细胞绝对仪

2024年4月1日，卫健委发布WS/T360-2014《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》，本标准于2011年首次发布，本次为首次修订。与WS/T360-2011相比除结构调整和编辑性改动外，主要技术内容变化如下:【1】增加了流式细胞仪性能验证内容(见5.1)；5.1流式细胞仪的性能验证5.1.1 验证时机当新仪器启用前、搬移后、仪器发生重大维修(如更换激光、光纤、光电倍增管或流动室等)后、仪器软件系统更新后、仪器性能出现问题或环境严重失控时，需对流式细胞仪进行性能验证，所用流式细胞仪应符合医疗器械注册要求。荧光通道线性应在流式细胞仪常规使用过程中每年至少进行1次验证。5.1.2 验证参数验证参数应包括灵敏度、分辨率、荧光通道线性、仪器稳定性和携带污染率等。5.1.2.1 灵敏度5.1.2.1.1 散射光灵敏度采用己知大小的校准微球检测仪器的FSC和SSC。在散射光FSC/SSC散点图上，应检测出直径0.5μm或更小的微球，或满足制造商声明的要求。5.1.2.1.2 荧光灵敏度即流式细胞仪能检测到标准荧光微球上的最少荧光分子数，可用等量可溶性荧光分子(MoleculesfEquivalent Soluble Fluorochrome，MESF)表示。可采用2~4种不同荧光素校准微球针对所用激发光源进行检测，其中FITC、PE及APC等通道的平均荧光强度(x)与其荧光分子数(y)分别进行双对数线性回归，得公式y=a+bx，其截距a的反对数值即为流式细胞仪的荧光灵敏度。FITC的荧光灵敏度应≤200MESF、PE的荧光灵敏度应≤100MESF、APC≤200MESF，或满足制造商声明的要求。5.1.2.2 分辨率5.1.2.2.1 散射光分辨率采用EDTA盐或肝素抗凝全血，取适量样品稀释后直接上机测定，标本在FSC/SSC散点图可将红细胞和血小板清晰地区分开 取适量样品裂解红细胞后上机测定，标本在FSC/SSC散点图可将淋巴细胞、单核细胞、粒细胞清晰地区分开，即认为散射光分辨率符合要求。示意图参见附录A。5.1.2.2.2 荧光通道分辨率采用校准微球上机测定，各荧光通道的分辨率CV值应符合制造商声明的要求。5.1.2.3 荧光通道线性可采用含有不同荧光强度的校准微球(已知其相应荧光素的可溶性荧光分子数)进行检测，计算每-种荧光微球的MFI，MFI与己知理论值的相关系数r应≥0.98，此方法适用于校准微球上的荧光素可被定量检测的荧光通道。亦可同时使用两种荧光强度不同的微球，在待测荧光通道下，通过改变光电检测器的电压，使两种荧光微球的实际MFI检测值由低到高分布,两种荧光微球的荧光强度比值应保持不变。此方法适用于流式细胞仪所有荧光通道。5.1.2.4 仪器稳定性连续开机条件下，采用荧光微球在开机稳定后0h和8h各检测一次FSC及各荧光通道的IFI，以第一次检测时间点测定的各通道MFI值作为基线值，荧光微球8h上机测定的每一通道的MFI变化范围均应在基线值土10%范围内。5.1.2.5 携带污染率使用浓度为5000个/HL~10000个/HL的校准微球上机进行测定，获取至少100000个颗粒，连续测定3次，计算检测通道内设定区域的颗粒数，分别记为H1、H2、H3:再使用空白溶液上机测定，获取颗粒303，连续测试3次，计算该检测通道内设定区域的颗粒数，分别记为L1、L.2、L3。按照此步骤重复循环3次。按携带污染率公式[(L1-L3)/(H3-L3)]X100%进行计算，取最大值。携带污染率应≤0.5%。【2】完善了仪器质量控制和项目性能验证内容(见5.2、7.2.2)；5.2外周血淋巴细胞亚群检测系统的性能验证5.2.1 验证时机及验证内容淋巴细胞亚群检测项目临床开展初期、更换试剂品牌、更换检测系统或仪器的重大部件维修后，应对检测项目的精密度、稳定性、线性范围、可比性和正确度等参数进行验证。5.2.2 验证方法建议使用配套试剂盒时开展性能验证，使用自选试剂时实施性能确认:需要分别描述性能验证和性能确认的方法和评价标准。5.2.2.1 精密度5.2.2.1.1 批内精密度选取至少5个新鲜全血样品，样品的淋巴细胞亚群细胞计数应覆盖低中高水平。每个标品从荧光染色到上机检测重复3次，并确保所有测试都在同一台仪器的同一批内测定，整个操作过程由同一个操作人员完成。先计算每个样品重复3次后检测结果的CV,然后计算所有样品的平均CV，所有样品的平均C宜10%，最大不超过20%。实验室可根据不同水平的淋巴细胞亚群细胞计数设定不同程度的可接受Q标准。5.2.2.1.2 日间精密度宜使用正常和异常两个浓度水平的全血质控品，每天从荧光染色到上机测定重复操作3次，至少市复4天，整个操作过程可由不同操作人员完成。先计算每天每个全血质控品重复3次检测结果的CV值，然后据此计算每个全血质控品4天的平均CV，最后得出两个全血质控品检测结果的平均CV。结果判定同本标准第5.2.2.1.1条。5.2.2.2 稳定性5.2.2.2.1 样品稳定性验证样品在确定的抗凝及处置条件下的稳定性。采集健康人或患者的样品至少5份，即刻染色-裂晖-固定并上机测定，以此结果作为基线参考水平，按照实验室的具体环境温度控制条件和预期的样品待检时间，在抗凝剂保存时间内，设置不同的时间点对上述样品进行重复处理和上机测定，获取检测结果，并与基线水平结果进行比较以相对偏差或绝对偏差表示,检测结果应符合实验室制定的验证要求。险证要求的制定应考虑不同水平的淋巴细胞亚群计数设定不同程度的偏差值，淋巴细胞亚群计数过低者，宜以绝对偏差进行验证:亦可对试剂说明书声明的稳定性条件进行验证。5.2.2.2.2 处理后标本稳定性旨在明确处理后标本的最长待检时间。采集健康人或患者的样品至少5份，对完成染色-裂解-固定后的标本即刻上机检测结果作为基线水平。按实验室获得检测结果的最长可接受时间为期限，设置不回的时间点对固定后标本进行上机检测。结果判定同本标准第5.2.2.2.1条。亦可对试剂说明书声明的稳定性条件进行验证。5.2.2.3 线性范围适用于淋巴细胞亚群绝对细胞计数。根据试剂说明书声明的线性范围，取一份淋巴细胞计数或亚群计数接近线性范围上限的临床样品，采用样品稀释液按照比例制备5~9个不同浓度的标本(如0、25%、50%、75%、100%等)，浓度范围应覆盖临床医学决定水平:通过染色-裂解-固定后，上机测定，每个标本重复测定4次，取均值。分析实际测定的亚群细胞数量均值与理论值之间的相关性，相关系数应≥0.975。5.2.2.4 可比性5.2.2.4.1 不同检测系统间的可比性验证宜使用至少5份新鲜全血样品(样品的淋巴细胞亚群细胞计数应覆盖低中高水平)和2份不同浓度水平的全血质控品，完成染色-裂解-固定后，分别采用待评价检测系统和比对检测系统进行检测。比对检测系统应为仪器性能良好、规范开展室内质量控制、室间质量评价成绩合格的淋巴细胞亚群常规检测系统，以比对检测系统的测定结果为参考，计算相对偏差或绝对偏差。检测结果应符合实验室制定的验征要求。验证要求的制定应考虑不同水平的淋巴细胞亚群计数设定不同程度的偏差值，淋巴细胞亚群计敬过低者，宜以绝对偏差进行验证。5.2.2.4.2 抗体试剂批次变更前后的可比性验证宜使用至少3份健康人的新鲜全血样品和2份不同浓度质控品采用新批号抗体试剂和当前批号抗体试剂进行荧光染色、上机检测，以当前批号试剂检测结果为参考，计算相对偏差或绝对偏差。检测结果立符合实验室制定的验证要求,验证要求的制定应考虑不同水平的淋巴细胞亚群计数设定不同程度的偏叁值，淋巴细胞亚群计数过低者，宜以绝对偏差进行验证。5.2.2.4.3 不同检测人员间的可比性验证宜使用至少5份新鲜全血样品和2份不同浓度水平的全血质控品分别由实验室内淋巴细胞亚群检测培训合格的不同检测人员完成染色-裂解-固定、上机检测和数据分析，计算不同检测人员间检测结果的相对偏差或绝对偏差。验证结果应符合实验室制定的验证要求。5.2.2.5 其他可使用室间质评回报结果验证淋巴细胞亚群项目的准确度亦可采用包含正常和异常浓度水平的具有溯源链的定值样品验证正确度，每一样品重复测定3次，每次测量值均在给定范围内且3次测量值的均值与标准值的偏倚在允许范围内为通过。选择至少20份表观健康人样品按照常规方法进行淋巴细胞亚群参考区间验证。7.2.2 仪器稳定性验证7.2.2.1 光路/液路稳定性验证检测当天宜使用校准微球进行光路/液路稳定性验证。记录每个检测通道的分辨率的变异系数(CV)，CV值应满足本标准第5.1.2.2.2条荧光通道分辨率要求。7.2.2.2 检测通道电压稳定性验证和调整应使用标准微球进行各检测通道电压验证检测通道电压的浮动应在标准微球的说明书允许范围或者实验室自建的可接受范围内。自建方法如下:在相同的电压设置下，10~20个工作日内检测标准微球20次，使用Levy-Jennings图建立每个参数的可接受范围(均值士2SD和均值士3SD)。【3】梳理和保留了检验前、检验中、检验后过程的内容及要求(见第6、7、8章)；【4】删减了标本采集和处理及临床意义内容(见2011年版的第4、10章)；【5】增加了淋巴细胞亚群六色分析方案(见4.1.3、附录C)。以下为完整内容：本标准由国家卫生健康标准委员会临床检验标准专业委员会负责技术审查和技术咨询,由国家卫生健康委医疗管理服务指导中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委员会医政司负责业务管理、法规司负责统筹管理。本标准起草单位:中国医学科学院肿瘤医院、北京医院/国家卫生健康委临床检验中心、北京大学第一医院、中国医学科学院北京协和医院、上海市交通大学医学院附属第一人民医院、上海交通大学医学院附属新华医院、上海长征医院、苏州大学附属第一医院/江苏省血液研究所。本标准主要起草人:崔巍、彭明婷、屈晨雪、黄春梅、李莉、沈立松、周琳、朱明清、崔婵娟、李臣宾。

近日，指真生物CytoFocus系列流式细胞仪获得北京市药品监督管理局批准的二类医疗器械注册证（京械注准20212220543），该仪器同时可配置双激光四色/六色/八色的流式细胞仪。CytoFocus系列流式细胞仪标配蓝色（488nm）和红色（638nm）激光器，配置四色、六色和八色荧光通道，自动进样，操作简单，功能全面，能够覆盖临床常规开展的淋巴细胞亚群分析（TBNK）及CD4细胞绝对计数、细胞因子检测、HLA-B27检测、白血病/淋巴瘤免疫分型、中性粒细胞CD64、造血干细胞计数、精子检测和DNA倍体分析等。主要特点：配置灵活：双激光四色、六色、八色性能强大：高分析速度、高灵敏度和高稳定性高速自动：支持40个管或96孔板自动进样，最高50000events/s进样速度智能简洁：固定光路无需校正，自动荧光补偿调节绝对计数：体积法和微球法同时兼容荧光通道：高灵敏度：FITC≤30MESF、PE≤20 MESF、APC≤20 MESF高分辨率：仪器分辨率：CV＜2%配套多种细胞因子检测试剂产品特点：时间短：单次样本处理＜1小时，大大节省时间，市面上大部分试剂样本处理时间在3小时左右。自动化：采用磁性微球，使用磁力架可实现分离或后期配套使用样本前处理系统实现无手工处理，解放劳动力同时避免人为误差，市面上大部分试剂采用塑料微球无法实现后续自动化。质控品：试剂盒内包含高低质控品，市面上大部分试剂盒内不包含质控品或需要单独购买。

中国细胞生物学学会细胞死亡研究分会2021年第一届学术年会将于2021年6月2-5日在浙江桐庐海博大酒店（二楼桐庐会堂A厅）举办，此次大会由中国细胞生物学学会细胞死亡研究分会主办，浙江大学、上海市细胞生物学学会和细胞学会会展部联合承办。北京深蓝云生物科技有限公司将携带相关产品亮相在此次会议，我们将在6号展位恭候您的参观咨询。程序性细胞死亡是生物体最基本的生命活动。越来越多的证据表明程序性细胞死亡的方式具有多样性，以细胞凋亡及程序性细胞坏死为代表的多种细胞死亡方式广泛参与生物体发育和疾病过程，并扮演不同的角色。全面系统的研究多种细胞死亡方式，能够推动对不同细胞死亡方式机制的深入了解，为细胞死亡相关疾病的临床诊治提供重要依据。详情请登录：https://www.cscb.org.cn/meeting/celldeath2021/查看。细胞死亡实时形态学监测全电动化解决方案Revolution正倒置一体电动化智能显微成像系统☑ 电动化智能程序：电动追焦，锁焦，多点样品导航和重访。☑ 高清晰全景图像： 双sCMOS相机，多焦面叠加，多视野整合，多维成像。☑ HYPERSCAN高速：同步无刷直线伺服电机和相机，数秒钟完成全景扫描。☑ 卓越的光学性能：大视野，大景深，多物镜、多荧光立方可选。☑ 一体化机身结构：正倒置一体，全能型显微镜，方便安放和运输。☑ 人性化数据交互：互联网+现场和远程实时共揽、延时摄影和图像分享。细胞死亡信号通路及激活和抑制因子数字PCR解决方案naica全自动微滴芯片数字PCR系统数字PCR技术(Digital PCR)无需标准品和标准曲线即可对起始样品中靶标核酸进行绝对定量。深蓝云展台产品展示naica下一代数字PCR平台naica全自动微滴芯片数字PCR系统，以Sapphire芯片（全自动）或Opal（高通量）芯片为耗材，形成由25,000-30,000个微滴组成的单层二维阵列，该单层微滴阵列形成后直接进行PCR扩增实验。反应完成后对微滴进行三通道成像，从而对起始核酸浓度进行绝对定量。仅需2.5小时即可获取结果。▲ naica微滴芯片数字PCR系统Echo正倒置一体显微镜Echo正倒置一体显微镜兼具正置和倒置显微镜的功能，方便小巧，一机多能，可以非常便利地通过旋转实现正倒置配置的切换；无传统目镜设计，拥有明场，相衬，荧光，偏光等观察方式，可兼容活细胞观察，病理切片，免疫组化，免疫荧光，荧光原位杂交等。▲ Echo正倒置一体显微镜Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，配备高品质温度模块，采用光纤和CMOS的检测系统，高能LED的激发，提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统深蓝云生物科技将携带相关产品亮相此次大会，恭候您的参观咨询！与您不见不散——展位：6号

文章来源：中华检验医学杂志, 2022,45(8) : 790-801作者：中国中西医结合学会检验医学专业委员会摘要嵌合抗原受体（CAR）-T细胞免疫治疗是近年来肿瘤治疗领域一个举世瞩目的重大成果。流式细胞术（FCM）在CAR-T细胞免疫治疗相关检验的每一个步骤中都起到非常重要的作用，包括靶点筛查、CAR-T细胞产品成分鉴定、毒性预估、微小残留病（MRD）检测、免疫功能评价、免疫微环境研究等。为了深刻认识FCM在CAR-T细胞免疫治疗这一新兴领域的作用，规范每一项应用中的操作，进一步促进其在CAR-T细胞免疫治疗中的应用，中国中西医结合学会检验医学专业委员会制定了此专家共识。嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）-T细胞免疫治疗是近年来肿瘤治疗领域一个举世瞩目的重大成果［1, 2, 3, 4, 5, 6, 7］，尤其是CD19-CAR-T细胞免疫治疗难治复发B细胞急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）获得了90%左右的缓解率［1, 2, 3］，单独使用或者桥接异基因造血干细胞移植均极大程度地提高了患者的完全缓解率和生存率；CAR-T细胞免疫治疗其他类型白血病、淋巴瘤、骨髓瘤以及实体瘤也在不断探索并取得巨大进步［4, 5, 6, 7］。流式细胞术（flow cytometry，FCM）在CAR-T细胞免疫治疗相关检验的每个步骤中都起到非常重要的作用 ［1, 2, 3, 4, 5, 6, 7］。作为一项免疫治疗，CAR-T细胞免疫治疗相关检验中涉及的FCM与临床常规不同，体现在靶点评估需要精确设门并且同时关注正常细胞的表达，CAR-T细胞免疫治疗后微小残留病（minimal/measurable residual disease，MRD）需要考虑靶点丢失以及输入的CAR-T细胞影响，而CAR表达细胞比例和数量的检测以及免疫相关检测均缺乏规范化，给临床工作带来不确定性等。为了能使更多相关领域的科研、临床和实验室检测人员认识FCM在CAR-T细胞免疫治疗中的作用和注意事项，规范在每项检验中的实验方案和技术操作，进一步促进其在CAR-T细胞免疫治疗中的应用，中国中西医结合学会检验医学专业委员会组织专家结合文献学习和多家医疗机构的临床工作实践制定了本专家共识。适用范围、术语和定义一、适用范围各类医疗机构临床实验室、商业化实验室和科研单位在使用FCM进行CAR-T细胞免疫治疗相关临床检验时，均可采用或参照使用本专家共识。鉴于CAR-T细胞生产过程中的创新性和复杂性，并且该步骤极少在临床诊断实验室中进行，本共识不涉及此研发过程。二、术语和定义1.多参数流式细胞术（multiparametric flow cytometry，MFC）：虽然MFC的术语出现于20世纪80年代，当初指代两色以上FCM，后期对此也没有明确定义，但是现在普遍建议采用三激光八色或者以上机型。2.CAR-T细胞免疫治疗：人体免疫细胞（来自自体或异体均可），在体外经过基因修饰后具备了特异性识别和杀伤表达特定抗原的肿瘤细胞的能力，输入患者体内以实现清除肿瘤细胞或者其他病态细胞的免疫治疗方法［1, 2, 3, 4, 5, 6, 7］。CAR-T细胞免疫治疗技术包括几个步骤：（1）从患者或者供者血液中分离出自体或者异体T淋巴细胞；（2）用CAR编码的病毒载体进行体外修饰、培养；（3）最后输入患者体内。近年来为了增强治疗效果降低副作用，已发展到第4代CAR-T细胞免疫治疗技术。3.细胞因子：细胞因子是由多种免疫细胞分泌的一类小分子蛋白质，具有介导和调节免疫过程等作用。目前已经发现的人类细胞因子有200多种。根据结构和功能一般可分为白细胞介素（interleukin，IL）、干扰素（interferon，IFN）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、集落刺激因子、趋化因子和生长因子等。4.细胞因子释放综合征：细胞因子释放综合征（cytokine release syndrome，CRS）是一种发生在任何免疫治疗后，由于内源性或者输注的T细胞和/或其他免疫效应细胞活化或者聚集导致的超生理反应。症状多样，但是必须包括初发时发热，可能伴有低血压、毛细管渗漏（低氧）和终末器官衰竭。尽管没有将细胞因子检测纳入定义，而CRS分级也主要是根据临床表现，但是鼓励进行C反应蛋白、细胞因子、铁蛋白等相关检测，便于为将来的研究提供依据［8］。5.趋化因子及其配体：趋化因子是能使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子，其配体很多是免疫功能检测中区分淋巴细胞亚群的重要标志物，例如半胱氨酸-半胱氨酸基序趋化因子受体（cysteine-cysteine motif chemokine receptor，CCR）系列，半胱氨酸-氨基酸-半胱氨酸基序趋化因子受体（cysteine-X-cysteine motif chemokine receptor，CXCR）系列［9］。6.抗原表达率：精确设门后，特定细胞上抗原表达的百分比。临床工作中由于受到抗体和荧光素选择、抗原抗体结合过程、温度光照和放置时间导致荧光信号改变、仪器设置、设门精确度、个体差异、细胞异质性、对照细胞群、检测目的等多种因素影响，以诊断为目标的临床实验室，一般由流式操作人员排除各种影响因素后，按照表达、部分表达、不表达进行定性描述［10］，以方便临床和实验室对目的细胞群进行简单直观的性质判断。7.抗原表达强度：与某种抗原分子在细胞上表达量的多少有关，FCM的直观体现为荧光强度。根据抗原表达强度将阳性细胞表达分为强表达（bright，bri）、中等强度表达、弱表达（dim）和异质性表达［10］，可能会随着治疗和疾病或者活化状态发生改变。8.单链可变区片段（single-chain variable fragment，scFv）：构建CAR-T细胞需要将CAR基因通过病毒载体或非病毒系统转染并整合到T细胞基因组上。CAR基因正常表达时，形成跨膜的CAR结构，细胞外域的重链可变区和轻链可变区通过15~20个氨基酸短肽连接而成的部分即为scFv。编码的scFv元件既是CAR-T细胞识别肿瘤抗原的重要成分，也可作为FCM评价CAR表达情况的检测靶点之一。9.同型阴性对照：用于检测抗体与细胞表面可结晶段受体非特异性结合导致背景信号的阴性对照。应该用与检测抗体相同标记、同种属来源、相同亚型、相同浓度的免疫球蛋白进行染色，如果是间接标记抗体，还需要做二抗的荧光素背景对照，其作用是设置仪器条件，消除背景染色。对于正常标本中不存在的未知标志或者与阴性细胞界限不清的标志，或者标本中比例极低需要精确检测的标志，同型阴性对照是普遍采用的对照。CAR-T细胞免疫治疗相关检验中的FCM项目CAR-T细胞的生产研发、临床治疗每个环节都与FCM检测密不可分，包括靶点筛查、患者选择、CAR-T细胞成分鉴定、毒性预估、MRD检测、回输物和患者标本免疫功能评价、免疫微环境和复发机制研究等。鉴于CAR-T细胞治疗这一全新领域集合了肿瘤细胞和正常细胞免疫表型、肿瘤干细胞免疫表型、免疫细胞亚群、细胞因子检测、CAR-T细胞检测、因部分病例靶点丢失甚至系别转变导致需要调整方案的FCM MRD检测、肿瘤异质性和免疫微环境检测等（表1），以及CAR-T细胞治疗设计的多样性和复杂性、临床工作中使用不同靶点或者联合靶点CAR-T细胞治疗、使用其他细胞因子或者信号分子靶向药物控制副作用等，这些都对FCM检测提出更高的要求。因此深入了解每个环节需要使用的标本类型、检测方案以及最低检测要求，将有助于进一步规范检测流程，提高检测水平，保证检测质量。FCM在CAR-T细胞免疫治疗靶点筛查中的应用随着CAR-T细胞治疗技术的不断完善，CAR-T细胞的功能和治疗的安全性都有了很大提升，并有CAR-自然杀伤（natural killer，NK）细胞、双特异性靶点CAR-T细胞等类似靶向细胞免疫治疗产品出现。但是作为特异性免疫治疗，胞外抗原识别区的设计，尤其是有效靶点的选择始终是每一种CAR-T细胞治疗相关产品的关键环节。理想的靶点应该满足下述要求：高覆盖率（某种疾病的群体中，肿瘤细胞表达该抗原的患者比例高）、高表达率（阳性个体中几乎所有肿瘤细胞都表达）、高表达强度（在肿瘤细胞表面抗原分子数量多，表现为同一种荧光标记时，荧光强度高）、高特异性（在正常细胞中不表达或者少表达，对患者不会造成严重影响）［11］。FCM作为一项快速、简便、直观、定性定量的技术，是目前实现这一目的的重要检测手段，而CAR-T细胞治疗靶点的选择虽然都是在免疫分型或者MRD的基础上进行，但是比常规临床诊断有更严格的特殊注意事项［12, 13］。一、正确设门评价肿瘤克隆在2021年中国的《急性白血病系别判断的流式细胞免疫分型专家共识》［10］中已经对检测方案和设门方法作出明确推荐，对于肿瘤负荷（肿瘤占有核细胞比例）、肿瘤细胞免疫表型分析、精确设门识别小克隆肿瘤细胞，建议参考此共识。需要指出的是：（1）在CAR-T细胞治疗时代之前，免疫分型的主要目的是诊断，故出于性价比考虑和仪器条件所限，只要肿瘤为单一克隆，抗原表达的判断多为阴性阳性的定性检测，大多数标志无需给出明确的百分比数值；（2）临床工作中，由于流式细胞仪检测通道数量的限制，每个抗体组合可使用的抗体数量有限，为了尽可能在相同数量抗体的情况下获得更多临床信息，一些实验室的免疫分型方案除了CD45以外，不重复使用其他设门抗体；（3）这种普遍使用CD45/侧向角光散射（side scatter，SSC）设置肿瘤细胞门的方法，因为CD45弱表达（dim）、SSC小的区域本身就包括NK细胞、嗜碱性粒细胞、正常髓系原始细胞、正常增生B祖细胞、树突状细胞、幼稚单核细胞、浆细胞、部分有核红细胞等，导致设门精确度有限，尤其是参数较少的机型。在做不到使用标志精确设门的情况下，抗原表达的描述必然是定性的。因为目的不同，最低要求也不同。以临床诊断为目的的普通免疫分型，采用设门精确度不影响诊断即可接受的方法；而CAR-T细胞治疗时代的到来，对于设门的精确度提出了更高的要求：（1）虽然现在还缺乏靶点表达率和表达强度对于缓解率和长期存活率影响的数据［13］，但是在临床治疗的初期，希望通过选择最理想的靶点准确评价CAR-T细胞治疗效果，建议临床治疗团队与FCM团队沟通，明确告知靶点筛查目的并调整方案；（2）在全面诊断结果出来之前，肿瘤性质、存在的恶性克隆数量及精确抗原表达情况、最能够准确定义全部肿瘤细胞群的标志或标志组合（精确设门）都是未知的，只能根据覆盖大多数疾病的理念设计方案，这种方案对于CD19、CD7等在B-ALL和T-ALL中覆盖高的系别标志尚可，但是对于急性髓系白血病、淋巴瘤、实体瘤等，由于特殊靶点在每个患者肿瘤细胞群上表达存在异质性［12，14］，可能达不到精确设门要求，需要在免疫分型基础上后续进行靶点评价；（3）CAR-T细胞治疗后复发的病例，存在更大的异质性［15］，因此靶点筛查工作会根据实验室情况和诊疗过程分层次进行。共识1：CAR-T细胞免疫治疗靶点筛查与常规诊断检测目的不同，临床需要与实验室沟通告知检测目的，在临床常规免疫分型或者MRD检测的基础上，通过精确设门来准确评价潜在靶点抗原在肿瘤细胞群的表达。推荐强度：强烈建议。二、正确评价肿瘤细胞中抗原表达的百分比和表达强度目前的研究和临床应用，因为需要准确评价CAR-T细胞治疗靶点针对的肿瘤细胞，建议应在精确设门定义肿瘤细胞群之后，对潜在靶点进行定量分析。而这个定量，既包括了抗原表达的百分比，也包括表达强度。虽然目前还没有关于CAR-T细胞治疗靶点的表达百分比和表达强度的适合区间要求，而且鉴于FCM检测的多种影响因素，可能在今后一段时间内也无法作出统一要求，但是为了使研究工作规范化，从FCM角度尽可能提供客观评价，建议：（1）医疗机构（最好扩大到多中心合作研究），尽可能采用相同的方案，至少关键抗体和组合采用相似方案，包括抗体的克隆号和荧光素以及主要设门和配伍标志。（2）鉴于行 CAR-T细胞免疫治疗的患者，往往是MRD阳性的难治复发病例，免疫表型可能会随着治疗发生改变［14］，建议在CAR-T细胞回输前对免疫表型再次进行严格评价确认。（3）关于潜在靶点的表达率评价，在精确设门的基础上，强表达和中等强度表达的抗原，因为阳性细胞和阴性细胞之间有明确的界限，相对好评价；弱表达或者异质性表达抗原可能不适合采用表达百分比的方式，暂时可以采用目的细胞中位荧光强度（median fluorescence intensity，MdFI）和对照MdFI比值（MdFI ratio，MdFIR）的方法［16, 17］。（4）CAR-T细胞治疗靶点筛查报告应尽可能包含丰富的实验数据，为临床靶点筛查分级和毒副作用预判提供实验数据支撑，建议提供：①肿瘤细胞的靶点抗原表达率、表达强度；②阴性对照或者阳性对照（如果有）、肿瘤细胞的MdFI，以及MdFIR等。为了更加精确地比较抗原表达强度，对目的细胞上抗原表达进行量化会更有助于CAR-T细胞免疫治疗靶点的研究。但是目前由于技术所限，极少有实验室采用荧光定量微球进行绝对定量检测，大多数采用仪器自动生成的MdFI或者平均荧光强度。使用的时候应注意，MdFI值依赖每个实验室的仪器和试验条件设置，因此需要检测过程的标准化和对仪器的校准。有的研究中心采用与同型对照或者阴性内对照细胞MdFIR的方法，可在一定程度上缩小差异，但是不能替代FCM检测的规范化、标准化，并且需要确定阴性细胞的一致性［17］。共识2：为了尽可能给CAR-T细胞免疫治疗提供客观评价，建议一项研究或治疗过程中尽量采用相同的方案，至少是关键抗体和组合相似的方案。同一患者的随访监测尽量在同一台仪器上进行，且尽量仪器条件（包括补偿）相同，或者进行仪器间条件比对。推荐强度：建议执行。共识3：在CAR-T细胞回输前对靶点在肿瘤细胞的表达情况进行严格评价：强表达和中等强度表达的抗原，在精确设门基础上采用百分比的报告方式；弱表达或者异质性表达抗原不建议采用表达百分比的方式，可以采用目的细胞和对照细胞MdFIR方法。采用MdFI和MdFIR时注意仪器校准。推荐强度：建议执行。三、背景细胞的表达评价涉及CAR-T细胞治疗的毒副作用靶点筛查还包括抗原特异性的评价，即该标志物在正常细胞表达情况。理想靶点是只特异性表达于肿瘤细胞，或者在正常细胞的表达率低，或者这些细胞的功能可以被其他细胞或者药物替代。虽然目前除了B细胞相关抗原CD19、CD20、CD22，几乎没有抗原是绝对特异和表达率低的，但是现代基因修饰改良技术在逐渐克服这个问题，如基因敲除CD7-CAR-T细胞的出现［18］，而此过程中FCM功不可没，因为通过FCM精确分析各种潜在靶点在不同细胞上的表达情况，才能预测毒副作用。选择直接的理想靶点，或者让一些特异性差的靶点通过基因修饰技术改良而降低副作用从而满足临床需要，建议将这些信息在靶点筛查报告中也予以体现，至少以彩色图片方式。共识4：在评价肿瘤细胞的同时，应该评价CAR-T细胞免疫治疗靶点标志在正常细胞表达情况，未知新靶点筛查尤其需要抗原特异性信息，建议在靶点筛查报告中予以体现，至少以彩色图片方式。推荐强度：建议执行。MRD相关检测由于肿瘤适应性和脱靶效应的存在，CAR-T细胞治疗后的MRD检测难度增加，最重要的就是设门标志的选择和认识靶点阴性的正常细胞。一、设门标志的选择及检测方案的修订CAR-T细胞治疗之后，经过长度不等的消减期，靶点表达细胞会逐渐恢复，但是也存在正常或者肿瘤细胞靶点阴性的情况。因此CAR-T细胞治疗后的MRD检测时需要注意，如果是靶点为CD19、CD7等设门相关系别标志，需要增加设门抗体。以CD19-CAR-T细胞治疗后MRD检测为例：（1）需要增加B细胞设门标志，因为13%~60%的B-ALL病例在CD19-CAR-T细胞治疗后会出现肿瘤细胞CD19全部或者部分表达丢失或者减弱，导致CD19设门方法可能会漏诊［3，19］；（2）关于增加设门标志的选择，有的实验室选择CD22+和/或CD24+/CD66b-，但是B-ALL有10%~20%的病例不表达CD24［20］。而现在随着CD22-CAR-T细胞单独或者联合CD19-CAR-T细胞的应用越来越广泛［21］，加上CD22在幼稚细胞弱表达而后随着细胞的成熟表达逐渐增强，都决定了CD22可能更加适合于靶点筛查，不适合作为设门标志；（3）从覆盖最完整的B细胞群角度考虑，胞浆CD79a是CD19以外作为B细胞设门的相对理想选择［3］；（4）关于B-ALL MRD的其他标志选择，经过多年发展已有比较成熟的经验，一般选择CD38/CD10/CD34/CD19/CD20/CD45（和CD81和/或TdT等）［3，20］，方案详见表2。二、免疫表型与观察方法的改变选择cCD79a设门时需要注意：（1）破膜处理会导致SSC和部分抗原表达强度发生改变，如SSC和CD45的细胞间差距缩小，导致CD45/SSC组合CD45/CD19以及其他涉及CD45dim和SSC增大的组合效率降低，提高MRD检测难度；（2）认识CD19-的正常B祖细胞免疫表型，与常见的CD19+B祖细胞不同，这群细胞多为CD34+的最早期阶段，CD10表达减弱，SSC偏大，在不熟悉的情况下极易误诊为MRD［3，20，22］；（3）CD19-B祖细胞正常情况下也存在，但是因为大多数比例极低，加上使用CD19设门，所以容易被忽视。使用CD19-CAR-T细胞治疗之后，CD19+B祖细胞比例显著降低，导致CD19-B祖细胞比例相对升高，加上设门方式的改变，以及对CD19-B祖细胞的关注，使得这群细胞变得明显。鉴于肿瘤细胞的异质性在CAR-T细胞治疗之后进一步加剧，即便使用替代设门标志，仍会因标志表达减弱或者脑脊液标本不适合使用胞浆标志等原因给检测带来困难。因此应该充分利用每一个标志进行多重标志设门，如B-ALL MRD检测中使用SSC/CD10、SSC/CD34、SSC/TdT等，T-ALL中使用CD99bri/SSC、cCD3/CD45dim、CD5/CD45dim、CD34和/或CD1a/SSC、TdT/SSC等，多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）使用CD229/CD45dim、CD138/CD45dim等；CSF标本正常不存在CD45dim/SSC小/CD10+和/或CD34+/CD38+细胞，因此采用CD34和/或CD10和/或CD38组合CD45设门的方法，结合CD22表达进行鉴定。此外，还应注意ALL患者CAR-T细胞治疗后可能发生髓系转换［15］。CD7-CAR-T细胞免疫治疗后，因回输物与疾病属于同一系别，可能因回输细胞或者反应性细胞与正常细胞表型不同而影响MRD检测。三、检测时间点研究发现，CAR-T细胞治疗后靶点表达细胞在1~3个月开始恢复［1, 2, 3，18，20, 21, 22］，如果除了CAR-T细胞治疗之外没有其他治疗措施，骨髓标本的检测时间最好为前6个月内每月1次，至少前6~12个月内每3个月1次；外周血至少为前6个月内每月1次［2］；因为CAR-T细胞会进入CSF，因此建议使用FCM进行CSF的MRD和CAR-T细胞检测，时间点酌情选择［2］。共识5：鉴于CAR-T细胞免疫治疗后靶抗原丢失率高，建议增加相似覆盖率的替代设门标志物，联合使用2个及以上重要系别标志分别设门分析，并结合使用原始标志设门分析。注意CAR-T细胞免疫治疗后靶点阴性正常细胞的表型变化。推荐强度：强烈建议。共识6：CAR-T细胞免疫治疗后复发不只限于骨髓，建议CSF或者其他可取材的受累组织都应该进行MRD检测。骨髓标本的检测时间点至少为前6~12个月内每3个月1次；外周血至少为前6个月内每个月1次；CSF标本酌情检测。推荐强度：强烈建议。免疫功能相关检测广义的免疫功能检测包括所有免疫相关细胞亚群的组成比例、数量、表型及功能检测：（1）CAR表达细胞比例、绝对数以及组成成分；（2）淋巴细胞和其他免疫细胞亚群检测；（3）非常规检测或者可以由其他技术完成的检测，如免疫抑制信号和细胞因子检测等。其中既有组合同时进行检测，也有分开进行检测，这主要由检测时间点和CAR表达细胞的比例与计数决定。一般临床试验初期摸索条件时，检测参数相对较多，时间点也相对较为密集；摸索到相应规律后，根据变化规律及临床表现，选择重要的时间点进行检测，而不同时间点的检测指标也会有差别；针对CAR-T细胞回输物质量鉴定，或者在CAR-T细胞治疗早期CAR表达细胞比例相对较高、绝对数较高时，检测的指标会相对全面，后期比例降低、细胞数减少，检测的指标会相对简单；患者CAR-T细胞输注周期中，早期变化较大较快，检测点也相对密集，后期变化延缓，检测间隔拉长。一、CAR表达细胞的检测FCM检测目的多样，因此从方案设计到检测结果，都需要根据相应目标进行沟通调整，才能在现有条件下获得尽可能精确的结果，从靶点筛查到CAR表达细胞比例和绝对数及组成成分检测皆如此［11，23, 24］。（一）CAR表达细胞检测抗体目前，绝大多数CAR-T细胞治疗处于实验室开发和临床研究阶段，出于设计和工艺的多样性和创新性，以及FCM仪器、荧光素以及成本所限等原因，还不能作出适用于所有类型CAR表达细胞的统一性实验方案，尤其是针对CAR表达细胞的比例和绝对计数检测，还没有通用的商品化抗体。但是抗体使用的基本原则相同，即在同一研究（尤其是多中心研究，尽可能包括更多的类似研究）的全过程中应该尽量保持一致，以便更好地对比在生产和使用的不同阶段产生的结果。例如：从生产到临床治疗过程中，最好使用相同的试剂、荧光素、对照，以及相似的方案；对于结果判读也应事先沟通和培训，统一数据分析标准，如设门原则等，尽可能采取一致性原则；对于少数有疑问的病例，应共同讨论研究［23, 24］。在CAR-T细胞检测中，最关键的就是检测CAR表达细胞的抗体，可选择的试剂类型包括抗scFv独特型的单克隆抗体、靶点融合蛋白抗体、重组蛋白L和抗标签单克隆抗体［24］。各类试剂各有优缺点，基本上都由CAR-T细胞研发公司特制提供给检测单位。由CAR-T细胞研发公司和定制抗体生产商负责对抗体的特异性、交叉反应性、稳定性、纯度和荧光素进行评价，并做染色方法的线性范围、准确度、专属性、重复性、精密度和耐用性等质量控制，从而保证可靠标记和每一批次的CAR表达细胞检测抗体具有良好的稳定性。如有商业化的抗体或蛋白，尽量采用商业化试剂。对于临床实验室的建议：（1）鉴于CAR属于未知抗原，缺乏正常细胞作为内对照，因此建议使用同型阴性对照（必要时增加未经改造的细胞作为阴性对照）［23, 24］；（2）在建立试验方案初期，要求CAR-T细胞制造方提供阳性对照和阴性对照，尤其是CAR阳性细胞的表达强度不能达到中等和/或强表达的时候，或者与对照相比染色背景显著提高时；（3）尽可能选择PE、APC这种亮度较高、受温度光照影响较小的单纯荧光素，并且同一研究尽量避免更换荧光素；（4）尽量采用荧光素减一（fluorescence minus one，FMO）的方案排除补偿影响；（5）进行抗体的批间检测：更换抗体批号时，应该对新旧批号抗体进行MdFI或者平均荧光强度对比，建议新旧批号抗体配对比较不少于5组，变异系数控制在25%以内［24, 25］。共识7：从生产到临床治疗过程中，最好使用相同的试剂、荧光素、对照以及相似的方案，对于结果判读也应事先沟通和培训，尽可能采取一致性原则，对于少数有疑问的病例，应共同讨论研究。推荐强度：强烈建议。共识8：CAR表达细胞属于未知抗原检测，建议使用合适的阴性对照，并在建立试验方案初期，使用阳性对照；尽可能选择PE、APC荧光素，并且同一研究尽量避免更换荧光素；尽量采用FMO的方案排除补偿影响；建议进行抗体批间检测。推荐强度：建议执行。（二）检测时间点多项临床试验数据显示，体内CAR-T细胞增殖与疗效显著相关［1，13，18, 19］，因此，检测体内CAR-T细胞增殖情况是评估疗效的重要指标之一；并且还能辅助诊断治疗后早期多种急性毒副作用［8，26, 27］。因此规律性检测CAR-T细胞很重要。检测时间点与CAR-T细胞治疗方案有关，每个研究大同小异，主要包括：CAR-T细胞制备后回输前的质量检测，CAR-T细胞回输后体内追踪（不同研究时间点有差异，例如4、7、14、28 d，2、3、6个月）。鉴于FCM检测CAR-T细胞的灵敏度为10-3（目的细胞数/单个核细胞数），在连续2次检测不到CAR表达细胞后可以停止检测。有的患者可能随访两年分子遗传学方法依旧能够检测到［23, 24，28］。（三）方案设计与获取细胞数FCM（尤其是3激光8色及以上的MFC）检测CAR表达细胞，虽然灵敏度可能低于分子遗传学技术［28］，但是优势很大：（1）快速简便低成本；（2）多色和设门技术可以清楚标记出CAR表达细胞亚群，如CD4、CD8以及记忆T细胞的表型，并能进行绝对计数；（3）可以发现混杂的MRD细胞；（4）能够检测到表达CAR的B细胞以及通过对回输物中其他细胞的评价进行质量检测［9，15］。缺点是缺乏标准化，尤其是对于CAR表达细胞的检测，因此需要专家共识加强标准化进程。方案设计包括抗体与荧光素的配对（最基本的原则是识别抗原表达强度低、比例低或者未知细胞表达的抗体，尽量选择PE、APC等亮度较高的荧光素），而CAR表达细胞比例和绝对数决定了方案的复杂程度。设计目标需要明确区分表达CAR的T细胞基本组成与可能表达CAR的其他细胞，低比例或者低细胞数的时候尤其需要排除非特异性染色［2，4，6，9，23, 24］。实际工作中，虽然可能受到条件限制，但是最简单方案应包括CAR检测抗体、CD3、CD8（或者CD4）、靶点（例如CD19-CAR-T细胞选择CD19，CD7-CAR-T细胞选择CD7）。相对优化的方案建议包括：CAR检测抗体、CD3、CD4、CD8、CD14、CD19（CD7-CAR-T细胞增加CD7）、CD56、CD45（表2），用以区分T、B、NK和单核细胞。回输物检测和回输后CAR-T细胞增殖高峰时，因为细胞量相对较大，以及CAR表达细胞比例相对较高，可以做比较全面的检测，即同时加CD45RA和CD197（图1），可选择CD95、CD45RO、CD62L、CD27 等用以区分CAR-T细胞的功能性亚群。最新研究表明，CAR-T细胞治疗疗效与T细胞成分（CD4、CD8）、功能（初始、记忆、效应）、活化（表达活化标志）和其他状态有关，利用FCM测定亚群有助于鉴定细胞产品的潜能［29, 30, 31, 32］。图1 流式细胞术检测经CD19-嵌合抗原受体（CAR）-T细胞免疫治疗7 d后B细胞急性淋巴细胞白血病患者外周血CAR-T细胞［A为活细胞门（live）内所有细胞群；B为淋巴细胞（lym）同型对照（con）表达图；C为淋巴细胞（lym）CAR表达图；D为检测管各群细胞占比及中位表达强度；E为淋巴细胞门内B细胞（B）占比；F为淋巴细胞门内NK和T细胞占比；G为淋巴细胞门内CD4+T细胞和CD8+T细胞占比；H为CAR阳性细胞中TN、TEM、TCM、TEFF细胞占比；TN为初始 T 细胞，TCM为中心记忆性T细胞，TEM为效应记忆性T细胞，TEFF效应性T细胞；CAR表达细胞占淋巴细胞比例为86.33%，主要为CD3+T细胞，57.34%为CD4+T细胞，40.60%为CD8+T细胞。未见明显B细胞和自然杀伤细胞成分（0.1%）；图片上方显示逻辑设门］此外，来自自体成分的CAR-T细胞，虽然大多数肿瘤细胞会在体外培养过程中死亡，但是极少数病例的肿瘤细胞依旧存活，甚至脱靶存活。因此在体外培养后回输之前，如果发现可疑细胞（例如CD19-CAR-T细胞出现CD19+细胞，或者CD19-/CD45dim的原始细胞），应进行严格的MRD检测［2，9］，方案同CAR-T细胞免疫治疗后MRD检测（表2）。CAR-T细胞回输前质量鉴定时，可以采用单平台或者双平台方法进行CAR-T细胞的绝对计数，质量控制参考CD34+造血干细胞计数［25］，获取细胞数最好20万以上。而回输后检测患者标本时，尤其是在大多数时间点可能因为CAR表达细胞频度极低，建议参考MRD检测要求，最好获取100万细胞，即便处于细胞减少阶段，也建议最低获取10万细胞［9，24］。共识9：方案设计的目标为：明确区分表达CAR的细胞组成，以及其他细胞残留情况，尤其是MRD细胞。最低检测方案应包括CAR检测抗体、CD3、CD8（或者CD4）、靶点（例如CD19-CAR-T细胞选择CD19，CD7-CAR-T细胞选择CD7），相对优化的方案建议包括：CAR检测抗体、CD3、CD4、CD8、CD14、CD19（CD7-CAR-T细胞增加CD7）、CD56、CD45。如果细胞比例和计数允许，最好进行CAR-T细胞功能性亚群的组成检测。推荐强度：建议执行。共识10：来自自体成分的CAR-T细胞，在体外培养后回输之前，如果发现可疑细胞（例如CD19-CAR-T细胞出现CD19+细胞，或者CD19-原始细胞），应进行严格的MRD检测，方案同CAR-T细胞免疫治疗后MRD检测（表2）。推荐强度：强烈建议。共识11：CAR-T细胞回输前质量鉴定时，可以采用单平台或者双平台方法进行CAR-T细胞的绝对计数，获取细胞数最好20万以上；回输后检测患者标本时，最好获取100万细胞，至少获取10万细胞。推荐强度：强烈建议。二、常规免疫功能检测CAR-T细胞治疗后期随访中，随着CAR表达细胞比例降低到FCM检测阈值以下，或者桥接移植后，绝大多数时间点随访的是常规临床免疫功能检测，如淋巴细胞、粒细胞、单核细胞占有核细胞比例，T细胞、B细胞、NK细胞占淋巴细胞比例和绝对数，T细胞亚群中CD4和CD8占比，以及调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）的检测。部分实验室会在此基础上增加CD28、CD45RA（和/或CD45RO）、CD197（和/或CD62L）、CD95、CD122等进一步区分功能性亚群，如初始T细胞（naive T cell，TN）、中心记忆性T细胞（central memory T cells，TCM）、效应记忆性T细胞（effector memory T cells，TEM）、效应性T细胞（effector T cells，TEFF）［29, 30, 31, 32］，甚至有的研究包括干细胞记忆样T细胞（stem cell memory-like T cells，TSCM），因为发现TN、TSCM和TCM表型与更长的体内持久性和更高的抗肿瘤疗效相关［33］。有的研究增加CD38、HLA-DR（可选择CD25、CD69等）检测活化信号，CD183（CXCR3）、CD196（CCR6）检测辅助性T细胞（T helper，Th）亚群等。不同实验室可能采用不同的指标来定义各功能性亚群，注意参加同一个多中心研究的各实验室需采用相同的定义；此外，注意冻存细胞的CD197和CD62L表达可能会减弱或者丢失［29, 30, 31, 32］。临床基本的淋巴细胞亚群是基于CD3、CD4、CD8、CD16+CD56、CD45、CD19的T、B、NK比例和绝对计数检测［34］，CAR-T细胞治疗涉及的常规免疫功能检测目前尚无规范化要求，建议包括Treg、TN、TCM、TEM和TEFF的检测，最好包括TSCM。推荐方案见表2。CAR-T细胞治疗后免疫功能改变因为不同研究差异很大，CD19-CAR-T细胞治疗弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma，DLBCL）的研究［34］发现2年后依旧有29%的缓解患者CD4+淋巴细胞计数低于200/μl，因此建议部分患者需要长期随访。共识12：CAR-T细胞免疫治疗后期随访中，绝大多数时间点随访的是常规临床免疫功能检测。至少包括如淋巴细胞、粒细胞、单核细胞占有核细胞比例，T细胞、B细胞、NK细胞占淋巴细胞比例和绝对数，T细胞亚群中CD4和CD8占比，建议包括Treg、TN、TCM、TEM和TEFF的检测。推荐方案见表2。推荐强度：建议执行。三、可选择性的免疫相关检测（一）免疫检查点和免疫抑制微环境检测CAR-T细胞治疗最大的问题就是耐药和复发［1, 2, 3, 4, 5, 6, 7］，涉及多种复杂机制，其中免疫抑制信号和免疫微环境的研究是近年来关注重点［11, 12, 13，15］：（1）T细胞耗竭，效应细胞降低，抑制性受体表达增加。外周血中靶点表达细胞恢复是CAR-T细胞功能减弱的一个信号，CAR-T细胞耗竭是其中因素之一，有研究中将CD279［程序性细胞死亡蛋白1（programmed cell death protein 1，PD1）］、CD223（淋巴细胞活化基因3）、CD152（细胞毒性T淋巴细胞抗原4）、CD366（T细胞免疫球蛋白和黏蛋白域蛋白-3）等耗竭相关信号纳入CAR-T细胞检测方案，希望找到相关性，从而通过PD1单抗等靶向药物解除抑制信号，获得长期缓解。（2）免疫老化，年龄相关T细胞质量。随着免疫年龄和免疫老化学说的提出，以及研究发现年龄相关CAR-T细胞表型，研究中也开始将免疫老化相关信息标志纳入。（3）其他拮抗CAR-T细胞功能的信号研究。CD19阴性复发时肿瘤细胞可能会高表达CD123，使用CD123-CAR-T细胞治疗可能有效；可能与抗凋亡信号B细胞淋巴瘤2（B cell lymphoma-2，bcl-2）表达增强有关，监测肿瘤细胞bcl-2，高表达患者使用bcl-2拮抗剂治疗也许有效。（4）抑制性骨髓微环境，髓系来源抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSC）、肿瘤相关巨噬细胞、Treg抑制了CAR-T细胞增殖与功能，通过FCM检测这些抑制性骨髓微环境，可以有助于CAR-T细胞治疗机制研究。共识13：CAR-T细胞免疫治疗后复发机制复杂，通过FCM方法进行T细胞耗竭、免疫老化、拮抗信号、抑制性免疫微环境的检测，可能有助于机制研究和探索进一步治疗。方案见表2。推荐强度：仅供参考。（二）细胞因子相关检测由于CAR-T细胞工艺和细胞来源不同，可能会产生不同的细胞因子，如外周血总CD3+T细胞来源的CAR-T细胞可能会导致多种细胞因子生成，CD4+T细胞相关因子有：IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-17，而分选CD8+T细胞来源的CAR-T细胞主要生成IFN-γ、TNF-α、穿孔素和颗粒酶B。CAR-T细胞治疗的有效性和毒性相辅相成，最常见的毒副作用是CRS和免疫效应细胞相关神经毒性综合征。CRS由活化免疫细胞释放大量炎症因子引发，因此细胞因子检测与CAR-T细胞治疗疗效和副作用评估均有关，等级≥3的CRS与多功能性T细胞相关［26, 27］。每项CAR-T细胞治疗研究都会使用细胞因子来评价T细胞活化特性，基本包括IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-2。对于其他因子的选择不同研究存在差异，包括：IL-1RA、IL-1β、IL-4、IL-5、IL-8、IL-10、IL-12、IL-13、IL-15、IL-17、IL-18、IL-21、IL-23、IL-31、IL-36、单核细胞趋化蛋白-1、穿孔素和颗粒酶B、促红细胞生成素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、可溶性CD25、铁蛋白等。虽然最初大多数研究使用酶联免疫吸附法（enzyme linked immune sorbent assay，ELISA）方法检测细胞因子，但近年来随着研究的深入，对更多细胞因子检测提出高通量要求。FCM的微球阵列技术（cytometric bead array，CBA）可同时测定多种细胞因子含量，相比于 ELISA，CBA标本需求量少（可实现CSF等微量标本检测）、快速、简便、多指标检测、灵敏度高、重复性好、灵活性大［35］。CSF标本的采集、运输与标本制备参见2021年相关共识［36］。共识14：CAR-T细胞免疫治疗后进行细胞因子检测，对于评价CRS等副作用有重要的辅助诊断价值，对于预测CAR-T细胞免疫治疗疗效有辅助参考价值。最低应该检测IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-2，其他因子酌情选择。推荐强度：建议执行。CAR-T细胞免疫治疗是近年来肿瘤治疗领域最大的突破，目前虽然遇到一些难题，但是随着技术的进步，可以预见在将来相当长的时间里这种技术会不断完善，成为经典的化疗和造血干细胞移植以外的重要补充治疗。FCM对于进一步发挥CAR-T细胞在肿瘤治疗中的作用，制定和改善方案，鉴定CAR-T细胞成分确保安全性，监测MRD评价疗效，监测免疫指标评价副作用，都起到举足轻重的作用。为了规范化FCM方案设计与操作分析，更好地促进其应用，本学会组织专家讨论达成此共识，希望能为同行和相关检验人员及临床医生提供参考。执笔人：王卉（河北燕达陆道培医院检验科），刘贵建（中国中医科学院广安门医院检验科）专家组成员（按姓名字母顺序排列）：艾利莎（华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科），蔡英（美国BD公司），曹永彤（中日友好医院检验科），常英军（北京大学人民医院、北京大学血液病研究所），陈曼（河北燕达陆道培医院检验科），池沛冬（中山大学附属肿瘤医院检验科），丁丽（解放军空军特色医学中心血液科），段彦龙（国家儿童医学中心，首都医科大学附属北京儿童医院，儿童肿瘤中心，肿瘤内科），樊华（中国医科大学附属第四医院血液科），冯晨（解放军总医院儿科），高广勋（空军军医大学第一附属医院血液内科），韩露（南京北恒生物科技有限公司），韩为东（解放军总医院生物治疗科），洪国粦（厦门大学附属第一医院检验科），李力（南部战区总医院血液科），李壹（四川大学华西医院实验医学科），李永伟（河南省中医院，河南中医药大学第二附属医院检验科），李智伟（新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心），林欣（清华大学医学院基础医学系），刘贵建（中国中医科学院广安门医院检验科），刘敏（山东第一医科大学附属肿瘤医院检验科），刘耀（重庆大学附属肿瘤医院血液肿瘤中心），陆佩华（河北燕达陆道培医院院长），马莉（贵州医科大学附属医院临床检验中心），毛霞（华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科），欧阳涓（中山大学附属第一医院检验科），钱文斌（浙江医科大学附属第二医院血液内科），全丽娜（哈尔滨医科大学附属肿瘤医院血液科），芮魏［华夏英泰（北京）生物技术有限公司］，桑威（徐州医科大学附属医院血液科），孙慧（山东第一医科大学附属省立医院临床医学检验部），孙士鹏（中国中医科学院广安门医院检验科），唐古生（海军军医大学第一附属医院血液病科），唐湘凤（解放军总医院儿科医学部儿童血液肿瘤科），唐晓文（苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所），王爱先（河北燕达陆道培医院检验科），王卉（河北燕达陆道培医院检验科），王慧君（中国医学科学院血液病医院血液病理诊断中心），王亮（首都医科大学附属北京同仁医院血液科），王茫桔（北京大学第一医院血液科），王平（陆军军医大学新桥医院血液科）、王巍（哈尔滨医科大学附属第二医院血液科），王瑶（解放军总医院生物治疗科），吴青青（贵州医科大学附属医院临床检验中心），吴雨洁（南京医科大学第一附属医院血液科），肖剑文（重庆医科大学附属儿童医院血液科），谢小兵（湖南省中医院附属第一医院检验科），徐翀（上海市临检中心）、杨曦明（中国中医药大学东直门医院检验科），杨再林（重庆大学附属肿瘤医院血液肿瘤中心），岳保红（郑州大学第一附属医院检验科），詹茜（重庆医科大学附属第一医院临床分子医学检测中心），张爱梅（中国科学技术大学附属第一医院安徽省立医院检验科），张国军（首都医科大学附属北京天坛医院检验科），张继红（中国医科大学附属盛京医院血液研究室），张曦（陆军军医大学新桥医院血液科），张弦（河北燕达陆道培医院血液科），钟晓松（北京世纪坛医院临床基因与细胞工程中心），周剑峰（华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科），周茂华（广东省人民医院检验科，广东省医学科学院），朱杰（大连医科大学附属第二医院检验科），朱莉（华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科），朱明清（苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所）参考文献（略）

研究背景T-LGLL是一种罕见的慢性淋巴细胞增生性疾病（Chronic Lymphoproliferative Disorder, CLPD），其特征是血液或组织中的成熟细胞毒性T细胞，如大颗粒T淋巴细胞（T- Large Granular Lymphocytes, T-LGL）的克隆性增生。由于缺乏特异性基因标志物，其表现（绝对计数变化、形态、免疫表型特征等）又常常与反应性扩增相似，因此，在T-大颗粒淋巴细胞白血病（T-Large Granular Lymphocytic Leukemia, T-LGLL）的诊断检测中，证明扩增的 T-LGL 的克隆性仍然是一个挑战，特别是在没有淋巴细胞增多（lymphocytosis）的情况下。利用流式细胞术（Flow cytometry, FCM）分析T细胞受体β链恒定区1（Constant region 1 of T-cell receptor β chain, TRBC1）的表达（后续用TRBC1-FCM表示），已被证明是评估Tαβ细胞克隆性的一种有效、简单、快速和特异的方法。然而，由于更为成熟的Tαβ细胞相较于总Tαβ细胞，往往显示出更为宽泛的TRBC1+/TRBC1 -比值，TRBC1-FCM方法对于诊断T-LGLL 克隆性的实用价值，还有待进一步证实。研究目的研究者希望通过直接比较正常 Tαβ-LGL 与T-LGLL中 TRBC1+ 和 TRBC1-Tαβ 细胞的相对分布和绝对计数，验证TRBC1-FCM方法在诊断T-LGLL中特异性T细胞克隆的实用性。研究方法研究纳入了54例样本（EDTA抗凝的全血），样本分别来自17例正常对照（HD），8例反应性 Tαβ 淋巴细胞增多症，5例HDc（有T-LGL克隆的HD），及24例Tαβ-LGLL 患者（18 名 TαβCD8-LGLL、5 名 TαβCD4-LGLL 和 1 名 Tαβ 双阴性 LGLL）。利用Cytek Aurora全光谱流式细胞仪，研究者设计了两组免疫分型方案（Panel I 和Panel II）对样本进行检测分析，整个过程严格遵循EuroFlow SOP进行。Panel I ，主要为TRBC1+细胞成熟标记（如CD27, CD28, CD45RA and CD62L等） Panel II，包括12个骨架抗体（TRBC1、成熟标记、LGL常见异常表型标记），4个主要系别标记（CD3, CD4, CD8 和 TCRγδ），TCRVβ和CD45。两组光谱流式免疫分型方案详细信息如下图1：图1-基于光谱流式的免疫分型方案结论利用Panel I，研究者比较了含有多克隆（n = 25）和单克隆（n = 29） LGL的血液中TRBC1+和TRBC1−的Tαβ-LGL的分布和绝对计数。总体而言，多克隆性TRBC1+或TRBC1− 的Tαβ-LGL细胞数量（百分比）在0.36 ~ 571细胞/μL之间（3.2 ~ 91% TRBC1+细胞），而单克隆性LGL的细胞数量（百分比）在51 ~ 11,678细胞/μL之间（0.9%或96% TRBC1+细胞）。因此可以认为，通过总Tαβ细胞群体中TRBC1表达谱鉴定的病理性T-LGL的绝对计数不能作为检测Tαβ克隆性的通用（单一）标准，特别是在没有淋巴细胞增多和/或血液中携带相对较少（2000 个细胞/μL）的TαβCD4-LGL或 TαβCD8-LGL 克隆的 T-LGLL 例中。相反，一旦将EM 和 TE Tαβ 细胞中的 TRBC1+ 细胞的百分比纳入考虑，所有携带单克隆细胞的T-LGLL和HDc例可以被明确识别，并可与仅有多克隆细胞的例区分开来。图2-TRBC1+和TRBC1−细胞的绝对计数和相对分布（多克隆vs.单克隆）接下来，研究者将TRBC1-FCM方案结合TCRVβ库和异常表型检测（Panel II），以进一步验证 TRBC1-FCM 方法在临床环境中对 T-LGLL 中 T 细胞克隆性进行高灵敏度评估的实用性，并提高其检测（小）LGL 克隆的特异性。一共有12个例的样本被纳入此步研究（6 个 HD、2 个 TαβCD8-HDc 和 4 个 TαβCD8-LGLL）。结果发现，T-LGLL 和 HDc 例中克隆性 TRBC1+ 或 TRBC1-的 Tαβ 和 TαβCD8 细胞的绝对计数（32-5,515 个细胞/μL） ，显著高于来自正常/反应性例的多克隆 TRBC1+ 和 TRBC1- 的总 Tαβ（0-25 个细胞/μL）和 TαβCD8（0-21 个细胞/μL）细胞（图 3A&C）。但对TRBC1+ 细胞百分比的分析却并未观察到显著差异。提示，基于表达单个 TCRVβ 家族的细胞中 TRBC1 的表达模式识别 Tαβ-LGL 的克隆性，应该基于（表达单个TCRVβ 家族的克隆性 TRBC1+ 或 TRBC1- Tαβ 和 TαβCD8 细胞）绝对细胞计数和/或异常表型表达的综合评估。图3- TCRVβ 家族中 TRBC1+ 细胞的绝对计数和相对分布（多克隆vs.单克隆）讨论利用光谱流式技术，研究者验证了 TRBC1-FCM 方法的临床实用性，并进行了拓展。值得特别指出的是，得益于Cytek全光谱流式仪器的高参数和高灵敏的检测能力，研究者可以将多种免疫标记（TRBC1, TCRVβ 库，异常表型标记，成熟相关标记等）同时检测和分析，详细了解TRBC1 表达谱和不同 TCRVβ 家族在正常/反应性 CD28-EM 和 TE Tαβ 中的分布情况。研究数据显示，在存在LGL 淋巴细胞增多症的患者血液中， T-LGLL的 TRBC1+ Tαβ 细胞百分比有显著改变（增加或减少）（大约 0 或 100%），因此研究者认为该方法可用于快速和简便地评估这类患者血液中的T 细胞克隆性。相反，在没有淋巴细胞增多（或者怀疑 TαβCD4-LGLL）的情况下，检测 T 细胞克隆性，需要在TRBC1-FCM 方法的基础上增加检测表达单个 TCRVβ 家族的 T-LGL 亚群的绝对细胞计数。由于样本数量有限，研究者也提出，如果需要进一步比较 TRBC1 -FCM方法与传统的 T 细胞克隆性检测方法，则需要进行更大的样本研究以验证本他们的发现。#参考文献：Muñoz-García, N. Morán-Plata, F.J. Villamor, N. Lima, M. Barrena, S. Mateos, S. Caldas, C. van Dongen, J.J.M. Orfao, A. Almeida, J. High-Sensitive TRBC1-Based Flow Cytometric Assessment of T-Cell Clonality in Tαβ-Large Granular Lymphocytic Leukemia. Cancers 2022, 14, 408. https://doi.org/10.3390/cancers14020408.关于CytekAbout Cytek /Cytek Biosciences, Inc.（Nasdaq: CTKB）作为一家全球技术领先的生命科学技术公司，通过其受专利保护的全光谱分析（Full Spectrum Profiling™ ，FSP™ ）技术，提供高分辨率、高参数和高灵敏度的新一代细胞分析工具。Cytek的创新技术通过检测荧光信号的完整光谱信息，以实现更高水平更高灵敏度的多参数检测。Cytek的FSP™ 平台包括其核心仪器 —— Aurora和Northern Lights™ 分析系统、Aurora CS分选系统、试剂、软件和服务，为客户提供全面和完整的解决方案。Cytek总部位于美国加利福尼亚州Fremont，在全球设有分部和分销渠道。更多的相关信息，请登录Cytek的官方网站：www.cytekbio.com和www.cytekbio.com.cn。注：Cytek, Tonbo Biosciences, cFluor, Full Spectrum Profiling™ , FSP™ 和Northern Lights™ 是Cytek Biosciences, Inc. 的商标或注册商标。Cytek全光谱检测技术相关专利包括但不限于：US10739245B2，US11169076B2，US10788411B2。 /

“细胞培养上清液方法包”采用超快速三重四极杆液质联用仪（LCMS-8040/8045/8050/8060），仅需 17分钟（包含分析时间和平衡时间），使用最优化的MRM参数，可同时监测分析95种化合物（不仅可分析培养基的基础成分也可分析细胞的代谢产物，包括氨基酸类、核苷酸类、维生素类、糖类以及其他类化合物等）的相对丰度变化。该方法包既可分析高浓度组分（例如葡萄糖和谷氨酰胺），也可分析低浓度组分（例如维生素等）。该方法包无需标准品，只需一个内标即可检测细胞培养过程中各组分随时间的变化曲线和培养基批次间的一致性。如用户需要对培养基或者细胞培养上清液中组分进行绝对定量，则需要另行准备对应的标准品，从而通过内标法对组分进行绝对定量。 “细胞培养上清液方法包”前处理操作简单方便，流程如下图所示： “细胞培养上清液方法包”中95个化合物（糖类、氨基酸类、维生素类、核苷酸类以及其他的抗生素、有机酸、生长因子等）列表详见表1。该方法包所检测化合物可增加扩展，也可根据用户需求选择性除去不关注化合物。 表 1. “细胞培养上清液方法包”中96种化合物列表（包含一个内标）关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。

导读中国疾病预防控制中心国家病毒病预防控制研究所和中国首都儿科研究所的科学家在Canadian Journal of Infectious Diseases and Medical Microbiology上发表了题为The Viral Load of Human Cytomegalovirus Infection in Children following Hematopoietic Stem Cell Transplant by Chip Digital PCR的文章。文中应用naica微滴芯片数字PCR系统建立了芯片数字PCR（cdPCR）方法，能够精准定量HSCT前后儿童HCMV感染的病毒载量。质粒pUC57-UL83的cdPCR检测限为103拷贝/ml，qPCR检测限为297拷贝/ml。cdPCR检测HCMV AD169毒株的结果为146拷贝/ml，表明cdPCR的灵敏度高于qPCR。人类巨细胞病毒（HCMV）是一种普遍存在的β-疱疹病毒，已感染发展中国家高达90%的人口。作为一种常见病原体，HCMV感染在免疫抑制个体中引起了显著的发病率和死亡率，特别是在接受了造血干细胞移植（HSCT）的患者中，原因是原发感染后潜伏感染的主要靶细胞是造血细胞。对于HSCT后的高危儿童，应在出现临床症状之前检测HCMV感染，因为HCMV病毒的载量及变化与HSCT儿童HCMV感染的发展和严重程度高度相关。因此，HCMV病毒载量的定量检测对患儿的治疗至关重要。应用亮点：▶ 使用naica微滴芯片数字PCR系统开发了一种快速、直观、简便和准确的检测HSCT前后儿童HCMV病毒的绝对定量方法。▶ 通过质粒和培养毒株验证naica微滴芯片数字PCR系统灵敏度、特异性和重复性。实验方法：作者从首都儿科研究所儿童医院收集了122名异体造血干细胞移植患儿、3名自体造血干细胞移植患儿样本（男/女:73/52），中位年龄7.5岁。该研究通过质粒和培养毒株验证naica微滴芯片数字PCR系统灵敏度、特异性和重复性均优于qPCR。在HSCT前后，通过qPCR和cdPCR检测所有供体和受体血清中的HCMV病毒载量。实验结果：作者通过含有pUC57-UL83基因的质粒DNA分别评估cdPCR和qPCR的动态范围。cdPCR的检测限 (LOD) 为103拷贝/ml (2.0拷贝/反应)，qPCR的LOD为297拷贝/ml。结果表明，cdPCR的灵敏度高于qPCR。为了评估cdPCR数据的重现性，作者使用质粒建立了HCMV DNA拷贝数的标准曲线。分析cdPCR检测的变异系数（CV、标准差/平均值）。结果表明，cdPCR检测具有良好的重复性（CV15%）。稀释质粒的预期值与cdPCR检测值之间也具有良好的一致性（cdPCR检测值与稀释质粒的预期值R= 0.979, P 0.05， qPCR检测值与稀释质粒的预期值R= 0.939, P 0.05）。▲图1 通过标准曲线评估cdPCR检测的HCMV DNA拷贝数的变化。黑线显示质粒DNA的标准曲线。不同的散点是通过cdPCR测试到的HCMV DNA拷贝数。作者又使用HCMV AD169毒株验证cdPCR的灵敏度。qPCR可以检测到5.67×10 TCID50/ml HCMV DNA，但不能检测到5.67 TCID50/ml HCMV DNA。cdPCR可以检测5.67 TCID50/ml病毒的HCMV DNA。cdPCR的灵敏度优于qPCR。为了验证cdPCR方法的敏感性以及是否可以用于HSCT患者血液中的HCMV检测，作者通过qPCR和cdPCR检测了125例HSCT后儿童的全血样本。在38份cdPCR阳性样本中，有4份qPCR阴性样本。在91份qPCR阴性样本中，有4份cdPCR阳性。结果如表1所示。HCMV在125个HSCT患儿的检出率为30.40% (38/125)，HCMV病毒载量范围为107拷贝/ml-6600拷贝/ml。男性组的检出率为30.14% (22/73)，女性组的检出率为30.77% (16/52)。在0-12岁HSCT后HCMV阳性儿童中，HCMV的检出率为89.47% (34/38)。在0-6岁组中，男性的检出率为25.64% (10/39)，女性的检出率为22.58% (7/31)。在7-12岁组中，男性的检出率为39.29% (11/28)，女性的检出率为40% (6/15)。12岁以上患儿HCMV检出率为33.33% (4/12)，男性检出率为16.67% (1/6)，女性检出率为50% (3/6)。结果如表3所示。综上所述， cdPCR方法在HCMV检测领域比qPCR更敏感，能快速、直观、简便和准确的检测HSCT患儿HCMV感染率及病毒载量。参考文献：1.P. Griffiffiffiths, I. Baraniak, and M. Reeves, “,e pathogenesis of human cytomegalovirus,” Journal of Pathology, vol. 235, no. 2, pp. 288–297, 2015.2.L. Dupont and M. B. Reeves, “Cytomegalovirus latency and reactivation: recent insights into an age old problem,” Reviews in Medical Virology, vol. 26, no. 2, pp. 75–89, 2016.naica六通道微滴芯片数字PCR系统法国Stilla Technologies公司naica六通道微滴芯片数字PCR系统，源于Crystal微滴芯片式数字PCR技术，自动化微滴生成和扩增，每个样本孔可实现6荧光通道的检测，智能化识别微滴并进行质控，3小时内即可获得至少6个靶标基因的绝对拷贝数浓度。

单细胞转录组以及蛋白质组分析为获得健康和疾病相关细胞图谱提供了技术支持，也彻底的改变了对多种生物现象的解释。单细胞技术能够在高精度和高分辨率的水平上分析细胞状态。但是当前技术还不能够在动态的场景中捕捉细胞状态的转变。每个细胞的行为改变是遗传和信号网络共同作用的结果，因组织和细胞类型而异。2022年1月5日，来自西班牙国家心血管研究中心的Andrés Hidalgo 团队在Nature上发表题为Behavioural immune landscapes of inflammation 的文章。作者利用成像技术结合机器学习开发出实时细胞行为分析体系。作者首先使用CD11c-YFP小鼠，过继回输CFP+中性粒细胞，并用流感病毒PR8感染小鼠，对气管进行成像。作者总共提取了118个参数进行分析，这118个参数描述了单细胞的运动和性状特征。过滤处理后，生成了一个可视化网络图。通过筛选最能代表细胞行为的参数，作者选定了31个参数，包括19个动力学参数和12个形态参数。作者用31个参数生成了t-SNE图，显示了基于细胞行为的两个主要细胞群。作者进一步在多维度分析基础上确定最能区分各细胞群的特定参数。如细胞运动变化的速度比绝对细胞大小的参数更能预测细胞身份，这也表明行为变化中包含生物信息。作者用每个参数的可预测性强度改进了细胞预测网络，来推断在病毒感染模型中气管中特定的生物学特征。如中性粒细胞在DC附近移动较慢，而DC则表现出较高的同质行为。作者又利用皮肤缺血再灌注和激光烧伤模型测试了这些基于行为的分析模式。在缺血再灌注损伤模型中，三个细胞簇可以匹配三种细胞类型：中性粒细胞、DC和巨噬细胞。进一步子聚类分析可以识别两种中性粒细胞、两种类型DC和三种巨噬细胞。而在激光损伤模型中，作者能够利用参数分析模式更加精准区分中性粒细胞和DC。作者还发现了中性粒细胞以不同的行为模式涌向损伤部位。作者利用每个细胞数据中包含的位置信息将细胞投影到实际位置，以此构建行为图，试图实现个体特征与复杂行为模式的关联。这样的分析能够实现不同细胞分布可视化，同时能够通过实时成像捕获细胞行为，可以在其原生环境中分析细胞特征。炎症与中性粒细胞等细胞亚群特别相关，其中蛋白质或转录组变化都会影响炎症的结果。而细胞状态是细胞动态变化的基础。所以作者接下来用lyzM-GFP小鼠构建TNF诱导的血管炎模型，以此模型分析中性粒细胞状态变化。为了提高形态测量、动力学特征以及与血管壁距离测定的准确性，作者开发了一个基于机器学习的定制分析工具，它可以产生73个参数，准确描述血管内粘附细胞状态。作者总共发现了血管内三种细胞簇。分析发现第一和第三代表一个连续体的两个极端，第二种细胞簇代表血管内中性粒细胞的过渡状态。接下来作者使用24种突变小鼠。并利用以上分析模式对细胞状态进行分析。结果发现其中五种品系小鼠会出现抗炎表型，血管中中性粒细胞行为状态转换会出现不同变化。这表明细胞的状态调控开关主要由特定的信号通路组成，提高了靶向治疗以保护机体免受血管损伤的可能性。作者最后利用肾小球肾炎模型重点分析了Fgr这一分子对中性粒状态的调控。结果发现Fgr可以介导血管中中性粒细胞向致病方向转变。本文利用机器学习结合成像生成的数百种参数分析细胞行为状态变化，可以实现实时捕捉在原生环境中的细胞行为变化，并利用这一体系分析发现靶向特定免疫行为特征，具有治疗价值。原文链接：https://doi.org/10.1038/s41586-021-04263-y

仪器信息网讯 2024年4月1日，中生医疗4光21色SinoCyte X高端（科研）流式细胞仪发布！最高配置4个激光器和21个荧光通道，最多24个检测参数。详情查看：SinoCytex流式细胞仪主要亮点一览：◆配置升级-- 最高配置4个激光器21个荧光通道，最多24个检测参数◆功能强大-- 高分辨率、高灵敏度和高稳定性◆自动智能-- 全自动检测流程，采集/分析同步进行◆快速上样--可达80000events/s进样速度，极大提高进样效率◆自动分析 -- 基于数据库的自动荧光补偿调节功能，无需更改采集条件◆绝对计数-- 基于柱塞泵的体积法绝对计数方法，更准确◆进样选配 -- 自动进样器支持40试管转盘/96孔板，操作简捷高效“3i奖-2023年度科学仪器行业优秀新品奖”揭晓倒计时！参与奖项预测，赢取百元京东卡！ 点击参与：https://www.instrument.com.cn/news/20240329/711334.shtml1、活动截止时间：2024年04月16日；2、竞猜规则：从所有品类共计106台提名新品中，累计勾选任意10台即可参与（注意！！！勾选多于、少于10台皆为无效问卷）。①累计勾选10台，若正确预测至少3台，即有机会赢取20元面值京东卡1张。②累计勾选10台，若正确预测8台及以上，则有机会获得100元京东卡1张，等你来挑战！3、奖品设置：①20元面值京东卡，共30张；②100元面值京东卡，共10张。日常新品申报入口 ↓↓↓https://www.instrument.com.cn/Members/NewProduct/NewProduct

数字PCR技术具备不依赖于标准品、灵敏度高、抑制剂耐受力高以及可区分微小差异等技术特性，是能够直接对目标核酸进行绝对定量的有力检测工具。数字PCR技术在液态活检、产前诊断、病原体筛查、转基因动植物、遗传育种、环境监测方面都有广泛的应用。此外，在细胞治疗及基因治疗等先进治疗领域还能够实现对核酸标准品及质控品定值、病毒基因组（如rAAV VG）滴度测定、GOI拷贝数检测、残留检测以及外源污染物等的检测。新一代微滴芯片数字PCR技术，集微滴式和芯片式数字PCR优势于一体，能够实现自动微滴体积质控和智能可视化数据分析，一步操作，双倍效能，为核酸绝对定量提供可靠的检测工具。本期我们邀请法国Stilla数字PCR系统应用专家王琳琳老师，为大家介绍数字PCR的技术原理、技术优势以及前沿应用。直播时间：2022年5月26日下午3：00主要内容：1、数字PCR如何实现核酸绝对定量2、数字PCR的技术特点和应用优势3、数字PCR在工业CGT等领域的应用进展主讲人：王琳琳，法国Stilla naica微滴芯片数字PCR系统应用专家。毕业于四川大学，细胞生物学专业，从事数字PCR技术数年，在数字PCR技术原理、应用以及方法学验证方面具有丰富的经验。 扫描下方海报内二维码报名

p style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "流式细胞仪在我国市场增长已经进入到稳步上升阶段。目前流式细胞仪主要应用于科研领域和临床领域。在科研领域的应用以免疫、肿瘤、单细胞研究为主；在临床上，流式细胞仪主要应用于淋巴细胞亚群分析及绝对计数、HLA-B27的检测以及血液病/淋巴瘤的免疫分型。除了中心实验室及检验科以外，应用的临床科室主要集中在血液科、肿瘤科等。此外，疾控系统也将流式细胞仪应用于HIV监测。br//pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "仪器信息网（www.instrument.com.cn） 基于自身平台优势调研了200余家流式细胞仪用户单位，对象包括科研院所（含大专院校）、医疗机构（医院、疾控中心、卫生院、妇幼保健院等）、企业（如生物制药、生物技术企业等）、政府检测/监测/执法机构等单位；并对近两年来国内公开采购数据（数据来源：北京易佰智汇数据咨询有限公司）进行分析。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "基于调研结果，仪器信息网撰写了《中国流式细胞仪市场研究报告（2020版）》，本报告包含中国流式细胞仪用户分布、中国流式细胞仪品牌分布情况、中国流式细胞仪市场分析等内容，旨在为流式细胞仪相关企业在仪器研发、市场推广和销售等方面提供决策参考，同时，也为流式细胞仪用户单位在采购时提供指南。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "strong在内容层面，《中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）》包含了流式细胞仪概述、流式市场概况分析、采购机构画像、品牌竞争情况、市场预测分析、技术及应用进展等。/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "以下为部分节选数据：/pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 397px height: 264px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/4306ac98-8d29-4d3c-8cb8-dc97014b92b4.jpg" title="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" alt="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" width="397" height="264" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "图3.1 2019年各省市进行采购的机构数（单位：家）/pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 418px height: 238px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/e64f497d-58f5-48c0-886c-f9b0226c70f3.jpg" title="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" alt="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" width="418" height="238" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "图3.5 2019年各流式细胞仪品牌市场份额情况/pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 440px height: 254px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/5b048660-f17a-4f12-b4b5-fbd015b5c391.jpg" title="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" alt="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" width="440" height="254" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "图3.10 2019年部分流式细胞仪品牌进入省市数（单位：个）/pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 406px height: 250px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202003/uepic/92f34dae-660c-40ad-8e23-444e689cd1f7.jpg" title="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" alt="中国流式细胞仪市场调研报告（2020版）" width="406" height="250" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "图4.1 调研用户所在单位流式细胞仪更新周期/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "对本报告感兴趣，可通过以下邮箱liuld@instrument.com.cn联系我司相关人员，咨询报告相关细节!/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "报告链接：/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "a href="https://www.instrument.com.cn/survey/Report_Census.aspx?id=193" target="_blank"https://www.instrument.com.cn/survey/Report_Census.aspx?id=193/a/pp style="text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei text-align: justify "报告目录br//span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "前言8/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "第一章 流式细胞仪原理及分类9/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.1流式细胞仪原理9/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.2流式细胞仪分类9/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.3流式细胞应用发展10/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.3.1从相对细胞计数到绝对细胞计数10/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.3.2从相对定量到绝对定量分析10/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "1.3.3从单色到多色荧光分析10/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "第二章 流式细胞仪市场11/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "2.1流式细胞仪新增市场规模趋于平稳11/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "2.2华北地区采购潜力可期13/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "2.3 北京、四川和云南采购需求迸发15/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "第三章 采购机构画像及品牌竞争情况17/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.1采购机构基本画像17/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.1.1参与采购流式细胞仪的地区与机构分布情况17/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.1.2流式细胞仪采购机构分布情况17/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.1.3采购均价情况19/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.2品牌竞争情况20/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.2.1流式市场主要“玩家”20/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.2.2全国流式细胞仪品牌竞争情况 20/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.2.3采购省市分布与采购量情况22/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "3.2.4品牌渗透率情况23/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "第四章 流式细胞仪用户调研分析27/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.1采购仪器更新周期分布27/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.2用户使用频率28/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.3采购关注因素28/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.4采购时间分布29/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.5用户单位购置流式细胞仪台数分布30/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.6用户单位购置流式细胞仪价格区间分布30/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.7用户单位采购调研渠道分析31/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.8用户单位近两年购置流式细胞仪意向分布32/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.9用户性别分布32/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "4.10用户满意度分布33/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "第五章 市场预测分析34/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.1市场研究结论34/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2流式细胞仪市场预测分析35/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2.1科研市场 36/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2.2临床市场 36/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2.3新冠疫情将刺激采购需求增长 36/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2.4生物制药市场 37/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.2.5流式在其他行业的应用 37/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.3流式技术的发展 37/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.3.1光谱流式 38/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "5.3.2质谱流式 38/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "参考文献36/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.5em "span style="font-family: 黑体, SimHei "附录：国产流式细胞仪研发成果37/span/p

p style="text-indent: 2em "从二十世纪八十年代至今，世界上生产流式细胞仪的厂家几经变迁，BC & BD仍在，新玩家不断进入，并购重组各取所需，它们生产各种不同性能和功能的流式细胞仪。总体而言，呈现出以下的发展趋势：br//pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "1. 应用对象从细胞到颗粒/span/strong/pp　　一般而言，流式细胞仪检测的对象是细胞，而且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞，即单细胞悬液。组织和器官中的细胞，必须用各种方法制备成单细胞悬液，才能进行检测。/pp　　细菌、浮游生物等也可以用流式细胞仪分析。/pp　　一些不是细胞的单个粒子，如病毒、细胞核、染色体、原生质体等也是流式细胞仪的检测对象。实际上，用“颗粒”而不仅仅是“细胞”来定义流式细胞仪的检测对象，显然更有代表意义。/pp　　因为流式细胞仪可以将“颗粒”视同为“细胞”来进行检测，在特制的微球上包被抗原，抗体或核酸探针，以微球为载体来检测各种可溶性蛋白、细胞因子、自身抗体、特定的核酸序列等，从而使流式细胞仪的检测对象扩展到分子范围。/pp　　Luminex公司的多重流式检测平台能够自一个微量反应孔中同时检测50、100甚至多达500种分析物，俨然成为这一技术的金标准。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "2. 检测颗粒尺度大大拓宽/span/strong/pp　　常规流式细胞仪检测颗粒的范围为0.5-50μm。/pp　　电荷分选流式细胞仪检测颗粒范围与喷嘴直径等相关，最大应到喷嘴直径的1/3-1/2，目前最大直径的喷嘴为200μm。/pp　　Union Biometrica公司的气流分选平台COPAS FP和BioSorter能够适应大到1500μm的颗粒，可以用于分选模式动物的卵和幼虫 模式植物种子与花粉 大体积细胞与细胞簇等。CytoBuoy公司的Cytosense也可以到1500μm。　　/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/aca8ce15-8bb8-42f4-8863-4675f7724835.jpg" title="01.jpg" alt="01.jpg" width="381" height="417" style="width: 381px height: 417px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Union Biometrica公司气流分选流式原理图/span/pp　　通过光路优化，采用多角度光散射，使用特殊荧光探针，甚至加装紫色激光收集散射光信号，有些流式细胞仪可以实现0.2μm颗粒与噪音信号的鉴别。/pp　　Apogee着力于微颗粒分析，其A50-Micro plus散射光的检测低限至80nm，可用于循环微粒，外泌体及特殊微生物检测。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/28e29df6-ee87-449c-b362-20f9785b26ec.jpg" title="02.jpg" alt="02.jpg" width="311" height="320" style="width: 311px height: 320px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Apogee A50-Micro plus/span/pp　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "　3.多种流路技术商品化/span/strong/pp　　绝大多数流式细胞仪基于鞘液流体动力学模式。/pp　　因为负压进样省去了庞大的压缩气源，可以灵活使用各种上样管，已经成为几乎所有公司新仪器的选择。/pp　　一般认为，流式细胞仪采用毛细管而非鞘液，容易被大的细胞或聚集细胞所阻塞，而且流动细胞难以准确聚焦，流速难以维持恒定。/pp　　Guava平台easyCyte(现被Luminex公司收购)通过负压进样，采用高压注射泵与PEEK管路，建立自稳流的微毛细管系统，据称解决了以上困扰，带来的好处是无需鞘液，产生废液也少。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/bebe5684-49c2-419d-aa5c-e4fc9f47041a.jpg" title="03.jpg" alt="03.jpg"//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Guava easyCyte(Luminex)/span/pp　　Thermo公司声波流式细胞仪Attune NxT ，该产品利用超声波将细胞聚集在样品流中轴线上。进样速度至1mL/min时，也可以避免基于鞘液的流式的所谓轴流加宽和细胞分散现象，这一技术的最大优势是快速检测，同时对稀有细胞的分析比较有利。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/407f47e9-043f-4bea-a5ab-dcd240aebc70.jpg" title="04.jpg" alt="04.jpg"//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Thermo Attune NxT/span/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "4.从相对计数到直接绝对计数/span/strong/pp　　为满足统计学要求，流式细胞仪必须采集一定数量的细胞，仪器设定以细胞数为停止条件。传统流式细胞仪测试结果为相对计数，即目标细胞在某一总体系中的比值。/pp　　随着应用深入，人们发现比值的变或者不变，以及变化大小不能反映细胞的真实变化，绝对计数，即单位体积内的细胞数被证明更具实际价值。/pp　　最早是采用双平台法来解决以上问题，即用血细胞分析仪来获得白细胞，淋巴细胞等浓度，再结合流式细胞仪测定的百分比来计算被测细胞的绝对计数值。由于该法需要使用两种仪器，操作步骤多、变异系数大，不同实验室之间的差异也较大，因此应用受到限制。/pp　　后来人们采用微球法，即用已知浓度的微球作为参比，通过被测细胞和微球的比例关系来进行绝对计数，但因计数微球价格较为昂贵，实际应用受到限制。/pp　　近年来，厂家的共识回到了测定进样体积这一思路上来，替代微球法直接进行绝对计数，取得更为精确的结果。区别在于不同产品具体测定技术的差别。/pp　　蠕动泵：Accuri C6 Plus、CytoFlex/pp　　注射泵：easyCyte、NovoCyte、CytoFlow/pp　　流量传感器：FACSVerse、Bricyte E6/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/ccfa4c2d-589a-4fd1-8bcd-17e1112840b1.jpg" title="05.jpg" alt="05.jpg"//pp style="text-align: center "Sysmex CytoFlow系列TVAC体积测定原理/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "5.光路优化和光学新元件的应用/span/strong/pp　　庞大的水冷或气冷的激光器逐渐被小型化的固态激光器取代。/pp　　光纤传导应用越来越普遍。/pp　　光纤耦合让光能量传输更高效，而不为公司所专有。/pp　　雪崩光电二极管等等新检测器提供新的选择。请见专家分析：/pp　　流式细胞仪是怎么“看见”光的?/pp　　以及光学元件的神级组合让灵敏度达到新的高度。/pp　　MESF是仪器灵敏度衡量的标准，基于微球，基于鞘液。/pp　　不同公司没有约定俗成，不是那么容易比较，但就同一公司产品而言：/pp　　BD FACSCelesta FITC 25 PE 15/pp　　Beckman Coulter CytoFlex FITC 30 PE 10/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "6.以多色分析为核心的新型光学技术的迅速发展/span/strong/pp　　早期流式细胞仪的主要应用还是细胞DNA含量测定，这一技术对设备要求不高，通常配备一个散射光和一个荧光信号的流式细胞仪就足以应付。随着新型荧光探针的不断开发和仪器软、硬件的逐步更新，流式细胞仪多色荧光分析得到了迅速发展，包括两个方面：/pp　　单激光多色，如488nm激光同时激发7色，紫色激光同时激发10色/pp　　多激光：如10激光机器。/pp　　也包括两种新的光学设计机型：/pp　　光谱流式，利用特殊的接受装置收集某范围内的全发射光谱，无需补偿，区别发射光谱重合度高的荧光染料对。目前有Sony公司SP6800Z和SA3800，Cytek公司的Aurora。/pp　　质谱流式，利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术。这个名为CyTOF的平台最初由DVS Sciences公司开发，后被Fluidigm公司收购。仪器采用同位素标记抗体来标记或识别细胞表面和内部的信号分子，并根据流式细胞原理分离单个细胞，再用感应耦合等离子质谱(ICP-MS)观察单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱的数据转换为细胞表面和内部的信号分子数据。2015年推出的Helios的检测通道达到135个，几乎没有信号重叠或背景噪音。/pp　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/c79c2dc9-dc52-45a2-9c40-da860593a6cd.jpg" title="06.jpg" alt="06.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "来自CyTek网站，不代表本人观念/spanbr//pp　　必须注意的是，多色分析提供了多种细胞特性的相互关系图，从而更加精确地界定一种细胞亚群，更好地对不同细胞进行分类。但是，同时检测的荧光染料越多，需准确调节各通道之间的补偿，技术难度更大，因为其中包含的信息量非常大，错误信号掺杂的概率也相应增加，所以数据分析时需格外注意，一般需采用不同的标记方案多次相互验证才能得出重要结论。光谱流式和质谱流式的出现克服了补偿问题。/pp　　但是，荧光染料匹配仍未解决，毕竟不是每个激光器都能如设计所愿，同时激发6色，7色到10色，甚至如光谱流式所希望的16色或者32色。所以，对20色以上多色分析仪器来说，标称往往都是理论，至少在目前还是设计师的想象。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "7.数据处理能力不断提升/span/strong/pp　　随着数字化技术的引入，以及数据处理系统的升级，流式细胞仪的数据处理能力得到极大提升。/pp　　数据处理速度：反映数据扫描频率，用Hz表示。/pp　　处理精度：信号采集精度，用比特表示，反映采集通道多少。目前仪器一般在20比特(2的20次方，100万通道)以上，最高达32比特(43亿通道)。/pp　　线性范围：目前一般在105以上，最高到107。/pp　　单文件存储能力：反映文件储存能力，对稀有细胞分析有利。/pp　　数据能力的提升直接影响到仪器的分析和分选速度。/pp　　速度的提升是光路，流路和数据采集系统三者共同优化改善的结果。/pp　　传统的流式细胞仪，分析速度不超过10000 events/s，新上市产品基本达到25000 events/s(注意：不是细胞/s)以上，如Beckman Coulter公司CytoFlex为30000 events/s，Cytek公司Aurora 为35000 events/s ，BD公司的LSRFortessa 为40000 events/s with beads，Bio-Rad公司ZE5为100000 events/s。/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/eb697251-c070-476d-8a38-812717426182.jpg" title="07.jpg" alt="07.jpg" style="text-align: center "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Bio-Rad ZE5/spanbr//pp　　BD公司FACSCalibur的机械分选，速度只有300/秒，对少量细胞收集困难，须配用浓缩系统进行细胞回收 捕获管的移动和浓缩系统对细胞的机械损伤大，影响分选目的细胞功能特性 由于捕捉器移动不可避免地影响到流路稳定，造成不确定性 机械装置较难彻底清洗消毒。机械式分选已被速度更高的电荷分选所完全取代。/pp　　如BD公司FACSAria III(70 psi /90 kHz)和InFlux(60 psi /100 kHz) 四路分选，纯度 98%，得率 80%, 分选速度25000 events/s，继续提高分选速度，纯度不受影响，得率会按Poisson分布下降。/pp　　Beckman Coulter公司的MoFlo XDP和MoFlo Astrios EQ，据称有效分选速度达到70000细胞/s。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "8.仪器不断小型化到微流控/span/strong/pp　　追求小型化，几乎是所有流式制造商开发新产品的共识。/pp　　看一组数字：主机W x D x H/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongBD/strong/span Accuri C6 plus / FACSVia/pp　　37.5 x 41.9 x 27.9 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongBD/strong/span FACSVerse / FACSlyric/pp　　63.2 x 57.9 x 57.9 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongBD/strong/span FACSCelesta/pp　　58 x 61 x 59 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongBeckman Coulter/strong/span CytoFlex/pp　　42.5 x 42.5 x 34 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongMiltenyi Biotec/strong/span MACSQuant/pp　　60 x 35 x 40 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongThermo/strong/spanstrong /strongAttune NxT/pp　　58 x 43 x 40 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongCytek/strong/span Aurora/pp　　54 x 52 x 52 cm/pp　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongMindray/strong/span BriCyte E6/pp　　50 x 55 x 50 cm/pp　　“小”意味着节省空间，容易安装和转移，“小”更值得期许的是减少样本体积，降低试剂消耗，提高检测速度，以及缩小空间所带来的光电及液路的改善。/pp　　微流控技术兴起于上世纪90年代，顾名思义就是使用微通道(尺寸为数十到数百微米)处理或操纵微小流体。/pp　　On-chip公司于2012年推出了世界上第一台微流控芯片流式On-Chip Sort，以低压对细胞进行分选，降低对细胞的损伤 简化实验操作 容易实现系统的无菌 使用一次性交换型模块，减少样品间交叉污染 无需清洗流路通道。Miltenyi Biotec公司的MACSQuant Tyro、Namocell公司的Namocell等亦先后推出类似的微流控流式分选产品。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/4447d8ae-2611-4183-8988-ecc0f9183d53.jpg" title="08.jpg" alt="08.jpg" width="485" height="215" style="width: 485px height: 215px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "on-chip公司之on-chip sort/spanbr//pp　　Sony公司分选平台的两大核心技术即为所谓的CoreFinder全自动校准技术和可更换式微流体芯片的液路设计。最新型号MA900，全自动光路及液流校准 立体式双光斑四激光激发，最多同时检测12色荧光 四路分选。/pp style="text-align: center "　　img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/16b8cd31-0eb3-44ff-bd93-1450cf1ba662.jpg" title="09.jpg" alt="09.jpg" width="415" height="293" style="text-align: center width: 415px height: 293px "//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Sony MA900/spanbr//pp　　专门生产分析型微流控流式的制造商Handyem公司，针对微流控装置容易导致细胞黏附和堵塞的问题，于2015年推出HPC-150(国内品牌深圳芯凯瑞)，采用双高精度玻璃注射泵代替蠕动泵或单注射泵，据称克服了上一代产品易见的流路堵塞沉积等问题。/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong9.融合显微成像技术和流式细胞术/strong/span/pp　　细胞生物学两大技术平台分别基于显微镜和流式，前者以形态分析为优，可提供详细的细胞图像信息，但解释主观、费时费力 后者以统计学见长，却缺乏成像能力，因此无法了解亚细胞定位。/pp　　融合显微成像技术和流式细胞术的图像流式细胞仪，以Amnis平台为代表(现被Luminex公司收购)，最新型号ImageStreamX Mark II，从细胞经过流动池开始即按线性分拆进行分线性照相，其冷CCD采用时间延迟积分方式进行信号采集，每一个样本的分析都生成该样本中所有细胞的荧光强度测量参数和图像数据库，包括“每个细胞”的明场、暗场以及荧光图像。/pp　　对于微弱荧光信号可以通过明视野细胞图像辅助设定遮罩，特定加强遮罩下细胞荧光信号，实现对微弱荧光图像的捕捉和分析。/pp　　系统可以对每个细胞分析超过500种量化参数，包括细胞整体的散射光和荧光信号强度，以及对细胞形态，细胞结构及亚细胞信号分布的分析。/pp　　图像流式细胞仪无须为了得到细胞群统计学资料而损失丰富的形态信息，也无须为了获得细胞细节而损失统计学功能。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/9d9b7215-7328-4a75-9018-1c4425cc45d0.jpg" title="010.jpg" alt="010.jpg"//pp style="text-align: center "span style="color: rgb(127, 127, 127) "Amnis图像流式细胞仪ImageStreamX Mark II/span/pp　　Sysmex公司最近推出MI-1000，自动检测多达10000细胞的图像荧光。/pp　　Union Biometrica公司的气流分选平台COPAS VISION也加入了明场图像。/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong10.专业化和临床型仪器纷纷面世/strong/span/pp　　CytoBuoy公司生产多种用于水体微型生物分析的流式细胞仪，如CytoBuoy安放在浮标上 CytoSub具有特殊的耐压装置，以及内部鞘液循环处理装置，不需外部加入鞘液，可在水下200米使用。Bentley Instruments 公司和Delta Instruments 公司公司专门提供牛奶场使用的专项检测仪器。/pp　　临床市场是商品流式细胞仪最具潜力的发展方向。但是，诊断流式试剂的研发和报证，以及符合检验流程的仪器开发，与不断增长的临床应用需求并不匹配。/pp　　一些公司推出了专门的小型流式细胞仪，用于CD4细胞的快速计数，如FACSCount、CyFlow Counter等。/pp　　迈瑞公司面向临床用户工作流程和场景推出BriCyte E6，针对淋巴细胞亚群分群等临床常规分析，可以实现检验仪器常有的一键得结果，免去繁复的电压和补偿调整，其LIS的双向通信，数据管理都非常符合临床诊断的期望。类似思路在后来上市的BD公司FACSlyric也有体现。/pp　　老牌血球生产厂商Sysmex 在收购Partec后的第五年，推出了PS-10流式样本前处理系统，配合新款流式XF-1600，实现样本处理、离心和检测的全自动化流程。详情请见：/pp　　全自动流式检测时代的来临!/pp　　可以期待，流式细胞仪未来将会作为一个重要的组成部分被整合到血液细胞分析流水线上，在这个系统中，血液细胞分析仪提供血常规结果和异常报警信息，流式细胞仪则根据这些信息对异常细胞进行不同策略的精细鉴别。/pp style="text-indent: 2em "strong style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "span style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "了解a href="https://www.instrument.com.cn/zc/144.html" target="_self" style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "详情请进入流式细胞仪专场/a/span/strong/p

首先感谢以下同仁向本文提供资料和信息：Sherrie女士，李增强先生；科瑞斯生物孙胜虎；微信公众号《竞逐IVD原料江湖》版主古井秋筠。——01—— 流式细胞术市场有多大？新的报告预估全球流式细胞术市场将从2022年的52亿美金增长到2027年的76亿美金。往前一年，则是估算2021年43亿美金，增长到2026年为63亿美金。司空见惯的市场预测，都是画一个基数，拍一个年复合增长率（这里是8%左右）。但，2022年回看估算的2021年43亿到2023年估算的2022年的52亿，增长20%，这其中发生了什么？其后能维持或者不能维持的理由又是什么？——02—— 大陆流式细胞术市场有多大？首先，终端销售额，流通商数据，制造商数据，大相径庭，不能混为一谈，甚至重复计算。累加制造商出货口径，大陆流式细胞市场容量大概在40亿左右。如果采信全球报告数据，按我们占全球10%~15%计算，则是5.2亿~7.8亿美金。——03——大陆流式公司有多少？不完全不确切统计，大陆流式公司生产及研发分布如下图。表中共收录140家公司，其中35家公司生产流式细胞仪或（和）微球流式细胞仪。看到表格，多数人的第一反应是“卷”——此词似乎已经成了人们的口头禅。生而为人，卷为宿命。什么事情不卷？一个事但凡少人做，原因不外乎难如乔（戈里）峰，想做做不到；或是轻如鸿毛，做也没意思。卷也符合事物发展的逻辑。生产商希望原料商卷以减低成本，终用户希望生产商卷以丰富选择。在卷的世道选择同卷，是乐观于百舸争流，无畏浪遏飞舟。在不卷的时候选择入，是坚定了俏不争春，守望山花烂漫。共性是底牌一张，你与众不同的是什么？应用、性能、价格、渠道还是人员？否则就是与快乐的小猪一起等风来。——04——光谱流式是流式发展的未来吗？是的，不然呢。至于质谱流式，其核心是质谱。让细胞流动起来并加上标签，本质上就是进样器。无论是光谱流式，还是质谱流式，过去一直执着于多色“军备竞赛”。其实，多色的应用面和话语权从来都在少数专家手上，懂的人不觉得正在使用的分光流式有什么不好；不懂的人如笔者，以为40色以上的应用在仪器层面上形成不了产业规模的需求。把目光放到20色以下——光谱流式把10色，15色，20色的细胞分群做得漂亮，简单上手，而且价格不比分光型流式贵，你会选择谁？当然，光谱流式高度依赖荧光染料（另文分析），目前染料倒是层出不穷，不谈价格的优越就是耍流氓。更重要的是，荧光染料最大发射波长和发射光谱的批间波动，用于分光型流式倒是无所谓，反正是带宽检测，但是用到光谱流式就不是一回事，这是亟待解决的问题。光谱流式区分两种发射光谱接近的荧光染料。图片由李增强先生提供——05—— 微球流式走向何方？参见 《发光向左，荧光向右：微球流式荧光未来在何方？》与传统流式相异，微球流式以微球为载体，以编码微球为特色，以同时多参数分析为优势。如果说光谱流式扩展了流式的生存空间，微球流式则拓宽了流式的应用边界。流式市场将因微球流式的日益普及而加速增长——增速8%还是20%，全村人希望所在！流式需要的编码微球，国内已经有10余家公司可以提供，并且多数是磁性微球，重数基本满足目前临床多参数分析的需要。当下的难点在于发现临床价值明显的项目，实现多而不费，同时相比单检速度快的项目有更好的性价比。——06—— 多联检细胞因子还有继续增长的空间吗？一般而言，流式临床项目普及，国内延循国外。除了细胞因子以外。目前，已有9家公司注册了29个细胞因子联检试剂盒——联检需要注册而非备案无需多言。这其中又涉及34个细胞因子及其它可溶性蛋白受体。求多求新的组合方式，借着”细胞因子风暴“在新冠三年带来大陆流式市场的一个高潮。但，医保控费的压力，以及疫情后临床选品趋于理性的趋势，让越来越多的人看到：这么多因子放在一起，价值何在，是否都不可或缺?同为促炎或同为抑炎的结果矛盾，是机制没有理清还是实验结果的误差？仅仅因为是可溶性受体合并为一个试剂盒，而对应基本不会同时发生的疾病，这样的联检意义何在？笔者有理由相信，接下来将是微球流式细胞因子的一个调整阶段，调整的结果是继续增长还是如同FITC 516nm之后的发射表现，见仁见智。——07—— 国内抗体原料厂家的生存空间何在？《竞逐IVD原料江湖》曾经发布过名单国内IVD抗原抗体厂家分布其中，能够提供CD分子抗体的公司不多，其中还有些是国外进口分装。据内部人士透露，大陆能够大规模生产CD分子抗体的公司不超过3家，至多5家。至于可溶性蛋白检测的抗体对和抗原，理论上化学发光、酶联免疫等厂家都可以提供，但至少在目前，大家的注意力还没有转移过来，甚至在网站主页上都不屑于一提。当然，国产绝对不应该成为厂家的第一甚至唯一优点，稳定的质量才是自产的生存基本，一票否决。顺便说到，国产化的定义是什么？是国内品牌，那么大家只好也不要出口。是国内设厂，这对国际大品牌来说日益成为常态。是国内出厂，那么原料依赖进口是不是另外一种形式的媚外？笔者会希望，如果我们以国产化为特点，以自主创新为优势，那么80%以上的成分都应该产自中华大地。图片来自网络

p　　日前，陕西师范大学发布分析型流式细胞仪单一来源招标公告，项目名称：分析型流式细胞仪，项目编号：SDJC-2017-0127-XK，开标时间：2017年09月21日 08:00。/pp　　招标公告内容显示，此项目是为陕西师范大学生命科学学院大型仪器设备共享平台购置的用于快速分析细胞及其他生物颗粒的物理或化学性质，对多个细胞特征进行定量或定性分析。项目建设单位在研究中需要进行多荧光标记和大量样本的检测，需要具备四个固态激光器，13个独立的荧光检测器且配备96孔板自动上样器，专家组在建设单位提交的相关采购材料的基础上进行充分的调研和论证，决定采用单一来源形式从西安信泰生物科技有限公司进行采购。/ppstrong　　技术标部分/strong/pp　　仪器名称：分析型流式细胞仪/pp　　数量：1 套，国产/pp　　用途：用于细胞、微生物、微纳米荧光材料等小颗粒的检测与分析。/pp　　技术指标：/pp　　1. 光学系统：/pp　　1.1 激光配置：四激光系统平台。激光器配置：第 1 激光：488nm 蓝色固态激光器 第 2 激光：630-640nm 红色固态激光器 第 3 激光：405nm 紫色固态激光器 第 4 激光：紫外固态激光器 375nm，完成≥13 色荧光 14 参数检测。/pp　　1.2 检测器：所有荧光检测通道分别对应独立荧光检测器，即最少配备≥13 个独立荧光检测器 高浓度样本无漏检、无死时间。/pp　　1.3 光路设计：固定校准的光路设计，智能监控确保激光稳定工作 用户可自行安装开机，无需专业人员调校。/pp　　1.4 激光器要求：机时达到 2000 小时，并提供免费质保服务。/pp　　1.5 流动室：光耦合物镜石英杯流动室。/pp　　1.6 颗粒检测能力：最小检测颗粒大小为 0.2μm。/pp　　1.7 检测灵敏度： FITC≤30MESF，PE≤10MESF。/pp　　1.8 荧光信号检测分辨率：CV≤3%。/pp　　2. 液体系统/pp　　2.1 管路清洁：带自动管路清洁功能，保持管路清洁，排除样本之间的干扰和污染，交叉污染 0.1%。/pp　　2.2 样本流直径：样本流直径可调：5-40um，或流速 5μl-120μl /min，保证数据的精准性，鞘液流直径也可以调。/pp　　2.3 样本检测速度(上样速度)：≥30000 个细胞/秒。/pp　　2.4 液流系统:注射泵驱动非加压液流系统，带液流控制报警系统，避免堵管。/pp　　2.5 上样系统：注射泵负压上样，上样管类型开放，可以用 5ml，1.5ml 试管，以及 96 孔板(保证不堵管)。/pp　　2.6 绝对计数：有细胞绝对计数功能且不需要使用绝对计数管。/pp　　2.7 鞘液系统：可商品化鞘液或超纯水，经 0.2um 过滤器过滤的超纯水/pp　　3. 数据处理/pp　　3.1 数据信号分辨率：数据信号分辨率≥24bit(≥16,777,216 channels)，结果显示动态范围不低于 7 个数量级，无需 PMT 增益电压调节，同时可调节电压。/pp　　3.2 荧光补偿：全矩阵荧光补偿，可脱机补偿，自动补偿，离线分析。具有预设荧光补偿库功能 用户自建补偿库，可以存储多色实验中荧光染料的溢出值，调节电压补偿矩阵自动计算，无需补偿方案。/pp　　3.3 分析软件：提供分析软件，可以完成所有检测分析，软件开放，所有软件负责及时、无限期免费升级。/pp　　3.4 标配台式电脑：CPU 主频 2.4G HZ 内存≥8G，硬盘≥1TB，独立显卡, DVD 刻录机，显存 4G windows 操作系统或 iOS 系统，要求与设备相匹配，并可处理存储充足的实验数据 /pp　　23 寸液晶显示器，两台。/pp　　4.工作条件/pp　　4.1 电源：220V，5050/60Hz。/pp　　4.2 变压器及洁净稳压电源：1 套。/pp　　5.试剂、耗材开放/ppbr//ppstrong　　项目联系方式：/strong/pp　　项目联系人：郭老师/pp　　项目联系电话：13572907905/p

p style="text-align: justify "　　span style="color: rgb(23, 54, 93) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai font-size: 14px "近年来，流式细胞仪市场“动作”频繁。2018年9月，安捷伦以2.5亿美元收购国产流式制造商ACEA，被业内称“靠谱国产品牌又少一个”。2018年10月，Luminex同意以7500万美元收购默克的流式细胞仪部门(于2019年1月完成此项收购)，将Amnis和Guava品牌收入囊中，从而扩大了Luminex在生命科学研究中的领域。2019年1月，中生苏州自主研制的流式细胞仪已在吉大一院投入临床使用。2019年2月，达科为与必达科共同推出Exflow品牌流式细胞仪。2019年2月，国产厂商赛雷纳也推出流式细胞仪新品。2019年，唯公科技研发的Easycell系列流式细胞仪也将获证上市。此外，博奥生物、竞天生物等国产厂商也于近年纷纷发布流式细胞仪产品，可见流式细胞仪市场生机勃勃。br//span/pp style="text-align: justify "span style="color: rgb(23, 54, 93) font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai font-size: 14px "　　如今国内流式细胞仪厂商近30家，流式细胞仪技术不断发展，仪器不断小型化到微流控，融合显微成像技术，未来应用前景十分广阔，可以满足更多用户的需求。流式细胞仪的发展已有数十年，为何在近些年备受关注?我国流式细胞仪市场特点以及应用前景是怎样的?为了对我国流式细胞仪市场发展情况作必要解读和评价，仪器信息网邀请艾森生物A part of Agilent流式产品经理严冰谈一谈对流式细胞仪的看法。/span/pp style="text-align: justify "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/liushixibaoyi" target="_blank"span style="text-decoration: underline "strongspan style="font-family: 宋体,SimSun font-size: 14px text-decoration: underline "点击进入span style="color: rgb(255, 0, 0) font-family: 宋体,SimSun font-size: 14px text-decoration: underline "“进击的”流式细胞仪专题/span，解锁更多流式行业信息！/span/strong/span/a/pp style="text-align: center "img width="342" height="456" title="微信图片_20190313153257.jpg" style="width: 342px height: 456px " alt="微信图片_20190313153257.jpg" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/cce1481d-4654-42f5-9b0c-08d79c16088b.jpg"//pp style="text-align: center "strong艾森生物A part of Agilent流式产品经理严冰/strong/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网：您认为流式细胞仪的中国市场与全球市场有哪些不同?请您谈谈流式细胞仪在中国的市场前景以及未来机遇。/strong/span/pp style="text-align: justify "strong　　严冰：/strong细胞治疗是未来医学的三大支柱之一，随着精准医疗被列入国家“十三五”规划，细胞治疗在中国的研究和应用蒸蒸日上，有很大的发展空间。但是在肿瘤免疫细胞生产的标准化、产业化方面还是存在一些瓶颈，如果能够引入全球领先技术、解决这些瓶颈，就会进一步加速细胞治疗产业的进程。流式细胞仪是在细胞治疗领域的一个重要的研究和研发依托，不但具有精确稳定的分析性能，而且其特有的单细胞水平分析能力在细胞治疗领域中发挥不可或缺的作用。/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网：贵公司的流式细胞仪技术特点是什么?看好的细分市场领域哪些?/strong/span/pp style="text-align: justify "strong　　严冰：/strong艾森生物一直秉持“客户至上(customer value)”的产品开发设计理念，顺应客户需求及流式细胞仪的发展趋势，给客户带来集“超凡性能”和“超简体验”为一体的高端智能化流式细胞仪系列产品。/pp style="text-align: justify "　　2018年在上一代智能化流式细胞仪基础上发布的Quanteon流式细胞仪，提供了更高的性能以适应更高端的使用需求。Quanteon支持多达27个参数，每个通道都配备了独立的检测器 FSC / SSC检测光学元件和信号处理元件均经过优化，适用于尺寸小至0.1μm的颗粒检测，可轻松识别和分析血小板、细菌以及各种亚微米颗粒 除了能够成功分辨8峰微球之外，Quanteon对于细胞群也可以更清晰的进行分群 配备的自动上样系统 NovoSampler Q 可兼容40管流式管架、24/48/96/384孔板等多种上样方式，能够在20分钟内采集完一块96孔板的所有数据，且能够整合到不同的实验室自动化平台。软件方面，Quanteon流式细胞仪预装的最新版NovoExpress操作软件，在延续功能全面、直观易用等特点的基础上，提供了更加强大的分析和数据报告性能。软件整体以工作流程为导向，模块化设计保证实验流程一目了然，且能够在中英文用户界面间随时自由切换。艾森生物希望通过Quanteon流式细胞仪，带给全球流式用户一个划时代的高端体验， Quanteon流式细胞仪也将在肿瘤免疫、生物治疗等多个细分领域发挥其作用。/pp style="text-align: center "img width="470" height="325" title="Novocyte Quanteon.png" style="width: 470px height: 325px " alt="Novocyte Quanteon.png" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/7841c1f6-c51d-4de8-b11c-a19d1cb9a25f.jpg"//pp style="text-align: center "strong艾森生物Quanteon流式细胞仪/strong/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网：请介绍贵公司流式细胞仪技术的发展历史?/strong/span/pp style="text-align: justify "strong　　严冰：/strong艾森NovoCyte流式细胞仪是国内第一台自主研发的流式细胞仪，是对细胞进行自动分析的新一代智能装置，可用于临床疾病检验和生命科学的基础研究，如HIV诊断、造血系肿瘤诊断和分型、移植前配型以及免疫相关疾病分析等。NovoCyte流式细胞仪产品最高配置达三激光十四个荧光检测通道，检测通道可自由组合，检测智能化、自动化，无需耗材直接绝对计数、检测稳定性高、动态检测范围广、数据采集完整可靠、灵敏度高、分辨率高、交叉污染率极低。与此同时，艾森公司获批了70余个CFDA认证的配套试剂产品，包括淋巴细胞亚群分析、HLA-B27检测系统、白血病单色试剂、细胞因子检测试剂等，并持续进行研发以满足临床市场的需求。/ppspan style="text-decoration: underline " /spanbr//pp style="text-align: center "strong仪器信息网生命科学官微“span style="color: rgb(192, 0, 0) "3i/spanspan style="color: rgb(0, 112, 192) "生仪社/span”上线啦! /strong/pp style="text-align: center "strong关注进群了解更多生命科学干货资讯！/strong/pp style="text-align: center "img title="新 公号icon.jpg" alt="新 公号icon.jpg" src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/b4d91c70-69cd-4f66-b5f2-903bc61c39a2.jpg"//p

电视剧《心术》的热播，让医院再度成为人们关注的热点。而大家关注的，已不仅仅是医生、护士的工作生活和医患关系，医院的实验室、手术室这些地方更是引起了很多人的好奇。这些地方和电视剧中描写的一样吗?为了将谜底揭开，21日，记者也和剧中人物黄菁菁一样，从头到脚裹了个严实，随医生走进了生物细胞实验室进行探访。　　决不允许将一丝细菌带入山西医科大学第二医院的生物免疫细胞实验室，是用于为肿瘤患者培养免疫细胞，治疗肿瘤的专用实验室。先以采血的方式将完好的免疫细胞从患者体内抽出，再通过分离、培养，使免疫细胞激活、扩大，再回输到患者体内，从而增强患者自身免疫力，来对抗肿瘤。而这个实验室的作用，就是细胞的分离、培养和储存。　　记者随着实验室负责人郑鹏博士首先进入到了实验室的更衣间，在他的指导下，将无菌帽戴好，口罩、一次性手套、无尘服、鞋套……一样样穿戴上身。郑博士在检查记者的“武装”是否到位时，特别将留在外边的头发向帽子里塞了塞，说道：“一定要严格穿戴，决不允许将一丝细菌带入实验室内，实验室要求绝对无菌的。”武装完毕之后，记者照了照镜子，有一丝丝的小兴奋，除了两只眼睛和稍许的额头以外，整个人全部都被“包”了起来。　　记者的随身物品，包括相机、采访本等是不允许从正门携带进入的，而是有一个专门的无菌仓，里外可以互通，通过那里进行拿取。　　显微镜下细胞清晰可见实验室里的温度有些偏低，不过穿上防护衣后，一般人是不会感到不适宜的。200多平米的占地面积，有3个细胞工作室，3个细胞培养室，一个细胞储存间，还有一个医用药品储存间。目前，有两个细胞工作室和两个培养室投入使用。　　记者随郑博士来到细胞工作室，里面恰好有两名穿着防护服的工作人员在为患者进行细胞分离。“这叫生物安全柜，所有的细胞分离都是在这里进行操作的。”郑博士指着工作室内最大的一台仪器介绍道。“先将患者姓名及资料写在离心管上，再将分离液倒入离心管，将患者体内抽出的细胞用移液管移入，放进离心机内，20—25分钟后，离心管内的液体会分为三层，其中最中间的那层白膜，就是我们需要进一步培养的细胞液体。”实验室的工作人员郭大夫一边操作，一边为记者介绍。由于细胞分离需要绝对的专业技术，因此，记者也只是在一旁观看学习，不敢轻易碰触。　　记者对培养出的新细胞非常感兴趣，于是，郑博士在细胞培养室内，取出几个装着细胞的医用器具，将其放在显微镜下，调好焦距，让记者观看。记者坐好，然后按照要求将两眼凑到显微镜前，亲眼看到显微镜下，呈不规则圆形的细胞清晰可见，且有的是沉着状，有的是悬浮状。　　储存冰箱温度低达零下80摄氏度其实实验室的气氛并没有大家想像得那么严肃，除了正常的分离细胞工作之外，大家的交谈还是非常随意的。为了不长时间打扰郭大夫工作，记者又随郑博士来到细胞培养室，看到了正在培养中的细胞生命。　　通过离心机分离出来的细胞，是要加入培养液，放入培养箱内，进行为期两周的培养工作的。记者在现场看到，培养箱的外形有些像普通冰柜大小，呈长方形，里面有很多夹层，放着不同患者的细胞，且箱内温度为37摄氏度。“这些细胞游离于培养液中，肉眼是看不见的，只有像刚才放在显微镜下，才可以看到。”郑博士解释。“两周以后，细胞就培养成了，这个时候患者的身体若发生变化，不适合回输细胞，那这些细胞会不会就白培养了呢?”面对记者的疑问，郑博士又带记者来到了细胞储存间。　　细胞储存间内，有一个特别明显的，外形酷似冰箱的东西。郑博士说这就是细胞储存器，又叫零下80摄氏度冰箱。这也就意味着，这个冰箱内的温度低达零下80摄氏度。而患者若延迟回输细胞，便可放在这里进行短暂储存。　　郑博士打开冰箱的大门，一股寒气随即逼近，记者不禁打了一个寒颤。冰箱内结满了厚厚的白霜，冷气缭绕，隐约看到很多培养成型的细胞在里面进行着冷冻储存，这也是记者第一次近距离接触零下80摄氏度的专用冰箱。“细胞不可能长久在这里储存，也是有时间限制的，一般情况下为两周，所以，我们还是会尽可能为患者进行回输，保证患者的生命安全。”郑博士介绍。

p style="text-align: justify "strong——国内首个获CFDA批准的自主品牌小型化流式细胞仪上市。/strong/pp style="text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/6156a5d1-e90f-47e2-999c-f211947b5201.jpg" title="1.jpg" alt="1.jpg" width="553" height="410" style="width: 553px height: 410px "//pp style="text-align: center "赛雷纳Sparrow流式细胞仪/pp style="text-align: justify "　　近日，由位于四川成都的高新技术企业-赛雷纳(中国)医疗科技有限公司自主研发的新一代小型流式细胞仪span style="color: rgb(192, 0, 0) "获得国家食品药品监督管理局(CFDA)批准的二类医疗器械注册证，成为国内首个获批上市的自主品牌的小型流式细胞仪产品，相关配套试剂也同期获取CFDA批准上市证书。/span/pp style="text-align: justify "　　strong流式细胞仪具有广泛的应用领域/strong/pp style="text-align: justify "　　流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析的装置。它可以快速测量(分析速度可达每秒数千个细胞和更多)、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量(信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号)。流式细胞仪主要由四部分：流动室和液流系统 激光源和光学系统 光电检测系统 计算机和分析系统。/pp style="text-align: justify "　　流式细胞仪常用于临床检测、细胞生物学研究、农林畜牧养殖研究、微生物学应用以及食品药品检测等领域。在临床检测中的感染科、呼吸系统、消化系统、泌尿系统、内分泌功能、风湿免疫性疾病、血液疾病科等科室中检测多达上百种疾病。目前，国内相关疾病检测需求巨大，科研应用也是种类繁多，流式细胞仪是不可或缺的检测仪器。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/560dd19e-27c6-4970-acb5-701810371cf5.jpg" title="2.jpg" alt="2.jpg" width="627" height="343" style="width: 627px height: 343px "//pp style="text-align: justify "　　strong常见流式细胞仪无法有效满足临床市场发展需求/strong/pp style="text-align: justify "　　流式细胞仪大多数为国外产品，基本分布在三甲及以上大型医院，面对中国庞大的患者人群，无法提供高效廉价的检测服务，有如下主要原因：/pp style="text-align: justify "　　1、价格高昂：仪器一般在50万人民币以上，且配套试剂价格昂贵，超过基层医院的财务承受能力。/pp style="text-align: justify "　　2、操作复杂，使用不便：各类检测内容需要调整多项设备参数和数据分析流程，操作人员需要专业培训定岗操作，加剧了流式细胞仪在中国以及基层医院使用的难度，无法满足国内临床市场刚需。/pp style="text-align: justify "　　strong小型化、易普及——赛雷纳流式细胞仪/strong/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201902/uepic/0f481b74-aec1-4b9e-8668-6e154ef519bd.jpg" title="3.jpg" alt="3.jpg" width="601" height="115" style="width: 601px height: 115px "//pp style="text-align: justify "　　span style="color: rgb(192, 0, 0) "赛雷纳研发的Sparrow流式细胞仪，/span基于企业多年技术研发和产品转化能力，在系统集成方案，器件选择，数据分析智能化等内容取得了关键突破，实现了小型化，低成本的智能化操作。/pp style="text-align: justify "　　Sparrow流式细胞仪配备双色高性能激光器，自主设计的光路无需调整，同步检测6个信号参数，具备准确绝对计数能力，并配套全自动样本处理功能、极大提高了工作效率 自主研发AISFCM全中文分析软件，傻瓜化一键操作模式，无需用户设置相关参数，仅需5分钟学习即可掌握仪器使用，降低人员的专业能力要求，使得仪器操作更方便、检测结果准确度更高、以更低的检测成本满足中国基层医院的需求。/pp style="text-align: justify "　　目前Sparrow流式细胞仪已应用于多家医疗机构和检测中心。Sparrow流式细胞仪以小型化、以简驭繁的特点，可将重要检测拓广至基层单位，为流式细胞仪广泛应用提供了低成本高精准的解决方案，翻开了中国医疗流式广泛应用的新篇章。/p

p style="text-indent: 2em text-align: justify "span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongspan style="text-align: justify text-indent: 2em "艾滋病的那些事儿/span/strong/span/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "span style="text-align: justify text-indent: 2em "据报道，2019年11万名孩子死于艾滋，每过100秒就有一人被感染。/spanspan style="text-align: justify text-indent: 2em "世界卫生组织于1988年将每年的12月1日定为世界艾滋病日，号召世界各国和国际组织在这一天举办相关活动，宣传和普及预防艾滋病的知识。/span/pscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=C5032FDE33AFEC019C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=490&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptp style="text-align: justify text-indent: 2em " “艾滋病感染者在感染之后，一般有长达8-10年的潜伏期，又称作无症状期。即使在急性期和艾滋病期，也缺乏特异性表征，艾滋病检测是目前唯一能够判断一个人是否被感染的途径。因此，我们大力提倡全民自愿检测，尽可能早发现、早治疗，提高感染者的治疗率和治疗有效率。所以，如果想了解是否感染了艾滋病，只能通过检测，否则会延误最佳治疗时机。”中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心二级研究员马丽英表示。span style="text-indent: 2em "br//span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(192, 0, 0) "strongspan style="text-indent: 2em "CD4+T淋巴细胞检测——HIV感染分期诊断的主要依据/span/strong/spanbr//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "CD4+T淋巴细胞在人体内扮演重要角色，它是机体的主要免疫细胞。CD4+T淋巴细胞也是HIV攻击的靶细胞，HIV感染导致CD4+T淋巴细胞进行性减少，CD4+／CD8+T淋巴细胞比值倒置，机体细胞免疫受损，出现多种机会性感染和恶性肿瘤等艾滋病相关疾病。这使得CD4+T细淋巴细胞检测和临床表现成为了HIV感染分期诊断的主要依据。br/ br/ 如今在临床上，根据病情和动态监测患者CD4+T淋巴细胞的数量以及CD4+／CD8+T淋巴细胞比值，有助于在治疗过程中监测治疗的效果和判断免疫功能是否重建，治疗前还可以用作疾病的分期。根据《中国艾滋病诊疗指南（2018版）》中艾滋病期的诊断标准：成人及≥15岁青少年HIV感染加CD4+T淋巴细胞数 200个／μL，可诊断为艾滋病。HIV感染的15岁以下儿童只要CD4+T淋巴细胞百分比 25%( 12月龄)或 20%(12~36月龄),或 15%(37~60月龄),或计数 200个／μL都可以诊断为艾滋病。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(192, 0, 0) "strong流式细胞仪--HIV检测利器/strong/spanbr//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "流式细胞术是一种结合了细胞生物学、流体力学、光学、电学等多种学科的临床检测技术，也是目前检测CD4+T细胞的数量以及CD4+／CD8+T淋巴细胞比值最常用的方法。随着流式细胞仪的发展和试剂的开发，采用单平台法，如利用绝对计数微球、体积法绝对计数可实现对CD4+T淋巴细胞的精确计数，避免不同平台间的误差，减少了计数操作的复杂程度；减少引入误差机会、提高结果的准确性和可重复性；同时，还大大降低报告结果的时间，提高临床检验的时效性。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/8a3491fa-5bdc-4b90-a633-2a056bd59e24.jpg" title="微信图片_20201201172943.jpg" alt="微信图片_20201201172943.jpg"//pp style="text-align: center "图：使用安捷伦Novocyte流式细胞仪进行HIV病人样本CD4+计数分析/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C376252.htm" target="_blank"strongimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/69d80756-b42d-4b54-ac3e-f3e8378247bd.jpg" title="5334fe96-ed73-4561-8430-55604ba3e99c.jpg!w300x300.jpg" alt="5334fe96-ed73-4561-8430-55604ba3e99c.jpg!w300x300.jpg"//strong/a/pp style="text-indent: 0em text-align: center "a href="https://www.instrument.com.cn/netshow/C376252.htm" target="_blank"strongAgilent NovoCyte 流式细胞仪（点击查看）/strong/a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "2014年，联合国艾滋病规划署就提出来了三个90%的防治策略：90%的HIV感染者通过检测知晓自己的感染状况，90%已经诊断的HIV感染者接受抗病毒治疗，90%接受抗病毒治疗的HIV感染者病毒抑制。三个90%的策略是重点围绕发现传染源，控制传染源，治疗传染源，通过管好传染源来有效控制艾滋病的传播，从根本上降低新发艾滋病毒感染和相关死亡率，改善艾滋病毒感染者的健康状况。br//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(192, 0, 0) "strong“携手防疫抗艾共担健康责任”/strong/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "在我国，由于艾滋病漫长而不确定的潜伏期和庞大的人口基数，仍有相当一部分的感染者仍未被发现并未接受有效治疗、实现生命的质量提升和寿命延长，在实现三个90%的道路上还需要全民的积极参与！br//pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/4cede4c2-f203-4a88-a5ec-236b0a34d755.jpg" title="微信图片_20201201172953.jpg" alt="微信图片_20201201172953.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "今年我国“世界艾滋病日”宣传教育活动主题为“携手防疫抗艾共担健康责任”（Global solidarity, shared responsibility）。旨在强调在全球抗击新冠肺炎疫情背景下，加强团结协作，强化落实政府、部门、社会和个人“四方责任”，携手应对新冠肺炎、艾滋病等全球范围内重大传染病挑战，共同抗击艾滋病，为实现艾滋病防控目标、构建人类卫生健康共同体努力。span style="color: rgb(191, 191, 191) font-size: 12px "（文源：安捷伦）/span/p

p style="text-align: justify text-indent: 2em "指真生物CytoPOC系列流式细胞仪获得北京市药品监督管理局批准的二类医疗器械注册证，成为国内获批上市的首个专门针对基层医疗机构和中小型实验室的流式细胞仪。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/c21a7718-1459-480b-af16-9c9c2feeab95.jpg" title="微信图片_20200109115817.jpg" alt="微信图片_20200109115817.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "CytoPOC系列流式细胞仪标配488nm激光器，支持FITC、PE、PerCP和PE-Cy7，能够覆盖临床常规开展的淋巴细胞亚群分析（TBNK）及CD4细胞绝对计数、HLA-B27、血液病/淋巴瘤分型、DNA倍体分析、细胞因子等。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong“简单、智能、自动”/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "指真生物CytoPOC系列流式细胞仪与PreSampler样本处理器组合产品，正是针对基层医疗机构“流式检验人员不足、样本量少、操作需求简易化”等实际“痛点”开发的智能化、自动化流式产品。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "CytoPOC系列产品提供智能化分析功能，针对常规应用，实现“一键上样、自动报告”，与preSampler样本处理器组合，实现从样本处理到样本分析的自动化、智能化流程，极大降低流式分析的操作门槛，提高临床流式检验工作效率。/pp style="text-indent: 2em "strong市场风云/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "近两年，流式细胞仪市场“动作”频繁。2018年9月，安捷伦以2.5亿美元收购国产流式制造商ACEA，被业内称“靠谱国产品牌又少一个”。2018年10月，Luminex同意以7500万美元收购默克的流式细胞仪部门(于2019年1月完成此项收购)，将Amnis和Guava品牌收入囊中，从而扩大了Luminex在生命科学研究领域的影响力。2019年2月，达科为与必达科共同推出Exflow品牌流式细胞仪。此外，中生医疗和赛雷纳等国产厂商纷纷推出流式细胞仪新品，2019年12月，唯公科技获得数千万A轮融资，可见流式细胞仪市场生机勃勃。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "流式细胞仪的发展已有数十年，为何各厂商近年纷纷选择布局流式细胞仪市场?流式细胞仪市场有什么样的特点？为了对我国流式细胞仪市场发展情况作必要解读和评价，仪器信息网邀请流式细胞技术业内多位专家为您带来精彩解答，详情点击下方图片或链接进入“进击的”流式细胞仪专题。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/liushixibaoyi" target="_blank"“进击的”流式细胞仪专题：/a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/liushixibaoyi" target="_blank"https://www.instrument.com.cn/zt/liushixibaoyi/a/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zt/liushixibaoyi" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/98ac353c-6357-423e-a3b6-52a8ac4c0076.jpg" title="企业微信截图_20191226142346.png" alt="企业微信截图_20191226142346.png"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "br//p

当样本细胞数少的时候，你应该如何进行样本处理？这个问题，曾经很多做实验的都碰到过，尤其是做小动物的，例如做小鼠的胰腺组织，往往只能分离出不多的细胞，处理中又很容易丢掉，导致最后上机获取到的细胞寥寥无几，给结果解读带来很大困难。因此，重要的是，如何尽量避免丢失，保障有足够的细胞进行实验呢。在Cyt-Geist中，汇总了以下建议，相信对遇到相同困境的FLOWER会有较大帮助：1、建议从野生型或其他相同细胞来源获取细胞掺入进去。如果感兴趣的细胞标记了荧光蛋白，那么可以使用没有荧光蛋白标记的野生型细胞来增加细胞数量，这样既可以区分出感兴趣的细胞，又使分析过程中的细胞损失降至最低。因为细胞丢失率是一定的，当细胞总量增加后，尽管你的目标细胞比例减少了，但是丢失的绝对数也相应减少。2、建议使用细胞系进行实验。在某些研究中，可以使用从感兴趣细胞建立的细胞系，这些细胞可以代替感兴趣的细胞来建立电压和设门等条件，这样可以大大减少样本的消耗，实现样本最大价值。3、与血液不同，来自实体器官的原代细胞在用于流式分析之前，必须经过数个涉及机械和酶解等步骤。由于这些解离步骤，细胞完整性可能受到损害。为了保证样品质量和细胞数量，需要关注解剖手法和解离方案的优化。除了优化解离程序外，还应优化整个实验中使用的温度条件。建议使用目标细胞优化这些条件，或者至少使用与目标细胞相似的细胞（即衍生细胞系）。优化条件和方案可以更好地解离细胞，并将解离时间最小化，从而保持细胞完整性。4、为了使细胞在准备步骤中保持“happy”和活性，建议使用无血清培养基，而不是常规使用的磷酸盐缓冲液（PBS）。应确保所使用的缓冲液不含酚红，否则可能干扰分析。另外，应考虑用于优化缓冲液，例如HEPES缓冲液在室温下的pH值优于磷酸盐缓冲液，这使其成为流式细胞术样品制备的理想选择。

聚光科技生命科学板块旗下杭州谱康医学科技有限公司自主研发、自主生产的SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪正式获批浙江省药品监督管理局颁发的《医疗器械注册证》（浙械注准20232222037），获准上市。谱康医学，赞16谱康医学SFLO CL系列是拥有自主知识产权、为临床用户量身定制的临床全光谱流式细胞仪。基于全光谱技术，突破传统滤光片的限制，实现在同样的激光器配置下，检测更多标志物。全光谱采集系统配合流式分析工作站，辅以高效的软件算法，减少荧光光谱重叠所导致的补偿问题，合并高精度注射泵进样和无脉动鞘流系统设计带来的高稳定样品聚焦能力，保证了临床使用的灵敏度和稳定性。SFLO CL系列临床全光谱流式仪包含SFLO CL-1、SFLO CL-2、SFLO CL-3共三个型号，支持最高3激光39荧光通道，实现分管检测向一管检测转化，提高临床检测标准化，更好地为临床服务。 丰富的临床应用SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪广泛应用于免疫学、癌症诊断和治疗、微生物学、血液学及遗传学等领域，覆盖临床常规开展的淋巴细胞亚群分析（TBNK及TBNK plus）及CD4细胞绝对计数、细胞因子检测、HLA-B27检测、白血病/淋巴瘤免疫分型、造血干细胞计数、精子检测和DNA倍体分析等检测项目，为临床检测提供更多选择。 全中文操作软件SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪采用Windows系统的全中文全光谱采集分析软件，界面设置简洁，操作简单方便，更符合中国临床医师日常操作习惯。操作软件具备高度智能化，可实现数据自动化分析，校准和参数调节简单方便，灵活性强，实验模板功能实现一键开始新一轮检测，使临床应用更加简便快捷、游刃有余，显著提升检测效率和智能化水平。依托此次SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪获批上市，谱康医学将为临床检测打造更加完善的标准化检测方案，助力临床检测实现更简便的操作、更高效的分析、更可靠的结果，为国人精准诊断提供坚实依据。聚光科技生命科学板块旗下杭州谱康医学科技有限公司成立于2020年，在原有雄厚的分析设备研发能力基础上，全面开拓生命科学领域市场。谱康医学以流式细胞检测技术为核心，提供专业化的硬件及配套试剂，同时为客户开发开展定制化服务。公司坚持流式细胞仪产业化协同发展战略，拥有高学历流式设备专业研发团队，标准化的GMP生产车间，丰富的实验室建设经验，成熟的实验室管理体系，已经全面掌握流式核心的设备制造技术及设备集成的开发能力，旨在为客户提供整套细胞解决方案。

聚光科技（300203）生命科学板块旗下杭州谱康医学科技有限公司自主研发、自主生产的SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪正式获批浙江省药品监督管理局颁发的《医疗器械注册证》（浙械注准20232222037），获准上市。　　谱康医学SFLO CL系列是拥有自主知识产权、为临床用户量身定制的临床全光谱流式细胞仪。基于全光谱技术，突破传统滤光片的限制，实现在同样的激光器配置下，检测更多标志物。　　全光谱采集系统配合流式分析工作站，辅以高效的软件算法，减少荧光光谱重叠所导致的补偿问题，合并高精度注射泵进样和无脉动鞘流系统设计带来的高稳定样品聚焦能力，保证了临床使用的灵敏度和稳定性。　　SFLO CL系列临床全光谱流式仪包含SFLO CL-1、SFLO CL-2、SFLO CL-3共三个型号，支持最高3激光39荧光通道，实现分管检测向一管检测转化，提高临床检测标准化，更好地为临床服务。　　丰富的临床应用　　SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪广泛应用于免疫学、癌症诊断和治疗、微生物学、血液学及遗传学等领域，覆盖临床常规开展的淋巴细胞亚群分析（TBNK及TBNK plus）及CD4细胞绝对计数、细胞因子检测、HLA-B27检测、白血病/淋巴瘤免疫分型、造血干细胞计数、精子检测和DNA倍体分析等检测项目，为临床检测提供更多选择。　　全中文操作软件　　SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪采用Windows系统的全中文全光谱采集分析软件，界面设置简洁，操作简单方便，更符合中国临床医师日常操作习惯。操作软件具备高度智能化，可实现数据自动化分析，校准和参数调节简单方便，灵活性强，实验模板功能实现一键开始新一轮检测，使临床应用更加简便快捷、游刃有余，显著提升检测效率和智能化水平。　　依托此次SFLO CL系列临床全光谱流式细胞仪获批上市，谱康医学将为临床检测打造更加完善的标准化检测方案，助力临床检测实现更简便的操作、更高效的分析、更可靠的结果，为国人精准诊断提供坚实依据。　　聚光科技生命科学板块旗下杭州谱康医学科技有限公司成立于2020年，在原有雄厚的分析设备研发能力基础上，全面开拓生命科学领域市场。谱康医学以流式细胞检测技术为核心，提供专业化的硬件及配套试剂，同时为客户开发开展定制化服务。公司坚持流式细胞仪产业化协同发展战略，拥有高学历流式设备专业研发团队，标准化的GMP生产车间，丰富的实验室建设经验，成熟的实验室管理体系，已经全面掌握流式核心的设备制造技术及设备集成的开发能力，旨在为客户提供整套细胞解决方案。

Millipore公司携手Guava Technologies公司共同推进微毛细管式细胞分析/计数仪在生命科学领域的应用。2008年9月24日至27日，Millipore与联科生物，普飞生物以及麦约尔生物技术有限公司一起，共同为Guava 微毛细管式细胞分析/计数仪新品发布揭幕。 Guava微毛细管式细胞分析/计数仪 微毛细管核心技术 　　此次发布会暨学术研讨会在上海第二军医大学、交通大学、中科院和华山医院共举办四场，吸引约300名专家学者参与。Millipore公司中国总经理陈亮致开幕词，并为莅临研讨会的来宾介绍了Millipore的公司文化，运营策略以及发展蓝图。Millipore已经逐步从传统的膜技术，过滤和超纯水为业务主导的公司，过渡到以推进生命科学发展为己任，涵盖抗体，试剂等业务多元化发展的生物科技行业领先者。 Millipore公司中国总经理陈亮致开幕词 Millipore公司亚洲总裁Ray Shin右揭幕 　　Millipore公司Bioscience市场部经理吴波博士为大家详细介绍了新一代“流式”技术—Guava微毛细管式细胞分析/计数仪。该系统摈弃了传统流式技术使用了近40年之久的鞘液流体系统，创新采用了专利的微毛细管技术，具有实验体系要求少（无鞘液）；系统使用与维护需求少；体积小；分析功能更强大（能做绝对计数，更精细细胞活力分析等）等超越传统流式细胞仪（三多一少）的特点。该系统新颖的设计和突出的优势吸引了广大专家学者的关注。在环保意识深入人心的当今社会，相信会有越来越多的人会对无鞘液细胞分析技术给予重视。 Millipore市场部经理吴波博士介绍 Millipore亚洲区技术经理章芳博士 Guava微毛细管式细胞分析/计数仪 Epigenetics 精彩演讲 Millipore亚洲技术支持详细介绍操作　　许多来宾纷纷表示，参加这次学术研讨会的另一大收获就是与Millipore公司亚洲区技术经理章芳博士在Epigenetics领域进行了现场讨论和交流。随着核功能研究的不断深入，不少实验室的研究已经达到基因水平。癌症以及遗传疾病依然是临床研究的重要方向。章博士讲了组蛋白修饰, DNA甲基化，ChIP(染色质免疫沉淀)的艺术和MSP (DNA甲基化特异性PCR)等专题，带来了当今表观遗传学最前沿的发展趋势和研究热潮。　　会后，Millipore亚洲技术支持中心的专业技术人员详细地为各位专家学者进一步介绍Guava微毛细管式细胞分析/计数仪的具体操作以及软件应用，为该次发布会上海站画上圆满的句号。

实施荧光检测是提高检测质量和灵敏度的一个快捷有效的途径。实现荧光检测最优化要求光学系统同时具有灵敏度和灵活性。以使用发射光束能横跨整个波长光谱的荧光染料为前提，高性能的光电倍增管 (PMT) 可以帮助您进行多重分析检测，给您清晰分离的信号和绝对的检测灵敏度。 细胞荧光检测增加了其他复杂因素：分析微孔底面分布不均匀的贴壁细胞极具挑战性，以及如何最大限度地减少培养基的自体荧光。Tecan Spark微孔板多功能酶标仪，采用荧光Fusion Optics™ 技术，能够应对这些挑战并提供您在设计及运行高等生物化学检测及基于细胞的荧光检测所需要的所有技术支持。 Tecan Spark多功能酶标仪，准确、灵敏地测定细胞荧光。使用灵活的Fusion Optics技术，发展高灵敏度的荧光检测方案 Spark独特的Fusion Optics功能为您的检测方案的提供了灵活且灵敏的开发平台。利用Fusion Optics技术, 您可以在同一检测试验中按需组合使用滤光片和光栅。这是相对于全功能酶标仪性能上的重大飞跃。 滤光片选择的灵活性既能够使激发端的光束输入最大化，也能使发射端信号检测效果最大化，而光栅能通过扫描以确定最优化设置的波长。用户选用的深阻二向色镜能提高波长谱末端常见染料的灵敏度。大功率氙闪灯减少了得到可靠灵敏的结果所需的闪光次数，因此您不必在灵敏度和速度间犹豫不决。结合应用了SparkControl软件后，系统可以通过自动调节扩大动态范围，避免荧光检测进入饱和状态。 使用光栅/光栅系统（浅绿）和光栅/滤光片系统（深绿）来扫描激发和发射波长的最大值。第二种组合系统能识别出更鲜明且灵敏的最大值。细胞检测时聚焦于微孔底面进行酶标可以使背景的自发荧光最小化 在细胞荧光分析中，使用传统的微孔底面酶标技术会降低检测的灵敏度，因为光束在到达样品之前必须要先穿过塑料或者玻璃板。这就降低了可以激活荧光的光束的量。Tecan Spark酶标仪能为您提供高性能的微孔底面酶标模块，以解决上述问题。Tecan Spark酶标仪拥有基于透镜的底面酶标系统，结合能将光束引导到样本焦点的Z-focus程序, 能提供极高的灵敏度。优化的酶标功能通过多次测量排列在微孔中的分离的样本点，可以使细胞分布不均导致的差异最小化。 基于细胞的检测所得的安全可靠的结果 为了可以得到可以在不同实验，不同微孔间比较的细胞检测结果，您需要特别注意细胞数量、细胞分布和细胞的健康状况。Tecan Spark酶标仪运用明视场及免标记技术、激光自动对焦技术，使您能够检查这些自动检测参数。细胞图像和细胞汇合度可以进行自动测量。使用SparkControl的实况查看器, 您可以使用Snapshot功能，记录开始实验之前的最后一个图像。 Tecan Spark酶标仪的细胞孵化功能如温度控制、气体控制和湿度控制允许细胞在酶标仪中孵育几天的时间。Tecan Spark酶标仪的自动开盖和进样器功能，以及可以进行有条件动力学编程，使检测的完成实现了智能自动化。例如，正常生长控制条件下细胞可以在酶标仪中生长；达到预定的细胞汇合度之后，酶标仪可在微孔中加入某种物质，激发GFP的产生。这是额外的荧光动力学监测功能, 在运行的同时监测图像以控制细胞的生长。总结Tecan Spark多功能酶标仪，以它独特的Fusion Optics技术，能在荧光检测领域带给而我们绝佳的性能体验。在同一检测中，滤光片和光栅的组合带给我们前所未有的灵活度，却丝毫没有影响其准确性。 环境控制特征、 成像能力及其动力学条件，使您的细胞检测实验得以自动化和标准化，且具有极高的重复性。结合了特殊的酶标功能，如基于透镜的底面酶标系统、自动化的z-focus以及优化的酶标功能，Tecan Spark是研究细胞和荧光时最理想的多功能酶标仪。

2021年4月7日，深蓝云Gene-π数字PCR学堂——先进治疗中核酸绝对定量分析及应用（上海张江站）成功举办。本次训练营以理论结合实践的形式，聚焦于数字PCR原理系统、实验操作、应用进展、结果分析，先进治疗中的质量控制、病毒载体标准品定量等核心内容，受到了学员们的一致好评。数字PCR技术的诞生和发展为核酸精准定量和基因检测提供了全新的思路，可实现单细胞/单分子层面的绝对定量。目前，该技术已经在肿瘤个体化诊疗、基因编辑、液体活检、病原微生物、先进治疗检测等前沿生命科学研究、临床医学检验、药物研发等多个领域实现突破性应用和发展。为了更好地让广大临床、科研工作者了解数字PCR技术，本次训练营对第三代数字PCR技术及naica️微滴芯片式数字PCR技术介绍、数字PCR系统原理、naica️数字PCR核酸绝对定量技术及先进治疗中的应用等方面进行了详细介绍，同时进行实操。▲ 专家在进行精彩的分享▲ 实验操作数字PCR技术的诞生和发展为核酸精准定量与基因检测提供了全新的思路，在医学、环境、食品检测等多个领域展现出良好的应用前景，尤其以医学方面为最， 在先进治疗（Advanced Therapy）如细胞治疗、基因治疗、免疫治疗等研究中，质控体系至关重要，目标核酸的绝对定量有助于直观有效的量化指标，受到了学员们的一致认可。naica微滴芯片式数字PCR系统naica微滴芯片式数字PCR系统，以Sapphire芯片（全自动）或Opal（高通量）芯片为耗材，形成25,000-30,000个微滴的2D阵列，以单层平铺方式进行PCR扩增实验。反应完成后对微滴进行三色通道或六色通道检测，从而对起始核酸浓度进行绝对定量。2.5小时内，可快速获得结果。

2021年5月13日，深蓝云Gene-π数字PCR学堂——核酸绝对定量分析及应用训练营（北京站）在北大医疗创新谷成功举办。本次培训以理论结合实践的形式，聚焦数字PCR原理系统、实验操作、结果分析，在先进治疗中数字PCR技术的体系开发和标准物质的绝对定量等核心内容，受到学员的一致好评。数字PCR技术的诞生和发展为核酸精准定量和基因检测提供了全新的思路，可实现单细胞/单分子层面的绝对定量。目前，该技术已经在肿瘤个体化诊疗、基因编辑、液体活检、病原微生物、先进的细胞治疗、基因治疗检测等前沿生命科学研究、临床医学检验、药物研发等多个领域实现突破性应用和发展。本次训练营对第三代数字PCR技术及naica️微滴芯片数字PCR技术介绍、naica️ 微滴芯片数字PCR系统在核酸绝对定量技术及先进治疗中的应用、在生物制品安全检测中的应用等方面进行了详细介绍，同时进行实操。▲ 专家在进行精彩的分享▲ 实验操作作为数字PCR头部企业技术开创者的法国Stilla Technologies公司于2019年提出数字PCR在线学习资源中心——www.gene-pi.com，为使用和即将使用数字PCR技术的专家学者提供有效的途径，同时开展Gene-π数字PCR线下实操培训课堂，为大家提供完善的服务以及优化的应用解决方案。naica微滴芯片数字PCR系统naica微滴芯片数字PCR系统，以Sapphire芯片（全自动）或Opal（高通量）芯片为耗材，形成25,000-30,000个微滴的2D阵列，以单层平铺方式进行PCR扩增实验。反应完成后对微滴进行三色通道或六色通道检测，从而对起始核酸浓度进行绝对定量。2.5小时内，可快速获得结果。

免疫细胞疗法如火如荼随着多款细胞治疗产品获批上市，免疫细胞疗法作为肿瘤免疫治疗的新星，近年来获得了极大进展。免疫细胞治疗，顾名思义，即从生物体中取出细胞，并将其在合适的人工环境中进行培养，利用免疫细胞的功能特性，使其成为一种活的药物，并通过回输人体实现治疗疾病的目的。目前已上市和临床研究中的免疫细胞疗法基本以治疗癌症为主，血液病偏多。由于体外培养的细胞没有抗感染能力，因此防止细胞污染是决定培养成功的关键，一切培养过程中的操作都需要保证无菌和安全。在活性细胞输送过程中，需要输送设备具有精确的流量控制能力和低剪切力。兰格蠕动泵具备高精度的流速控制比，同时在输送过程中只有软管会与流体接触，超低的剪切力让高附加值产品在转移时避免造成降解或破坏。案例分享某CART细胞治疗药物生产企业，要求在无菌条件下，高精度且高效率分装细胞液，尤其还要保证细胞活性。兰格建议在细胞分装过程中选择L100-1F多通道智能型蠕动泵，可实现高重复性精准输送(微升级灌装量，绝对精度可达1%)。同时，匹配DG-8蠕动泵泵头，可实现8个通道同步运行，提高分装效率。在蠕动泵软管的温和输送作用下，细胞活性能够得到充分保护，从而确保细胞治疗的作用和效果。兰格智能泵采用7寸工业触摸屏，图形化界面，操作简单且直观。根据不同需求的灌装量，可将不同灌装参数保存为方案，便于以后直接调用，减少参数设置。在进行灌装时，液体只与软管内壁接触，通过选用灭菌后的软管，即可满足灌装工艺的无菌要求。此外，我们的蠕动泵可满足从台式应用到批量生产的各种要求，功能性能不仅能满足工艺需求，还支持与其他工艺设备全面集成，从实验到规模化生产的工艺验证流程能够得到简化，验证周期能够有效缩短。

仪器信息网讯 2024年3月21日，优利特医疗电子集团自主研发生产的最高配置三激光 14色流式细胞仪BF-730获批二类医疗器械注册证（桂械注准20242220070），并于3月28日获得欧盟 CE 认证！该流式细胞仪主要特点如下：1、三激光十四色配置，更多选择， 更优性价比2、光纤传导，模块化分光设计， 检测性能优异3、无需预热，开机即用，一键质控， 快捷高效4、体积法绝对计数，高精密液流泵， 无管路耗材5、灵巧 机身小巧，运行安静，灵活适应各 种实验室环境6、全中文操作界面，简捷设计，易学 易用优利特三激光流式细胞仪 BF-730 关于优利特优利特集团致力打造质量更稳定可靠、性能更优异、检测项目更全面的流式产品，成为业内领先的专业流式系统方案解决商。

近日层浪生物LongCyteTM 获得北京食品药品监督管理局批准的二类医疗器械注册证，（京械注准20222220495）。22年5月已在欧洲医疗器械数据系统（EUDAMED）完成注册，获准进入欧盟市场。层浪生物秉承创建多彩世界，守护美丽生命的使命，致力研发生产更高端、更先进的生命科学仪器。 LongCyte&trade 功能及特性0126 种型号配置可选，低配可原位升级至高配LongCyteTM 具有26种型号，系统配置灵活，它的光学系统、检测器单元和电子系统可更换：激光器配置1-3个，包括488 nm激光器、638 nm激光器和 405 nm激光器 ；仪器预留激光器及检测器位置，可实现低配原机升级至高配三激光或者配置更换。LongCyteTM 最高配置3激光14色流式细胞仪可同时检测 14个荧光参数（488nm 5色、638nm 3色，405nm 6色）。02标配自动进样系统1标配内置孔板式进样盘，节省空间；2兼容多种进样器：96 孔板（U底、V底、平底），40 孔试管架、40 孔 EP 管；3自动进样、手动进样随意切换。03 专利设计的搅拌功能1单管搅拌混匀：可设置搅拌力度和时间，保证样本充分混匀且单次处理 2样本间自动清洗内外壁：极低的携带污染率；3智能识别试管底部：保证珍贵样本彻底吸干，不剩一滴残留 4自动报警与处理故障问题：防撞针系统和排堵功能。04体积法绝对计数1采用高精密度的定量泵进样；2经过校准的测量系统，保证结果准确；3兼容Trucount法测量，自动出结果。05不断升级的智能分析软件 - ModelFlower1中英文界面切换，Windows操作模式，简洁直观；2强大的模板功能，可以保存、复制、批量应用模板；3快速补偿及自动补偿功能；4测量时可同时分析已测数据；5可进行40孔流式管/EP管或96孔板批量化测量；6自动质控监测仪器状态，记录红蓝光延迟及仪器分辨率等性能参数状态，形成Levey - Jennings质控图，全程监测仪器状态；7完善的数据导出功能，可以随心所欲的设置导出格式，方便统计测量结果或进行LIS连接上传。8完善的Lis联网功能，经过多家重点医院的使用测评，满足大部分用户的需求，解决数据整理和上传的痛点；9检测报告直接输出。10兼容市面上所有的细胞因子数据格式，方便导出数据。更多层浪流式细胞仪

p style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="text-indent: 2em "新型冠状病毒疫情的蔓延已经给国人的生活带来了严重的影响。从已经获得的数据资料来看，这种病毒的传播能力相比SARS更强，危害范围更广。众多仪器厂商自发行动，为抗击疫情献出自己的力量。当前，仪器厂商推出仪器或试剂盒产品大多是关于疑似病例确诊的核酸检测。而新型冠状病毒以及类似病原体的不断升级进化，临床和科研迫切需要先进、全面的技术平台用于病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制。/spanbr//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "仪器信息网：针对此次新型冠状病毒（2019-nCoV）感染肺炎疫情，贵单位推出了什么样的检测仪器、试剂和解决方案？有何特点？/span/strong/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong：新型冠状病毒以及类似病原体的不断升级进化，临床和科研迫切需要先进、全面的技术平台用于病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制。Agilent推出的流式细胞仪和xCELLigence RTCA实时监测系统，在保证研究人员安全的同时，不耽误研究进程，从而协助攻关专家，助力病毒研究。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "xCELLigence RTCA 实时细胞分析技术是一种独特的活细胞检测技术，该技术可实现无标记和持续性的跟踪记录病毒感染细胞过程中CPE（细胞病变效应）的进展，为多种病毒学检测提供异常简易的实验流程，包括但不限于：病毒滴度测定、疫苗研发、中和抗体的检测与定量、抗病毒药物的开发等，可实时电子生物传感检测和多达四个独立的活细胞成像参数，包括1个明场和3个荧光通道。span style="text-indent: 2em "该技术可满足研究人员尽可能少地接触病毒，并可以做到无需研究人员值守的进行病毒研究任务。目前该系统已针对此次新型冠状病毒（2019-nCoV）展开各方面研究支持。/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "Agilent多色流式细胞仪，最高可达4激光25色，最高上样速度可达100，000 events/s，具备千余种临床和科研试剂，配套自动多功能数据分析软件NovoExpress，能够同时检测多种免疫细胞的表型、状态和细胞因子以及病毒的生物学特征和病理机制，可检测多种标本如血液、血清、脑脊液、细胞培养液和肺泡灌洗液等，对标本中的细胞类型、细胞器、蛋白质、核酸等成分进行定性定量的检测。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 199px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/21c14eb1-d0c1-4ee6-a760-3ba1237d913c.jpg" title="Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球，节省检测成本.png" alt="Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球，节省检测成本.png" width="600" height="199" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "Agilent流式细胞仪体积法绝对计数无需绝对计数微球，节省检测成本/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "新型冠状病毒肺炎诊疗方案和指南中提到免疫检查和监测对于易感人群的筛查以及隔离观察、新冠肺炎患者病情监测、判断细胞因子和炎症反应的产生，预警预测细胞因子风暴的重要性。流式细胞术在临床上可用于新冠肺炎患者的免疫细胞和免疫状态的评估，为筛查诊断、用药治疗和预后评估提供精确指导。应用Agilent流式细胞仪进行无成本淋巴细胞亚群的绝对计数，辅助临床客观、准确地评估细胞和体液免疫功能和免疫状态。临床医生通过免疫检测结果判断患者是否需要隔离，调整激素药物剂量以防止过量激素造成的免疫损伤和副作用，并动态监测治疗过程中新冠肺炎患者的免疫评估患者的治疗效果和评估预后。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "应用Agilent流式细胞仪配套试剂盒软件对新冠肺炎血清细胞因子进行定量检查，细胞因子风暴是导致新冠肺炎患者死亡的重要原因，动态监测细胞因子对细胞因子风暴的预警预测和及时采取相应药物或生物制剂治疗如细胞因子拮抗剂、激素和免疫抑制剂起指导作用。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "Agilent流式细胞仪检测新冠病毒肺炎患者中性粒细胞CD64感染指数可辅助临床诊断和鉴别诊断患者是否合并细菌感染，中性粒细胞CD64感染指数是诊断细菌感染的一项敏感度高、特异性强的新指标，与细菌感染的严重程度、预后及患者的死亡密切相关，监测CD64感染指数为评估病情、抗菌疗效和预后提供参考。Agilent流式细胞仪配合配套试剂检测新冠肺炎患者的中性粒细胞淋巴细胞亚群、细胞因子和CD64感染指数，可快速、精确、自动地出报告，节省检测成本和时间，为临床监测病情、用药指导、疗效和预后评估提供参考，为脓毒症、细胞因子风暴提供预警预测、免疫治疗指导和个性化治疗方案,同时为研发抗病毒药物和设计疫苗提供理论支持和开发新靶点并为药物和疫苗筛选、药效评估、安全性评估和免疫评价等提供高效、准确、客观、可靠的技术平台。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 500px height: 266px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/4c6f331b-070b-45a5-aa93-d29c70811635.jpg" title="Agilent流式细胞仪.png" alt="Agilent流式细胞仪.png" width="500" height="266" border="0" vspace="0"//pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center "Agilent流式细胞仪/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网：目前，贵单位开展了哪些具体工作？给疫情防控带来了哪些具体帮助？/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong：安捷伦从未停止奋斗在对抗疫情、挽救生命、助力科研第一线的步伐，2020年1月27日，大年初三，安捷伦宣布捐赠价值300万元急需的生物仪器设备到临床和科研一线。1月26日（大年初二），多名安捷伦杭州员工自愿放弃与家人团聚的时间，火速赶到公司完成捐赠货物NovoCyte流式细胞仪和实时无标记细胞分析仪的装箱发货，1月27日（大年初三），安捷伦捐赠价值300万元急需的临床与科研设备已经全部运出，并在第一时间完成仪器安装和调试，满足奋斗一线的医护和科研人员的临床样本检测、病毒学研究和抗病毒药物研究的迫切需求。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "同时，安捷伦有幸向中科院武汉病毒所和中国家疾病预防控制中心病毒所捐赠公司的xCELLigence RTCA系统，协助两家国家重点病毒科研单位用于病毒CPE，抗病毒药物和疫苗的研究，集中力量，快速突破，攻克技术难关，遏制病毒蔓延。xCELLigence RTCA实时监测技术可满足研究人员尽可能少地接触病毒，并可以做到无需研究人员值守的进行病毒研究任务。这在保证研究人员安全的同时，不耽误研究进程，从而协助攻关专家，助力病毒研究。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "值得一提的是，为了支持广大相关用户工作的正常运转，安捷伦工程师已提前到岗，以确保用户在特殊时期的仪器服务需求，最大限度降低用户因延期复工造成的损失。span style="text-indent: 2em " /span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网：针对疫情防控，后续还将有哪些工作计划？/strong/span/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "strong安捷伦/strong：冠状病毒及类似病原体的不断出现和变异对全球人类健康安全和经济发展造成了严重威胁，作为生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者，通过丰富的产品线，安捷伦有义务也有能力，从多方面为战胜疾病、保障人类健康做出贡献。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "接下来，安捷伦将持续支持病毒一线研究工作，利用领先的细胞技术在病毒致病机制研究、诊断治疗、药物研发和疫苗研制工作方面提供强有力的仪器、试剂和技术支持。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "安捷伦也将为此次疫情提供质量控制方面提供的多方面的解决方案。无论是针对疫苗的开发，抑或是在核酸与细胞层面对致病机理的研究，都离不开对蛋白与核酸样本的质量控制。安捷伦自动化电泳产品线以及UV-Vis光谱产品等可快速对DNA、RNA，蛋白样本进行分析。安捷伦液相和毛细管电泳可用于疫苗的质控分析，进行纯度及杂质检测，针对新冠肺炎的研究针分夺秒，可大大节省获取结果的时间，同时保障结果的准确性与重现性。另外，安捷伦顶空气相色谱法测定一次性医疗器械产品中各化学物质残留量，如医用口罩，中的环氧乙烷和2_氯乙醇的残留量，为一次性医疗器械生产过程的质量控制保驾护航。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "此外，针对疫情期间的环境隐患，污染物应急监测，和固废危废检测及其处理相关排放污染物检测等方面等，安捷伦有相应的丰富检测方案，积极配合相关机构进行高效的监测和分析。/pp style="text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em "今后，安捷伦将推出更多的临床检测试剂和科研检测技术，并结合安捷伦的多个平台、仪器、软件和专业技能，为临床检测、科学研究、药物和疫苗开发等提出更优更全面的解决方案。赢取此次战役之后，安捷伦期待更多参与并支持国家的公共卫生能力建设，应对公共安全挑战。/p