大家好,本人接触液相不久,向大家请教一个问题,我想用茚三酮衍生法检测一个药物(新霉素),但是发现一个奇怪的问题:我用ph5.8PBS配置茚三酮、新霉素标准液,取适量茚三酮、新霉素30min水浴加热后变紫色,而单独的茚三酮为无色。但在380、254、236nm等波长检测(我是用紫外扫描确定的最大吸收波长,但是我不确定它们的准确性),发现两者出峰时间、峰形、峰面积完全一致,即应当是新霉素要么没有衍生化好要么该检测波长下衍生物没有紫外吸收?但是衍生后的颜色是明显变紫的啊? 谢谢!
各位老师: 你们好,我用茚三酮显色剂法做赖氨酸的含量,但是做的过程中发现茚三酮有点粉色,查了资料说是氧化了,所以我进行纯化,但是在纯化的过程中我发现了问题,加入热水茚三酮不溶解,还有就是加热溶解后,加入活性炭就马上析出结晶,要是这样的话,我过滤后的清液,能析出的结晶是不是就太少了? 纯化方法:称取10g活性炭,用40mL热水溶解,加入1g活性炭,搅拌1min,静置30min,过滤,将滤液放置冰箱内过夜,出现蓝色结晶,在过滤,用2mL冷水冲洗,然后再干燥器中干燥,备用。 问题1:为什么加入活性炭会出现结晶现象,良好的茚三酮和氧化的茚三酮都是同一个现象么? 问题2:干燥时是放入烘箱中进行干燥么? 问题3:有其余的纯化的方法么?麻烦老师指点一下,谢谢啦!
大家好!本人接触液相不久。我想用茚三酮衍生法检测一个药物(新霉素),但是发现一个奇怪的问题:我用ph5.8PBS配置茚三酮、新霉素标准液,取适量茚三酮、新霉素30min水浴加热后变紫色,而单独的茚三酮为无色。但在380、254、236nm等波长检测(我是用紫外扫描确定的最大吸收波长,但是我不确定它们的准确性),发现两者出峰时间、峰形、峰面积完全一致,即应当是新霉素要么没有衍生化好要么该检测波长下衍生物没有紫外吸收?但是衍生后的颜色是明显变紫的啊? 谢谢!
最近跑板子出来两个物质,一个物质喷茚三酮以后用吹风机吹的时候很快就显色了,是紫红色!第二个物质要加热到105°才会显示,也是紫红色。 这两个物质都是小分子物质,分子量在300左右。 请教下各位 带什么基团比较容易被茚三酮显色?
怎么做标准曲线阿? 用定量的 己二胺溶解在异丙醇和1.4-二氧六环溶液中,加入茚三酮,怎么不显蓝紫色。请问和己二胺的量和茚三酮的量的关系??各位帮忙啊。
关于茚三酮显色反应的, 茚三酮与乙二胺反应后颜色为橙/ 黄色,但怎么不像与氨基酸(Gly)反应一样有一个最大吸收峰(570nm)呢?如果用来定量氨基的话,选择哪个波长好呢?图中EDA为不同浓度的乙二胺。谢谢! [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2006/12/200612291731_36908_1738763_3.jpg[/img]
请问,我在文献里面看到 监测固相多肽合成实验中偶联成功与否,用茚三酮实验,在茚三酮反应中要用到氰化钾(KCN) 。想请问 氰化钾在茚三酮实验中的作用是什么啊
我想问一下大家阿02年10月份生产的茚三酮现在还能用吗
用茚三酮来鉴别氨基酸的原理是?
在做氨基酸时,发现茚三酮的溶解很不同,在茶叶氨基酸测定中要用到氯化亚锡,而有些中要用到乙二醇,不知有何讲究?
最近用茚三酮法做茶叶中的游离氨基酸,遇到很大的问题需要找一些参考资料。1、【题名】:茚三酮与氨基酸显色反应再探氨基酸杂志论文(ZuoSanTongYuAnJiSuanXianSeFanYingZaiTanAnJiSuanZaZhiLunWen)【关键词】:茚三酮 氨基酸 显色反应【keywords】:ZuoSanTong AnJiSuan XianSeFanYing【作者】:赵凡 【来源】: 知识词典【期刊名称】:氨基酸杂志(AnJiSuanZaZhi)2、氨基酸显色剂茚三酮试剂的研究(二):不同浓度显色剂对氨基…氨基酸和生物资源 1995年第17卷第2期摘 要:氨基酸显色剂是氨基酸分析的的重要试剂之一,主要成份是茚三酮、二甲亚砜、还原剂、氢氧化锂等有机试剂氨基酸显色剂(以下称显色剂)。目前这种显色剂依赖从国外进口,由于受价格、进口周期及有效期限等诸多因素的影响,使之远远不能满足国内用户的需要,为适应国内用户的需要,进一步认自制显色剂的可行性和可靠性,确定显色剂的最佳配方,本项目对自制显色剂的存放时间、不同浓度显色剂、以及显色剂光学试验等项指标进行了全面系 (共8页)3、茚三酮与氨基酸显色反应再探作者:赵凡4、凡是关键词是氨基酸+茚三酮的文献,偶都要!谢谢各位!
薄层色谱中茚三酮显色剂的配制方法
用c18柱测氨基酸应选流动相是什么?茚三酮显色液:称取85mg 茚三酮和15mg 还原茚三酮,用10mL 乙二醇甲醚溶解。
各位大虾,用茚三酮分光光度法分析甘氨酸,做标准曲线为什么做不平行啊?
我们现在用一套美国的氨基酸分析试剂包,其中茚三酮比较贵而且还容易氧化,用起来很不方便。想问下有没有高手会配置这个溶液的?另外,其他牌子比如日立的茚三酮是否能通用?有知道的话可以加我qq 1437313202,必有重谢!
我在用茚三酮法测定氨基酸时,做标准曲线的时候,要求用100度沸水浴,我用了油浴,但是分析数据发现不成线性,而且吸光度值偏低,后来我又用水浴做了一遍,结果就很好。我在做的时候除了加热方式不一样,其它都相同,为什么油浴和水浴会有区别呢?我搞不明白,请专家指教!
茚三酮比色法测甘氨酸结果偏低,实在找不到原因?有哪些技巧,望老师不吝赐教
我想问一下大家阿在用茚三酮方法测定蛋白酶的时候,有没有出现没有加土样、只加了明胶的对照样,吸光度特别大呢?谢谢各位不吝赐教阿,呵呵
最近在做土壤蛋白酶,可是做了几次提出来的待测液体在比色的时候总是茶色,不知道是为什么? 我是按照关松萌的土壤酶及其研究法上的茚三酮比色法做的,不知道问题到底出在哪里,希望大家能给我指点迷津,方便的话可以给我发邮件,我的邮箱是 xiaoyu589@163.com 谢谢啦!
某食品的清液中,加入水合茚三酮试剂后呈兰色,证明含有()。 A、蔗糖 B、维生素Vc C、葡萄糖 D、α-氨基酸
求若干关于茚三酮显色测茶叶中氨基酸总量测定的方法的文献1.文献:茚三酮比色法测定茶叶中游离氨基酸总量期刊:《中国食品添加剂》2008年2期作者:邵金良2.文献:茚三酮比色法测定牛肉中游离氨基酸的试验研究期刊:《保鲜与加工》作者:刘慧燕3.文献:茶叶游离氨基酸及其总量的国标法测定探讨期刊:《贵州茶叶》2008年第36卷第一期作者:刘晓霞4.文献:α—氨基酸与茚三酮显色反应影响因素的探讨期刊:《邵阳高等专科学校学报》作者:[url=http://www.cqvip.com/asp/vipsearch.asp?Query=%D5%C5%D5%F1%BB%AA&Type=A]张振华[/url] 5.文献:茚三酮与氨基酸显色反应再探期刊:《[url=http://www.cqvip.com/qk/90324X/index.shtml]《氨基酸杂志》[/url]》作者:[url=http://www.cqvip.com/asp/vipsearch.asp?Query=%D5%D4%B7%B2&Type=A]赵凡[/url] 6.文献:α—氨基酸和茚三酮显色反应机理期刊:[url=http://www.cqvip.com/qk/97171X/index.shtml]《教材通讯》[/url]作者:[url=http://www.cqvip.com/asp/vipsearch.asp?Query=%B3%C2%D6%D2%D4%C6&Type=A]陈忠云[/url]
测定氨基酸含量,除了利用氨基酸与茚三酮的显色反应外,还有什么别的方法?
用茚三铜显色做还原型谷胱甘肽的鉴别,步骤如下:取本品5mg,加5ml水使溶解,加一滴氨试液和1ml茚三酮试液,水浴加热1至2分钟,即显橙红或红色。我想问一下:为什么要加一滴氨试液呢?多谢啦
跑氨基酸的薄层时,如果展开剂中有氨水的话,用2%茚三酮显色后常常弄得整个板子都是红色的(时间一长还发黄呢),搞得背景很不好看,不太明白是怎么回事? 氨基酸显色的机理是:(水合茚三酮与a-氨基酸反应生成)还原型茚三酮+NH3+茚三酮===紫红色化合物。关键是如果光NH3+茚三酮是不足以反应显色的,不知整块板子都变红了是什么原因造成的。哪位大虾解释一下啊!!
六、氨基酸、多肽、蛋白质鉴定试剂1、茚三酮试剂检查2-氨基酸及含有2-氨基酸的肽类、氨基糖和蛋白质。0.2g茚三酮溶于l00ml正丁醇中,加冰醋酸3ml。或者,0.2g茚三酮溶于l00ml乙醇或丙酮中。取1ml样品的冷水浸液,加入2~3滴试剂,沸水浴上加热5min放冷,显蓝色或蓝紫色。2、吲哚醌试剂检查氨基酸、多肽。吲哚醌1g溶于100ml丙酮中,加入10ml醋酸。作薄层色谱显色剂,喷洒试剂后,100~110〗萦热l0min,显蓝、红、桃红或棕色斑点。3、1,2-萘醌-4-磺酸钠试剂检查氨基酸。0.02gl,2-萘醌-4-磺酸钠溶于l00ml5%碳酸钠溶液中,新鲜配制。喷洒试剂后,室温晾干,不同氨基酸出现不同的颜色。4、双缩脲试剂检查多肽、蛋白质。
请问ninidrine solution 是什么溶液,是用于test for Nitrogen(relevant to amidic group)的检验,我把它翻译成了茚三酮溶液,这样对不对?茚三酮的英文是ninhydrine,是不是相同的意思啊?
六、氨基酸、多肽、蛋白质鉴定试剂1、茚三酮试剂检查2-氨基酸及含有2-氨基酸的肽类、氨基糖和蛋白质。0.2g茚三酮溶于l00ml正丁醇中,加冰醋酸3ml。或者,0.2g茚三酮溶于l00ml乙醇或丙酮中。取1ml样品的冷水浸液,加入2~3滴试剂,沸水浴上加热5min放冷,显蓝色或蓝紫色。2、吲哚醌试剂检查氨基酸、多肽。吲哚醌1g溶于100ml丙酮中,加入10ml醋酸。作薄层色谱显色剂,喷洒试剂后,100~110〗萦热l0min,显蓝、红、桃红或棕色斑点。3、1,2-萘醌-4-磺酸钠试剂检查氨基酸。0.02gl,2-萘醌-4-磺酸钠溶于l00ml5%碳酸钠溶液中,新鲜配制。喷洒试剂后,室温晾干,不同氨基酸出现不同的颜色。4、双缩脲试剂检查多肽、蛋白质。
大家好。本人现正进行硫酸新霉素在鱼体的药物残留动力学检测,了解的液相检测方法有茚三酮衍生化、氯甲酸芴甲酯衍生和国标OPA衍生检测方法,都是用UV检测。本人已经试验过茚三酮衍生化方法,感觉效果不太理想,而国标OPA衍生法据说衍生化试剂及衍生物稳定性比较差,不知大家对于检测方面有什么建议!!!不胜感谢。
氨基酸的主要化学反应(一)茚三酮反应茚三酮反应(ninhydrin reaction)这是氨基酸的α-NH2所引起的反应。α-氨基酸与水合茚三酮一起在水溶液中加热,可发生反应生成蓝紫色物质。首先是氨基酸被氧化分解,放出氨和二氧化碳,氨基酸生成醛,水合茚三酮则生成还原型茚三酮。在弱酸性溶液中,还原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反应,缩合生成蓝紫色物质。所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽都产生蓝紫色,但脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质,因其α-氨基被取代,所以产生不同的衍生物。此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,在570nm波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量。也可在分离氨基酸时作为显色剂定性、定量地测定氨基酸。 (二)氨基酸与2,4-二硝基氟苯的反应 此反应又称桑格反应(Sanger reaction)。在弱碱性(pH 8~9)、暗处、室温或40℃条件下,氨基酸的α-氨基很容易与2,4-二硝基氟苯(缩写为FDNB)反应,生成黄色的2,4-二硝基氨基酸(dinitrophenyl amino acid,简称DNP-氨基酸)。该反应由F. Sanger首先发现。多肽或蛋白质的N-末端氨基酸的α-氨基也能与FDNB反应,生成一种二硝基苯肽(DNP-肽)。由于硝基苯与氨基结合牢固,不易被水解,因此当DNP-多肽被酸水解时,所有肽键均被水解,只有N-末端氨基酸仍连在DNP上,所以产物为黄色的DNP-氨基酸和其它氨基酸的混合液。混合液中只有DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯,所以可以用乙酸乙酯抽提并将抽提液进行色谱分析,再以标准的DNP-氨基酸作为对照鉴定出此氨基酸的种类。因此2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸。(三)氨基酸与苯异硫氰酸(PITC)的反应 此反应又称艾德曼反应(Edman reaction)。在弱碱性条件下,氨基酸的α-氨基可与苯异硫氰酸(phenylisothiocyanate, PITG)反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸(简称PTC-氨基酸)。在酸性条件下,PTC-氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸(phenylthiohydantoin,简称PTH)。蛋白质多肽链N-末端氨基酸的α-氨基也可有此反应,生成PTC-肽,在酸性溶液中释放出末端的PTH-氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的多肽链。PTH-氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯,用乙酸乙酯抽提后,经高压液相层析鉴定就可以确定肽链N-末端氨基酸的种类。该法的优点是可连续分析出N端的十几个氨基酸。瑞典科学家P. Edman首先使用该反应测定蛋白质N-末端的氨基酸。氨基酸自动顺序分析仪就是根据该反应原理而设计的。(四)α-羧基的反应 氨基酸的α-羧基和一般的羧基一样,可以和碱作用生成盐,其中重金属盐不溶于水。氨基酸的羧基还能与醇类作用,被酯化生成相应的酯。酯化作用在人工合成多肽中常用来保护氨基酸的α-羧基。例如,氨基酸在无水乙醇中通入干燥氯化氢气体,或加入二氯亚砜,然后回流,生成氨基酸酯的盐酸盐。氨基酸的α-羧基被还原可产生相应的α-氨基醇,例如被氢硼化锂还原的反应。此性质在蛋白质一级结构的测定中是鉴定C-末端氨基酸的一种方法。(五)R基的反应 氨基酸的R侧链含有官能团时也能发生化学反应,例如丝氨酸、苏氨酸和羟脯氨酸均为含有羟基的氨基酸,所以能形成酯。酪氨酸的R侧链含有苯酚基,具有还原性,所以可利用此性质定量地测定蛋白质。另外,苯酚基和组氨酸中的咪唑基具有芳香环或杂环的性质,能与重氮化合物(如对氨基苯磺酸的重氮盐)结合而生成棕红色的化合物,此反应可用于定性、定量测定。此外,半胱氨酸的侧链上的巯基(-SH)的反应性能高,在碱性溶液中容易失去硫原子并且容易被氧化而生成胱氨酸。另外,极微量的某些重金属离子,如Ag+、Hg2+,都能与-SH基反应,生成硫醇盐,从而导致含-SH酶失活。
薄层色谱法中茚三酮、三氯化铝、溴酚蓝三种显色剂怎么配置呀 自己查了资料 但还是不敢肯定哈