水体叶绿素藻类荧光测定仪

地表水体的富营养化引起藻类及其它浮游生物迅速繁殖，导致溶解氧下降，水质恶化，鱼类和其它生物大量死亡，甚至引发供水危机。色素是藻类光合作用时吸收、转化和传递光能的主要物质，叶绿素以多种形式存在于藻类植物中，大约占有机物干重的1-2%，是估算其生物量的重要指标，快速准确测定水体中叶绿素a浓度对于评价水体营养状态和水质管理具有重要意义。 叶绿素测定方法有很多，大致分为萃取测定、荧光活体测定及水华遥感监测。萃取分析利用有机溶剂萃取植物细胞叶绿素进行光谱光度测定，根据分析技术的不同分为分光光度法、荧光法和高效液相色谱法。萃取分析只要操作准确，提取完全，可以得到准确和重复性好的结果，但是过程繁琐，不方便用于连续监测。 AOA在线藻类分析仪利用叶绿素荧光特性进行分类定量分析，活体测量，无需样品预处理，仪器操作简单，可以快速地获得大量叶绿素数据，广泛运用在在线监测。为保证在线分析仪的有效运行，需要用标准样品来校准、性能考核和日常数据质量控制，但国内还未开发叶绿素的标准样品和质控样品，已知叶绿素含量（用萃取方法测定）的浮游植物悬浮液被认为是最好的标样替代品。当水体发生水华，生物多样性下降，往往是一种藻类成为绝对优势，可作为纯种藻类标准样品，本文将几个代表性的比对实验整理分析，探讨误差原因。[b]1.比对方法[/b]1.1清洗AOA在线藻类分析仪蠕动泵、测量室及其底盖，检查纯水透光率值。1.2水样不经任何处理，测量叶绿素浓度值。1.3剩余水样酌量加入1%碳酸镁悬浊液(按1升水量加入1ml)，防止酸化。1.4带回实验室，尽快分析，实验室分析方法依据《无水乙醇热浴超声法测定淡水中的叶绿素a》[sup][/sup]。[b]2实验2.1微囊藻水样2.1.1样品来源[/b] 2014年8-10月某水库出现铜绿微囊藻水华，采集水华“浓密”处水样作为标准储备液，分别取0、2、5、10、15、20、25、50、100ml，用纯水稀释成500ml，检查两种方法叶绿素a和藻密度线性。取水库水华严重区、进水口、湖心和出水口四个水样，做实际水样比对分析。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011537059882_3331_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img][b]2.1.2实验结果[img=,690,361]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011538312332_220_3247383_3.png!w690x361.jpg[/img][/b]表1微囊藻稀释水样比对结果[b][img=,622,352]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011539397062_938_3247383_3.png!w622x352.jpg[/img][/b]图2微囊藻水样线性比对[img=,690,215]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011611492722_7678_3247383_3.png!w690x215.jpg[/img]表2含微囊藻实际水样比对表1、表2和图2表明，两种测量方法的结果与藻类数量之间存在非常显著的相关性，但AOA在线分析仪测量结果低于分光光度法，浓度越高，差异性越大。[b]2.1.3结果分析[/b]2.1.3.1分光光度法误差分析 萃取后叶绿素，对光照和氧气很敏感，极易造成不可逆的分解，因此，节时高效是分光光度法的质量保证，而温度是质控措施的关键。在超声波萃取过程，提高温度加快叶绿素溶出速度，同时，叶绿素降解的速度也是加快的，最佳超声波萃取条件：60℃萃取25分钟，2小时内完成测定。另外，实验室遮光也是必要。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011541253150_3659_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img]2.1.3.2AOA荧光法误差来源 AOA在线藻类分析仪原理：叶绿素具有荧光特性，一定的激励光，任何一种藻产生的荧光强度与其所含叶绿素a成正比，几种不同藻混合体产生的荧光强度等于各自荧光的总和。采用325纳米、450纳米、525纳米、570纳米、590纳米和610纳米作为激励光,其中325纳米是用来补偿黄色物质（有机物），测定685nm的光强，计算总叶绿素a值和不同藻的浓度。（1）水样原始性状发生变化暗室环境下，激励光照到藻上，能量分成三部分：光合作用、叶绿素自发荧光和热能辐射。如果藻的活性强，光合作用消耗的能量就越多，产生荧光的强度越小，反之，如果藻的活性弱，荧光强度就强。荧光能量和光合作用的能量是相互竞争的，叶绿素荧光常常被认为光合作用无效指标的依据。比对实验的样品，从采样经实验室样品处理，到水质自动监测站仪器分析，剩余样品送回实验室做分光光度法比对，再紧凑也需要3-4天完成，运输、保存过程，叶绿素在活体内也和其它物质处于不断更新变化中，可能衰老、也可能分解破坏，比对实验要求的同步水平也不可能实现，这是比对误差不可忽视的部分。（2）微囊藻特殊的细胞结构使水样分布不均匀微囊藻群体有胶鞘和伪空泡，可以自由漂浮在水中，水样在实验室静置一天后，出现明显的分层，测量过程难以保证均匀分布。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011542423667_4598_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img]（3）工作温度与校准温度不一致参考各类荧光法仪器说明书，浮游生物悬浊液的荧光反应受温度的影响很大，有些仪器的温度补偿2%⁄ ℃,但这种经验补偿不能保证准确的现场测量，因为每一种浮游植物的荧光强度随温度变化程度不同。这台AOA藻类分析仪安装测试在冬季，这次比对实验在9月份进行，温差亦有影响。（4）浊度的影响 实验室分光光度法经过0.8um滤纸过滤，比色扣除750nm吸光度值，只要操作正确，浊度的影响很小。水中的悬浮颗粒物对激励光和产生的荧光有反射、散射和阻挡的作用，造成激励光和荧光产量的下降，YSI3026传感器检测结果：1NTU的 浊度影响大约是0.03ug/L叶绿素。 除色素以外的细胞结构（细胞壁、胶被、储藏物质）以溶解有机碳为主要成分，对紫外光和蓝光具有强烈的吸收，也可视为影响测定的悬浮物，AOA在线藻类分析仪称之为黄色物质，用325纳米补偿。铜绿微囊藻细胞壁分为两层，内层是纤维素，外有胶鞘，有相当的厚度，互相溶合形成多细胞群体。图5显示黄色物质与叶绿素含量相关，AOA的测量结果反映了铜绿微囊藻细胞群体特征。分光光度法和AOA扣除浊度方法各有不同，是否有可比性，有待进一步了解。[img=,586,305]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011543564741_5446_3247383_3.png!w586x305.jpg[/img]图5（5）水样镜检微囊藻绝对优势，视野内不见其它藻类，AOA分析结果有少量绿藻、硅藻，其它的比对实验也出现藻类识别错误。[b]2.2薄甲藻水样[img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011545089042_4958_3247383_3.jpg!w690x920.jpg[/img][/b]图6[b]2.2.1实验结果[/b][img=,690,289]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011547036798_1735_3247383_3.png!w690x289.jpg[/img]表3薄甲藻水样比对结果2.2.2结果分析2.2.2.1镜检视野内为单一薄甲藻，与AOA定性结果相差较大。从图7可知，绿藻和硅甲藻的光谱图很相似，从光谱图识别绿藻和硅甲藻是困难的，AOA的藻类分类和藻密度估量值仅能作为参考，要将监测数据做水体生态评估的依据，必须结合实验室镜检和萃取分析方法。[img=,690,496]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011547417547_4700_3247383_3.png!w690x496.jpg[/img]图72.2.2.2薄甲藻AOA测量值约为光度法的1/3，薄甲藻有鞭毛，可以自由游动，离开有利的生活条件则很快失去活性，沉入水底不再活动，且细胞内容物溶出。不能保证水样原始性状，是叶绿素a比对测定误差的主要来源。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011548482013_3683_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img][color=#423B3B]2.2.2[/color][color=#423B3B].3[/color][color=#423B3B]薄甲藻细胞内容物溶出后，显微镜照片清楚看到细胞壁很薄，AOA测量结果印证黄色物质影响极小。[/color][b]2.3小球藻[img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011550015246_3694_3247383_3.jpg!w690x920.jpg[/img]图9 小球藻[/b]垃圾渗滤液水样，实验室放置几周，变绿，镜检结果：小球藻绝对优势，少量硅藻。[b]2.3.1实验结果[/b][img=,690,367]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011551332128_4472_3247383_3.png!w690x367.jpg[/img]表4小球藻水样比对[b]2.3.2结果分析[img=,537,303]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011552368052_2948_3247383_3.png!w537x303.jpg[/img][/b]图10小球藻水样线性分析2.3.2.1藻类分类与实验室镜检结果基本吻合；2.3.2.2低浓度出现少量蓝藻，因为仪器刚做完微囊藻样品，检测室可能有少量残留，比对实验之前彻底清洗检测室很有必要；2.3.2.3分光光度法相关系数小于AOA，并非方法不可行，而是叶绿素萃取太依赖分析人员的操作，稍有疏忽就会造成萃取损失，相比之下仪器要稳定可靠些。2.3.2.4小球藻叶绿素a测量结果AOA/分光光度法比值0.7-1.5，高于铜绿微囊藻和薄甲藻。两种方法测量结果比较接近的原因是因为小球藻不会运动，活体样品保持比较稳定的悬浮液状态，而AOA测量结果高于分光光度法的误差，一方面来自叶绿素和藻密度系数的确定，一方面来自萃取的损失。[img=,601,407]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011554177672_7731_3247383_3.png!w601x407.jpg[/img]图11AOA仪器校正界面 荧光测定仪校准即确定叶绿素和藻密度相关系数，可以给活体叶绿素传感器提供的最好标准物是浮游植物悬浮液，此悬浮液亦有部分用萃取方法测定叶绿素含量，并且应该从监测地点获得，这样的标准物质产生的荧光可以尽可能接近现场的生物体。荧光测定同时受浊度、温度、细胞活性、不同藻的种类、大小、形状、和叶绿素种类的影响，这些都大大限制活体测量的准确度。2.4不同水体样品分析[img=,690,267]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011555277271_2806_3247383_3.png!w690x267.jpg[/img]表5不同水体样品分析2.4.1与单一藻类样品结果一致，绿藻含量高的水样AOA测量值偏高，微囊藻水样上浮分层、甲藻和裸藻活性降低下沉造成水样不均匀分布，是比对结果偏低的一个因素。而在线监测时，水样中的藻类足够鲜活，吻合度会好些。2.4.2按照AOA提供的分类方法（图12），绿藻和蓝藻分类结果与镜检匹配，单一种类薄甲藻检测结果显示为绿藻、隐藻、蓝藻、极少量甲藻，镜检中数量可观的硅藻、裸藻在AOA测量结果中未见。[img=,600,350]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011602453540_1118_3247383_3.jpg!w600x350.jpg[/img]图122.4.3水库水质良好，杂质少，其它水体有机杂质含量相对高，AOA黄色物质测量结果与水体洁净程度吻合。[b]小结[/b]：萃取分析耗时长，不方便用于连续监测，需要有经验、高效率的分析人员才能得到准确、重复性好的结果。活体荧光法简便易操作，但准确度受更多因素的限制。两种方法不可互相替代，而应该取长补短，互为参照。参考文献 王丽娟，章岳蓬，郭步平等. 无水乙醇热浴超声法测定淡水中的叶绿素a.当代环保，2010，2（4）：14-17.

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310091014209568_2916_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　叶绿素检测仪是用于测量叶绿素含量的仪器，叶绿素是植物和藻类等生物体中的绿色色素，用于光合作用过程中捕获太阳能并进行光合反应。这些检测仪广泛应用于多个领域，包括：　　农业：叶绿素检测仪在农业领域中用于监测作物的生长和健康状态。通过测量叶绿素含量，可以评估植物的养分吸收、光合作用效率和生长速度，有助于农民和农业专业人员制定施肥和灌溉策略，提高农作物产量。　　植物生态学：在生态学研究中，叶绿素检测仪用于评估不同植被类型的叶绿素含量，以了解生态系统的健康状况、光合作用活性和生产力。这对于生态学家来说是重要的工具，可用于监测自然环境的变化和生态系统的恢复。　　水质监测：叶绿素是水体中藻类和浮游植物的主要色素之一，因此叶绿素检测仪用于监测水体的叶绿素含量，以评估水体质量、水生生物生态系统的健康和藻类水华的风险。　　海洋研究：在海洋科学领域，叶绿素检测仪被用来研究海洋生态系统的光合作用活动和生物量。它们可以用于检测浮游植物的分布和季节性变化，有助于理解海洋生态系统的动态。　　生物学研究：叶绿素检测仪也在生物学研究中广泛应用，用于测量叶绿素含量以研究植物和藻类的生长、发育和生理过程。　　总之，叶绿素检测仪在农业、生态学、环境科学、海洋学、生物学和水资源管理等多个领域都有重要的应用。它们帮助研究人员和专业人员监测植物和水体的叶绿素含量，提供了有关生态系统和环境健康状况的关键信息。

针对“水质 叶绿素a 的测定 分光光度法 HJ 897-2017”同事最近在纠结叶绿素a测加标回收率的问题，因为水样是要抽滤的，即溶解态的所有物质，均会通过滤膜。如果固态的标准品，经丙酮溶解后就变成溶解态了，再加入水样，也是溶解态，过滤时能被滤膜截住？而叶绿素a的测定，却是收集滤膜，加丙酮后浸提，再测定还有就是，常见的地表水（I-III类），叶绿素a含量都很低，观察发现滤膜截住的藻类非常少，如果研磨的话，很容易残留在研钵的内壁，损失会很严重，如果按照标准进行研磨，怎么保证准确度？[b][color=#ff0000]看了编制说明，是全程序加标[/color][color=#ff0000][img=,690,145]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/02/201802281634537558_2167_1880649_3.png!w690x145.jpg[/img][/color][/b]

[size=16px]　　叶绿素测定仪如何检测植物氮含量　　叶绿素测定仪通常用于测定叶片中的叶绿素含量，而不是植物的氮含量。要测定植物的氮含量，通常需要使用其他类型的仪器和方法，如Kjeldahl法、Dumas法或氮元素分析仪。　　以下是如何使用Kjeldahl法来测定植物的氮含量的基本步骤：　　样品准备：　　收集你要测定的植物样品，并将其剪碎成小块，以便更容易处理。　　将样品干燥，以去除多余的水分。　　氮的提取：　　将干燥的植物样品加入Kjeldahl消解管中。　　向样品中加入硫酸(H2SO4)和催化剂，通常是硒或汞的化合物。这些化学品将有机氮转化为无机氮。　　使用Kjeldahl消解仪将样品消解，通常是在高温下进行。　　蒸发和冷却：　　将消解后的样品加热以蒸发水分，直到样品中只剩下无机氮。　　将消解管中的液体冷却，使其凝结成液体。　　中和和滴定：　　向冷却的液体中加入氢氧化钠(NaOH)以中和其中的酸性。　　使用酸碱指示剂，如酚酞或溴甲酚绿，来监测酸性的中和点。　　然后，使用已知浓度的硫酸(H2SO4)溶液进行滴定，直到液体再次变酸，指示剂的颜色发生改变。滴定的体积可以用于计算氮的含量。　　计算氮含量：　　使用已知的滴定体积和硫酸浓度，计算出样品中的氮含量，通常以百分比或毫克/克的形式表示。　　需要注意的是，Kjeldahl法是一种相对复杂的化学分析方法，需要严格的实验室条件和设备，以确保准确性和安全性。测定氮含量的其他方法可能也可行，具体选择取决于你的实验室资源和样品类型。如果你没有化学分析的经验，云唐建议最好寻求专业的实验室支持或咨询专业化学家。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309181126073212_7562_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

与第四版比较，《水质叶绿素a的测定 分光光度法 HJ897-2017》的变与不变叶绿素a是浮游植物光合作用的载体，常用来表征浮游植物现存量，是湖泊水库富营养化评价指标之一。国内外叶绿素a测定方法繁杂多样，不同研究者采用的方法各式各样，导致研究结果之间少有可比性。环境监测普遍采用的是《水和废水监测分析方法》（第四版）（以下称第四版）叶绿素a的测定方法-丙酮研磨提取法[sup][/sup]。2017年12月21日环境保护部首次发布《水质叶绿素a的测定 分光光度法 HJ897-2017》[sup][/sup]，与第四版比较，做了一些改动，核心内容依然是丙酮研磨提取法，标准实施过程仍有诸多疑问和困难，写下来，希望同行不吝赐教。1.方法检出限HJ897-2017规定了方法检出限和测定下限，明确规定测定结果有效数字的保留。[img=,690,69]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300911232717_1558_3247383_3.png!w690x69.jpg[/img]图1 HJ897-2017关于方法检出限的规定《水和废水监测分析方法》（第四版）对检出限的定义[sup][/sup]是：为某特定分析方法在给定的置信度内从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。但没有严格规定检出限的计算方法，以下三种与分光光度法有关。①.《全球环境监测系统水监测操作指南》的计算方法为 D.L=4.6δ式中：δ——空白平行测定（批内）标准偏差（重复测定20次以上）②美国EPA SW-846规定MDL=3.143δ(δ重复测定7次)③某些分光光度法以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检出限。方法检出限受样品基质、前处理和仪器水平的影响，因此有必要说明取样体积、测量条件。“本标准测定丙酮提取液中叶绿素a的检出限为0.04mg/L”，“提取液”必然与提取方式有关，而这里没有说明提取条件，我的理解是分光光度法的检出限，即扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值，那么这句话改成“本标准测定叶绿素a丙酮溶液的检出限为0.04mg/L”是不是严谨一些？根据HJ897-2017关于检出限和测定下限的数据，推测计算过程：当取样体积200ml，丙酮提取液体积为10ml，方法检出限=0.04mg/Lx10 ml/200ml=0.002mg/L=2μg/L美国EPA SW-846规定4MLD为定量下限，所以测定下限=4x2μg/L=8μg/L如果取样体积为500ml,方法检出限=0.04mg/Lx10 ml/500ml=0.8μg/L取样100ml,检出限4μg/L方法检出限与取样体积有关，那么测定下限是否随着检出限而变化？2.防酸化问题第四版和HJ897-2017都规定样品采集后，立即做样品预处理：每升样品加1ml1%碳酸镁悬浊液，“以防酸化引起色素溶解”。叶绿素a是卟啉化合物，之所以呈绿色，是卟啉环中的电子和Mg决定的，卟啉环极易失去镁原子，分解生成暗褐色的脱镁叶绿素。水污染的地方、或者样品采集、保存、制备过程，因为酸性条件、高温、光照，浮游植物细胞被破坏，叶绿素变成脱镁叶绿素造成测量误差[sup][/sup]。酸化是脱镁反应的条件之一，加入碳酸镁是防止脱镁而非防酸化。3.修改了过滤水样的滤膜，用玻璃纤维滤膜代替乙酸纤维滤膜，并规定滤膜直径及孔径，增加配真空泵的玻璃砂芯过滤装置。3.1材质乙酸纤维滤膜过滤水样没问题，但用丙酮萃取叶绿素时，滤膜会被溶解成胶状，萃取液无法正常分离。HJ897-2017改用玻璃纤维滤膜，不存在滤膜溶解问题。3.2孔径滤膜孔径的选择很重要，要保证藻类细胞有效截留，另外要保证过滤效率。[img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300911487270_7582_3247383_3.jpg!w690x517.jpg[/img]图2几种浮游植物的细胞直径 [sup][/sup]细胞大小是浮游植物分类的重要依据，比较常见的藻类细胞绝大多数大于0.7μm，个人认为选择0.7μm的玻璃纤维滤膜比较合适。4.修改水样过滤时的操作。第四版是水样抽完后继续抽1-2min,减少滤膜上的水分。HJ897-2017是在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤，最后用滤纸吸干水分；有些藻类没有细胞壁或者细胞壁很薄，强大负压作用下，可能造成原生质破坏，叶绿素溶出，造成测量误差。HJ897-2017用滤纸吸干的做法尽可能避免在样品制备过程中叶绿素流失，但“注”中关于富营养化水样用离心法浓缩水样并不可取。因为水分的存在严重影响有机溶剂萃取效率，而离心法去除水分不完全。如果藻类密度较大，适量少取就好了。5.取样体积[img=,690,125]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300912335267_3403_3247383_3.jpg!w690x125.jpg[/img]图3（第四版）关于取样体积的规定[img=,690,151]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807300913206267_7656_3247383_3.png!w690x151.jpg[/img]图4 HJ897-2017中取样体积的规定取样体积直接关系到试样制备效率，是叶绿素a测定精密度准确度重要影响因素，HJ897-2017规定按水体的营养状况确定取样体积，并按营养状态给出相应的参考值。根据湖泊（水库）富营养化评价方法及分级技术规定（总站生字090号）评价标准，计算综合营养状态指数需要取得总氮、总磷、透明度、高锰酸盐指数和叶绿素a数据，是比较复杂的计算过程，用它来指导叶绿素测定的取样量，个人认为不适用。第四版的规定视浮游植物分布而定，少则多取，提高实验精密度；多则少取，提高实验效率，更具可操作性。6.低温保存样品过滤后，第四版规定滤膜在冰箱中低温干燥6-8h再研磨。“低温”让细胞质形成冰晶、膨胀，达到破碎细胞的目的，尤其是细胞壁坚硬的硅藻或者有胶被的蓝藻群体，低温处理有利于叶绿素顺利溶出，提高萃取效率。水分的存在影响有机试剂萃取效率，所以“干燥”也是必要的措施，低温保存具有双重效果。HJ897-2017则是过滤后马上研磨。7.第四版和HJ897-2017都用研磨法作为提取方法，不同的是第四版少量多次研磨，每次研磨后转移至离心管，离心后将上清液倒入容量瓶，最后用丙酮定容。HJ897-2017规定研磨5分钟以上，最后与滤膜一并转入离心管，定容至10ml，放置4℃避光浸提2-24h，离心取上清液，然后用针式过滤器过滤，测定。手动研磨费时费力，且不易把细胞完全磨碎，多次研磨、转移不可避免见光，还会造成样品流失，离心后很难得到上清液同时不能保证萃取液与滤膜完全分离，导致结果准确度、精密度不够，而且操作人员长时间接触丙酮，不利身体健康。多年以来，很多研究者提出用乙醇代替丙酮，用直接浸提、超声法、加热、反复冻融等多种细胞破碎方法代替研磨法，实验数据表明，经过改良的提取方法测得的叶绿素a水平明显高于研磨法，标准偏差变小，缩短实验操作时间。8.修改了测定波长及计算公式：第四版测定波长750nm、663 nm、645 nm、630 nm，HJ897-2017测定波长750nm、664nm、647 nm、630 nm。9.增加了空白试验和平行样测定等质控措施，试验过程增加质量保证注意事项。参考文献：国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会．水和废水监测分析方法．4版．北京：中国环境科学出版社，2002：670-671．环境保护部.水质 叶绿素a的测定 分光光度法：HJ 897-2017[s].北京：中国环境出版社，2017.国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会．水和废水监测分析方法．4版．北京：中国环境科学出版社，2002：28-29.陈文峻，[color=#333333]蒯本科，植物叶绿素降解[/color].植物生理学通讯2001，37（4）：336-338. 胡鸿钧, 魏印心. 中国淡水藻类——系统、分类及生态. 北京: 科学出版社,2006. HU Hongjun, WEI Yinxin. The freshwater algae of china: Sys- tematics,taxonomy and ecology. Beijing:Science Press, 2006. (in Chinese)[/s]