液相色谱乙腈二氯甲烷方法

听说二氯甲烷对液相色谱柱有影响，不知其原因何在？

在液相色谱分析中，二氯甲烷做溶剂，对C18柱有影响吗？

用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法做猪油中BHT BHA的时候，二氯甲烷还是把油淋洗下来，有没有好的办法把油完全留在层析柱上。液相色谱提取也存在此类问题，请问如何解决。

我的样品用二氯甲烷溶解，后加甲醇定容。流动相为甲醇：水 （95/5），柱子普通C18，请教各位高手，能不能直接进样啊？二氯甲烷会不会损害柱子？

[color=#444444]实验做出来的东西含有白油，想知道油的含量有多少，要用二氯甲烷将白油萃取出来（已知其他东西不溶于二氯甲烷），[/color][color=#444444]然后测萃取液中白油的浓度，从而推算出产物中白油的含量，二氯甲烷用的比较多，估计萃取液中白油含量在10 wt.%以内[/color][color=#444444]请问用什么方法能准确测出白油浓度呢？有没有大神来指导一下，尽量说具体一些呀，万分感谢[/color][color=#444444]实验室中有紫外也有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，但是不知道用什么色谱柱合适？紫外的话，在什么波长下测，參比样用什么呢？能直接测萃取液吗，需不需要别的溶剂处理一下样品先？[/color][color=#444444]二氯甲烷沸点低，39.8度，白油的沸点高，350度以上的，难道要用液相色谱或者[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]？这些真没有[/color]

本人用含CMC的零价铁溶液降解硝基苯，如果直接提取反应溶液经过0.22微米的有机滤头并进入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]，会因为粘性较大的CMC堵住色谱柱。所以本人用了二氯甲烷进行了萃取，但依然导致了压力升高，有没有哥哥姐姐能帮忙解答一下的呀？

在用高效液相色谱样品前处理中需要用到氧化铝萃取柱，氧化铝萃取柱制备过程中用二氯甲烷淋柱需要二氯甲烷的量是多少

领苯二甲酸酯（PAEs），是环境激素类的一种，作为聚氯乙烯、纤维素树脂、天然橡胶和合成橡胶的增塑剂广泛应用于塑料工业中，具有致畸、致突变、致癌以及生殖毒性。领苯二甲酸酯与塑料分子之间并不是以化学键结合，而是由氢键或范德华力连接，彼此保持各自独立的化学性质，因此它极易从塑料中释放，从而转入空气、水体、底质和生物等环境载体中，通过食物链危害着人体健康。领苯二甲酸酯类对水体的污染在国内已有许多报道，其主要来源于生产和使用邻苯二甲酸类的工厂所排放的工业污水。贝类属于滤食性生物，移动性相对较差，生活低于极为固定，所处环境受污染后，难免在滤食饵料时从水中吸入各种有害化学物质，PAEs等有机物具有较强的亲脂性，使其能在贝内中进行生物累积，并最终经食物链传递危害人类健康。因此建立一种高效、简便、准确的方法来检测贝类肉中领苯二甲酸酯类，对于开展贝类生物体中PAEs安全评估具有重要的指导意义。目前，国内外PAEs的分析方法主要有气相色谱法、液相色谱法及色谱-质谱联用法，分析的样品以环境、食品、塑料样品为主，尚未见对淡水贝类的研究报道。本文选取液相色谱法测定淡水贝类中8种领苯二甲酸酯的方法，该方法简便、快速，重现性好，准确度高，为淡水贝类中领苯二甲酸酯类物质准确的分析提供了理论参考。实验方法：1.样品的处理将购置好的新鲜贝类置于烧杯中，70度水浴加热30min,将贝类除壳以外所有贝肉全部取出，加入适量的生理盐水后，使用高速组织捣碎机，以10000r/min处理5min，然后移入50ml的离心管中，于4°C，15000r/min条件下离心15min，弃去上清液，将下层固体小烧杯中待用。称取贝肉5g,置于50ml离心管中，加入25ml1:1的正己烷和二氯甲烷混合液中，500W，53HZ超声提取30min后，在4°C下以15000r/min转速离心10min，移取上清液至旋转蒸发仪上浓缩，浓缩液移入2ml试管中，用甲醇定容到2ml，保存备用。测定时，提取液需经聚苯乙烯柱净化和0.45ul有机滤膜过滤后供HPLC测定，每个样品平行测定三次。2.标准溶液配制以甲醇为溶剂，配制浓度分别为0.1、0.5、1.5、10、25、50ul/ml的PAEs混合标准工作液。绘制标准曲线，用外标法计算样品中PAEs的含量。3.色谱条件色谱柱：AgelavenusilXBP-C18（250*4.6*5);流动相为甲醇-水梯度洗脱，检测器为紫外检测器，检测波长230nm，流速1.0ml/min，柱温25°C,进样体机1ul。结论本文以正己烷和二氯甲烷为提取剂，液液萃取贝类中的8种PAEs，以甲醇-水为流动相采用高效液相色谱仪建立了淡水贝类中领苯二甲酸酯类化合物的检测方法。方法操作简便，回收率高，重现性好。在实际样品分析中，；螺蛳，黄蚬和田螺中8种PAEs均有检出。

小白求助：使用液相色谱，样品的溶剂需要与做标线的标液溶液完全相同吗？如果不相同，会影响出峰和积分结果吗？比如说，我的标液是乙腈中的，流动相也是乙腈和水，我现在接到一个甲醇或二氯甲烷等其他溶剂的样品，我需要换标液，换方法，重新做线，还是可以直接进样？

[color=#444444]做薄层色谱时候，用二氯甲烷-乙酸乙酯体系能分开。但是液相色谱的洗脱体系是不是一般是甲醇-水体系或者乙腈-水？那这种情况样品是不是就不能拿去做液相色谱了？[/color]

蜂王浆样品用水溶解后经正已烷-二氯甲烷(1:1，V/V)提取，无水乙醇破除乳化，样液经离心后，用反相固相萃取柱富集与净化，用乙腈洗脱后，氮吹至近干，用80%乙腈水溶液溶解，经0.22μm滤膜过滤后，采用超高效液相色谱梯度洗脱与紫外检测器分析蜂王浆中的氟胺氰菊酯与氟氯苯氰菊酯残留。以XTerra Shield RP18柱(2.1mm×50mm，1.7μm)为色谱柱，以水和乙腈为流动相，两种菊酯残留在4min中内实现了较好的分离，方法快速准确，灵敏度高，是一种较好的定性和定量方法。所研究的提取净化方法及色谱分离条件能有效排除蜂王浆中的杂质干扰，添加回收率在75.7%～82.8%之间，方法检出限为10μg/kg。

液相色谱的常用试剂有哪些呢？都说说吧，看你都是干嘛用不管是样品处理也好，做流动相也好，................汇总：乙腈甲醇丙酮二氯甲烷乙醚异丙醇三氟乙酸磷酸四氢呋喃三氯甲烷正己烷醋酸甲酸乙酸铵乙酸钠磷酸二氢钾乙酸乙酯二氯甲烷环己烷叔丁基甲基醚庚烷磺酸钠四丁基溴化铵三乙胺

看到有资料说，二氯甲烷长时间存留在液相管道中，会分解产生盐酸，从而会腐蚀管道，有道理吗？

请教各位前辈关于用液相色谱检测甲醛的方法，目前我是用2,4-二硝基苯肼与甲醛反应后用二氯甲烷萃取，但发现结果试剂空白（纯水）中甲醛的含量也不低，导致标液定量时比较麻烦，不知道有做过的前辈是否有类似的情况，有什么好的解决办法吗，麻烦知道的前辈多多指点，本人不胜感激！！！

求助高手，溶剂二氯甲烷[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]检测方法，用FID检测器，色谱柱选择什么型号的？本人用SE-54的柱子做样，竟然不出峰，郁闷的是仪器是正常的

[color=#444444]液相-质谱监测分析中，EI源的[/color][color=#444444]进样瓶定容用二氯甲烷合适吗[/color]

作者： 李毅(湖南省安乡县人民医院，湖南，安乡，415600)摘要： 目的 建立利用高效液相色谱法测定人血浆中华法林浓度的方法.方法采用二氯甲烷-正己烷(1∶1)对血浆样品进行萃取,高效液相色谱外标法进行含量测定.色谱柱为Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水-冰醋酸(65∶35∶1),流速1ml/min,紫外检测器检测波长308nm,柱温30℃.结果华法林的保留时间为8.2min,定量线性范围0.05-5.0μg/ml. 血浆中华法林萃取同收率为85.3％89.8％(n=5)，方法回收率101.3％103.6％(n=5)，日内及日间RSD均小于8％(n=5)。结论本方法快速准确，可用于华法林血药浓度监测。谱图：无

最近用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]检测时，遇到样品是由二氯甲烷配制而成的，且非常的粘稠，想要。由于这种类型的样品之前没有接触过，想请问各位大佬，有可能的仪器方法推荐吗？比如可以尝试怎样的流动相配比，色谱柱型号等，拜托了各位大佬！！！

HPLC法1 应用范围本法适用于唇膏、雪花膏、化妆品及痱子粉等化妆品中的异丙基甲酚的测定。2 原理样品中的异丙基甲酚在H2SO4介质条件下，用二氯甲烷萃取，然后蒸干萃取液，用乙醇定容。将乙醇溶液注入高效液相色谱仪，以荧光检测器检测，与同样处理的已知标准溶液比较进行定性和定量测定。3 试剂3.1 异丙基甲酚的标准溶液:精确称取异丙基甲酚50.0mg溶于乙醇中定容至50.0ml。取此溶液5.0ml用乙醇稀释至50ml,此液1.0ml含100.0μg异丙基甲酚。3.2 内标准溶液:精确称取百里酚25.0mg溶于水500.0ml乙醇中。3.3 柱填充剂:氨丙基硅烷键合硅胶,十八烷基硅烷键合硅胶。3.4 流动相:已烷 乙醇(9 1) 水 乙腈(1 1)。4 仪器4.1 高效液相色谱仪:具荧光检测器。5 分析步骤5.1 样品的预处理精确称取样品约0.5～2.5g(2),加饱和NaCl溶液50ml,移入分液漏斗中,加10%H2SO4 1ml,30ml二氯甲烷,振摇5min,静置分层.水层再各用20ml二氯甲烷提取二次，合并全部二氯甲烷，用50ml水洗涤，用无水硫酸钠脱水后（3），在旋转蒸发器上（水浴约40℃）蒸去二氯甲烷（4），于残留物中加入内标液5.0ml(5),用乙醇定容至50ml(6)作为待测溶液。5.2 测定5.2.1高效液相色谱条件5.2.1.1色谱柱(7)：氨丙基硅烷键合硅胶（内径4.6mm、长250mm）。流动相：己烷一乙醇(9＋1）。流速：1.2m1／min。5.2.1.2色谱柱(8)：十八烷基硅烷键合硅胶（内径4.6mm、长15Omm）。流动相：水 乙腈(1 1）。流速：1.0ml／min。5.2.2荧光检测器波长：激发波长280nm，荧光波长305nm。5.2.3定性：取5.0ml标准溶液与5.0ml内标溶液于50.0ml容量瓶中，混匀,然后加乙醇至刻度。取此液2.5进行高效液相色谱分析，从得到的色谱图求出内标物对异丙基甲酚的相对保留时间。同样取2.5μl待测溶液，如上述方法操作。从得到的峰求出对内标物的相对保留时间与标准溶液时行比较而定性。5.2.4定量：取2.5μl待测溶液进行高效液相色谱分析。通过异丙基甲酚的峰高（或者峰面积）与内标物质的峰高（或者峰面积）之比，从预先做成的标准曲线中求出待测溶液中异丙基甲酚的浓度A（μg/m1）。5.2.5标准曲线的制备：分别取异丙基甲酚标准溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0及6.0ml于50.0ml容量瓶中，分别于每个容量瓶中加入内标准溶液5.0ml，立即加乙醇至50.0m1。分别取2.5μl此溶液进行高效液相色谱分析，求出异丙基甲酚与内标物的峰高（或峰面积）之比值，做标准曲线。6 计算c=A×V/(m×1000×1000)×100式中；c－一样品中异丙基甲酚的含量，%；A――从标准曲线上查得待测溶液中异丙基甲酚浓度，μg/m1。V一－测定用待测溶液的体积，m1；M－一样品质量，g。

作者：朱 军1, 黄伟侨2, 刘伟忠3, 刘文宪3, 王华成3, 林育华3( 1.中山大学附属第二医院药学部, 广州 510120 ; 2 . 中山大学附属第一医院药学部,广州 510080 ; 3 . 广州市精神病医院国家药品临床研究基地, 510370)摘要：目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中奋乃静的浓度。方法以钻石C18反相柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.03 mol.L-1醋酸铵-甲醇(23:77);流速:1.0 mL.min-1;柱温:40℃;检测波长:254 nm。以醋酸乙酯与二氯甲烷(80:20)为提取剂。结果奋乃静的高、中、低(1 000.0,400.0,10.0μg.L-1)3种浓度平均回收率分别为104.28%,97.60%,98.40%,日内、日间差RSD均7%(n=5);分析方法的检测限为5.0μg.L-1;线性范围为10.0~1 000.0μg.L-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中奋乃静的浓度。方法以钻石C18反相柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.03 mol.L-1醋酸铵-甲醇(23:77);流速:1.0 mL.min-1;柱温:40℃;检测波长:254 nm。以醋酸乙酯与二氯甲烷(80:20)为提取剂。结果奋乃静的高、中、低(1 000.0,400.0,10.0μg.L-1)3种浓度平均回收率分别为104.28%,97.60%,98.40%,日内、日间差RSD均7%(n=5);分析方法的检测限为5.0μg.L-1;线性范围为10.0~1 000.0μg.L-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。谱图：没有

请教分析二氯甲烷和2-甲基甲酰胺的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]方法

据说甲醇和二氯甲烷易损坏液相色谱柱，有没有这种说法？谢谢各位了！

现在要做一项溶残检测，同时含二氯甲烷、异丙醇和乙腈，在DB-624(30m*320um*1.8um)柱上异丙醇和乙腈完全重叠，在HP-INNOWax(30m*320um*0.25um)柱上异丙醇和二氯甲烷的分离度很低（小于1.0）。现在是顶空进样方式，分流比5:1，调节了流速等其他参数，都不能达到理想的分离效果，请教各位同仁有没有能较好分离这三种溶剂的色谱条件，多谢！

样品不溶于水，甲醇和乙腈。而只溶于二氯甲烷，三氯甲烷等溶剂。这个样品用一般的反相色谱可以做吗？！

[color=#444444]我做了一个以水为溶剂的反应，是否能用液相色谱来检测生成物的含量？[/color][color=#444444]实验室有一台液相色谱和质谱联用的仪器，但是管仪器的同学说，现在装的是正相柱子，不能直接检测以水为溶剂的样品，需要萃取，[/color][color=#444444]我想问的问题是怎么萃取我的样品，如果用有机溶剂（二氯甲烷）萃取了是否会有影响？[/color][color=#444444]还有，液相色谱的具体操作是怎样的？[/color][color=#444444]感谢各位给我回复，谢谢！[/color]

 [B] [center]【第二届网络原创作品大赛】我的液相色谱学习笔记---色谱柱保养[/center][/B]柱的保养： 柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动； 当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净； 要注意流动相的脱气； 避免使用高粘度的溶剂作为流动相； 进样样品要提纯； 严格控制进样量； 每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品； 每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱； 若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭；液相色谱柱的维护1、 注意正确地使用和存放色谱柱，不锈钢柱色谱柱可选用以下的溶剂保存：正相柱用烃类溶剂，反相柱用甲醇，离子交换柱用水或甲醇/水。某些专用分析色谱柱要注意制造商规定的保存条件。另外，要注意溶液的PH值，一般控制在PH2－8范围内，其硅胶柱PH＞8时会发生硅胶溶脱的情况，键合型柱PH＜2时会发生键合相断裂。2、 色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗，使柱效再生。⑴硅胶柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按顺序冲洗色谱柱，经过净化的色谱柱必须进行水活化，即按上述相反的顺序冲洗。柱再生时所需要的有机溶剂要严格进行脱水处理。⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷冲洗，键合C18柱一般用甲醇冲洗，必要时可用0.5 M EDTA钠盐溶液冲洗，然后用水冲洗，以达到去除柱内盐类。⑶键合型的离子交换柱可以用缓冲溶液、水、甲醇冲洗。3、 对污染严重的色谱柱在冲洗无效时，需将柱内填料取出进行处理或更换新的填料，还可以用更换柱头填料的方法即将柱头入口处的被污染的填料取出，重新补装和柱内同类型的填料，然后在改变柱流向进行再生。这种逆流再生柱的方法，可以救活大部分柱子。4、 注入色谱柱的溶剂、标液、样品溶液都必须严格过滤，以去除杂质，防止堵塞色谱柱。当用反冲洗方法无效时，可将柱口过滤装置取下，用弱酸溶液处理，去除污物或定期更换。5、 建议：为了保护色谱柱，避免给分析带来不必要的麻烦，请使用保护柱！！ 4．柱的使用和维护注意事项色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。①　避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。②　应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。③　一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。④　选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。⑤　避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。⑥　经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100~200µ l四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染。阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有机物）、甲醇、水依次冲洗。⑦　保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。⑧　色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净）再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱（5~30mm），可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。

某用户做糕点等食品中的防腐剂（山梨酸、苯甲酸、糖精钠），流动相是0.025mol乙酸铵水溶液/甲醇（70:30），用的是ODS-3的色谱柱，试验做完后，用95%水/5%甲醇冲洗1个小时，用甲醇冲洗20分钟，再用二氯甲烷冲洗半个小时，1.0ml/min。 用户最开始没有用二氯甲烷冲洗，后来听Waters的技术和其他同行介绍说做完实验以用二氯甲烷冲洗一下，可以去色谱柱里的蛋白质，刚开始（用的是天津某品牌的二氯甲烷）压力是正常的，3个月后(改用我们的二氯甲烷)压力从开始的100多psi升到2000psi，后来压力太高把色谱柱PEEK接头裂开了，就用0.2ml的甲醇冲了一晚上，压力还是在3300Psi，色谱柱严重堵塞。请大家帮忙分析下有哪些原因导致用二氯甲烷冲洗色谱柱后柱压上升了？另外，做防腐剂山梨酸、苯甲酸、糖精钠等的C18柱的使用寿命一般有多长？（ps：我听说这个实验很废色谱柱的，因为在前面处理沉淀蛋白过程中需要加入乙酸铅或者乙酸锌+亚铁氰化钾，请大家帮忙分析下导致色谱柱柱压上升的原因）。

通常进行高效液相色谱分析是优先考虑的是样品不必进行预处理，就可经溶样来进行分析，因此样品在有机溶剂和水溶液中的相对溶解性是样品最重要的性质。由于样品在有机溶剂中溶解度的大小，初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物，进而推断用非极性溶解剂戊烷、己烷、庚烷等，还是极性溶解剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品，并通过实验判断。若样品溶于非极性溶剂，表明样品为非极性化合物，通常可选用吸附色谱法或正相分配色谱法、正相键合色谱法进行分析。若样品溶于极性溶剂或相混溶的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常可选用反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。若样品溶于水相，可首先检查水溶液的pH值，若呈中性为非离子型组分，常可用反相（或正相）键合色谱法进行分析。若pH值呈弱酸性，可采用抑制样品电离的方法，在流动相中加入硫酸、磷酸调节pH=2~3，再用反相键合相色谱法进行分析。若pH值呈弱碱性，则可向流动相中加入阳离子型反离子，再用离子对色谱法进行分析。若pH呈强酸性或强碱性，则可用离子色谱法进行分析。对呈强离子型水溶性生物大分子的分析仍是高效液相色谱的特殊难题之一，近年随凝胶过滤色谱和高效亲和色谱的迅速发展，对解决像蛋白质、核酸等生物大分子的分析提供了有效的途径。来源：互联网

跟大家分享一本书《高效液相色谱方法及应用》第二版，感兴趣的版友可以下载附件查阅，也欢迎补充。全书的目录如下：作 者： 于世林出 版 社： 化学工业出版社 本社特价书所属丛书： 色谱技术丛书 册 数： 条 形 码： 9787502569068 ; 978-7-5025-6906-8I S B N ： 7502569065 出版时间： 2005-6-1开 本： 小16开 页 数： 333定 价： 39 元第一章 绪论第一节 高效液相色谱法的特点一、与经典液相(柱)色谱法比较二、与气相色谱法比较三、高效液相色谱法的优点四、高效液相色谱方法发展简介第二节 高效液相色谱法的分类一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性一、应用范围二、方法的局限性参考文献第二章 高效液相色谱仪简介第一节 流动相及储液罐一、储液罐二、流动相脱气第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置一、高压输液泵二、输液系统的辅助设备三、梯度洗脱装置第三节 进样装置一、停流进样装置二、六通阀进样装置三、自动进样器第四节 色谱柱一、柱材料及规格二、柱填料三、保护柱四、柱连接方式五、柱温控制第五节 检测器一、检测器的分类和响应特性二、紫外吸收检测器三、折光指数检测器四、电导检测器五、荧光检测器六、蒸发光散射检测器第六节 色谱数据处理装置一、微处理机二、色谱工作站参考文献第三章 液固色谱法和液液色谱法第一节 分离原理一、吸附系数二、分配系数第二节 固定相一、液固色谱固定相二、液液色谱固定相第三节 流动相一、表征溶剂特性的重要参数二、液固和液液色谱的流动相第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律一、溶质保留值的基本方程式二、液固色谱的保留值方程式三、液液色谱的保留值方程式参考文献第四章 键合相色谱法第一节 分离原理一、正相键合相色谱法的分离原理二、反相键合相色谱法的分离原理第二节 固定相一、键合固定相的制备及分类二、键合固定相的性质三、使用键合固定相应注意的问题第三节 流动相一、溶剂的选择性分组二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则三、改善色谱分离选择性的方法四、多元混合溶剂的多重选择性五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相一、新型高效化学键合固定相二、化学键合固定相分类方法简介三、整体色谱柱四、超热水流动相第五节 离子对色谱法一、分离原理二、固定相、流动相和对（反）离子三、影响离子对色谱分离选择性的因素参考文献第五章 梯度洗脱第一节 基本原理一、等度洗脱二、梯度洗脱第二节 影响梯度洗脱的各种因素一、梯度洗脱时间(tG)对分离的影响二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响三、梯度陡度对保留值的影响四、柱温变化对保留值的影响五、梯度洗脱程序曲线形状的影响六、影响梯度洗脱的其他变量第三节 优化梯度洗脱的方法一、建立梯度洗脱方法的一般步骤二、梯度洗脱中的实验条件第四节 梯度洗脱的图示方法一、二元溶剂梯度洗脱二、三元溶剂梯度洗脱三、四元溶剂梯度洗脱四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱参考文献第六章 体积排阻色谱法第一节 分离原理一、分布系数二、体积排阻色谱法的特点第二节 固定相一、固定相的分类二、凝胶固定相的特性参数三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点第三节 流动相一、凝胶渗透色谱的流动相二、凝胶过滤色谱的流动相第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理参考文献第七章 高效液相色谱法的基本理论第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数一、总孔率二、柱压力降三、柱渗透率第二节 高效液相色谱的速率理论一、影响色谱峰形扩展的各种因素二、范第姆特方程式的表达及图示第三节 诺克斯方程式一、描述色谱柱性能的折合参数二、诺克斯方程式第四节 色谱柱操作参数的优化一、三个柱操作参数的表达式二、HPLC中实用柱操作参数的优化三、柱操作参数优化的图示表达方法第五节 “无限直径”效应和柱外效应一、“无限直径”效应二、柱外效应第六节 超高效液相色谱一、超高效液相色谱的理论基础二、实现超高效液相色谱的必要条件三、超高效液相色谱的应用参考文献第八章 高效液相色谱分离条件的优化第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性一、色谱参数的分类二、色谱参数的相关性第二节 色谱分离条件优化标准的选择一、难分离物质对的峰对分离优化标准二、整体色谱图的优化标准第三节 色谱响应函数和色谱优化函数一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数二、Watson和Carr提出的色谱响应函数三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数四、Berridge提出的色谱响应函数第四节 色谱分离条件的优化方法一、单纯形法二、窗图法三、混合液设计实验法四、重叠分离度图法五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法一、实验设计系统二、人工智能系统第六节 高效液相色谱专家系统简介一、专家系统的组成二、专家系统的使用方法参考文献第九章 微柱液相色谱法第一节 方法简介一、微型柱的分类二、微柱液相色谱法的优点和缺点第二节 基本理论一、柱外效应二、管壁效应三、稀释效应四、分离阻抗第三节 仪器装置一、输液泵系统二、进样系统三、柱系统四、检测器系统五、连接管和接头第四节 微柱的制备一、评价微柱性能的重要参数二、影响微柱分离效率的相关参数三、微柱的制备方法第五节 微柱液相色谱的新技术一、纳米液相色谱技术二、超高压液相色谱技术参考文献第十章 二维高效液相色谱法第一节 描述分离体系效能的参数一、峰容量二、信息量第二节 二维高效液相色谱的技术功能一、切割功能二、反冲洗脱功能三、痕量组分的富集功能第三节 二维高效液相色谱的流路系统一、多通路切换阀二、二维高效液相色谱的流路系统第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用参考文献第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术第一节 样品的性质及柱分离模式的选择一、样品的溶解度二、样品的分子量范围三、样品的分子结构和分析特性第二节 分离操作条件的选择一、容量因子和死时间的测量二、色谱柱操作参数的选择三、样品组分保留值和容量因子的选择四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择第三节 高效液相色谱法的实验技术一、溶剂的纯化技术二、色谱柱的装填技术三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术四、梯度洗脱技术五、色谱柱前和柱后的衍生化技术六、样品的预处理技术参考文献符号表

各位大侠，用液相色谱做样品时，对样品中的溶剂和我使用的稀释剂有要求么？有不能使用的试剂么，类似于二氯甲烷，四氢呋喃，丙酮等？如果使用那些溶剂对机器有什么影响？