外护管检测

小伙伴们大家好，之前我们讨论了泵和进样器的维护之后，今天我们来聊聊检测器。有人说Chemistry代表Chem is try很有意思。化学的美妙在于它的无限可能性。中学化学老师曾经说过“结构决定性质，性质决定用途。”扩展到我们的分析工作中，也决定了分析手段，所有的分析都有规律可循，缘分“结构”注定！在色谱实验室中紫外检测器是必备的，70%以上的物质都可以用紫外检测器来分析，今天我们就扒一扒紫外可见检测器。一、紫外检测器的原理紫外-可见光检测器(UV-Vis Detector， UVD)是应用最广泛的检测器，遵循的原理是朗勃比尔定律。吸光度(A)=摩尔吸光度(ε)×光程(b)×浓度(c)。吸光度定义为透射率的负对数，它是透射光与入射光的强度之比。吸光度(A)= lg(1/透射率(T))。紫外检测器的灵敏度与溶剂的影响、背景吸收、示差折光效应有关，不同种类溶剂有其截止波长，溶剂的质量好坏对其截止波长有影响，溶剂质量与含紫外吸收的杂质、溶解在其中的氧气、缓冲液溶质的紫外吸收等因素有关；背景吸收减少线性范围、许多溶剂会产生背景吸收。常见结构的紫外吸收紫外可见检测器还有个Plus的兄弟——二极管阵列检测器。光电二极管矩阵检测器简称PDA（Photo-Diode Array），有的品牌也称为DAD(Diode Array Detector)，一般来说，紫外检测器比DAD的灵敏度高约1倍。但DAD也有它的优势，一是可以对未知物进行波长扫描确定zui佳吸收波长，二是可以同时检测多个波长，三是可以进行峰纯度的检査。 紫外检测器与DAD的区别为:紫外检测器是光源发出的光先分光，让特定波长的光通过狭缝，这样光的强度可以调节，然后通过流通池，光束被流通池里的样品吸收，未吸收的光达到光电二极管，产生电流变化，DAD光源发出的光不分光，让全波段波长的光通过狭缝，然后通过流通池，光束被流通池里的样品吸收，未吸收光被分光，各种波长的光落在不同位置的二极管上，各二极管产生电流变化。因为是后分光，所以DAD不同波长处光强度并不一致，波长分辨率也不及单波长的紫外检测器，需要通过其他手段来提高某些波长的灵敏度。二、紫外检测器的优缺点切勿用裸手触摸石英灯泡，因为在后来打开灯时指纹会不可避免地损坏灯。灯的位置在设备中精确确定，不需要进一步调整。灯更换后的组装步骤与拆卸相同，只是按相反的顺序。打开本机并点亮灯，如果没有发生错误，请关闭灯，然后进行新灯泡的校准。更换钨灯的步骤近似，感兴趣的小伙伴可以单聊。以Wisys5000为例清洗流通池窗片/更换流通池窗片污染的流通池会降低光的传输，增加噪声，很难使信号归零。最简单的清洗方法是用合适的溶剂冲洗拆除的流通池。清洗前必须从仪器取出流通池。根据污染物的特性选择互溶性系列的溶剂。它可以使用有机和无机溶剂和稀释酸溶液（如用1:10 到 1:20的稀硫酸或硝酸溶液）。此操作完成后用纯溶剂冲洗流通池。连接流通池到系统，当有液体流过时，观察是否泄漏。如果有必要更换有裂纹或受污染的窗片,或改变制备流通池的光学路径，拧下螺钉，拆下流通池盖并取出窗片和密封件。使用干燥的注射器往里推空气可以更好的移除密封的流通池窗片，不要用手触摸窗片。指纹会阻挡紫外线辐射的通道，并有可能损坏的窗片表面。将干净的窗片插入到流通池中，以便在流通池中调整所需的光路。检查垫片的完好情况 和密封件的密封面是否有窗片碎片或任何其他杂质。损坏的密封件须更换。今天的话题就扒到这里了，下期见。

p style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　span style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "本文作者为武汉大学医学部病毒学研究所严银芳副研究员，寻求科研成果转化合作，文末有联系方式，欢迎广大光谱仪器厂商联系洽谈。/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong光谱液体活检核酸市场分析/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　随着在现代医学精准医疗发展，液体活检在癌症、病毒核酸检测方面崭露头角，成为广受关注的热点领域。在临床应用中，液体活检在疾病的诊疗和预后都能发挥重要作用，通过采集患者唾液、尿液等体液标本中的肿瘤、病毒相关产物，可以实现非侵袭性检测，从而对肿瘤、病毒等疾病进行诊断和辅助治疗，具有广阔的临床应用前景。日本最近也批准了经唾液检测新冠病毒的产品，称“该核酸检测手段更安全、结果完全一致”。液体活检ctDNA核酸检测以及光谱液体活检ctDNA核酸检测已成为当前肿瘤领域的诊疗新热点。采用红外、紫外、荧光、拉曼光谱等方法进行肿瘤液体活检为临床提供了许多重要数据，因此发展光谱液体活检己成为肿瘤、病毒早期诊断的一个重要工具。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 247px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/5fc57fd0-35a6-41ae-b35e-f81b133b900d.jpg" title="00-.jpg" alt="00-.jpg" width="400" vspace="0" height="247" border="0"//pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　单从仪器产品的名称上解析，紫外光谱液体活检核酸表型检测仪，即是利用紫外光谱来液体活检核酸RNA、DNA表型的检测仪器，也就是说利用光谱液体活检来补充ctDNA核酸测序或新冠病毒的核酸测序液体活检的一种二维表观质量检测的光谱仪器。当前核酸PCR测序液体活检仍存在许多假阴性、价格高等缺陷，因此完善光谱二维液体活检，补充核检缺陷乃是当前防疫之急的大事。虽然光谱液体活检ctDNA核酸检测在肿瘤病毒上初露锋芒，紫外光谱液体活检核酸表型检测仪，也从实验室逐渐发展成为了新冠病毒核酸测序之外的佼佼者。光谱液体活检补充了肿瘤，病毒核酸测序缺陷，增加了病毒二维表观信息检测技术，前景十分诱人。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　span style="font-size: 18px "strongbr//strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong病毒基因二维表观信息检测技术完善了病毒基因检测能力/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　病毒二维表观信息检测技术更加完善了核酸测序检测能力。病毒有遗传物质，新冠病毒的遗传物质是单链RNA，这是它最核心、最明确的标志。虽然核酸检测是新冠病毒检测金标准，但是核酸检测也不是万无一失的。假阴性是新冠肺炎核酸检测逃不开的问题。怎样提升新冠病毒的快速检测能力?这是摆放我们面前十分棘手的问题。新冠病毒基因是由单链RNA一维序列与RNA二维表观信息所组成的。光有一维病毒核酸测序检测实际上是一种片面的检测方法。在病毒核酸测序检测基础上，增加病毒基因二维表观信息检测技术，则更加完善了病毒基因检测能力。因此新冠病毒基因二维检测技术，是目前急需的核酸检测设备，值得引起我们的高度关注与重视。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong紫外液体活检RNA、DNA表型检测仪产品原理/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　紫外液体活检RNA、DNA表型检测仪，是根据爱因斯坦“测量一个物体的质量就是测量其中的能量”原理。利用紫外光谱检测新冠病毒的复制动量就是在检测病毒基因二维的表观质量为基础理论。我们利用紫外吸收光谱测能技术(二维紫外光谱图)，利用DNA含氢基团(OH、NH、CH)基态以及激发振动吸收情况，来检测病毒具有不同的能量曲线和平衡核间距。来建立紫外普通感冒、病毒流感表型分析仪。二维紫外光谱检测病毒、肿瘤应用十分广泛。能解决一些我们用常规方法所不易观测的病毒表观现象，揭示了新冠病毒RNA一维光谱中被掩盖的信息量。如可观测新冠病毒RNA高级构象变化、分子空间结构信息及分子间的相互作用问题，这些微观层面的现象理解都可以通过病毒二维紫外的方法测得。紫外表型分析仪能进行常规病毒核酸蛋白分析，又能进行病毒、肿瘤早期诊断及其预后治疗，一机专用也能一机多用。紫外普通/病毒流感表型分析仪检测病毒核异质RNA或蛋白质定量定性质量灵敏可靠，很少出现假阳性，更适合检测病毒的表观质量生物学指标。通过简单的一滴体液，检测一滴唾液即可快速区分普通/病毒流感，来减少核酸测序液体活检目前存在的多次检测假阴性、价格高等缺陷问题。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong紫外液体活检核酸表型检测仪应用场景/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　1. 病毒二维表观检测仪 配合病毒核酸咽拭子一维测序检测，能快速实施准确的核酸检测，避免了多次核检假阴性、价格高等缺陷问题。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　2. 配合红外测温仪，一滴唾液一分钟表观检测结果，在各交通口岸，地铁站对可疑病例突施两查，就能快速区分普通感冒与流行病毒新方法，弥补了单一红外测温仪检测防控口岸的重大缺陷 。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　3. 医院导医台放一部，就能轻松快速区分是普通感冒与流行病毒感染，快速解决看病难/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　4. 疫情期间每日对超市、海鲜、肉禽市场货物、人流等快速实施病毒基因二维光谱扫描检测，以排除病毒染污食品造成传播扩散。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　5. 更重要的是能在学校学生云集的地方实施快速的每日一查，能轻松快速区分普通感冒与流行病毒感染，防止流行病毒感染发生，有益学校正常的学习生活。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="font-size: 18px "strong新冠病毒二维表观检测分析仪是疫情防控急需产品/strong/span/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　紫外光谱液体活检RNA表型分析仪实际上就是升级版的医用紫外可见分光光度计，例如UV-1801光谱扫描仪。经过简单的检测窗及软件系统性改造注册，就可以成为一台医用紫外光谱液体活检RNA表型分析仪。检测仪结构简单，无需投资，利润率客观；功能强大，价格便宜，实用性强；是新冠病毒疫情防控急需的产品，能够保证投资企业实现最大的利益，避开或减少了风险的额度，在当下疫情防控形势下，迎合了经济社会需求，是投资防控物资商业化应用的最佳时机。欢迎广大的光谱仪器制造商或有意向合作企业前来合作。/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "武大医学部病毒学研究所严银芳/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　武汉市武昌东湖路115号/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　联系电话15927431505/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　相关资料：癌患者血清的紫外光谱研究/pp style="text-align: justify margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "　　a href="https://wenku.baidu.com/view/39346a58de80d4d8d15a4fba.html" target="_self"https://wenku.baidu.com/view/39346a58de80d4d8d15a4fba.html/a/p

新冠疫情爆发以来，多种不同的疫苗(mRNA疫苗、慢病毒疫苗、灭活病毒等)在全的抗疫中发挥了重大作用。然而现有的疫苗也有一些局限性，如储存运输条件苛刻、需要接种加强针、对突变病毒不敏感等等。近，bioRxiv发表了一篇基于细菌外泌体的新型新冠疫苗对疾病保护作用的文章，或许可以为新冠疫苗的研发提供新的思路。 Jiang和Driedonks等[1]通过对细菌来源的外囊泡表面修饰病毒S蛋白的受体结合结构域（RBD）制成了新型新冠疫苗。革兰氏阴性菌能够产生外膜囊泡（OMV），在哺乳动物体内具有免疫刺激作用，可诱导免疫应答发生并激活树突细胞、T细胞、B细胞等免疫细胞，而经过改造的工程菌产生的OMV内毒性非常低，避免了不良反应的发生。作者使用了一种鼠伤寒沙门氏菌株，通过Spycatcher/Spytag体系使该菌株分泌的OMV通过共价键稳定结合了病毒的RBD（图1）。图1 （A）RBD重组抗原的设计，RBD连接到SpyTag的N端和C端；（B）RBD修饰的OMV示意图。 研究人员在RBD-OMV制备完成后，使用全自动外泌体荧光检测分析系统Exoview检测OMV表面是否成功结合了病毒RBD。其中，检测芯片上包被了D001, D003, MM43三种病毒S蛋白以及LPS的抗体，分别用于捕获RBD-OMV和所有OMV；捕获完成后使用荧光抗体标记对D001, D003, MM43进行表型分析。后，使用Exoview的SP-IRIS无标记成像技术检测了OMV是否被成功捕获，并通过荧光成像统计捕获的不同表型OMV的数量。图2 RBD-OMV捕获数量及表型检测。A：SP-IRIS技术检测不同抗体捕获的OMV数量；B：荧光检测不同表型OMV数量。 图3 对照组捕获数量及表型检测。A：SP-IRIS技术检测不同抗体捕获的OMV数量；B：荧光检测不同表型OMV数量。 图4 RBD-OMV与对照组的捕获的不同表型OMV数量对比。 图2A显示S蛋白抗体和LPS抗体均捕获到了数量相当的OMV，表示OMV以很高的效率成功结合了新冠病毒的RBD。图2B的荧光标记结果也证明了结合成功，但是结合D003的OMV数量相对较低。图3A和图3B的对照组结果表示仅有LPS抗体能够捕获到OMV，并且几乎没有荧光标记，表面对照组OMV上没有结合RBD，将RBD-OMV与对照组的数据统计对比（图4），说明RBD-OMV疫苗的特异性非常好。 RBD-OMV疫苗制备完成后，研究人员使用仓鼠模型对疫苗接种的效果进行了检测。实验分为三组：接种疫苗的实验组（RBD-OMV），接种溶剂的溶剂对照组（mock）和接种未结合RBD的OMV的空白对照组（Ctrl-OMV）。研究人员对不同组别分别接种后，使用病毒感染仓鼠，并进行了一系列测试以验证疫苗效果。图5 RBD-OMV与mock、Ctrl-OMV的体重。A&B：接种完成后，病毒感染前的体重记录；C&D：病毒感染后的体重变化。 体重检测结果显示，在病毒感染前，三组仓鼠的体重，无论雄性和雌性，随时间均没有显著改变（图5A&B）；病毒感染后，RBD-OMV组体重没有下降，而mock与Ctrl-OMV组体重下降，在三、四天达到显著（图5C&D）。 图6 A：接种后Day42的抗S-RBD IgG滴度；B：抗S-RBD IgG滴度随时间的变化；C&D&E：Day48的BAL中抗S-RBD IgG/IgM/IgA的滴度；F：病毒中和抗体测试的中和抗体滴度随时间的变化；G：Day35 WT和Delta病毒株的中和抗体滴度比较。 血浆S-RBD IgG滴度测试结果显示，接种后42天，RBD-OMV组的血浆S-RBD IgG滴度更高，而两个对照组的滴度位于检测限度以下（图6A）。为检测呼吸道黏膜的抗体水平，研究人员检测了肺泡灌洗液（BAL）的抗体滴度，RBD-OMV组中可检测到IgG/IgM/IgA，两个对照组则未检测到。中和抗体测试表明，WT病毒株感染的抗体滴度与14天开始上升，于28天达到峰值并可保持到35天（图6F）；抗体的中和活性在Delta和WT中没有显著差异（图6G）。 图7A：肺部组织中的病毒滴度；B：BAL中的病毒滴度 TCID50检测结果显示，肺部组织（图7A）和BAL（图7B）中RBD-OMV组病毒滴度显著低于两个对照组，BAL组已达到检测低限度。 图8 A：Day48不同组别仓鼠的肺部形态；B&C：H&E染色结果及病变积分。 于48天处死仓鼠并分离肺部，肉眼观察可见RBD-OMV组的炎症和出血病灶少于两个对照组，具有更少的肺泡水肿（图8A）；肺组织切片的H&E染色结果也显示，RBD-OMV组的炎症、出血病灶和肺泡萎陷更少，且雄性的病变积分更低（图8B&C）。 以上所有检测结果表明，这种RBD-OMV疫苗可诱导抗体分泌，分泌的抗体能够中和野生型和Delta亚种病毒，证明了疫苗具有保护作用。OMV等外泌体疫苗具有如下优势：产量高：细菌复制快，且能够大量分泌OMV；多功能：表面可修饰多种抗原；组分构成简单：疫苗不需要其他佐剂；稳定性高：在室温下也能够保持稳定，可以冻干粉末的形式在低温长期保存。 以上结果说明，基于OMV的外泌体疫苗具有广泛的应用前景，可作为阻断新冠肺炎以及其他传染病传播的有效手段。 在这项研究中，作者使用Exoview系统对结合了重组RBD的OMV进行了表征分析，确定OMV上成功结合了新冠病毒的RBD。Exoview在外泌体疫苗开发中，可快速准确地表征外泌体，并统计不同表型外泌体数量并计算其比例，适合作为多组分外泌体疫苗的标准检测手段。 参考文献： [1]. Linglei Jiang, Tom Driedonks, Maggie Lowman, Wouter S.P. Jong, ... & Kenneth W. Witwer. (2021). A bacterial extracellular vesicle-based intranasal vaccine against SARS-CoV-2 protects against disease and elicits neutralizing antibodies to wild-type virus and Delta variant. bioRxiv. .全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R100）简介 作为外泌体表征分析的倡导者，美国NanoView Biosciences于2018年推出了全自动外泌体荧光检测分析系统ExoView，该系统一经推出，便引起了外泌体领域科研工作者的广泛关注，凭借其稳定、出色的性能，短短几年在全球已有近百个客户，发表文献100多篇。ExoView的表征，能够帮助科学家更深入地了解外泌体与疾病之间的关系，助力疾病诊断和新药开发。 Nanoview所开发的全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R200）采用单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术，是一款无需纯化的全自动的新型外泌体表征设备。该设备能够提供全方位的外泌体表征信息，包括颗粒大小、计数、表型与生物标志物共定位等，提供多层次和全面的外泌体测量解决方案。 为了更好的服务中国客户；Quantum Design中国子公司在北京建立了专业的客户服务中心，正式推出专业的全方位外泌体表征测试服务，您只需要少量样品即可获得全方位的外泌体表征数据： 欢迎各位老师垂询，前10名订购服务的老师，可享受8折优惠！