低有机物方面的作用，紫外线技术正日益广泛地应用在水净化系统中。本论文研究了紫外灯在水纯化过程中的作用，同时也探讨了选择紫外灯时需要考虑的参数与配置情况。本论文研究了紫外线不同类型细菌的影响以及不同波长的紫外线对有机分子的影响。本文了防水箱中生物膜形成的254nm紫外灯的杀菌效果，以及Milli-Q超纯水系统中降低有机污染物的185nm和254nm双波长紫外灯的效果。

厂商：默克

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固相合成胸腺五肽的分离纯化与鉴定
目的建立胸腺五肽分离纯化、分析鉴定方法,有效提高胸腺五肽含量。方法将标准Fmoc方法固相合成的胸腺五肽以Sephadex G225凝胶柱使粗肽脱盐,以循环制备液相色谱仪进行粗肽纯化,以质谱法进行分子质量的鉴定。结果该法得到胸腺五肽的纯度为99102% ,分子质量测定值与理论值相符。结论建立了高效、简便的胸腺五肽分离纯化方法,为工业化生产提供了实验依据。

厂商：北京佳仪

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Waters：通过SFC对芳樟醇进行手性纯化
1. Investigator SFC系统可实现简化的手性分离，还可用于纯化和回收芳樟醇等挥发性化合物，无需制备型气相色谱(GC)中必需的复杂样品捕集。2. SFC比GC具有更高的载样量和更短的运行时间。3. 超临界流体色谱(SFC)使用较低的色谱操作温度，这种温度更适合芳樟醇等挥发性和不稳定化合物，可提高风味物质和香味物质纯化中固有的低回收率。4. SFC手性纯化方法使用无毒乙醇和CO2作为流动相，这对于供人使用或消费的化合物纯化而言至关重要。5. Investigator SFC系统可通过使用重迭进样提升采集效率，从而提高通量。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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Waters：通过SFC对薰衣草油进行手性纯化
1. Investigator SFC系统可实现简化的手性分离，还可用于纯化和回收薰衣草油等挥发性化合物，无需制备型气相色谱(GC)中必需的复杂样品捕集。2. SFC比GC具有更高的载样量和更短的运行时间。3. 超临界流体色谱(SFC)使用较低的色谱操作温度，这种温度更适合挥发性和不稳定化合物，可提高风味物质和香味物质纯化中固有的低回收率。4. SFC手性纯化方法使用无毒乙醇和CO2作为流动相，这对于供人使用或消费的化合物纯化而言至关重要。5. Investigator SFC系统可通过使用重迭进样提升采集效率，从而提高通量。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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质谱引导型制备液相用于药物中多组分鉴别及分离
本文建立了一种使用岛津质谱引导型高效液相制备色谱用于药物中多组分的制备分离的方法。以分离制备阿托伐他汀钙片中的有关物质为例，采用反向液相色谱，分别以紫外，质谱以及紫外和质谱同时触发馏分收集，详细说明了不同触发方式的参数设置以及LH-40的制备模拟功能，使用不同的触发方式都可以对目标组分进行准确的收集。多种触发收集模式，满足不同性质的化合物制备需求。

厂商：岛津企业管理（中国）有限公司/岛津（香港）有限公司

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使用超临界流体色谱对芳香成分的制备纯化
食品、饮料、个人护理用品和精油中所含芳香成分多为小分子的挥发性化合物。这些芳香成分是一些差向异构的手性化合物。正如在药品中不同的手性化合物之间具有不同的药理作用一样，芳香成分中不同手性异构体的香气不同，其存在比例也会影响香气的质量和强度。因此，对香料原料的开发而言，掌握异构体之间的特性差异非常重要，在开发过程中需要进行异构体的分离和分馏纯化。在过去，诸如芳香成分的挥发性化合物一般通过气相色谱法（GC）进行分离和制备。虽然GC具有较高的分辨率，但每次分析的样品负载量小，分析时间也较长。使用超临界流体色谱法(SFC)进行制备纯化时，与液相色谱法（LC）相比分析和负载同等量的样品能够更快速完成。此外，在SFC中用作洗脱液的液化二氧化碳会在常温常压下气化，分馏后的组分中仅含少量有机溶剂。因此，可以轻松浓缩目标组分。本文介绍了NexeraUC分析型制备系统对薰衣草精油中芳香成分芳樟醇进行制备纯化的示例。

厂商：岛津企业管理（中国）有限公司/岛津（香港）有限公司

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Waters：通过SFC对松油烯-4-醇进行手性纯化
1. Investigator SFC系统可实现简化的手性分离，还可用于纯化和回收松油烯-4-醇等挥发性化合物，无需制备型气相色谱(GC)中必需的复杂样品捕集。2. SFC比GC具有更高的载样量和更短的运行时间。3. 超临界流体色谱(SFC)使用较低的色谱操作温度，这种温度更适合挥发性和不稳定化合物，可提高风味物质和香味物质纯化中固有的低回收率。4. SFC手性纯化方法使用无毒乙醇和CO2作为流动相，这对于供人使用或消费的化合物纯化而言至关重要。5. Investigator SFC系统可通过使用重迭进样提升采集效率，从而提高通量。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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红豆杉提取物的分离纯化
在本文中，三泰科技的研发人员利用快速液相制备色谱系统SepaBean machine配合SepaFlash C18反相分离柱对红豆杉植物提取物进行了分离纯化，获得了满足制备需求的目标产品，可用于后续的进一步科学研究中，为此类天然产物的快速制备纯化提供了经济高效的解决方案。

厂商：常州三泰科技有限公司

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利用 HPLC 及 Q-TOF 质谱仪分析聚乙二醇及单、二聚乙二醇化的治疗性蛋白 (PDF)
聚乙二醇化的多肽和蛋白质为生物治疗药物的详细结构表征带来重大挑战，这主要是由于聚乙二醇 (PEG) 具有异质性。本应用简报描述了一种联用 Agilent HPLC 及 Agilent 6520精确质量数 Q-TOF LC/MS 系统分析聚乙二醇及聚乙二醇化蛋白的方法。其使用了一种电荷剥离剂（三乙胺）作为柱后添加剂，这样有助于简化质谱图，因此可更好地阐释结果。结果表明聚乙二醇和聚乙二醇化蛋白质的质谱图质量均得到显著改善。

厂商：天津市普伦科技开发有限公司

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对蛋白质进行连续纯化和评估
通过在LC系统中加入液体处理器，建立了一种仅需放入样品溶液，即可完成纯化、及无缝对已分取馏分进行重新分析的体系。对已确定目标物的常规样品的分析，也可重新分析所需馏分。并且通过追加色谱柱切换阀，增加色谱柱，可进行多阶段纯化。此外，通过使用96孔板，还可在SDS-PAGE和ELISA等后续各种分析中直接使用。

厂商：岛津企业管理（中国）有限公司/岛津（香港）有限公司

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Waters：通过SFC对茶树油进行手性纯化
1. Investigator SFC系统可实现简化的手性分离，还可用于纯化和回收茶树油等挥发性化合物，无需制备型气相色谱(GC)中必需的复杂样品捕集。2. SFC比GC具有更高的载样量和更短的运行时间。3. 超临界流体色谱(SFC)使用较低的色谱操作温度，这种温度更适合茶树油等挥发性和不稳定化合物，可提高风味物质和香味物质纯化中固有的低回收率。4. SFC手性纯化方法使用无毒乙醇和CO2作为流动相，这对于供人使用或消费的化合物纯化而言至关重要。5. Investigator SFC系统可通过使用重迭进样提升采集效率，从而提高通量。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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对映异构体的纯化
药物的立体异构体组成是目前药物开发中的一个关键问题。药品申报需要纯的药物异构体，在筛选阶段需评价两种异构体在疗效、毒性或药代动力学方面的差异。因为，实际上在早期开发中进行相关实验只需要有少量的有效药物，所以制备高效液相色谱是从消旋体中分离纯异构体的适当工具。在本应用报告中报道了克级呼吸系统候选药物外消旋体的分离。分离在Agilent 1100 纯化系统上进行。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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噻嗪类强极性碱性化合物的分离纯化
在本应用案例中，样品分子结构中含有噻嗪类母体结构，普通正相硅胶柱或反相C18 柱均不适合对其进行分离纯化，三泰科技的应用工程师利用SepaFlash HILIC ARG柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean® machine成功对其进行了分离，获得了满足纯度要求的目标产物，为此类样品的分离纯化提供了便捷高效的解决方案。

厂商：常州三泰科技有限公司

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