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紫外可见核酸蛋白分析仪

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  • 【分享】ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明

    ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置,配上层析柱、恒流泵、部分收集器(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而,目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多,但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功,为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段,其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪,主要有以下特点: 1、预热时间短,一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高,预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁,开机后仪器自动调整透光率(T)到100%,吸光度(A)调整到0.000。 4、透光率(T)和吸光度(A)对应准确,点两者误差小于1%。 5、双数据显示,仪器适时显示吸光度(A)和透光率(T)。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口(吸光度0—200mv)。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能,可将谱图插入文档(word)文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪(由电脑有效端口数决定)。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单,在电脑屏幕上可描出吸光度(A)谱图,透过率(T%)谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单,可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算,预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中,电脑会自动将图形左移(也可人工调整),电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数: 1、波长:254nm,280nm(可根据用户需要调配)。 2、样品池100ul,光程3mm。 3、量程:吸光度(A):0--2.000 透光率(T):1%—100%。 4、分辩率:吸光度(A):0.001 透光率(T):0.1%。 5、电脑分析参数:峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量(归一化)、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%,50HZ。 7、主机重量:约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源,仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后,将应用软件(ZHD.exe)复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮,待仪器显示0.000A和100%T后,双击ZHD.exe启动应用软件,系统进入采集(分析)状态。 4、在“测量选择”菜单下,用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”,电脑开始采集。 6、要停止采集,点击“检测操作”下的“测量结束”菜单,然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求: a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行; b、显示器分辩率为1024*768,小字体,256色配置; c、图形打印机; d、电脑系统必须正常工作,并保证串行口(COM2或COM1)有效; 2、系统连接无误后先让检测仪工作,再执行应用软件ZHD.exe; 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”,出现文件操作对话框,打开随机盘上的数据文件(.ran),图形被打开,熟悉菜单操作。菜单介绍如下: a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等; b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用); c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项; d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]; e、“谱图重绘”菜单:从起始点描谱;清理屏幕;释放压缩; f、“谱图全貌”菜单:在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下:在吸光度状态下,点击鼠标左键选取基线及时间范围(第一次点击选取第一点,第二次点击选取第二点),点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算,还可间接计算出层析柱分辨率;双击鼠标左键,即可取消本次计算。 h、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下,单击鼠标右键,屏幕显示该鼠标点的数值;双击鼠标右健,擦除屏幕显示数值。 七、注意事项: a、 更改波长方法:打开样品池挡板后,可见到滤光片的燕尾型支架和印字(245或280代表当前所使用的波长),用手将其轻轻抽出,换向后插入原位,再将样品池挡板装上,拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件; c、 应用软件执行后,十秒钟后不出现采集分析界面,说明电脑未收到数据,需检查系统连接是否正常; d、 在A—T%描谱过程中,开始1小时内,T%谱以实蓝线表示;1小时后(或点击“图形重绘” ),已描过的T%谱会以虚蓝线表示; e、 测量开始后(特别是出峰以后)不要按复位按钮。 f、 要停止采集,请点击“测量结束”后,先点击“EXIT”,再关闭检测仪。 g、 开始测量时,屏幕会弹出保存文件对话框,要求输入数据文件名及存放路径;之后,电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点,并与其他峰无焦点。

  • 【分享】紫外分析仪的分类及用途介绍

    紫外分析仪按照用途不同可以分为三大类,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,他们之间有区别,也有不同的用途。 三用紫外分析仪具有消耗功率小、热量低、可以长时间连续使用等特征,三用紫外分析仪可应用在科学实验工作、药物生产和研究、染料涂料橡胶、石油等化学行业、纺织化学纤维、粮油、蔬菜、食品部门、地质、考古等行业。 暗箱式紫外分析仪是提供白光和紫外光照射的装置,具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的优点。暗箱式紫外分析仪主要用于蛋白质电泳观察和照相。 可照相紫外分析仪是提供紫外光照射的装置,该仪器选用电子镇流器,具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的特点。可照相紫外分析仪可用于核酸电泳凝胶样品的观察、照相等方面。

  • 核酸蛋白检测仪应用和原理

    核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

  • 紫外-可见光分析仪

    今天用紫外可见分析仪扫了全波长,结果标品和样品的曲线是一样的,都没有明显的波峰波谷,不知道是什么原因。另外,扫描的峰值高低是不是和浓度大小有关呢?

  • 【讨论】远离EB和紫外,检测核酸有没有更好的选择

    话说无论是初接触分子生物学的新手,还是久经考验的“老鸟”,都知道EB染料的有害性,这种有害性表现在三个方面:接触致癌性,紫外观测的诱变性,以及麻烦的后处理。但是要说到EB的替代品,好像又都不是那么合心意,比如SYBR类染料在紫外下不稳定,容易降解,一些像是GelRed之类的染料虽然毒性低,但是价格却不亲民。想要避免EB的影响,又不想影响实验的效果,许多实验人员常陷入两难中,另一方面,经典的凝胶成像系统一般都是采用的紫外成像,在这种波长下,EB的灵敏度和价格都是比较合适的,而其它的染料又存在不稳定性这一瓶颈式缺点,所以导致了虽然知道EB的有害性,但许多实验室还是采用EB染料的现状。国内生物技术自主研发着名企业:百泰克公司2009年推出了新一代的凝胶透射仪,可用于核酸和蛋白质电泳凝胶样品的观察、处理、分析和拍照。这种凝胶透射仪:UltraPowerTM采用的是可见光光源,如果配合新一代核酸染料UltraPowerTM或者其他花菁类荧光染料,可检测出几十pg的dsDNA,灵敏度比紫外凝胶透射仪配合EB染料高10-25倍。这是由于花菁染料具有摩尔吸收系数大和荧光量子产率高的优点,通过共轭链长度的调节,花菁的光谱可以从可见光区一直延伸到近红外区,采用红区测量可有效地排除背景干扰,获得更为理想的分析灵敏度和选择性。花菁染料的光谱对外界微环境的变化极为敏感,非常适合生物及环境样品的分析研究。除此之外,UltraPowerTM可见光凝胶透射仪还可以用于多数荧光染料,比如SYBR Green I、绿色荧光蛋白(EGPF)等(具体染料见附表)。这可以算得上是一套多色荧光成像分析系统,而且UltraPower可以采用普通数码相机拍照,从而摆脱了高昂造价得黑白CCD时代,可以拍出多姿多彩的电泳图片来。

  • 氙灯的紫外可见分光光度计

    最近有一家叫SCINCO的韩国厂商到我们这推荐一种氙灯的紫外,体积挺小巧的,说是专门快速测量核酸和蛋白质含量的,说的天花乱坠的。。。。。看参数也不怎么样!说是价格比较实惠。。。不知道各位知不知道生物测量这块什么仪器测量最简便?紫外应用的多吗?简介:专业的生物紫外可见分光光度计优化生化分析,预设的程序和LabPro®生物软件使得核酸和蛋白质的测量变得非常简单,微量比色皿和多点比色皿可以减少实验样品用量,这款仪器在提供完整的解决方案分析DNA、RNA和蛋白质的同时其高性价比也使其更具有竞争力。主要参数波长范围:190-1100nm光源:氙气闪光灯检测器:512光电二极管阵列光谱带宽:2nm波长精确度:±1nm波长重复率:0.02nm

  • 【分享】紫外吸收法测蛋白质含量

    蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法,加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时,将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照,在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿,盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时,A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查,根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%,光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

  • 【原创】微量核酸蛋白定量的最新技术结晶 – NanoVue

    随着常规分子生物学研究的深入,越来越多的生物实验室日常需要测量的核酸、蛋白样品量也在不断地加大。传统的分光光度计虽然已经非常普及,但由于需要在测量后清洗比色杯,实际上消耗了不少宝贵的研究时间。同时,由于核酸样品的体积较小,即使使用昂贵的微量石英比色杯(容积数十ul左右),也往往需要对原始样品进行稀释,从而带来可能的操作偏差。对于一些稀有的样品来说,稀释即意味着测量后无法回收,同样也会对后续研究带来更高成本。因此,无需比色杯,仅需数ul即可测定样品浓度的超微量分光光度计现在受到很多实验室的关注和欢迎。NanoVue是GE Healthcare公司于2008年最新推出超微量分光光度计。GE Healthcare公司的分光光度计品牌Ultrospec和GeneQuant在市场上已经有了十多年的历史,在用户中有着很好的信誉和口碑。NanoVue在该系列仪器的基础上延续了出众的检测性能,同时大大改进了检测的光路设计,通过专利的检测技术使检测样品的体积最小仅需0.5ul, 190-1100nm的宽范围连续波长设计较市场上同类仪器宽了一倍左右,使得能够轻松检测核酸、蛋白样品和Cydye荧光染料标记物的浓度。仪器内置了RNA、DNA 和寡核苷酸浓度和纯度测定方法;寡核苷酸转换因子,分子量,理论Tm计算功能;包括一般紫外、Bradford、 Biuret、BCA、Lowry的蛋白定量法;以及波长扫描,动力学,标准曲线,多波长测定等扩展功能。除了强大的检测性能外,NanoVue还在许多操作性能上进行了精心的设计,能够给用户带来众多全新的体验,主要包括以下方面:1 唯一不需电脑就能在仪器面板上直接检测的超微量分光光度计。仪器配置了一块大面积高分辨率的背光液晶屏和操作面板。相对于点样后转去电脑控制,再回去仪器清洁的过程,NanoVue不仅节省了购买电脑的支出,同时点样,按键测量,擦拭一气呵成。可以通过整合的打印机直接打印分析数据。当然,如果需要在电脑上保存分析数据,NanoVue同样支持USB或蓝牙连接电脑,将珍贵的实验数据永久记录下来。2 通过特别设计的疏水点样表面,能够很容易回收稀有的样品,并且有效避免多个测量间的样品交叉污染,提高测量的准确性。NanoVue的点样表面具有专利设计,表面坚固而且光滑。不管是样品回收还是测量完直接擦去都非常简易,不会有任何样品粘附残留在点样面上。而且点样面耐用性也非常出众,保守估计可以至少测量20000个样品以上。3 最快的检测速度。NanoVue通过独特的光路设计,使得所有样品的检测都能够在5秒钟之内完成,把微量分光光度计的测量时间提升到了一个新的高度。而且NanoVue具备即开即用功能,避免了许多分光光度计开机需要预热的麻烦,真正做到省时省力。由此可见,NanoVue不仅性能出众,其易用性和灵活性也是目前超微量分光光度计中出类拔萃的。通过试用NanoVue的体验,使用者可以完全感受到,原来,核酸蛋白的测定可以这么简单,这么快速!目前,NanoVue已经正式在中国推出,欲了解更多的信息,请直接联系GE公司。

  • 【讨论】紫外分光光度法测定蛋白质含量de问题?

    【讨论】紫外分光光度法测定蛋白质含量de问题?

    实验原理本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。在最大吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯-比耳定律。仪器与试剂紫外-可见分光光度计,比色管,吸量管标准蛋白质溶液:5.00 mg.mL-1溶液,0.9% NaCl溶液,待测蛋白质溶液实验步骤1. 标准曲线的制作 : 用吸量管分别吸取1.0 、1.5、 2.0 、2.5 、3.0 mL 5.00 mg.mL-1标准蛋白质溶液于5只10 mL 比色管中,用0.9% NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1 cm石英比色皿,以0.9%NaCl溶液为参比,在280 nm处分别测定各标准溶液的吸光度A280,记录所得读数。2. 样品测定: 取待测蛋白质溶液3 mL,按上述方法测定280 nm处的吸光度。平行测定三份。数据处理1. 以蛋白质浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。2. 根据样品溶液的吸光度,从标准曲线上查出待测蛋白质的浓度。注意事项和问题1. 紫外吸收法与Folin-酚比色法测定蛋白质含量相比,有何缺点及优点?2. 若样品中含有核酸类杂质,应如何校正?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/04/200804041741_83891_1604910_3.jpg[/img]

  • 【资料】UV紫外吸收法测protein蛋白质含量

    UV紫外吸收法测protein蛋白质含量 蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质,有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法,加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

  • 紫外可见分光光度计测定原理分享

    紫外可见分光光度计测定的是蛋白浓度,X射线晶体衍射测的才是蛋白质结构。紫外分光光度计测蛋白浓度原理:组成蛋白质的氨基酸里,有三种氨基酸:苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸具有苯环的共轭结构,它们对特定波长的紫外线具有吸收光谱,也就是说:它们对紫外线是有颜色的。每种蛋白质根据苯环的数量和分布都有一定的吸收强度,总的吸收值和分子的浓度呈正比。根据蛋白质溶液对280nm紫外线的吸收强度,可以测定出蛋白质的浓度。X射线晶体衍射测蛋白结构原理:蛋白质的肽链不是杂乱无章的,按照一定的规则盘曲成了特定的形状(蛋白质高级结构),每个碳-碳键都有它特定的构象,这种特定的结构是蛋白质作为分子机器的基础。结晶的蛋白质中,分子排成了空间重复的有序的结构,而原子之间的间隙与X射线的波长类似,构成了X射线的衍射光栅。当用X射线照射这种重复性的天然光栅时,通过波的衍射形成了有规则的干涉条纹,分析这些条纹就可以解析出蛋白质分子中每个原子的位置。

  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 【分享】分析仪器使用与维护丛书--紫外可见分光光度计

    【分享】分析仪器使用与维护丛书--紫外可见分光光度计

    书  名:分析仪器使用与维护丛书--紫外可见分光光度计 著 译 者:李昌厚 出 版 社:化学工业出版社 出版日期:2005-6-1[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/01/200701111630_38589_1604910_3.jpg[/img]仪器信息的书店有买的,有兴趣的话去看看:http://www.instrument.com.cn/book/shtml/20050705/1008667.shtml([color=#DC143C]绝对没有做广告的意思,哈哈,我已经买了一本了[/color])内 容 提 要本书是《分析仪器使用与维护丛书》的分册。本书介绍了紫外可见分光光度计分析测量的基本原理和结构,深入讨论了紫外可见分光光度计的主要技术指标及其测试方法;用较多篇幅,从实际应用的角度,全面、详细地介绍了如何评价或如何挑选紫外可见分光光度计仪器、如何选择最佳分析测试条件、影响分析测试准确度的主要因素、分析测试误差的估算方法,以及对仪器的保养、维修等有关问题。本书通俗易懂,适用性强,可供科研院所、大专院校、工矿企业中从事紫外可见分光光度计分析测试工作的广大科技工作者阅读。

  • 【求助】紫外如何搭配设备以进行检测DNA和蛋白质以及基因工程研究?

    网上查到一份西安某大学的学报,里边介绍了日本某品牌紫外可搭配超速离心机进行基因工程的研究,我想请问下高手们:1、使用哪些机器搭配紫外能够达到分析DNA和蛋白质的目的?2、有使用过HITACHI紫外系列产品的高手能来回答下其分析软件(尤其是核算分析软件包)是需要独立购买的吗?

  • 德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    德国Implen超微量紫外-可见分光光度计

    NanoPhotometerTM——超微量分光光度计最佳选择摘要:由于传统的紫外-可见分光光度计对样品量的需求较大,而且对所测样品的浓度有一定范围的限制,对于分子生物学实验者来说,对少量又珍贵的核酸蛋白质样品的稀释,无疑是一种糟蹋。为了满足和方便广大生物学科研者的实验需求,德国Implen 公司研发出一款通过改变光程从而达到扩大样品浓度检测范围的目的的超微量紫外—可见分光光度计,它所需上样量只有0.3-2ul,能够检测核酸浓度和纯度,蛋白质A280等,内置BCA,Bradford等多种实用检测方法。同时可使用常规比色皿,用于细胞(细菌)OD600的测量。关键词:超微量,分光光度计,光程,核酸蛋白质浓度,OD600。前言核酸纯度和蛋白质浓度的测定,是分子生物学实验的常规操作之一,传统的紫外—可见分光光度计对样品量的要求较高,一般在500ul(特殊比色皿)以上,而500ul的蛋白质或核酸,对科研人员来说可能是半年来所提取核酸(蛋白质)的总量,因此,常规分光光度计在进行核酸(蛋白质)浓度的测定具有很大的局限性。Implen (德国,慕尼黑) 公司研发的超微量紫外—可见分光光度计通过使用特制的超微量比色皿,使得只需0.3-5ul的上样量就能准确的检测出样品浓度。通过对光程的调节,不但能够检测低浓度的样品(0.2ng/ul),也能够检测高浓度的样品(18750ng/ul)。NanophotometerTM性能特点具有专利权的样品压缩技术:NanophotometerTM 利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔(石英检测窗口和光学平面镜稀释盖)。这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力,同时,在很大程度上减少了样品的蒸发,保证了很好的重复性,尤其是溶于易挥发溶剂中的样品。NanophotometerTM有6个不同稀释倍数的样品稀释盖,同时也可使用常规比色皿进行检测。 http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164135373.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164141959.jpg http://www.wblab.cn/uploadfile/image/20110927164145737.jpg 由于具有多个稀释倍数的能力,所以NanophotometerTM的检测浓度范围测非常广阔:dsDNA:2-19750ng/ul; ssDNA:2-13875ng/ul; RNA:2-15000ug/ul; Oligo:2-12375ng/ul。蛋白质浓度检测范围在0.04mg/ml至660mg/ml之间。因此,几乎所有样品都不需要稀释而直接可进行浓度测定(适合全波长扫描)。NanophotometerTM 的全波长扫描只需3.5s,每个样品所需要的时间不到5秒钟,快速的检测速度为大量的样品检测节省了宝贵时间。0.3ul的上样量: NanophotometerTM 特制的样品压缩技术,使得所需上样量非常少,仅需0.3ul的样品就可准确检测所测物质的浓度。 2ng/ul到1875ng/ul的检测范围(dsDNA):NanophotometerTM 特有的样品压缩技术能够将样品自动稀释为1:5,1:10,1:50,1:100和1:250五种倍数,无稀释误差,并减少手动稀释所浪费的时间,保证了样品的稳定性。由于缩短了光程,所以增大了浓度检测的范围。NanophotometerTM 的最小光程为0.04mm,是常规比色皿光程的二百五十分之一,因此比常规紫外—可见分光光度计所测浓度范围大250倍。下表为稀释倍数所对应光程:5→d=2 mm; 10→d=1 mm; 50→d=0.2 mm; 100→d=0.1 mm; 250→d=0.04mm全谱扫描仅需3.5s:NanophotometerTM 的波长范围190—1100nm,系统启动时间小于5s,且无需预热,全波长扫描时间(200—950nm)只需3.5s,宽的波长范围满足常规物质的测定,NanophotometerTM 内置多种波长扫描方法,有单波长扫描、比色测定、波长扫描(自定义范围)、动力学测定、标准曲线测定、多波长扫描(5个波长点)和吸光度比值(两个吸光度比值)。灵活的数据输出方式:NanophotometerTM 的数据输出方式有内置打印机、SD-RAM卡、USB或者蓝牙可供选择。内置打印机可以方便的将实验结果马上打印,方便重要数据的保存和分析;USB接口连接电脑,一些需要长久保留的数据可方便的储存到个人电脑中。卓越的设计:独特的人体工程学理念,超大的背光蓝色液晶显示器,自定义用户界面,易于清洗的可移动样品室,用户友好型操作界面和防滑的控制面板,即使带有内置打印机,也易于携带,可用于户外操作。终身无需校正:密封的光路系统且无拆换部件,采用独特的光程改变技术,使得该NanophotometerTM 超微量紫外—可见分光光度计具有很高的精度,且终身无需校正,免去了昂贵的校正费用,节省宝贵的时间。总结NanophotometerTM 的样品压缩技术使得其具有卓越的检测和稳定性能,在同类产品中,由于它改变光程的技术不依赖于被测溶液的表面张力,从而扩大检测范围,而且这种改变光程的方法不涉及机械磨损或机械疲劳,故光程的改变是非常精确的,终身无需校正。总的来说,Na

  • 紫外-可见光谱分析

    紫外-可见光谱分析

    [color=#444444]请各位大神帮忙分析一下这个紫外-可见光谱~还想请问一下,紫外256-258nm是什么的吸收峰,摆脱各位了~[/color][color=#444444][img=,690,516]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908131013307219_1145_1848218_3.png!w690x516.jpg[/img][/color]

  • 有用GB5009.5-2010紫外法做蛋白含量检测吗?

    GB5009.5-2010紫外法做蛋白含量,用硫酸铵做标准曲线,经过15分钟100度水浴,标液有明显的色梯度,液体也很清晰,但回温到室温后,液体变的混浊,无法测吸收光。有没有用这个方法做蛋白的?有没有遇上这种情况的?救求高手指教!

  • 区分紫外可见光度计与可见光度计的方法

    [b][b][color=#008000]设计原理[/color][color=#008000]:[/color][/b][/b]紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。[align=left]可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是采用新型单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/align] [b][color=#008000]波长范围[/color][/b]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右,紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样,紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[b][color=#008000]光源不同[/color][/b]可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[b][b][color=#008000]光学器件不同[/color][/b][/b]由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件。同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。 [b][color=#008000]接收器不同[/color][/b]由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

  • 【求助】蛋白质在紫外可见光波长范围内是否有明显吸收

    大家好! 我初学使用紫外可见分光光度计,有一些问题想请教一下大家.望大家不吝赐教! 我用紫外可见分光度计在波长为190~400nm扫描蛋氨酸,想确定其最大吸收波长.但是发现吸收峰并不明显,从190~230吸收逐渐下降,之后就像基线一样平缓,这样的图谱怎样来确定其最大吸收波长呢. 谢谢各位!

  • 紫外—可见分光光度分析导学

    紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握:本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法;分子吸收光谱与电子跃迁类型,物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线,摩尔吸收系数与吸收系数,吸光度与透光度,偏离朗伯-比尔定律的原因;掌握显色反应条件及光度测量条件的选择;掌握紫外—可见分光光度计的主要部件,各部件的作用及仪器原理,主要类型及特点;掌握差示分光光度法的原理、特点。理解:物质分子结构与紫外吸收光谱的关系,吸收波长位移与分子结构变化的关系;紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。了解:了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径;双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法;紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。二、 基本概念与重点内容A概述 1.紫外—可见分光光度法的特点 灵敏度与准确度较高;选择性较好;设备简单、操作简便。 2.分光光度法的发展过程 目视比色法 光电比色法 分光光度法 3. 分子的紫外—可见吸收光谱 分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光,其外层电子跃迁而成,又称分子的电子跃迁光谱。紫外—可见分光光度法是基于物质分子的紫外—可见吸收光谱而建立的一种定性、定量分析方法。4. 光的基本性质 5.物质对光的吸收及吸收光谱6.紫外—可见吸收光谱与电子跃迁类型7.生色团与助色团B 光的吸收定律1.光吸收的基本定律(朗伯-比尔定律)2.吸光度与透光率、百分透光率之间的关系3.工作曲线的绘制与应用4.吸光系数、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度5. 偏离朗伯-比尔定律的因素C紫外-可见分光光度计1. 分光光度计的主要部件2. 在紫外和可见光区进行测量时,分别选择何种光源3. 单色器的主要元件 光栅;棱镜4. 分光光度计中的检测器类型早期:光电池;光电管;光电倍增管。 5.紫外-可见分光光度计的类型及特点D显色测定试样的制备和光度测定条件的选择、1.显色反应及其影响因素2.测定读数误差和测定条件的选择 5.入射波长的选择E 分光光度定量测定方法与其他应用 1.单组分的测定 通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 2.多组分的同时测定 3.紫外可见吸收光谱在有机化合物结构解析中的作用 了解共轭程度、空间效应、氢键等;可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。在有机化合物结构解析中,紫外可见吸收光谱没有红外吸收光谱提供的结构信息多。 4.紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律

  • 【求助】求助 紫外一可见分光光度计不稳定的因素分析

    我用的是紫外一可见分光光度计((Beckman Coulter DU800, Fullerton, CA, USA),做全波长扫描(200-800nm),扫描时出现的峰乱七八糟,我配溶液的浓度是100ppm的牛血清蛋白.请高手指点一下出现这种情况的可能性因素,UV灯预热了20分钟后扫的,机器重起还出现这种情况,请高手指点.

  • 紫外可见分光光度计的定量分析

    紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。当前已成为全世界使用最多、覆盖应用面最广的分析仪器。它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面,用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。由于仪器涉及到光学、电学和结构等,所以它需要在一定的环境中应用 定量分析  根据琅伯-比尔定律,样品的浓度和吸光度是成正比关系的,浓度越大,吸收值越高,所以分光光度计用的最多的还是定量分析,定量分析的种类有很多,这里先容常用的几种定量分析方法:  A、尽对法:尽对法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用最多的一种方法。这是一种以琅伯-比尔定律A=εbC为基础的分析方法,某一物质在一定波长下ε值是一个常数,石英比色皿的光程是已知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在λmax波优点,测定样品溶液的吸光度值A。然后,根据琅伯比尔定律求出C=A/εb,则可求出该样品溶液的含量或浓度。  B、标准法:在选定的波优点,在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液C标和被测试样品溶液C样的吸光度A标和A样。然后,按下式求得样品溶液的浓度或含量。  C样=A样/A标×C标  C、标准曲线法  紫外可见分光光度计最常用的定量分析方法是标准曲线法。即先用标准物质配制一定浓度的溶液,再将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光度,以吸光度值为纵坐标,标准溶液对应得浓度为横坐标,绘制标准曲线。最后,将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值,在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。  D、其它分析方法  除上述几个分析方法外经常使用的分析方法外,还有比吸收系数法、最小二乘法、解联立方程法和示差分光光度法

  • 用紫外扫描牛血清蛋白的峰值

    用紫外扫描牛血清蛋白的峰值

    [color=#444444]配置1mg/mL牛血清蛋白溶液,用去离子水和。BSA配的,然后紫外扫光谱峰值是539左右,网上查的是277nm左右,哪里有问题呢,扫光谱峰值和配置溶液浓度有关系吗[/color][color=#444444][img=,507,900]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908201019285247_8917_1827556_3.jpg!w507x900.jpg[/img][img=,507,900]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908201019276355_7390_1827556_3.jpg!w507x900.jpg[/img][/color]

  • 【分享】紫外-可见吸收光谱分析课件

    紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

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