显微荧光仪

大家好，今早领导说想买一台荧光显微镜，让我看看，本人对荧光显微镜不是很熟悉，刚大概查了一下，分透射和落射式荧光显微镜，还有什么正置、倒置和体视荧光显微镜，看了半天看蒙了，不知道这些荧光显微镜之间有什么区别。我们这边主要是做一些材料研究，买荧光显微镜主要用途是 物体构造的观察和物质辨别，样品一般都是不透光的黑色物质，要求仪器观察清晰、有图像处理功能和标尺。所以想麻烦大家给看看买什么型号的荧光显微镜合适？物体构造

大家好，今早领导说想买一台荧光显微镜，让我看看，本人对荧光显微镜不是很熟悉，刚大概查了一下，分透射和落射式荧光显微镜，还有什么正置、倒置和体视荧光显微镜，看了半天看蒙了，不知道这些荧光显微镜之间有什么区别。我们这边主要是做一些材料研究，买荧光显微镜主要用途是 物体构造的观察和物质辨别，样品一般都是不透光的黑色物质，要求仪器观察清晰、有图像处理功能和标尺。所以想麻烦大家给看看买什么型号的荧光显微镜合适？物体构造

1、荧光显微镜的照明方式通常为落射照明，即光源通过物镜投射于样品上；2、荧光显微镜的光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；3、荧光显微镜有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼。 荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

1．透射式荧光显微镜: 激发光源是通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光的。常用暗视野集光器，也可用普通集光器，调节反光镜使激发光转射和旁射到标本上．这是比较旧式的荧光显微镜。其优点是低倍镜时荧光强，而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱．所以对观察较大的标本材料较好。 2．落射式荧光显微镜这是近代发展起来的新式荧光显微镜，与上不同处是激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈45。角，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片／双色束分离器／阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀，成像清晰，放大倍数愈大荧光愈强。

荧光显微镜的原理 ：荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光4200入)作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，再通过物镜和目镜的放大进行观察。这样在强烈的对衬背景下，即使荧光很微弱也易辨认，敏感性高，主要用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上一些附件(如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器和阻断滤片等)的基础上组成的。荧光光源——般采用超高压汞灯(50一200W)，它可发出各种波长的光，但每种荧光物质都有一个产生最强荧光的激发光波长 ，所以需加用激发滤片（一般有紫外、紫色、蓝色和绿色激发滤片），仅使一定波长的激发光透过照射到标本上，而将其他光都吸收掉。每种物质被激发光照射后，在极短时间内发射出较照射波长更长的可见荧光。荧光具有专一性，一般都比激发光弱，为能观察到专一的荧光，在物镜后面需加阻断(或压制)滤光片。它的作用有二：一是吸收和阻挡激发光进入目镜、以免于扰荧光和损伤眼睛，二是选择并让特异的荧光透过，表现出专一的荧光色彩。两种[url=http://www.gengxu.cn]滤光片[/url]必须选择配合使用。荧光显微镜就其光路来分有两种：1．透射式荧光显微镜: 激发光源是通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光的。常用暗视野集光器，也可用普通集光器，调节反光镜使激发光转射和旁射到标本上．这是比较旧式的荧光显微镜。其优点是低倍镜时荧光强，而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱．所以对观察较大的标本材料较好。2．落射式荧光显微镜这是近代发展起来的新式荧光显微镜，与上不同处是激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈45。角，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片／双色束分离器／阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀，成像清晰，放大倍数愈大荧光愈强。荧光显微镜使用方法．1．打开灯源，超高压汞灯要预热几分钟才能达到最亮点。2．透射式荧光显微镜需在灯源与聚光器之间装上所要求的激发滤片，在物镜的后面装上相应的阻断滤片。落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激发滤片／双色束分离器／阻断滤片的插块。3．用低倍镜观察，根据不同型号荧光显微镜的调节装置，调整光源中心，使其位于整个照明光斑的中央。4．放置标本片，调焦后即可观察。 使用中应注意：末装滤光片不要用眼直接观察，以免引起眼的损伤；用油镜观察标本时，必须用无荧光的特殊油镜；高压汞灯关闭后不能立即重新打开，需经5分钟后才能再启动，否则会不稳定，影响汞灯寿命。荧光显微镜的观察在示教台上的荧光显微镜下用蓝紫光滤光片，可见经o．01％的丫啶橙荧光染料染色的细胞，细胞核和细胞质被激发产生两种不同颜色的荧光(暗绿色和橙红色)。

荧光背景主要由环境光引起。由于环境光线较弱，荧光显微镜也可以观察到荧光信号噪声。

请问一下，现在很多体式显微镜可以加荧光附件，但是也有专门的荧光显微镜，这两者有什么具体的差别吗？怎样选择使用？

准备购买一台荧光显微镜、一台自动切片机、一台小型便携式的荧光仪，请问一下哪个厂家的比较好，性价比比较高。希望用过的老用户来给点意见，有联系方式的更好。在此谢过！有此仪器的厂商也请私信我！

我想看到干酪食品中的脂肪球分布，是否可以用染色方法，利用荧光显微镜观察样品呢？？？荧光显微镜是否向电镜一样要求复杂的前处理呢？？？请指教！！

主体内容：操作步骤如下：荧光显微镜的使用程序荧光显微镜基本操作1．关闭房间内的电灯，开启显微镜汞灯；2．根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；3．放好样品，找到合适的视野；4．如需拍照，请确认照相机内已装好彩色胶卷（最好使用27定胶卷）；5．开启自拍装置，选择手动档，通常拍摄速度在0.5---10秒内；6．使用结束，关闭所有电源并做好使用记录。注：A．为延长汞灯的使用寿命，汞灯开启不到15分钟的请在15分钟后关闭汞灯。B．在荧光状态下观察标本，标本内的荧光染色会较快的衰减，所以要避免长时间的在荧光下观察。

（1）荧光倒置显微镜对样品的前处理有什么要求吗？（2）是否可以用它观察食品，例如含脂肪较高的干酪中的脂肪分别情况？（3）脂肪用荧光染色剂染色后就可以在荧光倒置显微镜下观察到吗？(4)是否需要和做电镜一样复杂的前处理？问题很多，一时还真问不过来，高手们快来指点一下吧。 期待ing[em06] [em06] [em06] [em06] [em06] [em06]

（1）严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序。　　（2）应在暗室中进行检查。进入暗室后，接上电源，点燃超高压汞灯5～15min，待光源发出强光稳定后，眼睛完全适应暗室，再开始观察标本。　　（3）防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。　　（4）检查时间每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱；所以，最多不得超过2～3h。　　（5）荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节　省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。　　（6）标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。（7）荧光亮度的判断标准：一般分为四级，即“一”—无或可见微弱荧光。“+”—仅能见明确可见的荧光。“++”—可见有明亮的荧光。“+++”—可见耀眼的荧光。

我在一种纳米材料表面固定了荧光标记过的蛋白质，想用荧光显微镜或者激光共聚焦来观察蛋白质在表面的密度，不知道可行不？

[b][url=http://www.f-lab.cn/fluorescence-microscopes/ae31e-100w.html]倒置荧光显微镜AE31E-100W[/url][/b][color=#000000]是motic[/color][color=#000000]麦克奥迪AE31倒置显微镜系列的倒置生物显微镜产品,广泛[/color][color=#000000]应用于生物学、组织学、微生物学,免疫学和医学等领域,并且具有竞争力的倒置荧光显微镜价格。[/color][color=#000000]倒置荧光显微镜[/color]AE31E-100W[color=#000000]采用[/color][color=#000000]Motic无限远色差校正CCIS光学系统,具有超长工作距离和[/color][color=#000000]光学性能,提供了高亮度高清晰度和高对比度的荧光成像。[/color][b][color=#000000]倒置荧光显微镜[/color]AE31E-100W特点[/b][color=#000000]三目显微镜宽场高视点目镜,10X/22mm,瞳距可调,橡胶眼罩CCIS消色差物镜PL4X CCIS消色差相位物镜PL,PH10x, PH20xELWD N.A.0.30聚光器汞灯照明系统12V/100W45mm蓝光和绿色干涉滤波片供电100-240VAC [img=倒置荧光显微镜]http://www.f-lab.cn/Upload/AE31E-100W.jpg[/img][/color]倒置荧光显微镜：[url]http://www.f-lab.cn/fluorescence-microscopes/ae31e-100w.html[/url]

为何荧光显微镜需要使用制冷CCD相机？众所周知，荧光显微镜是利用被观测物体发出荧光来进行观测的显微镜。在外部光源的激发下，被检测物体发出荧光，从而进行观察。与普通显微观察不同的是，荧光显微镜并不直接使用外部光源，而是使用被观测物体发出的荧光。相比普通光源，荧光光源的强度要小得多，反映到成像上面，即意味着相比普通显微拍摄的曝光时间，荧光拍摄的曝光时间要长得多。但是，单方面的延长曝光时间，并不能得到好的显微荧光图像，因为随着曝光时间的增强，噪声也大幅度的的增加，严重影响了成像质量。科学家研究发现，由于曝光时间延长而导致的噪声的增加主要来自于CCD产生的暗电流噪声，于是冷CCD应运而生。所谓冷CCD，就是利用一定的制冷技术对CCD芯片进行制冷，让它在较低的温度下进行工作，从而有效的降低暗电流噪声。所以荧光显微镜的图像采集需要配套制冷CCD才能得到满意的图片，因为荧光的强度不足可见光的万分之一，这就决定采集荧光图像的CCD必须具备很高的灵敏度，为了消除图像采集过程中，因亮度不足而出现的噪点，最好采用制冷CCD来完成。无锡超微光学的LC-140A/500A显微荧光成像制冷CCD，是一款研究级的显微荧光成像专用相机，最适用于极弱光和微光的应用及提供最佳颜色还原和灵敏度的显微荧光成像专业用CCD，图像传感器具有高动态范围，优秀的灵敏性，配合12位数据采样输出，并支持2 x 2，4 x 4硬件binning。，具有小型化、操作简单、性能稳定等特点，适用在Nikon，leica，Zeiss，Olympus等显微镜上。提供企业或研究单位在化学发光成像分析、多色荧光成像分析等之研究及应用领域。

不知道大家用的荧光显微镜的哪个品牌的呢，有什么配置呢？我们最近要做计划买一台，想请教一下，谢谢！

请问倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜功能上有什么区别现在有一台倒置荧光显微镜不知道能不能用来进行钙离子荧光探针标记的测定，我看文献上大多使用激光共聚焦显微镜，激发波长488nm，不知道倒置荧光显微镜能不能实现相同的目的

实验室有两台国产的双目显微镜一台是体视的，想给它们配个电子目镜，看到网上价格从1两百到一两千都有，有些无从选择了。希望价格在1000左右，当然物美价廉更好。像素能够200万以上，成像效果较好，起码发文章能用。另外，由于需经常看荧光染色的植物（比如花粉管），微生物（荧光染色，紫外激发）的片子，打算购买一台国产的荧光显微镜。价格能控制在3 ，4万以内。看了上光的 “落射荧光显微镜XSP-63B”（http://www.sgaaa.com/yingguang1.htm），应该能满足使用。似乎贵了些。还请网上各位推荐合适的荧光显微镜，如能顺告价格，不胜感谢。

透射光荧光显徽镜(transmited light fluorescence microscope)可以和暗视野置、干涉装置配合使用。因此目前奥林巴斯显微镜公司仍然出售这类型号的显微镜。但是透射光荧光显微镜的照明光路即激发光束必须通过载物玻片。为了减少激发光线的损失.透射光荧光微镜应该配用石英玻璃载物片。研究工作中大量使用石英载物片和盖玻片是一项昂贵的消耗。因为透射光荧光显微镜的这种缺点，目前愈来愈多的研究工作者欢迎落射光荧光显微镜。经济条件不足的基层研究单位急需使用荧光显微镜时，可以用尼康显微镜配制成简易但仍然很有效的荧光显微镜。例如电影放映机用的碳弧灯或高压汞灯当作光源.自制如所示透光鼓形瓶。瓶内装满5-10%硫酸铜水溶液。该溶液中逐滴加入氢氧化铁水。开始滴加时瓶内出现绵絮状沉淀物.随着铁水的滴加，绵絮状沉淀物愈来愈多。在继续加按水的过程中按水的量达到一定程度时，绵絮状沉淀物开始消融。这时要谨慎地滴加到最后的绵絮状沉淀物消失时停止加铁水。瓶内硫酸铜液由无色变成蓝紫色美丽的溶液.这种溶液可当作激发滤光片完全可以满足荧光显微镜观察的要求.激发光通过标本变成荧光成像光束进入目镜。在目镜上方或目镜体内放置黄色滤光片，以保护观察者的角膜。一般市售照像黄色滤光片可以使用。或者按着本书显微摄影一章中介绍的配方自制黄色滤光片。自制滤光片的方法比起该章介绍的方法还可以简化.例如取一段照像底片不经显影直接定影。通过定影剂将感光胶膜上的澳化银洗掉。胶片变成透明胶膜。将此膜浸泡于上述染液中即可制成滤光片。

相信大家对荧光显微镜或是体视显微镜都很熟悉了,而且前几天我也整理了《体视显微镜的应用领域》与大家一起分享，大家是否还有印象？但是，今天我所想说的可是既有荧光显微镜功能又有体视显微镜功能的荧光体视显微镜呢，这在国内还属于比较有技术成分的产品。好，还是别只说表面的东西了，我觉得一种产品的质量好坏，不是靠方字说出来的，我们还是一起来看一下通过这种荧光体视显微镜所拍到的实物显微效果图吧，通过图片能非常直观反映显微镜质量的好坏。[center][IMG]http://www.mshot.com.cn/uploadfile/localhost/200907/20090711135432561.jpg[/IMG]图1：转基因果蝇幼虫[IMG]http://www.mshot.com.cn/uploadfile/localhost/200907/20090711135509780.jpg[/IMG]图2：人民币的防伪荧光[IMG]http://www.mshot.com.cn/uploadfile/localhost/200907/20090711135525850.jpg[/IMG]图3：文昌鱼骨骼[/center][B]最后透露一下这款荧光体视显微镜的应用领域吧：[/B]此款显微镜是活体动物体内荧光成像技术的核心技术，既是荧光防伪印刷检测的必备工具，也是是矿物研究的理想工具。它具有卓越的性价比，搭配高灵敏度CCD成像系统，更可轻易地获取图像资料，是进口同类产品的理想替代品。

倒置荧光显微镜设备功能及应用：适用于对活体细胞和各种组织、流质、沉淀物等进行显微研究，是生物学、细胞学、生理病理学、医学、肿瘤学、遗传学、免疫学等研究工作的必备仪器。倒置荧光显微镜不仅可作为细胞室日常观察、检测细胞形态和生长状态、对组织病理切片进行观察与分析等，同时配套多荧光观察方式做相应的定向筛选工作和定量分析

各位大大请指教了：金相显微镜中如果想配荧光功能的话，怎么配比较好？有什么需要注意的？还有，这样配了后和荧光显微镜的差别在哪里？非常感谢！

在萤光显微镜上，必须在标本的照明光中，选择出特定波长的激发光，以产生萤光，然后必须在激发光和萤光混合的光线中，单把萤光分离出来以供观察。因此，在选择特定波长中，滤光镜系统，成为极其重要的角色。 　 　萤光显微镜原理： 　　 光源：光源辐射出各种波长的光(以紫外至红外)。 　　 (B) 激励滤光源：透过能使标本产生萤光的特定波长的光，同时阻挡对激发萤光无用的光。 　　 (C) 萤光标本：一般用萤光色素染色。 　　 (D) 阻挡滤光镜：阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射萤光，在萤光中也有部分波长被选择透过。 以紫外线为光源，使被照射的物体发出荧光的显微镜。电子显微镜是在1931年在德国柏林由克诺尔和哈罗斯卡首先装配完成的。这种显微镜用高速电子束代替光束。由于电子流的波长比光波短得多，所以电子显微镜的放大倍数可达80万倍，分辨的最小极限达0.2纳米。1963年开始使用的扫描电子显微镜更可使人看到物体表面的微小结构。 　 　显微镜被用来放大微小物体的图像。一般应用于对生物、医药、微观粒子等观测。 　　利用微微动载物台之移动，配全目镜之十字座标线，作长度量测。 　　利用旋转载物台与目镜下端之游标微分角度盘，配全合目镜之址字座标线，作角度量测，令待测角一端对准十字线与之重合，然后再让另一端也重合。 　　利用标准检测螺纹的节距、节径、外径、牙角及牙形等尺寸或外形。 　　检验金相表面的晶粒状况。 　　检验工件加工表面的情况。 　　（6）检测微小工件的尺寸或轮廓是否与标准片相符。

想买一台荧光倒置显微镜，价格在20-25万之间，不知道哪种牌子和型号合适，请大牛推荐，不胜感激！另外，各品牌的荧光倒置显微镜报价在哪里可以查到？在公司网站上找不到。多谢！