移液工作站在化合物对细胞毒性影响研究中的应用案例
介绍:CyBi-SELMA(CyBio品牌,德国耶拿公司)半自动移液工作站以其体积小、操作界面友好、兼容96或384孔板的特点,在低通量液体处理操作中非常适用。由于便于放入组织培养生物安全柜中,此设备非常适合在基于细胞的研究实验中应用,例如培养基更换、化合物浓度梯度筛选。iPSC制备的心肌细胞(iCell Cardiomyocytes)被《科学家》网站评选为2010年度生命科学领域的十大创新产品。位于美国威斯康星州麦迪逊市的Cellular Dynamics International (CDI)公司的研究人员将人类纤维细胞诱导生成多功能干细胞(iPSC)后,进一步对iPSC细胞进行重编程获得了人类心肌细胞产品iCell Cardiomyocytes,该细胞显示了活的心脏典型的电生理特征。这是目前第一个商业化的人类干细胞分化细胞系。iCell Cardiomyocytes为研究人员提供了最方便的细胞类型进行相关的特异性研究。此产品的主要目的是用于药物发现。药物毒性是药物研发中的一个严重问题,是药物退出市场的第二大原因。如何使药物更安全,甚至保全生命,是药物研发领域的很大机遇。 Chris Kendrick-Parker还介绍说,CDI公司每天都会制造、销售出数十亿的心肌细胞产品,在全球顶尖的20家制药公司中已经有一半的公司都成为了CDI公司的客户。这类人心肌细胞具有广泛用途,包括用于药物活性成分的心脏毒性研究。这种检测中的移液操作包括梯度稀释、化合物添加、细胞液添加,都是乏味、耗时,并且受到不同操作者在技术水平、准确度、重现性差异的影响。本实验采用Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell ViabilityAssay(CellTiter-Glo® 发光法细胞活力检测试剂盒)。是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计,是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中,无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上,加入试剂并混合后,10分钟内,该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。CyBi-SELMA用于一系列化合物的心脏毒性研究实验。对于SELMA自动化设备相比人工移液的操作友好性、快速、数据一致性进行评估。