荧光定量计

问专家几个关于荧光定量PCR的问题：（美国STRATAGENE四色荧光定量PCR）1。什么是Peltier效应设计的热系统2。动力学范围：7个数量级是什么意思3。可在一个扩增曲线中观测所有染料，也可在多个实验结果中观测单个染料。如何理解这句话？4。什么是熔解曲线？作用是什么？thank you very much

X射线荧光光谱仪是如何进行定量分析的？ 例如，我要测定生石灰中CaO的含量，得到的结果是通过测定钙元素的含量m，然后通过分子量计算出来(m/40*56)的吗？

定量计算：六步曲第一步：准备已知浓度的一系列标准样品溶液 。 第二步：仪器采集每一个浓度的标准样品的数据文件。 第三步：通过化合物的质谱图信息和色谱保留时间信 息，建立识别物质的判定指标。 第四步：建立定量方法和定量校正曲线。 第五步：仪器采集实际样品数据文件。 第六步：运用建立好的含有定量校正曲线的定量方 法，进行样品数据文件的定性判断和定量计算。

新买的仪器7890B-5977B [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]-MS，想进一针TVOC的标液试试，会定性，不知道怎么定量计算浓度，求教

荧光仪一次水的流量计转子用弱酸清洗后需要把一次水全部换掉吗？

[font=等线]如今随着智能化的不断发展，很多饮水机都可以实现定量出水的功能，这样不仅方便用户取水，还可以节省资源，那么这个功能如何实现呢？[/font][font='Segoe UI'][font=等线]饮水机实现定量出水的原理主要是通过小型流量计来实现的。这种流量计具有精确高、一致性强、体积小、安装简易等特点，并且符合[/font]FDA[font=等线]、[/font][font=Segoe UI]FLGB[/font][font=等线]标准，同时支持流量定制，使其成为饮水机定量出水的理想选择。[/font][/font][font='Segoe UI'][font=等线]在小型流量计中，常用的有霍尔式流量计和光电式流量计两种。霍尔式流量计利用霍尔效应，将带有两极磁铁的叶轮置于垂直于磁场中，当水流经过叶轮时，叶轮会转动并产生一定的[/font]GS[font=等线]值，然后将[/font][font=Segoe UI]GS[/font][font=等线]值转换成脉冲信号输出。这种原理能够精确地测量水流量，实现定量出水的功能。[/font][/font][align=center][img=饮水机流量计,531,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404091505501362_2694_4008598_3.jpg!w531x347.jpg[/img][/align][font='Segoe UI'][font=等线]另一种常见的流量计是[url=https://www.eptsz.com]光电式流量计[/url]，它利用叶轮切割光通路产生的脉冲信号来测量水流量。通过计算转轮的转动次数，可以准确地测量出水流的多少。相比于霍尔式流量计，光电式流量计不含磁铁，纯光学感应，对水质保护更好。它适用于透光率高的液体（如水），但对于透光性差的液体可能会有一定的差异。[/font][/font][font='Segoe UI'][font=等线]饮水机定量出水的原理主要是通过小型流量计来实现的，其中包括霍尔式流量计和光电式流量计两种常见的技术。这些流量计具有精确性高、安装简便等特点，能够满足用户对定量出水的需求，为用户提供便捷、节约资源的取水体验。[/font][/font]

投射电镜如何做半定量计算?

请问：如何用卫星峰进行定量计算？房晨婕

今天通过GC-MS数据处理软件建立了塑化剂的定量计算方法，然后用建立好的定量计算方法反过来计算标准溶液中不同塑化剂的含量，发现计算结果比标准溶液的含量少很多，比如，标准1#样品中DMP的实际标准含量是0.05ug/mL, 而通过定量计算方法计算结果只有0.03ug/mL，两者相差太大了，其他成分的塑化剂也是同样的现象，这是为什么呢？ps：DMP标准曲线的R2=1，其他成分的R2也是0.998—1。2. 计算一个样品中塑化剂含量时，发现其积分明显不对，手动积分后，用定量计算方法来计算，发现不管用（即手动积分结果无效一样），还是按照仪器不正确的积分结果进行计算的，这是为什么呢？

荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。一、特点FQ-PCR不仅具有普通PCR的高灵敏性，而且由于荧光探针的应用，可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果，所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确性，克服了常规PCR的许多缺点。如一般PCR产物都需通过琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色紫外光观察结果或通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测，不仅需要多种仪器，而且费时费力，所使用的染色剂溴化乙锭对人体又有害，这些繁杂的实验过程又给污染和假阳性提供了机会。而FQ-PCR只须在加样时打开一次盖子，其后的过程完全是闭管操作，不需要PCR后处理，避免了常规PCR操作中的诸多弊端。实验一般使用PE公司研制的ABI7100型PCR扩增仪。该仪器具有以下特点：①应用广泛：可用于DNA和RNA的PCR产物定量、基因表达研究、病原体检测及PCR条件的优化等。②独特的定量原理：采用荧光标记探针，经激光激发后荧光量随PCR循环而累积，从而达到定量目的。③工作效率高：内置9600型PCR扩增仪，电脑控制1～2小时全自动同步完成96个样品的扩增及定量。④无须凝胶电泳：无须对样品进行稀释和电泳，只须通过特殊探头在反应管内直接检测。⑤无管道内污染：采用独特全封闭反应管及光电传导系统，无须顾及污染。⑥结果重现性好：定量动态范围高达五个数量级。所以自从此项技术研制成功以来，受到许多科研工作者的重视并在多个领域得到应用。二、原理和方法FQ-PCR的工作原理是利用Taq酶的5’→3’外切酶活性，在PCR反应系统中加入一个荧光标记探针。该探针可与引物包含序列内的DNA模板发生特异性杂交，探针的5’端标以荧光发射基因FAM（6-羧基荧光素，荧光发射峰值在518nm处），靠近3’端标以荧光淬灭基团TAMRA（6-羧基四甲基若丹明，荧光发射峰值在582nm处），探针的3’开端被磷酸化以防止探针在PCR扩增过程中被延伸。当探针保持完整时，淬灭基团抑制发射基团的荧光发射。发射基团一旦与淬灭基团发生分离，抑制作用被解除，518nm处的光密度增加而被荧光探测系统检测到。复性期探针与模板DNA发生杂交，延伸期Taq酶随引物延伸沿DNA模板移动，当移动到探针切断，淬灭作用被解除，荧光信号释放出来（见图）。模板每复制一次，就有一个探针被切断，伴随一个荧光信号的释放。由于被释放的荧光基团数目和PCR产物数量是一对一的关系，因此用该技术可对模板进行准确定量。实验仪器一般使用PE公司研制的ABI7100型 PCR扩增仪，也可用其它PCR仪。如果用ABI7700型反应型反应系统进行实验，反应结束后，通过电脑分析，可直接给出定量结果。如果用其他PCR仪，则需要同时使用荧光探测仪测量反应管中的荧光信号，计算出RQ+、RQ-、△RQ。RQ+代表样品管荧光发射基团发光强度与淬灭基团发光强度的比率，RQ-代表空白管中二者的比率，△RQ（△RQ=RQ+-RQ-）代表PCR过程中荧光信号变化量，经过数据处理，即可得出定量结果。由于荧光探针的引入，显著提高了实验的特异性。探针设计一般应符合以下条件：①探针长度应在20～40个碱基左右，以保证结合的特异性。②GC碱基含量在40%～60%，避免单核苷酸序列的重复。③避免与引物发生杂交或重叠。④探针与模板结合的稳定程度要大于引物与模板结合的稳定程度，因此探针的Tm值要比引物的Tm值至少高出5℃。另外，探针的浓度、探针与模板序列的同源性，探针与引物的距离都对实验结果有影响。 http://www.biomart.cn/upload/asset/2008/07/21/1216476450.gif图.TaqMan PCR反应模式 （A）聚合反应；（B）链置换；（C）裂解； （D）聚合完成（R：FAM；Q：TAMRA，FP：上游引物；RP：下游引物）

请问HJ755测水质蛔虫卵定量计数框去哪里买合适？

大家好，请问用GC-MS-SPME时如何定量计算呢？

成分定量分析中，定量计算时复合纤维回潮率怎么计算？

本人想采购一种用于原子荧光仪器里控制屏蔽气流量、量程在0~1000ml/min的比较稳定的流量计，希望各位有经验的朋友能够提供这类信息，最好给推荐一下哪些厂家提供的流量计比较稳定可靠，谢谢

NY/T761定量计算公式K中的V1提取液的总体积，现在的问题是，A认为是V1是指前处理中加入的乙腈的量即50ml，B认V1应是萃取后所收集的乙腈的体积，应考虑萃取过程中的损失，谁也不能说服谁。到底谁的对呢？

荧光定量原理荧光定量原理荧光定量原理

在这个视频中，各位观众可以看到怎么利用安捷伦chemstation c版工作站建立内标法的标曲及定量计算

标准液：两种及以上不同浓度的混合液，怎么运用软件定量计算？在软件的哪部分能体现出浓度，纯度，并能参与到定量计算中？

液相定量计算中的稀释因子是怎样确定的？ 按照标准761制备样品的话，是称25.0g ，加入50.0mL乙腈，吸10.0mL乙腈相溶液氮吹近干，定容到2.5mL，然后上机是吸10μL。 但是我们在实际操作中会是称12.50g ，加入25.0mL乙腈，吸4.0mL乙腈相溶液氮吹近干，定容到1mL，上机吸10μL。 请各位大神指教一下，我这个稀释因子是多少？刚接手液相，很多不懂的地方。

请教，有哪位同仁用到agilent7890四阀六柱，一TCD，两FID气相色谱；在分析含有

请问大家固体的荧光样品，能不能用测试固体样品的样品架来进行定量测量呢？或是大家知道哪款荧光分光光度计可以进行固体荧光样品的定量测定呢？希望大家积极回答！谢谢！

讨论范围荧光物质,包括自发荧光和激发荧光.这些荧光发出来,有时是一个峰,有时会是几个不同波长的峰.个人感觉,采用峰值定量,即峰高定量. 和峰面积定量 都可以.请各位发表高见.

如题，求助定量包装商品净含量计量检验规则JJF1070-2023

用外标法定量后，对样品进行定量计算，可是目标化合物的保留时间和响应全都为零，但图谱是有的，这是为什么？有什么解决的办法呢？求大神指点。。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702211526_01_3187540_3.jpg

有奖问答’对错题：标准规定：纺织品成分定量测试，除另有注明者外，均按重量计？（ ）

荧光定量引物和探针设计荧光定量引物和探针设计荧光定量引物和探针设计荧光定量引物和探针设计

在基因扩增仪的几种类型中，荧光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确，受到越来越多的分子生物学研究者青睐。 　　实验者要购买一款合适的荧光定量PCR，需要考虑各方面的因素，首先要分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算，更要详细研究各种各样的宣传资料。 　　面对各种不同性能的产品，我们该如何选择呢? 　　首先建议大家走出认识荧光定量PCR的两个误区： 　　误区一：荧光定量PCR仪无需梯度功能 　　对于使用染料法的定量PCR反应，虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度(Tm值)，但运用的公式不同、引物序列不同，Tm值的差异会很大。 　　引物的熔解温度决定了退火温度。而且模版中碱基的组合千变万化，对于特殊片断，经验公式得到的数据不一定能得出准确的结果，退火温度细微的差异对结果都可能产生决定性的影响，因而“摸条件”一度是让人很头疼的问题。 　　梯度PCR的出现部分解决了一些问题——在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化，根据结果，一步就可以摸索出最适合的反应条件。 　　不单是退火温度，连变性温度和延伸温度都可以优化——对于多种聚合酶混合酶扩增如Invitrogen、Clontech、Promega的多数高保真Taq酶来说这个非常重要，因为Taq和校正酶的最佳反应温度可能有显著差异，优化延伸温度就显得很重要。 　　使用有梯度功能的荧光定量PCR可以一次完成以往多次实验才能完成的优化过程，简化了摸索 PCR反应条件的繁琐实验，既节省实验时间提高效率，又节省实验成本。 　　误区二：仪器通道越多越好 　　随着PCR技术的成熟运用，多重扩增越来越热闹，荧光定量PCR仪也不能幸免。 　　从最初ABI公司推出的单通道荧光定量PCR仪发展到如今各个厂家都推出4通道、5通道甚至6通道荧光定量PCR仪，眼花缭乱的选择让人无所适从，就有人一不小心走进了“通道越多越好”的误区。 　　在使用有些厂家5通道的荧光定量仪时，为了确保实验结果的精确性和准确性都要在实验中使用ROX(一种荧光染料)或专用的Reference dye ，这些荧光染料都必须单独使用一个检测通道。 　　所以，真正能检测多重PCR荧光信号的有效通道只有4个，而且使用校正染料可能会增加后期的使用成本。 　　有的荧光定量PCR的检测通道是只为自已厂家的专用的荧光染料或试剂开放的，有效检测通道也绝非像宣传资料中宣称的那么多。 　　在购买前确认荧光定量PCR仪器的有效检测通道尤为重要，不能单单只听宣传。 　　考虑多重荧光定量PCR的通道数的时候也应该从实验室实际情况出发，多重PCR并非人人适用、人人可用，因为它使实验复杂化了。 　　当我们看清误区，在选择一款最适合自己需求的荧光定量PCR仪时，我们又该关注些什么呢?

荧光定量PCR仪选择要点及误区 荧光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确，受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天，也许对你来说，最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算，更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资料。面对各种不同性能的产品，您又该如何选择呢？ 首先建议大家走出认识荧光定量PCR的两个误区：