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溶液中蛋白质相互作用分析系统

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溶液中蛋白质相互作用分析系统相关的仪器

  • Creoptix总部位于瑞士。拥有基于光栅耦合干涉技术(Grating-Coupled Interferometry ,GCI)的光学生物传感器专利,以及外置的微流控的设计和Google公司研发的自动化软件。Creoptix致力于提供高质量的动力学数据,拥有业内高度灵敏准确的WAVE 系统,使全球生物科学研究者可以做以前不可能做的事情,看到以前看不见的数据。避开了SPR的限制,突破无标记技术的局限。Creoptix公司于2022年1月被马尔文帕纳科公司收购。WAVE分析互作仪 创新的无标记检测技术配合防堵塞微流控芯片和自动化检测软件,为您提供高质量的结合动力学数据,并适用于多种样品类型。高信噪比&灵敏度专利的光栅耦合干涉(Grating-Coupled Interferometry,GCI)技术,赋予WAVE系统超越传统SPR技术的检测灵敏度和时间分辨率。不同于SPR技术,Creoptix WAVE GCI产生的消逝波(evanescent field)仅在芯片表面与样品溶液接触,并且延长了其与样品相互作用的长度,以确保更低的信噪比(0.015pg/mm2)。凭借WAVE分子相互作用仪的低检测限,可轻松获取无标记互作分子高精度的动力学速率,亲和常数及浓度数据。即使检测丰度较低的样品,仍可确保数据不失真。创新型微流控芯片防堵塞设计微流控芯片适用于多种不同类型样品,确保样品活性和生物学特性,节约了纯化步骤所需时间以其他设备脱机、堵塞等问题可能耗费的时间。高时间分辨率准确的表征解离速率大于10s-1的分子间相互作用的动力学。灵活的组合兼容48,96,384板任意组合,120h无人值守运行。智能软件从方案建立,数据分析到报告生成的每一步均可利用向导设计来简化,让您工作更加轻松高效。应用范围 分析领域:分子相互作用模式的研究;动力学常数的测定;亲和常数测定,浓度的测量及构象变化的速率等。 生命科学研究领域:蛋白质组学研究、癌症研究、新药研发、信号传递、分子识别、热力学分析、免疫调节、免疫测定、疫苗开发、瞬时结合、配体垂钓、结合特异性、结构与功能的关系及酶反应等。 分析样品类型:小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖到类脂、脂质体,噬菌体、病毒样颗粒和细胞等。
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  • 仪器简介:作为全球最大的实验室过滤及超滤产品供应商,Millipore 可为您提供l. 0.5mL至1000L处理量的实验室除菌过滤装置,可用于血 清、组织培养基及其他溶液的除菌过滤。高通量,低吸附的除菌滤膜,使蛋白质损失最少。可选择即用式过滤器或可更换膜的过滤装置。2. 0.5mL至3000mL处理量的实验室超滤装置,用于蛋白质,核酸的分离、纯化、浓缩和脱盐,专利 的结构设计和新型的超滤膜,使超滤速度更快,产物回收率更高。单片超滤膜和膜包可清洗并反复使用。3. 高通量纯化系统,特别适合大规模样品纯化实验室的应用,可快速有效地同时处理多达96个样品,大大减轻了实验室的负担。主要产品包括:* Amicon 系列超滤离心装置: 浓缩,脱盐一部到位,* DNA Extraction Kit: 从琼脂糖凝胶中回收DNA,只需10分钟即可回收100bp-10,000kb DNA* Micropure -EZ:从DNA中去除常用的42种限制性内切酶,可与Amicon超滤离心装置连用,一步离心即可完成去酶,浓缩及脱盐。* Immobilon 系列转印膜: Ny+ 用于Southern和Northern Blotting PVDF 用于Western Blotting* ZipTip 微量固相萃取吸嘴:只需数秒即可纯化fmol至pmol的蛋白质样品,提高质谱分析的灵敏度* Montage Plasmid kit:用于质粒DNA纯化2 Montage BAC kit:用于BAC DNA纯化2 Montage SEQ kit:用于测序反应后PCR纯化* Montage In-Gel Digest Kit: 同时处理96个1-D或2-D胶中的蛋白质样品* Millex GP33: 超大面积,超高流速的针头式除菌过滤器。技术参数:1.96孔PCR 纯化板---纯化96个样品只需10分钟2.无须离心,只需真空抽干3.不需要使用任何有机试剂及任何盐溶液,也无须洗涤步骤4.纯化后的PCR样品回收率90%(500bp以上)5.纯化后的DNA纯度极佳--Primer的去除率98%主要特点:1.Albumin Deplete Kit--有效去除人血清中65%以上的白蛋2.预装好亲和层析小柱,只需15分钟离心,洗脱操作3.非特异性蛋白吸附极低4.提高低峰度蛋白质在电泳,层析及质谱分析中的解析度5.此Kit同样可适合于其他多种哺乳动物
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  • 定量的表征生物大分子间的相互作用,如抗原/抗体、酶/抑制剂、蛋白质/多糖等重要生物学体系,是生命科学研究及生物技术研究的关键。 Calypso是一个以组分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)为基础的生物大分子间相互作用分析系统,可以快速、自动、无损、定量的表征大分子间的相互作用,具有重复性高、灵敏度高及无需样品修饰等诸多优点。该系统可以分析分子间的特异性及非特异性相互作用,聚集或解离的动力学等。对于分子间的特异性相互作用,Calypso可以测定其自聚作用及不同样品分子间的异聚作用,得到平衡解离常数Kd及反应的化学计量数。对于非特异性相互作用,可以测定其维力系数,并判断分子间的作用力及强度。此外,Calypso还可以测定反应的动力学,样品的重均分子量及均方根半径等重要分子信息。 Calypso分析系统无需对样品进行修饰(荧光标记、固定化等),且在溶液环境中测量,因此可以最大程度的保证样品的天然状态,从而得到其他技术难以得到的结果,最真实的表征生物大分子间的相互作用,样品方便回收。Calypso分析系统的工作原理:组分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是最新的分析技术之一,利用分子量的变化测定分子间的相互作用。溶液中大分子的散射光强依赖于物质的浓度C和重均分子量Mw,分子间发生复合,Mw则增加。例如,若所有的蛋白质分子以二聚体形式出现,则散射光强也会增倍。对于可逆的聚集,蛋白与单体蛋白复合的比例会达到一个平衡值,这个值依赖于每种蛋白初始的浓度和缓冲液的条件。不同的组成和浓度会导致Mw不同。通过分析一系列不同组成和浓度的光散射结果,可以确定所发生的聚集形式、各自的结合亲和力Ka、结合和解离平衡常数。手动配制比例及测量是一项繁琐、费时间且容易产生操作误差的工作,Calypso系统通过自动化的过程克服了CG-MALS手动操作的困难,将样品配制、输送及数据的采集和分析集合于一体,完美的保证了实验的重复性,并解决了人工配制样品时引入操作误差的问题。 技术优势1. 智能化配样,消除了手动配样时的误差问题;2. 样品直接测试,无需标记化或固定化,最大程度的保证了样品的天然状态;3. 快速的测定时间,半小时即可测得实验结果;4. 适用于各类生物反应体系的测定;5. 体系中自聚及不同样品分子异聚的分析;6. 化学计量点,平衡常数的分析,平衡常数范围:pM &ndash mM;7. 反应动力学的分析;8. 与激光检测器、浓度检测器联用,快速测定物质的Mw、Rg、A2、A3;获取Zimm图; 应用领域:1. 酶反应体系:酶与抑制剂的相互作用,酶促动力学等2. 药物探索:药物对蛋白质间相互作用的影响等3. 免疫研究:抗原/抗体的相互作用等4. 方法改进:测定及调整第二维力系数,帮助纯化抗体,确定多聚体的组成,确定样品的最优溶解条件等。5. 结合特异性:化学计量点,平衡常数,离子强度、pH或者辅料对多聚物或者蛋白结合的影响等。6. 多分子复合物的结构分析:在一系列缓冲溶液、时间、温度变化下,表征大分子聚集过程中分子间的结合强度, 以及确定其化学计量关系,通过Mw及Rg判断其空间构型。
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。 &bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-蛋白质: 抗原表位研究 ]Interleukin-1β (IL-1β) 在炎症和多种免疫应答中起关键作用,IL-1β 通过与 IL-1R 和 IL-1RAcP 形成异源三聚 体发挥功能。 Canakinumab 和 Gevokizumab 都是靶向 IL-1β 的人源化单克隆抗体,他们的作用机制不尽相同。勃 林格英格翰公司的研究人员通过 MST 试验发现,Canakinumab 与 IL-1β 的结合受到 IL-1R 的影响;而 加 入 IL-1R 对 Gevokizumab 和 IL-1β 的 结 合 影 响 较 小。 结 合 NMR 和 蛋 白 结 构 数 据, 研 究 人 员 证 明 了 Canakinumab 通过竞争性结合,Gevokizumab 通过变构效应,抑制 IL-1β 活性。 使用 MST 技术,可以在溶液中直接研究第三者分子对抗原抗体结合的影响,从而非常简单直观的进行抗原表位研究。Blech, M. et al. One target-two different binding modes: structural insights into gevokizumab and canakinumab interactions to interleukin[1]1beta. Journal of molecular biology 425, 94-111, doi:10.1016/j.jmb.2012.09.021 (2013). Chapleau, R. R. et al. Measuring Single-Domain Antibody Interactions with Epitopes in Jet Fuel Using Microscale Thermophoresis. Analytical Letters 48, 526-530, doi:10.1080/00032719.2014.947535 (2015).耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • GatorTM非标记生物分析系统采用生物膜干涉技术 ( Biolayer Interferometry, BLI ),通过采集、分析光学探针表面反射干涉光谱的信号变化来检测生物分子间的相互作用。作为一款全新设计的检测仪器,可被用于各个研发阶段,对分子进行非标记实时分析。GatorTM非标记生物分析仪可被广泛应用于研究蛋白质 - 蛋白质相互作用、蛋白质 - 核酸相互作用、蛋白质 - 小分子相互作用、核酸 - 核酸相互作用等领域,用于解离速度排序、亲和力常数测定、与靶抗原的结合、亲和力分析和表位分组等等。Gator系统的优势:l 无流路系统,无堵塞风险,仪器免维护l 操作简单,样品及缓冲液无需脱气处理,可直接测试上清液,细胞裂解液,血浆l 多达8个通道,检测速度快l 检测过程样品消耗很少,可以回收利用l 多样的探针选择,可根据实验需求定制l 检测和分析一体化软件,操作简单l 探针可再生 GatorTM 系统包括检测仪器、控制分析软件和一系列光学探针。 高度集成的软件整合数据采集和数据分析功能于一体,可实现一站式实验设置、数据获取、数据分析。目前许多常见的 ELISA 分析实验,包括抗体滴度测定、动力学分析、抗原表位分组和亚型鉴定,都可以在 GatorTM系统上快捷方便地实现。
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  • CEInfinite 全柱成像蛋白质等电聚焦分析系统是加拿大 AES 公司(Advanced Electrophoresis Solutions Ltd.)基于全柱成像检测技术研发和生产的新一代蛋白分析表征系统,是蛋白表征、生物制药研发和质控、生物大分子相互作用的利器。它克服了传统凝胶电泳和单点检测毛细管电泳固有的不足,能够为用户提供更加快速的方法开发,具有出色的检测灵敏度、完美的可靠性和更高的样品分析通量。
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  • 仪器简介:SPR-Navi ----致力于提供研究者能够支付得起的优质的SPR SPR-NAVI公司是与Janusz Sadowski博士和Ulf Jonsson博士合作成立的,Janusz Sadowski博士有着在VTT公司20年的表面等离子体谐振领域研究经历,Ulf Jonsson博士,为Biacore公司创始人和前任CEO,该公司开辟了表面等离子体谐振技术在蛋白质相互作用研究中的应用。 SPR-Navi是一个具有标准组件且易于使用的系统,该系统基于对分子间相互作用进行实时的,无标记监控的表面等离子体共振技术。 SPR-Navi应用范围: 生物分子研究 制药研究:工业/科学研究 - 药物设计和筛选 - 靶药物的输送 蛋白质工程 生物医学研究 蛋白质吸附 生物相容性研究 表面生物分子的相互作用 生物传感器 LB膜研究,分子自组装,有机单分子层,有机薄膜 结合点分析 吸附过程的动力学研究 SPR-Navi提供的信息: 浓度 折射率变化 厚度变化 相对聚集/解离速率 平衡常数 薄膜中的静电场(EM-SPR) 化学 BioNavis提供了宽范围的细心选择的,高纯度的产品,用于表面修正和自组合单层(SAMs)。对于其它研究表面特性的产品,请联系我们。 用于SAMs的硫醇 功能化硫醇 用于电活性SAMs的硫醇 用于光控开关SAMs的硫醇技术参数:SPR-Navi规格 测量原理 测角计SPR,具有旋转激光 角度分辨率 0.005度 光的波长 670nm,其它波段备选 折射率(RI)范围 1.00-1.45 SPR角度范围 40-80度 探测极限 折射率的3*10-6(蛋白质~3pg/mm2) 液体处理 双通道,试管交换容易 温度控制 8-40度(0.5度增量) 样品装载和注射 手动,通过12端口注射器 尺寸(H× W× D) 38cm× 32cm× 31cm 泵 双通道传导,软件控制 重量 10kg 流动池容量 1&mu l 环境和界面 MS Windows USB 2.0 样品容量 20&mu l和以上 电源要求 150W,100/240V, 50/60Hz SPR-Navi可选组件 可编程的注射器和泵 用于气敏的流动池 适合用户需要的客户化流动池 可达到4束客户选择的波长激光束 可在单点达到4激光波长 温度稳定区域 附件 SPR金制载片 12mm× 20mm 高粘连物可在绝大多数溶剂中由超声波清洗。同样适用于除了金之外的所有金属。 SPR载片架 更换SPR载片简单,与二氧化碳麻醉槽兼容。 专用的dip coater镀膜机 用于SPR 载片的化学表面修正。与SPR载片架兼容。 二氧化碳麻醉槽 小巧,独立的流动池,水平导向,手动吸液,以方便SPR载片的原位作用。对SPR激发相关的折射率(R)范围1.0-1.45保证了在气体和液体环境下使用标准棱镜的同时测量。 折射率的探测极限:3*10-6 相关的通常的蛋白质为3pg/mm2。 SPR-Navi提供具有吸引力的规格和附件供您选择,大量的选件组合将会满足具有最大要求的科学家们的需要。主要特点:易于交换SPR载片 不需要繁杂的相匹配油标记。 方便使用自己的载片 你同样可以使用自己的载片,这种载片通过合并和以数层的方式预涂到仪器的外面。 易于交换的流动池 允许对液体的和包括不同的激光波长的光学通道的组合进行改变。 双液体和双光学通道 使一个通道作为一个参考使用,以进行高灵敏度测量。 温度稳定性测量以及宽的温度范围 包括流动池和样品环的样品区域精确的设定恒温。宽温度范围进一步增加了测量的灵活性。
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  • 蛋白质高速乳化机,蛋白质实验室乳化机,蛋白质高剪切乳化机一、蛋白质的结构: 蛋白质结构是指蛋白质分子的空间结构。蛋白质主要由碳、氢、氧、氮等化学元素组成,是一类重要的生物大分子,所有蛋白质都是由20种不同氨基酸连接形成的多聚体,在形成蛋白质后,这些氨基酸又被称为残基。蛋白质和多肽之间的界限并不是很清晰,有人基于发挥功能性作用的结构域所需的残基数认为,若残基数少于40,就称之为多肽或肽。要发挥生物学功能,蛋白质需要正确折叠为一个特定构型,主要是通过大量的非共价相互作用(如氢键,离子键,范德华力和疏水作用)来实现;此外,在一些蛋白质(特别是分泌性蛋白质)折叠中,二硫键也起到关键作用。为了从分子水平上了解蛋白质的作用机制,常常需要测定蛋白质的三维结构。由研究蛋白质结构而发展起来了结构生物学,采用了包括X射线晶体学、核磁共振等技术来解析蛋白质结构。二、蛋白质的优点: 人体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质保证机体健康最重要的营养素,它不仅影响机体组织如肌肉的生长,还参与激素的产生、免疫功能的维持、其他营养物质和氧的转运以及血红蛋白的生成、血液凝结,因此有着“营养素之首”的美誉。蛋白质摄入不足不仅会影响机体新陈代谢,还可能导致免疫功能低下,引发多种疾病。传统高蛋白饮食存在着许多弊端,摄入大量的脂肪容易使人过于肥胖。通过服用蛋白质补充蛋白质则能避免这方面的顾虑。三、蛋白质的溶解实验: 为了纯化细胞蛋白质,采用有效的方法进行细胞破碎和固液分离是必要的。它是全过程的一步,通常是将处于细胞不同位置的待纯化蛋白释放出来,溶入已知成分的溶液内。该步骤是目的蛋白初级分离纯化阶段的重要环节,它直接影响产物的回收率,也可能影响产物的纯度。四、蛋白质分解实验室原理:通过固体剪切力破碎组织和细胞,释放蛋白进入溶液。市售的匀浆器主要有四类,刀片式组织破碎匀浆器、内切式组织匀浆器、玻璃匀浆器和用于规模生产的髙压匀浆器。玻璃匀浆器的匀浆头(杵)有玻璃制的,也有特夫隆制的,既可以手动也可以电动。由于匀浆过程中蛋白质被蛋白酶降解的可能性较小,所以匀浆是简便、迅速和风险小的组织破碎方法,是实验室首先考虑的方法之一。(洽谈:)五、蛋白质高速乳化机设备简介可在实验室高速马达,可选配不锈钢带夹套工作腔或玻璃工作腔。独特的定转子结构,产生超强的剪切力,迅速减小液滴尺寸,处理物料更精细、更均匀。本机特征模拟在线工况进行循环或在线连续处理,具有高效均质无分散死角等特点。适用工艺实验室连续流处理,可对物料进行循环处理,完成在线分散、乳化、均质、混合。 参数功率: 500/710W电源: 220v,50/60Hz流量范围:1-5L/min (H2O)处理粘度:5000CP速度范围:10000-28000rpm温 度: 120℃转速显示: 刻度转速控制: 无级接触物料材质: SS316L标准工作腔:不锈钢无夹套工作腔标准工作头: 20DG机械密封材质:SiC、FKM、陶瓷进、出口外径:14(软管接口)工序类型:在线处理底座材质:SS304外形尺寸:500×150×500重 量:10kg六、太仓希德实验室高速乳化机管精细化工:颜料、燃料、涂料、油漆、塑料、树脂、油墨、糊料、浆料、热熔胶、阻燃剂、胶黏剂、整理剂、表面活性剂、均染剂、防粘剂、消泡剂、亮光剂、橡胶助剂、塑料助剂、燃料助剂、絮凝剂、混凝剂、表面活性剂、溶剂、硅油乳化、树脂乳化、炭黑分散、白炭黑石油化工:润滑油、重油混合、重油乳化、油包水、包油水、柴油乳化、改性沥青、乳化沥青、催化剂、蜡乳化农药化肥:化肥、农药乳化、农药助剂、农药中间体、药乳油、杀虫剂、除草剂、种衣剂、杀菌剂、植物激素、尿素、复合肥、乳油、湿性粉剂生物医药:细胞浆化、血清疫苗、蛋白质分散剂、药乳膏、抗生素、糖衣、各型糖浆、营养液、中成药、膏状药剂、生物制品、鱼肝油、花粉、蜂皇浆、疫苗、各种药膏、各种口服液、针剂、静滴液等日用化工:护肤霜、护肤膏、洗涤剂、防腐剂、美发用品、牙膏、日用香精、洗发精、鞋油、高级化妆品、沐浴精、肥皂、香脂等食品工业:食品添加剂、香精、香料、果汁、果酱、冰淇淋、乳制品、巧克力、芦荟、菠萝、芝麻、月饼馅、奶油、果汁、大豆、豆酱、豆沙、花生奶、蛋白奶、豆奶、乳制品、麦乳精、番茄酱、花生酱、果冻、布丁、功能饮料、啤酒、鸡精、调味品等蛋白质高速乳化机,蛋白质实验室乳化机,蛋白质高剪切乳化机
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。&bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-纳米颗粒: 核酸适配体修饰的纳米颗粒探针 ]纳米颗粒在医学影像、分子诊断、靶向治疗等方面具有广泛应用。 双酚 A(Bisphenol A,BPA)广泛用于制造塑料瓶,食品罐内涂层等,同时它又是一种已知的内分泌干扰素, 威胁胎儿和儿童的健康。研究人员研发出一种纳米颗粒探针,将双酚 A 固定到金纳米颗粒上,可通过竞争 结合的方式定量病患儿童血液中的双酚 A 含量,指导医生的诊断和治疗。应用 MST 技术,研究人员检测 了纳米颗粒探针与双酚 A 核酸适配体之间的相互作用,测定到亲和力为 54 nM;这与游离双酚 A 和相同适 配体的亲和力(10 nM)差异不大。说明固定到金纳米颗粒上没有影响双酚 A 与适配体的结合。 MST 技术不受相互作用分子大小的限制,纳米颗粒,甚至是更大的病毒颗粒与配体的相互作用,都可以应用 MST 技术进行测定。Marks, H. L., Pishko, M. V., Jackson, G. W. & Cote, G. L. Rational design of a bisphenol A aptamer selective surface-enhanced Raman scattering nanoprobe. Analytical chemistry 86, 11614-11619, doi:10.1021/ac502541v (2014). Pant, K. et al. Surface charge and particle size determine the metabolic fate of dendritic polyglycerols. Nanoscale 9, 8723-8739, doi:10.1039/ c7nr01702b (2017).耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。 &bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-小分子: 自噬—溶酶体靶向降解 ]亨廷顿病是一种常染色体显性遗传的神经退行性疾病,病因是突变的 HTT 蛋白错误折叠而形成聚集物。 由于引起该病的变异亨廷顿蛋白(mHTT,Mutant huntingtin protein)生化活性未知,无法靶向,传统治疗方法并不适用。而特异性降解这些致病蛋白可以从根本上干预或治疗疾病。 复旦大学生命科学学院鲁伯埙、丁澦课题组和信息科学与工程学院光科学与工程系费义艳课题组合作在 Nature 期刊发表文章,开创自噬小体绑定化合物 (ATTEC)的概念,弥补 PROTAC 技术中蛋白酶体 难以单独消除某些特定蛋白聚合物的问题,发现了特异性降低亨廷顿病致病蛋白的小分子化合物,为亨廷顿病的临床治疗提供全新思路。 研究者成功将 mHTT 和 LC3“ 粘 连” 在一起,然后利用细胞自噬将 mHTT 降解掉。从化合物库筛选得到了两种小分子,随后用 MST 进一步验证了 mHTT、LC3以及正常亨廷顿蛋白与这些小分子的相互作用。Z. Li, et al. Allele-selective Lowering of Mutant HTT Protein by HTT-LC3 Linker [J]. Nature. 2019, doi: 10.1038/s41586-019-1722-1耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Biametrics公司介绍 位于德国的一家高科技公司,专注于无标记分子间相互作用检测技术及仪器的研发和生产。基于专利的SCORE(Single Colour Reflectometry)技术,研发出适合于工业高通量无标记分子互作检测设备b-screen,及适合一般科研实验室的灵活桌面型分子互作检测系统b-portable。b-portable:新一代分子间相互作用分析仪b-portable分子间相互作用分析仪一款科研实验室真正用得起、用得上的分子间相互作用分析仪。基于专利的SCORE技术(利用反射光干涉原理),在b-screen基础上推出低通量灵活桌面型b-portable分子互作检测系统,整个流程操作简单,快速获取动力学分析数据,适合于科研实验室低通量分子间相互作用检测应用。仪器参数技术原理:专利SCORE(Single Colour Reflectometry)技术,反射光干涉原理检测灵敏度:1pg/mm2动力学:结合速率常数Ka :103-107 M-1S-1解离速率常数Kd :10-6-0.5 S-1样品类型:蛋白质,抗体、肽段、DNA/RNA、多糖、脂类、小分子、细胞、病毒和纳米颗粒样品基质:各种基质,如含DMSO缓冲液、细胞培养基、尿液,血浆,血清,全血等进样方式:自动化流动式进样检测通量: 1-4个/次,样品多时可以4个样品为单位次连续多次上样检测耗材:芯片 应用领域:1、蛋白/蛋白相互作用2、动力学3、免标定浓度分析4、基于细胞的分析5、诊断研究
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。&bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-脂类: 新冠病毒 S 蛋白结合胆固醇 ] 血管紧张素转化酶 2(ACE2) 是新冠病毒重要受体。然而,ACE2 在许多组织中的表达水平较低,这提示新 冠病毒的入侵还依赖于辅助受体。2020 年,军事医学研究院与中国人民解放军第九六〇医院合作发表文章, 揭示了 B 族Ⅰ型清道夫受体 (SR-B1) 是新冠病毒的辅助受体。当人体中高密度脂蛋白 (HDL) 与新冠病毒 S 蛋白结合后,成为 S 蛋白和细胞表面 SR-B1 的“桥梁”,促进了病毒对细胞的黏附和入侵。 研究者首先对新冠病毒 S 蛋白的一级序列进行了分析,发现了六个可能的胆固醇结合基序。通过 Monolith 检测,证实 S 蛋白的 S1 亚基能够与胆固醇以及与 HDL 结合(图 1)。随后,研究人员进一步确认了结 合是通过 S1 亚基 C-termina 的 RBD (receptor-binding domain) 结构域完成的(图 2)。接下来,研究人 员通过三元结合的竞争性实验,证实了从新冠康复病人体内提取的单克隆抗体 mAb 1D2 可以阻碍 SARS[1]2-S1 与 HDL 的结合(图 3)。Wei, C., Wan, L., Yan, Q. et al. HDL-scavenger receptor B type 1 facilitates SARS-CoV-2 entry. Nat Metab 2, 1391–1400 (2020).耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。&bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-多肽: 小肽—受体激酶调控花粉与柱头识别的分子机理 ] 开花植物识别本物种花粉,而拒绝其他物种花粉的机制尚不清晰。2021 年,华东师范大学的研究人员发现, 拟南芥成熟未授粉的柱头内 ANJ-FER 受体激酶复合物与柱头内的 RALF33 多肽结合,引起活性氧产生。而 ANJ/FER 受体激酶复合物与花粉中花粉外壳蛋白 b 肽(PCP-Bs)互作,抑制 ROS 产生,使花粉水化。作 者通过推测 PCP-Bs 和 RALF33 多肽竞争结合 ANJ-FER 复合物,进而调节柱头中的 ROS 水平。 传统竞争结合方法实验步骤繁琐,且无法得到定量互作信息。作者利用 Monolith 完成了 RALF33, FER/ANJ 和 PCP-Bγ 三元复合体系中的竞争结合定量检测:将 RALF33 与 FERecd 孵育,使其达到结合平衡,然后加 入梯度稀释的 PCP-Bγ,检测得到 Ki 值为 2.5099 μM,即 PCP-Bγ 与 RALF33 竞争结合 FERecd/ANJecd,从而 抑制 RALF33 诱导的柱头 ROS 的产生,加速了花粉水化。红色曲线:FERecd 与 FITC-RALF33 的亲和力 Kd 为 0.1604μM黄色曲线:加入 PCP-Bγ,其对 FERecd-RALF33 结合的抑制常数 Ki 为 0.5009μM Liu, Chen, et al. "Pollen PCP-B peptides unlock a stigma peptide–receptor kinase gating mechanism for pollination." Science 372.6538 (2021)耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。 &bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-离子: 植物免疫抑制与广谱抗病机理 ]植物如何平衡抗病和生长发育平衡,中国科学院分子植物科学卓越创新中心何祖华团队研究揭示了以 ROD1 为免疫抑制中枢,通过降解超氧活性因子 ROS,抑制植物的免疫反应,平衡植物防御和生长之间的 冲突。 水稻中,ROD1 编码一种 Ca2+ 传感器蛋白,以Ca2+ 依赖的方式结合到磷酸肌醇脂质,靶向至特定膜区域。 ROD1 刺激过氧化氢酶 CatB 的活性,促进活性氧 (ROS) 清除,抑制免疫;当有稻瘟菌侵染时,植物通过 降解 ROD1 减弱其功能,产生有效的防卫反应。作者使用 Monolith 检测 ROD1 可直接与 Ca2+ 结合,并鉴 定出活性结果位点。 另一方面,研究发现病原稻瘟菌中具有与 ROD1 结构类似的毒性蛋白 AvrPiz-t,在植物体内盗用 ROD1 的 免疫抑制途径,实现侵染的目的,进而与病原菌共同生存。通过 MST 检测到 AvrPiz-t 与 Ca2+ 结合,进而 盗用 ROD1 途径。Gao M, He Y , Yin X , et al. Ca 2+ sensor-mediated ROS scavenging suppresses rice immunity and is exploited by a fungal effector. Cell, 2021.耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Monolith X分子互作仪【轻松、快速、精准检测分子间相互作用】产品简介:Monolith 系列分子互作仪,采用创新性的光谱位移技术(Spectral Shift) 和 经 典 的 微 量 热 泳 动 技 术 ( MicroScale Thermophoresis, MST),轻松检测最具挑战的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力,且检测浓度范围广、操作简单。技术原理&bull 光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 &bull 微量热泳动技术:MST技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标,荧光值为纵坐标作图,从而获得平衡解离常数 Kd 产品优势:&bull 双技术模块:可同时搭载光谱位移(Spectral Shift)和微量热泳动(MST)技术模块,可灵活升级&bull 无需固定样品:可直接在溶液中定量检测&bull 无惧分子量:各种分子互作轻松驾驭,蛋白质、核酸、多肽、小分子、离子、纳米颗粒等&bull 节省样品:最低样品消耗量仅需 10μL,10分钟即可检测1个 Kd &bull 智能优化:实时监测样本质量,并提供优化建议&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护产品优势 - 解决SPR难以应对的分子互作难题:&bull 样品固定会阻碍 Kd 值的测定SPR 中不合适的固定或再生条件会负面干扰配体结合。由于 Monolith 是在可控平衡条件下进行溶液内结合检测,因此可以帮助您测定固有无序蛋白(IDPs)等存在构象动态复杂变化的具有挑战性的样品。&bull 待测分子与芯片基质间的非特异性结合由于 SPR 无法区分待测分子是与固定在芯片上的样品还是芯片基质发生了结合,因此您还需要做进一步检测来识别和排除非特异性结合。而您在使用 Monolith 时无需专门检测此类非特异性结合,因为检测是在溶液内完成的。&bull 强亲和力结合分析难度大使用 SPR 评估强亲和力结合是极为困难的, 其原因是:强亲和力互作的解离速率极慢,而 SPR 需要通过解离速率来计算亲和力,因此您需要等待极长的时间才能准确测得此数据。而 Monolith 是直接检测结合,您完全无需等待。&bull 检测共价结合用 SPR 研究共价结合是非常繁琐的。而 Monolith 是直接在溶液内检测结合,您无需考虑如何再生芯片,这就使共价结合的检测变得非常容易。应用方向: 蛋白质-小分子蛋白质-蛋白质蛋白质-离子蛋白质-核酸蛋白质-多肽蛋白质-脂类蛋白质-糖类蛋白质-纳米颗粒案例精选[ 蛋白质-糖类: 流感病毒结构改变介导病毒在人类传播的机制 ]了解流感病毒的物种特异性,是研究人员的长期目标。流感病毒传播很大程度上取决于它们结合宿主细胞 表面受体的强弱。病毒表面蛋白血凝素(haemagglutinin, HA)介导与宿主细胞互作,是一个关键因子。 英国医学研究委员会国家医学研究所(NIMR)的研究人员应用 MST 技术定量研究了一种突变 H5N1 病毒 亚型的血凝素(HA)和其受体(细胞表面的糖分子)的结合特性。结果表明其对于人类受体的亲和力略有 增高(Kd= 12 mM VS. 17 mM),而对于禽鸟受体的亲和力显著下降(Kd= 32 mM VS. 11. mM)。使用 MST 技术测定的亲和力与以前使用 NMR 测定的结果非常一致。Xiong, X. et al. Receptor binding by a ferret-transmissible H5 avian influenza virus. Nature 497, 392-396, doi:10.1038/nature12144 (2013). Deng, L. et al. Host adaptation of a bacterial toxin from the human pathogen Salmonella Typhi. Cell 159, 1290-1299, doi:10.1016/. cell.2014.10.057 (2014).耗材支持: &bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供更加优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为优选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • 经典非标记技术,实时高质量数据S-CLASS是用于研究生物分子相互作用的非标记分析系统。其采用经典的表面等离子共振(SPR)技术,以卓越的灵敏度提供高质量的实时相互作用数据。即便是超快速的结合和超慢速的解离过程,亦能轻松应对。掌控全面信息,助力最优决策面对复杂的分子相互作用过程,传统的互作技术(例如ELISA)通常以终点快照的方式获取数据,只能提供极为有限的结合亲和力信息。而采用表面等离子共振技术(SPR)的S-CLASS系统,通过实时监测整个互作反应过程,获取多维度的高质量数据,协助您掌握正确的结论并作出最佳决策。特异性:结合分子对其目标蛋白是否具有特异性?抗体能否识别多种衍生物?应用灵活的检测方式进行快速评估交叉反应性和特异性。强度:分子之间的结合强度通常以亲和力(Affinity)来衡量,表示为平衡解离常数 (KD) 。亲和力受非共价键分子间相互作用的影响,例如氢键合、疏水相互作用等。快慢:结合动力学用于描述两种分子之间结合和解离的速度快慢,通常表示为 ka(结合速率)以及 kd(解离速率),是药物研发中不可或缺的重要参数。数量:通过检测活性分析物与目标蛋白的结合情况,定量测定活性蛋白与总蛋白的浓度关系。从容应对各种样本的挑战作为一款综合性的分析工具,S-CLAS5 可用于分子间相互作用的高通量筛选和表征,例如蛋白-蛋白、蛋白-核酸、蛋白-小分子以及蛋白-多糖等样本类别。集成式微米级流路控制系统,确保了仪器具有超高灵敏度特性,从容应对从低分子量的小分子到各式复杂生物大分子样本的挑战。全面加速药物研发进程S-CLASS 系统助力科学家在生命科学研究以及生物制药开发的每个阶段开展应用 ― 从药物早期机制研究、筛选到后续的验证和生产。作为一款高通量的分析仪器,将全面推动药物研发的进程。基础科研 &bull 结构生物学 &bull 天然产物研究 &bull 适配体的筛选与开发医学研究 &bull 疾病机理 &bull 临床(生物)标记 &bull 外泌体应用生物药发现与开发 &bull 筛选排序 &bull 动力学表征 &bull 表位作图小分子研发 &bull 高通量筛选 &bull 先导化合物优化 &bull 构效关系(SAR)和作用机制(MOA)生物药生产与QC &bull 纯度杂质分析 &bull CQA活性表征 &bull QC批次放行疫苗开发 &bull 疫苗设计 &bull 病毒疫苗定量 &bull 病毒颗粒检测通量和灵变的完美平衡平行检测S-CLASS 系统设计了先进的8根进样针平行进样模式,能够平行检测8种不同样品,快速获取动力学和亲和力数据。加上独特的微流控进样设计,通过实时通道扣减,确保每个样品都能获得高质量的参比扣减数据。系统可容纳两块96孔或384孔标准微孔板,在运行时样品舱门可独立开取以进行更换,大幅提高运行效率。X in 8 随心而选“X in 8”是S-CLASS最独特的设计,用户可以任意选择进样针的位置和数量进行实验。在实验运行中,未被选择的孔板位置无需加入缓冲液,有效提高耗材使用效率。系统支持手动、序列和平行三种进样模式,方便用户以最灵活的方式优化条件以及设计流程。智能化软件设计,可靠数据信手拈来控制软件和数据分析软件采用智能化、图形化的设计理念,让所有的使用者都能轻松上手,获得高质量数据。软件预设多种方法模板,引导用户快速完成方法编辑。针对不同使用者,管理员可设置多级别权限进行管理。面对大量实验结果,数据分析软件支持批量处理分析,快速获取可靠的数据结果。此外,灵活的数据输出方式支持多类型格式导出,包含excel、pdf以及常规图片格式。搭“积木”,编方法在实验方法的编辑中,用户往往面对大量复杂的参数设置而不知所措。S-CLASS控制软件运用模块化命令,以搭建乐高积木的方式让新用户也能轻松上手,所见即所得。生物药的表征和优化对于生物药物分子,具有相同亲和力的两个候选者可能表现出完全不同的结合机制。因此,综合结合速率和解离速率来评估亲和力常数在选择最佳候选药物的过程中至关重要。而SPR技术凭借其灵敏度高、动力学表征结果可靠的优点成为分子互作的金标准,助力近百款药物上市。在2016年被列入美国、日本药典,2020年又被列入中国药典。S-CLASS 作为一款高通量SPR仪器,可用于动力学和亲和力测定、结合特异性分析及筛选、表位作图、一致性评价、浓度定量及效价鉴定、生产质控及批次放行等诸多应用场景,全面加速药物上市进程。适用于各种应用的传感芯片针对不同的样品和应用,S-CLASS为客户提供多款传感芯片选择。良好的重现性和稳定性,可保证传感芯片的再生及重复使用,大幅降低实验成本。
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  • Fox Biosystems 光纤表面等离子体共振仪(FO-SPR)Fox Biosystems 无标记SPR生物分子相互作用仪White Fox 光纤探针SPR 一. Fox Biosystems 公司介绍比利时鲁汶大学的MeBioS学院(Mechatronics, Biostatistics and Sensors,机电一体化,生物统计学和传感器)于2006年开始研究基于表面等离子体共振的光纤生物传感,并将其命名为FO-SPR。FOx BIOSYSTEMS由Filip Delport和Jeroen Lammertyn于2017年创立,是MeBioS学院的衍生产品,目前仍与MeBioS科学家保持密切合作。Fox Biosystems突破生物分析的限制,提供强大且灵敏的基于光纤的表面等离子体生物传感器仪器,其使命是通过实时、无标签的分析产品改变生物科学和药理学研究市场。Fox Biosystems提供一种新型基于光纤的表面等离子体共振(fiber-optic-based surface plasmon resonance ,FO-SPR)生物传感器,采用浸入式光纤传感器,无流体设置,无堵塞风险,无清洗,适合直接分析复杂的生物样品,能够准确,快速地生成高质量,高性价比的生物分子相互作用数据,具有广泛的应用。White FOx 是其依据光纤表面等离子技术开发的自动化的生物分子相互作用分析研究平台。二、Fox Biosystems 产品介绍1、光纤表面等离子体共振技术(光纤-SPR) 表面等离子体共振(SPR)是等离子体在入射光照射的金属 – 电介质界面处的共振荡。它引起两种介质的界面处的导电表面反射光的强度降低。“共振条件”或反射少量光的波长可用于测量传感器表面上的质量。当目标分子与传感器表面结合并取代周围的基质时,通过监测共振条件的波长变化来实时检测质量密度的变化。FOx BIOSYSTEMS采用光纤SPR进行生物分子相互作用分析。在White FOx仪器中,通过将白光耦合到镀金的光纤传感器探头来实现SPR。这种作为耗材的探头可以通过光谱仪接收的内部反射光的变化来感受转瞬态场(距离外表面200nm的区域)中基质折射率的变化。反射光随时间的变化就是实时的结合曲线。探头可以方便的地浸入到样品中,无需流体学设置。这使得FOx技术即可用于纯化的样品也可用于更复杂的基质,例如血浆和血液中,而不会存在管堵塞的风险。2、White Fox 光纤的表面等离子体共振仪White FOx技术应用基于光纤的表面等离子体共振(SPR)传感原理,并进行一定改变。White FOx 仪器是一种坚固耐用、维护成本低、易于使用的台式仪器,用于生物分子之间的定量、亲和力和结合相互作用研究。只要将探针架和样品装入孔板或PCR管中,即可运行无需手动操作的自动化方案。光纤探针设置允许无流体浸入方案,用于分析复杂样品(如裂解物,全血或大颗粒)中的特定生物分子结合。不堵塞,无需清洁。White Fox 仪器的主要特点:&bull 基于表面等离子体共振(SPR)传感原理&bull 可相互更换探头,便于协议切换&bull 与 PCR 微孔板和低容量 PCR 条兼容&bull 四个并行传感探头加快速度&bull 所需体积至 140 μL&bull 温度控制:环境温度至40°C&bull 与 Windows 10 兼容的用户友好型软件&bull 开放数据格式&bull CE 认证White Fox 仪器的优势:&bull 方便使用的浸入式传感器&bull SPR的精度和速度&bull 无流体:无堵塞,无需清洁&bull 灵敏度:μM 至 nM (无标记检测),pM至fM(金纳米粒夹心法检测)&bull 一个设备多靶点检测:蛋白质,抗体,纳米体,复杂颗粒,微囊泡等。&bull 坚固耐用和灵活&bull 快速获得结果&bull 减少手动操作时间&bull 与竞争对手生物传感器技术相比,更经济实惠4、White FOx 的浸入式光纤探头White FOx 的浸入式光纤探头可以进行定制,目前提供四种表面化学成分,更加方便。可定制、可互换的探头由镀金光纤组成,有四种不同的表面化学物质可供选择,允许结合一系列蛋白质和生物制剂。这些一次性探头放置在White FOx中,作为一种半自动分析的台式仪器,用于实时分析生物分子相互作用。该仪器使用光纤表面等离子体共振(FO-SPR)原理对生物分子进行标记和无标记检测,包括蛋白质,抗体,纳米体,噬菌体,复杂颗粒,微囊泡或微升体积的细胞。在几分钟内,您可以获得有关结合亲和力,动力学或靶标浓度的准确信息。这些可互换的探头有四种不同的样式,这意味着White FOx可以用同一设备检测不同的目标分子,为您提供充分的使用灵活性。四种不同的表面化学成分,允许为生物测定选择适合方法,探头都可以在室温下运输和储存,并且可以在大多数的测定后再生以重复使用。四种不同表面成分的探头包括:羧基:一种通用表面化学修饰,适用大多数的应用NTA:用于固定His-tag蛋白,方便纳米体和重组蛋白,是文库筛选的理想选择,允许倍增。链霉亲和素:用于轻松固定生物素标记的蛋白质、抗体或肽蛋白 A:用于定量IgG的通用表面,筛选 IgG 文库结合效力的理想选择5、White FOx产品的独有技术特点 光纤表面等离子体共振通过广泛选择靶标简化了大多数的生物分析应用。White FOx使用新的光纤探头,将无流体的浸入方法与表面等离子体共振(SPR)的精度和速度相结合。这意味着它可以直接用于复杂的样品,如裂解物,全血或大颗粒。探头可以轻松切换,以便使用单个设备检测不同的目标分子,包括抗体,纳米体,微囊泡,噬菌体和小分子。无流体 = 无堵塞或清洁,可更换探头可用于多种表面化学成分。6、White Fox 控制软件软件是FO-SPR的重要组成部分,具有以下特点:&bull 使用直观、可视界面无需编程即可轻松创建和更改协议&bull 实时跟踪传感器图或无人看管运行后查看数据&bull 与标准数据处理软件兼容的开放数据格式&bull 数据处理工具便于选择和将感兴趣的曲线序列分组并导出数据。&bull 详细动力学和校准曲线的数据分析三、Fox Biosystem 应用领域White Fox 主要用于生物分子相互作用研究,可以实现无标记的定量,无标记的结合动力学,快速夹心法检测,未纯化样品的定量,生物淘筛(Biopanning),目标可以是抗体,纳米抗体,蛋白质,细胞外囊泡,病毒,噬菌体等。White FOx 光纤生物传感器仪器为您的诊断开发、生命科学和(生物)药物研究带来灵活性、控制和洞察力。
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  • Andromeda X 蛋白质表达和功能快速筛选系统「全方位提升蛋白质研发和生产效率」产品简介:蛋白质表达和功能快速筛选系统Andromeda X,配备高灵敏的光谱位移技术(Spectral Shift),仅需11分钟,即可筛选出您重组蛋白最佳表达与最优构象稳定性的条件; 在粗裂解液中更快地筛选更多表达条件常规工作流程依赖于不止一种方法来筛选表达和提取条件,例如SDS-PAGE, SEC 或 FSEC。Andromeda X 可以替代这些耗时且通量较低的传统方法,只需简单的样品处理,11 分钟即可分析多达 48 个粗裂解液样品,从而让您可以更快地进行放大生产。 传统的热稳定性检测,您必须先纯化蛋白质或用裂解液进行繁琐、低通量的FSEC-TS实 验。Andromeda X 可以轻松在粗裂解液中筛选出蛋白质表达量高并且处于正确折叠状态的表达条件。尽早获得蛋白质稳定性的信息意味着减少后续筛选表达条件的工作量,提高 实验效率。 在纯化之前,通过热位移实验评估蛋白质结合活性在生产用于亲和力筛选研究的靶标蛋白时,我们希望能得到充足且结构稳定的产物。在小规模表达阶段,Andromeda X 可在裂解液中快速评估配体存在情况下蛋白的结合活性。技术原理光谱位移技术:通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Andromeda X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光,因而能够精确检测到极细微的光谱位移。 高灵敏度光谱位移光学元件:您的目的蛋白在裂解液中无处遁形只需将特异性荧光染料添加到含有重组蛋白的裂解液中即可。 蛋白质去折叠导致荧光基团化学环境改变,从而引起光谱位移获取蛋白质全面信息:表达水平、构象稳定性、配体结合信息产品优势:&bull 搭载高灵敏光谱位移(Spectral Shift)技术模块&bull 单次检测,可获得蛋白质表达、热稳定性和配体结合信息&bull 无需纯化样品:使用10μL裂解液即可检测,兼容多种细胞系(E.coli,HEK293,Sf9)&bull 快速检测:仅需11min,即可检测48个样品&bull 无液流系统:无堵塞风险,免维护应用方向:&bull 抗原生产&bull 酶促蛋白优化&bull 小分子药物靶蛋白表达&bull 重组膜蛋白&bull 重组蛋白研发和生产耗材支持:&bull NanoTemper在线商城小程序(微信搜索)&bull NanoTemper官网关于NanoTemper: 德国NanoTemper始创于2008年,总部位于慕尼黑。作为全球知名的科学仪器制造商,历经十余载发展,在全球13个国家设立分支机构。 我们始终致力于为蛋白质分析研究提供最优质的解决方案。基于专利微量热泳动技术(MST)、微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)和光谱位移技术(Spectral Shift)等创新技术,公司先后推出分子相互作用检测仪(Monolith系列)、蛋白稳定性分析仪(Prometheus 系列)、高通量亲和力筛选系统(Dianthus系列)以及新品蛋白质表达和功能快速筛选系统 ( Andromeda X )。 NanoTemper以优质的产品与服务迅速赢得全球知名药企、生物技术公司、服务公司和科研机构的好评,成为首选合作伙伴。需要更多信息或希望获得个性化解决方案?请随时联系我们~
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  • Biacore T200 分子相互作用仪Biacore系统是基于表面等离子共振原理(SPR))的生物分子相互作用分析系统,通过实时、无标记的分析手段对分子结合过程加以研究,可揭示蛋白质,核酸等多种生物分子之间的相互作用,有助于科学家更深刻地理解生物分子之间的相互作用和这些作用所承载的生物学功能。在SPR实验中,一个分子(配体)固定在传感器芯片上,第二个分子(分析物)流过芯片表面,在流动条件下测定相互作用。响应以共振单位(RU)表示并与表面质量成正比。SPR实验可用于测量动力学结合常数(ka,kd)和亲和力(KD)。 应用和特点主要应用● 动力学: ka, kd● 亲和力: KD● 大分子和小分子结合Biacore T200 主要特征● 多种偶联方式● 可设置单循环动力学● 温度可控(4-45℃)● 可用于小分子的高灵敏检测耗材● S 系列芯片注意:只有S系列芯片适用于 Biacore T200更多芯片类型及货号可查看Cytiva 网站● 96 or 384-well reagent plates (optional)使用 Biacore Microplate Foil (96 or 384-well) ● 缓冲液和EP管 (自备)● Pipettes,双面架,记号笔 (自备)Popular Biacore T200 Sensor Chips and KitsPart NumberCM5 Sensor Chip, Series S (amine, thiol coupling)BR100530 (3-pack)Amine Coupling KitBR100050SA (streptavidin) Sensor Chip, Series SBR100531 (3-pack)Biotin CAPture Kit, Series S28920234NTA Sensor Chip, Series SBR100532 (3-pack)GST Capture KitBR100223Mouse Antibody Capture KitBR100838Human Antibody Capture KitBR100839样品准备缓冲液● 准备250 ml的运行缓冲液● 所选缓冲液需要保证蛋白质的活性● 为了避免非特异性结合,可添加 0.05% Tween 20 或其它种类的表面活性剂尝试的表面活性剂浓度范围 0.02-0.1%Cytiva 有商业化缓冲液 HBS-P+ (HBS, 0.05% Tween20) 可购买,登陆Cytiva网站查找详细信息● DMSO 浓度最高可达10%● 请用运行缓冲液配制分析物样品样品● SPR实验配体:固定的分子分析物:流动的分子● 分析物溶解在运行缓冲液中缓冲液不一致将产生溶剂效应由于DMSO具有高折光率,所以分析物与运行缓冲液中的DMSO浓度应该尽可能一致● 精确定量样品浓度配体浓度影响信号强度分析物浓度直接影响KD● 蛋白聚集体会干扰SPR实验,损坏芯片或者堵塞流通池实验开始前过滤或离心样品使用动态光评价样品的均一性使用SEC去除可溶性的蛋白多聚体● 初次尝试的浓度范围:配体:2 – 50 µ g/ml分析物:0.01 – 100 X KD (推荐 0.1 – 10 X KD)● 所需样品体积:随流速和时间的变化而不同单次最大进样体积 408新手入门SPR 实验有三个主要步骤需要优化:Immobilization:将配体固定到芯片表面Interaction analysis:分析物的结合和解离过程Regeneration:移除芯片表面的分析物或分析物和配体实验设计注意事项ImmobilizationBiacore T200 一共有4个通道● 每次实验使用两个通道 (1和2通道或者3和4通道)第一个通道为参比通道 (不固定配体分子)第二个通道为样品通道 (固定了配体分子)● 推荐配体偶联时的流速:10 µ l/min● 估算目标偶联量目标 Rmax~ 25 (受最大偶联密度限制)实验结果 Rmax可能在 2-10 RU(非绝对,仅供参考)预实验时,可以设定较高的偶联量,以避免低表面活性Rmax= RLx MWanalyte/MWligandx SmRmax= 分析物最大的理论响应值Sm= 化学计量比(分析物/配体)RL= 配体偶联量目标偶联量的计算方法:对于蛋白分析物,将RL设置为Rmax低于150对于小分子分析物:● 建议低密度偶联低偶联密度相当于较少的分析物消耗在层流中,例如 50 µ l/min时,由于表面附近的流速很低,低偶联密度可以使得表面附近的分析物浓度很快恢复最小的空间位阻和聚集体减少传质效应● 固定配体可以通过不可逆捕获或可逆捕获来实现不可逆捕获:配体不能从芯片表面除去● CM5 (Carboxy Methyl Dextran) 用于氨基偶联建议配体浓度:10-50 µ g/ml (~25 µ g/ml)最大偶联密度:8000-10000 RL配体的等电点建议大于4,太低不利于氨基偶联最常用芯片类型可用于制备捕获芯片 (固定抗体或链霉亲和素)氨基偶联● SA (Streptavidin) 用于捕获生物素标记的配体氨基偶联链霉亲和素到 CM5芯片,可降低非特异性结合或可达到高偶联密度可选择Biotin CAPture kit 进行可逆的捕获推荐配体浓度 ~2-5 µ g/ml最大捕获量:2000 RL其它类型的SA芯片:可逆捕获:每个循环可以从芯片表面除去配体● NTA 可用于捕获 His标签蛋白建议配体浓度 ~10 µ g/ml最大捕获量:1,000-3,000 RL8 His 或者 10 His的标签蛋白可提供更大的偶联量 (多达 5,000 RL)与氨基偶联同时进行可实现稳定偶联,但芯片将不可逆● Biotin CAPture Kit 用于捕获生物素化的配体建议配体浓度 ~2-5 µ g/ml.芯片已经预固定了特定的单链DNABiotin CAPture kit提供生物素化的互补DNA● 抗体捕获试剂盒Anti-human, Anti-mouse, Anti-GST, Anti-His capture kits 可提供相应的抗体和试剂,通过氨基偶联的方式固定到 CM5 芯片以实现可逆的抗体捕获最大的固定量依抗体浓度而定Interaction analysis: 设置动力学实验● 动力学实验需要至少5个浓度梯度浓度范围覆盖 0.1 - 10X KD,曲线分布要有曲有直● 可设置多个零浓度用来测定基线,如样品进样前两个,样品进样后一个● 至少设置一个浓度重复,可评价再生效果● 动力学检测时,推荐流速 50 µ l/min (最小 30 µ l/min)高流速最好 (100 µ l/min 50 µ l/min 30 µ l/min)高流速有利于参比扣除和拟合● Startup cycles 对于仪器的平衡是必要的蛋白样品:3 startup cycles小分子样品:5-10 startup cycles ● 设置重复试验计算实验误差,包括重新制备分析物和固定配体● 如果实验中使用了 DMSO,那么需要进行溶剂校正实验Regeneration● 配体的固定方式分为可逆法和不可逆法● 可逆固定每个实验循环都需要将芯片表面的配体移除每个循环必须重新捕获配体可逆固定方式的再生有成熟的试剂盒可选择,但是也需要进行必要的优化● 不可逆固定通过移除分析物来再生配体表面,但不能损害配体活性通过不可逆方式固定配体,那么每次实验都要重新优化● 优化再生条件高浓度快解离的 competitor0.1% SDS (进样15 sec)高盐低 pH高 pH添加去垢剂到缓冲液中优化的目的是在不损害配体表面活性的前提下,选择更温和的再生条件可使用手动操作或者使用 Regeneration Scouting Wizard测试一系列溶液,从温和到剧烈:为了确定再生条件,需要进行 5-6 结合再生循环如果解离比较快,那么可以不用再生小分子化合物可能难以再生,因此请尝试更广泛的再生条件数据收集数据收集前的准备● 提前一天在大型仪器共享平台上预约● 手机开电,然后手动开电脑主机和仪器电源● 设定实验温度为25℃● 缓冲液和芯片提前在室温平衡实验数据收集三种数据收集方式:● Manual Run● Wizard Template (most common)● Method1. Manual Run● 在手动运行中,可以实时发出仪器命令以进行快速测试或控制注射的结束时间i)不能于动力学分析,因为评估软件不会读取这些数据ii)最常用于预实验或手动固定2. Wizard Template● 常用的实验方法可以从向导模板中运行● 选择文件→打开/新建向导模板● 选择实验类别(例如固定化,动力学/亲和力)● 选择新建(或选择一个保存的模板)● 设计实验● 将样品添加到试剂架(1)选择要使用的架子(最常见的是样品架和试剂架1)(2)选择菜单→Automatic Positioning(3)对于技术重复(使用同一样品管),将Pooling 改为 Yesi)要更改rack type,请在“Rack Positions”页面上ii)选择弹出rackiii)根据rack map,向试剂架中放置相应的试剂● 要保存Wizard Template,请在“Prepare Run Protocol”页面上:i)选择菜单→将Wizard Template另存为...● 选择开始以开始运行3. Method● 可以使用“Method Builder”设计更复杂的实验● 通过修改现有方法或使用“Method Builder”来创建方法模板● 选择文件→打开/新方法● 选择一个现有的方法或Wizard Templatei)要将Wizard Template转换为方法,请选中显示可导入Wizard Template的复选框ii)Biacore方法文件夹中有一些预先设计的方法,可用于更复杂的方法实验(例如GST动力学,单循环动力学等)● 选择打开● 根据需要修改方法● 选择设置运行● 输入运行参数● 选择开始运行数据分析● 打开Biacore T200 Evaluation Software● 选择文件→打开,以打开数据文件● 检查所有原始和减去的感应图● 单击工具栏上的动力学/亲和力按钮,然后选择“Surface bound”● 选择曲线对话框:查看/编辑要包含的数据Blanks 显示为灰色● 选择数据对话框:显示减去空白的数据右键单击并拖动以删除选定的数据区域(例如,删除尖峰)选择分析类型“动力学”(首先尝试拟合动力学,然后返回并拟合“亲和力”作为替代或验证动力学)● 动力学对话框:单击拟合以执行拟合从默认的 1:1 binding model开始查看 “Quality Control” 选项卡并检查拟合情况单击完成以完成分析● 稳态拟合对话框:稳态拟合仅在结束时均已达到平衡的数据上使用调整分析区域(可选)单击拟合以执行拟合检查拟合和拟合参数单击完成以完成分析关机1. 从仪器中取出 芯片2. 倒掉废液3. 清洁台面卫生4. 手机关电,退出大仪共享系统
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  • Creoptix总部位于瑞士。拥有基于光栅耦合干涉技术(Grating-Coupled Interferometry ,GCI)的光学生物传感器专利,以及外置的微流体的独特设计和Google公司研发的自动化软件。Creoptix致力于提供高质量的动力学数据,拥有业内最灵敏准确的WAVE system,使全球生物科学研究者可以做以前不可能做的事情,看到以前看不见的数据。凭借突破性的创新,避开了SPR的局限性。突破无标记技术的局限。苏州欧亿特仪器科技有限公司是Creoptix中国总代理,拥有多位专业的应用科学家和售后服务工程师。作为国内科学仪器行业的领导供应商,我们服务于生命科学、工业、制药、政府、教育、电子以及商业实验室等众多领域。凭借与世界知名科学仪器制造商之间的战略合作关系、以及不断优化的公司自身运作和服务质量,欧亿特每年都为数以千计的客户提供产品和优质的服务。无与伦比的灵敏度传统的SPR技术基于表面等离子共振原理,其光束的照射范围为100nm,而光栅耦合干涉技术(GCI)利用波导技术将整个光路延申至2mm的整个传感器通路,对重量的微小变化更加敏感,能够表征极低蛋白固定量和分子量比大于300的分子相互作用动力学。超高时间分辨率准确的表征解离速率大于10s-1的分子间相互作用的动力学。灵活的操作系统兼容48,96,384板任意组合,120h无人值守运行。极低的维护成本微流路外置在芯片中,无需定期更换微流路,日常维护每年仅消耗100mL的PBS。分析领域:分子相互作用模式的研究;动力学常数的测定;亲和常数测定,浓度的测量及构象变化的速率等。 生命科学研究领域:蛋白质组学研究、癌症研究、新药研发、信号传递、分子识别、热力学分析、免疫调节、免疫测定、疫苗开发、瞬时结合、配体垂钓、结合特异性、结构与功能的关系及酶反应等。 分析样品类型:小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖到类脂、脂质体,噬菌体、病毒样颗粒和细胞等。参数:流通池(通道)数量: 4噪声(RMS) 2 (1pg/mm2=1RU)漂移 2 /min读取频率 :1 Hz, 10 Hz or 40 Hz分子量:无限制结合常数范围(小分子): ka = 10 3 —10 7 M -1 s -1结合常数范围(大分子): ka = 103—109M-1s-1解离常数范围: kd = 10 -7—5 s -1温控范围 WAVEdelta: 4°C - 45°C (max 20°C below ambient)微流路:整合到芯片中脱气装置:内置流速: 0—400ml/min样品容量:两块48(96,384)孔板自动化:120h无人值守运行进样量:20-425uL(普遍100ul)缓冲液:自动转换 4 buffers
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  • WeSPR One Auto生物分子相互作用仪WeSPR One Auto 生物分子相互作用仪将先进的光学传感装置、精致的管路系统、多样化的芯片表面化学修饰和强大的数据分析软件结合在一起,双流道检测方式,仪器灵敏度高,特别适合小分子和结合解离快样本的亲和力测试,One Auto适合各类流式检测,提供微流控环境。产品优势:1、小型桌面式、使用场景灵活2、操作简便、用户友好3、配套云平台、快速分析数据4、多样化的芯片表面修饰
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  • 关于Affinité Instruments Affinité Instruments由加拿大蒙特利尔大学知名教授Jean-Fran?ois Masson于2015年创办。 Affinité Instruments与多所高校、研究机构和企业建立合作关系。 表面等离子体共振(Surface plasmon resonance, SPR)SPR技术迄今已有30年的应用历史,作为分子相互作用检测技术,有优异的准确性、稳定性和高重复性。SPR技术工作原理如左图所示,将一个生物分子(配体)固定在芯片金膜表面,与之相互作用的另一个分子(分析物)溶液流过金膜表面。 SPR检测示意图与传统SPR固定入射光波长,检测入射光角度的改变不同,Affinité Instruments P4SPR采用固定入射光角度,检测入射光波长的改变。即:当入射光的波长为某一个值时,入射光全内反射产生的消逝波与金膜表面等离子体波的频率与波矢相等,两者发生共振即SPR现象,此时能量从光子转移到金膜表面等离子体,使得检测到的该波长的反射光能量急剧减少,对应的入射波长即共振波长。SPR的两种检测模式SPR对附着在金膜表面敏感探测区域的介质的折射率非常敏感,当溶液中的分析物与固定在金膜表面的配体结合时,引起金膜表面介质的折射率发生改变,从而使共振波长发生位移。通过检测共振波长随时间的变化,P4SPR可以实时动态检测溶液中分析物与配体结合、解离整个过程的变化。共振波长分子相互作用时共振波长随之改变P4SPR获取信息P4SPR检测对象P4SPR特点和优势P4SPR入射光无需穿过样品:即使是血液、细胞粗提液等复杂不透明样本也可以检测。4通道微流体可灵活组合:3+1、2 x 2或1 x 4模式,通过参比通道提高数据的准确度和重复性。P4SPR数据的变异系数小于2.2%,保证了数据的重复性。P4SPR采用光学设计使设备更加紧凑和坚固,易于携带和维护。P4SPR易于操作:培训10 min即可独立实验。 芯片价格低,可重复使用,降低使用成本。P4SPR可与其它分析技术(HPLC、MS等)整合。P4SPR应用案例:蛋白与小分子结合CD36跨膜蛋白胞外区可以直接结合信息素小分子。信息素是一类分子量在100-500 Da之间的小分子化合物。CD36胞外区蛋白通过His Tag固定到SPR芯片上,注入不同的信息素分子即可测定两者的亲和力。使用一张SPR芯片测定了9种不同的信息素分子,获得了从0.64-106 μM的不同亲和力数据。P4SPR应用案例:蛋白与核酸结合 P4SPR应用案例:环境检测乳糖操纵子(LacO)是存在于大肠杆菌基因组中的一段DNA序列,负责调控大肠杆菌中的乳糖代谢。DNA结合蛋白(LacI)是控制乳糖操纵子的关键乳糖阻遏物。硫醇化的LacO DNA固定到金薄膜芯片上,依次注入不同浓度(5,20,50,100和200 nM)的LacI蛋白,获得结合曲线,计算得到亲和力为6.4±1.2 nM。符合基于LacI的转录抑制蛋白的文献报道值。成功地展出乳糖操纵子DNA与其阻遏蛋白的结合相互作用;P4SPR系统也可考察其他生物系统,如DNA-DNA,RNA以及适体对,可以帮助科研人员更好地了解结合并揭示生物通路中的功能。P4SPR应用案例:蛋白与蛋白结合EB病毒诱导基因3(EBI3)是复合细胞因子IL-27和IL-35的组成部分之一。EBI3基因编码表达一个34 kDa的可溶蛋白,通过介导IL-6的trans-signaling功能发挥作用。EBI3可以与IL-6发生直接相互作用。将EBI3固化到金薄膜芯片上,注入IL-6蛋白时,检测到了3.5 nm的SPR信号变化;注入IL-11对照蛋白时,仅检测到0.8 nm的背景SPR信号变化。由此证明EBI3蛋白与IL-6蛋白可以发生直接相互作用。通过注入不同浓度的IL-6蛋白,获得EBI3和IL-6结合曲线,测定出亲和力为4.1 μM。RDX是一种军用高能zhayao,在军事设施和试验场附近会存在RDX残留,对附近水源造成污染。因此需要开发一种简单、快速检测RDX污染的方法。传统基于HPLC的检测方法需要使用复杂的仪器设备。P4SPR可以检测出浓度低至1 pM的RDX污染,达到了与HPLC相同的检测灵敏度。P4SPR体积轻巧,可随身携带,可以使用USB供电,非常适合复杂条件下的现场环境检测。P4SPR性能参数
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  • Biacore&trade X100为涉及分子相互作用研究的多个领域,包括生物化学,分子生物学等提供了比较完整的解决方案。该系统囊括了日常分子相互作用研究中所需的重要功能,从而让您能够透彻了解蛋白质功能以及生物学机制。 通过实时监控分子互作的全过程,Biacore&trade 让我们对动态的分子互作过程有了更加深入的理解,如获取非常有研究价值的的互作动力学信息。Biacore&trade 分析过程直观、快速且结论可靠,这些特性都让您可以轻松开展一些创新领域的研究。 Biacore&trade X100适用于多个领域的研究,包括且不限于结构-功能分析、信号通路分析、网络分析、药物靶标发现和验证,以及方法开发等。 Biacore&trade X100兼具多功能与灵活性于一身,配合卓越出众的技术支持,让您可以轻松地获得文章发表所需的高质量数据。在实验室拥有一台Biacore&trade X100,您的实验将立刻提升至新的高度,从而改善您的分子相互作用研究的现状。 Biacore&trade 系统目前已被大约10000篇的学术文献所引用,并广泛应用于世界范围的学术研究领域。关键性能和优点●实时、无需标记的生物分子互作数据●准确的动力学、亲和力信息,让您研究其它方法难以检测的微弱和瞬间的互作过程●多种的实验设计方式,其分析对象包括小分子、蛋白质、核酸乃至病毒等●工作流程导向的软件,配合对芯片和试剂盒的充分支持,让您轻松上手●高质量的软硬件组合提供出色的灵敏度,让您确信的发现真实的分子互作,同时减少样品消耗超高亲和力分子的解离速率精确表征。 Biacore&trade X100整合了快速获取可靠分子互作信息所需的全部元素,从实验第一天起就助您成功。全自动设备可从少量的样品中采集高质量的数据,同时减少人工操作时间。 Biacore&trade X100系统的操作软件以工作流程为导向,提供一套结构化却不失灵活的研究架构,让方法开发和数据解析更加容易上手。Biacore&trade X100 软件中预置的模块提供了对 Biacore&trade 捕获试剂盒和各种芯片的全面支持,一系列软件向导的使用增加了实验的灵活度。同时,Biacore&trade 提供了适用于不同研究需要的多种耗材供您选择。 您可在工作的同时随时巩固你的专业知识,操作软件内置的支持功能为各个步骤提供了注意事项和方法指导。此外,所有购买Biacore&trade X100用户都能通过我们的网站使用 e-learning工具进行学习并利用强大的知识数据库分享他人的经验。Biacore&trade X100为从实验开发到数据解读过程提供了卓越的支持。 更多详情请来电咨询。点击查看更多Biacore&trade 系列产品:
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  • Reichert 4SPR 4通道分子相互作用分析仪新一代4通道分子相互作用分析仪利用无标记技术来检测生物分子间相互作用,极大提高了工作效率。这些量化的相互作用信息可作为药学、药物发现、抗体筛选、蛋白结构/功能、基因控制、系统生物学等研究工作的指导性信息。应用领域:1.浓度测定:可准确测定生物活性分子的浓度2.是否结合(Yes/No):可快速判断分子间是否存在结合3.亲和力测定(KD):可准确测定分子间从mM到pM范围亲和力4.动力学测定(KD, Ka, Kd) :通过实时动力学方式提供分子间结合快慢信息,除了提供亲和力信息外,还可呈现结合常数和解离常数5.热动力学分析( △H,△S):热动力学分析可提供分子间结合深层次机理,判断焓驱动或熵驱动结合,有助于药物创新设计样品类型:常规样品:如蛋白、核酸、小分子、细胞上清、细胞裂解液上清等完整细胞:可研究蛋白与完整原核及真核细胞、以及膜性成分(包括细胞膜)之间相互作用血液:直接检测血液样品,减少处理步骤,排除纯化过程对样品的影响细胞裂解液、噬菌体、胶体金颗粒、纳米材料等产品特色:进样系统不依赖微流控,不需要维护试剂盒也不需要换卡;标准流路满足小分子到细胞,另外三类流路给荧光联用、质谱、电化学联用。
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  • Biolot蛋白质纯化系统/蛋白质层系统是为蛋白等生物样品的纯化制备而专门设计的全自动蛋白质层析纯化系统,其系统稳定性能高而且软件易用,配备酸度/电导检测器可准确即时监测分离时的梯度环境,专为进行单次和多次纯化的科学家设计。Biolot蛋白质纯化系统旨在满足您的不同应用需求:不论您是每天只需处理少量样品,还是您的工作量要求仪器能实现更大通量,我们的蛋白质纯化系统统使您可快速制备宝贵且复杂的混合物并获得高纯度、高回收率的完全可信结果。高效的模块化制备色谱系统,广泛应用于天然产物、和蛋白质生物高分子的分离纯化。 Biolot蛋白质纯化系统可用于: ● 多肽纯化 ● 单抗纯化 ● 重组蛋白纯化 ● 天然药物和多糖的纯化 ● 疫苗纯化 ● 血液制品分离纯化 ● 基因治疗药物纯化Biolot蛋白质纯化系统产品性能: 可快速分离蛋白质、多肽等生物大分子化合物 高度灵活的模块化配置,让科研过程更直观 采用高精度柱塞泵、高稳定性、低脉冲 高灵敏度在线检测,可选配UV、PH、电导、示差折光等多种检测器 流路为PEEK材料,生物兼容性好 泵头具有自动清洗功能,避免缓冲液残留、结晶析出 全自动馏分收集器,具有多种收集模式,可配置多种规格收集管 标配梯度程序、客户可根据实验需要进行重新设置 存储和执行色谱分离方法 高度智能化操作系统,使用简单方便 控制软件符合“FDA 21 CFR Part 11 认证”认证要求Biolot100蛋白质纯化系统技术参数:型号Biolot 100系统泵PEEK柱塞泵(高精度、低脉冲)流速范围0.01-100ml/min流速精度± 0.5% 压力范围0—20Mpa压力脉动≤0.2MPa梯度类型台阶、线性变化梯度、可在线修改梯度最小梯度调节±0.5%ABS(双泵)检测器光源进口氘灯+钨灯(系统自动切换灯源)检测波长190~800nm(两波长同时检测)波长精度±1nm吸光度范围-3--3AU (线性 0--2 AU)电导范围0—999.9ms/cmPH范围0—14收集器全自动馏分收集器收集管架2×60支试管(高度150mm,直径15mm)收集模式普通模式、顺序收集、循环收集手动上样阀标配1ml定量环(可选配各种规格定量环)电源85 ~ 264VAC,50Hz控制软件通过RS-232(USB),采用基于Windows XP/Windows7/ Windows8/ Windows10/的PC软件工作站,多模块系统控制、设计符合“FDA 21 CFR Part 11 认证”参考尺寸输液泵:370×240×152mm3 紫外检测器:370×240×152mm3 电导/PH:370×240×100mm3 自动馏分收集器:355×241×320mm3
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  • KinExA分子与细胞相互作用系统介绍一、KinExA的技术背景:Sapidyne Instruments Inc.于1995年在美国创立,产品基于独特的Kinetic Exclusion Assay(KinExA)专利技术。在公司成立早期,Xavier大学、美国陆军和环境保护局等研究单位采用KinExA技术开展了大量工作;经过数十年在生物制药领域、科研领域及环境监测领域的广泛应用,KinExA技术已成为顶级制药公司和生物技术公司以及许多大学、独立研究实验室和环境监测机构研究相互作用和生物活性物质检测的必备工具,并且已得到FDA和EMA认可。二、KinExA的技术原理:在反应溶液中当受体和配体达到平衡状态时,这时溶液中存在三种物质:受体、配体以及受体-配体复合物。KinExA技术通过包被受体或配体的珠子在极短时间内(0.5s,不影响反应平衡)捕获游离的配体或受体,再通过荧光标记的抗体检测游离的配体或受体的量。检测过程如下:三、KinExA与SPR的区别1、与SPR的区别:SPR在芯片表面固定一个分子,通过芯片表明与溶液间二维相互作用的物质量改变而实现SPR检测。这就带来了非常显著的缺点:固定在芯片上的生物分子可能不能维持其天然活性、质量迁移影响动力学分析(例如,流速会影响实验结果)、被检测分子有分子量下限限制、非常大的分子或者生物结构其分子量有上限限制、样品需要纯化及无法检测完整细胞。相反,KinExA分析三维水平及游离状态相互作用,不固定任何分子、不会对平衡带来影响、没有质量迁移的限制、可以检测未纯化样品和完整细胞;因此,极宽范围内的生物分子、生物结构及完整细胞均可灵活分析。2、与SPR技术对比:为了表征治疗性单克隆抗体候选分子,研究者采用不同类型芯片,从Biacore系统获得同一组单抗-抗原的53组数据,与KinExA实验数据对比发现,亲和力及动力学数据与所使用的芯片类型有关,带负电荷的CM5,CM4及CM1芯片对Biacore的动力学数据有不利的影响。为了验证这一假设,作者通过Biacore液相实验,KinExA平衡态滴定以及KinExA动力学实验,精确计算抗体与抗原的亲和力及动力学参数。结果表明随着芯片表面负电荷的降低,亲和力及动力学参数与液相实验所得的结果越接近。可能的原因:(1)带负电荷的葡聚糖芯片与抗体之间的空间位阻影响抗原的结合;(2)带负电荷的抗原与芯片表面的负电荷静电排斥。四、KinExA的应用:应用一、KinExA在CAR-T细胞治疗中的应用因多种因素的限制,自体CAR-T细胞治疗产品可能在应用于患者前未必能够进行全部项目的检定,所以工艺验证非常重要。工艺研究及验证必须结合工艺的实际情况设定相应的验证参数,CAR-T细胞产品工艺研究在不断发展,到目前为止,业界对何种工艺最好并未达成共识。因此,可以在产品研发过程及早期临床试验阶段开展不同程度的工艺验证研究,工艺验证完成后,应在关键工艺步骤设置关键过程控制参数及标准,以提高CAR-T细胞产品的生产一致性。CAR-T细胞治疗产品的质量控制研究及检测项目一般应包括:细胞数量及其存活率、细胞表型、CAR阳性率检测、生物学效力检测,无菌检测、支原体、热原/内毒素的检测、CAR-T细胞中病毒载体拷贝数及整合的检测等。如果能够检测CAR-T细胞与抗原分子的亲和力,以及CAR-T细胞上抗体的表达量,无疑会提升CAR-T细胞的质量控制标准。目前市面上除了KinExA技术外,没有其他特别有效的方式检测完整细胞与分子间的亲和力,更无从判断细胞上分子的表达量。KinExA技术可以检测细胞与分子间的亲和力,并且可以计算细胞上分子的表达量。其检测原理如下图,先将梯度稀释的细胞与恒定浓度的分子共同孵育达到平衡,离心之后收集上清液(此时上清液中只存在游离的分子),再通过已提前包被过的珠子捕获游离的分子,用荧光标签的抗体检测游离分子的量,通过检测器检测得到相应的数值后,利用KinExA系统软件进行数据分析。下图是国内某知名CAR-T公司通过KinExA技术检测CAR-T细胞与抗原分子间相互作用的结果。结果表明,CAR-T细胞与抗原的亲和力Kd为45.41pM,T细胞表面CAR的表达水平为1.368e+5,Kd与EL的95%置信区间均较窄,数据非常准确可信应用二、KinExA在高亲和力检测上应用对于抗肿瘤药市场,目前精准医疗最为成熟的领域还是以靶向药物为代表的抗肿瘤药物。由于单克隆抗体类抗癌药的副作用较小,且靶向性更好,因此,单抗药物仍将是引领抗肿瘤药物发展最为重要的领域。以PD-1为靶点的一类单抗药呈现出较高的亲和力,常规的相互作用检测系统例如SPR 、BLI、ITC等由于自身原理的限制均不能检测高亲和力(pM级别)。KinExA技术有别于常规的相互作用检测系统,能准确有效的检测高亲和力(fM级别)。下表是Pfizer, Rinat两家公司联合发表的KinExA高亲和力检测范围的文章。 Bee C., et al. 2012. Exploring the dynamic range of the kinetic exclusion assay in characterizing antigen-antibody interactions. PLOS ONE 7(4): e36261.五、案例分析案例一:完整细胞的相互作用检测背景:单克隆抗体XMetA是胰岛素受体(IR)变构部分的激动剂,其激活代谢Akt激酶信号通路,而对有丝分裂胞外信号调节激酶(ERK)信号通路几乎没有影响。为了研究这种选择性信号通路的性质,作者验证了XMetA对CHO细胞中IR,Akt和ERK的特异性磷酸化和活化的影响。目的:完整细胞亲和力检测。方法:研究者将表达短链型(IR-A)及长链型(IR-B)胰岛素受体的不同浓度CHO细胞分别与XMetA孵育,通过离心获得游离的XMetA,用KinExA仪器检测亲和力。另外,作者采取同样的策略,用KinExA仪器检测胰岛素与CHO细胞表面IR-A,IR-B的亲和力。结论:XMetA与IR-A亚型的亲和力为55±16pM,与IR-B亚型的亲和力为50±11pM。另外,在对照抗体组,胰岛素与IR-A亚型的亲和力为156±14pM;在XMetA组,胰岛素与IR-A亚型的亲和力为216±100pM;在对照抗体组,胰岛素与IR-B亚型的亲和力为221±28pM;在XMetA组,胰岛素与IR-B亚型的亲和力为277±112pM。数据同时说明, XMetA与IR亚型的结合与胰岛素无关。Bedinger, D., et al. 2015. Differential pathway coupling of activated insulin receptor drives signaling selectivity by XmetA, an allosteric partial agonist antibody. J Pharmacol Exp Ther 353(1):35-43.案例二:细胞与上清未纯化样品检测背景:单克隆抗体(mAb)在体内与膜蛋白间亲和力的可靠评估是肿瘤治疗的主要问题。在BV展示系统中,膜蛋白能以天然状态在病毒表面展示。目的:细胞与上清中未纯化样品亲和力检测。方法:研究者基于KinExA技术,结合杆状病毒(BV)膜蛋白展示系统,描述了一个简单而高度敏感的单克隆抗体评估方法。结论:在BV表面展示的肝癌抗原Robo1吸附到磁珠上(BV beads),其KD值(~10pM)与全细胞分析方法一致(R2=0.998),表明基于KinExA技术检测方法提供了针对细胞表面蛋白的单克隆抗体亲和力准确的评估。Kusano-Arai 0., et al. 2016. Kinetic exclusion assay of monoclonal antibody affinity to the membrane protein Roundabout 1 displayed on baculovirus. Anal Biochem.案例三:高亲和力检测背景:白细胞介素-1β(IL-1β)是炎症反应的有效介质,在许多淋巴细胞的分化中发挥调控作用。在一些炎症和自身免疫性疾病中,血清中IL-1β水平与疾病的发展和严重程度相关。 IL-1β在一些疾病中的机理已经被临床试验证实,并获得FDA的审批。目的:高亲和力检测与验证。方法:设计抗IL-1β抗体XOM052,SPR检测其与IL-1β的亲和力为≤4pM。另外实验采用Protein A捕获IL-1β抗体,解离10min,发现时间不足以使抗体抗原发生解离,将解离时间延长至4h,解离早期无法准确拟合,推测是由于IL-1β抗体从Protein A上解离对实验造成的影响。为了更精确的计算亲和力,作者改用KinExA,分析得到其亲和力为300fM。结论:KinExA技术对于高亲和力的检测具有无可替代的优势。Owyang A.M., et al. 2011. XOMA 052, a potent, high-affinity monoclonal antibody for the treatment of IL-1B-mediated diseases. mAbs 3(1): 49-60
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  • 多肽芯片点样仪 蛋白结合多肽研究移液工作站 蛋白质阵列 复杂的实验,简单的仪器无法满足?定制高通量液体处理工作站,按照您的实验需求配套定制! Aurora全自动多肽合成工作站简介 **生物微阵列喷印技术,为基因组、蛋白质组、药物筛选、靶标确认、表位定位、疫苗开发等基础科学研究领域提供革新性的研究技术。**基于自身液体处理平台,VERSA110多肽微阵列点样仪,可实现自动化纳升级到微升级的液体接触时印迹。可以高重复性地在玻片、膜、微孔板平台和其他适合基质表面建造微阵列。**为蛋白质组学、基因组学提供快速、高通量且相容性高的研究方法。欧罗拉生物科技有限公司始于1990年,是生命科学、环境科学、药物研发/安全和化学分析研究等实验室自动化方案设计与研发的全球性领 导者。我们提供的技术与服务可以在提高质量、准确度和精确度的同时提高样品处理量。产品包括:自动化液体处理工作站、原子吸收光谱仪、原子荧光光谱仪、离子通道筛选技术-离子通道阅读器和微波消解系统,它们可以在水质检测、学术研究、农业检测、分子检测、环境检测、食品安全、法医法证、公共卫生、畜牧兽医、药物开发等应用领域中提供高销量的样品处理。我们的总部设在加拿大,2007年,Aurora Biomed开设了其亚洲销售和服务中心,以促进向快速增长的亚洲市场的扩张。为了进一步扩大Aurora的市场范围,我们在全球80多个国家建立了积极的经销商网络,为客户提供销售和服务支持。自2003年起,Aurora是每年精密医疗和离子通道年会的主办方。会议旨在将业界和领 先的学术研究人员聚集在一起,分享知识、交流想法,并建立富有成效的合作伙伴关系。该会议每年在加拿大和中国之间轮流召开,吸引世界各地的顶 尖科学家就药物研发和个性化医学展开发人深省的讨论。它使Aurora和社会能够掌握尖 端技术和创新研究的脉搏。欧罗拉生物科技有限公司是生命科学、环境科学、药物研发/安全和化学分析研究等实验室自动化方案设计与研发的全球性厂家。我们提供的技术与服务可以在提高质量、准确度和精确度的同时提高样品处理量,我们致力于提高人类生活质量及环境的可持续性。欧罗拉致力于为各种研究领域的科学家提供自动化液体处理系统,包括:医药、生物技术、农业、食品科学和法医。VERSA系列作为液体处理系统,可以提高处理效率和数据质量,降低重复烦琐工作带来的不稳定性和减少试剂成本。 Aurora全自动多肽合成工作站应用领域 多肽微阵列应用领域:**癌症早期诊断**蛋白相互作用研究**蛋白修饰研究**疫苗与药物开发Aurora微阵列点样仪应用方向:**微定量喷点**基因芯片**细胞培养**研发或生产应用**基因表达,DNA筛查**多肽合成**细胞点样,药物筛选 Aurora全自动多肽合成工作站特点 可实现自动化纳升级到微升级的液体接触式印迹。高的密度高地在玻璃、纤维素膜、滤纸、微孔板以及其他特殊处理的载体矩阵上,建立多肽、核酸肽、基因等微阵列,为蛋白组学、基因组学提供快速、高通量且相容性高的研究方法接触式点印,在各种合适的基质上制备各种样品的微阵列,点与点少于1mm,定位校正,可在每个点点上多个样品点样针高效清洗,内外都彻底冲洗,管路可耐受各种有机溶剂软件功能强大,方便易学,支持点印序列导入导出,自动生成阵列排布高效过滤安全封闭外罩,具备消毒照明功能,确保步骤外部环境污染微阵列工作站特色功能:**高通量,可同时制备多张玻片、尼龙膜等**专门配置清洗站、干燥站、高效过滤安全罩等**定制化功能,例如容易结晶可定制保湿功能,细胞培养可定制温度控制功能和二氧化碳浓度控制功能,细胞形态分析下游实验可定制细胞成型功能等, Aurora全自动多肽合成工作站产品规格 盘面容量4个盘面吸液范围自40nL-100μL可调开放性基片不受限制,可在玻片、尼龙膜、试剂、硅片、不锈钢板上点样(点样矩阵通过软件自行设计)重量54kg尺寸约70cm*60cm*86cm相关模块点样钢针复杂的实验,简单的仪器无法满足?定制高通量液体处理工作站,按照您的实验需求配套定制!更多仪器模块配置根据你的实验项目需求推荐,欢迎点击【一键咨询】,【发送留言】后我们会马上联系您 Aurora全自动多肽合成工作站原理 自动化解决方案将会大幅度提高实验通量和效率,同时也降低实验成本,实现高通量、微型化、快速化。 Aurora全自动多肽合成工作站应用案例 喷印示例:多种基质、密度、形状:Aurora微阵列点样仪用户案例: Aurora产品应用报告列表(部分),更多更新欢迎查阅Aurora官网~ Applications Genomics &bull Automated Isolation of Genomic DNA using the MACHEREY- NAGEL NucleoMag Plant kit by Aurora Biomed’s VERSA 1100 &bull Automated Isolation of Genomic DNA using the MACHEREY-NAGEL NucleoMag Blood 200μL kit by Aurora Biomed’s VERSA 1100 &bull 采用性犯罪试剂盒差异消化方法在VERSA 1100自动化应用 &bull VERSA&trade 1100 GENE在下一代测序(NGS)文库制备自动化的可行性验证 &bull 全血样品中核酸提取应用报告 &bull 植物样品中核酸提取应用报告 &bull Automation of DNA Extraction &bull PCR Setup &bull Automation of Reverse Transcriptase PCR &bull Automation of Real time PCR &bull Automation of RNA Sequencing &bull Automation of Next Generation Sequencing &bull Automation of DNA Microarray &bull Automation of Miniprep &bull Automation of Sanger Sequencing &bull Automation of On-Slide (Amplislide) PCR Setup using VERSA&trade 110 PCR Setup Workstation &bull Food Safety Monitoring using VERSA&trade 110 NAP Workstation &bull Hot-Start PCR using VERSA&trade 110 PCR Workstation &bull DNA Isolation from Saliva (Invitek Forensic DNA Isolation Kit) &bull Nucleic Acid Prep for Avian Flu Viral RNA &bull β-Actin and Whole Genome Amplification (Sigma & Promega kits) &bull Genomic DNA Isolation from Blood (Promega) &bull Automation of Molecular Pathology Applications on the VERSA&trade 10 PCR Setup Workstation &bull Automated System for High Throughput PCR SetupExtraction &bull 高通量固相萃取&气相色谱-质谱联用方法定量检测吸毒者尿液中甲基苯丙胺和苯丙胺 &bull HTS Flux Assay Automation &bull Validation of Automated Liquid Liquid Extraction of 25-hydroxy vitamin D &bull Automation of Sample Preparation and Introduction into NMR Tubes &bull Liquid Liquid Extraction of β-carotene &bull Automation of Protein PurificationGeneral Liquid Handling &bull High-Density Peptide Array Printing &bull Specimen Staining for TEM (Array printing) &bull Automated Slide-Based Assay Setup using VERSA&trade 110 Workstation欢迎点击【一键咨询】,【发送留言】后我们会马上联系您,为您的实验或应用需求推荐合适的仪器配置
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  • 食品中蛋白质含量测定仪主要参数:  食品中蛋白质含量测定仪检测项目:可快速检测奶粉、牛奶及乳制品中的蛋白质,仪器预留其他项目检测程序和端口,根据日后需求可方便的自主增加检测项目。  仪器特点:  1. 检测方法:蛋白质检测方法符合【国家标准】《NYT 1678-2008》  2. 仪器构成:由主机、样品前处理器具和试剂包等构成,适于现场及实验室使用  3. 光路系统:采用进口超高亮发光二极管,光源和检测器采用全固态结构,准确度和精密度高、稳定性强、光源可控 采用光源自动开关节能设计,光源使用寿命达10万小时以上。  4. 内置曲线:仪器具有内置工作曲线,无需配制标准溶液,只需要用配套试剂进行零点校正后,即可实现样品的快速定量测定。  5. 测量方式:样品显色和测量为为标准1cm比色皿,无需转移,提高检测精密度。  6. 耗材配件:提供完备的 前处理设备和耗材,一站式服务。  7. 试剂盒:配备 的预制试剂,缩短试剂配制时间,操作简单,使用方便。  功能介绍:  1、安卓智能操作系统,采用更加高效和人性化操作,仪器具有网线连接、wifi联网上传、GPRS无线远传功能,快速上传数据。  2、智能化程度高,仪器具有自检功能:具有开机自检和调零功能,具有自动检测重复性功能。  3、检测通道:≥12个检测通道,可以同时测试多个样品,每个样品由程序控制分别独立工作,不会互相干扰。  4、配备新一代嵌入式热敏打印机,可选择手动打印或者自动打印,检测完成可自动打印检测报告和二维码。  5、采用标准USB2.0接口设计,支持U盘存储,免驱动安装,方便数据的存贮和移动,并可随时与计算机直接相连,并且可用计算机控制仪器。实现数据查询、浏览、分析、统计、打印等。  6、仪器带有监管平台。检测结果可直接无线上传。进行数据分析处理,检测乳制品等长短期动态,达到问题预估、预警。  7、仪器具有品类多种类样品菜单库,可灵活选择检测样品,不同的检测通道可同时检测不同的样品项目。  8、样品处理简单省力,整体操作快速、安全、便捷。  9、仪器具有自身保护功能,可设置用户名及密码,防止非工作人员操作等。  10、仪器具有重新校准、锁定、恢复出厂设置功能。  仪器参数:  1、主控芯片采用ARM Cortex-A7,RK3288/4核处理器,主频1.88Ghz,运转速度更快速,稳定性更强。  2、显示方式:7英寸液晶触摸屏显示,人性化中文操作界面,读数直观、简单。  3、直流12V供电,可连接车载电源,可配6ah大容量充电锂电池,方便户外流动测试。  4、智能恒流稳压,光强自动校准,长时间连续工作光源无温漂现象。  5、不间断进样,连续检测  6、样本编号自动累加。  7、检测项目可扩充。  8、检测结果可批量打印,批量上传。  9、检测结果为Excel表格,连接电脑即可拷贝。  10、可配置大容量锂电池,固件可升级  技术参数:  1、检出下限:0.5%  2、检测范围:(0~50)%  3、吸光度值范围:0.000-4.000A  4、重复性:±0.1%(A)  5、重复性误差:吸光度(A)≤0.003  6、稳定性:光电漂移(A)±0.002(3分钟)  7、吸光度准确度:±2.0%  8、线性误差:±1.0
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  • Biacore&trade X100 是一款能够实时、无标记地表征生物分子相互作用的智能化分析系统。Biacore&trade X100 系统适用于多个领域的研究,包括且不限于结构-功能分析、信号通路分析、生物标志物发现与验证、药物靶标发现与验证以及方法开发等。Biacore&trade X100 系统为您提供:&bull 全面的互作信息:实时的相互作用数据有助于动力学 ( 结合速率常数 ka 和解离速率常数 kd) 与亲和力 (KD) 的精确表征, 并且能够检测其它方法难以检测的微弱和瞬时的互作过程。&bull 可检测样品类型多:可检测包括小分子化合物、蛋白、抗原-抗体、多肽、核酸、多糖、脂类、病毒、细胞等,以及细胞上清、细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆、腹水等复杂样品和临床样品。&bull 方便高效:流程化 (workflow) 的软件,为实验方法开发提供一套结构化却不失灵活的方法模版,让方法开发与数据分析更加容易上手。软件中预置的方法模块配合对应的芯片和试剂盒,为多种分析提供了全面的解决方案。&bull 灵敏度高,数据质量好:高质量的软硬件组合提供出色的灵敏度,确保可靠检测各种分子间的相互作用并拓展应用范围,同时最大程度地降低样品的消耗。
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