水产品中孔雀石绿检测的固相萃取方法
水产品中孔雀石绿检测的固相萃取方法(superclean al-n)一、实验目的本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,hplc 法作为分析方法,检测水产品中孔雀石绿含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。二、实验目标物孔雀石绿(cas:569-64-2)三、应用范围本方法适用于鲜活水产品中孔雀石绿的检测的 hplc 检测及确证。四、参考标准《gb/t 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》五、实验材料nuanalytical superclean alumina-n 固相萃取柱 1000mg/3ml。六、实验方法1、 样品待测溶液制备准确称取鱼肉样品 5.0 g 于 50 ml 离心管中,加入 10 ml 乙腈,超声波振荡提取 5 min,涡旋 1 min,4000r/min 离心 5 min,上清液转移至 50 ml 离心管中,残渣按照上述步骤重复提取一次;合并两次提取液,用乙腈定容至 25 ml。2、活化依次用 5 ml 乙腈活化3、上样和洗脱在中性氧化铝固相萃取柱上加入 5 ml 待净化样品,收集流出液,然后用 4 ml 乙腈洗脱,合并收集流出液。4、重新溶解流出液 45 ℃氮吹至近干,1 ml 乙腈定容,过 0.45 μm 滤膜,,供高效液相色谱测定。5、hplc 条件色谱柱:superlu c18 (250×4.6mm, 5μm) 检测器:uv-vis@618 nm流动相:a-乙腈 b-0.05 mol/l 乙酸铵缓冲溶液流速:1.2 ml/min 进样体积: 50 μl洗脱方式:梯度洗脱,洗脱程序如下: 时间/mina/%b/%0.060403.0060403.10802010.00802010.10604013.006040七、实验结果1、0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果表 1 0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果 名称123平均回收率(%)rsd(%)孔雀石绿91.091.887.290.02.732、添加水平为 0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图图 1 添加水平为 0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图