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便携空气细菌总数测定仪

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  • 细菌总数的测定 平皿计数法

    刚开始做细菌总数的测定,用的HJ 1000-2018这个方法,买了细菌标准样,浓度是95MPN/ml,范围在60-300左右,但自己做完之后每个平皿上只有个位数菌落生长。可以确定的是:已做实验室空白实验没有问题。请问各位过程中有什么问题需要注意的吗?

  • 水中细菌总数的测定

    一、目的和要求(1) 了解水细菌学检验的卫生学意义和基本原理,掌握水中细菌总数的检验方法。(2)了解平板菌落计数原则。二、原理水中细菌种类繁多,它们对营养和其他生长条件的要求各不相同,无法找到一种在某种条件下使水中所有细菌均能生长繁殖的培养基。因此,通常选择一种大部分细菌能生长的培养基,通过生长出来的菌落大致计算水中细菌总数。目前一般是采用普通肉膏蛋白陈琼脂培养基。三、仪器与试剂(1)高压蒸汽灭菌器。(2)显微镜。(3)灭菌水。(4)肉膏蛋白陈琼脂培养基。蛋白陈 l0g牛肉膏 3g氯化钠 5g琼脂 15-20g蒸馏水 1000m将上列成分混合后,加热溶解,调整pH为7.4-7.6,过滤,分装于玻璃容器中,经121℃ (151b①/in2)高压蒸汽灭菌20min,冷暗处备用。四、实验步骤1.水样的稀释根据水被污染程度的不同,可用无菌吸管做10倍系列稀释。①11b=0. 453 592掩,下同。2.接种以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样,注入灭菌平皿中,再倾注约15mL已融化并冷却到45℃左有的培养基,并立即转动平皿,使水样与培养基充分混匀。每个水样应倾注3个平皿。每次检验时另用3个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。3.培养待冷却凝固后,翻转平皿,使皿底向上,置于37℃恒温箱内培养24h,进行菌落计数。3个平皿中的平均菌落数即为水样1mL中的细菌总数。4.菌落计数做平皿菌落计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大状菌落生长时,则不宜采用;而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数;若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数,然后再求该稀释度的平均菌落数。五、数据处理1.按各种不同情况进行计算(1) 首先选择平均菌落数在30-300者进行计算,当有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告。(2) 若有两个稀释度,其平均菌落数均为30-300,则应按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2,应报告两者的平均数;若大于2,则报告其中较小的菌落总数。(3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告(4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告。(5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告。2.菌落计数的报告菌落数在100以内时按实有数报告。大于100时,采用2位有效数字,在2位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算,为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示,报告菌落数为“无法计数”时,应注明水样的稀释倍数。六、注意事项(1)严格无菌操作,防止污染。(2)根据水样污染程度选择稀释倍数,必要时做预实验。

  • 细菌总数测定法

    细菌总数测定法一、设备和材料恒温培养箱、恒温水浴槽、试管、移液管、菌落计数器、放大镜、托盘天平、称量纸、培养皿。二、培养基和试剂营养琼脂培养基 0.9%生理盐水三、检验程序待检样 适当倍数的稀释液 选择2-3 个适当稀释度各1ml分别加入灭菌平皿内 每皿内加入适量营养琼脂 37℃ 48±2小时 菌落计数→报告四、操作步骤1.按无菌操作要求称取样品10g,连同100ml生理盐水加入灭菌三角瓶内,震荡,使成1∶10的均匀供试液。2.用1ml 灭菌吸管吸取1∶10的供试液 1ml,在离稀释剂液面上约1cm处,沿管壁注入装有9ml 灭菌的盐水管中,混匀即为1∶100的稀释液。3.另取1ml 灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增稀释。如此每递增稀释一次,应换用一支1ml灭菌吸管并充分混匀,稀释至10-3 倍数或适当倍数备检。4.在做上述10倍递增稀释时,每稀释妥一稀释度,即可取1ml稀释液注入9厘米平皿内。(一般可根据对供试品污染情况的估计,从供试液起,选择2-3个适宜稀释度进行测定,每个稀释度各用2-3个平皿)注:每次吸液时均应将待稀释液充分混匀,充分振荡或用吸管反复吹系数次。4.稀释液注入平皿后,将熔化并冷至45~50℃的肉汤琼脂培养基倾注平皿内约15mL,转动平皿使充分混合均匀后置水平台待凝。5.琼脂凝固后,翻转平板,置30-35℃培养箱内培养24h、48h,分别计算平板内生长的菌落,以48小时的菌落数为准。五、菌落计数方法先用肉眼观察,点数菌落数(霉菌不包括在内),然后持放大镜检查有无遗漏,各平板菌落计数后,求出同一稀释度各平板生长的平均菌落数,如平板中有连成片状的菌落或在点样菌落蔓延生长时,该平板不宜计数。六、细菌菌数报告一般的报告方法是选取同一稀释度平均菌落数在30~300个之间的平板,作为菌落总数测定的范围,其中一个平板有较大片状菌落生长时,或两平板菌落数相差一倍以上,此稀释度不宜采用,稀释度的选择:1.一个稀释度,平均菌落数在30~300个之间时,乘以稀释倍数报告。2.两个稀释度,平均菌落数在30~300个之间,则应求出两者总菌数之比,比值小于或等于2应报告平均数,大于2则报告其中较小的数字。3.有稀释度的平均菌落数均多于300个,应按稀释度最高的平均菌落数,乘以稀释倍数报告。4.所有稀释度的平均菌落数均少于30个,则按稀释倍数最低的平均菌落数,乘以稀释倍数报告。5.所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,其中一个稀释度大于300,而相邻的另一稀释度小于30,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告。6.有稀释度均无菌生长,报告数为10个/克。菌数的报告,菌数在100以内时,按实有数报告之,大于100时,采用左端前2位数字,在前两位数字之后的数值,以四舍五入法计算,数字后面的空,可用10的指数表示。如供试品经检验细菌数不符合要求,无特殊规定时应重新取样,依法复检两次,按三次结果平均值报告并判定合格与否。

  • 水中微生物检测方法-细菌总数检测-ATP??

    在BCEIA展会上,看到大的仪器厂家开始向小型化仪器方面发展,其中有一款便携式ATP,主要检测细菌总数,非常快速,我联想到我们水质菌落总数是需要培养的,时间很长。那我们是不是菌落总数也可以采用这样的方法??ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理,利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷(ATP)。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少。

  • 水质细菌总数的测定

    准确度上面的,细菌总数浓度为95MPN/ml,这个单位跟CFU/ml,单位能互换吗?CFU,MPN[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/01/202101230828205811_5396_4048932_3.png[/img]

  • 【原创】用先进微生物监测方法研究深圳空气环境细菌总数和遗传多样性

    [font=宋体]深圳市是华南地区新兴的大都市,人口稠密,工商业、电子制造业发达,交通繁忙,从近年气象要素和污染指数的变化情况看,空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量总体有呈下降的趋势;深圳处于亚热带海洋季风气候带内,空气温湿,有利于空气微生物的生长繁殖,地面上人群呼吸带的微生物已经直接影响到人体健康。因此,监测深圳市区的空气微生物含量,对于提高深圳市区的大气环境质量和保障人体健康是十分必要的。[/font][font=宋体]随着深圳市经济的发展和车辆的增多,城市空气污染也越来越严重。通过对空气微生物含量指标进行监测可以反映出空气的污染程度以及对人群健康造成的威胁。深圳市生态监测中,关于空气微生物的常规监测主要采用传统的平皿沉降法,此方法存在较多误差;我们将先进的荧光显微镜法和变性梯度凝胶电泳法([/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体])引入监测工作中,作为深圳市生态监测体系中空气微生物监测方法的改进和补充。[/font][font=宋体][/font][size=3][b][font=宋体]变性梯度凝胶电泳法[/font][font=宋体][/font][/b][/size][font=宋体]分子生物技术克服了传统微生物培养技术的限制[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]可以更精确地揭示环境中微生物种群结构及其遗传的多样性,从而可以更加清楚的了解环境的变化及其与微生物的关系。其中,[/font][font=Times New Roman]PCR-DGGE[/font][font=宋体]技术在遗传多样性等研究方面的应用较为广泛。[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]技术是[/font][font=Times New Roman]rRNA[/font][font=宋体]基因测序中经常用到的一项[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]分离技术。由于不同种个体的[/font][font=Times New Roman]rRNA[/font][font=宋体]基因的长度较稳定,[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]能够将大小相似的不同序列[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]区分开,得到纯化的单一[/font][font=Times New Roman] rDNA[/font][font=宋体],以便进行测序,从而可以获得更多有关微生物群落遗传学上的信息,即群落遗传多样性等信息。应用变性梯度凝胶电泳技术,对不同环境样品中的细菌微生物群落的遗传信息进行对比分析,结合环境的理化等指标,可以得到受不同程度污染的环境样品中的微生物遗传多样性的异同、微生物种类的变化等方面的信息,从而通过微生物指标来反映环境受污染的程度。[/font][size=3][b][font=宋体]荧光显微镜法[/font][/b][/size][font=宋体]利用微生物指标监测环境污染与清洁度是一种快速灵敏的生物学检测方法,通过对微生物[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]的染色所采用的荧光显微镜方法,能够检测到环境中绝大部分不能够被培养微生物类群,可以较好的降低常规培养皿培养所造成的微生物总量的损失或者过低估计等误差。此外,荧光显微镜检测方法还具有直观,快捷等特点。[/font][font=宋体]目前,国内外将荧光显微镜方法应用于空气和海水中微生物的研究较为成熟可靠,并且得到了很好的研究结果;在土壤和沉积物中的微生物总数的研究上多采用培养皿的方法,我们希望通过前期的实验探索,可以将荧光显微镜的方法应用到土壤微生物总数监测工作中,并且与常规方法进行对比,检测该方法的可行性。[font=Arial]深圳空气环境微生物监测研究的区域为整个深圳市,测点集中在东部和西部区域,有杨梅坑、田心山、莲花山、羊台山和南山生态测站5个站点。[/font][/font][size=3][font=宋体][b]荧光显微镜分析[/b][/font][/size]使用Syber Green I 染色剂染色土壤环境的细菌DNA,蓝光激发后,发亮绿色荧光; 使用Olympus BX41显微镜,在油镜条件下随机选择10-20个视野计数被染色的细菌个体(细菌个数=平均视野中的细菌数量×滤膜的有效过滤面积/视野面积),进行荧光显微镜计数(10×目镜,100×物镜,1000×倍数)亮绿色荧光的细菌细胞。[b][font=宋体][size=3]分子生物学分析[/size][/font][/b][font=宋体]采用常规[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]提取方法对深圳空气环境细菌样品总[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]进行提取,得到的总[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]电泳结果图谱;[/font][font=宋体]对测站的空气环境细菌样品[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]进行降落[/font][font=Times New Roman]PCR[/font][font=宋体]扩增,得到[/font][font=Times New Roman]PCR[/font][font=宋体]产物,作为[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]的上样样品。[font=宋体]对降落[/font][font=''''Times New Roman'''']PCR[/font][font=宋体]扩增获得的产物进行琼脂糖电泳,[font=宋体]进行[/font][font=''''Times New Roman'''']DGGE[/font][font=宋体]实验([/font][font=''''Times New Roman'''']Touch Down [/font][font=''''Times New Roman'''']PCR[/font][font=宋体]产物)。[/font][/font][/font]

  • 微生物方法验证,空气中细菌总数,如何做估计偏差、精密度

    微生物方法验证,空气中细菌总数,如何做估计偏差、精密度

    [size=24px][img=,690,975]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305261120254433_6375_5029957_3.png!w690x975.jpg[/img][img=,690,974]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305261105270608_3607_5029957_3.png!w690x974.jpg[/img]GB/T 18883-2022《室内空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量标准》中微生物指标“细菌总数”,做方法验证时,需不需要做估计偏差和精密度?按照RB/T 033-2020《微生物检测方法确认与验证指南》里,是验证具体基质,但是空气中细菌总数,就不太好操作人工加污染物进去。[img=,690,682]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305261119177402_7183_5029957_3.png!w690x682.jpg[/img][/size]

  • 废水微生物细菌总数与菌落总数的问题?

    今天出报告时遇到一个这样的问题,我用1000-2018做细菌总数,但地下水的标准钟又叫菌落总数,我想问这个是不是相同的,是不是只是叫法不同而已,我看地下水上的方法也是平皿计数法,那我测出来的是叫细菌总数还是菌落总数呢?我们资质附表中只有细菌总数,客户指明要测菌落总数,那我能不能出这个报告呢?

  • 细菌总数超标,你觉得安全吗?(投票有奖)

    饮用水标准中要求测定细菌总数和大肠杆菌,如果超标了,就一定有不安全了吗?细菌总数超标,你觉得安全吗?那如何取舍呢?要参考价值和依据吗?投票后请给出理由。投票有奖。欢迎大家踊跃参加。

  • 求助关于饮用水中R2A琼脂测定细菌总数的疑问

    我们用的是滤膜法测定饮用水中细菌总数,培养基用的是R2A琼脂,培养后滤膜上的菌落形态应该是什么样的?什么颜色?为什么我们培养的滤膜上有长红色的也有黄色或者乳白色的菌落?各位有经验的亲们,帮忙指点指点,http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif 谢谢啦~~

  • 【原创大赛】纯化水中需氧菌数与生活饮用水中细菌总数的测定比较

    【原创大赛】纯化水中需氧菌数与生活饮用水中细菌总数的测定比较

    纯化水中需氧菌数与生活饮用水中细菌总数的测定比较 同一生产企业,既有生产普通食品(乳制品)又有生产保健食品(牛初乳粉)的,水源肯定是来源于同一生产用水,下面来看下乳制品和保健食品生产许可审查细则对不同产品的要求。[b][color=#ff0000]乳制品生产许可证审查细则[/color][/b]五、原辅材料的有关要求生产乳制品所用的原辅材料应符合相应的国家标准、行业标准的规定。不得使用乳制品以外任何蛋白质或其他非食用原料制成的产品作为生产原料。牛乳应当符合GB/T6914《生鲜牛乳收购标准》的规定。全脂乳粉、脱脂乳粉应当符合GB5410《全脂乳粉、脱脂乳粉、全脂加糖乳粉和调味乳粉》的规定。[color=#ff0000]生产用水必须符合GB5749生活饮用水卫生标准[/color]。如使用的原辅材料为实施生产许可证管理的产品,必须选用获得生产许可证企业生产的合格产品。保健食品生产许可审查细则要求:[img=,676,455]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310349111885_4979_2166779_3.png!w676x455.jpg[/img]生活饮用水中细菌总数的测定培养基:[img=,690,278]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310351367080_4974_2166779_3.png!w690x278.jpg[/img]水样的测定结果:[img=,673,543]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310356106968_9857_2166779_3.png!w673x543.jpg[/img]水样的测定结果为99cfu/mL GB 5749-2006标准要求为小于等于100,因此该生产用水符合乳制品生产许可审查细则的要求,可以用于生产2015版药典二部对纯化水进行测定:培养基:[img=,690,1226]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310400320190_9869_2166779_3.jpg!w690x1226.jpg[/img]纯化水的测定结果:[img=,690,293]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310406296908_6402_2166779_3.png!w690x293.jpg[/img]从检测结果可以看出:该生产用水不符合保健食品生产许可审查细则要求使用纯化水的要求。结论: 生活饮用水中的细菌总数与药典中纯化水的需氧总数实质均为细菌总数; 同一生产企业,既有生产普通食品(乳制品)又有生产保健食品(牛初乳粉)的,水源肯定是来源于同一生产用水,应优先按保健食品生产许可审查要求满足药典中纯化水的要求,方可满足生活饮用水的要求。

  • atp测定仪适合检测哪些类型的微生物

    [size=16px]  atp测定仪适合检测哪些类型的微生物  ATP测定仪是一种基于生物发光原理的快速检测仪器,通过测量样品中的ATP含量来评估微生物的活性水平。由于ATP是所有活细胞(包括微生物)的能量来源,因此ATP测定仪能够广泛应用于多种微生物的检测。  具体来说,ATP测定仪适合检测的微生物类型包括但不限于:  病原微生物:这是指那些能够引起疾病的微生物,例如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等。这些微生物常常存在于食品、水源和环境中,对人体健康构成威胁。ATP测定仪能够快速检测这些病原微生物的存在,有助于及时采取防控措施。  环境微生物:环境中的微生物种类繁多,包括细菌、真菌、病毒等。ATP测定仪可以用于评估环境样本(如土壤、水体、空气等)中的微生物污染程度,为环境监测和治理提供数据支持。  食品微生物:食品中的微生物污染是食品安全领域的重要问题。ATP测定仪可以检测食品样品中的微生物活性,包括菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母等,从而评估食品的卫生状况和质量安全。  需要注意的是,ATP测定仪检测的是ATP分子本身,而不是细胞数量或种类。因此,它更适用于快速评估样品中生物活性和细菌污染的程度,而不是用于鉴定具体的细菌种类。  总的来说,ATP测定仪在多个领域都有广泛的应用,能够为微生物检测提供快速、准确的方法,有助于保障人们的健康和安全。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403151354328485_5049_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 求助关于饮用水中R2A琼脂测定细菌总数的疑问

    我们用的是滤膜法测定饮用水中细菌总数,培养基用的是R2A琼脂,培养后滤膜上的菌落形态应该是什么样的?什么颜色?为什么我们培养的滤膜上有长红色的也有黄色或者乳白色的菌落?各位有经验的亲们,帮忙指点指点,http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif 谢谢啦~~

  • 细菌总数的检测方法国标更新了,是变更还是扩项呢?

    生态环境部更新发布了[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》(HJ 1000-2018[/url]),我们实验室的资质认定项目上细菌总数检测方法还是《水和废水监测分析方法》(第四版)的,请问这种资质认定方法的改变,是申请变更还是扩项呢?

  • 【讨论】细菌总数与霉菌,酵母菌的关系

    细菌总数和霉菌,酵母菌有什么关系?最近我们检测了一个巧克力样品,检测结果细菌总数15cfu/g,霉菌和酵母据150个/g,这样的检测结果有问题吗?有人提出疑问,细菌总数那么小,为什么霉菌和酵母菌那么大?

  • 关于细菌总数

    请问各位大虾一般的食品(酒类)灌装车间 设备表面和工作人员手部的细菌总数又多少?谢谢

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