新冠核酸检测实验室仪器品类建设攻略看这里
p style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="text-indent: 2em "近日,北京协和医院发布了新型冠状病毒核酸检测标准操作流程的培训视频,供其他符合条件的医疗机构在开展新型冠状病毒核酸检测时参考。仪器信息网特将其整理成文字版本供大家方便查看!/spanbr//pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/e223babb-8db6-4d90-9fea-10556497f843.jpg" title="image001.jpg" alt="image001.jpg"//ppscript src="https://p.bokecc.com/player?vid=7193A4DAB2EBFFB19C33DC5901307461&siteid=D9180EE599D5BD46&autoStart=false&width=600&height=490&playerid=621F7722C6B7BD4E&playertype=1" type="text/javascript"/scriptbr//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong一、新冠核酸检测前:个人三级防护穿戴/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "带一次性帽子、佩戴医用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一层乳胶手套、外层一次性隔离衣、防护目镜、第二层乳胶手套、穿戴完毕后应尽快通过专用缓冲间或者走廊,进入核酸提取区(专业核酸提取实验室)。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "相关防护用品,点击查看:(点击仪器名称查看更多仪器信息)/span/ptable border="0" cellspacing="0" cellpadding="0" style="background: white"tbodytr class="firstRow"td width="180" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"span style="font-size: 14px font-family:' 微软雅黑' ,' sans-serif' color:#333333"产品名目/span/p/tdtd width="505" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif"相关厂商/span/p/td/trtrtd width="180" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"spana href="https://www.instrument.com.cn/ca/show/s-H4304.html" target="_blank"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif color: rgb(0, 32, 96) "护目镜/span/a/span/p/tdtd width="505" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif"3M、上海阿拉丁、霍尼韦尔等/span/p/td/trtrtd width="180" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"spana href="https://www.instrument.com.cn/ca/show/s-H4306.html" target="_blank"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif color: rgb(0, 32, 96) "口罩/span/a/span/p/tdtd width="223" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif"麦迪康医疗、艾迈柯思、span3M/span、霍尼韦尔、上海阿拉丁等/span/p/td/trtrtd width="180" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"spana href="https://www.instrument.com.cn/ca/show/s-H4401.html" target="_blank"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif color: rgb(0, 32, 96) "手套/span/a/span/p/tdtd width="223" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif"麦迪康医疗、艾迈柯思、北京伊诺凯等/span/p/td/trtrtd width="180" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px text-align:center"spana href="https://www.instrument.com.cn/ca/show/s-H4603.html" target="_blank"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif color: rgb(0, 32, 96) "防护服/span/a/span/p/tdtd width="223" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "p style="margin-bottom:10px"span style="font-size: 14px font-family: 微软雅黑, sans-serif"上海阿拉丁、麦迪康医疗等/span/p/td/tr/tbody/tablepbr//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong二、样本灭活处理/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "新冠核酸检测须有两名工作人员快速通过进入实验室,进行灭活实验操作。strong生物安全柜/strong内需配备吸水棉与消毒酒精、有条件可配备吸水台布,对样本溢洒时进行紧急处理;打开二级容器,用75%酒精消毒物体表面,检测样本管密闭性后进行灭活处理,灭活条件(56℃,30min,水浴等多种方式),取出酒精灭活管用酒精擦拭外表,将样本放入到生物安全柜内。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "生物安全柜相关,点击下方专场查看:(相关推荐:" a href="https://www.instrument.com.cn/news/20200207/521469.shtml" target="_blank"穹顶之下" 的新冠检测—— 生物安全柜)/a/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/430.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/4aad0f2a-b5ad-4ef6-9212-f57ba3651e19.jpg" title="image002.jpg" alt="image002.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong三、手工核酸提取(以凯杰52906为例)/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "操作人员进入试剂配置区或者单独的洁净实验室。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong1、试剂区准备:洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "根据说明说要求,在AW1中加入无水乙醇130mL,在AW2中加入无水乙醇160mL,计入无水乙醇后及时做好标记,在310μg的Carrier RNA中加入310μL AVE,并颠倒混匀使Carrier RNA充分溶解,就此完成洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA配置,而后通过传递窗传送到样本处理区,或者由专人送到核酸提取实验室中。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong2、样本的裂解/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "用1.5ml的无菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已灭活的待提取核酸的待测样本,strong涡旋振荡/strong15s,室温静止10min。将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。裂解完成后,加入560μl无水乙醇,振荡混匀15s,将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) text-decoration: underline "漩涡混合器是实验中必不可少的设备,点击下方专场查看更多:/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/966.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/48a8ba22-9318-43ad-9b39-ec684def9026.jpg" title="image003.jpg" alt="image003.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "向离心柱加入裂解产物630μl,8000转离心1min,若离心机在生物安全柜之外,每次使用都需进行外表面消毒。更换新废液收集管,要从离心机中小心取出离心柱,将上层离心柱转移到新收集管中,继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中,若样本体积大于140μl时需重复此步骤,直到全部裂解产物都过柱离心,strong8000转离心1min/strong,小心将离心柱转移到新的收集管中。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "桌面小型离心机是本次检测实验中必不可少的设备,点击下方专场查看更多:/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/164.html?SidStr=4875&AgentSortId=&SampleId=&IMCityID=&IMShowBCharacter=&IMShowBigMode=" target="_blank"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 405px height: 283px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/5327fb91-78a7-45c6-ab2b-f08ca2b9cb87.jpg" title="image004.jpg" alt="image004.jpg" width="405" height="283"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "br//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "取500μl AW1加入离心柱中(span style="color: rgb(255, 0, 0) "注意,此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样/span),8000转离心1min。小心取出离心柱,更换新的收集管。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "取500μl AW2加入离心柱中,14000转离心3min,小心取出离心柱,更换新的离心柱上端收集管,置于离心机中使用最大转速离心1min,以确保将AW2中的残液完全离心干净。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "取无菌1.5mlEP管收集核酸,将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中(span style="color: rgb(255, 0, 0) "注意:洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜/span),用EP管管盖盖住离心柱,使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "室温静止1min,将其放入离心机中8000转离心1min,回收核酸。丢弃离心柱,EP管中即为获取的提取核酸,做好标记与登记。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="text-decoration: underline color: rgb(0, 112, 192) "实验期间常用耗材配件请点击下方进入耗材配件专场:/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/ca/show/s-H4103.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/36edfa9f-8c24-489f-bd98-a4206ebd0016.jpg" title="image005.jpg" alt="image005.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong四、用仪器提取核酸(有条件的实验室)/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "首先按照说明说准备核酸提取试剂,将200μl灭活样本添加到核酸提取试剂中,根据核酸提取仪的设置程序上机提取核酸,等仪器操作结束,提取核酸完成,回收核酸。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) text-decoration: underline "有条件的实验室用户可以点击下方专场查看核酸提取仪选型指南:/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/879.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/3b6d3062-af96-4409-a9a7-bfff66adb0b0.jpg" title="核酸提取仪专场.jpg" alt="核酸提取仪专场.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong五、PCR体系的配制/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em " 以某品牌为例:/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/6e868b9b-9e60-4065-b9ad-7db72a46311b.jpg" title="image006.jpg" alt="image006.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "根据检测样本数量配制体系,将配制好的PCR体系充分混匀并离心后,将其通过传递窗送至样本处理核酸加样区,或单独的样本加样实验室。按照每孔分装20μL反应体系,进行分装,在各孔分别加入5μL待测样本核酸或阴阳对照物(span style="color: rgb(255, 0, 0) "请注意每次检测器包含1个阳性对照和3个阴性对照且阴性对照需随机分布/span),密封PCR管,有条件时模板加样尽量在单独的生物安全柜进行。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "工作人员将配好的PCR管通过传送窗口送至PCR扩增区,或由专人送至PCR扩增实验室,上机检测。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) text-decoration: underline "PCR仪是本次检测实验中必不可少的设备,点击下方专场查看更多:/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/133.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/1930f4dc-975d-4975-9adb-f43f305f6d6e.jpg" title="image007.jpg" alt="image007.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong六、上机检测及结果分析(以罗氏LC480为例)/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "工作人员进入基因扩增分析实验室,从传递窗取出PCR反应管,上机前需混匀并离心反应体系,按试剂盒说明说设置扩增参数并分析判读结果。分析结果时,严格阅读说明说充分了解试剂盒灵敏度、方法学局限性等综合判读实验结果。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/452178e2-8325-4dc9-9fed-aca2ccdb5403.jpg" title="image008.jpg" alt="image008.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "为防止扩增污染,反应结束后的PCR扩增管严禁开盖并装入密封带中装入指定的垃圾桶中。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong七、检测后的消毒处理/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "新冠样本处理完成后,工作人员应用75%的酒精消毒处理外层手套并脱下外层手套,放入生物安全柜中的生物垃圾桶中。检测完成后,生物安全柜台面和地面应用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇进行擦拭。将安全柜内产生的医疗垃圾用三层垃圾袋密封,并将其放入指定垃圾桶中,垃圾袋上需标记医疗垃圾信息。实验结束后,生物安全柜以及实验室均要进行紫外灯照射消毒,时间至少30min。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "实验操作人员,应有他人用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇对一次性隔离衣均匀喷雾消毒处理,而后脱去隔离衣将新冠检测医用垃圾放入制定垃圾桶中,工作人员在离开二级实验室后,应在缓冲区或走廊按顺序摘脱个人三级防护用品,首先应带新的外层手套,摘掉护目镜并置于75%乙醇中消毒,自上而下、自内向外翻转脱掉一次性防护服,脱去外层手套,摘除口罩、一次性帽子、脱一次性鞋套。脱掉手套,新冠病毒防护服均需进行strong高压灭菌处理/strong。高压前后医疗垃圾严格区分。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) text-indent: 2em text-decoration: underline "高压灭菌器可用于相关器具的消毒,点击下方专场查看更多:/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) text-indent: 2em text-decoration: underline "/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/1220.html" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/b29d7571-d110-481d-a558-fe8083afdd03.jpg" title="image009.jpg" alt="image009.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "新冠病毒相关垃圾需在120度,30min条件进行湿热高压处理,以高压试纸条变色为有效,而后作为普通医疗垃圾处理。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/gtzybdjc" target="_blank"更多相关资讯解决方案,请点击进入仪器信息网特别专题:span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong共同战“疫”之新冠病毒检测解决方案/strong/span/a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong/strong/span/pp style="text-align: center"a href="https://www.instrument.com.cn/zt/gtzybdjc" target="_blank"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/682efbe6-c7e0-4f28-b2df-29053b2300fb.jpg" title="image010.jpg" alt="image010.jpg"//a/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong/strong/spanbr//p