天隆六通道实时荧光定量仪

长期以来，实时荧光定量PCR仪被国外品牌所垄断，近年来随着我国科技不断创新，制造水平逐步提升，国产化的实时荧光定量PCR仪开始占领国内市场。现行的行标或国标缺乏一个能对实时荧光定量PCR仪评价的统一标准，十分不利于行业的发展以及日常检测工作的开展。国家标准计划《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》由TC124（全国工业过程测量控制和自动化标准化技术委员会）归口上报，TC124SC6（全国工业过程测量控制和自动化标准化技术委员会分析仪器分会）执行，主管部门为中国机械工业联合会。该标准的制定，旨在建立实时荧光定量PCR仪性能评价通则，将目前分散于行业标准、地方标准中的有关方法进行整理和验证，对缺乏的方法进行研制，最终形成针对实时荧光定量PCR仪性能评价的通用方法标准。为了保证该标准性能评价方案的全面性、严谨性和通用性，由全国工业过程测量控制和自动化标准技术委员会及分析仪器分技术委员会秘书处组织举办荧光定量PCR仪参数性能验证会，各计量测试院代表、荧光定量PCR生产厂家代表等共同参与。2021年7月12日，为期四天的验证会在南京医科大学附属苏州科技城医院举行，天隆科技作为国产荧光定量PCR仪领军企业，有幸受邀参与其中。会议期间，经过充分沟通和讨论，最终制定了严谨明晰的性能验证方案，包含温控性能、荧光检测性能和整体性能三大方面，共计14项影响定量PCR仪器主要性能的参数。天隆科技此次携抗疫明星产品Gentier 96E全自动医用PCR分析系统圆满完成性能参数验证工作。在2020年疫情期间，我司众多仪器设备凭借优异的性能、全面的功能及稳定的结果为疫情防控贡献了不可磨灭的力量。其中王牌产品Gentier 96E全自动医用PCR分析系统更以6通道同步检测、操作方式多样、温控精准高效、光学系统科学合理以及强大齐全的软件功能成为当前的抗疫明星，入选国家卫健委和中国医疗装备协会联合评选的“中国优秀国产医疗设备产品目录”，装备国家疾控中心、中日友好医院、同济医院、上海瑞金医院等知名单位。经过如火如荼的各项验证实验，Gentier 96E全自动医用PCR分析系统以优异的性能获得中国检验检疫科学研究院、中国计量院、上海计量院、北京理化分析中心等单位专家以及业内同行的一致好评。样本线性拟合图样本的标准曲线图S1-S6扩增曲线图天隆科技耕耘数年，致力国产智造，此次验证会是对天隆实力的认可。相信本次全面综合的参数验证，能够为《实时荧光定量PCR仪性能评价通则》国家标准的制定奠定更加坚实的数据基础，为荧光定量PCR产业发展带来积极影响！

仪器信息网讯 2011年3月7日至14日，西安天隆科技有限公司的实时荧光定量PCR仪、梯度PCR基因扩增仪以及BioLum-II手持式ATP细菌检测仪亮相国家“十一五”重大科技成就展。 实时荧光定量PCR仪 　　天隆科技公司将先进的定量PCR与实时PCR技术相结合，研制出实时荧光定量PCR仪，解决了快速热循环、无机械动作多通道荧光快速均衡扫描检测等关键技术难题，集成了微传感技术，提高了定量检测的灵敏度、准确度和快速性，为甲流防控发挥了重要作用，大大提高疾病预防控制和卫生检验检测水平和国家卫生医疗应急反应能力。 梯度基因扩增仪 　　该产品梯度功能强，梯度温度范围宽，可靠性高，具有卓越的精度和稳定性保障，实验结果重现性好；采用先进半导体Peltier热循环控温技术，控温精确，速度快；具有温度/时间、递增/递减等增强功能，可做降落PCR、长PCR、巢式PCR等复杂操作；一机多用，无需更换样品模块，大大节省了购买不同模块备件的费用；体积小，重量轻。 BioLum-II手持式ATP细菌检测仪 　　BioLum-II手持式ATP细菌检测仪填补了国产自主知识产权产品的空白，主要性能达到国际先进水平，可快速方便地检测到实时的微生物数量或菌落总数的变化，以便及时采取有效措施，控制微生物的繁殖，从而大大提高检测和处理效率，广泛用于食品、饮料、餐饮业、医疗卫生、日化、造纸、环保等多种行业。 　　关于西安天隆科技有限公司： 　　西安天隆科技有限公司是一家专业从事生物基因核酸诊断产品、生化仪器及治疗仪器等医疗器械及体外诊断试剂研发及应用的国家级高新技术企业。 目前天隆公司成功开发了以荧时荧光定量PCR仪为代表的系列核酸诊断产品，广泛应用各级医疗机构和临床实验室，如传染病学中病毒、细菌、支原体、衣原体等病原体检测 肿瘤性疾病中多种肿瘤标志核酸检测等。作为医疗仪器的一大门类，天隆公司还开发成功了先进的电脑控制激光治疗机、微波治疗仪、光谱治疗仪、肝病治疗仪等物理治疗系列产品。

法国Stilla Technologies公司开发的—款多重PCR专用预混液：naica® multiplex PCR MIX（见表1），专用于naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统的多重检测。并对naica® multiplex PCR MIX的多重检测性能进行了详细评估。当面对有限的样本量时，可保证多重数字PCR检测的灵敏度和准确性；在复杂背景基因存在的情况下，依然能精确检出低丰度的目的基因。★ naica® multiplex PCR MIX在naica® 六通道微滴芯片数字PCR上进行6个靶标的同步准确定量采用0.2~13000cp/ul的DNA样品，使用10X naica® multiplex PCR MIX在naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统上进行6个靶标的线性范围分析，结果显示6个靶标的R2均＞0.99，说明在naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统上，能够可靠地实现6靶标同步准确定量（图1)。与2X和5X浓度的数字PCR预混液(dPCR Mixes)相比，10X浓度的数字PCR预混液体积加入量降低了50％至80％，最大限度地提高样品加入量。尤其是在检测低浓度样品或稀有靶标时，样品加入量的增加可提高检测灵敏度。▲ 图1：使用naica® multiplex PCR MIX在naica® 六通道微滴芯片数字PCR上进行6个靶标的线性分析，分别在蓝色、青色、绿色、黄色、红色和红外线6个通道进行检测。每个稀释点的DNA浓度分别为：0.2、1.5、8.0、50、320、2050和13000 cp/ul，每个稀释度进行3次重复。结果显示6个靶标的R2均大于0.99，说明所有靶标的结果都高度真实可靠。★ 在复杂的背景基因下，对低丰度目的基因进行精确定量数字PCR的—个重要技术优势是能够在存在多个靶标扩增的情况下检测到低浓度靶标。为了评估naica® multiplex PCR MIX的稳定性。使用同一个目标DNA模板的不同浓度系列稀释液（0.2~ 13000 cp/uL)进行检测，同时其中掺入5种外部靶标模板（每个靶标的浓度为3000 cp/ul)。在不同测试条件下，结果均呈现良好的线性关系（图2A和2C)。这些结果与同一DNA 靶点在不同浓度下单独检测以及在不添加外部靶标的情况下获得的结果具有可比性（图2B和2D）。▲ 图2：使用naica® multiplex PCR MIX的扩增结果真实可靠。将pUC18质粒（图A和B)和pUC57质粒（图C和D)的13000至0.2 cp/ul的系列稀释液在5个外部扩增靶标背景下（每个靶标为3000 cp/ul(A,C)）和在不含外部靶标(B,D)的情况下进行定量检测，3次重复。线性拟合系数 R20.99，表明在不考虑多重背景的情况下，对所有靶标的测定结果都是真实可靠的。5个外部靶标的相对标准偏差保持在2.3％至3.1% (n=21)，显示出极好的重复性。★ naica® multiplex PCR MIX应用亮点☑ 实现数字PCR方法多重检测的高度稳定性和高检测灵敏度；☑ 可在naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统的动态范围内同时定量检测6个独立的DNA靶标，均具有良好线性关系；☑ 5X和10X的数字PCR预混液，提高了naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统高阶多重检测能力；☑ 10X PCR MIX比5X PCR MIX降低50％的体积用量，从而增加DNA的加入量。在检测低浓度样品或稀有靶标时，样本加入量的增加可提高检测灵敏度。表1 naica® multiplex PCR MIX货号及规格naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统法国Stilla Technologies公司naica® 六通道微滴芯片数字PCR系统，源于Crystal微滴芯片式数字PCR技术，自动化微滴生成和扩增，每个样本孔可实现6荧光通道的检测，智能化识别微滴并进行质控，3小时内即可获得至少6个靶标基因的绝对拷贝数浓度。