色谱分离氨基糖苷类抗生素方法

现要在生物制品中测残留氨基糖苷类抗生素。而生物制品的基质主要成分是明胶，具体哪种明胶不清楚，厂家不透露。我已经试了所有蛋白质沉淀方法（比如乙腈、甲醇、三氯醋酸、高氯酸、有机溶剂等）等不能将明胶破坏！觉得不理解，明胶也是蛋白质，为什么蛋白质沉淀剂对明胶没有作用呢？请教各位大虾！谢谢！

想要检测抗生素发酵生产菌渣中残留的抗生素含量，用三氯乙酸对菌渣中抗生素进行了提取，想要用固相萃取柱对提取液进行净化提纯，目标物是硫酸新霉素，极性很大，属于氨基糖苷类抗生素。请问该如何选择固相萃取柱？

最近在做抗生素发酵菌渣中抗生素残留量的检测，目标物是新霉素，属于氨基糖苷类抗生素，极性很大。准备使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]进行检测，前处理采用三氯乙酸对菌渣中的新霉素进行提取，需要对提取液进行净化提纯，有没有老师知道这类药物一般选用什么类型的固相萃取柱？

http://www.biomart.cn//upload/userfiles/image/2011/12/1322738581.png2011年12月，美国俄勒冈健康与科学大学(Oregon Health & Science University)耳聋科学家彼得-斯特格(Peter Steyger)在《自然》杂志出版集团的《科学报告》(Scientific Reports)期刊上发表一篇突破性的个人研究论文，第一次证实氨基糖苷类抗生素能够跨越保护感觉毛细胞免受伤害的内耳血迷路屏障，从而杀死能够让我们产生听力的感觉毛细胞。这就给科学家们研究为什么这种特定类型抗生素导致耳聋带来新的启示。而48年前也正是这类抗生素导致当时还是婴儿的斯特格耳聋。除了其他方法之外，人们广泛地使用氨基糖苷类(aminoglycoside)抗生素来阻止发展中国家人们患上结核病同时还广泛用来阻止危害生命的细菌感染，尤其是对全世界早产儿而言。斯特格和共同作者李洪哲(音译)研究长期以来大家都知道的使用氨基糖苷类抗生素带来的重要问题---这类抗生素如何进入内耳并且杀死能够让我们产生听力的感觉毛细胞(sensory hair cells)。杀死这些感觉毛细胞是耳聋的一个主要原因。六十年来，科学家们一直探究这类抗生素如何进入内耳。斯特格和李洪哲的这篇论文尽管还不能提供一个明确的答案，但也是给出迄今为止最强有力的证据：这类抗生素跨越保护感觉毛细胞免受血液中潜在性损伤性组分伤害的内耳血迷路屏障(blood-labyrinth barrier)。血迷路屏障主动地运输重要的矿物质和营养物---比如离子、氨基酸和葡萄糖---到内耳以便发挥灵敏的听觉功能。斯特格说，这些氨基糖苷类抗生素有可能利用这些营养物运输通道来“偷渡”这些药物到内耳。因为斯特格已经知晓主要的偷渡路径，他和其他科学家们就能够测试单个营养物运输通道来鉴别推动氨基糖苷类抗生素跨越血迷路屏障的机制。因此，斯特格的这篇论文是通往终极目标的一次意义重大的里程碑。一旦完全揭示其中的机制，人们就可以阻断这些药物偷渡到内耳，从而阻止杀死毛细胞和随后的听力丧失和耳聋。斯特格说，“在利用这类抗生素杀死细菌的同时，我们应该能够施加一种抑制剂保护耳朵不受它们的伤害，从而挽救病人的听力。”单在美国，大约80%的早产儿被施予氨基糖苷类抗生素来阻止将可能杀死他们的感染。斯特格说，更少比例的受到感染的早产儿必须持续几天服用抗生素，因而处于丧失听力的极大危险当中。斯特格说，就这些婴儿和其他病人而言，“如果我们能够发现一种阻断剂，那么在美国我们每年就能够挽救最高达5万个人的听力”。斯特格的听力丧失要追溯到他14个月大时感染上脑膜炎。当时，他的家人和他住在英国斯托克波特市。他接受得到广泛使用的第一批氨基糖苷类抗生素之一的链霉素治疗。链霉素虽然拯救了他的生命，但是也导致他听力重度到极重度丧失。斯特格的研究得到美国国家卫生研究院分支机构国家耳聋和其他沟通障碍研究所的资金资助。在这项重要的研究之后，斯特格和他的实验室已经正在研究氨基糖苷类抗生素和其他毒性药物跨越血迷路屏障的精确分子机制。随着他们了解得越多，他们希望开发新的更加有效的策略来阻止药物引起的听力丧失。他说，因为“这些药物导致的听力丧失是完全可以预防的。我的研究小组和我讲继续努力开展研究以便找出阻止它的方法”。

【序号】：不知【作者】：韩春霞【题名】：高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器法检测氨基糖苷类抗生素【期刊】：《全国生物医药色谱学术交流会（2010景德镇）论文集2010年【年、卷、期、起止页码】：不知【全文链接】：http://cpfd.cnki.com.cn/Article/CPFDTOTAL-ZGHY201005001200.htm灰常感谢【序号】：第25卷第8期【作者】：蔡玉娥，蔡亚歧，牟世芬，鲁毅强【题名】：离子交换-脉冲积分安培法分离检测氨基糖苷类抗生素【期刊】：分析实验室【年、卷、期、起止页码】：第25卷第8期 2006年8月【全文链接】：http://epub.cnki.net.cn-ki.net/kns/brief/default_result.aspx

我用液相色谱测磺胺类抗生素和喹诺酮类抗生素（共五种物质），除了不到两分钟有两个溶剂峰，再也没有峰了，一直很平的直线。流动相是甲醇-水，还试过乙腈-水，均没有峰。求大神指导一下。

万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁均属于糖肽类抗生素，对革兰氏阳性菌具有很强的抗菌作用，可用于治疗由严重耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林表皮葡萄球菌引起的感染。目前，糖肽类抗生素作为添加剂普遍用于家禽、猪、牛饲料和兽药中，对人类安全造成威胁。[align=center][img=,600,451]http://www.gdkjfw.com/images/image/32891528255363.jpg[/img][/align]来自河北省食品检验研究院和河北省食品安全重点实验室的范素芳，王丽明，李强等建立了基于快速前处理的牛乳中万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁的高效液相色谱-串联质谱测定方法。结果与分析1 实验条件优化及方法验证取适量牛乳样品，加入0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液（85∶15，V/V），经涡旋混匀、超声提取、离心后，万古霉素和去甲万古霉素经阳离子交换柱净化、替考拉宁经C18固相萃取柱净化，采用HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS仪测定。采用外标法定量，通过绘制标准曲线进行定量分析，万古霉素和去甲万古霉素的线性范围为10～100 μg/L，替考拉宁为20～100 μg/L。以目标化合物仪器响应信号与仪器噪声比（RS/N）约为3时的目标化合物添加量为方法的检出限（limit of detection，LOD），以RS/N约为10时的目标化合物添加量为方法的定量限（limit of quantitation，LOQ）。结果表明，本方法中万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁的LOD分别为2、1、2 μg/kg，LOQ分别为4、2、4 μg/kg。分别作LOQ、5 倍LOQ和10 倍LOQ 3 个水平的添加回收率实验，结果表明，3 种分析物的方法回收率为77.3%～84.5%，相对标准偏差为4.7%～7.2%。2 基质效应评价万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁的基质效应分别为80.2%、81.3%和91.5%，表明3种分析物均存在离子化抑制效应，且万古霉素和去甲万古霉素的ME相对比较严重。3 实际样品测定从当地市场购买的15 份牛乳样品中均未检测到万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁。上述结果表明，该方法可用于市售牛乳样品中糖肽类抗生素万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁的检测。本文来源于《乳业科学与技术》2018年41卷第2期文章《高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中3 种糖肽类抗生素残留》，作者：范素芳，王丽明，李强，张冬生，孙文毅，张岩（河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室）。

在GMP法规中，对一些药物的生产厂房设施做出了特殊的规定，跟小伙伴儿们分享一下，青霉素类和头孢类两者之间有没有本质的区别。抗生素是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）产生、能抑制或杀灭其他微生物的物质。抗生素分为天然品和人工合成品，前者由微生物产生，后者是对天然抗生素进行结构改造获得的部分合成产品，头孢是属于抗生素类。这两者都属于β-内酰胺类抗生素。头孢菌素类（Cephalosporins）是由冠头孢菌培养液中分离的头孢菌素C,经改造侧链而得到的一系列半合成抗生素。其抗菌谱广,对厌氧菌有高效;引起的过敏反应较青霉素类低;对酸及对各种细菌产生的β-内酰胺酶较稳定;作用机理同青霉素,也是抑制细菌细胞壁的生成而达到杀菌的目的.属繁殖期杀菌药。（头孢菌素是青霉素近源的头孢菌属的真菌发酵液离而来。）青霉素一般是静脉滴注的，药效强，但抗菌谱窄，且半衰期短。1.笫一代头孢菌素第一代头孢菌素是60年代初开始上市的。从抗菌性能来说，对第一代头孢菌素敏感的菌主要有β－溶血性链球菌和其他链球菌、包括肺炎链球菌（但肠球菌耐药），葡萄球菌（包括产酶菌株）、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、克雷伯杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌、志贺菌等。不同品种的头孢菌素可以有各自的抗菌特点，如头孢噻吩对革兰阳性菌的抗菌作用较优，而头孢唑林则对某些革兰阴性菌有一定作用。但是，第一代头孢菌素对革兰阴性菌的β-内酰胺酶的抵抗力较弱，因此，革兰阴性菌对本代抗生素较易耐药。第一代头孢菌素对吲哚阳性变形杆菌、枸橼酸杆菌、产气杆菌、假单胞菌、沙雷杆菌、拟杆菌、粪链球菌（头孢硫脒除外）等微生物无效。本代抗生素中常用品种有头孢唑林、头孢氨苄、头孢拉定、头孢羟氨苄、头孢克罗等。其中除头孢唑林只能供注射外，其他的均可用于口服，也称口服头孢。头孢噻吩、头孢噻啶、头孢来星、头孢乙腈、头孢匹林等均已少用或不用。 2.笫二代头孢菌素第二代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能与第一代相近或较低，而对革兰阴性菌的作用较为优异，表现在：（l）抗酶性能强一些革兰阴性菌（如大肠杆菌、奇异变形杆菌等）易对第一代头孢菌素耐药。第二代头孢菌素对这些耐药菌株常可有效。（2）抗菌谱广第二代头孢菌素的抗菌谱较第一代有所扩大，对奈瑟菌、部分吲哚阳性变形杆菌、部分枸橼酸杆菌、部分肠秆菌属均有抗菌作用。第二代头孢菌素对假单胞属（铜绿假单胞菌）、不动杆菌、沙雷杆菌、粪链球菌等无效。临床应用的第二代头孢菌素主要品种有头孢孟多、头孢西汀（美福仙），头孢呋新（西力欣），头孢克罗等。3.笫三代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的抗菌效能普遍低于第一代（个别品种相近），对革兰阴性菌的作用较第二代头孢菌素更为优越。（1）抗菌谱扩大第三代头孢菌素的抗菌谱比第二代又有所扩大，对铜绿假单胞菌、沙雷杆菌、不动杆菌、消化球菌、以及部分脆弱拟杆菌有效（不同品种药物的抗菌效能不尽相同）。对于粪链球菌、难辨梭状芽胞杆菌等无效。（2）耐酶性能强对第一代或第二代头孢菌素耐药的一些革兰阴性菌株，第三代头孢菌素常可有效。常用有：头孢哌酮（先锋必素）、头孢三嗪（罗塞秦、菌必治）、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等。 4.笫四代头孢菌素第三代头孢菌素对革兰阳性菌的作用弱，不能用于控制金黄色葡萄球菌感染。近年来发现一些新品种如头孢匹罗（Cefpirome）等，不仅具有第三代头孢菌素的抗菌性能，还对葡萄球菌有抗菌作用，称为第四代头孢菌素。关于第一至第四代的划分不仅适用于头孢菌素，其他的一些β-内酰胺抗生素也可按此分代。常用有拉他头孢、头孢匹罗、氨曲南等。1.青霉素和头孢菌素都属于β-内酰胺类抗生素。2.青霉素是青霉菌培养液中提取精致获得的，是一种窄普抗生素，其基本结构是母核6--氨基青霉烷酸（6-APA），其中β--内酰胺环对抗菌活性起重要作用。3.头孢菌素是一类来自头孢菌的广谱抗生素。4.头孢菌素和青霉素类都具有相同的β-内酰胺环，所不同的是头孢菌素系7--氨基头孢烷酸（7--ACA）的衍生物，青霉素由6--氨基青霉烷酸（6-APA），两者的区别只是青霉素母核中五元噻唑环换成头孢菌素的六元双氢噻嗪环。

A201A是一个结构独特的核苷类抗生素，其中含环外烯醚的呋喃糖单元从未在其它天然产物中出现过。该抗生素由美国礼来公司于1976年从链霉菌Streptomyces capreolus NRRL 3817中分离得到，对革兰氏阳性菌和大多数厌氧性革兰氏阴性菌显示出强烈的抗菌活性。由于该化合物含有模拟tRNA末端的3’－酰胺基核苷片段，推测其作用于核糖体A位从而抑制蛋白质的合成。2012年，中国科学院南海海洋研究所鞠建华课题组从南中国海海底获取的放线菌株Actinomycetes thermotolerans中又意外地分离得到A201A，并对其独特的生物合成途径开展了研究。　　中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室俞飚课题组近期完成了A201A的首次全合成（J. Am. Chem. Soc. 2014, 136, 4157−4160）。该合成采用线性合成策略，通过对5个砌块的糖苷化和酰胺化完成拼接。其中通过Mitsunobu糖苷化高立体选择性地实现了呋喃糖1,2-顺式糖苷键的构建；通过优化条件立体选择性地实现了E式烯醇甲醚的合成；通过该课题组发展的一价金促进的糖苷化反应实现了嘌呤的N－糖苷化；并实现了对含有酸性敏感基团和碱性氮原子的复杂底物的糖苷化。这种线性和模块化的合成策略也为A201A类似物的发散性合成以进行构效关系的研究提供了可能。 该工作得到了国家自然科学基金委、科技部和中国科学院的资助。 http://www.cas.cn/ky/kyjz/201406/W020140619321207956891.jpgA201A分子结构文章来源：上海有机化学研究所 发布时间：2014-06-19

来源：中国论文下载中心 作者：冯建成　张容鹄乳及乳制品是老少皆宜的营养品，在我国，乳制品及乳制品工业发展迅速，同时畜牧业也发展迅猛，β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类等抗生素在乳畜饲养业中广泛应用，造成乳及乳制品中抗生素残留，给消费者健康带来了潜在威胁，因而提高抗生素残留的检测技术显得尤其重要，尽快开发或引进先进的抗生素检测技术以解决我国当前乳和乳制品行业面临的难题已成为当务之急。　　　　1 抗生素残留现状　　　　我国乳制品中抗生素的残留现状不容乐观，2006年的一份对北京、天津、石家庄5个零售点的77个牛奶样品进行β-内酰胺酶的残留检测，63.6%的样品检测为阳性。一项对我国几个大城市如西宁、南宁、广州、杭州、泉州、北京等城市乳制品质量的检测调查结果显示，在近八百份乳品采样中，抗生素残留超标居不合格项目第一位。　　　　2 抗生素残留的来源及其危害　　　　乳和乳制品中抗生素残留的来源要追寻到原料生产及其流通过程。首先，使用抗生素防治动物疫病。对患病奶牛用药不当及不遵守停药期是造成牛奶中抗生素残留的重要因素。其次，抗生素类饲料添加剂的使用。第三，饲养户和经营商为了保鲜，将抗生素人为添加到畜产品中，来抑制微生物的生长、繁殖，防止牛奶酸败变质 ，也是造成抗生素残留超标的重要因素。　　从乳制品加工的角度来看，原料乳中抗生素残留物严重干扰发酵乳制品的生产，抗生素残留可严重影响干酪、黄油、发酵乳的起酵和后期风味的形成。长期服用含低剂量抗生素残留的乳制品，日积月累会危害人体健康。主要危害表现在：其一，毒性作用，如长期摄入氨基糖苷类抗生素严重超标的乳产品可导致肾毒性和耳毒性。其二，过敏反应。其三，病原菌耐药性增加。其四，破坏人体胃肠道微生物菌群的动态平衡。其五，妨碍我国畜产品的国际贸易。　　　　3 抗生素残留检测方法的研究进展　　　　目前抗生素残留检测的方法很多，基本上可以分为四大类型：一是经典的微生物检测方法；二是现代仪器分析方法；三是生化免疫分析法；四是专一试剂盒法。　　3.1 经典微生物检测法　　其测定原理基于抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作检测用，因而与临床应用的要求一致，但其测定时间长且结果误差较大。如TTC法、戴尔沃检测（Delvotest SP）法、BY法等。　　3.1.1 TTC法 　　TTC法是国际上较早通用的标准测定法，也是我国鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27-94）规定的检测法。如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种（嗜热链球菌）经培育2.5-3h后，加入TTC指示剂（三苯基四氮唑）不发生还原反应，所以样品呈无色状态；如果牛奶中不含抗生素，则样品呈红色。TTC法检测的各种抗生素灵敏度如下：青霉素为0.004单位、链霉素0.5单位、庆大霉素0.4单位、卡那霉素5单位。TTC法主要对于青霉素类和氯霉素药物敏感，但对链霉素不太敏感，对新霉素根本不敏感，并且消毒剂可干扰TTC试验。TTC法检测抗生素残留虽然费用较低，但检测方法消耗时间也相对较长，因此应用受到一定限制。　　3.1.2 戴尔沃检测（Delvotest SP）法　　是由荷兰其试剂是由荷兰DSM公司生产并由AOAC认证。原理是利用微生物——嗜热芽胞菌在64℃条件下培养2.5～3h后会产酸，酸引起指示剂BCP(溴甲酚紫)变为黄色；若牛奶样品中不含抗生素，培养后样品呈黄色，如样品中含有抗生素, 嗜热芽胞菌生长受到抑制而无法产酸，指示剂将不变色。可检测到β-内酰胺类抗生素在内的更多抗生素，如磺胺类、四环素类等，其中对青霉素和磺胺类抗生素特别灵敏。Delvotest SP 法操作方便，严格实用，容易判断，结果可靠，费用适中等优点；但也易出现假阳性，此方法适用于农场、企业、实验室及政府监测部门。　　3.1.3 BY法　　BY法，也称蓝黄检测法，是一种广谱的微生物抑制法，能在较短的时间里检测到乳制品中抗生素的残留，通过颜色的对比判断阳性、阴性和可疑样品。B• Linage等通过这种方法对β-内酰胺类、大环内酯类、四环素类等25种抗生素进行了检测，其残留的检测限与欧盟规定的检测限很接近。此方法耗时短，操从简单，检测抗生素种类较多，但误差较大，容易误检。　　3.2 现代仪器分析方法　　是利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应或理化特性，借助现代仪器对抗生素残留进行精确分析的一种方法。如色谱法、荧光法、毛细管电泳、色谱质谱联用技术等。　　色谱法有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]（GS）、高效液相色谱（HPLC）法、反相高效液相色谱法等。检测的过程运用了色谱理论，通过高灵敏度的检测器，分离速度快、效率高和操作自动化。一般要经过样品的提取、脱蛋白、离心、层析柱净化、衍生化等步骤，能检测抗生素的具体含量。蔡颖用反相HPLC法测定乳制品中土霉素、四环素和金霉素残留量。检测限为：土霉素为15.0μg/kg、四环素为20.0μg/kg、金霉素为18.0μg/kg。Jian Wang等运用超高效液相色谱和飞行质谱联用(UPLC/Q-Tof MS)和LC/MS/MS测定牛奶中大环内酯类抗生素的残留量，其检测限为：红霉素40ug/kg，泰乐菌素50ug/kg，替米考星50ug/kg，能满足各国对这六种β-内酰胺类抗生素的最低检出要求。　　仪器分析方法分离速度快、效率高和自动化程度高，能检测抗生素的具体含量，敏感性较高，结果准确，但待检样品需经一系列的预处理，繁琐费时，还必须有相应的价格昂贵的仪器设备。一般在大型实验室使用，适合于精确测定。　　3.3 生化免疫法　　目前应用的生化免疫分析技术，是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的分析技术。其基本原理是抗原抗体的竞争性结合。可分为酶联免疫测定法（ELISA）、荧光免疫测定法(FIA)、免疫分析技术与常规理化分析技术联用的方法等。　　酶联免疫吸附测定(ELISA)：以待测抗原（或抗体）与酶标抗体（或抗原）的特异结合反应为基础，通过酶活力测定来确定抗原（或抗体）含量。因为结合了免疫反应和酶催化反应，所以是一种特异而又敏感的技术。YONG JIN运用酶联免疫法(ELISA)对庆大霉素的检测限度为0.5 ng/mL。Bucknal等运用免疫检测法测定了在牛奶中几种喹诺酮药物的残留量。酶联免疫法测定，其敏感性和特异性好，检测的灵敏度以普遍使用的β-内酰胺类计：青霉素为5ppb，阿莫西林为10ppb，氨苄西林为10ppb，头孢西林为8ppb。其检测结果快速准确，9分钟内即可检测出牛奶中β-内酰胺类、四环素类、磺胺类等抗生素的残留含量，可监控牧场用药的情况。　　荧光免疫测定(FIA)法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与抗原抗体复合物(Mb)浓度呈正比，可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。Huth 已经用荧光免疫法测定了牛奶中的6种β-内酰胺类抗生素，得到它们的最低检测限为：青霉素G3.2μg/kg、氨苄青霉素2.9μg/kg、羟氨苄青霉素3.6μg/kg、头孢匹林16.3μg/kg；该法重复性好，具有快速、敏感、准确的特点。生化免疫法测定抗生素残留灵敏度极高，达到ng级水平；检测快速、专一性强。由于此法的高度专一性，每检测一种抗生素就要制备或购买相应的抗原或抗体，导致检测费用较高。因此生化免疫检测法不可能取代色谱或光谱等常规分析方法，只能作为其重要的补充。　　　　4 专一试剂盒法　　　　ECLIPSE试剂盒的原理是含有芽孢杆菌的琼脂培养基和pH指示剂，当在(65±1)℃下培养时，孢子发育生长，降低培养基pH值，在pH指示剂的作用下，蓝(紫)色变为绿-黄色。生鲜牛乳中的抗生素残留使微生物生长和酸的产生受到抑制，由于没有酸生成，颜色将不会改变。。　　ECLIPSE试剂盒有ECLIPSE50和ECLIPSE100两种试剂盒。ECLIPSE50的精确度虽然没有ECLIPSE100的高，但其检测限都符合欧盟标准，弥补了快速方法只能单一检测某类抗生素的缺陷，同时提高了检测的广谱性和高灵敏度，同时也可以同欧盟等国家的先进检测技术和标准接轨我国的牛奶事业提供非常有效和准确的抗生素残留检测方法。且操作简单，灵活性强，无需对样品进行任何的处理，只需严格按照说明书上规定的方法进行操作，就能获得理想的效果，且不易出现假阳性现象，被检样品的需要量少，且费用低，越来越被广泛应用。　　乳制品抗生素残留的检测方法很多，有的操作烦琐,有的实验条件要求高，有的检验时间太长；这些不仅会给乳制品生产企业造成经济上和时间上的损失，而且检测结果常常会被原辅材料和人为操作等因素所影响。牛奶中抗生素残留是涉及人类健康的公共卫生问题，开发出越来越准确、快速，误差越来越小的检测方法，方便地检出乳和乳制品中抗生素残留，净化消费环璄，就能为居民的身心健康提供保障，促进中国乳业健康发展。　　

随着人们生活质量的提高，食品安全问题越来越为广大消费者所关注，特别是农药和抗生素等药物残留问题更是广大消费者所关注的焦点问题。在食品安全这个全球关注的热点问题上，如何快速、准确地检测食品安全的问题已成为重中之重。抗生素具有哪些危害人们吃了有抗生素残留的肉、蛋、奶等食物后，会造成抗生素在人体内蓄积，使人产生对抗生素的抗性，引起各种组织器官病变，甚至癌变。对人类健康的危害对人体肠道菌群的影响人体肠道菌群是一个平衡的生态系统，对保持人体健康起着非常重要的作用。如果人们长期摄入含有抗生素的食品后，会使敏感菌群被杀灭或抑制，而耐药菌群却大量繁殖，从而打破原来的平衡状态造成菌群失调，这就可能会导致长期腹泻或营养不良，严重时还可造成耐药菌感染，给临床治疗带来困难。引起过敏和变态反应青霉素、四环素、磺胺类及某些氨基糖苷类抗生素能使部分人群发生过敏反应和变态反应，氯霉素可破坏机体造血功能，诱发再生障碍性贫血。经常食用含抗生素的动物性食品，轻者出现皮肤瘙痒、荨麻疹、关节肿痛，重者导致血管性水肿、休克、甚至死亡。导致细菌耐药性增加目前，由于抗生素的广泛使用，使得细菌的耐药性不断增加，食用含抗生素残留的动物性食品后，人体内细菌的耐药性增加。同时，动物体内的耐药性菌株的耐药性也可能转移到人体细菌中，从而对人类产生极大的危害。其他毒害作用动物性食品中残留的链霉素进入人体后可引起肾损害和听神经受损。长期摄入氨基糖苷类抗生素残留严重超标的动物性食品，可损害第8 对脑神经，出现头晕、头痛、耳鸣、耳聋、恶心、呕吐等症状。四环素会引起肝损伤，与骨骼或牙齿中的钙质结合后，使骨骼及牙齿黄染，还可影响儿童的生长发育。邻氯青霉素、头孢菌素等可引起人类免疫性疾病；氯霉素会损害人的造血功能，抑制蛋白质摘要：文章综述了抗生素残留的来源与途径, 介绍了抗生素残留对人类健康、乳制品生产、环境及其他方面造成的危害，分析了检测抗生素残留的方法，包括微生物检测法、仪器检验法、免疫学分析法等，并指出了这些检测方法的研究现状与发展前景。对乳制品生产工艺的危害由于含有抗生素的奶无法制成酸奶、奶酪等一些高质量牛奶产品，容易造成大量原料奶的浪费，给乳品企业造成经济损失。另一方面，一些不法奶户在高温季节为防止鲜乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，从而造成乳中抗生素残留，对人体也造成了很大的危害。对环境的危害一些性质稳定的药物被排泄到环境中仍能稳定存在很长时间，从而造成环境中的药物残留。链霉素、土霉素在环境中不易降解；螺旋霉素低浓度降解很快，但浓度高时需6 个月才能降解完；杆菌肽锌在有氧的条件下完全降解需3～4个月，在无氧环境中降解所需要的时间更长。据报道，动物养殖场污水处理池中红霉素、复红霉素、磺胺甲唑质量浓度可达69g/L，这些药物的排放污染了环境，破坏了生态平衡。

我在做毕业设计，请问有没有谁知道用高效液相色谱法（紫外光检测器）测河流中某一类抗生素的实验大概要做多久？难不难？步骤复杂吗？ [b][/b]我测的是喹诺酮类抗生素，本科毕业设计，不发表，但也要写好啊，呵呵，一万多字

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152834]液相色谱-串联质谱法检测牛乳中多肽类抗生素残留量[/url]摘 要选用牛奶为研究对象．建立了一种可同时测定多粘菌素B、粘杆菌素、杆菌肽和维吉尼霉素等4种多肽类抗生素残留量的液相色谱一串联质谱法(Lc—Ms／Ms)检测方法。样品经甲醇一0．1％甲酸体系提取，正己烷脱脂，固相萃取柱净化后，利用Lc—Ms／Ms进行定性和定量分析。结果表明，该方法4种多肽类抗生素检出限分剐为：多粘茵素B 25O g／kg，粘杆菌素25 g／kg，杆菌肽A 5O g／kg，维吉尼霉素2O g／kg。平均回收率分别为：多粘茵素B 92．16％—95．89％，粘杆菌素92．24％ 97．87％，杆菌肽94．54％—97．96％，维吉尼霉素 93．58％ 8．25％。变异系数为2-54^ ．55。

随着我国经济的快速发展，人们追求效益最大化，抗生素的使用越来越普遍，如用抗生素治疗奶牛的乳腺炎；畜禽养殖户在饲料中添加抗生素和激素，提高种畜的抗病能力和食欲；水产养殖用户为了让大闸蟹加快脱壳过程、长得肥大生猛，给蟹喂食大量抗生素和激素等。我国是抗生素生产和使用大国，据统计每年约有6000吨抗生素用于饲料添加剂，占全球抗生素饲料添加剂的50%。抗生素的大量滥用已经严重威胁到人们的身体健康，专家指出，经常食用含有抗生素的食品，即使是微量的，也能使人出现荨麻疹或造成过敏性休克。时常摄入含有抗生素的食品，可使某些菌株产生耐药性，从而带来预防与治疗某些人畜疾病的困难。如果长期食用抗生素残留的食物，可造成人体中一些非致病菌的死亡，使菌群平衡失调或引起核黄素缺乏症和紫癜性损伤。特别是氯霉素的滥用，极易损害人类骨髓的造血功能，并由此导致再生障碍性贫血的发生。两年前，四川资阳地区曾暴发猪链球菌疫情，微生物专家李明远教授认为，很可能是养殖业者长期在猪饲料里滥用抗生素导致的。常用抗生素包括β-内酰胺类、四环素类，氨基糖苷类，大环内酯类，磺胺类等，世界各国均对抗生素的使用量提出严格标准，欧盟的标准比日本和美国的标准更加严格，限量值更低，我国要想保障本国食品安全并出口产品到上述国家，就必须加强我国的自身的检测能力。一般来说，肉类（畜禽），鱼虾（水产），蛋类，奶类，饲料、蜂蜜等产品需要进行抗生素检测，常用方法包括：液相色谱或液相色谱与质谱联用，微生物抑制法和酶联免疫方法。色谱方法是一种理化检测方法,一般要经过样品的提取、脱蛋白、离心、层析柱净化、衍生化等步骤，能检测抗生素的具体含量，敏感性较高，但检测程序复杂，费用较高，需购买色谱仪等检测设备，不适合小型检验室。微生物抑制法和酶联免疫方法属于筛选方法，操作简便、快速，消耗成本低，不需要购买大型仪器，但阳性结果需要其他方法进行确认。酶联免疫方法存在一定的假阳性，下面针对微生物方法进行详细介绍。

大家做过乳制品中青霉素类抗生素的谈谈自己的经验以及遇到的各种问题，是用的那种方法，对GB/T 21315-2007 动物源性食品中青霉素族抗生素残留量检测方法-液相色谱-质谱质谱法以及GB/T 22975-2008牛奶和奶粉中阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林和双氯西林残留量的测定-液相色谱-串联质谱法这两种方法的检测有什么看法，回收率怎么样？基质干扰明显嘛？样品测定液干净吗？大家共同来探讨一下，分享经验，共同进步！

请问有用固相微萃取液相色谱法检测磺胺类抗生素的啊

请问有没有人做过鱼肝油里的四环素类抗生素？查了半天都没有查到相关的标准或者方法，请各位GGJJ江湖救急！

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152854][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法测定牛奶中5种_内酰胺类抗生素.pdf[/url]摘要: 　[目的]　建立采用LC - MS - MS分析牛奶中阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、苯唑西林和青霉素- G残留量的方法。　[方法]　牛奶样品中加入内标青霉素- D7,经乙腈沉淀后,离心并吸取上清液。上清液吹干后,通过固相萃取柱净化,然后进行检测。在液相色谱分离系统中,通过A tlantis C18柱,采用0. 1%甲酸水溶液与乙腈不同比例混合的梯度流动相,根据以上各成分的不同质量数的碎片离子的强度,将5种抗生素分离并测定。　[结果] 　在2～20μg /L 范围内,与内标的峰面积比有良好的线性关系。相关系数(R2 )为0. 9943～0. 9981, 在5、10 μg /L 水平的标准加入回收率为88% ～127%。阿莫西林、氨苄西林、青霉素、氯唑西林、苯唑西林的最低检测限量分别为5、2、2、4、4μg /L (以信噪比为10∶1) 。　[结论]　该方法利用液- 液萃取和固相萃取相结合的方法,并加入同位素内标,有效地去除干扰因素,为该类抗生素的测定提供了可靠、实用的测定方法。

【摘要】本文综述了β－内酰胺类抗生素高分子聚合物测定的国内外研究进展，介绍了聚合物测定的原理和具体方法，分析了目前在聚合物测定中存在的问题，并针对问题提出了处理建议。 【关键词】高分子聚合物、质控现状、测定方法 1、概述 抗生素是临床用量最大和较易发生不良反应的药物。其中最常见的一类不良反应就是过敏反应。多年来的研究已证明，在β－内酰胺类抗生素所致的速发型过敏反应中，药物分子本身只是半抗原，药物中存在的高分子聚合物才是引发速发型过敏反应的真正过敏原，因此严格控制抗生素中高分子聚合物的含量有着重要的意义。 本文综述了高分子聚合物测定方法在国内外的研究进展，对实际测定过程中遇到的问题作简单的分析和探讨。 2、高分子聚合物的分类 抗生素中的高分子杂质系指药品中分子量大于药物本身的杂质总称，其分子量一般在1000～5000Da，个别可达10000Da左右。β－内酰胺类抗生素中的高分子杂质按其来源通常被分为两类：外源性杂质和内源性杂质。 外源性杂质包括蛋白、多肽、多糖等类杂质或抗生素和蛋白、多肽、多糖等的结合物，来源于发酵工艺，如青霉素中的青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽等。 内源性杂质是指抗菌药物的自身聚合产物，聚合物既可来自生产过程，又可在储存中形成，甚至在用药时也可产生。对于现在的生产工艺，外源性的高分子杂质已经较少产生，对内源性聚合物的控制是当前抗生素高分子杂质质量控制的重点。 金少鸿等人的研究表明，高分子聚合物不仅能引发IgE介导的过敏反应，而且青霉素类的抗生素还能经胃肠道吸收而引发过敏反应。故对β－内酰胺类抗生素中的高分子聚合物进行严格的控制，可以保证临床用药的安全有效

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=25638]大环内酯类抗生素的分析方法[/url]

肉类抗生素检测仪器是一种专门用于检测肉类产品中抗生素残留的设备。该仪器利用现代化技术，如物化、生物化学和光电等方法，对肉类样品中的特定抗生素物质进行快速检测和分析。　　肉类抗生素检测仪器的工作原理通常包括样品制备、提取、反应和检测等步骤。首先，从肉类样品中提取出可能的抗生素残留物，然后利用特定的试剂或抗体与这些残留物发生反应，产生可测量的信号。最后，仪器通过检测这些信号的强度或数量来确定肉类中抗生素的残留量。　　肉类抗生素检测仪器具有多种特点：　　高效性：能够在短时间内完成大量样品的检测，提高检测效率。　　精准性：采用先进的检测技术和算法，能够准确测量肉类中抗生素的残留量。　　稳定性：仪器性能稳定，检测结果可靠。　　便捷性：操作简单，易于使用，不需要复杂的预处理步骤。　　肉类抗生素检测仪器广泛应用于食品安全检测领域，对于确保肉类产品的质量和安全性具有重要意义。它可以用于检测各类肉类产品，如猪肉、牛肉、鸡肉等，以及肉制品如香肠、火腿等。通过使用肉类抗生素检测仪器，食品生产企业可以及时发现并解决抗生素超标问题，保障消费者的健康和安全。　　此外，肉类抗生素检测仪器还可以用于监管部门的抽检工作，对市场上的肉类产品进行监测和评估，确保市场的食品安全。同时，该仪器也可以用于科研和教学领域，为相关研究提供准确的检测数据和科学支持。　　总之，肉类抗生素检测仪器是一种重要的食品安全检测设备，对于保障肉类产品的质量和安全性具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405091057315400_8228_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

随着中西医结合治疗疾病的普及，其配伍也应严格掌握。配伍不合理不仅影响疗效，而且会产生毒副作用，下列中药不宜与抗生素合用。　　龙骨、珍珠、牡蛎、海螵蛸等含胸种钙质，易与四环素类抗生素形成螯合物影响吸收，降低疗效。　　血余炭、艾叶炭、煅瓦椤有强大吸附力，可减少抗生素在胃肠道的吸收。神曲、麦芽含有多种消化酶，某些抗生素使其活性受抑制，减弱其消食健胃功能。　　石膏、赤石脂、滑石等含镁、铝、铁离子与四环素抗生素合用，形成螯合物而降低疗效。玄胡、桅子、甘草等抑制胃酸分泌，影响四环素的吸收，四季青、黄药子可损害肝脏，与四环素合用，毒性作用增加。五味子、山楂、乌梅可酸化尿液，使碱性的四环素、红霉素疗效降低。　　生姜、龙胆、萝芙木等促进胃酸分泌，红霉素破坏增加。颠茄类中药抑制蠕动，延缓胃排空，红霉素在胃中停留时间延长，破坏增加。地榆、虎杖、石榴皮等所含鞣质可与红霉素结合，阻碍红霉素吸收。中药泻剂巴豆、黑白丑等可加速红霉素通过肠道，影响其吸收。　　犀角、珍珠中所含蛋白质及其水解产物（多种氨基酸），可抵抗黄连素的抑菌作用而降低疗效。　　茵陈对氯霉素的抗菌作用有拮抗作用，可降低氯霉素的疗效　　含有鞣质的中药，如五倍子、诃子、石榴皮、地榆、枣树皮、四季青、大黄等与灰黄霉素、制霉菌素、林可霉素等同服时，可结合成鞣酸盐沉淀，不易被吸收。碱性中药硼砂与氨基酸糖甙类抗生素如链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素、妥布霉素同时服用，可增加毒副作用。硼砂与弱酸性呋喃旦啶、青霉素、先锋霉素同用时，可减少这些药物的再吸收，降低血药浓度。

小弟用三重四级杆液质联用检测四环素类抗生素，结果发现TC、CTC、OTC的峰型都很差，就是峰太宽，峰高低，而且峰呈锯齿形，导致信噪比小，难以检测。同步检测的其他抗生素如磺胺类和大环内酯类是没有问题的。样品用磷酸盐乙腈混合溶液提取，色谱条件是C18柱，A：0.1%甲酸水溶液，B：甲醇，梯度洗脱。请教做好这方面实验的兄弟姐妹们LC-MS检测四环素要注意什么？是否出现过上述情况？大家用的色谱质谱条件怎样的？多谢。

2005年版《中国兽药典》（以下简称本版兽药典或CVP2005）共收载抗生素产品75个，占一部446种药品的16.8％。抗生素品种广泛用于动物养殖和兽医临床，鉴于其生产工艺不同于其他化学药品，因此质量标准也具有特殊性。为了更好地执行本版兽药典，现将有关情况介绍如下： 　　一、本版兽药典抗生素产品标准的特点 　　1、修订数量多，新增品种比例大。收载的75个品种中，其中1个为新增品种，占一部新增品种（27个）的52％，修订并收载了CVP2000中?64个抗生素品种中的62个，未收载CVP2000中的琥珀氯霉素和注射用琥珀氯霉素。 　　2、高效液相色谱（HPLC）等现代分析技术应用广泛。75个抗生素品种中HPLC在鉴别项中47项，检查项中占39项,含量测定中占37项 IR在鉴别项中占28项 并增加了分子排阻色谱法对聚合物的检查。 　　3、传统检验技术增加了新的内涵。如抗生素微生物检定法中增加了浊度法。 　　4、检查项中动物试验项目大幅减少。热原检查改为细菌内毒素检查达17个品种，有11个品种删减了异常毒性的检查，10个品种删减了降压物质检查。符合凡例中第二十四条中“随着兽药纯度的提高，凡是有准确的化学和物理方法或细胞学方法能取代动物试验进行兽药质量检定的，尽量采用，以减少动物试验”，方便检验的同时也体现了动物福利。 　　二、执行本版兽药典抗生素产品标准应把握的重点 　　（一）掌握“凡例”内容是执行好兽药典的基础 　　“凡例”是解释和正确使用兽药典进行质量检验的基本原则，并把正文品种及质量检定有关共性问题加以规定，避免了重复说明，并且“凡例”中的有关规定具有法定约束力。本版兽药典“凡例”在CVP2000的基础上进行了修订，增加了各相关内容的分类题目，包括：名称与编排，项目与要求，检验方法与限度，标准品、对照品，计量，精确度，试药、试剂、指示剂，动物试验，说明书、包装、标签等共9部分，28条。其中需要重点把握“凡例”中对鉴别，检查，原、辅料，检验方法和限度几个方面的表述。 　　（二）分类学习正文品种是执行好兽药典的关键 　　本版兽药典共收载青霉素类抗生素18种，四环素类9种，大环内酯类16种，氨基糖苷类18种，酰胺醇类3种，林可胺类3种，多肽类2种，抗寄生虫类6种。每类品种检验标准均有雷同，现分类详述。