抗生素分离纯化活性成分纯化中压层析系统

2015年5月21日，北京慧德易科技有限公司联手东曹(上海)生物科技有限公司和深圳市华创精科生物技术有限公司在天津日航酒店共同举办了&ldquo 液相色谱分离分析及中低压层析纯化技术应用研讨会&rdquo ，来自全国各地的共约100余名色谱界专家和学者参加了此次会议。会议主要从&ldquo 用于抗体纯化的层析填料新产品&rdquo 、&ldquo 针对抗体/ADC药物分析的应用&ldquo 以及&rdquo 反相/正相色谱柱在原料药和中草药方面的应用&ldquo 等几个方面向到场嘉宾介绍了东曹(上海)生物科技有限公司最新研发的TSKgel UP-SW系列色谱柱，并与到场嘉宾做了细致的交流。同时，在此次会议上还邀请到了日本山口大学研究生院的山本修一教授就色谱法中的生物识别和移动现象以及规模放大、规模缩小的开发做了精彩报告。会议在热烈的讨论中落下了帷幕。 会议现场 来自东曹(上海)生物科技有限公司的史俊霞工程师向到场嘉宾做了&ldquo 针对抗体/ADC药物分析的最新应用以及最新2umUHPLC色谱柱介绍&ldquo 报告，报告首先对抗体&mdash 药物偶联物(ADC)做了简要介绍，ADC即将单克隆抗体和高效细胞毒素完美地结合到一起，充分利用前者靶向，选择性强以及后者活性高的优点，同时又消除了前者疗效低和后者副作用大的缺陷。ADC常用的HPLC分析方法包括HIC、HIC/LC-MS、SEC和IEC等，接着史俊霞就分别对用TSKgelButy-NPR、TSKgel G3000SWXL、TSKgel SP-STAT分析曲妥珠单抗偶联药物的偶联比、曲妥珠单抗和曲妥珠单抗偶联药物的聚体以及抗体偶联药物的电荷异构体等做了分析，结果发现用TSKgelButy-NPR(4.6mmX10cm)曲妥珠单抗偶联药物的偶联比时，在流动相中添加20%异丙醇各组分的分离度较好 用TSKgel G3000SWXL(7.8mmX30cm)分析曲妥珠单抗和曲妥珠单抗偶联物的单体与二聚体时，添加10%的IPA在流动相中，单体与二聚体的分离度超过了1.5，各组分峰型良好。用TSKgel SP-STAT(4.6mmX10cm)在PH梯度条件下可以得到更多的ADC电荷异构体信息。最后史俊霞介绍了东曹(上海)生物科技有限公司最新研发的TSKgel UP-SW3000色谱柱，该色谱柱是一款主要针对生物大分子开发的SEC色谱柱，采用2um的硅胶作为基质，并用二醇基进行表面修饰，它可以同时兼容于UHPLC和HPLC系统。同时将TSKgel UP-SW3000色谱柱与竞争产品色谱柱在分离单抗的效果上做了对比。 东曹(上海)生物科技有限公司工程师 史俊霞 报告提目：《针对抗体/ADC药物分析的最新应用案例分享》 　　来自东曹(上海)生物科技有限公司的张琳博士向到场嘉宾介绍了TSKgel反相/正相色谱柱的介绍及在原料药和中草药方面的应用以及TSKgel色谱柱的常见问题和解决方法。张琳首先介绍了TSK品牌的由来，即源于东曹公司以前的名字&ldquo Toyo Soda Kogyo&ldquo ,其最有名的产品是用于蛋白分析的TSKgel G3000SWXL系列色谱柱，接着张琳向在场嘉宾介绍了使用TSKgel ODS系列反相色谱柱按照2010年版《中国药典》的要求考察了实验参数对于结果的影响情况。最后张琳还对色谱柱在化药-抗生素分析中的应用做了简要介绍。同时还介绍了TSKgel色谱柱的常见问题和解决方法。 东曹(上海)生物科技有限公司技术部主任 张琳 报告题目：《TSKgel反相/正相色谱柱在原料药和中草药方面的应用及TSKgel色谱柱使用中的常见问题解答》 　　来自于深圳市华创精科生物技术有限公司的栗云天经理向到场嘉宾介绍了公司最新开发的新一代全自动层析柱及层析系统。深圳市华创精科生物技术有限公司其产品主要包括分析液相、中压和高压制备液相、工业层析操作系统和层析柱，产品种类涵盖反相聚合物、反相硅胶、手性制备、离子交等不同类型的填料及预装柱，以及从分析到半制备、到工业生产不同规格的层析柱和操作系统。 深圳市华创精科生物技术有限公司经理 栗云天 报告题目：《新一代全自动层析柱及层析系统介绍》 日本山口大学研究生院教授 山本修一 报告题目：《用于生物大分子的新一代下游工艺的介绍》 东曹株式会社研究员 田中亨 报告题目：《根据FcR的糖链结构来进行抗体分离纯化》 东曹株式会社 桥本佳巳 报告题目：《新型磺酸基阳离子交换填料的介绍》

实验室蛋白纯化层析系统一体机SDLSDL蛋白纯化层析系统是为重组蛋白、抗体、疫苗、血液制品、多肽等生物样品的纯化制备而专门设计的一款自动化程度高的一款仪器。 SDL蛋白纯化层析系统采用固定模块配置，一体化设计，节省空间，适合放进冷库或者台面，各模块都面向使用者，更容易了解各模块之间的关系。SDL蛋白层析系统可用于：蛋白纯化；疫苗纯化；单抗纯化；血液制品分离纯化；多肽纯化；基因治疗药物纯化；天然药物和多糖的纯化等领域；进样模式手动进样双泵A1/A2、B1/B2，收集器、pH、电导、紫外、温度检测模块。流动相经过的模块以及管路会用绿色标记出来。可以手动进样，进样后进样阀会按照设置好的程序自动切换到Inject模式，实现进样。系统泵进样双泵A1/A2、B1/B2，收集器、pH、电导、紫外、温度检测模块。流动相经过的模块以及管路会用绿色标记出来。样品体积比较大的情况下，可以采用系统泵进样，直接将样品通过系统泵输入色谱柱。系统特点品质可靠的系统部件主要元部件均由精选欧美知名厂商制造，多数合作开发，性能优越，品质可靠。与样品接触的各部件均采用PEEK、蓝宝石、红宝石等生物惰性材料，具有良好的生物兼容性。精确连续的液体流速原装进口双柱塞杆二元梯度泵，泵头为PEEK材质，前置设计便于清洗维护。泵头带有自冲洗功能，避免纯化生物样品时，盐等在泵头析出，造成仪器损坏和污染；输液泵采用电子压力脉动抑制技术，为蛋白层析系统提供良好的梯度精确度和重复性，保证纯化结果的重现性；精确即时的检测环境紫外检测器为原装进口DAD检测器，同时提供多个波长的信号输出，可方便实时监测分离组分的纯度；pH/电导检测器，可精确的提供pH和电导率的实时监测，并可根据需要对pH和电导率进行温度补偿，以获得更准确的监测；智能化配置，享受工作的乐趣全新组分收集器，配备多种收集架，支持多种收集方式，便于对目标物的纯化收集；各种阀（收集阀、柱位阀、进样阀、柱选择阀、电磁阀等）均为国际知名厂商定制，原装进口，用户可根据实际需要选择；专业及时的售后服务团队专业的售后服务团队，2小时给予回复，24小时到达现场解决问题。软件终生免费升级。创新点：该产品与上一代仪器的主要创新点： 1、SCG产品（上一代）为分体式结构，客户根据不同的配置，安装不同的模块。SDL为一体机，整台仪器为固定配置。 2、一体机在整个外观与SCG差别较大，主要为科研机构，配置较低的用户设计，整体布局设计简约而不简单。 蛋白纯化层析系统赛谱SDL

GE医疗在中国和全球同步上市新一代层析系统Ä KTA&trade pure 开创蛋白质纯化新纪元 8月24日 成都 &mdash &mdash 今日，GE医疗在成都市举办的全国生物化学与分子生物学学术大会上宣布，将在中国和全球同步发售新一代层析系统Ä KTA&trade pure。作为GE医疗在&ldquo 健康创想&rdquo 理念指导下推出的又一款力作，Ä KTA&trade pure采用了具有&ldquo 蛋白质分离纯化金标准&rdquo 之称的 Ä KTA&trade 全自动层析系统的核心技术，充分满足科研院所研究人员以及生物行业研发人员的工作需求，以功能强大的硬件、灵活的UNICORN &trade 6软件与各种层析柱和填料为支撑，向生物大分子的分离纯化工作提供灵活、直观、可靠的解决方案，帮助科研人员快速纯化从微克到克水平的蛋白、肽和核酸等目标产物。业内人士认为， Ä KTA&trade pure在中国的推出，将使生物大分子的分离纯化工作取得实质性进展，助力中国科研人员开创生物大分子分离纯化和功能研究新纪元。 我国政府在科学和技术发展&ldquo 十二五&rdquo 规划中曾明确提出，要着力突破制约经济社会发展的重大科学问题，集中优势力量，推进以蛋白质研究为代表的一系列重大科学研究计划。为配合&ldquo 十二五&rdquo 规划工作的落实， GE医疗充分发挥在生命科学领域的技术优势，以科研工作者的实际需求为出发点，通过持续的创新，改进Ä KTA&trade 层析系统的工作流程，满足蛋白质纯化工作中不断涌现的新需求，提高蛋白质纯化效率。此次发布的新一代层析系统Ä KTA&trade pure ，提供了最全面功能的硬件和软件模块，可以帮助科研人员进行最方便的富有想像力的纯化。同时科研人员可以通过Ä KTA&trade pure灵活的全模块话设计定制专属自己独一无二的纯化系统，让生物大分子的纯化制备真正做到&mdash &mdash 纯化随心 &ldquo pure&rdquo 随行。 GE医疗生命科学部科研产品部总经理Johan von Heijne表示：&ldquo Ä KTA&trade pure是GE医疗围绕&lsquo 健康创想&rsquo 理念研发的创新产品，是GE医疗在蛋白质研究领域超过半个世纪经验和在Ä KTA&trade 纯化系统研发方面三十年经验的结晶。此次选择中国成都与全球同步发售，是因为成都得天独厚的生物制药优势，这里不仅有丰富的生物资源，还拥有中国顶尖的科研院和技术人才，与此同时四川省政府给予生物制药领域大量的政策和财政支持，所以我们对此次选择中国成都发布新品及其市场表现充满信心。 产品链接：http://www.instrument.com.cn/netshow/C157794.htm - 灵活的模块配置，让科研过程更简单 Ä KTA&trade pure继承了Ä KTA&trade avant的高贵血统，采用高度灵活配置的模块化设计，既能满足科研工作者的常规需求，又有足够强大的实力应对高难度工作的挑战。Ä KTA&trade pure 硬件的所有阀门、检测器和层析柱均面向操作者安装，让样品以及缓冲液的流路更加简单直观。Ä KTA&trade pure的阀、检测器、泵和软件提供了一系列灵活的解决方案，科研人员可以添加为了获取更高纯度的蛋白所需要的任何功能。 - 全自动智能操作系统，让科研工作更高效 Ä KTA&trade pure 的入口自动化阀可以最大程度地提升工作效率。每个入口阀都整合空气传感器，将气泡排除在管路外，科研人员可安心进行过夜无人运行。Ä KTA&trade pure的控制软件UNICORN 6可以选配智能集成实验设计（DoE）功能。它能为科研人员快速有效地优化实验方法，通过较少的实验捕获更多的信息，及时得到预期结果。 - 多重检测设备，让科研结果更可靠 Ä KTA&trade pure 系统最多连接2个UV，配有固定波长的紫外检测器或可变的多波长紫外和可见光检测器。固定波长（280mm）紫外线检测器结合了LED技术，无需预热开机即可使用。可变的多波长紫外检测器可以同时检测3个波长，快速发现杂质，保证纯度。另外，Ä KTA&trade pure系统仅重48kg，可更简单地放置在实验台上和标准的层析冷柜中，用于不稳定样品的纯化。 在 &ldquo 健康创想&rdquo 战略指导下，GE医疗致力以技术创新提高医疗质量，降低医疗成本，推动医疗行业快速发展。作为GE医疗的高端创新产品，Ä KTA&trade pure搭载了行业领先的色谱系统，能快速灵活地为蛋白纯化工作提供值得信赖的解决方案。无论是初学者还是专家，都能通过Ä KTA&trade pure快速实现蛋白质的高效分离与纯化，在较短的时间内尽可能全面地了解蛋白的功能。在海量的科研设计中，蛋白纯化往往仅是其中的一小步，却也是关键的一部。Ä KTA&trade pure能让这一步走得更加省心，为科研工作进步打下坚实基础。 以技术为先导，融入创新灵魂，持续研发高品质、高性价比的产品，使GE医疗在生物大分子分离与纯化领域始终保持领先。作为层析系统开发的引领者，从FPLC到Ä KTA&trade explorer，再从Ä KTA&trade avant 到 Ä KTA&trade pure ，GE医疗不断改进蛋白质分离与纯化工艺，为中国带来一系列国际一流的产品，推动中国生命科学研究事业的发展。今日，Ä KTA&trade pure 正式进入中国市场，它的应用必将为中国的生物大分子的分离纯化工作注入新的活力，帮助中国的结构生物学，农业生物学和系统生物学基础科研机构和医药企业应对更复杂的挑战。 关于GE医疗集团 GE医疗集团通过提供革新性的医疗技术和服务，开创医疗护理的新时代。我们在医学成像、信息技术、医疗诊断、患者监护系统、药物研发、生物制药技术、卓越运营和整体运营解决方案等领域拥有广泛的专业技术，能够帮助客户以更低的成本为全世界更多的人提供更优质的服务。此外，我们还和医疗行业领袖一道，正努力通过全球政策，打造成功的、可持续的医疗体系。 我们的&ldquo 健康创想&rdquo 愿景普及全球。我们不断通过创新在世界范围内推动降低医疗成本、增加医疗机会、提高医疗质量和效率。GE医疗集团总部设在英国，是通用电气公司（纽约证券交易所：GE）下属的业务集团之一。GE医疗集团的员工分布于全球100多个国家和地区，致力于为医疗专业人士和患者服务。欲了解更多有关GE医疗集团信息，请访问公司网站www.gehealthcare.com。有关更多近期新闻，请访问http://newsroom.gehealthcare.com。 媒体联络人： GE医疗集团 时空视点公关 刘曼娜 杨雪 电话：010 &ndash 58069876 电话：010 &ndash 65228800 电邮：manna.liu@ge.com 电邮：wendy.yang@evisionpr.com.cn

邀 请 函色谱分离分析及中低压层析纯化技术应用研讨会尊敬的用户： 您好！东曹（上海）生物科技有限公司（TOSOH）、默隆（上海）实业有限公司将于2016年12月16日（周五）上午9时开始，在 苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A1楼环形报告厅 举办关于液相色谱分离分析及中低压层析纯化技术应用研讨会。会议特邀国外专家以及TOSOH资深技术人员前来，围绕生物医药在研发或生产中所涉及的HPLC分析分离及中低压层析纯化技术展开介绍及讨论。东曹（上海）生物科技有限公司和默隆（上海）实业有限公司真诚邀请您的参与并致以最诚挚的感谢！ 会议提供自助午餐及茶歇，会后设置精彩抽奖环节，期待您的参与！一等奖：Iphone7 1部 二等奖：Ipad 1部 三等奖：Kindle 3部 专家介绍：津本浩平（Kouhei Tsumoto） 先生东京大学 教授津本浩平教授，于1991年毕业于东京大学生物化学系，并在此继续获得其博士学位。2002年，他成为日本东北大学工程研究生院生物分子工程系的助教。在1995年至2005年期间，他主要从事抗体工程项目的研究工作。2005年，他被邀请至东京大学前沿科学研究生院医学基因组学系，担任助教一职，并于2010年晋升为东京大学医学科学研究所医学基因组学实验室教授。津本教授的研究领域包括解剖与生物分子的相互作用的工程、从相互作用的热力学观点进行药物筛选和优化、以及操纵生物大分子的液相系统的开发等。在2002年，他获得过日本生物化学协会颁发的优秀青年学者奖，2012年又获得了日本促进科学协会奖（JSPS）。 其他嘉宾介绍：桥本佳巳（YOSHIMI HASHIMOTO）先生东曹株式会社 生命科学事业部 销售及市场部桥本先生于1987年加入东曹公司，已经在东曹公司服务将近30年。曾经负责过TOYOPEARL中低压层析填料、TSKgel色谱柱产品的开发。2009年10月至2014年6月期间，在东曹（上海）生物科技有限公司担任技术中心总监，领导技术团队对应中国国内客户有关所有产品的技术问题。任期结束后，于2014年7月返回东曹总部至今。 史俊霞 工程师东曹（上海）生物科技有限公司 技术部2008年12月加入东曹（上海）生物科技有限公司。主要负责TSKgel色谱柱的技术支持，曾参与ADC、融合蛋白、抗体以及抗生素等药品的方法开发工作。 冯文昌 层析填料产品经理东曹（上海）生物科技有限公司 营业部主要负责TOYOPEARL层析填料的市场开发，奔走于国内各大生物制药企业，与广大纯化领域的客户都建立者良好的合作关系，致力于为我们的客户献计献策。会议地址：苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A1楼环形报告厅抽奖活动： 会议结束前将举行抽奖活动，TOSOH公司准备了若干精美的小礼品以及神秘大奖等您赢取。单位名称：默隆（上海）实业有限公司地址：上海市肇嘉浜路366号(裕华大厦)9楼A座电话：021-34010390传真：021-64260273联系人： 袁超 13916627102 陈华明 18621785582E-mail：chenhuaming@meuron.com.cn网址：http://www.meuron.com.cn/

仪器信息网讯 近年来，全球医药市场的发展中心逐渐由小分子化学药转向大分子生物药，预计到2020年，全球生物医药的销售额将达到1400亿美元，生物医药的全球销售比重将超过三分之一。而各大跨国药企对生物制药的投入不断扩大，如2013年罗氏宣称拟投资8亿瑞郎用于全球生物药品的生产，2014年三星公司宣布以至少20亿美元的投资进军生物制药市场。 　　当今影响生物制药发展的重要技术之一是分离纯化技术。来自北京赛升药业股份有限公司的孔双泉在CISILE 2014&ldquo 药物纯化、检测技术专题论坛&rdquo 上分析了现有生物制药行业所用的分离纯化技术特点以及新兴纯化技术的发展。 　　从机理上划分，生物制药行业现行的分离纯化技术主要有五大类：基于溶解度差异的分离纯化技术、基于分子大小差异的分离纯化技术、基于选择性吸附差异的分离纯化技术、基于电荷不同的分离技术 、基于对配体亲和力差异的分离技术。 　　以基于溶解度差异的分离纯化技术为例，其主要包括盐溶盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点法、双水相萃取法和反胶团萃取法，每种方法均有其明显的特点或适合分离的对象。 方法 特点 盐溶盐析法 优点是温度系数小而溶解度大 有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化；低温一般先冷却&mdash 20度；常与其他沉淀方法联用。 等电点法 适用于低温操作．因对于许多生物分子等电点比较接近，故此法常与其他方法结合使用，较难扩大生产。 双水相萃取法 与传统的分离技术相比，具有操作条件温和、处理量大、易连续操作等优点。 反胶团萃取法 具有选择性高、萃取过程简单，正萃、反萃同时进行，能有效防止大分子失活、变性。其不足之处包括：普通离子型表面活性剂可能对产品产生污染；常用的离子型表面活性剂容易造成蛋白质的变性和失活。 　　从报告中获悉，现行的膜分离技术常用的膜有四种：用于细菌和病毒分离的微滤膜 用于蛋白质和多肽分离的超滤膜 用于抗生素、合成药物、核苷酸、无机盐分离的纳滤膜 用于无机盐分析的反渗透膜。 　　从纯化策略上看，生物制药的分离纯化主要分四个阶段：样品准备(破碎、过滤和离心)、粗提(分离、浓缩和稳定样品)、中度纯化(去除大部分杂质)和精细纯化(高纯度)。当前较为成熟的生物分离纯化技术如IEX、HIC等具有不同的特色。 层析技术 主要特色 粗提 中度纯化 精细纯化 IEX 高分辨率、高载量、快速 ★★★ ★★★ ★★★ HIC 分辨率好、载量一般、快速 ★★ ★★★ ★ AC 高分辨率、高载量、快速 ★★★ ★★★ ★★ GF 高分辨率 ★ ★★★ RPC 高分辨率 ★ ★★★ 　　分离纯化工业化影响因素主要来自设备和分离介质，目前生物制药企业纯化工业所使用的设备主要有GE AKTA Pure 蛋白质层析纯化系统、 高分辨率的分析制备平台&mdash &mdash BioLogic DuoFlow中高压层析系统以及北京创新通恒第三代工业化生产HPLC系统 分离介质主要有BIO&mdash RAD公司适合工业化的耐受高压层析介质-UNOsphere SUPrA 亲和介质和UNOsphere Q 阴离子交换介质、利用灌注层析技术制备层析介质-POROS胶体是灌注层析技术的填料以及PALL公司HEA和PPA HyperCelTM混合模式填料。 　　基于生物制药纯化对高通量、高分辨率等的追求，分离纯化技术也得到了快速发展，主要有三种：第一，扩张床吸附技术，该技术结合了澄清、浓缩及产品捕捉三个步骤，在基因工程产品的分离纯化过程中得到较好的发展 第二，径向膜层析技术，该技术由于流向的截面积大，具备了纯化速度快处理量大以及简单通过改变柱长便可增加上样量的特点，利于放大生产 第三，置换层析技术，与传统的洗脱层析技术相比，其明显的优势在于高上样量、高产率、高分辨率、易于操作等。 　　目前生物纯化技术的设备主要是以GE公司的AKTA系统，据了解，该产品在生物制药企业的全球市场占有率在90%左右，中国生物制药市场的占有量几近100%。相关消息显示，国内有研究机构和仪器制造企业已经着手生物纯化设备产品的研发，并已进入研发后期。在生物制药快速发展的今天，生物纯化设备也将得到快速的发展。(撰稿：杨改霞)

承接世博会在上海成功举办，2010中国国际工业博览会于11月9日 -13日在上海新国际博览中心举行。中国工博会是由国家发展和改革委员会、商务部、工业和信息化部、科学技术部、教育部、中国科学院、中国工程院、中国国际贸易促进委员会和上海市人民政府共同主办，中国机械工业联合会协办，上海世博(集团)有限公司承办的中国最具影响力的国际工业品牌展。每年十一月在上海举办，迄今已成功举办十一届。 　　2010中国工博会以“科技创新，振兴装备制造业”为主题，设立“数控机床与金属加工展”、“工业自动化展”、“环保技术与设备展”、“信息与通信技术应用展”、“新能源与电力电工展”、“科技创新展”六大专业展。 　　通用电气(中国)医疗集团受邀参加此次盛会，在“科技创新”展区的“生物医药发展”专区设立展台。我们契合主题，推选数台设备参展，其中“Ä KTAavant 150”是最新一代的蛋白质分离纯化系统，代表了全球最先进的纯化技术和水平，在现场引起了众多专业人士的关注，并在现场被此次工博会评奖委员会的评审挖掘出，申报参与奖项的评选，凭其优异的性能表现和创新的技术特色摘得银奖殊荣。 获奖证书 国家发改委工业司司长熊必琳等领导与Ä KTA产品经理现场交流 Ä KTAavant产品介绍 Ä KTA在瑞典文中式精确、地道、实在的意思。Ä KTAdesignTM是一种可以帮助您在进行各种生物大分子的分离纯化时取得实质性进展的技术平台。 Ä KTAavant 150 技术亮点 Ä KTAavant系统是最新一代的蛋白质分离纯化系统，代表了全球最先进的纯化技术和水平，其下述特点在层析仪器中均属于全球首创： 1、可放大性Ä KTAavant可以直接可靠的放大，并通过UNICORN软件预计和消除系统和实验误差，保证工艺放大过程的一致性和经济性。 2、加速药品的研发和上市 仪器软件整合了突破性的DoE（Design of Experiments）实验设计功能，这样可以自动生成实验方法，便于快速、高效的工艺摸索和方法优化。 3、安全性 硬件可以自动保护层析柱，防止气泡和压力对于层析柱的破坏，增加了安全性。另外，仪器自动跟踪层析柱的试验次数和使用效率，大大节省了人工的操作时间，确定了安全范围。 系统指标 工作温度： 4-35℃ 相对湿度： 20-95%，无冷凝水 内置压力感应器： 系统泵、样品泵、柱前、柱后各一个 内置气泡感应器： 样品入口、A泵、B泵溶液入口各一个 紫外监测范围： -6到6AU 电导检测精度： ±0.01mS/cm 或 ±2% 温度监测器范围： 0-99度，精度±1.5度 (4-45度) pH监测器范围： 0-14pH单位，精度±0.1pH单位 (pH2-12) 收集器收集体积范围： 0.1-50ml 应用领域 对于全球的十万科学家来说，无论纯化蛋白质是用于结构或功能的研究、开发或优化生物大分子的纯化方法，还是纯化人工合成的多肽、核酸、抗体、病毒、疫苗、抗生素及中草药天然活性分子，Ä KTA始终意味着出色的生物分子纯化方法。 Ä KTA是全球唯一能提供从实验室规模到最终生产的可放大的蛋白纯化技术平台。在美国食品药品监督管理局（FDA）所批准的所有生物药物厂商（包括各种新兴疫苗）中有90%的客户选择它，在所有实验室规模的蛋白质纯化中约有70%的市场占有率。

2017年12月1日，由东曹（上海）生物科技有限公司（TOSOH）、默隆（上海）实业有限公司主办的液相色谱分离分析及中低压层析纯化技术应用研讨会在上海博雅酒店举行。会议特邀国外专家以及TOSOH资深技术人员前来，围绕生物医药（单克隆抗体、ADC药物等）在研发或生产中所涉及的HPLC分析分离及中低压层析纯化技术展开介绍及讨论，共吸引了100余位专业人士参加。研讨会现场东曹株式会社生命科学事业部市场部部长山崎洋介带来了题为《TSKgel色谱柱在单克隆抗体HPLC分析领域的最新技术介绍》的精彩报告。抗体是一种结构复杂的糖蛋白，其结构也是各不相同。抗体类药物在其生产工艺（培养、分离纯化）或贮存过程中容易导致产品的不均一性，所以在药物研发以及纯化、生产过程中，对抗体药物的定量和定性的分析是十分重要的。山崎先生介绍了TSKgel色谱柱在尺寸排阻色谱法、离子交换色谱法、疏水相互作用色谱法、亲水相互作用色谱法和反相色谱法中的应用。山崎先生还带来了题为《抗体药物在中低压层析技术方面的最新话题》的精彩报告。研究报告指出：在未来的5年，即至2022年，抗体药物的整体市场将每年提升6.5%。随着生物制药以及诊断试剂领域对单克隆抗体的需求日益旺盛，需要更大量、更高纯度的抗体产品。因此通过层析法实现抗体的下游纯化变的日趋重要。山崎先生介绍了Protein A亲和层析填料、离子交换层析填料、疏水层析填料和混合模式层析填料在纯化过程中的应用。报告指出Protein A亲和层析法可获得高纯度的单抗，因此普遍用于初始纯化步骤中。离子交换层析法（IEC）的高载量特点也使之在抗体的制备纯化过程中被广泛采用。疏水相互作用层析法（HIC）具有去除抗体多聚体以及脱落的Protein A配体等杂质的性能。混合模式层析法（MXC）也被应用到了抗体的层析纯化工艺中。东曹株式会社生命科学事业部市场部部长山崎洋介在做报告东曹（上海）生物科技有限公司技术中心应用开发部部长张琳博士带来了题为《TSKgel色谱柱在生物样品分析实验中条件优化与应用举例》的精彩报告。报告首先介绍了生物样品分析常用TSKgel系列色谱柱SEC、IEC、HIC、RPC、HILIC、AFC的使用对象。SEC系列主要应用于多肽、胰岛素、葡胺聚糖等物质的分析，IEC、HIC系列主要应用于抗体、核酸分析，RPC用于抗体片段，HILIC用于糖链、寡糖，AFC用于抗体定量。报告分别举例说明了TSKgel色谱柱在面对不同分析物质时的使用特点。最后，还组织了现场抽奖活动，六位参会嘉宾幸运地抽到了精美礼品，会议在热烈的氛围中圆满结束。

科学家利用层析系统开发高效的蛋白分离介质。诺维信供图 　　注射疫苗出现副作用，使用血液制品感染疾病，热销的生物制品紧急召回……这样的消息接连见诸报端。这在国家生化工程技术研究中心(北京)首席科学家苏志国看来，出现上述问题的背后，可能都是生物分离纯化技术不过关在“捣鬼”。 　　“生物制药对纯度要求颇高，需要通过生物分离纯化技术将有害物质或杂质去除，但又不能破坏目标产物的活性，其过程十分复杂。”苏志国说，包括生物制药在内的生物技术各相关产业流程，到最后都绕不过分离纯化这一步。 　　业内人士更是形象地将分离纯化技术，比作为生物技术产业化的“最后一棒”，而跑过的人都知道这一棒的艰难程度。 　　不可替代的产业角色 　　根据业内人士的共识，生物技术有所谓的上、下游之分。习惯上，把由生物学家从事的工作，包括分子生物学、生物化学、生物物理学以及遗传、育种、细胞培养、代谢等的研究划分为上游技术，而把生物技术初级制品的进一步分离、纯化、精制，进而制成最终产品的过程统称为下游技术。 　　因此，生物分离纯化技术常常被称作生物技术的下游工程。 　　从工业流程上来看，分离纯化技术也是距离终端产品最近的关键一步。 　　在生物技术科研和生产过程中，存在着大量的蛋白质、多肽和核酸等生物大分子的分析、分离和纯化工作，需要高效快速的分析、分离和制备方法。 　　而生物分离纯化技术又有别于传统的化学分离方法。全球最大生物酶制剂生产商诺维信中国研发部高级经理吴桂芳向《中国科学报》记者表示：“与化学方法相比，生物分离纯化要保持生物分子的活性，通常需要低温、特定的酸碱度、渗透压等。” 　　苏志国进一步解释，化学分离法通常利用物质挥发度的不同，比如蒸馏、精馏，通过加热来分离 但对于生物分子，例如蛋白质，通过加热就容易失去活性，所以传统化工方法往往不适用于具有生物活性产物的分离纯化。因此，生物分离纯化技术具有不可替代的产业角色。 　　据吴桂芳介绍，在生物制品的生产流程中，分离纯化成本一般占总成本的60%以上，主要是因为分离过程中的选择性不高，有效成分损失多。对于一些对终产物纯度要求高的产品，分离步骤越多，产物的最终收率越低。 　　特别是用于临床的生物医药产品，不仅要达到很高的纯度，而且还要在分离过程中最大限度地保持其生物活性，因为一旦失活，不仅失效，甚至可能产生有毒有害物质。苏志国认为，不合格疫苗等生物制品在人体出现副作用，其背后往往存在生产企业生物分离纯化技术不过关的问题。 　　令学者又爱又怵 　　据苏志国观察，很多学生非常愿意学习生物分离纯化技术，甚至从其他专业“投奔”过来。“因为产业需求大，很多企业都需要这方面人才，毕业生好找工作。” 　　而与此形成鲜明对比的是，国内长期在这一领域从事研究的学者却并不多。 　　苏志国对《中国科学报》记者说：“有别于大多数基础科学研究，生物分离纯化技术的应用性很强，需要产业实践来检验，很难出理论成果，也不容易在国际一流期刊上发论文。” 　　该领域的科研人员还需要直面来自企业的压力。花了真金白银的企业不会在乎学者发了多少文章，而是看能不能解决产业化问题。因此，研究者对于从事生物分离纯化技术研究的矛盾心理也就不难理解了。 　　那么，生物分离纯化技术到底难在哪? 　　马宁宁来自北京义翘神州生物技术有限公司。该公司以蛋白和抗体生产见长，去年还被世界知名生物技术公司Life Technologies选为战略合作伙伴。身为研发副总经理的他对于生物分离技术之难深有体会。 　　据他介绍，生物活性物质对外界很敏感，具有天生的不稳定性，对分离条件要求高，从而限制了分离的手段，而同时其分离和纯化又是一个非常复杂的过程。 　　例如，生物合成的发酵液或反应液是很复杂的多相体系。它含有微生物细胞、细胞碎片、代谢产物、未用完的培养基等，杂质含量较高，而目标产物的浓度却非常低，常常不到百分之一甚至千分之一 有的杂质还具有与产物非常相似的化学结构及理化性能，很难去除 目标产物具有生理活性物质，极不稳定，遇热或遇某些化学试剂极易失活或分解，还容易受到环境微生物的污染，因此常常要求在无菌条件下进行分离纯化。 　　受制于人的局面必须打破 　　生物分离纯化的复杂性，直接导致了其工艺流程长、需要的设备多，对原材料要求高等特点。 　　而在生物分离纯化领域，我国生物产业却面临着受制于国外厂商的尴尬局面。 　　马宁宁表示，有些设备和原材料看似简单，但对精度和GMP规范符合程度的要求很高，国内还不能生产，只能从国外进口。 　　“例如色谱柱，国内产品精度和强度能达到生物制药生产要求的很难找到。”他对《中国科学报》记者说，“再比如分离介质，进口产品在国内的售价要比在原产国高出50%~100%。” 　　苏志国认为，这意味着我国具有战略意义的生物产业，其命脉却掌握在别国手中。“长期以来我国生物分离纯化关键技术、设备和部分原材料依靠国外引进，这是发展阶段所决定的，但我们若想实现生物技术新产品的创制，就必须打破这一局面。” 　　他建议，应加强生物分离纯化技术的基础研究，“因为基础科学是原动力，而如何在复杂系统中分离生物产品，其中某些科学规律还不清楚”。 　　而各个被访者均重点阐述的，就是要攻克在设备和原材料方面的难题，其中又以分离介质为甚。 　　吴桂芳表示，应针对特定的产品开发高选择性的分离纯化介质，从而缩短分离流程，提高产品得率。这需要材料学、化学、生物技术及化学工程的紧密合作，并与终端市场需求、生产企业需求的紧密结合。 　　据马宁宁观察，分离纯化介质虽然附加值高，但由于用量低，并且技术要求高，对于习惯生产低端大宗工业品的企业不具吸引力，还需依靠有技术优势的中小企业来开发，但这些企业又因规模小不受国家重视。 　　他认为，国家在选择扶持对象时，应该更多关注专于某个细分领域的小企业，“这样的企业非常重要，没有它们，现代化的生物技术产业链就无法建立，这些小公司不该被忽视”。 　　记者手记 　　产业化长跑不能倒在冲刺阶段 　　科技产品从基础研究到投放市场，会经历漫长的过程。如果把这比作长跑，那生物技术产业化就是马拉松。 　　这段时间记者接连跑了两家生物技术企业，其负责人无不感慨生物产业的煎熬：多少品种在中试阶段表现良好，结果一放大生产就功亏一篑。 　　而生物分离纯化正是产业化冲刺阶段的关键技术。 　　我们常说，不要输在起跑线上。经过近些年的努力，我国在生物技术基础研究上的成果可谓丰硕，已成为在国际顶级期刊上发表论文的常客。 　　而在距离产业化最近的生物分离纯化阶段，我们同样需要强大的合力共同攻坚。 　　与大多数基础科学不同，生物分离纯化技术研究的应用性很强，需要产业实践来检验，很难出理论成果，也不容易在国际一流期刊上发论文，不少学者望而却步或者来了又走。 　　那么，能不能针对这一特点调整科研评价体系，把更多优秀学者吸引过来呢? 　　生物分离纯化过程复杂，涉及多种设备和原材料，其中有些虽然附加值高，但由于用量低，并且技术要求高，对于习惯生产低端大宗工业品的企业不具吸引力，还需依靠有技术优势的中小企业来开发，但这些企业往往规模小，抗风险能力差，一个订单被国外抢走就可能倒闭。 　　它们就像机器上的一颗颗螺丝钉，易被忽视但又不可或缺。它们期盼扶持政策的甘霖。国家能否鼓励更多的中小企业专于某一细分领域，给起跑不久的它们推上一把，这样，生物产业的整体才能尽早抵达终点。

漫谈离子交换层析之生物大分子分离纯化应用——江必旺博士全球生物制药产业发展迅猛，根据Frost&Sullivan市场调研，2018年全球生物制药市场规模约为2642亿美元。单抗类药物由于特异性好，靶向性高，副作用小，疗效显著，成为发展最快的一类生物药。单抗药物在2020年市场已达到1550亿美金。生物药的生产可分为上游发酵过程和下游纯化分离过程，上游工艺主要包括细胞复苏、传代、发酵生产。而下游工艺主要包括膜过滤及多步层析分离纯化。过去十多年来，基因工程获得突飞猛进的进步，细胞培养的表达量从原来的不到0.5 g/L 到现在普遍达到5g/L，有的甚至超过10g/L。这些进步是由细胞表达载体的开发，单克隆筛选以及细胞培养基优化等技术创新所驱动的。由于发酵产率的大幅度提升，使得上游细胞培养成本大幅度降低。与上游十多倍生产效率提升相比，下游分离纯化技术进步明显滞后，导致下游工序成为生产瓶颈，抗体主要生产成本也转移到下游。下游纯化在整个生物药生产中占据主要生产成本，也被认为是最需要改进的技术领域。下游工艺先进性决定了药品的质量，及药品生产效率和成本。生物药生产的技术瓶颈：实现高效、经济的分离纯化生物制药下游生产工艺目的就是把目标药物分子从复杂发酵液体系中分离出来以满足药品纯度及质量的需求。一方面监管部门对生物药的纯度和质量要求越来越高，另一方面用于治疗用的生物分子种类越来越多，结构越来越复杂，且生物分子对外部条件敏感，稳定性差，杂质多，使得生物制药分离纯化的挑战更大。比如说治疗用抗体不仅对其含量有严格的要求，还必须去除工艺相关杂质如HCP, DNA，Endotoxin, 聚集体及降解片段等（表2）。 因此如何经济、高效的从发酵的复杂组分中浓缩、分离和纯化目标生物分子已成为全球生物药生产的技术瓶颈。在蛋白类生物药生产过程中，分离成本可占总生产成本的50～80％，分离纯化技术还对生物药的分子形态、收率、质量和成本具有关键作用。色谱或层析技术对复杂生物分子具有极高的分离纯化效率, 且条件温和, 在分离纯化过程中容易保持目标生物分子的活性，因此层析技术是目前生物药分离纯化最重要的手段，甚至是唯一的手段，几乎所有生物分离纯化都离不开层析技术。离子交换层析技术的优势生物分子的分离可以根据其尺寸大小、表面电荷、疏水性能、及与配基的亲和作用性能的差异分别采用分子筛，离子交换，疏水，亲和等层析分离模式。由于蛋白类生物分子是由氨基酸组成，几乎都带有电荷，因此蛋白分子在不同pH 条件下其带电状况不同，当pH等于蛋白的等电点时，蛋白处于电中性，当pH 小于等电点时，蛋白带正电荷，当pH 大于等电点时，蛋白带负电。不同生物分子带的表面电荷正负性质及表面电荷数量不同而且会随着流动相的pH改变而改变，使得不同组份的生物分子在离子固定相的电荷作用力有较大差异，因此绝大多数生物分子可以通过离子交换进行分离纯化。离子交换层析在生物分离纯化具有较多优点：第一，载量高，离子交换对蛋白的吸附量可超过100 mg/ml, 有利于提高批处理量及大规模纯化效率；第二，离子交换分离纯化选择条件比较多，既可选择不同的离子强度，也可选择不同的pH值作为分离条件。而且色谱出峰顺序可根据蛋白质的等电点进行预测。第三，离子交换层析操作简单，流动相便宜，蛋白质活性回收率高，综合成本低。第四，离子交换在蛋白的纯化过程中可同时实现产品的浓缩，有利于低浓度蛋白样品的分离纯化。减少后续浓缩工艺。总之，离子交换具有交换载量高，适用性广，且容易保持生物分子的活性而使得离子交换成为生物大分子分离纯化最常用的分离模式，根据Markets and Markets 市场报告离子交换介质用量已超过所有其它层析介质（包括SEC，亲和，疏水、复合模式及其它）用量总和。离子交换层析介质的种类离子交换色谱(IEC)是利用带有不同电荷的样品组分与固定相的离子功能基团形成电荷作用力而吸附在固定相上, 然后通过增加流动相的盐的浓度或改变pH来以降低样品组分与固定相的电荷作用力从而达到洗脱分离的目的。因此离子交换过程是低盐上样，高盐洗脱的过程。按所使用的离子交换介质所带基团的不同，可分为强碱性阴离子型（含季胺基，Q型）、弱碱性阴离子型（含伯、仲胺基，DEAE型）、强酸性阳离子型（含磺酸基，SP型）和弱酸性阳离子型（含羧酸基，CM型）等四种类型。为了增加离子交换的选择性，同时含有离子和疏水功能基团的混合模式离子交换介质也已问世，由于混合模式离子交换层析可以同时提供疏水作用力和静电作用力，因此其具有独特的选择性在分离纯化上具有广泛的应用。另外由于有疏水作用力混合模式离子交换介质耐盐性好，生物样品可以在高盐条件上样。离子交换基团要发挥离子交换作用，必需在溶液中解离成离子。季胺盐（Q）强阴离子交换介质和磺酸型(SP)的强阳离子交换介质离解的pH范围很大，在水溶液中几乎百分之百离解。而羧甲基(CM)型弱阳离子型交换介质和二乙胺乙基（DEAE）型弱阴离子交换介质离解的pH范围小得多。羧甲基(CM)弱阳离子型交换介质在pH 变大后逐渐离解成羧基负离子，pH大到一定程度就可完全离解；二乙胺乙基（DEAE）弱阴离子交换介质在pH 变小后氮原子上逐渐结合质子，pH小到一定程度就可完全让氮原子都结合上质子，达到完全离解。离解度越大，对应的柱子吸附量也大，不离解的弱离子交换介质是无吸附能力的。当然，吸附量还与目标蛋白质在此pH下的电荷情况有关。从羧甲基(CM)弱阳离子型交换介质在pH 变大后离解度逐渐变大看，pH值大有利于弱阳离子型交换介质使用。但是此时蛋白质带的正电荷减少，不利于蛋白质的吸附。当pH值大到一定程度，蛋白质可能带负电荷，就不被弱阳离子型交换介质吸附。从二乙胺乙基（DEAE）弱阴离子型交换介质在pH 变小后离解度逐渐变大看，pH值小有利弱阴离子型交换介质使用，但是此时蛋白质带的负电荷减少，不利于蛋白质的吸附。当pH值小到一定程度，蛋白质可能带正电荷，就不被弱阴离子型交换介质吸附。很多情况下，只要介质在使用pH范围，也就是在离子状态，蛋白质的带电性质和电荷多少是影响蛋白质吸附量的决定因素。另外，蛋白质样品一般要求在分离后保留生物活性，而保留蛋白质活性需要一个合适的pH值。所以选择离子交换分离纯化生物分子时，要综合考虑样品组分的等电点、蛋白质稳定的pH 范围和交换基团离解范围选择交换基团类型。常规四种离子交换结构图基质组成对离子交换层析介质的影响目前市场上用于生物分离层析介质主要由两大类材料组成：第一类是以琼脂糖，葡聚糖为代表的天然高分子层析介质；第二类是以聚苯乙烯和聚丙烯酸酯为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强，生物兼容性好，能减少对生物分子的非特异性吸附等特点，因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构，因此多糖介质表面积大，容易做成高载量的介质。但如果软胶在干燥状态下脱去水孔道结构容易塌陷，因此，软胶填充的层析柱一般不能干，否则介质容易孔道结构容易塌陷从而失去分离性能。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久，应用最广泛的层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶，其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等。相反，合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高，化学稳定性好等特点，因此可以耐受更大的压力、更快的流速，从而提高分离效率，其市场应用增速最快。另外合成高分子微球粒径大小，粒径均匀性更容易控制，使得合成高分子介质更容易装柱，柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀，分子进不去，因此其表面积比琼脂糖基质的小，但孔径通透性更好，因此分子传质速度快，在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大，导致非特异性吸附大，容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点，但它们的目标都是一致的，都是往高载量、高机械强度、高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质，交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度，而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。未来离子交换层析介质的发展方向就是融合软硬胶的优点，做成载量高，机械强度大的介质。介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外，孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果，层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一，可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上，而内孔表面积主要由孔径大小，孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大，但如果孔径太小，目标生物分子进不去，这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大，比表面积也会降低，因此对于不同分子量大小的生物分子，有个最优的孔径大小，其可及表面积最大，分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子，孔径一般选择小于30纳米以下，而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右，而对于病毒这种大尺寸的生物，需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大，比表面积越大，载量也会越大，同时机械强度越差，因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求。不同孔径大小的单分散聚合物色谱填料图层析介质粒径大小及均匀性对生物分离的影响单分散与多分散层析介质分离性能对比示意图层析介质粒径大小和分布是影响其分离性能最重要的参数之一。粒径越小，分布越均匀，柱效越高，分辨率越高。因此制备精确的粒径大小及高度的粒径均一性单分散层析介质一直是业界追求的目标。纳微成功开发出单分散大孔聚合物层析介质可以用于高效分离生物大分子。另外粒径均匀，填充的柱床稳定，重复性好，不容易堵塞筛板，而且可以使用更大孔径的筛板以降低反压。表面亲水改性对离子交换性能的影响大分子分离纯化介质的一个共性要求就是介质表面亲水性要好，以达到降低蛋白的非特异性吸附并保持生物分子的活性的要求。因此商业化的聚合物层析介质一般有两种合成方法：第一种就是选择具有足够亲水的单体直接合成亲水聚合物多孔微球，然后通过表面键合不同功能基团以制备离子、疏水、分子筛及亲和层析介质。比如说日本Tosoh 和美国 Biorad公司都是采用亲水较强的带多羟基丙烯酸酯或丙烯酰胺单体，这类介质与糖基组成的软胶类似不需要进行表面亲水化处理就可以直接键合功能基团做成离子交换层析介质。第二种方法是用疏水性较强的单体如苯乙烯，丙烯酸酯合成疏水聚合物多孔微球。这种微球由于疏水性较强不能直接用于蛋白分离纯化的层析介质，而是要先经过表面亲水化改性，才可以键合功能基团制备生物大分子分离纯化用层析介质。Thermofisher 生产的POROS 离子交换层析介质就是在疏水的聚苯乙烯微球表面通过亲水化改性后再键合不同功能基团制成离子交换层析介质。多孔聚苯乙烯微球表面亲水化改性是由Purdue 大学 Regnier教授研究组发明的专利技术（ US Patent No. 5503933）。因此Thermofisher利用该技术成功地开发出用于蛋白药物如抗体分离纯化的亲水化聚苯乙烯层析介质，该介质目前已被广泛地用于抗体及疫苗的纯化，在去除抗体多聚体等杂质方面具有明显优势。显然，第二种方法制备聚合物层析介质步骤多、工艺复杂、技术门槛高、成本高，但其制备的介质具有更高的机械强度，更小的压缩系数和更低的溶胀系数，可耐受更高的压力和流速，而且具有传质速度快、寿命长等优势。间隔臂对离子交换层析介质的影响除了介质基质材料组成，表面亲水性能及功能基团种类及密度会影响离子交换层析介质分离效果外，其功能基团与基球表面之间的间隔臂长短以及接方式也很重要。尤其是对于生物大分子的分离纯化，由于生物分子体积大，相比于小分子，其表面电荷的可及性差，因此间隔臂越长，越有利用介质表面离子功能基团与生物大分子带电功能基团起作用。对于小分子的分离纯化，由于空阻比较小，离子交换载量与离子功能基团的密度基本成正比，与基团与介质表面之间手臂长短关系不大。因此用于小分子分离纯化的离子交换介质，其离子功能基团可以直接连接到介质表面，中间不需要长间隔臂。但对于大分子分离纯化的离子交换介质，间隔臂对载量和分离效果都有较大影响。 德国默克开发出触角型的离子交换介质就是把离子功能基团通过高分子链从微球表面延伸出来，这种触角型的离子交换介质更容易与生物大分子有效结合，同时也有利于孔道空间的利用，解决了聚合物由于表面积比软胶小从而导致聚合物离子交换介质载量低的问题。触角型离子交换不仅载量高，而且传质速度快，分辨率高。单分散离子交换层析介质的最新进展为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来，并保持其生物活性，用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。粒径分布均匀，形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好，流动相在柱床中的流速均匀，流动相经过柱床的路径长短一致，从而有效降低涡流扩散系数，使色谱峰宽变窄，理论塔板数升高。粒径分布与流速特征关系图另外粒径大小一致，可以保持分子在填料微球的扩散迁移路径基本保持一致，相应的保留时间也一致，减少分子扩散系数，从而获得更高的柱效。因此高度粒径均一的单分散色谱填料既可以降低涡流扩散系数又可以减少分子扩散系数，从而提高柱效。另外粒径越精确、分布越窄、其柱床越稳定、反压越低、批间稳定性好。纳微生产的单分散色谱填料不仅完全可以替代SOURCE 系列产品，而且粒径，孔径及材质的选择都远远超过SOURCE产品种类和规格。纳微单分散聚合物层析介质包括聚苯乙烯和聚丙烯酸酯系列。聚苯乙烯表面改性层析介质系列可以替代POROS用于抗体和蛋白的分离纯化，而聚丙烯酸酯系列可以替代Tosoh, Merck, Biorad等生产的聚丙烯酸酯或聚丙烯酰胺层析介质。层析介质关系到药品生产的成本和质量。不同厂家生产的离子交换层析介质都有各自的特点，没有最好的，只有选择最合适的。但层析介质的国产化无疑对中国生物制药产业链安全供应至关重要。越来越多像纳微这样的中国公司已经具备生产一流的层析介质的能力，这些国产化的层析介质也得到越来越多的药企认可。后记在问及江必旺博士对该技术的期望时，他表示：“色谱和层析是药物分离和分析最重要手段，尤其是生物制药领域，层析几乎是生物制药分离纯化的唯一方法。中国生物制药快速崛起会带动中国色谱和层析介质的发展，同时色谱和层析技术的进步及国产化会降低中国生物药的成本，提高药品的纯度和质量。因此中国的色谱和层析技术遇到千载难逢的发展机遇, 相信一定会得到迅猛的发展。”作者简介苏州纳微科技董事长 江必旺博士 江必旺博士，国家特聘专家，获北京大学化学系学士， State University of New York at Binghamton博士学位，在University of California at Berkeley 从事博士后研究。 回国后创建了北京大学深圳研究生院纳微米材料研究中心并任该中心主任。于2007年，江必旺博士创建了苏州纳微科技股份有限公司，专门从事高性能微球材料的研发及产业化。江博士带领团队突破了单分散硅胶色谱填料精确制备技术难题，成为全球唯一一家可以大规模生产单分散硅胶色谱填料的公司。江博士团队还开发出世界领先的单分散聚合物层析介质、如离子交换、亲和，疏水及分子筛等系列亲和层析介质，打破国长期垄断。江博士创建的纳微科技成为色谱领域第一家在科创板上市公司。【专家约稿招募】若您有生命科学相关研究、技术、应用、经验等愿意以约稿形式共享，欢迎邮件投稿邮箱：liuld@instrument.com.cn微信/电话：13683372576扫码关注【3i生仪社】，解锁生命科学行业资讯！Webinar预告（点击报名）

2017年9月21日，备受瞩目的第四届制药分离纯化技术与学术大会如期召开，来自全国100多家单位的近500名参会者兴致高昂地齐聚一堂，互相交流行业心得，聆听资深专家教诲，在其乐融融的氛围中，共享此次业界盛会带给大家的丰硕成果。9月21日第四届分离纯化技术与学术大会现场千呼万唤始出来：分离纯化领域的行业盛宴作为国内色谱分离纯化领域研发创新的排头兵，纳微科技兼顾软硬件方面的共同发力，不仅数十年如一日地坚持技术创新、研发突破，保证研发投入占比在40%以上，还应行业迫切需求首创分离纯化技术学术大会及相关实验培训班，至今已成功举办第四届。“以创新，赢尊重，得未来”，如今纳微科技已经越来越得到国内外顶尖制药企业及色谱领域公司的认可与信赖，我们愿与包括药企、食品企业等在内的广大用户共同努力、携手走向美好未来。 小编之所以称这场学术技术大会为行业盛宴，是因为此前曾在药企从事数年的新药研发、质量研究和工艺优化等工作，站在这样的立场上看待与会特邀嘉宾和报告嘉宾的论题，简直觉得字字珠玑，不容错过。非常荣幸的是，小编全程学习了特邀嘉宾的报告论题，现在试图根据自己的心得感悟整理成文，以飨读者。精华一：张玉奎院士从科研角度提出发展色谱行业的迫切需求 张玉奎院士从蛋白质组学角度介绍了他们的研究成果，并引用质谱行业领军企业的话：当务之急是要让色谱峰变得更窄！尽管当前质谱领域发展迅速，但其始终无法取代色谱分离纯化的地位，目前解决该问题的方法之一在于发展单分散填料。纳微科技实现单分散填料的技术突破后，为中国色谱行业的发展带来了新的希望，祝愿中国早日由色谱大国转变为色谱强国。精华二：郭中平处长发出监管标准改革最强音：更规范、更严格、全球新 在国家“健康中国”的战略发展背景下，生物制药的快速发展将使国家监管和标准体系面临新的挑战，实现生物制品国家标准与生物制药创新与产业升级的协同发展成为新形势下的重要任务。她还不无感慨的表示，十多年来首次看到政策表态国家标准药品“极端重要”，在我国政府深化改革和加入ICH的大背景下，严格规范的食品药品监督管理将进一步提升色谱分离纯化的重要性和紧迫感。精华三：魏开坤博士分享最前沿生物医药研发审评改革信息并作经验性指导 随着我国改革开放事业的发展，生物医药领域的研发和审评进入了一个由仿制为主向创新为主转变的转型时期。自2015年起，为了顺应我国生物医药领域的创新形势所需，国家食品药品监督管理总局按照国务院的部署，发力推进药品审评审批制度改革，逐步拓展为药品监管制度的全面变革。他简要分享了就生物医药方面的最新政策法规、新药研发挑战与机遇、评审决策要点及注意事项等方面的信息和理解，向行业传递监管当局的思想理念和方法策略，希望以此共同促进为人民服务的生物医药事业发展。目前我国CFDA已经加入国际人用药品注册技术协调会（ICH），下一步还要争取加入国际药品认证合作组织（PIC/S），并逐渐与国际水准接轨，实现新药“全球新”。精华四：江必旺博士介绍多年来技术创新成果，分享应用效果 江必旺博士作报告表示，生物分子结构的多样性以及监管部门对生物药的纯度要求越来越严格，使得生物药的分离纯化难度越来越大。因此，如何经济、高效的从复杂组分中浓缩、分离和纯化目标生物分子，往往是生物药生产的瓶颈。蛋白类层析或制备色谱分离纯化技术对结构复杂、稳定性差及浓度低的生物分子具有极高的分离纯化效率，且条件温和，在分离纯化过程中容易保持目标分子的生物活性，已成为生物药分离纯化最重要的工具。另外，高效液相色谱法（HPLC）作为一种高效、快速的分析检测技术，已成为生物药生产过程中产品质量监控的重要方法。色谱填料或层析介质毫无疑问是整个液相色谱技术的核心, 液相色谱的分离效果很大程度上取决于色谱填料；色谱技术重大进步往往是随着新的色谱分离材料的出现而突破的。他还分享了国内企业如何通过持续不断的技术创新突破国外在高性能的色谱填料和层析介质的长期垄断，以及产品从me too到me only的发展过程，最后他还通过大量生动详实的应用案例讲解如何选择合适的色谱填料和层析介质以解决抗体、蛋白、胰岛素、 多肽、抗生素、天然产物及多糖的分离纯化问题。

随着2017年初《“十三五”生物产业发展规划》的发布，中国的生物技术产业迎来新的快速发展阶段。其中生物医药产业将重点发展生物技术药物等多个创新药物品类，推动医疗向精准医疗和个性化医疗发展。如何加快研发项目进展，提高产品质量是生物医药研发和生产企业关注的焦点。东曹（上海）生物科技有限公司（TOSOH）将于近期在武汉、成都和上海举办技术应用研讨会，围绕生物医药（单克隆抗体、ADC药物等）在研发或生产中所涉及的HPLC分析分离及中低压层析纯化技术展开介绍及讨论，助力中国生物医药产业的技术进步。 【会议主题】单克隆抗体HPLC分析领域的最新技术介绍；TSKgel色谱柱在生物样品分析实验中条件优化与应用举例；抗体药物在中低压层析技术方面的最新话题。 【会议日程】城市时间地点武汉11月28日（周二）9:00-13:00武汉华美达光谷大酒店成都11月29日（周三）9:00-13:00四川锦江宾馆上海12月1日（周五） 9:00-13:00博雅酒店 【报名方式】请致电东曹公司：021-34610856-212或发送邮件：info@tosoh.com.cn （标题注明：技术研讨会报名）名额有限，请尽早报名参加。 本次参会免费，安排自助午餐及茶歇，会后更有精彩抽奖环节，期待您的参与！ 关于东曹东曹集团生命科学事业部是全球知名的液相色谱仪器耗材和工业层析填料产品供应商。其产品包括EcoSEC系列凝胶渗透色谱仪、离子色谱仪、TSKgel高效液相色谱柱、TSKgel高压层析填料、TOYOPEARL中低压层析填料、TOYOPEARL PAK、TOYOSCREEN层析工艺方法筛选用预装柱。广泛应用于蛋白、多肽、多糖、寡聚糖、DNA、低聚核苷酸、抗生素、合成高分子、天然产物和其他小分子量化合物的分析、分离及纯化工作中。东曹（上海）生物科技有限公司作为东曹集团在中国的全资子公司，秉承东曹集团通过化学创新、实现幸福、回报社会的理念，为中国客户提供优质的产品和完善的服务。

2019年6月11日、13日，由东曹(上海)生物科技有限公司(TOSOH)主办的“生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会”在北京、上海两地成功召开。研讨会首次携手藤森工业株式会社、岛津上海实验器材有限公司，并邀请资深技术人员，围绕生物医药(单克隆抗体、ADC药物等)在研发、生产中所涉及的分离、分析、一次性技术等内容展开介绍及讨论，北京场共吸引100余位专业人士参加。仪器信息网作为特邀媒体参与并报道北京场的研讨会。北京场研讨会现场东曹(上海)生物科技有限公司副总经理潘明祥主持研讨会报告主题: Ground-breaking Application to therapeutic antibody by FcγReceptor ⅢA immobilized Affinity chromatography column TSKgel FcR-ⅢA-NPR -Separation of mAb based on ADCC activity-演讲人：冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)　　 糖链结构差异会影响抗体与引起免疫反应的效应细胞上的Fc受体之间的结合，因此对抗体药物糖链结构的分析在质量控制中至关重要。TOSOH于今年2月在全球范围内推出一款高性能亲和TSKgel® FcR-IIIA-NPR色谱柱，将重组人FcγIIIA作为配基键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上，并充填至PEEK色谱柱内，以识别不同糖链结构并根据ADCC活性强弱来分离不同抗体组分，为抗体药物糖链结构的分析和活性测定带来全新思路和方法。　　报告对该色谱柱的分离原理、性能参数、主要用途、使用要点进行了介绍，列举其在抗体药物质量控制、细胞培养条件优化、细胞器筛选、细胞培养过程监控等环节的应用。相比传统方法，FcR-IIIA-NPR色谱柱可在30分钟内快速完成抗体分离并获得重复性良好的分析结果，降低成本且无需样品预处理。这款色谱柱推出不久便获得2019年PITTCON会议颁发的“卓越奖银奖”。报告主题: TSKgel色谱柱新产品UP-SW2000在小分子蛋白、多肽、寡核苷酸领域的应用演讲人：冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)　　冨泽洋先生还介绍了TOSOH另一超高效液相色谱柱新产品，用于生物大分子分离的尺寸排阻色谱分析柱TSKgel® UP-SW2000。该色谱柱的填料粒径为2μm，可针对小分子蛋白、多肽、寡核苷酸等生物大分子/中型分子进行快速分离和高效率分析 与TSKgel SW系列色谱柱有相同的填料表面特性，可兼容于UHPLC和常规HPLC系统。与现有SW系列色谱柱相比，UP-SW2000对蛋白质具有相同的分离选择性，且峰形更尖锐，分辨率更高。各类多肽样品在UP-SW2000上可以保持良好峰形。冨泽先生在报告中分享了该色谱柱对多种中小分子量蛋白、多肽(胰岛素、胸腺肽)、寡核苷酸、抗生素等的分析应用。报告主题: 生物大分子药物生产中一次性技术的介绍演讲人：矢野贵之(藤森工业株式会社)　　藤森工业株式会社成立于1914年，是一家拥有精密涂布技术，可为电子行业提供精细材料,并且为医疗、化妆品、食品行业提供各种包装材料的“百年老店”。藤森工业生命科学事业部提供颗粒分包、铝箔袋、灭菌袋、药用离型膜、药用输液袋等各类包装产品。公司近年来大力拓展一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件。在日本生物制药行业的一次性生物工艺的应用研究和行业标准制定中，几乎都有藤森工业的参与。报告重点介绍了藤森工业提供的一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件的定制服务、应用以及验证工作。报告主题: 岛津在生物药领域的解决方案：细胞上清液组分分析包、抗体药物分析、nSMOL技术介绍演讲人：涂奇奇(岛津上海实验器材有限公司)　　为应对生物药领域日益复杂的分析需求，报告重点介绍了岛津推出的细胞上清液组分分析方法包和纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL)技术。细胞上清液组分分析方法包可同时分析95种化合物，分析时间最快可达17分钟一个样品，在葡萄糖、谷氨酰胺等高浓度组分，以及维生素等低浓度组分中均呈现优化的MRM参数。nSMOL技术则是通过特异性酶解CRD区域的肽段降低分析的目标肽段数，再结合质谱方法实现各类抗体药物的分析。该技术在曲妥珠单抗定量分析、百日咳毒素S4亚基肽段覆盖度分析中已得到较好应用。报告主题: Technical trend of biopharmaceuticals purification演讲人：桥本佳巳(东曹株式会社 生命科学事业部)　　桥本佳巳先生汇报了生物制药纯化技术的发展趋势，方向是更高的结合能力，以及碱性条件下更强的稳定性。报告介绍了TOSOH针对下游纯化工艺，推出的TOYOPEARL AF-rProtein L-650F、 rProtein A HC-650F和羟基磷灰石Ca++ Pure-HA三种新型层析填料。Protein L可对一些无法使用Protein A填料纯化的抗体样品(不含有Fc区域的抗体)进行有效纯化。Ca++ Pure-HA适用于生物分子的分离纯化，其高选择性可以分离电泳或其他层析模式难以分离的蛋白。据悉，TOSOH还参股位于美国的Semba Biosciences公司，以推进连续流色谱技术及产品的研发。

汇智而行 创新启动未来 第四届制药分离纯化技术与学术大会暨实验技术培训班时间：2017年9月21日-24日大会地点：苏州工业园区独墅湖世尊会议中心实验班地点：苏州工业园区百川街2号【本届大会亮点】强大的国内外演讲嘉宾阵容：30多位报告专家，500多名制药界专业技术人员、行业人士及政府代表参会。新增质量检测分论坛，三个专题论坛涵盖更多技术内容：涵盖抗生素、手性药物、中药及天然产物等、单克隆抗体及ADC、重组蛋白、多肽、生物分析检测等丰富内容。最新技术交流与实验技能培训班的创新结合：真正惠及一线技术人员的研发、生产及质检的全过程，帮助解决实际问题【大会背景介绍】近年来，我国制药产业加快了向新药创制大国迈进和战略转型升级的步伐，CFDA加入人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)，在加快药物审评及审批速度、提高药品质量、鼓励创新药研发等方面颁布重要举措，同时我们看到欧美制药巨头在单抗、抗艾疫苗、重组蛋白及免疫细胞治疗等方面突飞猛进。由于药物结构多样性和监管部门对纯度要求更佳严格，下游色谱层析纯化环节占生产成本50%以上，质量控制越加重要，高水平人才缺口很大，影响我国新药创制进程及国际竞争力。第四届制药分离纯化技术与学术大会由苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会主办，旨在盛邀政府机构、药物监管单位、制药研发及下游生产与质量控制的国内外专家及专业人士共赴盛会，探讨当前制药行业的新政策、新工艺及新技术以及国内外最新的进展。大会将于9月21日-22日在苏州独墅湖世尊会议中心举办，前三届累计参会人数超过1500多人，技术学术大会同技能培训班结合获得广泛好评和赞誉，已成为制药分离纯化领域的专业盛会。本届大会以“汇智而行?创新启动未来”为主题，主办方诚挚邀请您及广大制药界专业人士前来参会、学习和交流。【大会议程】 备注：大会将分为三个主题论坛同步进行；日程安排以现场为准。【往届精彩回顾】【大会邀请嘉宾】【往届特邀嘉宾】【参会人员及规模】诚挚邀请各制药企业、高校科研院所、CRO/CMO企业，从事分离纯化的专家、学者、企业高管、工程技术人员和相关厂商、媒体参会、参展，届时预计将吸引500名专业人士齐聚苏州。【赞助商方案】此次大会将成为宣传企业形象、展示实力、扩大知名度及开展信息发布的良好机会，同时主办方将邀请从事色谱、分析、生物制药、分离纯化领域的媒体、网站开展宣传和报道。此次会议为各单位提供了一系列不同的赞助方式，以满足不同单位的需求。【往届赞助商】【实验班背景介绍】生物药结构的多样性和对高纯度要求，分离纯化环节一直是重中之重。采用液相色谱或层析技术从复杂组分中分离和纯化目标生物分子并实现经济高效的产出是一直是难点，分离成本一直高居不下；在药物质量控制与提高方面，高效液相色谱法以其高效、快速及高分辨率的优势发挥关键作用。当前我国生物药层析制备与质量控制技术，无论从研发、工艺优化(DOE)、工艺放大到过程控制水平等方面，均与欧美发达国家存在较大差距，影响了新药创制进展和国际竞争实力，急需培养一批真正高水准的分离纯化专业人才。基于纳微科技在蛋白与小分子纯化领域的师资优势和领先技术突破，极好地满足创新型人才培训的需求。无论在师资力量、理论深度和国际视野， 或是在创新思维和操作实践方面均处于国内领先水平， 能切实帮助学员更好、 更快地完成分离纯化科研和生产任务。我们在往期培训班教学实践基础上，举办“第六期蛋白分离纯化及高压制备色谱实验技能培训班”。本次升级培训课程包括：中低压液相色谱(FPLC)、高效液相色谱(HPLC)及实用分析检测技与制备技术、生物药层析纯化、填料筛选、工艺优化及方法开发（DOE）等。【培训地点及议程】第四天与第五天：9月23日 -24日 【名额有限，需提前报名预定】地点：苏州工业园区百川街2号时间日程安排时间日程安排第四天上午08:30-12:00签到及理论课程培训第四天下午13:30-第五天16:00实验技能培训【培训对象】制药公司从事药物分离纯化或质检的一线技术人员、科研院所从事生物分子或中小分子分离纯化技术应用的工程技术人员、科研工作者、高校教师及博士研究生。 【授课形式】授课专家将理论学习和实际操作相结合、讲师演示和上机操作相结合，为学员提供更多亲自动手的机会而提高工艺设计和操作能力，提高实际解决分离纯化问题的水平；专家现场答疑解惑，帮您解决从实验室到中试放大生产过程中遇到的棘手问题，以及药物分析检测过程中的难题，重点培养学员的实验技能和开发思路。【实验条件】纳微科技为学员提供最先进分离纯化及分析仪器，包括waters hplc 2台，waters uplc 1台, dac 制备色谱系统2台，akta avant，akta prime plus，akta purifier 100，akta purifier 10共6台，岛津lc 7台，agilent hplc 6台，agilent gc 1台，赛谱scg蛋白纯化系统5台等，还配套提供各种层析填料及介质，涵盖反相, 正相, 手性、gpc、离子交换, 金属亲和及protein a 介质以及各种纳微科技的色谱层析柱供学员学习使用。 【培训内容及导师阵容】【培训主题一：高压制备色谱分离纯化实验培训】 通过学习高压制备色谱的理论、方法策略和实际操作，让学员掌握：理论部分 1.hplc分离纯化与分析技术原理及要点，如方法与目的，条件选择与优化，战略与战术； 2.工业化hplc分离与纯化工艺开发的流程与关键事项，包括：实验室规模的研发阶段，中试及放大至工业规模及其关键注意事项。实验部分 混合样品的分离纯化的实验操作，包括：实验条件选择，超载条件下分离，馏分收集及工艺确定等。总结讨论 讨论与解答各种具体实际问题，包括：流动相制备与回收，色谱填料选择、使用与再生，装柱技术，超载进样，分离过程，检测，馏分收集与后处理等。 * 欢迎培训学员将需要纯化的样品或纯化问题带到课堂，我们将帮助您进行设计纯化工艺和路线并实际操作。黄骏雄，中国科学院生态环境研究中心研究员、博士生导师，80年代初赴美留学，是中国第一位在色谱领域拿到耶鲁大学博士学位的学者，在国内积极推广了非线性制备色谱技术，具有深厚的制备色谱理论功底和实践经验，曾在国际知名色谱公司服务多年，为中国生物制药工业，如胰岛素和多肽的分离纯化等，提供了极其宝贵的理论和实践支持。江必旺，博士，北京大学化学系学士，State University of New York at Binghamton 博士，University of California at Berkeley 博士后，Rohm and Haas资深研究员，回国后创建了北京大学深圳研究生院纳微米材料研究中心，并任该中心及广东省纳微米材料重点实验室主任。2007年创建了苏州纳微科技有限公司专门从事高性能单分散色谱填料和层析介质的产业化。江博士带领的团队长期坚持创新，不仅填补了国内高性能色谱填料技术和产品的空白，而且开创了世界新一代的单分散硅胶和聚合物色谱填料制备技术，为中国色谱填料制备技术从空白走向世界领先做出贡献，并出口大量的高性能色谱填料和层析介质到欧美、日本、韩国等发达国家的生物制药公司，打破了中国长期单向进口色谱填料的局面。石凌超，近10年制药企业原料药纯化工艺开发和液相色谱设备制造商技术应用工作经验，专注于小分子液相色谱纯化工艺开发和优化，涉及项目领域包含氨基酸，糖类，头孢类及其他小分子抗生素，多肽等等。曾供职于全球领先的大型液相色谱设备生产企业——法国诺华赛（Novasep），主持和参与多项新型液相色谱纯化项目，对色谱纯化工艺的开发，优化和生产放大及成本控制有丰富的经验和独特的见解。【培训主题二：蛋白分离纯化实验技能培训】 通过学习蛋白分离纯化理论、方法策略和实际操作，让学员掌握： 1.掌握并能初步进行蛋白质纯化的流程设计框架； 2.了解样品处理对于纯化流程的意义； 3.了解和操作蛋白质纯化仪器设备，包括辅助设备的使用； 4.掌握蛋白质纯化主要层析方法：脱盐，离子交换，疏水相互作用，protein a亲和等层析技术的运用和缓冲体系； 5.蛋白质层析过程运行参数的选择和确定； 6.建立蛋白质纯化技术经济的概念，初步学会评估不同纯化方案的优劣； 7.在培训过程中与合作者和同行建立良好的交流合作关系。姜韬，中国科学院发育生物研究所高级工程师，多年致力于生物工程下游蛋白质纯化工艺技术的研究，项目指导和人才培训，拥有多项生物技术相关专利，是生物工程学会《生物工程杂志》的蛋白分离纯化的研讨班和中国科学院研究生院现代生物工程主讲老师，培训学员已逾千人，对于推动和提高我国蛋白质纯化和生物工程下游工艺提高做出重要贡献，丰富的蛋白纯化实践经验及演示让学员们印象深刻受益匪浅。谢岩生(Sam Xie)，博士，生物制药下游工艺专家，在美国医药及生物制药行业有多于15年的工作经验。曾经就职于施贵宝(BMS), 人类基因科学(HGS)等公司。作为研发专家和组织者，参与了重组蛋白、抗体、抗体-药物偶联物等医药产品的工艺研发。在纯化工艺开发,中试放大及工业化生产等方面，具有丰富的实践经验。(U. of Delaware生物化学博士, Scripps Res. Inst. 博士后)金百胜，曾经供职于TOKU-E，GE Lifescience，10年以上药物研发及生产经验。长期致力于下游纯化方向，曾在2010年负责多肽项目转让给欧洲某制药企业。任职通用电气期间，担任层析填料应用技术支持。帮客户成功解决过若干抗体，疫苗，重组蛋白，细胞治疗用病毒载体及胰岛素等多肽类的纯化问题。精通Akta设备以及DOE实验条件优化。【收费标准】第四届制药分离纯化技术与学术大会 （9月21-22日） 会务费第六期蛋白分离纯化及高压制备色谱高级实验班（9月23-24日） 培训费包含：讲课费、会议资料、茶歇、午餐、欢迎晚宴等（交通、住宿自理）包含：专家授课费、仪器费、培训资料、茶歇、午餐、晚宴等（交通、住宿自理）单人报名：1500元/人 团队报名：1300元/人，2人及以上享受此优惠单人报名：1900元/人 团队报名：1500元/人，2人及以上享受此优惠凡同时报名参加大会和实验班，可享受优惠价：3200元/人(团队优惠价：2700元/人，2人及以上可享受此优惠)主办单位：苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会承 办 方： 苏州纳微科技有限公司支持单位：苏州工业园区生物产业发展有限公司苏州工业园区科技与信息化局 苏州纳米科技发展有限公司苏州千人计划专家联合会北美华人色谱协会蒲公英药学社区更多详情请关注Nanomicro Tech

p & nbsp /p p 　　层析纯化技术由于其高选择性、灵活性、易放大性等优点，已经成为蛋白质药物纯化中不可或缺的技术。传统的层析填料为多糖基质，孔径一般在100 nm以下。1970年代出现了大孔和微孔无机材料硅填料，虽然增大了孔道、提高了层析的分辨率和流速，但只能在PH2-7.5范围内稳定，不利于分离纯化在碱性范围内稳定的蛋白质或是需要碱性层析条件的分离，从而限制了其在大规模快速分离蛋白质层析上的应用。多孔聚合物微球由于其高的比表面积、高的机械强度和多样的表面特征，常被用作层析分离纯化的填料。目前已发展出了多种表面基团、基质种类的层析填料，成功用于疫苗、病毒、抗体、酶、细胞因子等的分离纯化。 /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　层析纯化病毒、病毒样颗粒等生物大分子的瓶颈问题 /strong /span /p p 　　随着病毒、病毒样颗粒在疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗中的地位越来越重要，这类复杂生物大分子的分离纯化需求也逐渐增加。然而传统填料由于孔径较小，蛋白质只能以扩散方式通过填料，传质速率慢，处理量低，造成分离时间长、容易失活等问题[1]。当蛋白质体积较大时，填料表面在吸附一层蛋白后，由于体积位阻以及静电排斥作用，会阻碍其它的蛋白质进一步进入孔内，造成填料的载量下降。另一个限制是病毒或疫苗，尤其是带有包膜的病毒或疫苗，在狭窄的填料孔径内发生吸附时非常容易发生结构变化，破坏其整体结构。在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的纯化中发现这种病毒样颗粒在层析时会发生解聚[2]，经过离子交换层析分离后，疫苗的回收率通常不到50%[3, 4]。而抗原的结构发生变化以后，就会对其免疫原性产生影响，所以需要在纯化过程中尽可能维持抗原的结构。 /p p 　　为了解决针对病毒及病毒样颗粒纯化的瓶颈问题，目前已有采用膜色谱、超大孔贯穿孔颗粒填料及整体柱的策略进行纯化的案例，成功纯化了包括人乳头瘤病毒、番茄花叶病毒、流感病毒、腺病毒、慢病毒及各种病毒样颗粒。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　病毒及病毒样颗粒的分离纯化 /strong /span /p p 　　根据文献报道，超大孔填料相比传统层析填料不仅在载量及处理速度上有极大的优势，还更有利于病毒及病毒样颗粒的结构保持。 /p p 　　例如，在重组乙肝病毒表面抗原的分离纯化中，采用具有120nm及280nm超大孔径的离子交换填料DEAE-AP-120 nm和DEAE-AP-280 nm(商品名为中科森辉的Giga系列)具有比传统填料DEAE-FF高7倍以上的动态载量[1]。此外，采用ELISA测定抗原收率，发现采用超大孔填料能够减少重组乙肝病毒表面抗原在层析过程中的裂解，从而显著提高活性抗原的收率。 /p p style=" text-align: center " img width=" 576" height=" 450" title=" 1.jpg" style=" width: 415px height: 282px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/3b67db18-4291-4ab6-9874-209cd57644af.jpg" / 　　 /p p style=" text-align: center " 重组乙肝病毒表面抗原在不同孔径离子交换填料上 /p p style=" text-align: center " 　　的吸附动力学[1] /p p style=" text-align: center " img width=" 497" height=" 345" title=" 2.jpg" style=" width: 387px height: 289px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/07fdf233-77a5-4c30-8d20-faf7f044b54a.jpg" / 　 /p p style=" text-align: center " 　重组乙肝病毒表面抗原从不同孔径的填料上洗脱下来的 /p p style=" text-align: center " 　　ELISA回收率[1] /p p 　　对病毒的分离纯化同样有类似的效果。例如在灭活口蹄疫病毒的纯化中，DEAE-FF导致严重的病毒裂解。而采用具有100nm以上孔径的超大孔填料，不仅载量提高10倍以上，还能显著提高病毒在填料上吸附时的热稳定性，从而减少病毒的裂解，具有更高的收率。最终的分离纯化单步收率达90%以上[5]。 /p p style=" text-align: center " 　　 span style=" font-size: 14px " strong 灭活口蹄疫病毒在传统填料与超大孔填料上的吸附解离过程 /strong /span /p p 　　与商品填料的小孔道填料相比，超大孔结构可能从以下几方面提高对蛋白质构象的稳定性： /p p 　　1)增大孔道(受限空间)：根据蛋白质折叠行为计算显示，蛋白质的折叠速率与空腔大小、形状密切相关，也即当填料孔道与蛋白的相对尺寸超过某一阈值后，蛋白的折叠行为将不受空腔大小影响。与数十纳米中孔结构的传统填料的相比，数百纳米超大孔结构会因孔道增大、与蛋白接触面积减小，从而对某一尺寸下蛋白质的变构行为有所改善。 /p p 　　2)界面曲率：小孔径填料孔道曲率大，填料与蛋白质接触面积大，因此受更大吸附力影响，蛋白质二级结构变化越严重。而曲率更大的超大孔孔道对蛋白二级结构的保护比狭窄孔道更有优势。 /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " strong 　表面曲率变化对蛋白接触面积的影响 /strong /span /p p 　　3)改善配基与蛋白活性区域的接触面积：超大孔微球内部数百纳米孔道在修饰配基后可能会有效改善传统填料狭窄孔道内由于配基拥挤造成的蛋白质失活现象。 /p p 　　4)减少蛋白在孔道内的静电排斥作用：有研究者认为，在离子交换填料上蛋白质起初会在孔道入口处形成一圈静电层，这一静电层会对后来蛋白继续进入孔道产生排斥作用从而使孔道关闭，动态载量下降。如果将超大孔填料修饰为离子交换树脂，由于孔道尺寸显著扩大可能会有效改善蛋白吸附静电层对孔道的封闭作用，从而有效引导蛋白质进入超大孔道，提高回收率。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　快速分离蛋白质及pDNA /strong /span /p p 　　除了应用于病毒及病毒样颗粒的分离纯化的分离纯化，利用超大孔填料传质速度快的优势，将超大孔填料镀上亲水表层，再接上不同配基制成多种形式的层析填料，用于快速高分辨率的纯化蛋白混合物或质粒。超大孔填料制备成的亲和层析、反相层析和离子交换层析填料广泛的应用在蛋白质的分离纯化方向，显示出超大孔填料比传统分离填料高速高分辨率的蛋白质纯化优势。 /p p 　　例如以肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白的混合溶液为模拟体系，考察不同流速下超大孔聚苯乙烯阴离子交换介质(DEAE-AP，商品名为Giga系列)的分离效果，并与DEAE 4FF介质进行了对比。实验结果(图2)显示，作为对照的DEAE-4FF介质在流速达到361 cm/h时，分离效果已明显降低，而超大孔介质可以在流速高达1084 cm/h的条件下操作，分离效果良好，能够在6 min内实现三种生物大分子的快速分离。 /p p style=" text-align: center " img width=" 588" height=" 170" title=" 3.jpg" style=" width: 473px height: 144px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/65df31ac-bd00-4a08-8a5a-feedfa1aa990.jpg" / /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　超大孔填料应用前景与展望 /strong /span /p p 　　近年来，随着生命科学的发展，生物样品越来越复杂，如人的血样、尿样、组织样品等，对生物分离分析技术提出更高的要求。根据超大孔填料固有的诸多优点，通过合成不同种类的超大孔固定相及在固定相上做不同功能的衍生，超大孔填料已经被广泛应用于生物分离分析中，但也存在一些问题。因此，发展新的制备手段，优化制备条件和过程，探索制备和分离机理，对于开辟新的应用领域以及开展实际样品的分离分析有更大的理论和现实意义。 /p p 　　根据已有的文献报道，我们可以预测今后几年的相关工作仍会集中在以下几个方面： /p p 　　(1)规则的聚合物整体材料内部形态。如获得规则的3D网络骨架，可控的孔径尺寸和分布。 /p p 　　(2)继续在微分离系统中扩展其应用。如在加压电色谱、微流控芯片材料、微流色谱和纳流色谱系统，甚至纳米器件开发等诸多方面大显身手。 /p p 　　(3)表面物理化学性质的调控向功能化、智能化方向发展。如基于分子印迹技术、温度响应以及pH响应的表面智能化的整体材料。 /p p 　　(4)制备规模整体柱的开发及其在生物下游技术中的应用。 /p p 　　目前，已经有一部分整体柱实现了商品化，但种类有限，还无法与种类繁多的颗粒型填充柱相提并论，也远未能满足分离分析的需求。而颗粒型的超大孔填料，由于其制备较困难、批次间重复性较差、价格昂贵等，也没有得到广泛的应用。相对于超大孔填充柱，有机相整体柱存在因流动相变会发生溶胀或收缩、机械强度差、比表面积小、柱容量差以及聚合过程中产生的微孔不利于小分子样品的分析等问题，现有报道大都用于生物大分子的分离。硅骨架整体柱也存在必须预先聚合好装入套管中，制备繁琐，比表面积较小的问题。因此，如何以更简便、有效的方式制备高效新型的超大孔填料并将其应用于实际样品的分离分析仍然是今后工作的重心。在实际工作中所面临的层出不穷的问题也是推动新型超大孔填料制备技术和方法发展的源源不竭的动力，在诸多的尝试中很可能就会出现某些性质优良的超大孔填料，这也预示着将来商品化的超大孔会越来越多。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　部分商品化的超大孔层析介质 /strong /span /p p 　　 strong 超大孔填料因其具有独特的多孔结构，与传统填料相比具有更加优良的渗透性和传质速率，可以在较低的操作压力下实现高效和快速的分离，已成为继多聚糖、交联与涂渍、单分散之后的第四代分离填料。可以预测，随着制备技术的不断提升，超大孔填料在生命科学、医药、环境和化学化工等领域必将大有可为。 /strong /p p 　　参考文献 /p p 　　[1] M.R. Yu, Y. Li, S.P. Zhang, X.N. Li, Y.L. Yang, Y. Chen, G.H. Ma, Z.G. Su, Improving stability of virus-like particles by ion-exchange chromatographic supports with large pore size: Advantages of gigaporous media beyond enhanced binding capacity, Journal of Chromatography A, 1331 (2014) 69-79. /p p 　　[2] P.M. Kramberger P, Boben J, Ravnikar M, ?trancar, A.S.m.c.a.b. in, p.a.f.q.o.t.m. virus., J. Chromatogr. A 1144(1). /p p 　　[3] W. Zhou, J. Bi, J.-C. Janson, A. Dong, Y. Li, Y. Zhang, Y. Huang, Z. Su, Ion-exchange chromatography of hepatitis B virus surface antigen from a recombinant Chinese hamster ovary cell line, Journal of Chromatography A, 1095 (2005) 119-125. /p p 　　[4] W. Zhou, J. Bi, J.C. Janson, Y. Li, Y. Huang, Y. Zhang, Z. Su, Molecular characterization of recombinant Hepatitis B surface antigen from Chinese hamster ovary and Hansenulapolymorpha cells by high-performance size exclusion chromatography and multi-angle laser light scattering, Journal of Chromatography B, 838 (2006) 71-77. /p p 　　[5] S.Q. Liang, Y.L. Yang, L.J. Sun, Q.Z. Zhao, G.H. Ma, S.P. Zhang, Z.G. Su, Denaturation of inactivated FMDV in ion exchange chromatography: Evidence by differential scanning calorimetry analysis, BiochemEng J, 124 (2017) 99-107. /p p /p

东曹生命科学（Tosoh Bioscience）是全球知名的色谱分离解决方案供应商，近日宣布对现有SkillPak预装柱产品线进行了拓展，推出了2.5 cm I.D.和5.0 cm I.D.两种规格的层析柱新品，用于单克隆抗体、抗体片段、ADC、寡核苷酸以及病毒等生物大分子的纯化工艺开发。关于SkillPak预装层析柱SkillPak预装填有亲和、阴/阳离子交换、疏水以及尺寸排阻等各种分离模式的TOYOPEARL或TSKgel层析填料，性能卓越、稳定可靠，可与常用的低压或中压液相色谱层析系统配合使用。SkillPak不仅可以重复再生使用，还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比，能够精确展示各种尺寸层析柱的纯化效果。公司现有产品1 mL和5 mL SkillPak主要用于纯化工艺开发或变更时进行参数和方法的优化，以及耐用性的测试等。此次新上市的50 mL和200 mL规格的层析柱可将开发好的纯化工艺线性放大。SkillPak预装层析柱的应用1. 抗体纯化工艺中洗脱pH值的确定在mAb纯化工艺中，找到适合mAb洗脱的缓冲溶液和pH值，可降低样品中聚集体增加的风险。为了确定mAb结合和洗脱的最佳条件，我们将含CHO细胞培养上清液的mAb进样至预装有TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F填料的SkillPak层析柱中。图1. 使用1 mL和5 mL SkillPak确定mAb洗脱pH值图1中的A和B显示了使用线性pH值梯度在pH 3.5时获得尖锐的mAb组分峰 (洗脱最大)。为了最大程度地提高回收率，可选择pH 3.3～3.5进行分步洗脱。2. 下游工艺的无缝放大我们使用装填了阴离子交换填料TOYOPEARL NH2-750F的不同尺寸的SkillPak层析柱分离蛋白标准品。下图中蛋白标准品的分离结果显示，不同尺寸层析柱上其洗脱曲线相似，证明了SkillPak出色的放大能力。图2. 不同尺寸的SkillPak分离蛋白标准品同时，我们还在5 mL、50 mL和200 mL的SkillPak层析柱上测定了牛血清白蛋白 (BSA) 的动态吸附载量。BSA在不同尺寸的SkillPak上动态吸附载量值非常接近，最大偏差为4%，表明吸附能力与层析柱尺寸无关，这一点对于工艺放大时的上样量来说非常重要。表1. 不同尺寸SkillPak上BSA的动态吸附载量如您想了解SkillPak预装柱的详细信息，欢迎联系我们索取产品资料或申请免费试用。Tel：400-825-6296

东曹生命科学（Tosoh Bioscience）于2020年4月正式推出了SkillPak工艺开发用层析柱，主要用于快速实现纯化方法的开发及优化、填料的筛选以及样品的浓缩。SkillPak层析柱有1 mL和5 mL两种规格，其中预装填了东曹公司的各类TOYOPEARL、TSKgel以及Ca++Pure-HA填料，能够对生物大分子，如单克隆抗体、蛋白质和寡核苷酸进行出色的纯化评价、评估。 SkillPak 1 mL和5 mL层析柱为从平台工艺开发到中试规模纯化而设计。这类预装层析柱一经收到即可立即投入使用，由于具有优异的刚性强度和理想的压力/流速特性，尤其适合下游纯化工艺。 SkillPak层析柱性能卓越、稳定可靠，可与常用的低压或中压液相色谱/层析系统配合使用。该类层析柱不仅可以重复再生使用，还充分考虑了每种填料不同的装填压缩比。因此，能够精确展示各种尺寸层析柱的代表性状态。

尊敬的用户： 您好！ 东曹（上海）生物科技有限公司（TOSOH）将于2015年5月21日在天津日航酒店、5月22日在上海张江博雅酒店举行两场“色谱分离分析及中低压层析纯化技术研讨会”。今年我们一如既往的邀请到了色谱分离领域的专家来与各位分享下游纯化方面的新技术与应用案例。此外，东曹公司的资深技术人员也会围绕单克隆抗体以及ADC药物在研发或生产中涉及的HPLC分离纯化等热门话题展开介绍及讨论。 我们诚挚地邀请您的参与并致以衷心的感谢！ 时 间：2015年5月21日（周四）9：00 – 15：00地 点：天津日航酒店6楼钻石宴会厅 天津和平区南京路189号会议日程：时间内容演讲者09：00-09：15报道、注册09：15-10：15Next generation downstream processes for biologics用于生物大分子的新一代下游工艺介绍（英文演讲）山本修一 教授山口大学10：15-10：30抽奖环节 & 茶歇10：30-11：00Separation of Antibody by N-Glycan Structures on　FcR immobilized Resin根据FcR的糖链结构来进行抗体分离纯化（英文演讲）田中亨 先生东曹公司总部11：00-11：30用于抗体纯化的层析填料新产品介绍桥本佳巳东曹公司总部11：30-12：00针对抗体/ADC药物分析的最新应用案例分享史俊霞 工程师东曹(上海)生物科技12：00-13：00抽奖环节 & 午餐13：00-14：00TSKgel反相/正相色谱柱在原料药和中草药方面的应用及TSKgel色谱柱使用中的常见问题解答张琳 博士东曹(上海)生物科技14：00-15：00新一代全自动层析柱及层析系统介绍栗云天 总经理华创精科15：00-抽奖环节 & 会议结束时 间：2015年5月22日（周五）9：00 – 12：15地 点：上海博雅酒店1楼宴会厅 上海张江碧波路699号会议日程：时间内容演讲者09：00-09：15报道、注册09：15-10：15Next generation downstream processes for biologics用于生物大分子的新一代下游工艺介绍（英文演讲）山本修一 教授山口大学10：15-10：30茶歇10：30-11：00Separation of Antibody by N-Glycan Structures on　FcR immobilized Resin根据FcR的糖链结构来进行抗体分离纯化（英文演讲）田中亨 先生东曹公司总部11：00-11：30用于抗体纯化的层析填料新产品介绍明华 博士东曹(上海)生物科技11：30-12：00针对抗体/ADC药物分析的最新应用案例分享史俊霞 工程师东曹(上海)生物科技12：00-13：30抽奖活动 & 午餐自助餐如果您对我们的活动感兴趣，请填写如下报名回执并反馈至如下联系方式：报名回执姓 名性 别职 务民 族单位名称通讯地址邮 编电 话手 机E-mail是否需协助安排住宿是（ ）是否需协助订票火车票（ ）注明硬座、硬卧等否（ ）飞机票（ ）如需要，请打勾活动联系：东曹（上海）生物科技有限公司联系人：徐绍纲电 话：021-34610856*213传 真：021-34610858邮 件：xushaogang@tosoh.com.cn

p 　　 strong 仪器信息网讯 /strong 2019年6月11日、13日，由东曹(上海)生物科技有限公司(TOSOH)主办的“生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会”在北京、上海两地成功召开。研讨会首次携手藤森工业株式会社、岛津上海实验器材有限公司，并邀请资深技术人员，围绕生物医药(单克隆抗体、ADC药物等)在研发、生产中所涉及的分离、分析、一次性技术等内容展开介绍及讨论，北京场共吸引100余位专业人士参加。仪器信息网作为特邀媒体参与并报道北京场的研讨会。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/31ec2b44-39ba-44d7-926a-83ccbc3c3f69.jpg" title=" IMG_5067_副本.jpg" alt=" IMG_5067_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 北京场研讨会现场 /strong /p p strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/ff796c28-99fa-4a57-8146-1429979f1684.jpg" title=" IMG_5051_副本_副本.jpg" alt=" IMG_5051_副本_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 东曹(上海)生物科技有限公司副总经理潘明祥主持研讨会 /strong /p p strong /strong /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/e81c12e6-79c4-400c-83a2-35bd198f1da4.jpg" title=" IMG_5053_副本.jpg" alt=" IMG_5053_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告主题: Ground-breaking Application to therapeutic antibody by FcγReceptor ⅢA immobilized Affinity chromatography column TSKgel FcR-ⅢA-NPR -Separation of mAb based on ADCC activity- /strong /p p style=" text-align: center " strong 演讲人：冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部) /strong /p p 　　糖链结构差异会影响抗体与引起免疫反应的效应细胞上的Fc受体之间的结合，因此对抗体药物糖链结构的分析在质量控制中至关重要。TOSOH于今年2月在全球范围内推出一款高性能亲和TSKgel& reg FcR-IIIA-NPR色谱柱，将重组人FcγIIIA作为配基键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上，并充填至PEEK色谱柱内，以识别不同糖链结构并根据ADCC活性强弱来分离不同抗体组分，为抗体药物糖链结构的分析和活性测定带来全新思路和方法。 /p p 　　报告对该色谱柱的分离原理、性能参数、主要用途、使用要点进行了介绍，列举其在抗体药物质量控制、细胞培养条件优化、细胞器筛选、细胞培养过程监控等环节的应用。相比传统方法，FcR-IIIA-NPR色谱柱可在30分钟内快速完成抗体分离并获得重复性良好的分析结果，降低成本且无需样品预处理。这款色谱柱推出不久便获得2019年PITTCON会议颁发的“卓越奖银奖”。 /p p style=" text-align: center " strong 报告主题: TSKgel色谱柱新产品UP-SW2000在小分子蛋白、多肽、寡核苷酸领域的应用 /strong /p p style=" text-align: center " strong 演讲人：冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部) /strong /p p 　　冨泽洋先生还介绍了TOSOH另一超高效液相色谱柱新产品，用于生物大分子分离的尺寸排阻色谱分析柱TSKgel& reg UP-SW2000。该色谱柱的填料粒径为2μm，可针对小分子蛋白、多肽、寡核苷酸等生物大分子/中型分子进行快速分离和高效率分析 与TSKgel SW系列色谱柱有相同的填料表面特性，可兼容于UHPLC和常规HPLC系统。与现有SW系列色谱柱相比，UP-SW2000对蛋白质具有相同的分离选择性，且峰形更尖锐，分辨率更高。各类多肽样品在UP-SW2000上可以保持良好峰形。冨泽先生在报告中分享了该色谱柱对多种中小分子量蛋白、多肽(胰岛素、胸腺肽)、寡核苷酸、抗生素等的分析应用。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/39ee150a-320e-4773-ad21-1f41a6b0c5f2.jpg" title=" IMG_5058_副本.jpg" alt=" IMG_5058_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告主题: 生物大分子药物生产中一次性技术的介绍 /strong /p p style=" text-align: center " strong 演讲人：矢野贵之(藤森工业株式会社) /strong /p p 　　藤森工业株式会社成立于1914年，是一家拥有精密涂布技术，可为电子行业提供精细材料,并且为医疗、化妆品、食品行业提供各种包装材料的“百年老店”。藤森工业生命科学事业部提供颗粒分包、铝箔袋、灭菌袋、药用离型膜、药用输液袋等各类包装产品。公司近年来大力拓展一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件。在日本生物制药行业的一次性生物工艺的应用研究和行业标准制定中，几乎都有藤森工业的参与。报告重点介绍了藤森工业提供的一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件的定制服务、应用以及验证工作。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/cf5da81f-ae52-492a-9b10-6fd84e7962ae.jpg" title=" IMG_5076_副本.jpg" alt=" IMG_5076_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告主题: 岛津在生物药领域的解决方案：细胞上清液组分分析包、抗体药物分析、nSMOL技术介绍 /strong /p p style=" text-align: center " strong 演讲人：涂奇奇(岛津上海实验器材有限公司) /strong /p p 　　为应对生物药领域日益复杂的分析需求，报告重点介绍了岛津推出的细胞上清液组分分析方法包和纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL)技术。细胞上清液组分分析方法包可同时分析95种化合物，分析时间最快可达17分钟一个样品，在葡萄糖、谷氨酰胺等高浓度组分，以及维生素等低浓度组分中均呈现优化的MRM参数。nSMOL技术则是通过特异性酶解CRD区域的肽段降低分析的目标肽段数，再结合质谱方法实现各类抗体药物的分析。该技术在曲妥珠单抗定量分析、百日咳毒素S4亚基肽段覆盖度分析中已得到较好应用。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/cc2818cb-1217-4264-b9dc-ef245f0f1b09.jpg" title=" IMG_5087_副本.jpg" alt=" IMG_5087_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 报告主题: Technical trend of biopharmaceuticals purification /strong /p p style=" text-align: center " strong 演讲人：桥本佳巳(东曹株式会社 生命科学事业部) /strong /p p 　　桥本佳巳先生汇报了生物制药纯化技术的发展趋势，方向是更高的结合能力，以及碱性条件下更强的稳定性。报告介绍了TOSOH针对下游纯化工艺，推出的TOYOPEARL AF-rProtein L-650F、 rProtein A HC-650F和羟基磷灰石Ca++ Pure-HA三种新型层析填料。Protein L可对一些无法使用Protein A填料纯化的抗体样品(不含有Fc区域的抗体)进行有效纯化。Ca++ Pure-HA适用于生物分子的分离纯化，其高选择性可以分离电泳或其他层析模式难以分离的蛋白。据悉，TOSOH还参股位于美国的Semba Biosciences公司，以推进连续流色谱技术及产品的研发。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/1cc66e66-f0bb-4296-85ca-21e4e7d6bc1a.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 研讨会上举办精彩纷呈的抽奖环节 /strong /p

同田生物携tbe-300c全新高速逆流色谱分离纯化系统参展cisile 2013 第十一届中国国际科学仪器及实验室装备展览会cisile 2013于5月17日在北京圆满闭幕。上海同田生物公司携tbe-300c全新高速逆流色谱分离纯化系统参展cisile 2013，赢得了广大客户的好评以及关注，相关高校，科研单位，医药研发企业的负责老师也表示了强烈的采购意向。tbe-300c 主要用于中小分子的分离纯化，特别适合进行天然产物、中草药、化学合成物质、抗生素等中、小分子类物质的分离，并累积10克量级别的有效成分单体进行后续的科学研究。tbe-300c是公司全新的研发平台打造，体现高分离流速，高进样量，高分离效率，双泵平衡功能。 详细的产品资料，以及分离图谱案例，联系我们公司销售人员。 如下链接是详细的产品介绍 http://www.tautobiotech.com/products_06_01_300c.htm 上海同田生物技术股份有限公司，致力于分离纯化领域的研究开发，主要经营20a，300a，300b，200v，300c，1000a,5000a高速逆流色谱仪/高效逆流色谱，以及各个型号流量的中压平流泵，中压恒流泵，中压制备色谱。

p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 兽用疫苗很重要 /span /strong /p p 　　我国是全球最大的家禽、家畜生产国和消费国。兽用疫苗在家禽、家畜疾病的预防和控制中发挥了重要作用，为畜牧业的健康和可持续发展提供了重要保障。我国的兽用疫苗从无到有，从粗放式到规范化快速发展，已发展成为一个品种多、覆盖面广的高增长行业。2015年的市场规模已达120多亿元，近7年年均复合增长率超过17%，在未来的5-10年里仍将保持13-15%的高速增长。 /p p 　　为保证疫苗的安全性和有效性，降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰，需要对疫苗进行有效的分离纯化，去除细胞培养液中的其它杂质，提高疫苗有效成分的含量和纯度。 /p p 　　由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高，以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究，传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法，杂质去除效果有限，导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。 /p p 　　随着市场对高端疫苗需求的日益扩大，疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入，以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比，兽用疫苗对生产成本极其敏感，对纯度要求相对较低，如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本，对于兽用疫苗的产业化尤其重要。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 需要什么样的兽用疫苗 /span /strong /p p 　　为保证疫苗的安全性和有效性，降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰，需要对疫苗进行有效的分离纯化，去除细胞培养液中的其它杂质，提高疫苗有效成分的含量和纯度。 /p p 　　由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高，以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究，传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法，杂质去除效果有限，导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。 /p p 　　随着市场对高端疫苗需求的日益扩大，疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入，以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比，兽用疫苗对生产成本极其敏感，对纯度要求相对较低，如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本，对于兽用疫苗的产业化尤其重要。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 传统疫苗纯化技术 /span /strong /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 沉淀法 /span /strong /p p 　　沉淀法，即通过向蛋白质溶液中加入盐、有机溶剂、聚合物，改变溶液的pH或温度，从而使蛋白质沉淀出来的方法。最常用的沉淀剂主要有硫酸铵、硫酸钠、乙醇、丙酮、PEG等。例如在口蹄疫病毒的纯化中，所采用的沉淀方法主要包括硫酸铵沉淀法、PEG沉淀法、等电点沉淀法、鱼精蛋白沉淀法等。沉淀法对疫苗的纯化效果有限，单步处理所得到的疫苗纯度质量较低，往往作为样品预处理的一种有效方法。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 超滤法 /span /strong /p p 　　超滤法是利用超滤膜在一定的驱动力下使水、无机盐等小分子通过，截留一定大小的大分子或病毒等颗粒，进而使大颗粒得到浓缩的方法。超滤法已成为蛋白质浓缩和缓冲液置换的首选方法。超滤膜的材料一般选用聚砜、聚醚砜等多聚物 而在疫苗等生物大分子领域，应用最多的是再生纤维素。超滤法是从大量病毒原料液中浓缩病毒样品的一种非常快捷高效的方法，其优点是操作条件简单、处理量大、疫苗损失小 在进行浓缩的同时还可以根据分子大小的差异(类似凝胶过滤层析)起到一定的纯化效果，但超滤法的选择性不高，只能透过或截留一定分子量的物质，使得最终得到的浓缩液中还会含有大量的大分子杂质，分辨率低于凝胶过滤层析。在超滤过程中，选择合适的膜组件以及优化合适的操作条件，对疫苗回收率的影响非常大。此外，疫苗等分子在膜上的吸附和超滤过程中的浓差极化现象，对超滤的应用效果也有显著的负面影响。 /p p 　　王振辉等[1]采用超滤方法对效力检验不合格的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒灭活液进行浓缩和纯化处理(0.6/0.8/1.0微米的微滤膜过滤碎片等杂质、陶瓷膜过滤器(10k)浓缩和纯化、0.22微米滤膜无菌过滤)。结果表明，杂蛋白去除率达到62-70% 免疫至63 d时中和抗体效价(ELISA)平均高达245.7 稀释倍数，比常规疫苗中和抗体效价平均高出66.3 稀释倍数。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 超速离心法 /span /strong /p p 　　超速离心技术主要包括差速离心和密度梯度离心2种类型，可用于样品浓缩、样品分析和生物大分子(病毒颗粒等)的分离纯化。差速离心法常用于对纯度和产量要求不高时的分离，通过不同的离心速度使颗粒从溶液中沉淀出来，并根据目的蛋白所在的位置选择保留上清还是沉淀。差速分离最常见的实际应用是通过其他手段浓缩和纯化上清液中的病毒之前，用差速离心法去除病毒裂解物中的细胞碎片等杂质。通过差速离心法能够将病毒离心沉淀与小颗粒的杂质分开，但是在沉淀或重悬过程中，病毒的结构可能会被破坏 此外一些病毒沉淀后难以再溶解，这就影响后续的纯化或分析。如果要得到活性和结构良好、分散均一并且纯度较高的病毒样品，那么就应该考虑密度梯度离心法。 /p p 　　Kaaden O R等[2]人先用PEG沉淀法(PEG 6000、8-10%(W/V)浓度)从BHK-21型细胞病毒养液中对口蹄疫病毒(FMDV)进行预处理，然后采用蔗糖密度梯度离心，得到高纯度的口蹄疫病毒。Barzilai R[3]等人通过氯化铯密度梯度离心，直接从细胞质裂解液中获得了FMDV纯品，回收率达到95%。但超速离心存在操作繁琐、离心时间长、重复性差、设备成本高、处理量小、不易于放大等问题，只适用于实验室规模的病毒纯化和分析，难以满足工业化生产需求。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 新型疫苗纯化技术 /span /strong /p p 　　层析技术具有分辨率高、操作条件温和、重复性好、易于放大、分离系统可实现管道化和自动化(更好满足密闭无菌要求)等突出优势，在生物制品(重组蛋白、疫苗、抗体等)的分离纯化中扮演着极其重要的角色。层析技术应用广泛，在疫苗纯化中已有大量成功的案例，绝大多数人用疫苗(乙肝疫苗、百日咳疫苗、狂犬疫苗等)都采用层析技术进行纯化和大规模生产[3]。 /p p 　　层析技术根据分离原理的不同，主要包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析和亲和层析4大类。各种层析技术的特点和应用情况如表1所示，其中离子交换层析技术的应用最为广泛。 /p p 　　 strong 表1.层析技术的特点和应用情况 /strong /p p /p table border=" 0" cellpadding=" 0" cellspacing=" 0" width=" 648" colgroup col width=" 72" span=" 5" style=" width:54pt" / /colgroup tbody tr height=" 18" style=" height:13.5pt" class=" firstRow" td height=" 13" class=" xl63" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 129" 层析技术 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 特点 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 捕获& nbsp /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" 精纯& nbsp /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" 精制 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 离子交换 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 高分辨率、高载量、高流速；低盐上样 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" *** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" *** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" *** /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 台风（TY） /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 高分辨率、中等载量、高流速；高盐上样 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" ** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" *** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" * /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 凝胶过滤 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 高分辨率；低载量、低流速 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" - /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" * /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" *** /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 亲和 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" 高分辨率、中/高载量、高流速 /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 129" *** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" *** /td td class=" xl64" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 130" ** /td /tr /tbody /table p 　　随着市场需求的扩大、研发机构及疫苗厂家的研发投入和技术积累，越来越多的兽用疫苗开始使用层析技术进行分离纯化，工艺开发和小批量制备取得了重要进展，部分产品已进入后续的中试放大阶段。中科院过程工程研究所生化工程国家重点实验室是我国分离纯化领域的知名机构和优势单位，拥有一支高水平的人才队伍、配置齐全的分离纯化和分析检测平台，在人用疫苗领域具有10多年的研发和产业化经验(与企业合作)。近年来在兽用疫苗的分离纯化、分析检测、结构稳定性研究等领域也开展了一系列富有成效的工作[4-7]。 /p p 　　苏志国、张松平等[4]通过对口蹄疫病毒结构特点的研究、培养液中杂质的组成和特性分析，在对介质选型、操作条件优化的基础上，建立了1条由离子交换层析和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺，口蹄疫灭活病毒的纯化倍数达到217倍，纯度达到95%以上，收率为37.5%。为提高疫苗的收率和降低纯化成本，又进一步研究疏水层析技术在口蹄疫病毒分离纯化中的应用效果，最终建立的由疏水层析、超滤浓缩和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺，取得了更好的分离纯化效果，纯化倍数达到247倍，收率达到75.4%，纯度接近电泳纯 该工艺进一步提高了疫苗收率，更有利于提高纯化效率和降低疫苗的纯化成本，为大规模制备口蹄疫灭活病毒疫苗奠定了基础。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/d040dc05-cfd0-42b9-87a8-be93c3088b2e.jpg" style=" " title=" 1_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/a7545038-4f01-43fb-89d8-cd7b9eda952f.jpg" style=" " title=" 2_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/8a3f7210-7fb4-4ec4-aa4b-89e9aec73c98.jpg" style=" " title=" 3_副本.jpg" / /p p 　　图1：丁基疏水层析分离纯化FMDV层析谱图 /p p 　　图2 ：凝胶过滤层析精制纯化FMDV层析谱图 /p p 　　图3：图3 SDS-PAGE和Western blot分析(1、FMDV培养液，2、HIC初纯样品，3、超滤浓缩样品，4、凝胶过滤样品 5、凝胶过滤样品的VP1条带进行Western blot分析) /p p 　　除了灭活病毒疫苗，基因工程重组疫苗(重组蛋白抗原或重组融合(标签)蛋白抗原)也可以有效抑制病毒感染，有望发展成为更为安全有效的疫苗品种。基因工程重组疫苗，特别是带有标签的重组疫苗，分离纯化难度大大降低，分离效率大大提高。熊毅等[8]分别构建了带His和GST标签的重组表达载体，成功表达了A型口蹄疫病毒(FMDV)的结构蛋白VP1(包涵体形式)，并分别采用金属螯合层析和GST亲和层析进行纯化，得到电泳纯的VP1蛋白 活性鉴定结果表明重组蛋白具有良好的特异性和抗原性，可用于易感动物的免疫及血清抗体筛查。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 疫苗检测技术 /span /strong /p p 　　分析检测技术应用于疫苗培养、纯化、质控的各个阶段。快速、准确地对疫苗进行分析表征，对于疫苗分离纯化工艺的开发和优化，意义重大。人用疫苗研究历史悠久、技术完善，相关技术都可以直接用于兽用疫苗的分析检测。疫苗表征内容主要包括纯度、结构和活性 相应的分析检测技术主要包括电泳(以及Western blot)、ELISA、高效液相色谱、超速离心、动态光散射、透射电镜、差示扫描量热等技术[4-8]。 /p p 　　 strong 表2 疫苗分析检测技术 /strong /p table border=" 0" cellpadding=" 0" cellspacing=" 0" width=" 648" colgroup col width=" 72" span=" 3" style=" width:54pt" / /colgroup tbody tr height=" 18" style=" height:13.5pt" class=" firstRow" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 215" 技术名称 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 特点& nbsp /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 应用& nbsp /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 电泳& nbsp /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 操作简单，定性半定量& nbsp /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 纯度、分子量 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" ELISA /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 体外活性& nbsp /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 活性表征 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 高效液相色谱 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 快速、准确 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 纯度、颗粒大小、分子量 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 场流分级 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 无损伤表征疫苗真实结构 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 纯度、颗粒大小、分子量 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 高效液相色谱 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 分析速度慢、操作繁琐 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 纯度 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 动态光散射 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 快速、准确 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 颗粒大小和分布 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 高效液相色谱 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 方便快捷直观昂贵 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 分子大小和形貌 /td /tr tr height=" 18" style=" height:13.5pt" td height=" 13" class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 215" 差示扫描量热 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 快速、疫苗稳定性条件筛选 /td td class=" xl65" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width=" 216" 结构稳定性 /td /tr /tbody /table p /p p 　　在上述分析检测技术中，疫苗结构及其变化的表征对于疫苗分离纯化工艺和产品保存稳定性的研究越来越引起研究者的关注。高效液相色谱(或场流分级)与光散射技术(如多角度激光)联用，广泛用于各种疫苗的颗粒大小、分子量，以及结构变化的表征[4, 6, 7]。差示扫描量热技术也被广泛应用于疫苗稳定性研究中，无论是分离纯化过程中疫苗稳定结构条件(温度、缓冲液(pH、盐种类和浓度)、添加剂等)的筛选，还是疫苗成品的制剂研究[5]。　　 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 结论与展望 /span /strong /p p 　　我国兽用疫苗市场潜力巨大，未来一段时间都将保持高速发展的态势。近年来，疫苗品质不断提高，市场逐步由政府招标向市场化转变，因此，疫苗分离纯化必将成为今后疫苗发展的重要趋势，只有经过浓缩、纯化等技术处理的高品质疫苗，才有可能在越来越激烈的市场竞争中占有一席之地。 /p p 　　单从技术层面来看，兽用疫苗和人用疫苗的分离纯化与分析检测技术是相通的。目前广泛用于各种人用疫苗分离纯化和分析检测的技术都可用于兽用疫苗研发和生产中。但在市场价格方面，与人用疫苗相比，兽用疫苗市场价格相对较低，因此兽用疫苗的工业化生产对分离纯化技术及成本控制的要求也极为苛刻。如何借鉴人用疫苗的分离纯化技术和成功经验，设计和简化纯化工艺、提高疫苗稳定性和疫苗收率、降低介质等关键材料的使用成本，对于高端兽用疫苗的研发和产业化，意义重大。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 作者介绍 /span /strong ：黄永东，博士，中科院过程工程研究所副研究员，长期致力于蛋白质分离纯化工艺研发和层析分离介质研制工作。先后主持了9项国家自然科学基金、国家重点研发计划等课题，以及多项和生物医药企业的合作课题 先后开发了乙肝疫苗、百日咳疫苗、胸腺肽等多种生物活性物质的分离纯化工艺，以及10多种层析分离介质，相关技术和产品在200多家科研单位和企业得到应用。在纯化工艺开发和介质筛选等方面具有高超的理论水平和丰富的实战经验。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 参考文献 /span /strong /p p 　　[1] 武桂梅, 何玉友, 王振辉, 李鹏, 郑洪娟. 膜分离法纯化浓缩猪繁殖与呼吸综合征灭活病毒的效果试验. 中国兽医杂志, 2015, 51 (9): 99-102. /p p 　　[2] Kaaden OR, Dietzschold B, Matheka HD, Tokui T. Konzentrierung und Reinigung von Maul-und-Klauenseuche-(MKS-) Virus durch Polyä thylenglykol (PEG). Archiv fü r die gesamte Virusforschung, 1971. 35(1): 104-113. /p p 　　[3] Barzilai R, Lazarus L H, Goldblum N. Viscosity-Density Gradient for Purification of Foot-and-Mouth Disease Virus. Archly fü r die gesamte Virusforschung, 1972, 34: 141-146. /p p 　　[4] Li H, Yang YL, Zhang Y, Zhang SP, Zhao Q, Zhu YY, Zou XQ, Yu MR, Ma GH, Su ZG. A hydrophobic interaction chromatography strategy for purification of inactivated foot and mouth disease virus. Protein Expression and Purification, 2015, 113: 23-29. /p p 　　[5] Yang YL, Zhao QZ, Li ZJ, Sun LJ, Ma GH, Zhang SP, Su ZG. Stabilization study of inactivated foot and mouth disease virus vaccine by size-exclusion HPLC and differential scanning calorimetry. Vaccine, 2017, 35: 2413-2419. /p p 　　[6] Chen Y, Zhang Y, Zhou YF, Luo J, Su ZG. Asymmetrical flow field-flow fractionation coupled with multi-angle laser light scattering for stability comparison of virus-like particles indifferent solution environments. Vaccine, 2016, 34: 3164-3170. /p p 　　[7] Yang YL, Li H, Li ZJ, Zhang Y, Zhang SP, Chen Y, Yu MR, Ma GH, Su ZG. Size-exclusion HPLC provides a simple, rapid, and versatile alternative method for quality control of vaccines by characterizing the assembly of antigens. Vaccine 33 (2015) 1143–1150 /p p 　　[8] 颜健华, 何奇松, 蒋家霞, 冯淑萍, 黄胜斌, 韦达有, 易春华, 许瑞胜, 梁晟, 熊毅. A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达、纯化及鉴定. 南方农业学报, 2016, 47 (2): 301-305. /p p br/ /p

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛，是一项重要的操作技术。一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质，一些含量十分丰富，一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质，必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。 蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤——01 材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有：1. 机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用，使细胞破碎。常用设备有，高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。2. 渗透破碎法这种方法是在低渗条件使细胞溶胀而破碎。3. 反复冻融法生物组织经冻结后，细胞内液结冰膨胀而使细胞胀破。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。4. 超声波法使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。5. 酶法如用溶菌酶破坏微生物细胞等。02 蛋白质的抽提通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提，抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂（十二烷基磺酸钠、tritonX-100等），使膜结构破坏，利于蛋白质与膜分离。在抽提过程中，应注意温度，避免剧烈搅拌等，以防止蛋白质的变性。03 蛋白质粗制品的获得选用适当的方法将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来。比较方便的有效方法是根据蛋白质溶解度的差异进行的分离。常用的有下列几种方法：1. 等电点沉淀法不同蛋白质的等电点不同，可用等电点沉淀法使它们相互分离。2. 盐析法不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同，所以可通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质，并能再度溶解而不变性。3. 有机溶剂沉淀法中性有机溶剂如乙醇、丙酮，它们的介电常数比水低。能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低，进而从溶液中沉淀出来，因此可用来沉淀蛋白质。此外，有机溶剂会破坏蛋白质表面的水化层，促使蛋白质分子变得不稳定而析出。由于有机溶剂会使蛋白质变性，使用该法时，要注意在低温下操作，选择合适的有机溶剂浓度。04 样品的进一步分离纯化用等电点沉淀法、盐析法所得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质，须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。常用的纯化方法有：凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等等。有时还需要这几种方法联合使用才能得到较高纯度的蛋白质样品。05 蛋白质的分析测定通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定。蛋白质的分析纯化，不仅仅是选择合适的方法，必备的工具，例如微量均质器、干燥器、抗体保存盘等，也很重要。Bel-Art蛋白质分析纯化工具推荐本篇我们根据不同耗材在蛋白质分析纯化过程中的不同作用，分类为大家推荐几款合适的耗材。细胞裂解 热门优选 微量均质器-手持式货号：F65000-0000研磨组织和破碎细胞层析 热门优选 磁珠分离架货号：F19900-000分离结合在磁珠上的蛋白质以快速纯化透析热门优选 透析袋夹持器货号：F18237-0000测定热门优选贝塔盾货号：F24976-0001在进行C14分析时减少接触电泳热门优选 Spindrive&trade 轨道摇床平台货号：F37041-0001提供彻底、温和的凝胶混合，同时*限度地扩大实验室空间

p 　　近年来，随着基因工程的快速发展，使生物制药行业获得前所未有的发展机遇，预计2015年全球生物制药产值可达2000亿美元。由于生物药结构的多样性以及监管部门对生物药的纯度要求越来越严格，使得生物药的分离纯化难度越来越大。因此，如何经济、高效的从复杂组分中浓缩、分离和纯化目标生物分子，往往是生物药生产的瓶颈。 br/ /p p 　　为交流和探讨生物制药分离纯化过程中面临的技术难题，2015年9月17日上午， 2015第二届生物制药分离纯化技术学术论坛在苏州福朋喜来登酒店隆重开幕，此次论坛由苏州纳微分离纯化技术有限公司(简称“纳微”)和中国生物工程杂志联合主办，来自高校、科研院所、制备色谱分离纯化相关技术企业用户约400人参加了本次论坛。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/aafac2e4-a2c1-4af2-ba59-0771b4611c05.jpg" title=" 论坛现场.jpg" / /p p style=" text-align: center " 论坛现场 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/c4c786a6-64f3-45c9-8254-0720b10f5436.jpg" title=" 局长.jpg" / /p p style=" text-align: center " 苏州工业园区科技局局长张东驰出席了开幕式并致辞。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/1d19ff52-f48c-4702-bc5b-77204a3dd362.jpg" title=" 张洪祥.jpg" / /p p style=" text-align: center " 中国生物工程学会副理事长张宏翔致欢迎词 /p p 　　会议以大会报告和分论坛形式开展，议题涵盖胰岛素、多肽、天然产物、抗生素等中小分子制备色谱分离纯化技术和核酸、蛋白质、抗体、疫苗等大分子层析技术。会议特邀30位国内外在蛋白、多肽、抗生素及天然产物等分离纯化方面具有深厚研究功底和丰富实战应用经验的专家做精彩的专题报告，分论坛聚焦在当今前沿的生物制药分离纯化行业的新技术、新工艺、新设备和分离纯化过程放大的关键要素、应用技巧与实际操作经验。中科院大连化物所张玉奎院士、中科院生态环境研究中心黄骏雄教授、西北大学耿信笃教授及Joachim Walter, Stefan Arnold和 Charles Lim 3位国外生物分离纯化专家等受邀参加本次论坛。张玉奎应邀出任纳微牵头筹备的生物制药分离纯化产业联盟名誉主席。 /p p 　　部分报告人： /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/bd9817c1-fa1f-419a-91c5-0389eb11eb1e.jpg" title=" 张玉奎.jpg" / /p p style=" text-align: center " 报告人：中科院大连化物所 张玉奎院士 /p p style=" text-align: center " 报告题目：《新型功能材料制备及其在蛋白质组分析中的应用》 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/22114eb2-b506-4fbc-8f40-97d9d6185619.jpg" title=" 将比网.jpg" / /p p style=" text-align: center " 报告人：纳微科技江必旺 博士 /p p style=" text-align: center " 报告题目：《新型高效色谱填料的研究及其在生物医药分离纯化的应用》 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/0f0363c6-9347-46c6-a47b-f6cfdc3877df.jpg" title=" 报告人.jpg" / /p p 　　借本次论坛召开之际，生物制药分离纯化产业联盟筹备会顺利举办，该联盟由纳微科技牵头。 br/ /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/f7a58855-d06e-4b30-8474-7f22c6e987cd.jpg" title=" 联盟会.jpg" / /p p style=" text-align: center " 纳微科技牵头的生物制药分离纯化产业联盟筹备会 /p p 　　据统计，90%以上的参会人员是来自国内各大生物医药企业和高校、科研机构从事研发和生产的专业人士。与会嘉宾和参会人员聚焦在生物制药下游分离纯化领域这一关键难点问题，现场交流热烈。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/d14891b9-dfbc-40fe-b8d9-e7d01a91b4e0.jpg" title=" 互动.jpg" / /p p style=" text-align: center " 活跃的现场气氛 /p p 　　本届论坛吸引多家企业参展，展品广受与会人士关注。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/5c7f92b7-7412-4263-8021-e252dc1b5cc8.jpg" title=" 茶歇.jpg" / /p p style=" text-align: center " 展商与用户交流现场 /p p 　　为欢迎广大与会人员，纳微科技举办了论坛欢迎晚宴，纳微科技董事长江必旺博士致欢迎词，晚宴上节目包含丰富的文艺表演和精彩的抽奖环节。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/57323880-7e92-4001-82e7-fd1603f8591a.jpg" title=" 晚会.jpg" / /p p style=" text-align: center " 文艺节目 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/fe3f27e7-7994-490e-9386-1cad34d13303.jpg" title=" 合影1.jpg" / /p p style=" text-align: center " 第二届生物制药分离纯化技术学术论坛合影留念 /p p 　　此外，为满足研发及产业工作中的实际需求，论坛同期举办的实验技能班,在拥有多年蛋白纯化培训和项目指导经验的中科院资深专家—姜韬老师和资深留美博士Sam Xie的亲自指导下，各位学员对从色谱模式(填料)的选择、结合-洗脱条件的试验及优化、分离效果的评价、层析柱再生等全过程进行了学习和探讨 最后对不同的蛋白质分离纯化方案和结果进行了比较，将所学的理论知识运用到实际操作之中。通过这次学习和实践，增强了学员的动手操作能力，提高了在研发和生产过程中解决实际问题的水平。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/e5a74e3f-ef4c-40a5-bb2b-0df01f505647.jpg" title=" 培训现场.jpg" / /p p style=" text-align: center " 实验技能培训班-理论与实践相结合的教学现场 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201511/noimg/e06c194a-68f0-4083-8019-b2a2e747854e.jpg" title=" 合影2.jpg" / /p p style=" text-align: center " 实验技能培训班合影 /p p br/ /p

p img width=" 984" height=" 423" title=" 1.jpg" style=" width: 664px height: 322px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/a827dd8c-0bc4-487f-818f-647a743c8b75.jpg" / /p p 　　主办单位：苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会 /p p 　　承办单位：苏州纳微科技股份有限公司 /p p 　　协办单位：荣捷生物工程(苏州)有限公司 /p p strong 　　【本届大会亮点】 /strong /p p 　　 strong 最新技术交流与实验培训班的创新结合 /strong /p p 　　真正惠及一线技术人员的研发、生产及质检的全过程，帮助解决实际问题 /p p 　　 strong 新增国际会议专场，三个专场会议涵盖更多技术内容 /strong /p p 　　涵盖：蛋白质、抗体、核酸、疫苗、血液制品、多肽、胰岛素、抗生素、天然产物、药物质量控制与杂质分析检测等丰富内容。 /p p 　　 strong 强大的国内外演讲嘉宾阵容 /strong /p p 　　拟邀请60位报告专家，800位制药界专业技术人员、行业人士及政府代表参会 /p p 　 strong 　【大会背景介绍】 /strong /p p 　　《“十三五”生物产业发展规划》(以下简称为：规划)中指出，生物医药迎来新一轮发展机遇，规划强调，十三五期间我国生物医药产业重点发展重大疾病化学药物、生物技术药物、新疫苗、新型细胞治疗制剂等多个创新药物品类。在 “十三五”期间，国家对医药创新的投入逐步增加，极大地促进国内制药企业对创新药物研发投入，并将加大药品研发过程中对于药品安全性、有效性的检验需求，带动国内医药市场的持续增长，受益于医药内生需求逐步释放，医药创新政策不断催化、一致性评价快速推进、随着医药创新写入国策、药审改革不断提速、鼓励药品药械创新政策频出，医药行业创新发展意味着研制和生产出质量更好、疗效更佳、成本更低的药品。新组建的国家市场监督管理总局正式挂牌，新时代的医药行业大发展的春天来了! /p p 　　由苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会主办的“制药分离纯化技术学术论坛”已成功举办四届，邀请来自国内外报告嘉宾近百位，累计吸引国内外从事分离纯化行业的专家和技术人员近2000位，对国内医药下游行业的发展起到了很好的推动作用，逐步成为国内最专业、规模最大和反响最热烈的行业学术专题论坛之一。 /p p 　　第五届制药分离纯化技术学术论坛计划于2018年9月10-11日在苏州独墅湖世尊会议中心召开。同时为响应广大国外同行的要求，本次论坛期间，同期举办BIOSEP International Conference 2018，邀请国际知名行业专家与大家分享国际经验。 /p p style=" text-align: center " img width=" 1039" height=" 209" title=" 1.jpg" style=" width: 644px height: 140px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/1ab24e75-a90b-45c9-86d6-aefd7f215082.jpg" / /p p 　　 strong 【论坛焦点】 /strong /p p 　　 国家最新法规、政策的解读 /p p 　　 国内外药物开发最新进展和趋势 /p p 　　 制药工业下游纯化工艺的难点和解决方案 /p p 　　 药物开发中的质量控制研究、杂质去除和分析检测 /p p 　　 国际分离纯化介质的发展状况及其如何满足产业发展的需求 /p p strong 　　【论坛主题会场】 /strong /p p 　　主题分会一：蛋白质、抗体、核酸的分离纯化专场 /p p 　　主题分会二：疫苗、血液制品的分离纯化专场 /p p 　　主题分会三：多肽、胰岛素分离纯化专场 /p p 　　主题分会四：抗生素、天然产物分离纯化专场 /p p 　　主题分会五：药物质量控制与杂质分析检测专场 /p p 　　另设： BIOSEP International Conference 2018 /p p 　　 strong 【论坛议程】 /strong /p p img width=" 902" height=" 322" title=" 1.jpg" style=" width: 629px height: 274px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/6bb35f57-72c3-40b3-8868-0d38f044b1cc.jpg" / /p p style=" text-align: right " 　　备注：日程安排以现场为准。 /p p 　 strong 　【论坛演讲嘉宾】 /strong /p p style=" text-align: center " img title=" 1.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/c680badd-3dd2-422e-b115-e68b96598240.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 2.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/dc360c1d-268d-47c0-89df-66f1534b3eda.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 3.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/377afc84-79e7-4f1e-94ec-0fc623411c60.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 4.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/b26090bf-7b43-46d3-982a-7d4d766fbb51.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 5.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/155b1084-90f6-4ba7-ab03-b9f2681dd448.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 6.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/4fe5b188-3182-45c4-a17b-aca98cbb7129.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 7.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/4152bd84-a61a-4b80-b2eb-29d00209ded6.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 8.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/c700bd57-6fb6-4556-aa22-85e8ac9688ba.jpg" / /p p style=" text-align: right " 　　*仅列部分嘉宾，详情请参考会议当天的会议手册日程表。 /p p strong 　　【往届部分演讲嘉宾】 /strong /p p style=" text-align: center " br/ /p p style=" text-align: center " img title=" 11.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/af89c839-924a-4db8-a8c5-3b9f34628db4.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 12.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/174afda1-ca56-4dc7-bff6-a81a1b708494.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 13.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/bdae45e4-c105-46a7-80ee-733daa6487fa.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 14.jpg" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/b1c6533d-9286-49ab-99ad-0c1d4279d344.jpg" / /p p 　 strong 　【赞助方案】 /strong /p p 　　此次大会将成为宣传企业形象、展示实力、扩大知名度及开展信息发布的良好机会，同时主办方将邀请从事色谱、分析、生物制药、分离纯化领域的媒体、网站开展宣传和报道。此次会议为各单位提供了一系列不同的赞助方式，以满足不同单位的需求。剩余展位数量有限，如需了解详情，请随时与我们联系。 /p p style=" text-align: center " img width=" 1005" height=" 287" title=" 1.jpg" style=" width: 615px height: 231px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/fadef40d-0a6b-4090-aa66-358fd9675cb7.jpg" / /p p img width=" 1053" height=" 329" title=" 111.jpg" style=" width: 639px height: 231px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/65c8be11-681e-48f0-95cb-5d92fa357c58.jpg" / /p p strong 　　【实验班背景介绍】 /strong /p p 　　生物药结构的多样性和对高纯度要求，分离纯化环节一直是重中之重。采用液相色谱或层析技术从复杂组分中分离和纯化目标生物分子并实现经济高效的产出是一直是难点，分离成本一直高居不下 在药物质量控制与提高方面，高效液相色谱法以其高效、快速及高分辨率的优势发挥关键作用。当前我国生物药层析制备与质量控制技术，无论从研发、工艺优化(DOE)、工艺放大到过程控制水平等方面，均与欧美发达国家存在较大差距，影响了新药创制进展和国际竞争实力，因此急需培养一批真正高水准的分离纯化专业人才。 /p p 　　基于纳微科技在分离纯化领域的师资优势和领先技术突破，无论在师资力量、理论深度和国际视野，或是在创新思维和操作实践方面均处于国内领先水平，能切实帮助学员更好、更快地完成分离纯化科研和生产任务。我们在往期实验培训班教学实践基础上，举办“第七期高压制备色谱与高效亲和捕获抗体实验/挑战性抗体纯化实验技能培训班”。 /p p strong 　　【培训地点及议程】 /strong /p p 　　9月8日 -9日 【名额有限，需提前报名预定】 /p table width=" 1028" style=" width: 648px " border=" 1" cellspacing=" 0" cellpadding=" 0" tbody tr class=" firstRow" style=" height: 25px " td width=" 1028" height=" 25" style=" padding: 0px 7px border: 1px solid rgb(56, 86, 35) border-image: none background-color: transparent " colspan=" 4" p style=" text-align: left -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: " 地点：苏州工业园区· 百川街 /span span style=" font-family: " 2 /span span style=" font-family: " 号 /span /p /td /tr tr style=" height: 25px " td width=" 206" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" color: rgb(83, 129, 53) font-family: " 时间 /span /strong /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" color: rgb(83, 129, 53) font-family: " 日程安排 /span /strong /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" color: rgb(83, 129, 53) font-family: " 时间 /span /strong /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" color: rgb(83, 129, 53) font-family: " 日程安排 /span /strong /p /td /tr tr style=" height: 25px " td width=" 206" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: " 9 /span span style=" font-family: " 月 /span span style=" font-family: " 8 /span span style=" font-family: " 日上午 /span span style=" font-family: " 08:30-12:00 /span /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: " 签到及理论课程培训 /span /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: " 9 /span span style=" font-family: " 月 /span span style=" font-family: " 8 /span span style=" font-family: " 日下午 /span span style=" font-family: " 13:30-9 /span span style=" font-family: " 月 /span span style=" font-family: " 9 /span span style=" font-family: " 日 /span span style=" font-family: " 16:00 /span /p /td td width=" 274" height=" 25" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) rgb(56, 86, 35) rgb(56, 86, 35) rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: " 实验技能培训 /span /p /td /tr /tbody /table p 　　 strong 　【授课形式】 /strong /p p 　　授课专家将理论学习和实际操作相结合、讲师演示和上机操作相结合，为学员提供更多亲自动手的机会而提高工艺设计和操作能力，提高实际解决分离纯化问题的水平 专家现场答疑解惑，帮您解决从实验室到中试放大生产过程中遇到的棘手问题，以及药物分析检测过程中的难题，重点培养学员的实验技能和开发思路。 /p p 　　【培训内容及导师介绍】 /p p style=" text-align: center " img width=" 740" height=" 462" title=" 1.jpg" style=" width: 624px height: 455px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/15f4adfd-7115-4e39-9c66-afbf3e0c77cc.jpg" / /p p 　 strong 　〖特别内容：旭化成产品和设备〗 /strong /p p 　　旭化成集团是一家以石油化工为基础的世界500强企业，旭化成集团旗下的工艺膜事业部专注于生产MF/UF精密微管膜产品，并参与多行业的设备开发、设计和制造，并开发了众多的行业应用与案例。通过建立中国分支机构，引进国外先进的技术经验，为中国的环保和高科技领域提供了多种先进的解决方案，并做出了卓越的贡献。 /p p 　　本次主要从旭化成产品和设备方面进行介绍，大体分为以下几部分： /p p style=" text-align: center " img width=" 741" height=" 269" title=" 1.jpg" style=" width: 640px height: 231px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/66df76a8-82fc-411f-9dd1-91b7aa655b45.jpg" / /p p 　　 strong 【培训对象】 /strong /p p 　　制药公司从事药物分离纯化或质检的一线技术人员、科研院所从事生物分子或中小分子分离纯化技术应用的工程技术人员、科研工作者、高校教师及博士研究生。 /p p strong 　　【实验条件】 /strong /p p 　　纳微科技为学员提供最先进分离纯化及分析仪器，包括Waters HPLC 2台，Waters UPLC 1台，DAC 制备色谱系统2台，AKTA Avant、AKTA Pure、AKTA Prime Plus、AKTA Purifier 100及AKTA Purifier 10共十余台，岛津LC十余台，Agilent HPLC 6台，Agilent GC 1台，赛默飞HPLC 6台，赛谱SCG蛋白纯化系统5台等，还配套提供各种层析填料及介质，涵盖硅胶正相、反相、HILIC、手性填料，聚合物反相、离子交换, 亲和(Protein A、金属螯合、苯硼酸)介质以及各种纳微科技的色谱层析柱供学员学习使用 /p p style=" text-align: center " img width=" 892" height=" 174" title=" 1.jpg" style=" width: 640px height: 138px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/0562f963-4242-413a-bb39-57ed2e8d01ec.jpg" / /p p strong 　　【收费标准】 /strong /p p 　　第五届制药分离纯化技术学术论坛 (9月10-11日) · 会务费 /p p 　　包含：讲课费、会议资料、茶歇、午餐、欢迎晚宴等(交通、住宿自理) /p p 　　单人报名：1500元/人 团队报名：1300元/人，2人及以上享受此优惠 /p p 　　第七期高压制备色谱与高效亲和捕获抗体实验/挑战性抗体纯化实验班(9月8-9日)? 培训费 /p p 　　包含：专家授课费、仪器费、培训资料、茶歇、午餐、晚宴等(交通、住宿自理) /p p 　　单人报名：1900元/人 团队报名：1500元/人，2人及以上享受此优惠 /p p 　　凡同时报名参加大会和实验班，可享受优惠价：3200元/人(团队优惠价：2700元/人，2人及以上可享受此优惠) /p p style=" text-align: center " img title=" 2.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/noimg/29263ab0-6f64-44d6-9ed7-dec06a4d3e5b.jpg" / /p p & nbsp /p

一、微孔过滤法微孔过滤法包括三种类型：深层过滤(depth)、筛网过滤(screen)及表面过滤(surface)。深层滤膜是以编织纤维或压缩材料制成的基质，利用随机性吸附或是捕捉方式来滞留颗粒。筛网滤膜基本上是具有一致性的结构，就像筛子一般，将大于孔径的颗粒，都滞留在表面上(这种滤膜的孔径大小是非常精确的)，而表面过滤则是多层结构，当溶液通过滤膜时，较滤膜内部孔隙大的颗粒将被滞留下来，并主要堆积在滤膜表面上。由于上述三种滤膜的功能不同，因此对滤膜之间的分辨非常重要。由于深层过滤是一种较为经济的方式，可去除98%以上的悬浮固体，同时保护下游的纯化单元不会败坏或堵塞，因此通常被作为预过滤处理。表面过滤可去除99.99%以上的悬浮固体，所以也可作为预过滤处理或澄清用。微孔薄膜(筛网滤膜)一般被置于纯化系统中的最终使用点，以去除最终残留的微量树脂碎片、碳屑、胶质颗粒和微生物。例如：0.22μm微孔滤膜，其可滤过所有的细菌，通常用于将静脉注射用的液体、血清及抗生素进行除菌用。二、活性碳吸附法有机物可能是阳离子、阴离子或非离子性的物质，离子交换树脂可去除原水中一些可溶性的有机酸和有机碱(阴离子和阳离子)，但有些非离子性的有机物却会被树脂包覆，这过程称为树脂的“污染阻塞”现象，不但会减少树脂的寿命，而且降低其交换能力。为保护离子交换树脂，可将活性碳过滤器安装在离子交换树脂之前，以去除非离子性的有机物。活性碳的吸附过程是利用活性碳过滤器的孔隙大小及有机物通过孔隙时的渗透率来达到的。吸附率和有机物的分子量及其分子大小有关，某些颗粒状的活性碳较能有效的去除氯胺。活性碳也能去除水中的自由氯，以保护纯水系统内其他对氧化剂敏感的纯化单元。活性碳通常与其他的处理方法组合应用。在设计纯水系统时，活性碳与其他相关纯化单位的相关配置，是一项极为重要的项目。三、反渗透法反渗透(RO)法是可达到90%~99%杂质去除率中最经济的方法。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密，RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密，RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。当二种不同浓度的溶液，由一个半透膜隔开时，渗透现象会自然发生。渗透压将水压过半透膜，水将浓度较高的溶液稀释，后造成浓度平衡。在水纯化系统中，施加压力于高浓度的溶液中，以抗衡渗透压。如此迫使得纯水由高浓度的液体通过RO膜，并可加以收集。由于RO膜致密度极高，因此，产出的水流很慢，需要经过相当的时间，贮水箱内才会有足够的水量。RO膜可执行离子排除，使得只有水可通过RO膜，其余所有的离子及溶解的分子都被截留，并加以排除(包括盐类和糖)。RO膜以电荷反应将离子排除，带电荷愈大，排除性愈高，所以RO膜几乎可排除所有的(99%)强离子性的高价离子，但是，对于弱离子性的单价离子(如钠离子)的效果只有95%。不同的进水需要不同种类的RO膜，RO膜包括由乙酸纤维酯制成，或是以聚硫胺与聚砜基质的混合薄层聚合物。如果以原水水质及产水水质为基准，经过适当设计后，RO是将自来水纯化的最经济有效方法。RO同时也是试剂级纯水系统很好的前处理方法。四、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前，先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂，以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水质。离子交换树脂利用氢离子交换阳离子，而以氢氧根离子交换阴离子；以包含磺酸根的苯乙烯和二乙烯苯制成的阳离子交换树脂会以氢离子交换碰到的各种阳离子(例如Na+、Ca2+、Al3+)。同样的，以包含季铵盐的苯乙烯制成的阴离子交换树脂会以氢氧根离子交换碰到的各种阴离子(如Cl-)。从阳离子交换树脂释出的氢离子与从阴离子交换树脂释出的氢氧根离子相结合后生成纯水。阴阳离子交换树脂可被分别包装在不同的离子交换床中，分成所谓的阴离子交换床和阳离子交换床。也可以将阳离子交换树脂与阴离子交换树脂混在一起，置于同一个离子交换床中。不论是那一种形式，当树脂与水中带电荷的杂质交换完树脂上的氢离子及(或)氢氧根离子，就必须进行“再生”。再生的程序恰与纯化的程序相反，利用氢离子及氢氧根离子进行再生，交换附着在离子交换树脂上的杂质。若将离子交换法与其他纯化水质方法(例如反渗透法、过滤法和活性碳吸附法)组合应用时，则离子交换法在整个纯化系统中，将扮演非常重要的一个部分。离子交换法能有效的去除离子，却无法有效的去除大部分的有机物或微生物。而微生物可附着在树脂上，并以树脂作为培养基，使得微生物可快速生长并产生热源。因此，需配合其他的纯化方法设计使用。五、EDI纯水技术电渗析(EDI)是一项结合了离子交换树脂和离子选择性通透膜，并结合直流电去除水中离子化杂质的技术。该项技术的发展克服了离子交换树脂的局限性，特别是离子交换柱耗竭时离子杂质的释放及重填或再生离子交换柱的工作。水通过一个或多个在阳离子或阴离子选择膜之间填满离子交换树脂的管腔，在电场的作用下，离子在离子交换树脂间向管腔的两侧移动并进入另外的管腔，这个过程中也会电解产生维持树脂处于再生状态所需的H+和OH- 。流向两侧独立管腔的离子被水冲刷掉。六 、超滤法超滤（UF）是一个过滤术语，指能去除如蛋白质大小的颗粒的过滤器。膜孔径通常在1-50nm之间，中空纤维结构的超滤膜通常有较高的滤过速率。超滤膜根据其降低相关污染物浓度的效率来分级微孔薄膜是依其孔径大小来去除颗粒，而超滤(UF)薄膜则是一个分子筛，它以尺寸为基准，让溶液通过极细微的滤膜，以达到分离溶液中不同大小分子的目的。超滤膜是一种强韧、薄、具有选择性的通透膜，可截留大部分某种特定大小以上的分子，包括：胶质、微生物和热源。较小的分子，例如：水和离子，都可通过滤膜。所以，超滤法可将截留液中的大分子加以浓缩，但是，仍有些大分子会渗漏至滤过液中。超滤膜有数种不同的范围，在所有的实例中，超滤膜会留在大部分大于其分子筛所定义分子量的分子。七 、紫外线照射法紫外线照射法已广泛的使用在水处理上，低压水银灯所放射出来的254nm的紫外线是一种有效的杀菌方法，因为细菌中的DNA及蛋白质会吸收紫外线而导致死亡。近来在UV灯制造技术方面的进步，已可制造同时产生185nm和254nm波长的紫外灯管，这种光波长组合可利用光氧化有机化合物，接着这种特殊灯泡，将纯水中的总有机碳浓度降低至5ppb以下。八、蒸馏法蒸馏法是通过改变水的形态，从液态到气态再回到液态，将水和污染物分离。蒸馏法的每一个转换过程都为纯水与污染物的分离提供了机会。理论上，除蒸汽压力与水接近的物质和共沸化合物，蒸馏法能去除所有种类的水中污染物。像RO一样，蒸馏法生产纯水的速度较慢，所以蒸馏水必须先储存起来以备日后使用。蒸馏水器非常耗电，每生产1升纯水通常耗费1KW电力。依据蒸馏水器的不同设计，蒸馏水的电阻率大约能达到1 MΩ-cm，因为空气中的CO2会溶入蒸馏水中迅速降低其电导率。新鲜蒸馏水是无菌的，但如果保存不当，一段时间后就不再是无菌的了。九、凯得菲(KDF)凯得菲(KDF)的作用及功效：凯得菲(KDF)是高纯度的铜/锌合金颗粒，它通过微电化学氧化-还原反应(Redox)进行水处理工作，在与水接触时，合金中的两种金属在亚微观尺度上构成无数小的原电池系统，这种材料在水中具有强大的反应能力和极快的反应速度，可以清除水中高达99%的氯和水中溶解的铅、汞、镍、铬等金属离子和化合物。对抑制细菌、真菌、污垢、水藻的滋生效果卓著。被用于预处理、主处理与废水处理设备。凯得菲(KDF)完善或取代现有技术，可大辐度延长了系统寿命，减少重金属、微生物、污垢，降低了总费用，减化系统维护。(1) 去除强氧化剂(余氯)凯得菲(KDF)具有强大的还原能力，能去除水中的各种强氧化剂，对余氯特别有效。(2)去除重金属凯得菲(KDF)处理介质可以去除水中的多种重金属离子，如铅、汞、铜、镍、镉、砷、锑、铝和其他许多可溶性重金属离子，它们的去除是通过置换反应和物理和化学吸附反应来完成的。凯得菲(KDF)去除重金属离子的机理如下：金属离子吸附于凯得菲(KDF)处理介质的表面并与凯得菲(KDF)中的锌发生置换反应，生成的金属或吸附在凯得菲(KDF)表面，或进入凯得菲(KDF)晶格中，从而使有毒重金属污染物结合在凯得菲(KDF)上。例如，水中溶解的铅离子还原成不溶性的铅原子，并吸附于凯得菲(KDF)介质的表面,汞离子与凯得菲(KDF)也发生类似的反应，X射线衍射研究发现汞的去除是形成了铜－汞合金。(3)去除硫化氢在应用膜法进行水处理时，如果选用地下水作水源，水中可能存在硫化氢，硫化氢如被氧化成硫磺就会污染滤膜表面，凯得菲(KDF)过滤介质有去除硫化氢的功能，生成的硫化铜不溶于水，可在凯得菲(KDF)介质反冲洗时去除(4)减少悬浮固体凯得菲(KDF)处理介质的颗粒平均尺寸大约为60目，最小的颗粒约110目，也能起到物理过滤去除悬浮物质的作用，通常凯得菲(KDF)过滤介质能够有效地去除直径小于至50μm的颗粒。(5)减少矿物质结垢(6)抑制微生物繁殖凯得菲(KDF)处理介质不是通过一种机理、而是几种机理控制微生物的生长繁殖，通过每一种的单独作用或协同作用来达到抑制微生物的作用。主要机理包括：氧化还原电位的变化，氢氧根离子和过氧化氢的形成，介质中锌的溶出等。在一般情况下，凯得菲(KDF)处理介质作为反渗透膜的预处理手段时，能够抑制细菌、藻类等微生物的繁殖，从而防止了微生物对膜的破坏。【本文由和泰仪器发布，未经允许，禁止转载、抄袭！部分内容整理摘编自网络，如有侵权,请联系改正！】

UNICORNTM 7.0，层析实验更简单、灵活、高效 很高兴向大家宣布我们今天将发布最新一代的UNICORN 7.0控制软件。 深受科研及工业用户信任的AKTA层析系统已经陪伴大家超过30年的时间，UNICORN软件作为AKTA系统控制软件经过了20多年的发展历程而日臻完美。AKTA+UNICORN凭借卓越的性能、稳定的表现和便捷的操作成为“生物活性物质分离纯化的金标准”。 我国政府在科学和技术发展“十二五”规划中曾明确提出，要着力突破制约经济社会发展的重大科学问题，集中优势力量，推进以蛋白质研究为代表的一系列重大科学研究计划。为配合“十二五”规划工作的落实，GE医疗充分发挥在生命科学领域的技术优势，以科研工作者的实际需求为出发点，通过持续的创新，改进UNICORN软件的功能，满足蛋白质纯化工作中不断涌现的新需求，提高蛋白质纯化效率。此次发布的最新UNICORN 7.0控制软件在上一版本基础上大幅改进了结果评价（Evaluation）模块的用户体验，使得对结果的处理更加快捷、简单。其自动化的功能将科研人员从繁冗的实验操作及结果处理中解放出来，从而有更多的精力进行实验的设计和思考。 UNICORN 7控制软件具有实验规划、控制运行和结果分析的功能。它不仅可以控制AKTA层析系统，还支持Wave生物反应器和UNIFLUX过滤系统，并且适用于从小量的科研实验到大量生产的所有规模设备。UNICORN 7软件具有四个模块：Method Editor：提供简单的界面进行方法的创建和修改System Control：实时控制和显示实验运行状态Evaluation：数据分析和生成报告Administration：设置用户权限、查看日志、管理内嵌SQL数据库 UNICORN 7的特点在于：简单：采用了交互式过程示意图和简化的结果评价窗口，使得UNICORN 7.0具有直观的用户界面，易于学习和使用。灵活：UNICORN 7.0可以通过添加更多的功能或简单的修改方法进行调整以满足您的独特需求。高效：UNICORN 7.0通过远程控制可以简单的进行方法和结果分享，帮助您节省宝贵的时间和资源。 在此次升级中，UNICORN 7.0软件Evaluation模块的用户体验得到显著提高。新的模块具有Evaluation Classic和Evaluation两种选择： Evaluation模块针对最常用的工作流程如：快速结果评价、结果比较以及峰组分操作提供了简化的用户界面。可自动进行评价预览，一键式峰积分和曲线移动，并计算峰中蛋白的总量和浓度。 为了获得更丰富的数据处理功能，您还可以选择Evaluation Classic模块。在Evaluation Classic中可以进行自动、半自动和手动的数据处理。Evaluation Classic中可以对曲线进行数学操作，创建、执行自动评价程序等。Multi-result peak comparison功能可以对比不同运行结果或Scouting的数据，简化重现性研究的操作。在Evaluation Classic的基础上还可以扩展DoE、Column Logbook等丰富工具，提高系统的综合性能。 以技术为先导，融入创新灵魂，持续研发高品质、高性价比的产品，使GE医疗在生物活性物质的分离与纯化领域始终保持领先。作为层析系统开发的引领者，从FPLC到AKTATM avant 和AKTATM pure ，从UNICORN 1到UNICORN 7，GE医疗不断改进蛋白质分离与纯化工艺，为中国带来一系列国际一流的产品，推动中国生命科学研究事业的发展。今日，UNICORN 7.0正式进入中国市场，它的应用必将为中国的生物大分子的分离纯化工作注入新的活力，帮助中国的结构生物学，农业生物学和系统生物学基础科研机构和医药企业应对更复杂的挑战。

文/Tosoh Bioscience应用专家Jonas Wege 单克隆抗体是目前生物制药行业中成熟的靶向分子，适用于治疗各种疾病，且生产便捷、易于放大。然而，生物制药的创新者并没有安于现状，而是不断推动当前疗法背后的科学进步。抗体片段是目前最具前景的一种形式，不仅能够改善靶向点位，还能够提高亲和结合力。另外，工程技术的不断进步也推动了抗体片段重组生产变得更加经济。抗体片段是相对较新的技术，正确的分析和纯化对于为患者提供安全、有效的治疗至关重要。我们的生物制药合作伙伴不仅信赖Tosoh Bioscience高质量的色谱解决方案；他们还相信我们的专家能够帮助他们开发最具性价比效益的工艺流程。 减轻负担生物制药厂家一直致力于在抗体捕获阶段生产更高浓度的产品，继而保证后续所有操作（包括精制）具有更高的成本效益和时间效率。然而这是一个史无前例的挑战，因为片段无法与Protein A（依赖于Fc结合）等传统层析填料结合。目前来说，Protein L是应对这类纯化挑战的第一选择。Protein L填料基质表面的蛋白质通过Kappa轻链（存在于许多抗体片段中）与抗体结合来清除杂质。尽管Protein L非常适合纯化抗体片段，但与Protein A相比，Protein L仍然属于一种新型的层析介质。开发人员报告称，传统的Protien L填料表现出的动态吸附载量更低。简而言之，最终只有少量的靶向分子能够吸附到层析柱中，进而限制了层析柱的性能，导致抗体捕获步骤更加昂贵、更加费时。制造商面临的另一个潜在难题是填料在重复清洗过程中的化学稳定性较低。层析柱运行后，通常需要使用碱性溶液进行清洗。然而，传统Protein L填料化学稳定性差，往往会导致性能部分损失。为应对该问题，就需要在清洗少量次数后更换填料，导致成本升高、工作量增加。 为了应对挑战，东曹开发了一种行业领先的耐碱性Protein L层析填料——Toyopearl AF-rProtein L-650F。其设计首先考虑到了高动态吸附载量，意味着层析柱中的填料能吸附更多蛋白，纯化相同数量靶向分子需要的运行次数更少。事实上，我们的Protein L亲和填料对Fab的动态结合载量在任何驻留时间内都至少是其他市售填料的两倍以上，这显然更有助于提高生产效率和生产力。我们不仅研究了填料在抗体片段捕获步骤中的性能，还探讨了填料在整个纯化过程中的可重复使用性。由于提高了填料的耐碱性，因此可以在同一色层析柱上运行多次纯化循环。最后，我们还针对不同的清洗方案进行了广泛的试验，加上我们在填料方面的专业知识，极大地提高了产品的纯度和填料的寿命。因此，我们的生物制药合作伙伴所需的填料更少，能够将更多资源用于开发最有效的工艺过程，并且借助我们的专业知识尽快完成工艺开发。 成功背后的科学虽然我们的Protein L填料促进了抗体片段捕获工艺的革新，同时我们也认识到了持续改进的迫切性，对东曹来说，这意味着我们将持续专注于高质量的研发。事实上，不论是我们内部的独立研究，还是与外部伙伴的合作，我们一直奋战于多个更加广泛的研究项目，旨在优化整个工艺流程的生产效率。比如，目前我们正在评估如何将Protein L介导的捕获步骤转移到连续流色谱中。我们期望这种具有成效的、高效的选择能够为我们的客户带来无限可能。 最重要的是，东曹始终致力于开发更加高效的抗体片段纯化解决方案。凭借悠久的历史经验和丰富的技术专长，我相信我们是寻求节省成本和提高生产率的药物研发公司的最佳合作伙伴。解决方案 Wacker Biotech（瓦克生物技术）是WACKER Group下属的负责生物制药业务的公司。该公司在使用大肠杆菌作为表达系统生产抗体片段方面有着多年的经验。但这一过程并非没有挑战。这里，Wacker Biotech的业务发展经理Ilona Koebsch和下游工艺专家Thomas Walther就该公司面临的一些生产挑战，以及东曹是如何协助其开发解决方案方面进行了阐述。 最有趣的抗体片段亚型是什么？ Koebsch：抗体片段的尺寸、结构和功能各不相同。但是，从治疗角度来看，Fab和所有包含抗原结合位点的变体算得上是最有趣的抗体片段技术的代表。值得注意的是，片段尺寸足够小，才能穿透组织，这对于许多治疗和免疫组织化学来说是必不可少的。另外，由于这些片段相对较小，使用原核表达系统（如大肠杆菌）进行生产也更加容易，更加经济。生产Fab面临的主要挑战是什么？ Walther：根据结构的不同，Fab既可以是可溶性的，也可以组装成包涵体（聚集的结合蛋白）。生产厂家还必须在发酵及下游工艺中保持其折叠和结构，确保Fab具有生物活性。对于上游工艺，主要任务始终是找到表达系统（宿主和质粒）和培养参数的最佳组合，以实现高效、稳健的生产工艺。但是，在我看来，最关键的挑战是找到合适的模型来模拟特定结果，或是在实验室规模下模拟大规模生产过程。在下游工艺中，挑战主要包括样品结构的复杂性、开发时间的长短以及亲和填料对大多数常见清洗方案的低耐受性。WACKER是如何应对这些挑战的？ Koebsch：WACKER开发了两种独特的基于大肠杆菌的表达系统，能够高效生产不同的抗体片段。ESETEC® 是一种独特的表达系统，可控制发酵液中正确折叠的重组蛋白产品的分泌。简而言之，这有助于简化初级回收和纯化过程，从而降低产品成本。我们还针对疏水性抗体片段开发了FOLDTEC® 技术。该技术包括高效的大肠杆菌菌株、不含抗生素与噬菌体的质粒保持系统，以及全面的复性技术。我们没有相关的专利技术来解决下游工艺中存在的难题。高通量、良好的分辨率、低背压、易于操作（就柱填料而言）、洗脱时间短、使用寿命长、非特异性吸附低，这一切对于层析填料来说都是必不可少的！东曹是如何协助WACKER应对这些挑战的？ Walther：我们在一个项目中使用了我们以前的首选填料，但由于吸附载量太低而失败了。此时，我们在WACKER其他分公司同事的推荐下，使用了东曹的AF-rProtein L-650亲和填料。我们将东曹的填料与其他三种声称可以特异性结合Kappa轻链的填料进行了比较。我们发现，AF-rProtein L-650填料的结合能力明显高于竞品（约3倍），而且目标蛋白的回收率也更高。同时，蛋白杂质的含量也是测试填料中最低的。最后，AF-rProtein L-650的流速也明显优于其他测试填料，这使我们能够用更小的柱体积来装填填料，为我们的客户带来了真正的成本优势。我们还得到了东曹填料和技术销售专家的大力支持，在为填料产品选择合适型号的层析柱方面获得了建设性的建议。很明显，东曹Protein L对于其他同类填料是一个强大的竞争对手，它应该会让其他供应商重新考虑他们当前的产品阵容。文章来源：The Medicine Maker：https://themedicinemaker.com/fileadmin/issues/1021_TMM_Issue.pdf

尊敬的用户： 您好！ 东曹（上海）生物科技有限公司（TOSOH）将于2016年12月15日在广州、12月16日在苏州分别举行两场“色谱分离分析及中低压层析纯化技术研讨会”。会议特邀国外专家以及东曹公司资深技术人员前来，围绕生物医药在研发或生产中所涉及的HPLC分析分离，以及中低压层析纯化技术展开介绍及讨论。 我们诚挚地邀请您的参与并致以衷心的感谢！会议提供自助午餐及茶歇，会后设置精彩抽奖环节，期待您的参与！会议日程: 时间 内 容 演讲嘉宾09:00-09:10报道、注册09:10-10:10Physical Biochemistry of Protein Interactions for Therapeutics /药物研发中蛋白质相互作用的物理生物学机理（英语演讲）津本 浩平教授东京大学10:10-10:20茶歇10:20-10:50Introduction of new Protein L-based chromatography resin for affinity purification of antibodies and antibody fragments /用于抗体及抗体片段亲和纯化的新款Protein L层析介质的介绍（英语演讲）桥本 佳己 先生TOSOH JAPAN 10:50-11:30TSKgel 色谱柱在生物制药中的最新应用报告史俊霞 应用工程师东曹（上海）生物科技11:30-12:00Toyopearl层析填料在生物制药中的最新应用报告冯文昌 产品经理东曹（上海）生物科技12:00-12:15答疑&抽奖活动主题报告嘉宾介绍：津本浩平（Kouhei Tsumoto）教授 东京大学 津本浩平教授，于1991年毕业于东京大学生物化学系，并在此继续获得其博士学位。2002年，他成为日本东北大学工程研究生院生物分子工程系的助教。在1995年至2005年期间，他主要从事抗体工程项目的研究工作。2005年，他被邀请至东京大学前沿科学研究生院医学基因组学系，担任助教一职，并于2010年晋升为东京大学医学科学研究所医学基因组学实验室教授。 津本教授的研究领域包括解剖与生物分子的相互作用的工程、从相互作用的热力学观点进行药物筛选和优化、以及操纵生物大分子的液相系统的开发等。在2002年，他获得过日本生物化学协会颁发的优秀青年学者奖，2012年又获得了日本促进科学协会奖（JSPS）。广州研讨会：时 间：2016年12月15日（周四）9：00 – 13：00地 点：广州市环市东路367号白云宾馆29楼彩云厅苏州研讨会：时 间：2016年12月16日（周五）9：00 – 13：00地 点：苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A1楼环形报告厅活动联系:东曹(上海)生物科技有限公司联系人：徐绍纲 先生电 话：021-34610856传 真：021-34610858E-mail：shaogang.xu@tosoh.com.cn

由中国生物工程杂志社(中国生物工程学会会刊)主办的第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班定于2012年9月15-16日在上海举行。本期研讨班课程综合了国内外最新的蛋白质分离纯化技术与方法，特别是广泛吸纳了历届参会代表的大量问题解答与反馈意见以及研发与产业中的实际应用需求，经权威专家的反复提炼而成。研讨班内容涵盖蛋白质样品制备、纯化策略、过程优化，相关的产品规定、政策解读以及技术经济分析等内容，并注意突出重点和难点，如基因工程上下游的整体策略、纯化中的具体难点，层析介质的选择等多方面，以及层析柱蛋白质失活等具体问题。 　　本期研讨班由中国科学院从事制备与纯化技术的一线专家授课，注重引导学员讨论实际案例，突出互动性以提高学习效果，从而帮助参会人员在短时间里高效率地掌握蛋白质分离纯化工具，获得规范和先进的蛋白质纯化与工艺开发知识和方法，提高蛋白质分离纯化实践中解决具体问题的能力。 　　本期研讨班课程涵盖了从样品制备到纯化策略和过程优化的全过程，主要内容包括： 　　蛋白质样品的获得层析预处理原则与技术：离心、过滤、超滤、双水相抽提蛋白质层析，包括： 　　(1)层析介质选择：层析介质特性对层析过程的影响——材质、孔径、官能团 　　(2)层析技术：分子排阻、离子交换、疏水层析、金属螯合、亲和层析等 　　(3)层析步骤整合方法：选择性、分辨率、动态载量、主要杂质的控制和去除 　　(4)蛋白质纯化平台：适应于分子生物学实验室蛋白质纯化的方法和实例 　　单克隆抗体纯化，包括： 　　(1)单克隆抗体的生化性质 　　(2)单克隆抗体纯化的工具 　　(3)单克隆抗体纯化的策略和方案 　　用于疫苗和基因治疗的病毒颗粒纯化策略和方法 　　(1)双水相技术 　　(2)整体柱分离技术：病毒颗粒的离子交换，疏水，IMAC及亲和层析纯化 　　蛋白质纯化的溶液体系 　　(1)蛋白质纯化的缓冲溶液组成和功能 　　(2)各种层析模式的常用缓冲溶液的设计和使用 　　蛋白质层析技术经济分析 　　研讨班还安排高效重组蛋白表达策略与经验介绍等专题内容。 　　会议时间、地点：2012年9月15-16日，中国科学院上海学术活动中心(好望角大饭店)，地址：上海市肇嘉浜路500号。报到时间：2012年9月14日，报到地点：好望角大饭店一层。 　　参会办法：参会代表请于9月7日前填写会议回执后Email/邮寄/传真至会议主办单位中国生物工程杂志社，会议费每人1600元，在读研究生每人1400元(凭有效证件)，食宿统一安排，费用自理。 　　联系方式： 　　通信地址：北京市海淀区中关村北四环西路33号中国生物工程杂志社(100190) 　　联 系 人：任红梅13641036700 　　电 话：(010)82624544，82626611-6511 传真：(010)82624544 　　电子邮件：renhm@mail.las.ac.cn 　　中国生物工程杂志社 　　2012年8月 　　第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班报名回执表 　　(参会代表请于2012年9月5日前Emial/传真/邮寄至中国生物工程杂志社) 单位名称 通信地址 邮编 姓名 性别 职称 电话 传真 E-mail 是否住会 　　第14期蛋白质分离纯化技术专题研讨班住宿预订表 　　(住会者请务必2012年9月5日前回传本表，否则无法安排住宿) 单位名称 联系人 电话 手机 电子邮件 代表姓名 性别 是否需要单人间 入住日期 离店日期 　　报到及住宿酒店 　　好望角大饭店，地址：上海市肇嘉浜路500号，酒店电话021-64716060。住宿标准：330元/天标准间。由于好望角大饭店属于政府采购指定酒店，对于事业单位的参会代表，可以凭工作证享受政府采购价格298元/标准间(含早餐)。

p strong 仪器信息网讯 /strong 2017年9月21日，由苏州工业园区医药分离纯化产业联盟协会主办的 “第四届制药分离纯化技术与学术大会”在苏州独墅湖世尊会议中心隆重召开，本届大会以“汇智而行· 创新启动未来”为主题，来自国家食品药品监督管理总局、国家药典委员会专家、苏州工业园区政府领导、全国各地知名制药企业高管、下游研发与生产主管人员以及高校科研院所的科学家、GMP及制药服务机构等500人参加了此次盛会。苏州纳微科技有限公司作为承办单位，带着一颗“圆梦中国色谱芯“的梦想，给我国制药届奉献了一场政策法规、标准更新以和下游分离纯化新技术的饕餮盛宴! /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/79c21ee4-075c-4299-87c1-15bf20f2b929.jpg" style=" " title=" 1_副本.png" / /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/7658b05b-1fc9-4c21-8241-664d0b140e74.jpg" style=" " title=" 2_副本.png" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 9月21日第四届分离纯化技术与学术大会现场 /span /strong /p p 　　本届大会主席是苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士，大会特邀嘉宾有中国科学院张玉奎院士、苏州工业园区科技与信息化局许文清局长、国家药典委员会生物制品标准处郭中平处长、国家食品药品监督管理总局药品审评中心高级审评员魏开坤博士、美国药典委员会生物高级战略专家黄懿博士，还邀请到包括江苏万邦医药科技有限公司首席科学家文良柱博士、中国科院黄骏雄研究员、上海创诺制药有限公司贾茜高级工程师、北京军科华仞生物工程技术研究有限公司首席技术官刘翠华博士、前安捷伦科技全球副总裁牟一萍女士、苏州纳微分离纯化技术有限公司谢岩生博士、江苏康宁杰瑞生物制药有限公司蛋白质化学研发总监郭康平博士、BioPharmaDev Inc.总裁杨彦博博士、上海交大首席科学家曹成喜教授、浙江大学生物工程研究所林东强所长、義守大學先進層析程序研究中心主任梁明在教授、赛默飞世尔色谱耗材全球研发总监刘晓东博士等重量级嘉宾。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/fe757806-3e5a-4201-9a47-318187512561.jpg" title=" 3_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 大会特邀嘉宾合影 /strong /span /p p 　　首先，为众多产业界与会嘉宾致欢迎词的是本次大会主席、国家千人计划特聘专家、苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/bc8e540b-6b74-4be4-9b18-f0297ffcb7de.jpg" title=" 江必旺.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 国家千人计划专家、苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士 /span /strong /p p 　　江必旺博士对所有参会代表们表达了感谢，并说到：“衷心感谢各位新老朋友们的到来，从十年之前到苏州创业的‘外行’，到现在连续四年成功举办制药分离纯化大会，我感到由衷的高兴。十年之前，苏州工业园区还是一片荒凉，当年园区内的生物制药企业也不过五六家，现今是高楼林立、企业竞相发展的良好局面，也正是中国生物制药产业蓬勃发展的一个缩影。分离纯化是制药过程下游的关键技术，我国制药上游技术近年来迅猛发展，但下游技术却一直徘徊不前，我希望大家通过此次会议分享交流技术心得，共同推动我国制药分离纯化技术的发展与进步。” /p p 　　接下来致辞的是苏州工业园区科技与信息化局许文清局长。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/c4ce6882-cf2a-4846-83d4-78c2a13f2d45.jpg" title=" 徐文清.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 苏州工业园区科技与信息化局局长许文清 /span /strong /p p 　　许文清局长对大会的顺利召开表示了祝贺，并对参会的嘉宾、学者、企业代表等表示了衷心的欢迎与感谢。“今年是制药分离纯化技术与学术大会第四次在苏州工业园区举办，大会经过四年发展已形成品牌效应，并吸引了大量海内外的学界与产业界人士的参加。苏州工业园区近年来实施创新驱动战略，生物医药产业蓬勃发展，下一步园区还将继续致力于创新，持续发展生物医药产业。” /p p 　　接下来由大会协办方代表江苏汉邦科技有限公司执行总经理李胜迎博士致辞。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/84c8a208-be81-43d9-9e97-7df8bd966113.jpg" title=" 李胜迎.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 江苏汉邦科技有限公司执行总经理李胜迎博士 /span /strong /p p 　　李胜迎博士介绍：“自2014年起制药分离纯化技术与学术大会为大家提供了难能可贵的交流与学习机会，是中国制药行业药物分离纯化界彼此促进和共同提升的重要平台，本次大会也必将为整个行业带来新的技术驱动力。作为技术与产品供应商，江苏汉邦也将持续为业界提供新的思路、产品及解决方案。”随后李胜迎博士向与会者简要介绍了江苏汉邦科技有限公司的情况。 /p p 　　致辞环节之后大会主旨和特邀报告正式拉开序幕，中国科学院张玉奎院士带来了“蛋白质组学深度覆盖”的大会主旨发言。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/1ab6c5ee-79c0-43d7-9275-c9a9b18ffea4.jpg" title=" 张院士.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 中国科学院张玉奎院士 /span /strong /p p 　　张院士介绍了目前世界上蛋白质组学的研究进展、我国在蛋白质组学基础研究方面最新进展，还汇报了我国色谱界的最新研究成果与进展情况。 /p p 　　国家药典委员会生物制品标准处处长郭中平研究员带来了“国家药品标准与生物制药创新与产业升级的协同发展”的特邀报告。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/74a9b6d1-c024-407d-9140-6476c539b55f.jpg" title=" 郭中平.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 国家药典委员会生物制品标准处处长郭忠平研究员 /span /strong /p p 　　报告指出，在国家“健康中国”的战略发展背景下，生物制药的快速发展将使国家监管和标准体系面临新的挑战，实现生物制品国家标准与生物制药创新与产业升级的协同发展成为新形势下的重要任务，郭处长分享了新版《中国药典》生物制品方面的最新动态、国家药典下一步的发展战略和《中国药典2020版》的宏伟蓝图。　　 /p p 　　国家食品药品监督管理总局药品审评中心高级审评员魏开坤博士带来“改革大时代中生物医药的研发和评审创新”的特邀报告。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/907587db-3393-4c62-a060-84ecb507a952.jpg" title=" 魏开坤.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 国家食品药品监督管理总局药品审评中心高级审评员魏开坤博士 /span /strong /p p 　　报告指出，随着我国改革开放事业的发展，生物医药领域的研发和审评进入了一个由仿制为主向创新为主转变的转型时期。自2015年起，为了顺应我国生物医药领域的创新形势所需，国家食品药品监督管理总局按照国务院的部署，发力推进药品审评审批制度改革，逐步拓展为药品监管制度的全面变革，魏博士介绍了我国生物医药的最新政策法规、新药研发挑战与机遇、评审决策要点及注意事项等，向行业传递监管当局的思想理念和方法策略，共同推进为人民服务的生物医药事业发展。 /p p 　　本届大会主席、苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士带来“国内外生物分离纯化技术的挑战和机遇“的特邀报告。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/9b1b7d11-c1f1-4812-b9e8-ee22fff70d58.jpg" title=" 江博士报告.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士 /span /strong /p p 　　江博士解析了当前国内外对生物药纯度的要求、工艺挑战和技术难点。“蛋白类层析或制备色谱分离纯化技术对结构复杂、稳定性差及浓度低的生物分子具有极高的分离纯化效率，且条件温和，在分离纯化过程中容易保持目标分子的生物活性，因此，经济高效地从复杂组分中浓缩、分离和纯化目标生物分子，往往是生物药生产的瓶颈。” 江博士分享了纳微科技在色谱填料及层析介质上的技术创新与打破国际垄断的案例，讲解了色谱层析填料或层析介质解决抗体、蛋白、胰岛素、多肽、抗生素、天然产物及多糖的分离纯化的最新案例。 /p p 　　上午大会报告结束之后，主办方安排了三个专题分会场，共邀请到近40位国内外权威专家作报告，与会者们选择感兴趣的专题进行聆听和学习。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/1f175731-174b-4345-80e7-e8ffb9e16be2.jpg" title=" 大分子.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 大分子专题会场 /strong /span /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/06c57d86-50e2-4257-a0bd-9a90327ad2de.jpg" title=" 小分子.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 小分子专题会场 /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/b3e18828-de95-4510-a276-11563e1abb4a.jpg" title=" saimofei_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 高端生物分析暨赛默飞科技专题会场 /span /strong /p p 　　第四届分离纯化技术与学术大会得到超过20家行业赞助商的支持，为现场近500名与会者带来全方位的分离纯化技术与产品展示，以下是部分参展商。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/4c26bacf-c019-497d-9131-6c0cf88c5817.jpg" title=" zhanwei_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 苏州纳微科技有限公司 /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/da9155fe-15ff-42b1-a020-21084968f869.jpg" title=" 汉邦科技.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 江苏汉邦科技有限公司 /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/b1b20cc8-b76d-4559-8f2e-486d9f8f4f37.jpg" title=" 赛默飞.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　赛默飞世尔科技(中国)有限公司 /span /strong /p p strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/888b39ab-c8f0-4594-b6c3-fa75540c4c43.jpg" title=" 荣捷.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　荣捷生物工程(苏州)有限公司 br/ /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/eabe18c5-b6fb-4029-85f5-28d30d2eb454.jpg" title=" 安捷伦.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　安捷伦科技(中国)有限公司 /span /strong br/ /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/b69eb3c8-5bcb-4b8d-bdd0-d43b16b66800.jpg" title=" 成都普思生物.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　成都普思生物科技股份有限公司 /span /strong /p p strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/5465ef1d-2dcf-4180-8f10-6426157d21e4.jpg" title=" 利穗科技.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　利穂科技(苏州)有限公司 /span /strong /p p strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/b9d21bd2-634c-4a17-a0dc-82dda0b73135.jpg" title=" ATS.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　ATS安拓思 /span /strong /p p 　　关于苏州纳微科技有限公司董事长江必旺博士和他的“中国色谱芯”，仪器信息网还进行了更加深入的了解，敬请期待本网后续报道。 /p p br/ /p

利用 Pure C-850 双模式辣椒素纯化分离Pure 应用”1介绍辣椒素主要来源于辣椒属植物，不同种类的辣椒含有不同量的辣椒素，通常辣椒的辣度与其中辣椒素的含量有关。此外，一些其他植物也可能含有少量的辣椒素，例如胡椒、姜等。▲ 辣椒素结构式辣椒素因其抗菌活性可用于生物膜和防污涂料，使其在食品包装、食品保鲜、海洋环境和牙科治疗等方面具有广阔的应用前景。辣椒素在代谢紊乱中也起着至关重要的作用，包括减肥、降压和降低胰岛素的作用。此外，辣椒素通过诱导细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖，对预防肺癌、胃癌、结肠癌和乳腺癌等人类癌症有效。先前的研究还表明辣椒素对缓解疼痛和认知障碍有积极作用。辣椒素是瞬时受体电位香草素 1 型 (TRPV1) 的激动剂，可选择性激活 TRPV1，诱导 Ca2+ 流入和相关的信号通路。最近，肠道菌群也参与了一些疾病的治疗，但其对辣椒素作用的影响仍有待深入研究。在天然辣椒中同时存在辣椒素与二氢辣椒素，用硅胶柱层析或正相薄层色谱法（TLC）等传统方法分离这两个结构相似的化合物十分困难。即使用中压快速制备色谱（FLASH）分离纯辣椒素也非常困难，因此往往需要使用中压制备色谱法和高压制备色谱法进行两步纯化。在本次的应用文章中，我们将会展示如何利用两步分离从红辣椒原料中提取 HPLC 峰面积达 95% 以上的辣椒素。2仪器、耗材与试剂仪器：步琦 Pure C-850 中高压一体纯化分离系统步琦 E-800 索氏萃取系统Agilent 1260 Infinity II 液相色谱分析系统▲ Pure C-850 制备色谱系统▲ E-800 索氏萃取系统耗材：VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mmFlashPure Ecoflex Silica 12gBUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm试剂与样品：市售红辣椒 10g去离子水 4L乙腈（HPLC 级）4L甲醇（AR 级）4L二氯甲烷（AR 级）4L乙醇（AR 级）1L辣椒素标样 99.5% 100mg3实验部分样品准备：将市售红辣椒皮碾碎成粉状，取 5g 置于 E-800 索氏提取器的萃取腔内，溶剂杯内加入 100mL 乙醇，加热等级设定为 13 级，整个提取过程持续 4 小时，制成辣椒皮萃取液。确认辣椒素峰位置：HPLC 条件色谱柱VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mm流速1.5mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，6 分钟紫外波长227nm▲ 辣椒素标样出峰图▲ 辣椒皮萃取液出峰图根据辣椒素标样，我们可以确定辣椒素的出峰位置为 3.884 min，通过这一参数我们可以确认之后每一步分离的馏分位置。辣椒素粗分离：色谱条件（C-850 FLASH 模式）色谱柱FlashPure Ecoflex Silica 12g平衡时间6 分钟流速10 mL/min溶剂 A二氯甲烷溶剂 B甲醇梯度10% 等度，40 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高上样量600mg 红辣椒皮粉末上样模式干法上样将 600mg 红辣椒皮粉末与 3g 硅胶拌匀，放入干法上样柱内进行上样，在 C-850 的中压模式下进行初步纯化分离。▲ C-850 中压模式下分离红辣椒皮内的化合物根据之前 HPLC 上辣椒素的出峰位置，我们大致判定目标化合物被收集在 9-11 管内，将这几管馏分合并后浓缩，进行 HPLC 检测。▲ 9-11 管馏分并管后 HPLC 检测图通过 HPLC 分离后，可以看到除了 3.882 min 的辣椒素，在 5.365 min 还有一个化合物，这是与辣椒素结构相似的二氢辣椒素。▲ 二氢辣椒素结构式中压模式下的色谱柱填料粒径通常为 30-50μm，很难将辣椒素与二氢辣椒素拆分开，因此我们需要将 C-850 切换至高压模式，利用粒径更小的高压不锈钢色谱柱分离这两个化合物。获取高纯度辣椒素：色谱条件（C-850 高压模式）色谱柱BUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm平衡时间10 分钟流速15mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，45 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高将之前获取的9-11 管馏分浓缩后，在 C-850 的高压模式下进行分离。▲ 样品粗分后 9-11 管馏分高压分离图根据之前 HPLC 的出峰顺序，我们可以推测 21-26 管馏分为辣椒素，31-33 管馏分为二氢辣椒素，取 21-26 管分别进行 HPLC 检测。▲ 高压模式下 21-26 管馏分 HPLC 检测图4结论辣椒皮中含有多种化合物，仅通过柱层析色谱或中压制备色谱很难获得高纯度的单一化合物。步琦 Pure C-850 纯化分离系统支持中压和高压双模式，一台仪器就能完成大量样品的中压粗分富集与高压高纯度纯化，分离天然产物时具有明显的优势。在本次应用中，通过中压和高压的两次分离，最终 24 与 25 管馏分的峰面积能达到 95% 以上，可以进行下一步的生物活性测试。