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细胞冻存是长期保存、运输和共享生物材料的重要手段,对于各种生物医学研究领域具有重要的作用。然而,不同的细胞冻存方法可能会影响细胞的质量和存活率。本文将探讨不同厂家提供的细胞冻存方法,并分析它们对细胞质量的影响。 厂家差异及其对细胞质量的影响 目前,市面上有许多细胞冻存试剂盒供应商,其中一些主要的厂家包括Thermo Fisher Scientific、Sigma-Aldrich、Qiagen和Promega等。这些厂家提供的细胞冻存试剂盒都有其独特的优点和缺点。 以细胞存活率为例,Thermo Fisher Scientific公司提供的CryoStor冻存剂的细胞存活率达到了98.5%,而Sigma-Aldrich公司提供的CryoSure-DMSO冻存剂的细胞存活率仅为85%。这表明,不同厂家提供的细胞冻存试剂盒对细胞存活率的影响存在差异。 此外,不同的冻存方法也可能影响细胞的质量。例如,在使用Thermo Fisher Scientific公司的CryoStor 冻存剂时,冷冻速率、先冷冻后复温的步骤和使用的液氮均对细胞的冻存质量产生影响。另外,Sigma-Aldrich公司的CryoSure-DMSO冻存剂需要在冷冻过程中将细胞悬浮于冻存剂中,并使用20%的DMSO作为保护剂,以确保细胞质量。 因此,选择细胞冻存试剂盒时,需要注意不同厂家提供的细胞冻存试剂盒的差异,以及冷冻的方法是否适合特定类型的细胞。 关注:[url=http://www.yedanguan365.com/]液氮罐[/url] [url=http://www.mvecryoge.com/]金凤液氮罐[/url] [url=http://www.mvecryo.com/]mve液氮罐[/url]
细胞冻存是细胞培养的关键步骤,一般推荐的冻存液比例为:1:3:6(或1:2:7) 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态良好的细胞进行冻存处理,小编实验室有一个秘密配方,就是10%DMSO和90%的纯血清,这个冻存液有一些奢侈,但是对于一些比较脆弱的细胞,或者是一些冻存条件比较差的实验室(例如没有-80冰箱)有非常良好的效果。除此之外和大家分享六大注意事项1、错误的时机:细胞状态不好(长的太过了,培养液已经很黄;细胞可疑污染;细胞已经开始凋亡或崩解;连续培养超过二个月,细胞性状已有改变改变)。解决:最佳时机:细胞增殖旺盛,情况稳定,试验效果良好,复苏后两周内。2、细胞太少:冻存时细胞浓度低于1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)。解决:离心后调整细胞浓度。(不要重新洗细胞)。3、盖子不紧:冻存管的盖子一定要拧紧,否则复苏水浴时会渗水,造成污染。解决:选择原配的管子和盖子(不同牌子/型号的颜色会有差别)。4、单薄的冻存盒:放在-80度的冻存盒,壁太薄,细胞在被迅速降温。解决:选择厚壁泡沫塑料盒,或塞入大量干棉花。(冻存的原则:缓降!)。5、-80度太久:放在-80度冰箱的时间超过半年。(冰箱的温度难以恒定:开门/关门,电压不稳等)解决:尽快转入液氮。6、液氮不足:液面不能漫过所有细胞。解决:定期测量液氮储备,保证细胞全部浸在液面下。
细胞冻存是细胞培养的关键步骤,一般推荐的冻存液比例为:1:3:6(或1:2:7) 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。取生长状态良好的细胞进行冻存处理,小编实验室有一个秘密配方,就是10%DMSO和90%的纯血清,这个冻存液有一些奢侈,但是对于一些比较脆弱的细胞,或者是一些冻存条件比较差的实验室(例如没有-80冰箱)有非常良好的效果。除此之外和大家分享六大注意事项1、错误的时机:细胞状态不好(长的太过了,培养液已经很黄;细胞可疑污染;细胞已经开始凋亡或崩解;连续培养超过二个月,细胞性状已有改变改变)。解决:最佳时机:细胞增殖旺盛,情况稳定,试验效果良好,复苏后两周内。2、细胞太少:冻存时细胞浓度低于1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)。解决:离心后调整细胞浓度。(不要重新洗细胞)。3、盖子不紧:冻存管的盖子一定要拧紧,否则复苏水浴时会渗水,造成污染。解决:选择原配的管子和盖子(不同牌子/型号的颜色会有差别)。4、单薄的冻存盒:放在-80度的冻存盒,壁太薄,细胞在被迅速降温。解决:选择厚壁泡沫塑料盒,或塞入大量干棉花。(冻存的原则:缓降!)。5、-80度太久:放在-80度冰箱的时间超过半年。(冰箱的温度难以恒定:开门/关门,电压不稳等)解决:尽快转入液氮。6、液氮不足:液面不能漫过所有细胞。解决:定期测量液氮储备,保证细胞全部浸在液面下。