【参数解读】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用毛细管电泳仪主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器,前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。由于毛细管电泳有很多分离模式,所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型,有些则具有专一性,只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100,Beckman PA800 plus,专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机,这个就只能做电色谱(CEC),类似于HPLC,通常需要有填充物质,但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪,其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪,只能用于蛋白质的分离分析,分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳(cIEF)。〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析:1、空气制冷和冷凝液制冷,哪个效果更好?冷凝方式,液体冷凝会比较稳定,液冷效果好。只是这样一来还要另外买冷凝液,增加分析成本。2、注意过样品盘的温控范围吗?你的仪器范围多大?什么范围内才比较好?控温范围直接决定了仪器的适用范围,控温的准确度又决定了重现性的好坏,所以,这个参数至关重要。安捷伦的样品温度最低高达10度,如果做生物样品的话就被动了。beckman最低4度,比较有优势。我见过最低温度的是Lumex的毛细管电泳仪,低到-10度。控温的最高值也值得关注,如果毛细管堵住了的话,常温经常冲洗不了,这是提高温度往往会有惊喜(越高越好)。3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响?如何评价毛细管的质量好坏?出口端长度是指的是窗口到出口端的距离吗?会影响场强和进样量。在出口端进样模式下,出口端的长度有重要意义,因为较长的有效距离能够提供更好的分离度。4、影响仪器分离度的因素有哪些?仪器的哪些参数会影响分离度?电压、温度、管长、管内径、溶液等;仪器的温度、电压等会影响。5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪,比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗?可以的,还可以和质谱联用。6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。常见的是管子容易断或者污染什么的,解决办法就是“换”和“洗”。SDS-MEKC很容易有气泡,解决办法就是超声。如果毛细管里面有气泡,引起断流,断流后如果不及时发现,积聚的热量就有可能烧坏毛细管。欢迎大家参与讨论,补充自己想交流的参数,说说自己的认识或者提出自己的疑问!!!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统,如图1所示。[align=center][img=,220,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212291520503108_4240_3237657_3.jpg!w220x174.jpg[/img][/align][align=center]图1 毛细管电泳仪器简图[/align][align=center]1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理[/align]检测器由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检测方法,但是受到仪器、单波长等因素的限制。目前应用最广泛的是二极管阵列(PDA)检测器。常规的检测器还有灵敏度很高的激光光热(LIP)和荧光(FL)检测器。近些年,在实际应用中还产生了激光诱导荧光(LIF)、有良好选择性的安培(EC)、通用性很好的电导(CD)助以及可以获得结构信息的质谱(MS)等多种检测器。迄今为止,除了电感耦合等离子体(ICP)和红外(IR)技术没有和CE联用,其他的检测方法均和CE联用并且大部分实现商品化。使用CE时应该根据所分析物质的特点,选择相应分离模式和检测器,以扬长避短,得到最佳分析效果。
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。 由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检测方法,但是受到仪器、单波长等因素的限制。目前应用最广泛的是二极管阵列(PDA)检测器。常规的检测器还有灵敏度很高的激光光热(LIP)和荧光(FL)检测器。近些年,在实际应用中还产生了激光诱导荧光(LIF)、有良好选择性的安培(EC)、通用性很好的电导(CD)助以及可以获得结构信息的质谱(MS)等多种检测器。迄今为止,除了电感耦合等离子体(ICP)和红外(IR)技术没有和CE联用,其他的检测方法均和CE联用并且大部分实现商品化。使用CE时应该根据所分析物质的特点,选择相应分离模式和检测器,以扬长避短,得到最佳分析效果。毛细管电泳仪的主要部件和其性能要求如下:(1)毛细管用弹性石英毛细管,内径50μm和75μm两种使用较多(毛细管电色谱有时用内径再大些的毛细管)。细内径分离效果好,且焦耳热小,允许施加较高电压,但若采用柱上检测因光程较短检测限比较粗内径管要差。毛细管长度称为总长度,根据分离度的要求,可选用20~100cm长度,进样端至检测器间的长度称为有效长度。毛细管常盘放在管架上控制在一定温度下操作,以控制焦耳热,操作缓冲液的黏度和电导度,对测定的重复性很重要。 (2)直流高压电源采用0~30kV(或相近)可调节直流电源,可供应约300μA电流,具有稳压和稳流两种方式可供选择。 (3)电极和电极槽两个电极槽里放入操作缓冲液,分别插入毛细管的进口端与出口端以及铂电极,铂电极接至直流高压电源,正负极可切换。多种型号的仪器将样品瓶同时用做电极槽。(4)冲洗进样系统每次进样之前毛细管要用不同溶液冲洗,选用自动冲洗进样仪器较为方便。进样方法有压力(加压)进样、负压(减压)进样、虹吸进样和电动(电迁移)进样等。进样时通过控制压力或电压及时间来控制进样量。 (5)检测系统紫外-可见光分光检测、激光诱导荧光检测、电化学检测和质谱检测均可用作毛细管电泳的检测器。其中以紫外-可见光分光光度检测器应用最广,包括单波长、程序波长和二极管阵列检测器。将毛细管接近出口端的外层聚合物剥去约2mm一段,使石英管壁裸露,毛细管两侧各放置一个石英聚光球,使光源聚焦在毛细管上,透过毛细管到达光电池。对无光吸收(或荧光)的溶质的检测,还可采用间接测定法,即在操作缓冲液中加入对光有吸收(或荧光)的添加剂,在溶质到达检测窗口时出现反方向的峰。 (6)数据处理系统与一般色谱数据处理系统基本相同。
大家在使用毛细管电泳仪时,,,有没有出现过检测的样品只有一种物质,,但却连续的出现峰,,或者出现倒峰的情况啊??我使用的是彩陆毛细管电泳仪cl1030 检测的是甲酰苯甲酸的标样,,,,,缓冲溶液使用的是己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十六烷基三甲基氯化铵的ph=10的缓冲溶液、求助给位大侠http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603101511_586582_3073431_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603101511_586581_3073431_3.jpg
高效毛细管电泳仪,做紫外检测的,要25微米、100微米的25米长,50、75微米的50米长,有必要吗??
SCIEX的毛细管电泳仪为什么会经常出现软件和仪器信号中断
我们所现要购买一台高效毛细管电泳仪,现请大家指点一二!国产的与进口的毛细管电泳仪有很大的差别吗?国产的差到哪儿了。进口的又是哪家的好!!!
2020年贝克曼毛细管电泳仪的灯有涨价了吗?据说到了2.2万了 谁知道 Q172387260
如果毛细管电泳仪长期不用,应该注意什么呢,就是如何才能保持仪器的较好性能,已经四个月没开机了!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif都不知道毛细管堵了没有,明天搞搞看!
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410081610_517225_1608710_3.jpg由于毛细管电泳有很多分离模式,所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型,有些则具有专一性,只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100,Beckman PA800 plus,专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机,这个就只能做电色谱(CEC),类似于HPLC,通常需要有填充物质,但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪,其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪,只能用于蛋白质的分离分析,分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳(cIEF)。所以这里只以某个仪器参数举例,当然大家有其他仪器参数,也可以跟帖讨论。◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆列举部分仪器的个别参数,仅供参考:技术参数:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410081612_517231_1608710_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410081612_517232_1608710_3.jpg〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析:1、空气制冷和冷凝液制冷,哪个效果更好?2、注意过样品盘的温控范围吗?你的仪器范围多大?什么范围内才比较好?3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响?如何评价毛细管的质量好坏?4、影响仪器分离度的因素有哪些?仪器的哪些参数会影响分离度?5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪,比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗?6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。欢迎大家参与讨论,补充自己想交流的参数,说说自己的认识或者提出自己的疑问!!!往期回顾:【参数解读】液相制备色谱仪的技术参数解读与使用
1. 分离模式毛细管电泳根据分离模式不同可以归结出多种不同类型的毛细管电泳,见表1。毛细管电泳的多种分离模式,给样品分离提供了不同的选择机会,这对复杂样品的分离分析是非常重要的。表1 毛细管电泳类型[img=,690,458]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212291514512122_3127_3237657_3.png!w690x458.jpg[/img]2. 操作方式毛细管电泳可以按操作方式重新分为手动、半自动及全自动型毛细管电泳。3. 分离通道形状按分离通道形状分为圆形、扁形、方形毛细管电泳等。4. 缓冲液的介质根据配制缓冲液的介质的不同,可以把CE分为水相毛细管电泳和非水毛细管电泳(NACE)。NACE是以有机溶剂作介质的电泳缓冲液代替以水为介质的缓冲溶液,增加了疏水性物质的溶解度,特别适用于在水溶液中难溶而不能用CE分离的物质或在水溶液中性质相似难以分离的同系物,拓宽了CE的分析领域。
请问哪位大哥,有参照JJG 964-2001,规程里面的方法,用维生素B6溶液做毛细管电泳仪的检测限测量和重复性测量。测量次数最好是10次。或可以提供可以正常使用的毛细管电泳仪,我寄样过去测量。非常感谢。我只需要出峰后的时间,峰高和峰面积以及噪声峰高。这是我的邮箱bat_31415926535@163.com。非常感谢。
毛细管电泳仪哪家的好?
小弟初次使用安捷伦 毛细管电泳仪7100。方法中规定,负极进样,7psi*s。 请问这个负极进样怎么设置到方法中?
我们是制药行业的,现在药典上要求要毛细管电泳做的项目很少,只有EP 上有些项目我们有涉及到,现在我负责这台仪器,除了两个区带电泳方法外就是测定等电点和糖测定,而且做的都不是很稳定,各位都运用毛细管电泳仪做些什么呢?怎么才能利用好这台仪器呢,真是很迷茫啊!请各位赐教!
我们的毛细管电泳是自己搭建的,用的是激光诱导荧光检测器,进样一直不出峰,想问一下如何检查是否正常?进荧光素?用什么缓冲
Agilent 高效毛细管电泳仪价钱大概是多少
目前使用的SCIEX家的毛细管电泳仪,想问一下CIEF的涂层毛细管有没有平替?因为货期太长,价格也高,谢谢各位大佬!
利用激光诱导荧光的检测方法做毛细管电泳实验时,基线总是过高,请问会是什么原因造成的呢?谢谢!
如题,最近在用安捷伦的毛细管电泳仪,英文界面不是很熟悉,(以前用伯乐的),故,请求安捷伦毛细管电泳仪使用教程,有的大虾给传份,多谢!
各位,毛细管电泳仪有单通道、双通道、多通道之分吗?
我是整毛细管电泳仪器装置的新手,想找一些也是从事毛细管电泳装置的朋友,以便以后向你们请教相关的知识和经验,看见后请加我为好友吧。谢谢啦!![em0809]
本人刚刚使用毛细管电泳,是北京宾达公司生产毛细管电泳仪,工作站是浙大的N2000,现在又两个问题请问大家:1.在采集数据之前进行的仪器零点校准,实在高电压压进行的还是未加高电压近进行校正?2.N2000工作站通道的两个接线口连在毛细管电泳的记录仪上还是积分仪上啊? 谢谢各位啦!
国内有出售高效毛细管电泳仪使用的涂层的毛细管吗?
[em09511]各位版友,请问你们是如何做毛细管电泳仪的期间核查的呢?你们的仪器有经过法定部门检定过吗?
pa800毛细管电泳仪数据运行结束后,怎么讲数据导入成empower的格式,并且导出
大家的毛细管电泳仪都是在哪里检定的啊?都做了哪些项目?很多计量院都说没法做,只能出一个检测报告啊!
我实验室刚刚购买了一台“毛细管电泳仪”1229-HPCE型,北京宾达公司生产。正在测试其中,所用试样为小檗碱溶液。问题是每次电泳之后,所显示的峰面积,偏差较大在10%-15%,请问大家原因是什末?操作时应注意哪些问题??
请问 PA800毛细管电泳仪在运行过程出现报错,显示sample cover opend是什么情况,sample cover 具体指仪器的哪个部位?求指教,谢谢
各位大侠们,,,我们实验室现有一台 彩陆高效毛细管电泳仪cl1030现在出现的问题是进样后电泳仪不出峰但是我直接把样品用注射器推进柱子 约5s,,,,而后再换上缓冲溶液 不加高压电 也可以看到样品的一个很大的峰出现这种现象的可能原因有哪些?????求助各位大侠