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液相色谱检查川牛膝含量

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  • 【讨论】RIGOL L-3000 高效液相色谱法测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含量

    【讨论】RIGOL L-3000 高效液相色谱法测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含量

    【文章来源】北京普源精电科技有限公司（RIGOL） http://www.instrument.com.cn/netshow/SH101945/index.asp【摘要】　　天麻钩藤颗粒是由天麻、钩藤、黄芩、牛膝等多味中药加工精制而成的中药复方制剂，具有平肝熄风，清热安神之功效，用于肝炎上亢所引起的头痛、眩晕、耳鸣、眼花、震颤、失眠等症。中国药典(2010版)对该药品做了详细的阐述，本文应用RIGOL L-3000高效液相色谱系统，采用药典规定的方法测定了天麻钩藤颗粒中黄芩的含量。实验证明L-3000高效液相色谱系统全面满足药典方法及系统适应性的要求，分析结果准确可靠。完整应用文档，请点击如下链接下载 ======================= 点击打开链接 =======================针对大家所关心的问题，RIGOL应用中心会持续为大家开展分析http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif========================================================部分谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101061445_272295_2222707_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101061445_272296_2222707_3.jpg欢迎大家积极讨论哈~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gifRIGOL L-3000的其它相关应用文献：　　1、HPLC法测定牛奶中牛磺酸的含量　　2、HPLC法测定清火栀麦片中栀子苷的含量　　3、HPLC法测定牛黄上清片中栀子苷的含量　　4、HPLC法测定乳制品中泛酸的含量　　5、高效液相色谱法测定茶叶中的茶多酚　　6、高效液相色谱法测定穿心莲片中内酯的含量　　7、高效液相色谱法测定三颗针药材中盐酸小檗碱的含量　　8、HPLC法测定牛奶中山梨酸和苯甲酸的含量

  • 液相色谱-串联质谱法检测食品中维生素D的含量

    液相色谱-串联质谱法检测食品中维生素D含量 如何用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）检测食品中的维生素D含量。这项技术可是现代食品分析中的佼佼者，能够帮助我们精准地掌握食品中的营养信息。 样品前处理 提取：首先，我们需要从食品样品中提取维生素D。这一步很关键，因为提取效率直接影响最终的检测结果。通常，我们会使用有机溶剂，比如乙腈或甲醇，来提取维生素D。 净化：提取后的样品往往含有很多杂质，这些杂质会影响检测结果。因此，我们需要对提取液进行净化处理。常用的净化方法有固相萃取（SPE）和液液萃取（LLE）。 浓缩：净化后的样品溶液需要进行浓缩，以提高维生素D的浓度。常用的浓缩方法有氮气吹干和旋转蒸发。 仪器操作 流动相选择：选择合适的流动相对分离效果至关重要。通常，我们会使用水和有机溶剂（如甲醇或乙腈）的混合物作为流动相，并根据需要添加少量酸或缓冲液。 色谱柱选择：选择适合的色谱柱也很关键。C18反相色谱柱是常用的选择，因为它对维生素D有很好的保留效果。 质谱条件：设置合适的质谱条件，包括离子源温度、喷雾电压、碰撞能量等。这些参数的优化可以大大提高检测灵敏度和特异性。 故障排除 峰形不好：如果发现峰形不好，可能是由于流动相比例不合适或色谱柱污染。尝试调整流动相比例或清洗色谱柱。 灵敏度低：如果灵敏度不够，可能是由于样品提取效率低或仪器参数设置不当。检查提取方法并优化仪器参数。 杂峰干扰：如果出现杂峰干扰，可能是由于样品净化不彻底或流动相选择不当。尝试改进净化方法或更换流动相。 仪器故障：遇到仪器故障时，首先要保持冷静，然后根据仪器的报错信息查找原因。必要时，可以联系仪器厂家进行维修。 总之，液相色谱-串联质谱法检测食品中维生素D含量是一项复杂但非常重要的技术。通过掌握这些操作要点和故障排除方法，我们可以更加准确、高效地完成检测任务。

  • 【求助】含量检测:高效液相色谱法

    盐酸洛美沙星颗粒含量检测盐酸洛美沙星颗粒含量检测:高效液相色谱法，枸椽酸：乙腈（80：20）作流动相，想知道对柱子的要求，以及详细的注意事项及步骤。明天就要检样了，可是我们都没有做过，以前那个人离职了，望各位网友不吝赐教，拜托！！

  • 【求助】液相色谱 测定含量相关问题？

    高效液相色谱分析血液中儿茶酚胺含量，回收率不高各位老师，我想要用用高效液相色谱分析血液中儿茶酚胺含量，用的是电化学检测器，柱子是C18柱，用氧化铝吸附解析，找了几篇论文但是回收率不高，不知道是柱子没选对，还是前处理做的不好，或者是流动相不好，各位老师有什么意见可以知道一下吗？

  • 61.5 高效液相色谱法测定牛黄上清片中连翘苷含量

    61.5 高效液相色谱法测定牛黄上清片中连翘苷含量

    作者：谭志艺; 刘永路;（广东省云浮市药品检验所;）摘要：目的建立测定牛黄上清片中连翘苷含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Diamonsil(钻石)C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),检测波长为230 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。结果连翘苷进样量在0.08～1.00μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为99.66%,RSD=0.78%(n=6)。结论 HPLC法简便、灵敏、准确、重复性好,可用于牛黄上清片的质量控制。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271012_386283_1606903_3.jpg

  • 【求助】请教：液相色谱含量测定问题！谢谢！！

    有没有分析3-氨基丙腈的液相色谱分析方法我想用液相色谱分析有机盐中的3-氨基丙腈的含量，但由于3-氨基丙腈在紫外和示差液相中响应值不是很大，满足不了微量杂质的分析。大家有没有好的建议。比如有没有合适的检测器、或则有合适的衍生法。（由于样品中含有氨基丙酸，所以氨基的衍生手段好像无法使用）

  • 41.8 高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中淫羊藿苷的含量

    41.8 高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中淫羊藿苷的含量

    作者：丁永志;李霄锋;蔡俊安;郭鑫慧;（河南百年康鑫药业有限公司;河南财鑫集团有限责任公司;）摘要：目的采用高效液相色谱法测定穿龙骨刺片中淫羊藿苷的含量。方法采用外标一点法,Diamonsil ODS1 C18色谱柱,乙腈-水(27∶73)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长270nm。结果淫羊藿苷在0.125～1.00μg范围内呈良好线性,回归方程为Y=81601X+10356,r2=0.9997,平均加样回收率为99.12%,RSD=0.65%(n=6)。结论本方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为穿龙骨刺片中淫羊藿苷的定量分析提供了科学有效的方法。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131051_383402_1606903_3.jpg

  • 液相色谱串联质谱测饮用水中农药含量

    [color=#444444]请问用液相色谱串联质谱法测试水样中农药含量时，为什么要在过滤后的水样中加入等体积的有机溶剂？最终如何计算测得的浓度？是否为2倍关系？[/color]

  • 迪马产品有奖问答2.21(已完结)———高效液相色谱法测定小儿金丹片中橙皮苷和牛蒡苷的含量

    迪马产品有奖问答2.21(已完结)———高效液相色谱法测定小儿金丹片中橙皮苷和牛蒡苷的含量

    10，抽取5个版友）；幸运奖5名(2钻石币)捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）zgx3025（注册ID：v2844608）翠湖园（注册ID：hhx050）馨语（注册ID：huangdm）大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702211552_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702211552_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================高效液相色谱法测定小儿金丹片中橙皮苷和牛蒡苷的含量方法：HPLC基质：药品应用编号：102866固定相：Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱：Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm色谱条件：色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm, 5μm (Cat#:99603) 流动相:甲醇-水(45:55) 流速:1.0mL/min 柱温:室温 进样量:10μL 检测器:紫外检测器,284nm文章出处：中国新药杂志 2008,1(17):60-62关键字：高效液相色谱法,小儿金丹片,橙皮苷,牛蒡苷, 含量测定,Diamonsil C18(2),钻石二代谱图：摘要 目的:建立小儿金丹片中橙皮苷、牛蒡苷的含量测定方法.方法:Diamonsil C(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(45:55);检测波长为284nm;进样量为10μL;柱温为室温;流速为1.0 mL/min.结果:橙皮苷对照品在0.12～1.08μg范围内,进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为99.2%;牛蒡苷对照品在0.16～1.44μg范围内,进样量与峰面积间呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为98.9%.结论:本方法操作简便,结果准确,重现性好,可作为该制剂的含量测定方法.http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/95-5(1).jpg

  • 超高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中灭蝇胺的含量

    超高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中灭蝇胺的含量户江涛（黑龙江省农垦科学院测试化验中心，黑龙江 佳木斯 154007 ）摘要：采用超高效液相色谱-串联质谱法建立了检测果蔬中灭蝇胺含量的分析方法。试样经1%三氯乙酸溶液提取，MCX固相萃取柱净化，灭蝇胺在C18色谱柱上以2 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相，进行液相色谱分离；质谱检测采用电喷雾正离子化模式和多反应监测模式（MRM）。结果表明，灭蝇胺在0.002~0.05 mg/L范围内线性关系良好，相关系数（R）为0.9998，定量限（LOQ）为0.002 mg/kg。在果蔬空白样品添加浓度为0.002、0.05、0.5 mg/kg时，灭蝇胺的平均回收率为86.1%~94.6%，相对标准偏差（RSD）为1.86%~5.18%（n=6）。本方法简便、灵敏、抗干扰，适用于果蔬中灭蝇胺含量检测。关键词：超高效液相色谱-串联质谱；果蔬；灭蝇胺Determination of Cyromazine in Vegetable and Fruit by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometryHU Jiangtao(Testing and Analysis Center of Heilongjiang Academy of Land Reclamation Sciences, Jiamusi 154007,China) Abstract：A method was developed for the determination of Cyromazine in Vegetable and Fruits by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/MS). The sample was extracted by 1% TCA, purified by MCX solid phase extraction cartridge. Cyromazine was separated on a Waters BEH C18 column with gradient elution with the mobile phase of 2 mmol/L NH4 AC +0.1% FA and acetonitrile, and finally detected by positive eletrospray ionization-mass spectrometry(ESI+-MS/MS) in multiple reaction monitoring(MRM) mode. The results showed the linearity of Cyromazine was good in the concentration range of 0.002~0.05 mg/L , and the correlation coefficient was 0.9998. The limit of quantification(LOQ) of Cyromazine was 0.002 mg/kg. At the spiked levels of 0.002、0.05、0.5 mg/kg in the blank of vegetable and fruit, the mean recovery of Cyromazine was 93.1%~95.7%, and the relative standard deviation(RSD) of Furosine was 1.16%~1.71%（n=6）.This method is simple, sensitive, anti-jamming and suitable for simultaneous determination of Cyromazine in vegetable and fruit. Key words: ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC- MS/MS) Cyromazine Vegetable and Fruit 灭蝇胺（Cyromazine）又名环丙氨嗪，分子式为C6H10N6，属于三嗪类强内吸性昆虫生长调节剂，可以抑制双翅目幼虫和蛹成虫羽化，主要用来防治蔬菜、水果和观赏类植物上的美洲斑浅蝇和潜叶蝇等农业害虫。为保障食品安全，我国国家标准《GB 2763-2021 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》中规定了不同种类农产品中灭蝇胺最大残留限量——豇豆等豆类蔬菜（0.5 mg/kg）、黄瓜（1 mg/kg）、叶菜类蔬菜（3-20 mg/kg）、瓜果类水果（除西瓜外，0.5 mg/kg）、鲜食蘑菇（平菇 1 mg/kg，其它7 mg/kg）等。 目前，灭蝇胺的检测方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱法（LC-MS/MS）、量子点荧光探针法等。《NY/T 1725-2009》采用的HPLC法需要用氨基柱，紫外检测器响应相对质谱较低，且容易受基质干扰可能导致定性、定量不够准确；而LC-MS/MS法通过选定目标物的特征离子，MRM模式下能有效去除杂质干扰，使定性、定量更加准确可靠。因此本研究拟建立果蔬中灭蝇胺检测的UPLC-MS/MS法，通过优化前处理方式，使整个分析过程更加[/color]简便、快速、高效，可以作为GB 23200.121等农残检测方法标准的有益补充。 1 实验部分1.1 材料与试剂灭蝇胺（CAS：66215-27-8，农业部环境质量监督检验测试中心（天津））；乙酸铵（色谱纯，天津科密欧公司）；甲酸、乙腈（色谱纯，Fisher公司）；实验用水为Millipore纯水仪制备。 1.2 仪器与设备 Acquity UPLC型超高效液相色谱仪（Waters公司）；XEVO TQ-MS三重四级杆质谱仪（Waters公司）；MCX固相萃取柱（60 mg/3 mL，Waters公司）；匀浆机、涡旋混合器（IKA公司）。 1.3 样品前处理 提取：称取粉碎均匀后的试样5.00g（精确到0.01g）于50 mL聚乙烯离心管中，加入10.0 mL1%三氯乙酸溶液，20000 r/min匀浆1 min，以10000 r/min离心3 min，将上清液转移至25 mL容量瓶中，再加入10.0 mL1%三氯乙酸溶液重复上述操作，合并两次上清液并用1%三氯乙酸溶液定容至25 mL混匀后，准确吸取5.0 mL待净化。 净化：MCX小柱使用前依次用3 mL甲醇、3 mL水活化，然后将待净化液转移至MCX柱中，待提取液全部通过后再分别依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗后挤干，用3 mL 5%氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，再将洗脱液置于50℃水浴中用氮气吹至近干，残留物用1.00 mL2 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液+乙腈（95+5）定容，涡旋混匀后过0.22 um有机系滤膜，供UPLC-MS/MS测定。 1.4 液相色谱及质谱条件 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱：色谱柱:Waters BEH C18（1.7 μm，50mm×2.1mm）；柱温：30℃；流速：0.3mL/min；进样量：2 μL；流动相A：乙腈；流动相B：2 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液。梯度洗脱程序：0~1.0 min，5% A；1.0~3.0 min，5%~100% A；3.0 ~4.0 min，100%A，4.0 ~4.1min，100% A~5% A，4.1 ~5.0min 3% A。 质谱：离子源：电喷雾离子源( ESI + ) ；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测( MRM)；毛细管电压：3.2 kv；离子源温度：150℃；去溶剂气温度：500℃；去溶剂气流量：1000 L /h；定性、定量离子对及碰撞能量见表1。 表1灭蝇胺的质谱参数Table 1 MRM parameters of CyromazineAnalyteCone/VParent ion/(m/z)Daughter ion/(m/z) Collision energy/VCyromazine 25 167 108﹡801919 ﹡quantitative ion 2 结果与讨论 2.1色谱及质谱条件的优化 色谱的选择：灭蝇胺极性强，C18填料色谱柱对其很难保留，可以考虑氨基柱作为分析柱（《NY/T 1725-2009》HPLC法）；但在农残实际检测中，一般都是上百种组分同时分析（除非是专门检测灭蝇胺），得兼顾大多数参数（绝大多数C18柱分离效果很好），因此进行农残多残留分析时还是需要优先选择C18分析柱；虽然灭蝇胺在C18柱上保留时间较短，但液质的优势在于MRM模式可以通过只扫描灭蝇胺特征离子从而避开基质干扰，即使出峰靠前也几乎不会受到干扰（见图2），从农药多残留高通量分析检测角度考虑，选择C18填料色谱柱，流动相为2 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液和乙腈。质谱的选择：灭蝇胺分子量为166.2。将1.0 mg/L 灭蝇胺标准溶液直接注射到质谱中，在正离子模式下分别进行母离子全扫描，发现167离子具有很好的响应，然后分别以167为母离子进行子离子全扫描，得到定性、定量子离子对进行MRM监测，最终确定的质谱条件见表1。2.2 提取试剂的优化灭蝇胺的Pka值为7.5，呈弱碱性，极性非常强，实验中发现参照农产品农残检测常用标准《GB 23200.121-2021 食品安全国家标准 植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱—质谱联用法》的乙腈提取、QuEChERS净化方式前处理，灭蝇胺的回收率只有40%-50%左右，因此该标准没有将灭蝇胺列入；农业行业标准《NY/T 1725-2009 蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》采用0.05 mol/L乙酸铵+乙腈（1+4）提取液，强阳离子交换柱（SCX）净化，该方法加入了一定比例乙酸铵对提高灭蝇胺这类极性强的组分提取效率有一定帮助——该前处理方法灭蝇胺回收率能达到80%以上，但乙酸铵+乙腈溶液组合不能直接过SCX柱，需要旋蒸近干后再加入盐酸溶液进行酸化才能过SPE小柱，导致前处理费时费力费试剂。结合灭蝇胺Pka值，考虑用酸化试剂作为提取液，这样就可以直接过阳离子交换小柱，省去了旋蒸浓缩步骤，可大大提高检测效率。灭蝇胺Pka值为7.5，为保证其在MCX（混合型阳离子交换柱）上有较好的保留，提取液pH值应＜5.5（待测物在小于其Pka值两个单位的溶液环境中99%以上呈离子状态），通过查阅相关资料，发现三氯乙酸能够很好的溶解弱碱性物质，同时还可以沉淀蛋白等大分子，经过试验比对最终选用1%三氯乙酸溶液作为果蔬中灭蝇胺检测的提取溶液，得到了很好的回收率，具体实验结果见表3-5。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410080832317311_1776_1729077_3.png 图1 灭蝇胺标准溶液（0.01 mg/L）MRM色谱图 Fig.1 MRM chromatograms of Cyromazine standard solution at 0.01 mg/L https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410080832319119_7226_1729077_3.png 图2黄瓜样品中灭蝇胺MRM色谱图 Fig.2 MRM chromatograms of Cyromazine in Cucumber 2.3线性范围和定量限 吸取不同体积的灭蝇胺标准储备液，用初始流动相分别配置0.002、0.005、0.01、0.02、0.05 mg/L的灭蝇胺上机标准溶液，以各自定量离子的峰面积为Y对应质量浓度X（mg/L）做标准曲线，得到的线性方程和相关系数见表2。结果表明，灭蝇胺标准溶液在0.002~0.05 mg/L浓度范围内线性良好，相关系数R为0.9998。以10倍信噪比（S/N）计算，该方法灭蝇胺的定量限（LOQ）为0.002 mg/kg。 表2 灭蝇胺标准溶液的线性方程、相关系数和定量限（LOQ） Table 2 Linear equation, correlation and LOQ of Cyromazine in standard solutionsAnalyteLinear range/(mg/L)Linear equationRLOQ/(mg/ kg)[/align]Cyromazine 0.002~0.05Y=6786.7X+33.8070.99980.002 2.4回收率和精密度 分别称取不含灭蝇胺的黄瓜、菜豆、苹果空白试样各5.00 g，添加0.002、0.05、0.5 mg/kg水平的灭蝇胺标样，每个水平重复6次，按照1.3前处理方法处理后上机检测，回收率计算结果见表3-5。从表3-5可以看出，灭蝇胺的平均回收率为86.1%~94.6%，相对标准偏差（RSD，n=6）为1.86%~5.18%。 表3 黄瓜中灭蝇胺的加标回收率和相对标准偏差（n=6）Table 3 Recoveries and relative standard deviations（RSD）of Cyromazine in Cucumber（n=6） Analyte[/size]Spiked level(mg/kg)Recovery/%RSD/% Cyromazine 0.0020.050.5 86.192.390.7 3.372.662.13 表4 菜豆中灭蝇胺的加标回收率和相对标准偏差（n=6）Table 4 Recoveries and relative standard deviations（RSD）of Cyromazine in Kidney bean（n=6） AnalyteSpiked level(mg/kg)Recovery/%RSD/% Cyromazine0.0020.050.5 93.091.994.6 5.182.763.01表5 苹果中灭蝇胺的加标回收率和相对标准偏差（n=6）Table 5 Recoveries and relative standard deviations（RSD）of Cyromazine in Apple（n=6） AnalyteSpiked level(mg/kg)Recovery/%RSD/% Cyromazine 0.0020.050.5 87.993.793.3 3.604.391.[/size]86 2.5 讨论 灭蝇胺作为一种昆虫生长调节剂，相比一些传统农药对人体、环境安全性要高不少，因此被广泛使用，但随之带来的药物残留等问题也日趋严重，因此灭蝇胺已被列入农产品例行监测农残必检参数。鉴于每次监测农残参数有近百种，且样品数量也很大，不大可能将灭蝇胺作为特殊参数单独进行样品前处理，在大批量样品农残筛查实际工作中，还是采用GB 23200.121 乙腈提取、QuEChERS净化的方式前处理（该方法灭蝇胺回收率基本能稳定在40%-50%），若在筛查时发现有灭蝇胺含量大于等于其在GB 2763各类果蔬中限量值的四分之一的情况，则需要用本研究方法确认得到准确含量，低于限量值四分之一时一般直接折算45%回收率作为最终样品中灭蝇胺的含量值。 3 结语 本文建立了超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定果蔬中灭蝇胺含量的分析方法。该方法灵敏度高，灭蝇胺定量限（LOQ）达到0.002 mg/kg，其灵敏度能满足GB 2763各类果蔬中灭蝇胺限量要求。同时该方法具有较高的准确度和精密度，前处理步骤简单，分析速度快，可以作为GB 23200.121等农残检测方法标准的有益补充。 GB 23200.121-2021 食品安全国家标准 植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱—质谱联用法 NY/T 1725-2009 蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法 李维,孙俏俏. QuEChERS-LC-MS/MS法检测豇豆中的灭蝇胺残留量. 山东化工,2021 ,50 (20):81-83 谭华东,赵淑巧,武春媛. CdSe/CdS量子点荧光探针测定蔬菜中灭蝇胺的残留量. 分析测试学报 . 2019 ,38 (10): 1207-1212 李莉,刘苗苗,丁宗博,等. 液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中的灭蝇胺. 食品安全导刊,2021 (20):84-85 代艳娜,刘青海,蒲继锋,等. 超高效液相色谱-串联质谱法检测芹菜和土壤中灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺残留. 食品安全质量检测学报 . 2020 ,11 (15): 5020-5026 刘兰,周培华,汤春甫,等. 分散固相萃取高效液相色谱法测定蔬菜中灭蝇胺残留. 湖南农业科学, 2022 (11): 78-83

  • 【原创大赛】【第四届原创】牛奶和奶粉中的保泰松残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

    液相色谱-串联质谱法检测牛奶和奶粉中保泰松残留量方法的研究摘 要 建立一种测定牛奶和奶粉中保泰松残留的液相色谱-串联质谱法测定方法。用乙醇、氨水提取，乙醚、石油醚分离脂肪，酸化四氢呋喃-正己烷萃取，流动相定容、外标法定量。回收率86.0％～96.1％，室内四个水平相对标准偏差均在10.63%以内，重复性相对标准偏差（RSDr）在3.34%～3.99%之间，再现性相对标准偏差（RSDR）在6.96%～10.34%之间。在0.03 ng～6 ng范围内均呈线性关系，检出限（LOD）为1.0 μg/kg。 方法准确、简便，可以应用于牛奶和奶粉中保泰松残留量的测定。保泰松（Phenylbutazone），又名苯丁唑啉、4-丁基-1，2-二苯基-3，5-吡咯烷二酮、布他酮、布他唑立丁、布泰其安。化学名称：3，5-Pyrazolidinedione，苯基丁氮酮，为吡唑酮类衍生物。RTECS编号：UQ8225000，CAS登记号：50-33-9。分子式：C19H20N2O2，分子量308．41。白色或类白色结晶性粉末，易溶于丙酮；氯仿或苯，溶于乙醇或乙醚，几乎不溶于水，溶于氢氧化钠溶液。无臭，味略苦。具有解热镇痛、抗炎及抗风湿作用，主要用于治疗风湿性，类风湿性关节炎及痛风。由于抗炎抗风湿作用强，曾广泛用于人类的治疗。但代谢产物(Oxyphenbutazone)有不良反应，引起肝炎、中毒甚至致死等。在兽药和饲料添加剂中使用，不可避免地造成动物产品中该药物的残留。因此，建立一种与世界发达国家同一水平的牛奶和奶粉中保泰松残留检测方法，对提高我国食品安全与卫生质量、保护国民的健康、促进动物产品出口是十分必要的。目前检验方法主要有HPLC法、气相色谱法、紫外法毛细管电泳法和电化学检测方法。文献报道的测定保泰松分析方法多应用于药品中和畜禽中，未检索到可应用于牛奶和奶粉中保泰松残留量的资料。本文主要参考AOAC建立的分析方法，重新优化了提取体系和测定条件，建立了碱性去除脂肪、酸性条件下提取牛奶和奶粉中的保泰松、液相色谱-串联质谱法检测、外标方法定量测定保泰松的新方法。1 试验部分1.1 主要仪器与试剂1.1.1 仪器美国应用生物系统公司AB 3200 Q TRAP液相色谱-串联质谱仪（配有电喷雾离子源），天平（感量0.01 g，0.000 1 g），漩涡混合器，氮气浓缩仪，10 mL具塞聚丙烯离心管，离心机（2600 g），超声波清洗仪，振荡器。1.1.2 试剂除另有说明外，所用试剂均为AR级。水：GB/T 6682，一级。甲醇，乙醇，乙醚，石油醚，乙酸乙酯，盐酸，甲酸铵。氨水，CP。四氢呋喃，正己烷，乙腈，HPLC级。二硫苏糖醇（dithiothreitol。CAS：3483-12-3）：C4H10O2S2，纯度≥99%。N，N-二甲基甲酰胺（CAS：68-12-2，含量99.5%）。稳定液：0.25 mg/mL二硫苏糖醇-乙酸乙酯溶液（125mg二硫苏糖醇（DL-dithiothreitol）溶于乙酸乙脂并定容至500ml）。0.05 mol/L醋酸铵（1.95g醋酸铵溶于500ml水中，过0.2μm的水相滤膜。使用前过滤）。保泰松标准储备溶液：称取适量保泰松标准物质（CAS：50-33-9，纯度≥95%），用80 mL甲醇溶解，加入5mL稳定液，用甲醇定容于100 mL容量瓶中。同时，根据不同测定需要，稀释适当浓度的保泰松标准应用溶液。1.2 仪器工作条件2.1 试验方法2.1.1 样品分析牛奶：称取1 g试样，精确至0.01 g，置于10 mL具塞聚丙烯离心管中，加入1.0 mL乙醇混匀；加入0.1 mL氨水，混匀；加入2.5 mL乙醚，于漩涡混合器混匀20 s，静置5 min；加入2.5 mL石油醚，于漩涡混合器混匀20 s，静置5 min。小心吸弃上清液

  • 【原创大赛】液相色谱法测定乳制品中苯甲酸含量

    液相色谱法测定乳制品中苯甲酸含量摘要： 使用液相色谱仪检测乳制品中苯甲酸防腐剂含量。关键词：乳制品；液相色谱；苯甲酸；防腐剂参考文献：GB 21703-2010苯甲酸是食品工业中常见的一种防腐保鲜剂，但乳制品中是禁止添加的。一般情况下，苯甲酸被认为是安全的，但对包括婴幼儿在内的一些敏感人群而言，长期摄入苯甲酸也可能带来哮喘、荨麻疹、代谢性酸中毒、抽搐等不良反应。实验部分1试验材料、仪器及试剂1 样品：新疆奶牛基地生鲜乳2 仪器：液相色谱仪-Waters 2695配紫外检测器；天平（0.01g）（奥豪斯（上海）有限公司）；3试剂：氢氧化钠、浓硫酸、亚铁氰化钾、乙酸锌（分析纯，天津盛奥化学试剂厂）；甲醇（色谱纯，Therm Fisher）2 标准品配制：苯甲酸标准贮备液：500mg/L；标准工作液：10mg/L。3 样品前处理 称取乳制品液体试样20g±0.01置于100mL的容量瓶中，加入25mLNaOH(0.1mol/L)，混匀振荡15min，用H2SO4（0.5mol/L）调节pH≈8，再加入2mL亚铁氰化钾(0.25mol/L)和2mL乙酸锌（1mol/L），混匀振摇，静置后用甲醇-水（v/v=1/1）定容至100mL，上清液过0.45μm滤膜过滤后装进样瓶待测。4 仪器条件色谱柱：C18柱（Waters）；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲溶液=1:9；流速：10mL/min；检测波长：227nm；进样量：10uL。5 结果与分析 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/07/201407071107_505678_1634341_3.bmp[

  • 36.1 高效液相色谱法测定化痰平喘片中黄芩苷的含量

    36.1 高效液相色谱法测定化痰平喘片中黄芩苷的含量

    【作者】 赵志刚； 刘晓丽；【机构】 辽宁省朝阳市药品检验所；【摘要】 目的建立高效液相色谱法测定化痰平喘片中黄芩苷的含量测定方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(32∶68∶0.2);检测波长:280 nm;流速:1.0 mL.min-1;柱温:室温。结果回归方程为Y=1.142×105X+4.629×105,r=0.999 8(n=6),进样量在0.40~2.4μg有良好的线性关系,平均回收率为100.13%±0.68%。结论本方法简便、准确、重现性好,适于化痰平喘片的质量控制。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061149_381785_2379123_3.jpg

  • 高效液相色谱_串联质谱法同时测定动物源性食品中全氟辛烷磺酸和全氟辛酸含量

    目的 建立一种同时测定动物源性食品中全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)和全氟辛酸(perfluorooctanoic acid, PFOA)含量的高效液相色谱-串联质谱法的分析方法。方法 从前处理过程和色谱条件两个方面进行优化，在不使用价格昂贵的同位素内标的情况下提取样品，流动相为0.05%甲酸-5mmol/L 甲酸铵水溶液和甲醇,采用多反应监测模式进行分析检测，外标法定量。 结果 PFOS 和 PFOA含量在0.1~60.0ng/mL范围内线性良好，相关系数均大于0.997,PFOS 和PFOA定量限分别为0.1μg/kg、0.01μg/kg,样品加标回收率在 85%~110%之间，相对标准偏差均小于10%。该方法适用于检测国家认监委组织的CNCA-23-03(2023)能力验证样品，能力验证结果为满意。结论本方法前处理简单，且不使用价格昂贵的同位素内标，回收率高，精密度好，色谱峰分离效果佳，适用于动物源性食品中PFOS 和PFOA 的检测。

  • 液相色谱含量测定

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]含量测定中测的值为98%，实际含量为96%，一个称量0.1g，稀释100倍，一个称量0.01g稀释10倍，结果前者测得含量98，后者测得含量97，这个是什么原因

  • 65.7 高效液相色谱法测定心可宁胶囊中原儿茶醛含量

    65.7 高效液相色谱法测定心可宁胶囊中原儿茶醛含量

    【作者】 骆红梅； 童红； 何斌；【机构】 贵阳中医学院第二附属医院药剂科； 贵州省药品检验所； 贵州得轩堂制药有限公司 贵州贵阳550001； 贵州贵阳550004； 贵州贵阳550008；【摘要】 目的建立高效液相色谱(HPLC)法以测定心可宁胶囊中原儿茶醛的含量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(磷酸调节pH值至3.0)-甲醇(80∶20)为流动相,流速1mL/min,检测波长280nm。结果心可宁胶囊中原儿茶醛线性范围为0.051～0.459μg(r=0.99985),平均回收率为98.27%,RSD为0.85%。结论HPLC法简单,操作方便,重现性好,阴性无干扰,能有效地控制药品质量。 更多还原【关键词】 心可宁胶囊； 原儿茶醛； 高效液相色谱法； 含量测定； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271638_386521_2352694_3.jpg

  • 【分享】饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152821]饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法[/url]摘要建立了超高效液相色谱一串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取，提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化，使用u．PLC—MS／M进行检测。色谱条件：ACQUITY uPLC M BEH C】8柱(2．1 innl×100 rain i．d．，1．7 )，流动相乙腈0．1％甲酸溶液，梯度洗脱流速O．3 mL／min。采用电喷雾串联四极杆质谱检测。结果表明，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng／mL时线形良好，在1～100 g／kg的添加水平条件下平均回收率为68．5％ ～91．6％ ，该方法的检测限为1．0／zg,／kg。

  • 64.1 高效液相色谱法测定阿魏酸川芎嗪口崩片的含量

    64.1 高效液相色谱法测定阿魏酸川芎嗪口崩片的含量

    【作者】 吕洁； 孟祥军； 郭妍；【Author】 Lu Jie1,Meng Xiangjun2,Guo Yan1 (1.Vocational College,Liaoning University of TCM,Shenyang,Liaoning,China 110101; 2. Shenyang Medical College,Shenyang,Liaoning,China 110034)【机构】 辽宁中医药大学职业技术学院； 沈阳医学院；【摘要】 目的建立用高效液相色谱法测定阿魏酸川芎嗪口崩片含量的方法。方法色谱柱为Diamonsil-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以用三乙胺调节pH=7.6的0.02mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(320∶60)为流动相,检测波长320nm,流速1.0mL/min,外标法定量。结果阿魏酸川芎嗪分离完全,进样量在6.4～9.6μg范围内线性关系良好。阿魏酸线性回归方程为Y=6162969.58X-7471917.60,r=1.000;川芎嗪线性回归方程为Y=4237015.65X-3057438.64,r=1.000。阿魏酸平均回收率为99.4%,RSD=1.76%(n=9);川芎嗪平均回收率为98.9%,RSD=2.38%(n=9)。结论该方法快捷、简便、准确,可作为阿魏酸川芎嗪口崩片的含量测定方法。 更多还原【Abstract】 Objective To establish a method for determining Ligustrazine Ferulate Orally Disintegrating Tablet by HPLC.Methods Diamonsil- C18 column(250 mm× 4.6 mm,5 μ m)was used.Acetonitrile- 0.02 mol/L potassium dihydrogen phosphate( 60 ∶ 320,with triethylamineto adjusting pH=7.6) was the mobile phase and the detection wavelength was 320 nm.Results A good linearity was obtained in the range of 6.4- 9.6 μ g for ferulic acid.The linear equation was Y=6 162 969.58X- 7 471 917.60,r=1.000 for ligustrazine feru... 更多还原【关键词】 阿魏酸川芎嗪； 口崩片； 高效液相色谱法； 【Key words】 Ligustrazine Ferulate； orally disintegrating tablet； HPLC； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271541_386436_2352694_3.jpg

  • 62.4 反相高效液相色谱法测定氟康唑搽剂中氟康唑含量

    62.4 反相高效液相色谱法测定氟康唑搽剂中氟康唑含量

    作者：霍玉; 马克勤;（山东省潍坊市药品检验所; 山东省潍坊市人民医院;）摘要：目的建立测定氟康唑搽剂含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(pH=7.0)-甲醇(55∶45),检测波长为261nm。结果氟康唑进样量的线性范围为1.2～6.0μg,平均回收率为99.73%,RSD=0.30%(n=6)。结论该法简便、准确、重现性好,可用于氟康唑搽剂的含量测定。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271031_386311_1606903_3.jpg

  • 超高效液相色谱_串联质谱法测定注射用头孢曲松钠中2_巯基苯并噻唑的含量

    建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定注射用头孢曲松钠中2-巯基苯并噻唑(MBT)基因毒性杂质含量。样品经甲醇提取，50%(V/V)乙腈稀释后，采用ACQUITY UPLC HSS T色谱柱(2.1mmx100 mm，1.8μm)分离，乙腈-0.05%(V/V)乙酸(80:20，V/V)为流动相，电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)负离子模式扫描，外标法定量。MBT在0.11~10.92ng/mL范围内线性关系良好(r2=0.9989)，检出限为0.03ng/mL,定量限为0.08ng/mL,平均回收率为96.8%，相对标准偏差(RSD)不大于3.5%。采用该方法检测抽检的14个厂家63批次样品中MBT杂质含量，59批次样品中有MBT检出。该方法适用于注射用头孢曲松钠中MBT的定性和定量分析。

  • 【欢迎讨论】高效液相色谱法测定穿心莲片中内酯的含量

    【欢迎讨论】高效液相色谱法测定穿心莲片中内酯的含量

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008231346_238218_2134598_3.jpg穿心莲片是由穿心莲加工精制而成的中药单味方剂，具有清热解毒，凉血消肿之功效。用于邪毒内盛，感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤等症。中国药典（2010版）新增了该药品名录，并对其做了详细阐述。本文应用RIGOL L-3000高效液相色谱系统，采用药典规定的方法测定了穿心莲片中内酯的含量。实验证明L-3000高效液相色谱系统全面满足药典方法及系统适应性的要求，分析结果准确可靠。完整应用文档，请点击如下链接下载：===========点击打开链接===========针对大家所关心的问题，RIGOL应用中心会持续为大家开展分析http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif==========================================================部分谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008231344_238214_2134598_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/08/201008231344_238215_2134598_3.jpg=====================================================================欢迎大家积极讨论哈~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gif

  • 超高效液相色谱-串联质谱法测定奶粉中生物素的含量

    超高效液相色谱-串联质谱法测定奶粉中生物素的含量

    [size=16px]超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定奶粉中生物素的含量[/size][align=center][size=16px]户江涛[/size][/align][align=center][size=16px]（黑龙江省农垦科学院测试化验中心，黑龙江 佳木斯 154007 ）[/size][/align][size=16px]摘要：采用超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法建立了检测奶粉中生物素含量的分析方法，对试样提取、净化条件，流动相、色谱柱和质谱条件进行了优化，结果表明该方法与国标微生物法对同一样品检测得到的生物素含量基本一致，但检测所需时间大大减少，且抗干扰能力、精密度均比微生物法高，特别适和大批量奶粉中生物素含量检测。关键词：超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱；奶粉；生物素生物素又称维生素B7，是生物体内羧基转化酶作用的一种辅酶，在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。人类自身不能合成生物素，需从膳食中获得，而奶粉是人类（特别是婴幼儿）获取生物素的重要途径，准确测定奶粉中生物素含量有重要意义。目前国家标准规定的生物素测定方法《GB 5009.259-2016 食品安全国家标准 食品中生物素的测定》为微生物法。该方法需要购买特定菌种，成本较高，且菌种难保存、易受污染，实验操作复杂、费时费力、技术难度大、对检验人员和实验室要求较高，且容易受到基质干扰、检测结果重复性较差。同时奶粉成分复杂，所含生物素含量极低，一般为十几个微克/100克。因此，制定一种准确、高效、便捷、灵敏度高的生物素测定方法迫在眉睫。基于高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的分离能力和质谱的高灵敏度、高选择性，采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱测定法具有前处理简单、分析速度快，适用的基质范围广、实用性强，可以为奶粉中生物素含量的测定提供一种有效的检测手段。本文建立的超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定奶粉中生物素含量[color=black]的方法前处理过程简便、分析时间短、灵敏度高、抗干扰能力强，特别适用于大批量奶粉样品中生物素[/color]含量的检测。1 实验部分1.1 材料与试剂[color=black]生物素（纯度[/color][font=宋体][color=black]≥[/color][/font][color=black]99%，Sigma公司）；婴儿配方乳粉定量分析质控样品（BQC1051147452，北京普天同创生物科技有限公司）；乙腈、甲酸（色谱纯，Fisher公司）；Prime HLB固相萃取柱（200 mg，3 mL，[/color][font=宋体]Waters[/font][color=black]公司）；0.2 um有机系滤膜；实验用水为Millipore纯水仪制备。[/color]1.2 仪器与设备UPLC XEVO TQ-S超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱仪（Waters公司）；涡旋振荡器。1.3 [color=black]生物素[/color]标准储备液的配置称取一定量生物素[color=black]标准品[/color]，用50%乙醇-水溶液配置成质量浓度为100 ug/mL标准储备液，于2~4℃冰箱保存（有效期1个月），待用；临用前将溶液回温至室温，并吸取一定体积储备液用水逐级稀释成所需浓度的标准工作液。1.4 样品前处理准确称取1.00 g(精确到0.01 g)奶粉试样于50 mL离心管中，加入10.00 mL纯水涡旋混匀2 min，然后加入10.00 mL乙腈，涡旋混匀1 min，然后在离心机中以15000 r/min离心5 min，取出后吸取2 mL上清液置于[color=black]Prime HLB固相萃取柱中，使其自然流出弃去最初几滴，然后用玻璃试管接取流出液约1 mL涡旋混匀，[/color]过0.22[font=宋体]ｕ[/font]m有机系微孔滤膜后供UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析测定。1.5 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]及质谱条件[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]：色谱柱:Waters HSS [font=times new roman]T3（1.8 μm，100mm×2.1mm）；柱温：30℃[/font]；流速：[font=times new roman]0.3 [/font]mL/min；进样量：[font=times new roman]2[/font] [font=times new roman]μL；流动相A：乙腈；流动相B：0.1%的甲酸水溶液。梯度洗脱程序：0~0.5min，10% A；0.5~3. 0 min，10%~100% A；3. 0 ~4. 0 min，100%A，4 ~4.1min，100% A~10% A，4.1 ~5.0min 10% A。[/font]质谱：离子源：电喷雾离子源( ESI [sup]+[/sup] ) ；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测( MRM)；毛细管电压：3.2 kv；离子源温度：150℃；去溶剂气温度：500℃；去溶剂气流量：1000 L /h；定性、定量离子对及碰撞能量见表1。[/size][align=center][size=16px]表1生物素的质谱参数[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=16px]分析物[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]锥孔电压/V[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]母离子/(m/z)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]子离子/(m/z) [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]碰撞能量/V[/size][/align][/td][/tr][tr][td][size=16px]生物素[/size][/td][td][align=center][size=16px]30[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]245[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]227﹡[/size][/align][align=center][size=16px]97[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]13[/size][/align][align=center][size=16px]25[/size][/align][size=16px][/size][/td][/tr][/table][size=16px]﹡为定量离子2 结果与讨论2.1 色谱质谱条件及前处理过程的优化流动相的选择：对比了酸性体系（0.1%甲酸水溶液）与甲醇、乙腈的流动相体系组合，结果发现生物素在乙腈体系中响应值比甲醇更好一些，故本研究采用0.1%甲酸水溶液+甲醇流动相体系。色谱柱的选择：比较了[font=宋体]Waters [/font]BEH C[sub]18[/sub]（1.7 μm，50mm×2.1mm）和[font=宋体]Waters [/font]HSS T[sub]3[/sub]（1.8 μm，100mm×2.1mm）两种不同填料的分析柱，实验时发现目标物在这两款色谱柱上响应值差不多，但目标物在BEH C[sub]18[/sub]上保留时间比HSS T[sub]3[/sub]要短，考虑到生物素本身属于水溶性维生素，极性较强，若出峰太早可能造成奶粉中一些极性强的基质随目标物一起共流出进而干扰目标物测定，因此本方法采用了HSS T[sub]3[/sub]色谱柱。质谱参数优化：将1.0 mg/L 生物素标准溶液直接注射到质谱中，在正离子模式下进行母离子全扫描，发现目标物各自对应的准分子离子峰[M+H][sup]+[/sup]具有很好的响应，然后在分别进行子离子全扫描，各得到两对丰度高、干扰小的子离子对进行MRM监测，最终确定的质谱条件见表1，相应的色谱质谱图见图1、图2。前处理过程优化：生物素属于水溶性维生素，用纯水作为提取试剂可以得到很好的提取效果。但实验过程中发现，用纯水将奶粉溶解后整个溶液呈乳白色，只通过离心方式很难去除其中大量的蛋白、脂肪等杂质，需要对提取液进行除蛋白操作。通过考察乙酸铅、三氯乙酸、乙腈等几种常用的沉淀蛋白方法，综合考虑在去除蛋白的同时要尽可能减少其它杂质的引入，因此本方法采用乙腈除蛋白的方式，比较了几种不同水/乙腈比例，最终选定水/乙腈（1:1体积比）达到最优的实验效果。对于脂肪的去除则选用了目前较流行的[color=black]Prime HLB固相萃取柱通过式方法，即提取液通过Prime HLB时脂肪等大分子保留在SPE小柱上，目标物不保留以达到去除脂肪等杂质的目的，[/color]综合以上因素本实验最终采用了1.4的前处理方法。[/size][align=center][size=16px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210071506558084_124_1729077_3.jpg[/img][/size][/align][align=center][size=16px]图1 [color=black]生物素[/color]标准溶液（10 ng/mL）MRM色谱图[/size][/align][size=16px][/size][align=center][size=16px][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210071506561980_1283_1729077_3.jpg[/img][/size][/align][align=center][size=16px]图2 奶粉样品中[color=black]生物素[/color]MRM色谱图[/size][/align][size=16px][color=black]2.2 线性范围和定量限[/color][color=black]吸取不同体积的生物素标准储备液（1.3），用[/color]纯水[color=black]分别配置不同浓度的[/color]上机标准溶液，以各自定量离子的峰面积（或与内标峰面积比值）为Y对应质量浓度X（[color=black]m[/color]g/L）做标准曲线，得到的线性方程和相关系数见表2；以10倍信噪比（S/N）计算得到生物素的定量下限，结果见表2。表2 生物素标准溶液的线性方程、相关系数和定量下限（LOQ）[/size][table][tr][td][align=center][size=16px]分析物[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]线性范围/(ng/mL)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]线性方程[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]R[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]LOQ/(ug/100g)[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]生物素[sub] [/sub][/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.2~50[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]Y=3078.1X-106.32[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]0.9993[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]0.5[/size][/align][/td][/tr][/table][size=16px][color=black]2.3回收率和精密度[/color][color=black]生物素在奶粉中天然存在[/color]，选取已知生物素含量的奶粉作为基质进行加标。具体添加水平为：[color=black]0.5，5，50[/color] ug/100g。[color=black]每个[/color]水平重复6次，[color=black]同时做该奶粉的本底实验。[/color]按照1.4前处理方法处理后上机检测，回收率计算结果（扣除空白后）见表3。结果表明，该方法生物素的平均回收率为87.2%~110%，相对标准偏差（RSD，n=6）为2.3%~5.2%，均满足实验要求。[/size][align=center][size=16px]表3 奶粉生物素的加标回收率和相对标准偏差（n=6）[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=16px]分析物[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]添加水平(ug/100g)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]回收率/%[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]相对标准偏差/%[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]生物素[/size][/align][size=16px][sub] [/sub][/size][/td][td][align=center][size=16px]0.5[/size][/align][align=center][size=16px]5[/size][/align][align=center][size=16px]50[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]86.8[/size][/align][align=center][size=16px]93.2[/size][/align][align=center][size=16px]91.6[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][align=center][size=16px]4.6[/size][/align][align=center][size=16px]3.3[/size][/align][align=center][size=16px]2.1[/size][/align][size=16px][/size][/td][/tr][/table][size=16px][color=black]2.4实际样品分析[/color][color=black]为进一步验证该方法的准确性，采用本方法和《[/color]GB 5009.259-2016[color=black]》微生物法同时对北京普天同创生物科技有限公司的奶粉质控样品BQC1051147452生物素含量进行检测，结果见表4[/color]。由表4可知，UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法测定结果与国标方法的结果基本一致，无显著性差异，但前者所需时间更短，精密度更好。[/size][align=center][size=16px]表4 奶粉质控样品[color=black]BQC1051147452[/color]生物素的测定结果[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=16px]检测方法[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]特性值区间(ug/100g)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]测定平均值（n=6）[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]相对标准偏差/%（n=6）[/size][/align][/td][/tr][tr][td][size=16px]UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法微生物法[sub] [/sub][/size][/td][td][align=center][size=16px]15.6~22.4[/size][/align][align=center][size=16px]15.6~22.4[/size][/align][size=16px][/size][/td][td][size=16px]18.718.1[/size][/td][td][align=center][size=16px]2.5[/size][/align][size=16px] 4.6[/size][/td][/tr][/table][size=16px]3 结语本文建立了超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法（UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS）测定奶粉中[color=black]生物素[/color]含量的分析方法。该方法具有较高的灵敏度、准确度和精密度，前处理步骤简单，分析速度快，特别适合大批量样品的检测。参考文献：[1] GB 5009.259-2016 食品安全国家标准 食品中生物素的测定.[2] 薛霞, 赵慧男, 魏莉莉, 等. 超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定蜂蜜中五种水溶性维生素的含量[J]. 食品与发酵工业. 2021,47(12) : 250-256.[3] 李佳兴, 周利, 金艳, 等. 超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法测定枸杞子中8种水溶性维生素[J]. 食品科技. 2018,43(11) : 336-341.[/size]

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