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自动特定蛋白即时检测分析仪

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  • 牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品嘛

    牛奶蛋白质分析仪可以用于检测乳蛋白制品。以下是详细解释和相关信息:  功能与应用:牛奶蛋白质分析仪是一种专门用于分析牛奶及其制品中蛋白质含量的仪器。它基于先进的生化分析技术,如比色法、光谱法或电化学法等,能够准确、快速地检测样品中的蛋白质含量。  乳蛋白制品的检测:乳蛋白制品,如奶粉、酸奶、奶酪等,其蛋白质含量是产品质量和营养价值的重要指标。牛奶蛋白质分析仪可以有效地检测这些乳蛋白制品中的蛋白质含量,为生产厂家提供准确的质量控制手段。  优点与特点:  准确性高:牛奶蛋白质分析仪具有高灵敏度和高准确性,能够确保测量结果的可靠性。  快速便捷:该仪器操作简单,使用方便,可以快速得出测量结果,提高检测效率。  适用范围广:除了牛奶及其制品外,还可以用于其他含蛋白质样品的检测,如豆类制品、肉制品等。  在乳品工业中的重要性:随着乳品市场的不断扩大和消费者对乳制品质量要求的提高,牛奶蛋白质分析仪在乳品工业中的重要性日益凸显。它可以帮助乳品企业提高产品质量、降低生产成本,同时为消费者提供更加安全、健康的乳制品。  综上所述,牛奶蛋白质分析仪是一种功能强大、应用广泛的检测仪器,完全可以用于检测乳蛋白制品中的蛋白质含量。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405271615421543_8284_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • [推荐]蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用zz

    褚福亮,王福生, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室 北京市 100039项目负责人 王福生, 100039 ,北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院全军艾滋病与病毒性肝炎重点实验室. fswang@public.bta.net.cn电话:010-66933332 传真:010-63831870收稿日期 2002-08-15 接受日期 2002-09-03摘要新近广泛应用蛋白质芯片(ProteinChipâ Array)系统成功鉴定出了一些重要疾病(如肿瘤和危害性较大的传染病)新的、特异性的生物标记(biomarkers),后者不仅在生物医学的基础方面具有重要的科学价值,而且在临床疾病的诊断、治疗和预防发挥重要的指导作用,显示了良好的发展前景.本文就表面增强的激光解析电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.此外,我们就蛋白质谱分析技术在病毒性肝炎、肝硬化和肝癌等一系列肝病方面的应用策略和前景进行了分析.褚福亮,王福生. 蛋白质谱分析方法特点及其在蛋白组学研究领域中的应用.世界华人消化杂志 2002 10(12):1431-14350 引言人类基因组计划已经进入后基因组时代-即功能基因组时代[1],作为基因功能的直接体现者-蛋白质,及其之间的相互作用越来越引起基础和临床科学家们的关注[2-6] .因为要彻底了解生命的本质,只把基因测出来还是不够的,还必须要了解其在生物生长、发育、衰老和整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及他们与疾病发生、发展和转化的规律[7-14] .正因为如此,有关上述问题的蛋白质组学研究成了今天生命科学最重要的焦点之一[15] .为了阐明蛋白质在上述生命现象中的作用和相关机制,人们设计了许多新的方法技术,如:二维电泳、质谱分析、微距阵列、酵母双杂交和噬菌体展示等,这些方法在一些特定的情况下,虽然显示出了他们各自不同的优点,但是同样也存在着较大的局限性,难以开展大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质等方面的分析,因而设计更全面、同时研究多种蛋白质相互作用的技术,在功能基因组和蛋白组学的研究中建立一个更有效的技术平台,成为本领域中优先关注的问题[16] .近来,美国Ciphergen(赛弗吉)公司研制的ProteinChipâ Array的仪器,并建立了一种新的蛋白质飞行质谱-表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(surface-enhanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra, SELDI-TOF-MS),已取得可喜的进展,筛选出了许多与疾病相关的新型生物标志,不仅为临床疾病的诊断和治疗等提供了新的选择,而且在基础科学、新药研制和疾病预防等方面具有广泛的应用前景[16-18] .本文就SELDI-TOF-MS相关的原理、特点、在临床和基础研究中的应用新进展和未来的发展趋势做一综述.1 ProteinChipâ Array系统和SELDI-TOF-MS的特点1.1 蛋白质芯片系统的组成和原理 蛋白质芯片系统由三部分组成:蛋白质芯片、芯片阅读器和芯片软件.供研究用芯片上有6-10芯池,不同的芯片表面上的化学物质不同,芯片表面分为两大类:一类为化学类表面,包括经典的色谱分析表面,如:结合普通蛋白质的正相表面,用于反相捕获的疏水表面,阴阳离子交换表面和捕获金属结合蛋白的静态金属亲合捕获表面;另一类称为生物类,特定的蛋白质共价结合于预先活化的表面阵列,可以用来研究传统的抗体一抗原反应,DNA和蛋白质作用,受体、配体作用和其他的一些分子之间的相互作用[19] . 根据检测目的不同,可以选用不同的芯片,或者自己设计芯片.将样本和对照点到芯池上以后,经过一段时间的结合反应,用缓冲液或水洗去一些不结合的非特异分子,再加上能量吸收分子(energy absorbing molelule,EAM)溶液,使样本固定在芯片表面.当溶液干燥后,一个含有分析物和大量能量吸收分子“晶体”就形成了.能量吸收分子对于电离来说非常重要.经过以上步骤,就可经把芯片放到芯片阅读器中进行质谱分析. 在阅读器的固定激光束下,芯片上、下移动,使样本上每一个特定点都被“读”到.激光束的每一次闪光释放的能量都聚集在该区一个非常小的点上(focused laser beam,聚焦激光束).这样,每个区都含有丰富的,可寻址(addressable)的位置.蛋白质芯片处理软件精确控制激光寻读过程.当样本受到激发,就开始电离和解除吸附.不同质量的带电离子在电场中飞行的时间长短不同,计算检测到的不同时间,就可以得出质量电荷比,把他输入电脑,形成图像[19].Ball et al [20]采用一种称为人工神经网络(artifical neural network,ANN)的算法处理出现的成千上万的峰,鉴定出三个分子量为13 454、13 457和14 278的生物标记分子,使疾病预测率达到97.1 %.1.2 ProteinChipâ Array芯片和SELDI-TOF-MS的特点 新型蛋白芯片与以往的蛋白芯片不同之处:SELDI-TOF-MS,他是在MALDI(matrix-assisted laser desorption/inionation)[21,22]基础上,改进后实行表面增强的飞行质谱.SELDI-TOF-MS优于MALDI-TOF表现为他不会破坏蛋白质,或使样本与可溶的基质共结晶来产生质谱信号.对SELDI-TOF来说,可以直接将血清、尿液、组织抽取物等不需处理直接点样检测[40] 由于一部分非特异结合的分析物被洗去,因而出现的质峰非常一致,有利于后期分析[23,24] . 与二维电泳相比:二维电泳分析蛋白质的分子量在30 KDa以上时电泳图谱较清楚,对在组织抽提物中占很大比例的低丰度的蛋白质不能被检出;其次,二维电泳胶上的蛋白质斑点很大一部分包含一种以上的蛋白质;而且,二维电泳耗时长,工作量大,对象染色转移等技术要求高,不能完全实现自动化.而SELDI-TOF在200 Da-500 KDa区间都可以给出很好的质谱,对一个样本的分析在几十分钟内就可以完成[19],处理的信息量远远大于二维电泳;对于低丰度物质,即使浓度仅attomole(10-18)的分子,只要与表面探针结合,就可以检测到,这也是二维电泳所不具备的[24,25] . 对于微距阵蛋白芯片来说,需要一种不破坏折叠的蛋白质构象的固定技术,再与另外的蛋白质反应,经检测莹光来观察蛋白质之间的作用[26] .而基于SELDI-TOF-MS的ProteinChip分析蛋白质不需溶解、不需染色、廉价、针对性强. 因而蛋白质芯片仪具有以下优势:(1)可直接使用粗样本,如:血清、尿液、细胞抽提物等[27] .(2)使大规模、超微量、高通量、全自动筛选蛋白质成为可能;(3)他不仅可发现一种蛋白质或生物标记分子,而且还可以发现不同的多种方式的组合蛋白质谱,可能与某种疾病有关[28] (4)推动基因组学发展,验证基因组学方面的变化,基于蛋白质特点发现新的基因.可以推测疾病状态下,基因启动何以与正常状态下不同,受到那些因素的影响,从而跟踪基因的变化[2,14,15] . 其存在的问题:对于不同的样本,根据检测的目标采取或者设计几种芯片,理论上可以把所有的相同性质蛋白质捕获,但是实际上仍有少量的分子没与表面探针结合.使用SELDI-TOF-MS,仅能给出蛋白质的分子量,不能给出C端、N端的序列,也没法知道蛋白质的构型,因此需要将蛋白质充分纯化后,用蛋白酶消化芯片上的蛋白质,分析肽段,再用生物信息学方法鉴定蛋白质序列[18,24] .另外,在国内,该芯片费用较高,分析质谱需要大量后续工作支持.

  • 【天研】牛奶蛋白质分析仪在乳制品生产线上有哪些应用

    牛奶蛋白质分析仪是一种专业的检测设备,主要用于对牛奶中的蛋白质进行快速、准确地分析。该仪器在乳制品行业中发挥着重要的作用,能够帮助消费者了解牛奶的质量和营养成分,同时也能为乳制品生产企业提供科学的指导,优化生产工艺,提高产品质量。  牛奶蛋白质分析仪的工作原理主要基于光谱分析技术,通过测量牛奶中蛋白质对特定波长光线的吸收来计算蛋白质的含量。该仪器具有操作简便、快速、准确等特点,可广泛应用于各类乳制品的生产、加工、质检等领域。  具体来说,牛奶蛋白质分析仪在乳制品生产线上具有以下应用:  原料奶检测:确保原料乳的质量符合生产要求,通过快速检测原料奶中蛋白质的含量,确保生产过程中的原料质量稳定。  加工过程控制:实时监测加工过程中蛋白质的变化情况,指导生产商及时调整工艺参数,确保产品品质。  产品质量检验:质检部门和乳制品企业可以利用牛奶蛋白质分析仪对市场上的乳制品进行抽检,判断其蛋白质含量是否符合国家标准。这有助于打击假冒伪劣产品,保障消费者的合法权益。  此外,牛奶蛋白质分析仪还可以检测牛奶中的其他营养成分,如脂肪、糖等,从而全面评估牛奶的营养价值。通过使用这种仪器,乳制品企业可以及时发现并解决生产过程中的问题,提高产品的竞争力,并保障食品安全。  总之,牛奶蛋白质分析仪是乳制品行业中不可或缺的重要检测工具,其在保障产品质量和消费者健康方面发挥着重要作用。如需更多信息,可以访问牛奶蛋白质分析仪生产厂商官网或咨询乳制品行业专家。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291700285525_1260_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 豆制品蛋白质检测仪有什么用

    豆制品蛋白质检测仪,通常也被称为大豆蛋白仪或大豆蛋白分析仪,是一种高科技设备,具有多方面的用途和应用价值。以下是对其用途的详细阐述:   一、核心功能   1. 快速准确测定蛋白质含量   高效性:豆制品蛋白质检测仪能够快速测定大豆及其制品中的蛋白质含量,极大地提高了检测效率。   准确性:采用先进的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术或其他高精度检测方法,通过测量特定波长的光吸收特性来推断蛋白质含量,确保了检测结果的准确性。   二、应用领域   1. 食品加工企业   在豆制品生产过程中,如豆腐、豆浆、素肉等的制作中,该检测仪可帮助企业确保产品蛋白质含量符合营养标准和口感要求,提升产品质量和安全性。   通过快速检测,企业能够及时发现和解决蛋白质含量异常的问题,减少次品率,提高生产效益。   2. 食品药品监督管理部门   作为监管工具,豆制品蛋白质检测仪可用于对市场上的豆制品进行抽检,确保产品符合相关标准和法规要求,保障消费者的食品安全权益。   3. 科研机构   在农业科研中,大豆蛋白分析仪可用于研究大豆种植、品种选育、施肥管理等农业领域的问题,为农业科研提供数据支持。   在食品科学研究中,该仪器可用于研究豆制品中蛋白质的结构、功能及与其他成分的相互作用,推动食品科学领域的发展。   三、技术特点   1. 先进的检测技术   采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术或其他高精度检测技术,实现了非破坏性检测,确保了样品的完整性和检测结果的准确性。   2. 智能化的数据分析   配备强大的数据库和智能分析软件,能够根据不同的样品和实验条件自动进行数据校正和误差补偿,提高检测结果的可靠性和稳定性。   3. 批量处理能力   能够对大量样品进行快速、批量处理,满足大规模生产和检测的需求。   综上所述,豆制品蛋白质检测仪在食品加工、食品安全监管、农业科研等多个领域具有广泛的应用价值,是现代食品工业和科研领域中不可或缺的重要工具。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408131424338910_5357_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 氨基酸自动分析仪的检测限一般可以达到多少?

    我有一批水稻伤流液样品需要测定其中的17种酸水解蛋白氨基酸,根据文献记载其含量范围应该在几十个PPM以上,不知用氨基酸自动分析仪可以保证质量地测出吗?谢谢各位老师的帮助了![em01] [em01] [em61]

  • 血细胞分析仪检测原理

    目前血细胞分析仪检测原理包括电学和光学两种,电学包括电阻抗法和射频电导法,光法包括激光散射法和分光光度法。电阻抗法根据Coulter原理及血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定。当有细胞通过小孔时,由于电阻增加,于瞬间引起电压变化及通过脉冲。细胞体积越大,脉冲振幅越高,细胞数量越多,脉冲数量也越多。脉冲信号经过:放大、阈值调节、甄别、整形、计数而得出细胞技术结果。电阻抗法可准确量出细胞(或类似颗粒)的大小,是三分类血液分析仪的主要应用原理,并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。激光散射法应用了流式细胞术检测原理及细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接受的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。射频电导法是用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。射频电流是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波,能够通过细胞壁。分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测血红蛋白的原理,它利用血红蛋白与溶血剂在特定波长下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成比例。

  • 【分享】ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明

    ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置,配上层析柱、恒流泵、部分收集器(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而,目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多,但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功,为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段,其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪,主要有以下特点: 1、预热时间短,一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高,预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁,开机后仪器自动调整透光率(T)到100%,吸光度(A)调整到0.000。 4、透光率(T)和吸光度(A)对应准确,点两者误差小于1%。 5、双数据显示,仪器适时显示吸光度(A)和透光率(T)。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口(吸光度0—200mv)。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能,可将谱图插入文档(word)文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪(由电脑有效端口数决定)。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单,在电脑屏幕上可描出吸光度(A)谱图,透过率(T%)谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单,可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算,预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中,电脑会自动将图形左移(也可人工调整),电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数: 1、波长:254nm,280nm(可根据用户需要调配)。 2、样品池100ul,光程3mm。 3、量程:吸光度(A):0--2.000 透光率(T):1%—100%。 4、分辩率:吸光度(A):0.001 透光率(T):0.1%。 5、电脑分析参数:峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量(归一化)、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%,50HZ。 7、主机重量:约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源,仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后,将应用软件(ZHD.exe)复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮,待仪器显示0.000A和100%T后,双击ZHD.exe启动应用软件,系统进入采集(分析)状态。 4、在“测量选择”菜单下,用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”,电脑开始采集。 6、要停止采集,点击“检测操作”下的“测量结束”菜单,然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求: a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行; b、显示器分辩率为1024*768,小字体,256色配置; c、图形打印机; d、电脑系统必须正常工作,并保证串行口(COM2或COM1)有效; 2、系统连接无误后先让检测仪工作,再执行应用软件ZHD.exe; 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”,出现文件操作对话框,打开随机盘上的数据文件(.ran),图形被打开,熟悉菜单操作。菜单介绍如下: a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等; b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用); c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项; d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]; e、“谱图重绘”菜单:从起始点描谱;清理屏幕;释放压缩; f、“谱图全貌”菜单:在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下:在吸光度状态下,点击鼠标左键选取基线及时间范围(第一次点击选取第一点,第二次点击选取第二点),点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算,还可间接计算出层析柱分辨率;双击鼠标左键,即可取消本次计算。 h、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下,单击鼠标右键,屏幕显示该鼠标点的数值;双击鼠标右健,擦除屏幕显示数值。 七、注意事项: a、 更改波长方法:打开样品池挡板后,可见到滤光片的燕尾型支架和印字(245或280代表当前所使用的波长),用手将其轻轻抽出,换向后插入原位,再将样品池挡板装上,拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件; c、 应用软件执行后,十秒钟后不出现采集分析界面,说明电脑未收到数据,需检查系统连接是否正常; d、 在A—T%描谱过程中,开始1小时内,T%谱以实蓝线表示;1小时后(或点击“图形重绘” ),已描过的T%谱会以虚蓝线表示; e、 测量开始后(特别是出峰以后)不要按复位按钮。 f、 要停止采集,请点击“测量结束”后,先点击“EXIT”,再关闭检测仪。 g、 开始测量时,屏幕会弹出保存文件对话框,要求输入数据文件名及存放路径;之后,电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点,并与其他峰无焦点。

  • 自下而上法LC-ESI-MS/MS检测靶蛋白,纯蛋白可检测出,血清中检测不出是什么原因?

    [font=微软雅黑][color=#444444]实验步骤如下:[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]变性,还原、烷基化、加入内标肽,酶解后固相萃取,干燥复溶,最后LC-ESI-MS/MS检测特征肽和内标肽,碰撞能和流动相都优化后,纯蛋白响应值很高。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]之后开始做血清标本,比处理蛋白多了一步去除高丰度蛋白步骤,也是严格按照试剂盒步骤做的,然而检测响应值只有500~1000。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]血清中是有目标蛋白的,因为质谱检测前已经在自动生化分析仪上面检测到靶蛋白浓度大约有20ug/ml。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]PS:质谱仪是AB SCIEX 5500QTRAP,以前师姐用上述的方法是可以在仪器上做出10000多的响应值,是不是说明方法建立这块没什么大问题。目前仪器坏了,借用了别处的仪器,型号和厂家也是相同的,响应值却很低[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]求问各位大佬血清中检测不出是什么原因,万分感谢![/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444][/color][/font]

  • 蛋白质氨基酸残基组成分析以及蛋白预测软件

    http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位,通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能,蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的,本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质,也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序:AACompIdent:与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同,AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括:蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外,用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择,这影响到分析如何进行。例如,某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列,算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表:第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类,并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同,但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim:AACompIdent的一个变种,AACompSim提供类似的分析,但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同,后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称,氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等,1995),并且通过分析氨基酸的组成,研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander,1995)。因此,在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析,能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH:PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质,包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等,把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具,用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch,MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量,一种未知蛋白质能被准确无误地确认,给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序,这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件,包含一张实验测定的肽段列表,分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表,包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时,准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息,可以相该地址发送电子邮件,并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸,用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似,但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。分析效果:从目前已知的氨基酸分析方法比较来看,除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:0.5 pmol;氨基酸分析仪:10 pmol),其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面,都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括:首先是蛋白被水解为氨基酸,其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸,利用氨基酸也可以研究蛋白质。

  • 天研|牛奶蛋白质分析仪的原理是什么

    牛奶蛋白质分析仪的原理主要基于光学测量技术,特别是光谱分析法。具体地说,它采用红外光谱法来测量牛奶中乳清蛋白和酪蛋白的含量。首先,将牛奶样品制成透明薄片,然后使用近红外光电传感器和光源对其进行扫描。牛奶中的蛋白质对特定波长的红外光有特定的吸收特性,通过测量这些吸收特性,可以分析出牛奶中蛋白质的种类和含量。此外,仪器会将牛奶光谱与事先建立的标准光谱进行比较,通过复杂的算法处理,从而得出各种蛋白质形态的含量。这种比较和计算过程确保了测量结果的准确性和可靠性。总的来说,牛奶蛋白质分析仪通过光学测量和光谱分析技术,能够快速、准确地测定牛奶中蛋白质的含量和种类,为乳制品生产、质量控制和科学研究提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404291701212298_2595_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 核酸蛋白检测仪应用和原理

    核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统(根据需要选配)和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质(样品)对紫外光有明显吸收的特征,实现对样品成份含量比对分析,以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

  • 立即报名!基于液相色谱法的糖化血红蛋白分析仪的应用的技术讲座!

    立即报名!基于液相色谱法的糖化血红蛋白分析仪的应用的技术讲座!

    糖尿病是一种慢性病,随着经济生活水平的提高和社会老龄化的加剧,近年来患者人数在全球包括中国逐年递增,目前已严重威胁到国民的健康。对糖尿病的监测也越来越受到国家和人们的重视。作为全球公认的糖尿病检测"金标准",糖化血红蛋白(HbA1c)能够稳定可靠地反映出受检人在检测前90天到120天内的平均血糖水平,不受抽检时间、空腹与否或胰岛素等因素的干扰,经过国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)的技术验证和推广使用,使得糖化血红蛋白检测已成为诊断糖尿病的一种趋势。我们国家也参考国际公认的HPLC-LC-MS/MS方法,已经基本建立了自己的糖化血红蛋白检测一级参考体系。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/10/201510221629_570638_1587_3.jpg糖尿病检测方法以及主流仪器分析使用最先进的流体技术和产品,为您打造最优秀的HbA1c分析仪项目难度以及如何解决各类流路问题糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪市场情况以及前景分析立即报名参与讲座:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1689

  • 全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?

    全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?库尔特原理库尔特原理指出:悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这主要是根据血细胞与稀释剂相比,血细胞是不良导体的特性而提出的。起初,原始的库尔特计数器只能计算和测量红细胞。后来,随着技术的不断发展和设备的不断改进,临床医生还可以利用它来计算和测量白细胞。到20世纪70年代,技术的进一步发展使技术人员能够分离血小板。全自动细胞计数器的演进传统意义上的血细胞计数器是通过研究外周血涂片,使用血细胞仪和白细胞分类计数而手动完成的(也称为100个细胞涂片分类,手动白细胞分类计数或手动计数器)。根据库尔特原理导致了库尔特计数器的发明,随后又开发出了技术先进的全自动血液细胞分析仪。自此,仪器的技术水平得到不断提高。由于技术的进步,一台仪器可以分析越来越多的参数,从而大大提高了血液检测的效率,减少在多台仪器上分析一个样品的情况。现代的细胞分析仪能够测量白细胞(WBC)、白细胞分类(五分类)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积,并且可以自动计算血细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度,血小板比积和血小板分布宽度。自动分析仪的其他重要因素包括它们运行的速度和每批次可以处理的样本数量(大处理容量可以减少周转时间)。即时检验(POCT)即时检验([/

  • 仪器介绍 II:拜耳ACS 180SE 全自动免疫分析仪

    仪器介绍 II:拜耳ACS 180SE 全自动免疫分析仪

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204261141_363473_1699466_3.jpg ACS全自动化学发光免疫分析系统由拜耳公司生产,采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。20世纪90年代初首次推出全自动化学发光免疫分析系统ACS:180。90年代中期推出第二代产品为ACS:180SE分析系统(图2),最 近该公司又推出了ACS:CENTAUR。第二代产品将微机与主机分开,软件程序加以改进,使操作更灵活,结果准确可靠,试剂贮 存时间长,自动化程度高等优点。 1.仪器测定原理 该免疫分析技术有两种方法:一是小分子抗原物质的测定采用竞争法;二是大分子的抗原物质测定采用夹心法。该仪器所用固相磁粉颗粒 极微小,其直径仅1.0µ m,这样大大增加了包被表面积,增加抗原或抗体的吸附量,使反应速度加快,也使清洗和分离更简便。其反应基本过程:⑴竞争反应: 用过量包被磁颗粒的抗体,与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育,其免疫反应的结合形式有两种,一是标记抗原与 抗体结合成复合物;二是测定抗原与抗体的结合形式。⑵夹心法:标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合成一种反应形式,即包被抗体 -测定抗原-发光抗体的复合物。 上述无论哪种反应凡所结合的免疫复合物均被磁铁吸附于反应杯底部,上清液吸出后,再加入碱性试剂;其免疫复合物被氧化激发,发射 出 430nm波长的光子,再由光电倍增管将光能转变为电能,以数字形式反映光量度,计算测定物的浓度。竞争法是负相关反应。夹心法 是正相关反应。 2.实验操作 本仪器测定所用试剂均包括两种:固相磁粉和液相发光试剂。每套试剂可放置于试剂托盘的任意位置上,由仪器扫描标签条码后自动加样 。根据测定项目不同,试剂用量在50~450µl之间。测定标本必须用血清,禁止用血浆,以防纤维蛋白将管路堵塞。 由于是自动化仪器,其操作极其简单:①将样品编号排入样品盘。②按试验项目将所用试剂放入试剂盘,并观察辅助试剂。③自由编排程 序,按“START”键运行,根据所编工作表,在微机的控制下,仪器自动放置反应杯,自动加样与试剂,并根据实验项目不同进行温育。温育时间一般在 2.5~7.5分。从第一个测定开始至16分钟,分析仪自动计算报告结果。然后每20秒有一个结果报出,即每一分钟报告3个结果 。如果60个样品同时测定,120个实验项目仅用一个小时即可完成。④随时可加入急诊检查项目。⑤打印报告方式可有三种:按测定 混合项目排列报告;按病人编号排列报告;按每一种项目排列报告。 3.仪器组成及特点 该仪器由主机和微机两部分组成。主机部分主要是由仪器的运行反应测定部分组成,它包括原材料配备部分、液路部分、机械传动部分及光路检测部分。微机系统是该仪器的核心部分,是指挥控制中心。该机设置的功 能有程控操作,自动监测,指示判断,数据处理,故障诊断等,并配有光盘。主机还配有预留接口,可通过外部贮存器自动处理其他数据 并摇控操作,以备实验室自动化延伸发展。 ACS:180SE分析仪为台式,其主要特点为:①测定速度:每小时完成180个测试,从样品放入到第一个测试结果仅需要15分 钟,以后每隔20秒报一个结果。②样品盘:可放置60个标本,标本管可直接放于标本盘中,急诊标本可随到随做,无需中断正在进行 的测试。③试剂盘:可容纳13种不同的试剂,因此每个标本可同时测定13个项目。④全自动条码识别系统:仪器能自动识别试剂瓶和 标本管,加快了实验速度。⑤灵敏度:达到放射免疫分析的水平。 4.测定项目 现有检测项目 47项,更多的项目还在开发之中。①甲状腺系统:总、游离T3,总、游离T4,促甲状腺素,超敏促甲状腺素,T3摄取量。②性腺 系统:绒毛膜促性腺激素,泌乳素,雌二醇,雌三醇,促卵泡成熟素,促黄体生成素,孕酮,睾酮。③血液系统:维生素B 12,叶酸,铁蛋白。④肿瘤标记物:AFP,CEA,CA15-3,CA125,CA19-9,β2 微球蛋白,PSA。⑤心血管系统:肌红蛋白,肌钙蛋白T,肌酸激酶-MB。⑥血药浓度:地高辛,苯巴比妥,茶碱,万古霉素,庆大 霉素,洋地黄,马可西平。⑦其他:免疫球蛋白E,血清皮质醇,尿皮质醇,尿游离脱氧吡啶。

  • 酶标仪测定特定蛋白的蛋白含量-ELISA实验步骤

    酶标仪测定特定蛋白的蛋白含量-ELISA实验步骤

    酶标仪测定特定蛋白的蛋白含量-ELISA实验步骤[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301442498094_2367_5389809_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301442501323_8948_5389809_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306301442504164_1052_5389809_3.png[/img]

  • 蛋白质检测仪测量指标有哪些

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]  蛋白质检测仪测量指标有哪些,蛋白质检测仪的测量指标可以因不同型号、品牌和用途的仪器而有所差异。然而,一般来说,蛋白质检测仪的测量指标可以归纳为以下几个方面:  一、基本测量参数  检出下限:这是仪器能够检测到的最低蛋白质含量,通常以百分比或具体浓度值表示。例如,某些蛋白质快速检测仪器的检出下限为0.5%。  检测范围:仪器能够测量的蛋白质含量的范围,这通常是一个区间值。例如,某些仪器的检测范围为(0~50)%。  吸光度值范围:在光度法中,吸光度是衡量物质对光吸收程度的物理量,蛋白质检测仪通常会给出其吸光度值的测量范围,如0.000-4.000A。  重复性:这是衡量仪器测量结果稳定性的一个重要指标,通常以百分比或具体数值表示。例如,某仪器的重复性为±0.1%(A)。  重复性误差:与重复性相关,但更具体地描述了多次测量同一样品时结果之间的差异,如吸光度(A)≤0.003。  稳定性:指仪器在长时间运行或不同时间点测量时,结果的一致性。例如,光电漂移(A)±0.002(3分钟)可以反映仪器的稳定性。  二、特定功能指标  多通道检测:一些先进的蛋白质检测仪支持多通道检测,可以同时处理多个样品,提高检测效率。  样品类型:仪器能够检测的样品类型,如食物、饮品、血清、血浆、尿液等。  分子量范围:对于能够检测蛋白质分子量的仪器,其分子量范围是一个重要的指标,如2-440kDa。  样品处理量:一次运行能够处理的样品数量,如某些全自动蛋白质定量检测仪一次可以处理25个样本/每轮。  检测速度:完成一次检测所需的时间,这也是衡量仪器效率的一个重要指标。  三、高级功能指标  智能化程度:包括仪器的自我保护功能、数据储存方式(如支持U盘储存)、以及是否具备自动校准、自动清洗等高级功能。  检测精度和误差:除了上述的重复性和重复性误差外,还包括仪器的整体检测精度和误差控制水平。  软件支持:是否配备有用户友好的软件界面,用于数据分析和报告生成。  兼容性:仪器是否兼容不同类型的试剂盒和样品处理方法。  需要注意的是,以上指标并非所有蛋白质检测仪都具备,具体指标会根据仪器的设计、用途和性能而有所不同。在选择蛋白质检测仪时,应根据实际需求和使用场景综合考虑各项指标。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407030956049224_5772_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 质谱技术在蛋白组研究中的应用(一)

    [摘要] 质谱对于现代蛋白质化学研究是一项重要的技术。也可用于蛋白组分析,在同一时间监控上千种蛋白的表达情况。首先蛋白质混合物可以用双向凝胶电泳分开,再用质谱及随后的蛋白质数据库检索对单个蛋白进行鉴定和分析。最近几年,质谱领域取得了令人鼓舞的进展,使得全自动、高通量的蛋白检测成为可能。质谱也可以用来分析蛋白的转录后调节以及研究蛋白质复合体。本文将介绍目前蛋白组研究中质谱方法的应用并对其优缺点进行讨论。关键词: 质谱;二维电泳(2-DE);蛋白组分析MALDI-TOF1 前 言蛋白组学是研究生物特定组织或细胞内表达的所有蛋白质成分,蛋白质组的一门学科。蛋白组分析一般是用双向凝胶电泳(2-DE),质谱(MS)以及数据检索来完成。2-DE要回顾到20世纪70年代初[1],但是用质谱技术对蛋白质进行鉴定和分析是在近十年内才成为可能。其中最重要的一个原因是新的软离子技术即基质辅助激光解析电离(MALDI)[2]和电喷雾电离(ESI)[3,4]技术的发展和应用,以及样本制备技术和质谱仪的发展等。从数据库中获得成指数上升的序列信息也促进了质谱技术的发展。跟转录组学中的全自动DNA微阵列技术相比,蛋白组分析需要更多的手工操作,尤其在2-DE上会出现很多问题[5,6]。尽管存在很多困难,蛋白组学的重要性还是公认的。DNA微阵列技术是建立在对mRNA稳定水平的检测上,然而蛋白组学研究的对象是细胞中最活跃的因子——蛋白质。最近有研究证明,mRNA的表达和蛋白的水平并非具有相关性[7,8]。蛋白质有转录后修饰过程,并会以不同的形式出现。而这些修饰过程是相应的DNA测序技术所不能预测的。质谱技术在蛋白质修饰分析过程中具有重要的作用。2 质谱对蛋白质的检测质谱仪是由离子源,质量分析,离子检测器,以及数据检索等单元组成。首先,被分析的分子在离子源中被离子化,然后在质量分析器里根据不同的质荷比分开,再对分开的离子进行检测。随着MALDI和EIS的出现,质谱技术已经广泛用来分析蛋白质。质量分析器有很多种,最常用的方法是将飞行时间检测器(TOF)与MALDI或三级四级串联质谱仪联用,或者将四级杆-TOF,离子阱等连接到ESI上。蛋白组分析中,可以用两种不同的方法检测电泳分离后的单个蛋白质。最简单的方法叫做肽指纹谱测定(PMF)[9~13]。这个方法是用特殊的酶对2-DE分离后的蛋白质点进行降解,产生的肽从凝胶中分离出来后再用质谱分析和检测肽的分子量。数据库检测能够产生所有蛋白质理论上的PMF,把它们和质谱分析所获得的肽片进行比较就可以得出结果。第二种方法是在质谱仪中把凝胶分离后的肽分解成片段,产生局部的氨基酸序列(序列标签)。那么就可以用分子量或者序列信息进行数据库检索[14,15]。PMF一般用MALDI-TOF来实现,序列标签可以用串联质谱技术MS-MS进行检测[16~18]。用质谱检测蛋白的灵敏性可以精确到飞摩的水平,甚至已有报道其精确度可以达到阿摩水平[19]。3 用MALDI-TOF进行肽指纹谱分析凝胶分离后的蛋白质鉴定以及肽指纹谱分析是目前质谱实验室常规使用的方法。在进行MALDI分析之前需要最优化的凝胶上消化[20~22]和脱盐过程。胰岛素是最常用的凝胶消化酶,因为它在赖氨酸和精氨酸位点能够特异性切割蛋白质,产生分子量在600~2500Da之间的小分子肽,并能够从凝胶上有效的分离出来。MALDI-TOF是质谱技术中相对简单并很容易使用的一种方式,对样本中的盐和其他污染物有很高的耐受性,这点优于ESI。提取的肽片混合物中较小的片段可以直接沉积在靶板上做PMF分析,剩下的样本可以储存起来作为以后的ESI-MS分析。如果经凝胶分离后所有的肽全用来做MALDI分析,那么样本经脱盐以后将会取得更好的结果。脱盐的过程可以用商品化的试剂盒ZipTip(Millipore),或者在凝胶电泳仪的末端放置一个小的逆向塑料柱来实现[23,24]。PMF中非常重要的一个因素就是质谱测量分子量的准确度[25]。现代的MALDI-TOF仪都具有延迟取样反射器装置,用它们检测的肽段分子量可以精确到10~30ppm。这样的精确度使得4~5个肽段足以清楚的鉴定蛋白质的分子量。MALDI产生的大多数都是单电荷离子,所以它的图谱很容易解释。4 肽质指纹谱分析的自动化为了实现高通量蛋白检测,样本准备,质谱检测,资料分析和数据检索必须实现自动化操作。目前有些实验室用机器人对蛋白质进行自动化取点,凝胶上消化,样本脱盐以及对MALDI平板进行定点测定等。而且,现代化的MALDI-TOF仪完全能够让MALDI检测自动化。资料分析和数据检索过程同样可以自动化。在进行蛋白组分析时,如果在凝胶上不用单个分离就可以对所有蛋白质进行鉴定将是非常具有诱惑力的。为此,研究人员做了很多努力,由Hochestrasser及其同事建立了一套称作分子探测术的方法(molecular scanner)[26,27]。它是将整个2-DE胶上蛋白质样本同时酶解,并将酶解片段一起原位转移至另一张膜上,再直接用MALDI- TOF 质谱对膜上样本进行整体扫描,为实现蛋白质组学研究的自动化、规模化以及临床应用提供了一个崭新的思路和方法。这种思路的优点是显而易见的,不过按照目前的方法,要普及此种技术主要的难点是,质谱扫描一张图谱所需的时间过长,如用0.4mm的精度扫描一张4cm×4cm的膜需55个小时,这就意味着一张16cm×16cm的常用膜的扫描,至少需要36天不间断的工作和大约40G的磁盘空间存储如此庞大的原始数据。5 用ESI-MS/MS的方法创建序列标签只有当被消化的蛋白存在于已有的蛋白或基因组数据库中,并且能从MALDI分析器中得到四五个肽片的数据才能成功进行。如果在EST数据库中只有目的蛋白的部分序列,那么就需要知道肽片的序列信息。创建序列标签的优势在于,用肽的分子量和序列作为数据库检索对象比只用分子量作为检索对象具有更高的特异性。有了序列标签信息后,也可以用EST数据库进行检索[28]。通常来自于一个肽上的序列标签就足以鉴定蛋白质。同MALDI相比,纳升-ESI-MS/MS费时费力,而且在做ESI分析之前必须对样本进行脱盐处理。这些问题可以通过ESI-MS与HPLC联用得到解决。做ESI分析对样本浓度很敏感,用现代化的纳升-HPLC方法可以提供很高的局部肽片凝聚物,分离后的样本可以直接用于质谱分析,而不需要再分解。当分析混合物的时候,在质谱之前做LC分离尤其重要,因为它使得数据依赖的实验(DDE)成为可能,在DDE中,所有的离子都进入检测器进行测量,如果从HPLC到质谱之间出现一个峰的话,软件将自动从质谱转换到MS/MS模式并对产生的离子进行扫描。跟纳升-ESI相比,用这个方法可以从一份标本产生更多的MS/MS数据。Yates等已经详细叙述了如何进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS全自动蛋白检测的策略[29]。

  • 全自动生化分析仪主要测的指标有哪些?

    全自动生化分析仪主要测的指标有哪些?1、肝功能系列如胆红素、总蛋白、白蛋白各种氨基转氨酶等2、肾功能系列参数有尿素、肌酐、尿酸等3、糖尿病系列参数有果糖胺、葡萄糖等4、血脂系列参数有胆固醇、甘油三酯、高低密度胆固醇、脂蛋白等5、心肌酶谱系列参数有肌酸激酶、肌酸激酶同功酶、乳酸脱氢酶等6、胰腺系列参数主要有阿尔法淀粉酶

  • 纯水质量对自动生化分析仪及检测结果的影响

    0.2MΩ·cm)的标准。三级纯水虽然已经去除了大部分杂质,但其中的离子等杂质浓度还较高,会影响生化分析仪的微量检测,因此必须将三级纯水进一步去离子以达到一级纯水(电阻率≥lOMΩ·cm)的标准才能用于生化检测。1.3.1方法:离子交换树脂法是纯水制备的常用方法,所用的部件就是离子交换纯化柱(罐),包括阴离子交换柱、阳离子交换柱和混合柱等,试剂为阴阳离子交换树脂。阴阳离子交换树脂一般是由苯乙烯聚合成后再通过二乙烯苯交联得到多孔网状骨架结构,然后在骨架上连接活性基团而形成的高分子聚合物。离子交换树脂所连接的活性基团可分为酸性基团和碱性基团两大类型。连接酸性基团的离子交换树脂称为阳离子交换树脂,连接碱性基团的树脂称为阴离子交换树脂。1.2.2原理:①阳离子交换柱原理即硬水软化原理:阳离子交换树脂中的酸性基团有磺酸基(-S03H)、羧基(一COOH)和苯酚基(-C6H40H)等酸性基团,其中的氢离子能与溶液中的金属离子或其他阳离子进行交换。②阴离子交换柱的原理:阴离子交换树脂中的碱性基团有季氨基、氨基(-NH2)和亚氨基(=NH)等。它们在水中能生成OH-离子,可与各种阴离子起交换作用。③混合柱:当两者串联使用或混合使用时,产物就只有水。1.2.3影响因素:①离子交换树脂的质量:离子交换树脂是有使用寿命限制的,当离子交换达到一定量时就达到饱和,需要进行再生处理,因此质量越好总量越大其使用期限越长。②阴阳离子交换树脂的连接方式:复床式:若干个阳离子交换柱和若干个阴离子交换柱串联而成,阳在前阴在后,其优点是再生方便,缺点是出水质量不高(单级复床式出水电阻率只有0.5 MΩ·cm,双级复床式出水电阻率为2 MΩ·cm)。混床式:将阳离子树脂和阴离子树脂以1:2容积比均匀混合装入同一个交换柱内而成,优点是出水纯度高(电阻率≥1OMΩ.cm),缺点是再生困难。联合式:将复床式和混床式串联起来即成,出水质量高(电阻率最高可达18. 3MΩ.cm,即超纯水),使用寿命长。③三级纯水的纯度:当三级纯水质量不合格,其中一些非离子杂质通过离子交换柱时就会影响离子交换柱的使用寿命并造成出水水质的降低。有些开放性的纯水系统将生成的三级纯水储存于水箱中以备其它用途使用时储存时间过长或其它原因导致的二次污染也会使水纯度下降2.1 不合格纯水中的杂质成分 纯水质量不合格也就意味着纯水系统水纯化的失败,可能出现在原水预处理过程、反渗透过程、离子交换过程和纯水储存中的任何一步。无论哪一步失败,其杂质来源无外乎自来水和纯水机水通道的污染物,主要有:①离子,常见的有H+,Na+,K+,NH4+,Mg2+,Ca2+,Fe3+,Cu2+,Mn2+,Zn2+,Al3+等阳离子和F-,CI-,N03-,HC03-,S042-,P043-,H2P04-,HSi03-等阴离子;②有机物质,如农药、烃类、醇类和酯类等;③颗粒物,如自来水管道中的铁锈和泥沙等;④微生物;⑤溶解气体(Nz,02,C12,H2S,CO,CO2,CH4等)。2.2不同杂质成分对生化分析仪及检测结果的影响2.2.1 离子含量高的影响:①最直接的影响就是对血清(浆)中同种离子测定结果的升高,如对Mg2+,Ca2+,Fe3+,Cu2+,Zn2+等的测定,同时也对这些项目的标定产生影响;②由于很多金属离子都是酶的辅酶因子,因此当金属离子含量高时往往影响酶活性的检测(如Mg2+是多种磷酸化激酶的激活剂,水中含量超标时会导致这些酶活性测定值的升高;而许多重金属离子则对酶有抑制作用,导致酶活性下降);③很多阴离子也作为酶的辅因子存在,对酶活性测定产生影响(如CI-对α-淀粉酶就有激活作用);④离子含量高的水更容易形成结晶和导致蛋白等有机物变性附着于管道系统,从而使得生化分析仪管道系统更易堵塞,最终造成测定失真或失败;同时,在使用其对反应杯进行清洗时也很难清洗干净,会加速反应杯的老化和损坏,使杯空白升高。2.2.2有机物质的影响:有机物质的影响主要在于对类似物质测定时导致类似物质测定结果的升高。同时,有机物含量升高也会加速管道系统和反应杯的清洗困难及老化。2.2.3颗粒物的影响:颗粒物一般很难通过纯水系统进入生化分析仪管道和反应系统,其来源一般都是储水箱发生二次污染,但是一旦进入除了会导致吸光度升高外,还很容易堵塞管道和损坏反应杯。2.2.4微生物的影响:微生物的去除主要依赖原水的预处理,有些纯水系统还在超纯水处加装紫外杀菌或者微滤、超滤等装置,进一步除去水中残余的细菌、微粒、热源等。但一旦预处理失败或纯水储存箱被二次污染,微生物及其产物就能进入生化分析仪管道系统和反应系统,可能出现的情况有两种:①微生物在管道及反应系统孳生,导致管道堵塞,同时令吸光度和杯空白升高;②微生物产生特定的酶对生化分析仪酶测定产生影响,具体产生什么影响取决于污染菌的类型。 2.2.5溶解气体:溶解气体增多产生的影响有:①对同种气体的测定的影响;②对水的pH值也产生影响,如C02,Cl2,H2S等溶解增多导致水pH值的下降,也对pH值依赖性较强的生化项目测定产生影响;③某些气体如C12增多,因其自身氧化性较强,会对与氧化还原反应相关的生化测定项目产生影响,如对基于340 nm处NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT,AST,BUN等的测定方法,会导致测定值的升高。 2.2.6其它杂质的影响:有些纯水系统也将最终生成的超纯水或一级纯水储存于水箱中,当水箱有生锈情况时导致铁测定不正常,通常会出现在压力水箱中;还有当机械装置密封不严造成的漏油时导致TG测定结果升高。这些情况虽然少见,但也最容易被忽视。 3讨论3.1 实验室常用的自动化纯水系统有两种:①大型蒸馏器系统,日出水量在100 L左右,原水利用率10%—15%,能耗大,自动化程度低,制备的蒸馏水纯度一般较低,适用范围较窄,现在基本已经被淘汰。②反渗透的中央纯水系统,由机械过滤、活性炭吸附、反渗透膜和离子交换树脂等组成,日产水量500 L左右,原水利用率30%—40%,自动化程度高,能耗低,主部件可反复使用,出水纯度高,目前使用广泛。另外,有些实验室因条件所限,直接购买商品化纯净水使用,但商品化纯净水多为饮用水,其标准与实验室用水标准有所不同,很容易对检测造成影响。3.2评价水质的常用指标①电阻率,是衡量实验室用水导电性能的指标,其随着水内无机离子的减少而增大,但由于水自身的解离作用,电阻率最大只能达到18.2MΩ.cm左右,是检测水中离子浓度的主要指标;②总有机碳,是指水中碳的浓度,反映水中有机化合物的含量;③颗粒,反映水中颗粒物的浓度;④热原,通常为革兰氏阴性细菌的细胞壁代谢产物。3.3

  • 【分享】自动生化分析仪的原理、构成及使用

    一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外,有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法,最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。 所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染,结果不太准确,现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的,不易出现较差污染,结果可靠。

  • 蛋白质质谱分析

    PS1利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间(MALDI-TOF)技术来表征生物分子。样品溶于固定的底物中形成晶体,用激光脉冲使其离子化,离子被加速后通过飞行管时分离,所有离子均可被检测。系统包括三个组成部件:样品点样制备工作站(SymBiot 1)、生物质谱工作站(Voyager-DE PRO)和自动化分析软件(AutoMS-Fit)。SymBiot1 是一个自动样品处理系统,支持亚微升级微量点样,具有快速省时、重现性好的特点;Voyager-DE PRO是为蛋白质组研究专门设计的自动飞行时间质谱分析系统,配有AB公司之专利—延迟检测技术,具有高分辨率、质荷比宽等特点;AutoMS软件可以批处理方式或实时动态方式检索Protein Prospector蛋白数据库或您指定的蛋白数据库,查询参数可以任意设定,检索结果以Microsoft Access格式分类编号及储存。 PS 1技术平台建立伊始便受到了许多蛋白质课题研究组的关注。中国科学院上海生物化学研究所戚正武院士课题组从猪肝中提取某一活性蛋白组分,该组分理化性质不清楚,天然含量十分低,并无相关文献报道。用HPLC分离以后对活性组分的成分不能确定。上海基康生物技术有限公司运用PS 1系统对HPLC分离后的活性组分作了质谱分析,仅在一个工作日内就精确确定该组分由分子量极为相近的几种蛋白质构成,分子量精确度达到10 ppm。后经HPLC再次细分(洗脱梯度增加了2.5倍),证实了质谱的结论。此活性组分曾滤过1kD分子筛,基康的质谱数据纠正了研究人员过去对该活性组分分子量的误判,为研究人员明确实验方向、优化实验步骤提供了强有力的依据。 PS1除了可以进行生物大分子的精确分子量测定,还可用于蛋白的肽指纹图谱分析(peptide mass fingerprint,PMF),提供相关生物信息学服务,并且还可以利用源后衰变(Post Source Decay,PSD)技术来获得样品的MS/MS数据,以得到一级结构信息。PSD方法通常增加了激发激光的功率,使其超过产生一般肽指纹谱图所需功率的阈值,过剩的能量使前体离子在源内离子化之后发生裂解,产生一系列碎片离子,在反射器的作用下,最终可以得到一张连续的碎片离子图谱。经特定的软件分析后,即可在数据库中检索到肽段的氨基酸序列。利用PSD分析技术,还可以对磷酸化,糖基化等翻译后修饰进行定位分析,同样也可以鉴定产生翻译后修饰肽段的蛋白质。Neville et al.(1997)将这一方法成功的用于磷酸肽的序列分析。作为重要的蛋白质鉴定手段之一,PS1的精确度可以达到10 ppm,灵敏度为fmol,分子量检测范围可达到500 kDa,每天可自动分析40-100个样品,适用于大规模“蛋白质组学”研究。

  • 鸡蛋品质分析仪有什么作用

    鸡蛋品质分析仪主要用于自动检测鸡蛋的品质,它具有以下几个主要作用:  全自动测量:通过最先进的激光测量技术,全自动测量蛋的重量、蛋白高度和蛋黄颜色,无需人工干预,提高了测量的效率和准确性。  新鲜度评估:能够自动地计算和分类Haugh unit(哈夫单位),即蛋品新鲜度,帮助用户快速了解鸡蛋的新鲜程度。  精确可靠:采用高测量精确度的稳定测量方法,与操作者无关,充分保证了数据的可靠性。  快速检测:单个测量时间小于17秒,极大地提高了蛋品检测的工作效率和准确度,缩短了蛋品检测的时间。  高级数据处理:具备高级数据处理功能,可以在液晶屏上显示测试结果,并且支持超过100个单元的数据保存、计算平均值等。  多样化应用:不仅适用于鸡蛋,还可以检测其他禽蛋的品质,是食品安全检测领域中的重要工具。  总的来说,鸡蛋品质分析仪通过自动、快速、准确地检测鸡蛋的品质,为蛋品行业提供了可靠的实证数据,有助于确保食品安全,提升蛋品行业的整体质量水平。

  • 【讨论】乳制品中蛋白质及非蛋白氮快速检测技术

    对于乳制品中蛋白质及非蛋白氮的检测方法,国家在2008年发布了GB/T 21704-2008《乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定》和NY/T1678-2008《乳与乳制品中蛋白质的测定 双缩脲比色法》,但GB/T 21704-2008是采用滴定的方法,NY/T1678-2008是双缩脲比色法,检测时间比较长,均无法实现乳制品中蛋白及非蛋白氮的快速检测,造成在鲜奶收购中检测速度慢,运奶车等待时间比较长的现象,是否有一种方法或仪器可快速定量的检测上述物质呢,最好分析时间控制在15分钟以内。

  • 优利特URIT-12型便携式血红蛋白分析仪电路原理解析

    优利特URIT-12型便携式血红蛋白分析仪电路原理解析

    [font=宋体] 近年来,由于电子技术和电化学试纸技术的进步,国产POCT(Point of care test,即时检验,又称床边检验)仪器品种上市增多,血红蛋白浓度也可以方便地在家中用便携式仪器进行测量了,对于贫血病患者来说是一个福音。本文拆解优利特一款便携式血红蛋白分析仪,解析电路结构,为正确使用和维修提供帮助。[/font][font=宋体][b]一、仪器基本情况[/b] 广西桂林优利特医疗电子有限公司生产,型号URIT-12。直接显示人体内血红蛋白含量和血细胞压积,可快速完成检测。无需手动校正,不同批号试纸只需插入该试纸CODE卡,仪器自动更换代码。[/font][font=宋体]下图检测窗口的绿光,是内部520nm高亮LED发出的检测光:[/font][font=宋体][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010906317330_1037_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img] [/font][font=宋体]检测时的照片:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010907136257_5413_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]取出试纸片,背面的反应色块上是[/font][font=宋体][back=white]棕红色的反应物氰化高铁血红蛋白:[/back][/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010907341079_4231_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][b]二、仪器测量原理[/b][align=left][font=宋体] 仪器与专用试纸条配套使用,通过测量试纸条反射光强度,定量检测血液中血红蛋白([/font]HGB[font=宋体])浓度。其原理是:一次性试纸条上的化学品涂层中含有溶胞剂及反应化学物质,当被测指尖血滴到试纸上,溶胞剂破解红细胞后,反应物质与其中的血红蛋白发生反应,试纸颜色发生变化。试纸颜色变化深浅与血红蛋白浓度相关,在波长[/font]520nm LED[font=宋体]照射下,用硅光电池测量试纸条反应终点的反光强度,经[/font]MCU[font=宋体]数据处理后,显示为血红蛋白浓度值。[/font][/align][font=宋体] 试纸条上[/font][font=宋体]反应色块的[/font][font=宋体]主要反应物质:高铁氰化钾,表面活性剂曲拉通。曲拉通起到[/font][font=宋体]溶胞剂作用,让血红蛋白从红细胞中释放出来,与[/font][font=宋体]高铁氰化钾反应生成[/font][font=宋体][back=white]氰化高铁血红蛋白(棕红色),它是一种非常稳定的血红蛋白衍生物,血液中的各种血红蛋白成分均能被转化,其吸收峰为540nm左右。[/back][/font][font=宋体][b]三、拆机[/b][/font][font=宋体]取下仪器下面盖板,看见内部的“SET”键和PD(检测器):[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010912540877_8931_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]PD上面有一小块红外截止滤镜(泛红光),防红外干扰。旁边的小圆孔内是520nm高亮LED,工作时发出检测光:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010913209777_4784_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器背面,有工厂出厂商标:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915071431_3168_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]卸下电池盖,装有两枚日本原产maxell CR2032锂电池,电量高,比较耐用:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915308198_5689_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]拆开试纸代码卡,内部只有一枚芯片:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010915529522_2600_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]芯片型号24C02,是I2C接口串行E2PROM存储芯片,内部写有试纸批号数据,供仪器自动校正使用:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010916176537_8204_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]仪器是卡口结构,用小刀拨开,取出电路板:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010916458952_4776_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010917212870_868_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010917475022_3461_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]电路板侧面的通讯孔、试纸代码插槽:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010918147194_539_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]电路板上元件分布,由于采用了MCU,元件不多,比较简洁:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010918440117_8499_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体][b]四、主要电子元件及功能[/b][/font][font=宋体]下面电路板上,U1是TI(美国德州仪器)公司的2432C,E2PROM存储芯片,存储试纸数据或检测结果,供MCU分析计算用或查询以往检测结果。U4是[color=black][back=white]TI [/back][/color]公司[color=black][back=white]贴片模数转换芯片[/back][/color]D571[color=black][back=white],[/back][/color][color=black][back=white]封装SOT23-6,将光电池输出的模拟电信号转变为数字信号,送入MCU[/back][/color]分析计算用。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010919491011_8981_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]下面电路板上,U2是TI(美国德州仪器)公司的[color=black][back=white]M430FE427[/back][/color][color=black][back=white]微控制芯片(MCU),封装[/back][/color][color=#333333][back=white]TQFP-64[/back][/color][color=#333333][back=white],是主控芯片,内置本机程序及液晶显示屏驱动。[/back][/color]U3-ADNN是电源管理芯片。CRYSTA EAMD是晶振,为MCU提供时钟基准。[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010920361712_1183_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]卸下电路板与液晶面板固定螺丝,将二者分离开:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010921135797_2257_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]这一面没有元件,LCD与电路板用导电橡胶条连接:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010922114891_9083_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]红外截止滤镜片嵌在塑料板上,旁边的小圆孔是LED导光孔:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010923114231_1077_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]看见光源520nm高亮LED及PD(硅光电池检测器)的真面目:[/font][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010923331469_1690_1807987_3.jpg!w690x517.jpg[/img][font=宋体]该机电路原理框图如下:[/font][img=,690,394]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308010924008044_1154_1807987_3.png!w690x394.jpg[/img][font=宋体][b]仪器电路工作原理:[/b]开机前,插入试纸代码卡,按下开关键,仪器自动读取代码卡中的信息并向机器内部传输数据,屏幕显示代码值(应与试纸筒上的代码一致),然后自动关机,取下代码卡。再次按下开关键,根据屏幕提示,插入试纸片,仪器读取试纸片反应色块的白底后,判断为有效试纸,待屏幕出现滴血提示,取指尖血滴入试纸反应区,几秒钟后,待试纸反应区生成[/font][font=宋体][back=white]氰化高铁血红蛋白(棕红色),MCU发出读取检测头数据指令,520nm高亮LED对试纸反应色块发出闪烁光,试纸反应色块的反射光被PD(硅光电池检测器)接受,其电信号经模数转换后,送入MCU进行分析计算,结果由LCD液晶显示屏显示出来。其余按键用于查阅以前检测结果和进行时间、亮度等参数设置。[/back][/font][font=宋体][b]结束语:[/b]通过拆解,了解到[/font][font=宋体]该仪器属于单光束分光光度计。检测器(PD)采用硅光电池,光源采用[/font]520nm [font=宋体]高亮[/font][font=宋体]LED[/font][font=宋体],为固定波长吸光度测量方式。如果采用最新的[/font][font=宋体]智能光敏传感器[/font][font=宋体],[/font][font=宋体]在一块芯片上集成信号调理、模数转换、跨导运放等电路,[/font][font=宋体]会进一步简化电路,[/font][font=宋体]使仪器精度及可靠性大大提高,缩小与进口仪器的差距,性价比会得到进一步提升。[/font][font=宋体]用过的试纸片不能乱丢,应妥善处置。避免老人、小孩接触玩耍受到污染。[/font][font=宋体](由于不是厂家设计人员,难免没有错误,欢迎指正。)[/font]

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