抗生素高分子杂质分析系统

【摘要】本文综述了β－内酰胺类抗生素高分子聚合物测定的国内外研究进展，介绍了聚合物测定的原理和具体方法，分析了目前在聚合物测定中存在的问题，并针对问题提出了处理建议。 【关键词】高分子聚合物、质控现状、测定方法 1、概述 抗生素是临床用量最大和较易发生不良反应的药物。其中最常见的一类不良反应就是过敏反应。多年来的研究已证明，在β－内酰胺类抗生素所致的速发型过敏反应中，药物分子本身只是半抗原，药物中存在的高分子聚合物才是引发速发型过敏反应的真正过敏原，因此严格控制抗生素中高分子聚合物的含量有着重要的意义。 本文综述了高分子聚合物测定方法在国内外的研究进展，对实际测定过程中遇到的问题作简单的分析和探讨。 2、高分子聚合物的分类 抗生素中的高分子杂质系指药品中分子量大于药物本身的杂质总称，其分子量一般在1000～5000Da，个别可达10000Da左右。β－内酰胺类抗生素中的高分子杂质按其来源通常被分为两类：外源性杂质和内源性杂质。 外源性杂质包括蛋白、多肽、多糖等类杂质或抗生素和蛋白、多肽、多糖等的结合物，来源于发酵工艺，如青霉素中的青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽等。 内源性杂质是指抗菌药物的自身聚合产物，聚合物既可来自生产过程，又可在储存中形成，甚至在用药时也可产生。对于现在的生产工艺，外源性的高分子杂质已经较少产生，对内源性聚合物的控制是当前抗生素高分子杂质质量控制的重点。 金少鸿等人的研究表明，高分子聚合物不仅能引发IgE介导的过敏反应，而且青霉素类的抗生素还能经胃肠道吸收而引发过敏反应。故对β－内酰胺类抗生素中的高分子聚合物进行严格的控制，可以保证临床用药的安全有效

随着新版《药品注册管理办法》的实施，对药品注册的相关技术提出了新的要求，特别是抗生素类高风险产品，目的是全面提升注册上市药品的质量和品质。 杂质研究是药物质量控制研究的重要项目。对抗生素而言，由于其多为半发酵、半合成产品，所含的杂质种类与杂质含量都比普通合成化学药物复杂；同时由于国内抗生素使用范围较广，面临的安全性问题更为突出，因此，杂质研究和杂质控制更是抗生素质量控制研究的关键项目。 对于仿制国内外已上市抗生素的品种，根据仿制药的基本技术要求，应选择被仿药物进行系统的质量对比研究，以保证其质量的一致性。 在杂质研究方面，根据相关技术要求，结合我国抗生素生产和研发的历史以及现实情况，提出如下要求：

做沉积物抗生素的时候，检测到的杂质太多怎么办?可以去掉前两毫升的洗脱液么？

[color=#444444][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]分析抗生素，质谱调谐时可以找到四环素类抗生素的母离子和子离子，但是走[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]时，四环素类抗生素标准品不出峰，走scan模式也不出峰，使用的柱子是waters的uplc BEH C18 流动相 用的 甲醇/水 不同比例的都试了，也试了0.1%甲酸水的~~求助~~谢谢各位啦~~[/color]

制订抗生素有关物质标准的指导原则（草 案）　　□蒋煜 译　　编者按　　目前市场上的抗生素活性物质是通过化学合成、发酵或发酵后一次或多次合成步骤（半合成物质）等方式制造的。与合成工艺相比，发酵工艺中可变性更大，可控性更低。因此与纯合成产品相比，在生产中含有发酵工艺的活性物质的杂质谱可能更复杂及难以预测。由于上述原因，发酵产品和半合成产品未包括在ICH（人用药品注册技术规范国际协调会）Q3和VICH（兽用药品注册技术规范国际协调会）10/11（关于杂质的）指导原则之内，这些指导原则就化学合成活性物质中引入的杂质的鉴定、报告和控制限度制订了质量标准。　　欧洲药物管理局（EMA）近期发布的《制订抗生素有关物质标准的指导原则(草案)》旨在为未包括在上述（V）ICH指导原则中的内容提供指导，即如何规范发酵产品或源于发酵产品的半合成物质的抗生素中的有关物质。本报特刊登了药审中心专家对此草案的整理翻译，望能给相关制药企业及研发人士以参考和借鉴。　　介绍（背景）　　目前市场上大部分抗生素是通过化学合成或发酵方式得到。在某些情况下，通过发酵所得到的抗生素，其化学结构可通过多步合成工艺进一步修饰之后，在制剂生产中做为活性物质使用（半合成物质）。　　和纯化学反应相比，发酵工艺涉及到生物系统，预测性差，可控性低，且更为复杂。因此发酵产品的波动性比化学合成产品更大。所以，发酵产品的杂质谱比合成产品更为复杂和难以预料。　　为此，发酵产品以及由此得到的半合成物质并未包含在ICH Q3和VICH 10/11指导原则中，这些指导原则制订了化学合成活性物质中有关物质的鉴定、报告和控制限度。指导原则中对限度的定义是，如果超出了该限度，该杂质即应该被鉴定、报告或控制，该限度同样适用于欧洲药典总论“药用物质”。发酵产品及其半合成衍生物不在该总论范围内。　　在没有其他指导原则的情况下，这些产品中的有关物质曾经根据一对一（case-by-case）的方式进行评估，这导致了相同抗生素或同类抗生素中的不同化合物（如头孢菌素）可能存在不同的杂质限度。因此，在批准新抗生素时能有连贯一致的措施来制定杂质限度是十分必要的。　　所以需要基于常规操作和经验的基础制定指导原则，为规范含发酵工艺抗生素的杂质限度提供建议。该指导原则中对此都有所提及。　　即便如此，如有必要，根据原料药/制剂的使用和暴露情况，在某些情况下更高的限度要求是合理和可行的。　　范围　　本文件的规范对象为申请上市许可，为发酵所得或发酵后半合成所得的抗生素（即抗细菌物质）中的有关物质制定标准。未来可能将把范围扩大到其他抗生素（如抗真菌物质）。文件为活性物质和药物制剂中的有关物质的范围和标准提供指导。该指导原则不适用于用于临床试验的研究性药物制剂中的新活性物质。本指导原则中提供了有关物质的报告，鉴定和控制限度。对于由几种密切相关的化合物混合组成的抗生素活性物质，这些基本要求可能很难适用。提供了常规原则，就如何制定具体限度、标准以及如何确定杂质谱限度进行了规定。此原则中的限度适于一系列基本要求，可根据特定物质或产品的不同情况进行调整。如有必要，可以引入更多的要求，例如安全性原因。　　本指导原则不包括发酵工艺中产生的残渣，如来自微生物发生器、培养基、基板和产物母体的残渣。该部分内容包含在欧洲药典总论“发酵产品”中。（该论著适用于发酵生产的物质，不适用于半合成物质）。　　本指导原则适用于上市许可新申请和新厂商变更。本指导原则不具有追溯效力的应用，但将作为建立最佳实践以及修正相关欧洲药典的激励原则。对于新申请者，应该将本指导原则的应用与任何现有欧洲药典活性物质的内容相结合。　　法律依据　　本指导原则必须与如下内容相结合：介绍、通则（4）以及作为指导原则2001/82和2001/83增补的附录I第1部分。　　基本要求

牛奶分析器与牛奶分析仪的共同结论，最终导致乳制品中抗生素污染的途径主要有以下几个方面：(1) 饲料污染：为了防治奶牛的肠胃疾病、乳腺炎等，奶农会将抗生素直接掺杂在奶牛的饲料中。为了快速治愈这些疾病，奶农常常大量的掺加抗生素，从而导致奶牛体内抗生素大量积累，进而污染牛奶。(2) 乳房内注射：乳腺炎是奶牛的易患病之一，治疗奶牛乳腺炎的方法有很多，其中最直接的，同时也是奶农最常用的方法就是乳房内注射抗生素。这种方法快速、有效，但是很容易导致牛奶中含有抗生素。(3) 在牛奶中直接掺加：挤出的牛奶有时不能及时的送往奶站，如果保存不当就会使牛奶变质。有些不法分子为了防止牛奶变质，直接在牛奶中加入抗生素进行防腐。(4) 牛奶分析仪可检测出，在给患病奶牛使用过的挤奶工具和贮奶设备，未经彻底清洗和消毒就用于其他健康奶牛，造成牛奶中抗生素的污染。 如果牛奶中含有抗生素，不但对消费者有较大的危害，对于乳制品厂商也有不利的影响。虽然可以利用市面上的牛奶分析仪与乳制品检测仪检测出来，但是并不普及。其危害主要有以下几个方面：(1) 有些人对抗生素过敏，食用含有抗生素的乳制品会造成不同程度的过敏反应，严重的可能危及生命。(2) 长期食用含有抗生素的乳制品，相当于长期低剂量摄入抗生素，这样会使人体内的细菌产生抗药性，给今后患病时使用抗生素治疗带来不利的影响；另外还会破坏人体内正常菌群的平衡状态，使菌群失调，甚至造成二重感染，使重症患者病情难以控制。(3) 牛奶中残留的抗生素会影响牛奶的品质，同时也影响牛奶的发酵，致使其深加工制品，如黄油、酸奶、奶酪等的产量和质量降低，给生产者造成经济损失。(4) 一些性质稳定的抗生素被排泄到环境中会造成环境污染，破坏生态平衡。2010 年底到 2011 年初闹得沸沸扬扬的“超级细菌”问题就是典型的抗生素滥用的后果之一。通过牛奶分析仪和乳制品检测仪可以检测，不过如果长期食用含有抗生素的乳制品，人体内很可能出现“超级细菌” 这样人们在需要使用抗生素治疗时就会面临无药可用的状态，这样的后果是很严重的

抗生素发酵系统工艺配管设计1 　简述 大多数抗生素初级原料药的生产均是通过生物发酵,然后经分离精制而成。提炼生产与一般的化学制药以至化工生产在管路配置的工艺要求是一致的:即保证工艺物料流程顺畅。发酵生产由于生产过程是连续的,且需满足菌种的正常生长、生产要求的环境条件如温度、PH、溶解氧及限制杂菌生长等,因而其管路系统配置有其特殊性,本文将就工艺物料管道、无菌空气系统、灭菌蒸汽系统及阀门选用谈一下自己的设计体会2 　工艺物料管路 微生物发酵是抗生素生产的龙头。目前,抗生素发酵生产的基本工艺一般为:冷冻孢子→斜面培养→摇瓶培养→种子罐种子培养(一般1～3 级) →发酵罐发酵。发酵终了,放罐至提炼。从菌种分离培养开始至发酵放罐的整个生产过程中应始终保持在最适宜的生成环境中,杂菌的存在不利于抗生素菌种生长及整个发酵的生产,因而,发酵系统的无菌保证成了该部分管路设计的基本要求之一。发酵厂房的工艺物料管路按其用途分为培养基进料系统管路、移种系统管路和补料系统管路三种。下面对以上三种管路基本要求分别加以说明。2. 1 　培养基进料管路 第一级种子罐培养基量较少时有时直接在罐内配制培养基。当种子罐和发酵罐培养基量较大一些,一般在配料罐内配制好后用泵输送至罐内。由于培养基消毒灭菌分为连消和实消两种,因而决定了进料管道的配置不同。所谓连消,是指培养基连续进入消毒塔与饱和蒸汽直接混合,瞬时加热至130 ℃左右,经维持罐保温5～8 分钟即达灭菌效果,再经冷却后进而已空罐消毒的种子罐或发酵罐。实消是指将培养基直接打入罐内,然后通入饱和蒸汽使罐内物料温度升到121 ℃左右,罐内保温保压约30 分钟,使培养基连同罐体一起被灭菌。此种方法所需蒸汽负荷较大,但流程较短,操作也较简单,现抗生素行业实消较为常用。不过,许多厂家采取先于配料池中预热物料,再进入罐内实消的做法,以降低较为集中的蒸汽负荷。然而,由于输料离心泵汽蚀现象的存在使得配料池升温不可能太高,这对于降低蒸汽高峰负荷作用有限。若在输料泵后设预热器,可使物料温度升至85～90 ℃再进入罐内实消,这不仅降低了蒸汽负荷,而且由于取消了配料池内的蒸汽系统,改善了配料室环境。早期的进料方式实罐消毒时多为人工手持软管通过人孔加料,近年来随着抗生素发酵罐容积的增大,培养基量也较大,且一般为预热后物料,故多采用固定管路进料。进料管路有时配在罐体上封头,有时位于罐体下部与放料管路共用一个管口,但不论从上部还是下部接管,实罐消毒时的培养基进料管道与罐体连接部分应能保证与罐体同时消毒为无菌状态。2. 2 　移种管路 一级种子罐一般在罐体上封头开接种口接种,该接种口设计时一般为带盖管口,接种时将盖打开,用酒精擦拭消毒或用火焰灭菌后将摇瓶种子液直接倒入罐内。从一级种子罐至次级种子罐及至发酵罐间移种管道,其配置方式一般为管路两端均设置双阀,并于两阀之间接入灭菌蒸汽和放净口,接种管路靠近罐体的阀门与罐体内物料同时灭菌,操作时,灭菌蒸汽从双阀之间进入罐体。每一次种子罐间及种子罐至发酵罐移种操作前,均需对移种管路进行灭菌。2. 3 　补料管路 多数抗生素发酵过程中需向发酵罐中补充培养基或对生产过程影响较大的物料,以满足菌种生产所需的碳源、氮源、葡萄糖等养分及维持PH 恒定和消除泡沫等。由于发酵生产是连续的,多个发酵罐的补料管道一般由补料主管道上接出,而系统主管不可能随每一个发酵罐放罐终止运行,一般在几个罐批后定期灭菌或根据生产情况需要消毒灭菌时才进行补料管道灭菌。因而,补料管道配管时设计时一般采用分支管路设隔断阀的方式进行分割,这样既保证管道能随罐体一起灭菌,又要保证管道单独灭菌操作时不至影响发酵罐的正常生产。

1.效价如何定义的？2.如何测定效价？3.购买标准品随带的质检报告中是否应该有效价的说明？4.使用抗生素过程，一般怎么方便快速的测定效价？5.请您把有关效价的只是给出，谢谢。我先把我了解的放在这儿。抗生素的计量单位 抗生素依性质不同，分别以重量单位或效价单位来计量。 （1）理论效价 理论效价是指抗生素纯品的重量与效价单位的折算比率。一些合成、半合成的抗生素多以其有效部分的一定重量（多为1μg）作为一个单位，如链霉素、土霉素、红霉素等均以纯游离碱1μg作为一个单位。 少数抗生素则以其某一特定的盐的1μg或一定重量作为一个单位，例如金霉素和四环素均以其盐酸盐纯品1μg为1单位。青霉素则以国际标准品青霉素G钠盐0.6μg为1单位，参见表2-2。 表2-2一些常用抗生素的理论效价表 链霉素碱 1000单位／mg 链霉素硫酸盐 798单位／mg 土霉素碱 1000单位／mg 土霉素碱（含二分子结晶水） 927单位／mg 土霉素盐酸盐 927单位／mg 红霉素碱 1000单位／mg 红霉素碱（含二分子结晶水） 953单位／mg 红霉素乳糖酸盐 672单位／mg 金霉素盐酸盐 1000单位／mg 四环素盐酸盐 100O单位／mg 四环素碱 1082单位／mg 青霉素钠 1670单位／mg 青霉素钾 1598单位／mg 普鲁卡因青霉素 1009单位／mg 苄星青霉素（长效西林） 1211单位／mg 新霉素 1000单位／mg 卡那霉素 1000单位／mg 多粘菌素B 10000单位／mg 庆大霉素 1000单位／mg 巴龙霉素 1000单位／mg 说明：表中各抗生素的理论效价系折算的标准。各抗生素的盐类的理论效价是根据标准计算出来的。 非合成的抗生素通常采用特定的单位来表示效价，如制霉菌素等，不采用重量单位。 （2）原料含量的标示 理论效价是指抗生素纯品的效价单位与重量（一般是mg）的折算比率。但实际生产出来的抗生素原料都含有一些许可存在的杂质，不可能是“纯品”。如乳糖酸红霉素的理论效价为672单位／mg。而中国药典规定此药按干燥品计算，每1mg的效价不得少于610个红霉素单位。所以产品的实际效价（含量）在610单位／mg～672单位／mg之间，需要在瓶上标出具体数字。 在制备制剂时需进行计算，如用效价为650单位／mg的乳糖酸红霉素原料来制备25单位／mg的软膏1300g，需取用原料量计算如下： （25单位/mg）/（650单位/mg）× 1300g＝50g（称重） （3）处方计量单位 药剂制品标示的和处方上开写的抗生素重量单位数均指该抗生素的纯品量。如硫酸链霉素1g，系指含有链霉素纯品1g（1百万单位），因此又称为重量效价单位。如果处方开写硫酸链霉素1g，需用称重法取药时，则应按原料实际含量，通过计算求得应称取的重量。

大家好，鄙人想向大家请教有关抗生素耐药的相关问题： 1. 望大家推荐经典文献 2. 介绍有关抗生素的好的学术杂志 3. 抗生素耐药的牛B的研究课题组 请大家多多支持回帖，谢谢！ Best wishes to everyone!

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=25638]大环内酯类抗生素的分析方法[/url]

[color=#444444]最近做的一个项目涉及到四环素这类抗生素的液相检测，但是之前没有做个这个药物的分析工作？有否有大神知道这类抗生素用什么检测器？进液相需要注意些什么？药典录入的检测方法可信么？（未标明流动相流速）[/color]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=70930]抗生素合集[/url]包含了抗生素液相分析方法及谱图,以及2005版药典新增得很多不易分开得药物也分得很好,感兴趣得可以传阅一下

日前，广州发表申明说：市环境监测中心站已迅速与中科院地化所等单位合作对一些水样进行检测分析并制订计划，“目前没有相关标准和规范的情况下，市环境监测中心站正在开展抗生素类指标检测方法研究，要对广州地表水中主要的抗生素进行监测。抗生素这个问题是越来越复杂，各地是不是应该检测呢？

随着人们生活质量的提高，食品安全问题越来越为广大消费者所关注，特别是农药和抗生素等药物残留问题更是广大消费者所关注的焦点问题。在食品安全这个全球关注的热点问题上，如何快速、准确地检测食品安全的问题已成为重中之重。抗生素具有哪些危害人们吃了有抗生素残留的肉、蛋、奶等食物后，会造成抗生素在人体内蓄积，使人产生对抗生素的抗性，引起各种组织器官病变，甚至癌变。对人类健康的危害对人体肠道菌群的影响人体肠道菌群是一个平衡的生态系统，对保持人体健康起着非常重要的作用。如果人们长期摄入含有抗生素的食品后，会使敏感菌群被杀灭或抑制，而耐药菌群却大量繁殖，从而打破原来的平衡状态造成菌群失调，这就可能会导致长期腹泻或营养不良，严重时还可造成耐药菌感染，给临床治疗带来困难。引起过敏和变态反应青霉素、四环素、磺胺类及某些氨基糖苷类抗生素能使部分人群发生过敏反应和变态反应，氯霉素可破坏机体造血功能，诱发再生障碍性贫血。经常食用含抗生素的动物性食品，轻者出现皮肤瘙痒、荨麻疹、关节肿痛，重者导致血管性水肿、休克、甚至死亡。导致细菌耐药性增加目前，由于抗生素的广泛使用，使得细菌的耐药性不断增加，食用含抗生素残留的动物性食品后，人体内细菌的耐药性增加。同时，动物体内的耐药性菌株的耐药性也可能转移到人体细菌中，从而对人类产生极大的危害。其他毒害作用动物性食品中残留的链霉素进入人体后可引起肾损害和听神经受损。长期摄入氨基糖苷类抗生素残留严重超标的动物性食品，可损害第8 对脑神经，出现头晕、头痛、耳鸣、耳聋、恶心、呕吐等症状。四环素会引起肝损伤，与骨骼或牙齿中的钙质结合后，使骨骼及牙齿黄染，还可影响儿童的生长发育。邻氯青霉素、头孢菌素等可引起人类免疫性疾病；氯霉素会损害人的造血功能，抑制蛋白质摘要：文章综述了抗生素残留的来源与途径, 介绍了抗生素残留对人类健康、乳制品生产、环境及其他方面造成的危害，分析了检测抗生素残留的方法，包括微生物检测法、仪器检验法、免疫学分析法等，并指出了这些检测方法的研究现状与发展前景。对乳制品生产工艺的危害由于含有抗生素的奶无法制成酸奶、奶酪等一些高质量牛奶产品，容易造成大量原料奶的浪费，给乳品企业造成经济损失。另一方面，一些不法奶户在高温季节为防止鲜乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，从而造成乳中抗生素残留，对人体也造成了很大的危害。对环境的危害一些性质稳定的药物被排泄到环境中仍能稳定存在很长时间，从而造成环境中的药物残留。链霉素、土霉素在环境中不易降解；螺旋霉素低浓度降解很快，但浓度高时需6 个月才能降解完；杆菌肽锌在有氧的条件下完全降解需3～4个月，在无氧环境中降解所需要的时间更长。据报道，动物养殖场污水处理池中红霉素、复红霉素、磺胺甲唑质量浓度可达69g/L，这些药物的排放污染了环境，破坏了生态平衡。

能有效对抗炭疽杆菌和耐抗生素超级病菌2013年08月01日 来源： 科技日报 作者： 华凌 科技日报讯 据英国广播公司7月31日报道，美国加州大学圣地亚哥分校斯克里普斯海洋学研究所的一个研究团队，从加利福尼亚海岸沉积的海洋微生物中提取出一种全新的罕见化合物，可以有效杀灭耐抗生素极强的细菌：炭疽和超级病菌MRSA。该研究成果的详细信息刊登在最新一期的德国《应用化学》杂志上。 炭疽病由炭疽杆菌所致，是一种人畜共患的急性传染病，人会因接触病畜及其产品或食用病畜的肉类而发生感染；超级病菌MRSA即耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，是能够引起各种感染并可抵抗最强力的抗生素及药物，也就是说使用多种抗生素都无法杀死它。 最近，美国疾病控制和预防中心主任托马斯·弗里登对耐抗生素细菌所带来的风险发出警告，与此同时，英国首席医疗官萨莉·戴维斯把这类细菌描绘成是一个威胁国家安全的“定时炸弹”。美国传染病学会对抗生素还击这种细菌耐药性力量的发展速度不足表示关注。无疑，这一最新发现显得尤为令人可喜。 斯克里普斯研究所海洋学和制药科学特聘教授威廉·凡尼克说，我们将这种全新的、不寻常的化合物命名为炭疽毒素（anthracimycin），其具有独特的化学结构。他们利用多种分析方法，发现炭疽毒素含有一种不同寻常的环系统，其中一个环含有14个碳原子，另两个环各含有6个碳原子。这种大环内酯物可能是通过聚酮途径生物合成。 不像任何先前报道的天然抗生素，新研究可能会引导测试和开发出一种新的抗生素药物。最初测试已证明，新化合物对于杀灭炭疽病即曾被担心用作生物武器的细菌具有效力。而且它还在对抗超级病菌MRSA方面表现出显著的活性。 凡尼克评价说：“这一发现补充了许多以前表明海洋细菌在基因和化学方面具有独特性的研究成果。这一研究提供的最新证据表明，海洋及其许多尚未开发的海洋区域，对于人类开发出用于治疗各种疾病的新材料及药物，是一个潜在的巨大资源宝藏。”（华凌） 《科技日报》（2013-08-02 二版）

RT：讨论：抗生素的危害与分析方法，欢迎大家参与共同讨论。

请问：黄霉素（抗生素）有仪器分析方法吗？能提供吗？谢谢！

-内酰胺类化合物除外。对于这些抗生素，为防止假阳性反命的发生，通常不检测其抑 制特性,而检测其中的13 -内酰胺酶.因为菌株的抑制剂除抗牛素外还有i污剂或消毒 剂等其他物质。噬菌休或其他热敏性抑制剂可能产生假阳件结果，在确认试验前对样品 进行热处理便可以排除：这类试验通常有对比结果，所以必须按要求规范实验操作。is 法中测试的灵敏度和痕贵抗生素的检出限取决丁特定测试条件下选用菌株的敏感性。常 用的对奶中抗生素的常规分析方法是纸片分析法和染色剂还原法二本书对这些方法举例 迸行r描述。另外，也可使用快速现场测试法,这些方法町用于农场或平台放行检测。检 测芦-内酰胺抗生素的SNAP测试(美国缅因州IDEXX实验室)就是其屮的一个例子，它 可在lOmin内得到检测结果：Bell等人也证明该方法是一种可靠的现场检测方法。 (1)片碟法将敏感菌株接种于琼脂培养基后倾倒平板,并使之凝固，然后将浸泡在 样品中的小圆形滤纸片放在琼脂忐面。将平板智于适当的温度下培养，直至长出菌落。 若有抗生素或其他抑制物渗人培养基，则在纸片周围会出现清晰的抑菌圏。通过与巳知 对照平板抑制圈直径的比较（条件是严格的标准状态），可得到牛奶中抗生素的含量 所有敏感菌株均可用于此项试验，如藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌 改进的方法使用了嗜热的嗜热脂肪芽孢杆菌作为敏感阐株，其优点为平板可在55℃培养，能较快 地得到检测结果。AOAC官方规定片碟法检测内酰胺抗生素时所使用的敏感菌株为 嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌(AOAC, 1995)

-内酰胺类化合物除外。对于这些抗生素，为防止假阳性反命的发生，通常不检测其抑 制特性,而检测其中的13 -内酰胺酶.因为菌株的抑制剂除抗牛素外还有i污剂或消毒 剂等其他物质。噬菌休或其他热敏性抑制剂可能产生假阳件结果，在确认试验前对样品 进行热处理便可以排除：这类试验通常有对比结果，所以必须按要求规范实验操作。is 法中测试的灵敏度和痕贵抗生素的检出限取决丁特定测试条件下选用菌株的敏感性。常 用的对奶中抗生素的常规分析方法是纸片分析法和染色剂还原法二本书对这些方法举例 迸行r描述。另外，也可使用快速现场测试法,这些方法町用于农场或平台放行检测。检 测芦-内酰胺抗生素的SNAP测试(美国缅因州IDEXX实验室)就是其屮的一个例子，它 可在lOmin内得到检测结果：Bell等人也证明该方法是一种可靠的现场检测方法。 (1)片碟法将敏感菌株接种于琼脂培养基后倾倒平板,并使之凝固，然后将浸泡在 样品中的小圆形滤纸片放在琼脂忐面。将平板智于适当的温度下培养，直至长出菌落。 若有抗生素或其他抑制物渗人培养基，则在纸片周围会出现清晰的抑菌圏。通过与巳知 对照平板抑制圈直径的比较（条件是严格的标准状态），可得到牛奶中抗生素的含量 所有敏感菌株均可用于此项试验，如藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌和嗜热脂肪芽孢杆菌 改进的方法使用了嗜热的嗜热脂肪芽孢杆菌作为敏感阐株，其优点为平板可在55℃培养，能较快 地得到检测结果。AOAC官方规定片碟法检测内酰胺抗生素时所使用的敏感菌株为 嗜热脂肪芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌(AOAC, 1995)

有分析内酰胺抗生素液相分析的朋友不妨一看,有用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=70916] 内酰胺抗生素液相分析方法[/url]

http://www.biomart.cn//upload/userfiles/image/2011/12/1322738581.png2011年12月，美国俄勒冈健康与科学大学(Oregon Health & Science University)耳聋科学家彼得-斯特格(Peter Steyger)在《自然》杂志出版集团的《科学报告》(Scientific Reports)期刊上发表一篇突破性的个人研究论文，第一次证实氨基糖苷类抗生素能够跨越保护感觉毛细胞免受伤害的内耳血迷路屏障，从而杀死能够让我们产生听力的感觉毛细胞。这就给科学家们研究为什么这种特定类型抗生素导致耳聋带来新的启示。而48年前也正是这类抗生素导致当时还是婴儿的斯特格耳聋。除了其他方法之外，人们广泛地使用氨基糖苷类(aminoglycoside)抗生素来阻止发展中国家人们患上结核病同时还广泛用来阻止危害生命的细菌感染，尤其是对全世界早产儿而言。斯特格和共同作者李洪哲(音译)研究长期以来大家都知道的使用氨基糖苷类抗生素带来的重要问题---这类抗生素如何进入内耳并且杀死能够让我们产生听力的感觉毛细胞(sensory hair cells)。杀死这些感觉毛细胞是耳聋的一个主要原因。六十年来，科学家们一直探究这类抗生素如何进入内耳。斯特格和李洪哲的这篇论文尽管还不能提供一个明确的答案，但也是给出迄今为止最强有力的证据：这类抗生素跨越保护感觉毛细胞免受血液中潜在性损伤性组分伤害的内耳血迷路屏障(blood-labyrinth barrier)。血迷路屏障主动地运输重要的矿物质和营养物---比如离子、氨基酸和葡萄糖---到内耳以便发挥灵敏的听觉功能。斯特格说，这些氨基糖苷类抗生素有可能利用这些营养物运输通道来“偷渡”这些药物到内耳。因为斯特格已经知晓主要的偷渡路径，他和其他科学家们就能够测试单个营养物运输通道来鉴别推动氨基糖苷类抗生素跨越血迷路屏障的机制。因此，斯特格的这篇论文是通往终极目标的一次意义重大的里程碑。一旦完全揭示其中的机制，人们就可以阻断这些药物偷渡到内耳，从而阻止杀死毛细胞和随后的听力丧失和耳聋。斯特格说，“在利用这类抗生素杀死细菌的同时，我们应该能够施加一种抑制剂保护耳朵不受它们的伤害，从而挽救病人的听力。”单在美国，大约80%的早产儿被施予氨基糖苷类抗生素来阻止将可能杀死他们的感染。斯特格说，更少比例的受到感染的早产儿必须持续几天服用抗生素，因而处于丧失听力的极大危险当中。斯特格说，就这些婴儿和其他病人而言，“如果我们能够发现一种阻断剂，那么在美国我们每年就能够挽救最高达5万个人的听力”。斯特格的听力丧失要追溯到他14个月大时感染上脑膜炎。当时，他的家人和他住在英国斯托克波特市。他接受得到广泛使用的第一批氨基糖苷类抗生素之一的链霉素治疗。链霉素虽然拯救了他的生命，但是也导致他听力重度到极重度丧失。斯特格的研究得到美国国家卫生研究院分支机构国家耳聋和其他沟通障碍研究所的资金资助。在这项重要的研究之后，斯特格和他的实验室已经正在研究氨基糖苷类抗生素和其他毒性药物跨越血迷路屏障的精确分子机制。随着他们了解得越多，他们希望开发新的更加有效的策略来阻止药物引起的听力丧失。他说，因为“这些药物导致的听力丧失是完全可以预防的。我的研究小组和我讲继续努力开展研究以便找出阻止它的方法”。

英国出台新规限制抗生素治小病 发布来源:浙江省食品药品监督管理局 时间:2008-07-24 英国国家医疗服务系统所属“全国卫生与临床学会”出台新规，对抗生素药品的使用提出更严格规定。 英国《每日电讯报》２３日报道，根据新规，英国医生将不得给患有轻微耳道感染、咽喉痛、扁桃体发炎、感冒、咳嗽、鼻窦炎、支气管炎的病人开具抗生素类药品处方，取而代之的是建议患者回家休息或服用止痛片。 新规 全国卫生与临床学会制定的用药新规指出，如果不是处于特别危急状况，医生一般不得给上述病人开抗生素类药品，因为这类药品不但“对缓解症状没什么帮助，还会产生不小的副作用”。 规定说，如果一段时间后，病人病情没有好转甚至出现恶化，医生才能考虑给病人提供抗生素类药品。假如病人不愿意使用这样的诊疗程序，医生也可以先开好抗生素处方，但要求病人在至少一周之后，有需要的情况下才去购买。 根据新规，医生可以为２岁以下双耳感染或耳朵流脓的患儿开抗生素药品；那些扁桃体炎并发其他疾病的患者也可服用抗生素。 此外，如果患者有出现其他并发症的危险，或患有心、肺、肾、肝等脏器疾病或免疫系统疾病，医生也可为他们开抗生素药品，并进行进一步检查。 新规定还对６５岁和８０岁以上病人如何使用抗生素分别作出说明。 滥用 全国卫生与临床学会副执行官吉莲?伦说，这是英国在抗生素应用方面的首个指导原则。医务人员将通过判断患者需要以控制抗生素的使用量。 《每日电讯报》说，推出新规之前，英国的家庭医生通常会建议普通呼吸道感染病人服用抗生素。仅在去年，英国医生就开出了３８００万张抗生素处方。英国人服用抗生素的花费高达１．７５亿英镑（约合３．４８亿美元）。其中三分之二的抗生素处方针对呼吸道感染。 英国卫生部首席医疗官利亚姆?唐纳森说，滥用抗生素容易使病菌产生抗药性。有“超级病菌”之称的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌近期在英国各医院的蔓延就是滥用抗生素的结果。 今年年初，英国卫生大臣艾伦?约翰逊曾在全国范围内开展宣传活动，呼吁民众不要在咳嗽或感冒时服用抗生素，因为它对这两种病几乎无效。 　　顾虑 报道说，一些医生担心，如果拒绝给病人开抗生素处方，可能会招致病人的愤怒。因为在许多人脑海中，抗生素能帮助治好咽喉疼痛等疾病的想法根深蒂固。 英国皇家全科医师学院教授史蒂夫?菲尔德教授说，医生说服患者暂时不使用抗生素并非易事，服用抗生素在某些人看来是必不可少的。因为轻微的感染不管吃不吃药本身就可以自愈，而吃了药的人们就会以为这是抗生素的功效。 不过，专家说，控制抗生素使用的规定试行一段时间以来收效良好，绝大部分患者听从医生建议，最终没有使用抗生素。（荆晶） 来源：新华网

长期使用抗生素会造成畜禽免疫力下降，引起畜禽内源性感染和残留，而食用过抗生素超量的畜产品的人，会产生抗药性，或大量蓄积而对机体产生毒害。近年，牛奶中的抗生素残留成为人们日益关注的话题。 　　奶牛乳腺炎是世界奶牛养殖业中发病率最高、流行最快、造成损失最大的疾病之一。根据美国奶协统计，亚临床型奶牛乳腺炎发病率高达50%，而总发病率可占整个牛群的70%。　　抗生素是目前国内外普遍采用的一种治疗奶牛乳腺炎的手段。欧美等国多年前明文禁止抗生素残留超量的牛奶上市。1990至1991年期间，美国奶业基金会规定超过允许量标准的牛乳及其乳品全部废弃处理，不得食用。近年来，我国也颁布了相关管理条例，但是牛奶中抗生素残留问题仍然不时发生。　　目前抗生素的检测方法，按照检测原理和使用的仪器可分微生物法、免疫法、理化仪器法等3类：　　微生物测定原理是根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用，来定性或定量确定样品中抗微生物药物残留。微生物法的优点是费用低，一般实验室都能操作。缺点是时间长、显色状态判断通过肉眼辨别、易产生误差、对微红色者无法做出准确判断、操作复杂。　　免疫分析技术最突出的优点是操作简单，速度快、分析成本低。免疫测定法取样量小，前处理简单、容量大，仪器化程度低，检测牛奶的灵敏度高。是目前奶牛场和牛奶公司使用最广泛、快速、灵敏的检测抗生素残留的方法。目前部分抗生素已经建立了免疫测定法，如磺胺二甲基嘧啶、氯霉素、沙拉沙星、链霉素、四环素、莫能菌素等。该法适用于现场监控和大量样品的筛选，具有广阔的应用前景。但是免疫法直接测定也存在样本信息量太少，假阳性和理化分析技术选择性低等不足，当样品中含有与某类抗生素结构相似的化合物时，可能出现免疫交叉反应而呈现假阳性结果。　　最常用的理化仪器分析方法是高效液相色谱和质谱联用技术。高效液相色谱法(HPLC)是目前广泛应用的一种理化检测方法，分离速度快、效率高和操作可自动化，已成为大多数抗生素残留的常规分析方法。由于奶样品中药物残留量少，背景干扰往往很严重，因此一般都通过柱前衍生反应来提高紫外检测器检测残留的灵敏度。目前，HPLC方法已用于红霉素、庆大霉素、羧苄青霉素和吩羧青霉素残留的测定。　　近期，国外在抗生素残留检测方法上正在由各种分析技术联用代替单一的色谱技术。例如检测氯霉素的联用技术有液相色谱/质谱联用（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/质谱联用（GC-MS）、高效液相色谱/光阵列检测器（HLPC/PAD）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/电子捕获检测器（GC-ECD）等，目前[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]已进入实用阶段。　　目前国家食品质量安全监督检验中心研制出一种液相色谱／离子阱多级质谱联用仪，它可完成对复杂基体的定性及定量分析。适于分析食品、小分子量药物、药物代谢产物、农药、除草剂等样品。

如果牛奶中含有抗生素，不但对消费者有较大的危害，对于乳制品厂商也有不利的影响。虽然可以利用市面上的牛奶分析仪与乳制品检测仪检测出来，但是并不普及。其危害主要有以下几个方面：(1) 有些人对抗生素过敏，食用含有抗生素的乳制品会造成不同程度的过敏反应，严重的可能危及生命。(2) 长期食用含有抗生素的乳制品，相当于长期低剂量摄入抗生素，这样会使人体内的细菌产生抗药性，给今后患病时使用抗生素治疗带来不利的影响；另外还会破坏人体内正常菌群的平衡状态，使菌群失调，甚至造成二重感染，使重症患者病情难以控制。(3) 牛奶中残留的抗生素会影响牛奶的品质，同时也影响牛奶的发酵，致使其深加工制品，如黄油、酸奶、奶酪等的产量和质量降低，给生产者造成经济损失。(4) 一些性质稳定的抗生素被排泄到环境中会造成环境污染，破坏生态平衡。2010 年底到 2011 年初闹得沸沸扬扬的“超级细菌”问题就是典型的抗生素滥用的后果之一。通过牛奶分析仪和乳制品检测仪可以检测，不过如果长期食用含有抗生素的乳制品，人体内很可能出现“超级细菌” 这样人们在需要使用抗生素治疗时就会面临无药可用的状态，这样的后果是很严重的。

卫生官员惊恐地发现，细菌开始对一种强有力的药物——碳青霉烯类抗生素出现耐药性，而该抗生素已是人们最后可用的为数不多的药物。一般而言，身居高位的公共卫生官员都会试着回避预警性的描述。因此，前不久Thomas Frieden和Sally Davies提出的警告令人们十分担忧。Frieden和Davies表示，一个健康“噩梦”和“灾难性的威胁”即将到来。相关机构正在关注一种鲜为人知的抗生素耐药细菌的迅速增加，这种细菌属于耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CREs）。《自然》杂志报道称，英国首席医疗官Davies将CREs描述成堪比恐怖主义的威胁。“我们面临一个非常严峻的问题，亟须预警。”美国疾病控制和预防中心（CDC）主任Frieden说。他们的可怕措辞并非耸人听闻。CREs能感染膀胱、肺和血液，可能引发致命的感染性休克，几乎一半感染者死亡。它们能逃脱几乎所有抗生素的打击，其中也包括碳青霉烯类抗生素，这种药物曾被认为是细菌治疗的终极手段。英国发布的一份分析报告称，如果抗生素无效，诸如髋关节置换等常规手术可能要以1/6的死亡率告终。

各位专家好！我测水环境中抗生素的含量，由于受采样条件限制，短时间内完成样品的前处理全部过程（水样过HLB柱后，清洗，抽干，马上洗脱，氮吹仪吹干，定容）有些困难。因此想请教一些关于样品前处理的问题。 1.水样过Oasis HLB（500mg,6cc)柱后，用10ML超纯水清洗杂质并抽干，这时HLB柱能放低温保存至检测再洗脱吗？会不会影响回收率？ 2.还是做到洗脱这一步，把洗脱液放低温中避光保存至分析再做下一步处理呢？如果能这样做保存时间为多久？谢谢！

长期以来，人们对于病原菌耐药的认识基本上停留在特定病原菌对特定抗生素的耐药机制，以及特定抗生素对病原菌的抑菌机理上。然而相关研究表明，在抗生素使用与病原菌耐药水平之间存在着一种宏观的量化关系，即一定范围内的抗生素使用可以导致病原菌整体耐药水平以及耐药菌感染率的变化，这种关系就是抗生素与病原菌之间的量化关系。 有关抗生素与病原菌之间量化关系研究的历史不长，而对其集中、深入的研究也只是近几年才展开的。在发达国家，特别是对抗生素使用严格控制的北欧国家此类研究开展较多，而在发展中国家则基本为空白。造成这一领域研究起步晚，发展不均衡主要有两方面因素。 首先，相关研究需要通过一定范围内大样本的调查，收集、处理各种病原菌和抗生素使用的相关数据。在发达国家，有关病原菌耐药和抗生素使用的监测机构健全，可以方便地获取和处理大量的相关数据，加之有流行病学、统计学、药理学、微生物学以及临床医学等多学科的协作，可以深入、细致、及时地研究抗生素使用与病原菌耐药之间的量化关系。 而在发展中国家，相关的监测机构不健全。以国内为例，目前各级医疗机构有关病原菌耐药的数据和抗生素使用的数据，由不同的职能科室、部门管理，信息交流困难，导致了我们在这一领域中的研究远远落后于发达国家。 第二，不同抗生素剂量单位以及常用剂量差别很大，在大范围研究中无法比较和叠加。早期相关研究只能以抗生素的使用率和抗生素的费用消耗为指标，不能准确反映抗生素的实际使用情况。为解决这一难题，人们用成人每日常用剂量作为标准剂量，将不同抗生素的消耗量换算为统一标准单位，并命名为每日约定剂量（defined daily doses，DDD），以使用的DDD数表示抗生素的消耗量。每一种抗生素消耗量换算成DDD后可以比较和叠加。WHO于1996年推荐采用此方法来研究、监测抗生素的使用情况。正是在这一标准建立后，相关研究在短时间内取得了很大进展。这一领域的研究大致分为以下二类： 1、针对社区居民的大范围研究 此类研究的对象多为一个地区、一个国家，甚至可以是对多个国家的超大规模研究。研究结果对于指导相关国家和地区制定、修改控制抗生素使用的法规，检验相关控制措施的有效性具有重要指导意义。通过不同国家的对比研究还可以探讨自然条件、环境因素、社会因素、经济发展水平对抗生素使用与病原菌耐药水平之间量化关系的影响。 瑞典在1994年设立专门机构，率先启动了一项针对抗生素使用与病原菌耐药的全国性系统工程STRAMA，采取有针对性的措施消除抗生素不合理的使用，若干年后，瑞典抗生素的消耗量减少了22%，病原菌耐药水平也明显降低。 2、针对医疗机构的小范围研究 此类研究主要关注不同医院、不同病区、不同基础疾病条件下抗生素使用与病原菌耐药之间的量化关系，发现并证实了多种抗生素的消耗量与常见病原菌的感染率和耐药率之间存在密切的关系。 此类研究的重点通常是临床常见、对患者威胁最大的病原菌，如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎球菌和肠球菌，以及临床重点关注的抗生素，如万古霉素、大环内酯类抗生素和第三代头孢菌素等。其研究结果对于指导临床抗感染治疗即控制病原菌耐药水平的上升具有重要实用价值。 一项研究采用多元回归的方法，分析了以色列一家医院6个内科病区抗生素使用与病原菌耐药的数据，结果表明，这些病区阿米卡星和第3代头孢菌素的消耗量与临床耐药菌感染率密切相关。 目前只有为数不多的研究通过改变临床抗生素的使用，降低病原菌的耐药水平和耐药菌的感染率，可以说是这一领域研究的前沿，也是这一领域探索者的希望所在和最终目的。 Landman等通过减少医院中头孢菌素、亚胺培南、克林霉素和万古霉素的使用，增加含β-内酰胺酶抑制剂抗生素的使用，成功地降低了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐头孢他啶肺炎克雷伯菌的感染率。 近期研究还发现，临床增加氨苄西林/舒巴坦的使用量可以明显降低奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌的耐药水平；而增加头孢吡肟的使用量可以降低MRSA的感染率。 有研究者曾对其所在医院烧伤病区抗生素使用和病原菌耐药的相关数据进行了统计分析，发现含β内酰胺酶抑制剂类抗生素的使用量与金黄色葡萄球菌耐药水平呈负相关。此外，他们目前已累积了该院烧伤病区8年来临床抗生素使用和病原菌耐药的全部数据，并建成了查询方便的数据库，为进一步进深入研究奠定了基础。 总之，抗生素使用与病原菌结构和耐药水平之间量化关系的研究对于指导临床抗感染治疗、合理使用抗生素，以及制定控制抗生素使用的相关法规具有重要意义，但目前在这一领域有许多方面有待进一步探索。目前国内有关抗生素和病原菌的相关信息的交流存在诸多障碍，这需要包括医疗机构管理者、相关专家以及临床医师共同努力，加强信息交流，通过深入研究抗生素使用与病原菌耐药之间的量化关系，为指导临床抗感染治疗，降低病原菌的耐药水平提供具有实际应用价值的信息。

大家好！我测水环境中抗生素的含量，由于受采样条件限制，短时间内完成样品的前处理全部过程（水样过HLB柱后，清洗，抽干，马上洗脱，氮吹仪吹干，定容）有些困难。因此想请教一些关于样品前处理的问题。 1.水样过Oasis HLB（500mg,6cc)柱后，用10ML超纯水清洗杂质并抽干，这时HLB柱能放低温保存至检测再洗脱吗？会不会影响回收率？ 2.还是做到洗脱这一步，把洗脱液放低温中避光保存至分析再做下一步处理呢？如果能这样做保存时间为多久？谢谢！

[color=#444444]waters 的 BEH C18的柱子不是可以测定抗生素么？~[/color][color=#444444]为什么连上柱子后 不出峰呢？[/color][color=#444444]ps： 不连柱子接两通的时候是可以出峰的。[/color][color=#444444]也就是说质谱调谐是没有问题的。[/color]