肠菌群检测

大肠菌群(Coliform bacteria)是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。大肠菌群作为作为食品微生物的主要检测指标之一，食品企业最常检测的微生物项目，我们都知道目前大肠菌群检测的方法包括：GB 4789.3-2003 和GB4789.3-2016，那在日常检测中细心的小伙伴们可能会发现，报告单位有时是MPN/g(mL)，有时又是MPN/100g(mL)，这两个单位是什么意思呢？能够简简单单的认为两者相差100倍吗？答案当然是NO。针对这个问题，今天我们就仔细地分析探讨一下，一次性解决大肠菌群MPN法报告的问题。一、检测方法大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法，其一是以100mL(g)检样内大肠菌群最大可能数(MPN)表示，检测方法需使用GB/T 4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；其二以每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值表示，检测方法需使用GB 4789.3-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》。二、报告单位溯源首先看看这两个单位的来源。2003年8月，国家卫生部和标准化管理委员会联合发布了《GB/T 4789.3-2003 食品微生物学检验 大肠菌群测定》，来替代1994版国标。这版国标的检测只有一种MPN法，但是却是大肠菌群检测的经典国标。在2016年12月，国家卫生部发布了《GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》，这次标准标准代替了GB 4789.3-2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》、GB/T 4789.32-2002《食品卫生微生物学检验 大肠菌群的快速检测》和SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》大肠菌群计数部分。2016版国标相对2010版来讲内容更充实，不仅增加了检验原理，还对标准的适用范围、典型菌落的形态的描述以及第二法平板菌落数的选择、证实试验计数、平板计数的报告等进行了修改。但是2016版国标正式实施的同时，国家有关部门也并没有废除2003版国标，因此在接下来的时间里，2003版和2016版国标还将继续并存。三、两个国标报告单位区别下面我们先看看这两个版本的MPN法有什么区别：由以上表格可以看出，2016版国标与2003版国标在MPN法检测上还是有很大的区别的：首先是培养基，2016版国标使用的是LST肉汤培养基，由于LST培养基中含有月桂基硫酸盐，有一定的抑菌作用，同时对大肠菌群会有一定的修复作用，同时相对于乳糖胆盐培养基，没有了胆盐沉淀的影响，更利于现象的观察，所以2016版国标里没有对阳性发酵管进行分离培养和革兰氏染色等验证试验。其次，阳性发酵管进行的验证试验也不相同，2003版国标明显比2016版国标要复杂的多，操作更为繁琐，验证步骤更多。最后，当然也是最令检测人员头疼的问题就是报告单位，也是我们最容易忽视的问题。四、小结弄清楚两个版本的国标的区别，关于报告格式的问题也就不太纠结了。假如你使用的检测方法用是2003版国标，那么结果报告的单位就应该是MPN/100g(mL)，假如你使用的是2016版国标，那你的结果报告单位就应该是MPN/g(mL)。举个例子说，如果MPN法的阳性管数为320，假如用的是2003版国标，则报告结果为930MPN/100g(mL)；假如用的是2016版国标，则报告结果为93MPN/g(mL)。但是同一个样品若是同时使用两种检测方法进行检测，检测结果并不会特别一致，通常情况下，2016版国标检测样品的检测结果偏高。相反的，产品标准也会提示或者要求我们合理选择检测方法：假如某一产品大肠菌群的标准为30 MPN/100g(mL)，那你肯定应该选择2003版国标的检测方法；若是产品标准为3 MPN/g(mL)，那就只能选择2016版的国标了。总之，在确定了产品标准的情况下，不存在一个产品既可以选用2003，又可以选用2016版的情况。单位MPN/100g与单位MPN/g，之间是没有转换关系的！

日前，卫生部发布2009年第16号公告，进一步规范食品中大肠菌群指标的检测工作。公告要求：现行食品标准中规定的大肠菌群指标以“MPN/100克或MPN/100毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》(GB/T4789.3-2003)进行检测 以“MPN/克或MPN/毫升”、“CFU/克或CFU/毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大肠菌群计数》(GB/T4789.3-2008)进行检测。 　　中华人民共和国卫生部2009年第16号公告，引出了大家对现行检测标准制定的一些疑问，现就大家在实际检测过程中可能遇到的、关心的一些问题做几点解释说明： 　　1、大家所关心的现行标准的修订，那是肯定的，08前所有版本，都将要再次修改。一是因为现行标准菌落总数结果计数公式注解中明显出错，二是因为食品安全法的颁布，势必要对现行颁发标准做标题性更改，因原来的为食品卫生法，所以冠头的都以食品卫生标准，即将更改的，将是以食品安全标准为标题。 　　2、从科学的角度出发，在新的限量标准下发前，必须在有新检测标准方法执行过后，对产品做出全面的风险分析，才能得出科学的结论，制定新的产品限量标准。而这个风险分析，需要有完整的程序，过程比较漫长，不是一朝一夕就能完成的。 　　3、大肠菌群新标准的科学性，是不容大家置疑的。在新版限量标准未颁发前，新旧标准查索表互相换算，已得到权威人士鉴定相关部门允可，是可行的。 　　4、现行大肠菌群方法，LST培养基包涵了对大肠菌群两部份的培养：一部分是(即和旧版方法一样的)是未受损的大肠菌群(24小时培养)，另一部分是受损大肠菌群的培养(48小时培养)，所以，现在的培养结果，较之旧版标准检测方法培养涵盖范围更广，所以部分产品检测值普遍偏高。 　　5、卫生部16号公告，正是基于以上原因，由卫生部牵头，召集各标准起草人共同商订的，是在新旧标准过渡期的一个权宜之计。

为支持企业开拓市场，扩大销售，打造山东名牌，引导装备产业向高端、高质、高效发展，今年8月份省经信委会同财政厅、国土资源厅、人民银行济南分行制定了《山东省高端技术装备新产品推广目录管理办法》(鲁经信装字〔2011〕463号)，确定自2011年起建立新产品推广机制，定期向社会公布高端技术装备新产品目录。 　　日前，省经信委公布了第一批《山东省高端技术装备新产品推广目录》，包括103家企业的130个产品。青岛德固特机械制造有限公司、青岛青锻锻压机械有限公司、青岛景钢烫印设备有限公司、青岛佳明测控仪器有限公司、青岛双星橡塑机械有限公司、软控股份有限公司六家青岛企业的七个高端技术装备新产品被列入首批《山东省高端技术装备新产品推广目录》。 　　根据《山东省高端技术装备新产品推广目录管理办法》，列入推广目录的新产品，将优先享受经信、财政、国土、金融等部门在结构调整方面的相关扶持政策。 　　我公司自主研发生产的JMS-CLM型大肠菌群在线快速监测仪被列入《山东省高端技术装备新产品目录》，成为我省首批入选高端技术装备的新产品之一。 　　◆产品用途： 　　监测水质中危害身体健康的大肠杆菌。 　　◆功能特点： 　　仪器通过特殊设计的机械手自动实现检测过程中的在线采样、进样和检测等组合动作，仪器融合了自动报警等功能，检测周期短，操作简单。 　　◆适用领域： 　　环境监测部门和疾病预防控制中心对水质的在线监测 　　对污水处理中的进出水、食品加工用水、地表水的检测 　　污染现场快速筛查、监测 　　水工业用水中的大肠菌群的测试与监测 　　教学演示实验、科学研究。

近日，根据《山东环境科学学会科学技术奖励管理办法》的规定，经各市、各部门推荐和专家评审，共有 19个项目荣获2012年度山东省环境保护科学技术奖。 我公司自主研发的的&ldquo 大肠菌群在线自动监测仪&rdquo ，通过评审委员会专家评审，从参与评审的众多科研项目中脱颖而出，荣获2012年度山东省环境保护科学技术三等奖。 佳明测控大肠菌群在线自动监测仪，采用酶底物法，实现同时监测水样中的大肠菌群和粪大肠菌群，填补目前国内针对现场水样中的微生物自动、连续监测的空白，技术处于国内领先水平。该仪器的推广应用，将有助于及时获得准确、连续性的监测数据，扩大监测指标和范围，确保水质监测的质量，从而加强我国环境水质监测的能力，促进环境水质监测工作更开始向自动化、智能化和网络化为主的监测方向发展，满足我国日益多样化的环境监测需求。有利于人类社会保护环境、节能减排目标的实现，具有显著的社会效益。

p 　　2月1日，国家生态环境部办公厅印发了《关于做好新型冠状病毒感染的肺炎疫情医疗污水和城镇污水监管工作的通知》，指出要进一步加强医疗污水和城镇污水监管工作， strong 防止新型冠状病毒通过污水传播扩散。 /strong /p p 　　《通知》明确要求，地方生态环境部门要督促医院和城镇污水处理厂切实加强消毒工作，确保 strong 出水粪大肠菌群数指标 /strong 达到《医疗机构水污染物排放标准》(GB 18466-2005)和《城镇污水处理厂污染物排放标准》(GB 18918-2002)的要求。 /p p 　　目前粪大肠菌群的检测方法包括多管发酵法、滤膜法、快速检测法(纸片法)、酶底物法、分子生物学，其中环保标准的方法包括HJ 347.1-2018水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法、HJ 347.2-2018 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法、HJ 1001-2018 水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法。而所有这些方法均为实验室方法。 /p p 　　山东省生态环境厅近日发布了《 a href=" https://www.instrument.com.cn/download/shtml/948243.shtml" target=" _blank" DB37/T3787-2019水质 粪大肠菌群测定 光度法 /a 》，规定了测定 strong 水中粪大肠菌群的分光光度法和荧光法 /strong ， strong 适用于地表水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的应急现场快速测定 /strong 。 /p p 　　标准全文如下： /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 819px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/01a0fee4-29b5-4242-bc88-376975fe85f4.jpg" title=" 11.jpg" alt=" 11.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 819" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 292px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/8dff5740-e56f-45d0-89ff-41e56d06a0e5.jpg" title=" 22.jpg" alt=" 22.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 292" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 269px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/b155f093-9136-4e93-b7e4-26ccb1ea1f6b.jpg" title=" 33.jpg" alt=" 33.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 269" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 779px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/9e6c8f16-617e-43f6-89c2-056702f2840f.jpg" title=" 44.jpg" alt=" 44.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 779" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 754px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/98ae507b-c43b-4ae3-8d6f-24478b9fde2a.jpg" title=" 55.jpg" alt=" 55.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 754" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 758px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/08e71d55-ec40-4576-85b5-1c9592b08164.jpg" title=" 66.jpg" alt=" 66.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 758" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 747px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/64abab04-f333-4dc6-a272-a8e5a300f461.jpg" title=" 77.jpg" alt=" 77.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 747" border=" 0" / /p p style=" text-align: center" img style=" width: 600px height: 754px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/180667ac-77aa-4a69-af32-204eb067aa5d.jpg" title=" 88.jpg" alt=" 88.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 754" border=" 0" / /p p img style=" width: 600px height: 800px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202004/uepic/9fb79fd0-fa42-4d32-bd70-877d1c0ac64e.jpg" title=" 99.jpg" alt=" 99.jpg" width=" 600" vspace=" 0" height=" 800" border=" 0" / br/ /p p 附件： a href=" https://www.instrument.com.cn/download/shtml/948243.shtml" target=" _blank" DB37/T3787-2019水质 粪大肠菌群测定 光度法 /a /p

信息时报讯 大肠菌群超标现象在食品中屡见不鲜，在广州市质监局发布的食品质量抽查第十批公告中，又有3批次产品因此登上了不合格产品榜单。记者昨日了解到，本次抽查涉及到水果制品、蔬菜制品、薯类食品和冷冻饮品、湿河粉、湿米粉等五类食品，其中有3批次产品被判定为不合格，不合格项目均为大肠菌群超标。 　　在湿河粉、湿米粉产品方面，本次抽检36批次样品，经检验合格34批次，有2批次不合格，合格率为94.4%。不合格项目为大肠菌群，分别为广州鑫明食品有限公司生产的一批次湿米粉、广州市番禺成峰粉厂生产的一批次湿米粉(河粉)。据悉，大肠菌群作为食品污染的常用指示菌之一,食品出现大肠菌群超标最常见的原因有两个：一是生产环境卫生状况不佳 二是操作人员不注意个人卫生。 　　另外在冷冻饮品产品方面，共计抽查了10家企业生产的14批次产品，经检验合格13批次，有1批次不合格，合格率为92.9%。不合格项目同样也为大肠菌群，为广州佳纯食品有限责任公司生产的一批次“佳纯”绿豆冰雪泥。 　　专家提醒，湿河粉、湿米粉是一种保质期较短的产品，建议最好购买有包装的产品，且不要一味追求颜色过分白，因为这样的产品可能会添加含二氧化硫的漂白剂。而对于冷冻饮品，发现有变型或已解冻现象建议最好不要购买。 　　大肠菌群超标企业和产品 　　广州鑫明食品有限公司 湿米粉 　　广州市番禺成峰粉厂 湿米粉 　　广州佳纯食品有限责任公司 “佳纯”绿豆冰雪泥

天津市工商行政管理局近日在流通环节对47家生产企业生产的30个批次饼干进行了食品质量抽样检验。经检测，9个批次饼干质量不合格，主要问题是产品菌落总数或大肠菌群超标。 　　据悉，此次依据国家食品安全标准，重点检验了甜蜜素、糖精钠、菌落总数、大肠菌群等4项指标。检测结果显示，7个批次产品菌落总数超标，涉及“上好佳”等市场知名品牌。业内人士称，菌落总数或大肠菌群超标的食品可能致食用者出现腹泻等身体不适。 　　据介绍，此次检测出的菌落总数超标的食品有： 　　1.标称驻马店市驿城区三威食品厂“立威”红豆味夹心饼干 　　2.标称河北省沧县乐宝食品有限公司“沧宝”乳酪夹心饼干 　　3.标称郑州上好佳食品工业有限公司“上好佳”谷维精华绿茶饼干 　　4.标称东莞市石龙爱士宝饼业食品厂“爱士宝”果子曲奇饼干(椰子奶油味) 　　5.标称上海小帅才食品漯河有限公司“小帅才”香葱味酥性饼干 　　6.标称河北博通饼业有限公司“博通”博通薄脆饼饼干(麦香口味) 　　7.标称东莞市溢东食品有限公司“溢东”溢东蛋烧薄饼干(薯仔味)。 　　此外，存在其他问题的食品有： 　　1.标称广州真巧食品有限公司“真巧”巧克力酱心饼干(代可可脂牛奶味夹心)，大肠菌群超标 　　2.标称临沂港仁食品有限公司港仁饼干，甜蜜素超标。 　　据了解，对此次抽样检验发现的质量不合格食品，天津市工商局已责令受检经销单位全部下架、停止销售，并将依照食品安全法律、法规实施处罚。

第一部分 GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 第一法 大肠菌群MPN法 1、取样原则：本标准中对应的检样量分别为0.1g（mL）、0.01g（mL）、0.001g（mL），根据样品限量值，查阅附录部分MPN表：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜3.0”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：1000的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管； （2）无论固体或液体样品的限量值为“＜0.3”或其它任意为MPN表中查到的数值缩小10倍的数值，则分别取10mL样品1:10稀释液接种到3管双料LST肉汤管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管（如蜂蜜的限量值为0.3MPN/g，即采取此做法）。 2、凡产酸或产气的LST管，都取1环接种GBLB肉汤管，凡BGLG产气者记为阳性。第二法 大肠菌群平板计数法（常见问题汇总） 1、VRBA培养相关问题（1）所用器皿是否需要灭菌？答：不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌，但要求一定要清洗干净，表面无污渍、无残留。煮沸完成后，取下锥形瓶，用一般常用的卫生纸（软纸）覆盖瓶口，用橡皮筋缠绕，待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时，须点燃酒精灯，稍微灼烧锥形瓶口。（2）如何保持“煮沸2min”？答：可以用电磁炉或电热板进行加热煮沸，在该培养基即将煮沸时调低温度。实际操作时，不需要严格按照此要求进行，加热煮沸数秒即可。原因：本培养基很难保持煮沸2min，一旦煮沸，则培养基很快上涌、翻腾，若不调低温度或立刻采取其他措施，则培养基可在数秒内喷涌出来，严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围（实验室危险因子之一）。（3）若培养基未用完，是否可以冷藏起来下次用？答：不可以。4789.28中已规定，固体培养基最多允许熔融1次（指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用）。且VRBA培养基冷却后，再次熔融时非常容易喷涌，若温度控制不当，底部培养基熔融后很快就会发生喷涌（即培养基未完全熔融就会发生喷涌现象）。（4）倾注完成后是否需要“覆盖一层”？如何覆盖？答：一般情况下不需要覆盖。在实际操作过程中，若检验员初次接触该食品（或食品品类），则有必要在倾注培养基后再覆盖一层（原因是不清楚该样品是否会发生蔓延）。而如此往复测试几次后，若该样品或食品品类均不存在蔓延现象，则以后的实验中都不需要进行覆盖。若重复多次测试后都有蔓延现象，则以后的检验中最好都进行覆盖，最好是在原培养基已凝固或半凝固（不会发生晃动）时再倾注一层培养基（“一层”是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿）。2、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群？答：建议新手们认真按照标准进行证实试验，此证实试验简单易操作，每一次VRBA上有菌落生长都进行证实试验，如此往复3-4次，对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心。 第二部分、GB/T 4789.3-2003 《大肠菌群测定》——（标准补充） 1、由于MPN表中给出的检样量为1mL（g）、0.1mL（g）0.01mL（g）三个稀释度，所以：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜30”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取10mL 1：10的样品匀液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管（有时限量值≤300，也建议同样操作）； （2）若液体样品的限量值为“＜3”，则分别取10mL样品原液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL样品原液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管，9管皆为阴性则符合该限量值。 2、大肠菌群在EMB培养基上的典型形态特征，参考GB 5750-2006中总大肠菌群发酵法相关章节。但仍然建议：一旦有菌落数生长，无论是否为典型形态，都应挑取进行革兰氏染色及证实试验。 3、最后一次证实试验，凡乳糖发酵管产气（无论气泡大小）且革兰氏染色镜检为阴性则判定为大肠菌群阳性。第三部分、那如何判断咱们的产品到底是应该用哪个版本的大肠菌群计数方法呢？以GB 2726-2016《食品安全国家标准 熟肉制品》为例，其中大肠菌群指标如下：该标准提到的检验方法并未写明是按GB 4789.3-2016中的第一法还是第二法检测，那现在按检测标准来分析一下：1. GB/T 4789.3-2003的检测结果单位为MPN/100克或MPN/100毫升”2. GB 4789.3-2016中的第一法中的检测单位为“MPN/克或MPN/毫升”

据《北京晚报》报道，国家质检总局昨天公布入境不合格化妆品、食品信息，共有422种产品上黑榜。法国依云矿泉水亚硝酸盐超标，农心牌辛辣方便面检出大肠菌群超标。 　　上黑榜的产品中，北京盛世唯嘉商贸有限公司从法国进口的依云、富维克天然矿泉水，亚硝酸盐超标。北京同仁堂健康药业股份有限公司从马来西亚有限公司进口的一批燕窝，检出亚硝酸盐。天津智傲物流有限公司在进口的农心牌辛辣方便面中，检出大肠菌群超标。 　　漯河双汇进出口贸易有限责任公司从丹麦进口的27吨多冻半猪头，检出沙门氏菌。上海昌琦绿忠国际贸易有限公司从法国进口的家乐福牌尖三角必奶酪和法国之光牌列福士奶酪，大肠菌群超标。生产金龙鱼食用油的益海嘉里(青岛)贸易有限公司从埃塞俄比亚进口的380吨芝麻，发生霉变。中轻日用百货进出口公司从印度尼西亚进口的48吨可可粉，菌落总数和霉菌超标。 　　广州安婕妤生物科技有限公司从意大利艾婕芙专业美容化妆品集团购买的RVB活力修颜面膜，菌落总数超标。汉的盟贸易(上海)有限公司从德国进口的碧丽娜丽致美白平衡保湿液，细菌总数超标。 　　美国奇士美飞丝公司从美国进口的天然蔓越莓无氟儿童牙膏，PH值超标。杭州宾博贸易有限公司从意大利进口的婴儿健康洗手液，甲醛超标。 　　这些食品、化妆品都是入境口岸检验检疫机构实施检验检疫时发现的，都已依法做退货、销毁或改作他用处理，未在国内市场销售。

绝味铁道学院店，店员表示，销售并未受影响 绝味鸭脖被爆大肠菌群超标16倍 　　一边啃鸭脖，一边看电视，是很多长沙吃货很喜欢的休闲方式。近日，央视财经频道《是真的吗》节目曝光了北京几家大型超市和鸭脖店所出售的熟食中大肠杆菌数量超标的消息，其中在长沙遍地开花的绝味鸭脖的熟食鸭脖和鸭肠大肠杆菌数量比标准高出16倍和30倍。 　　“是在吃鸭脖还是在吃细菌?!”、细菌鸭’以后再也不敢吃了”、“难怪我一吃鸭脖就拉肚子”……绝味被爆出大肠菌群严重超标后，一时间让热衷吃鸭脖的长沙吃货们很受伤。 　　事件：绝味鸭脖大肠菌群超标16倍，鸭肠超标30倍 　　9月7日，央视财经《是真的吗》栏目报道了对卤制品的抽检全过程。湖南绝味食品有限公司的绝味鸭脖，以及知名品牌久久丫均在抽检行列。抽检结果显示，这两家连锁企业的食品大肠菌群严重超标：绝味鸭脖大肠菌群数量为2400mpn/100g，绝味鸭脖的鸭肠大肠菌群数量为4600mpn/100g。 　　该报道中还提到，此次抽检结果如果参照熟肉制品卫生标准GB2726-2005大肠菌群150mpn/100g的标准，绝味鸭脖超标16倍，绝味鸭脖的鸭肠超标30倍。 　　相关食品专家表示，大肠杆菌容易引起很多种疾病，最常见的就是拉肚子。另外，还能引起呕吐、中枢神经系统的头痛等等一系列问题。某些严重感染者有可能造成溶血性贫血，红细胞、血小板减少 肾脏受到波及时，还会发生急性肾功能衰竭甚至死亡。因此，对付此类病菌感染的最佳手段还是预防：不吃不熟的肉类食品如生鱼、生牛肉等，食用生鲜瓜果前要彻底清洗，遇有腹泻尽早去医院。 　　调查：长沙门店销售未受影响 　　记者前往长沙铁道学院附近的一家绝味鸭脖店探访。店员表示，央视报道对湖南的影响不大，“很多消费者都还不知道这件事，销量也没有受到影响。一天的销售额比较好的店铺近万元，差的也有好几千。” 　　她还表示，这家店是加盟店，商品是由公司每天统一配送，工厂在暮云。“外地销售的商品应该不在长沙生产，因为口味不一样，每个地方都有工厂，长沙的工厂设在暮云。”并强调，长沙的鸭脖应该没问题的。 　　如果没卖完怎么办呢?店员并没有正面回应。她只说，“不会进太多货啦，每天都有配送的，进太多没必要”。 　　绝味长沙回应：散装鸭脖比对包装食品标准，这是个失实报道 　　今天下午，记者致电绝味鸭脖长沙公司，其负责人潘小姐回应说：“央视是购买散装鸭脖等食品进行检测的，但比对的是真空包装食品的标准，可以说，这是一个失实的报道”。 　　她表示，对于散装食品目前国家并没有明确的标准。目前卤制熟食中的大肠菌群指标是参考GB2726-2005熟肉制品卫生标准中对酱卤肉相关产品的规定，即小于等于150MPN每100克。但这个标准主要针对预包装食品，现制现售的食品由于没有包装作为食品与外界的阻隔，是难以达到的。 　　同时，她表示，“各地的绝味鸭脖配方和做法差不多，只会针对各地区饮食习惯在口味上做一些调整，比如微辣或者不辣，但都在当地有厂生产”。 　　吃货回应：吃绝味容易闹肚子，以后不敢吃了 　　长沙食客对鸭脖的感情，可谓又爱又恨。网友“黑骏马”表示，以前很喜欢吃绝味鸭脖，尤其是黑鸭架，但有时候吃了会腹泻，“感觉很辣，吃一两个还没事，但是吃多了，就闹肚子了”。 　　网友“菲菲”也表示，前几年吃绝味鸭脖挺多的，但自从前年有一次吃了绝味鸭脖得了肠胃炎，就再也不敢吃了。网友“半半歌”也表示，“难怪我一吃绝味鸭脖就拉肚子”。 　　网友“小云”也说，以前听传言说绝味鸭脖不能吃，没想到细菌超标这么厉害，吃鸭脖变成吃细菌了，太可怕了，以后尽量少吃，绝对不能再跟孩子吃了。

昨日，记者从广州市工商局获悉，近期广州市工商局委托检验机构对市场上销售的方便食品(不含方便面)进行了抽检，共抽检样品106批次，实物质量合格88批次，总体合格率为83.02%，其中芝麻糊4成不合格。其中，皇室核桃营养麦片与周氏牛奶加钙即溶燕麦片齐登不合格“黑榜”。 　　据悉，本次共抽检样品106批次，其中，麦片96批次，芝麻糊10批次，经检验，实物质量合格88批次，合格率为83.02%，检验项目包括标签、水分、总糖、蛋白质、脂肪、酸价、安赛蜜等。 　　值得注意的是，在抽检的10批次芝麻糊中有4批次产品不合格，不合格率在本类食品中占了4成，不合格项目主要表现为菌落总数、大肠菌群、真菌、酸价等超标。其中汕头市金妹健康食品有限公司生产的“人人欢喜”牌黑芝麻糊(高钙低脂)(720g/包，2012-3-15)以及桂林阜康食品工业有限公司生产的核桃黑芝麻糊(240克/包，2012.01.08)等2批次产品表现为酸价超标。酸价是衡量含油脂食品氧化酸败程度的重要卫生指标，酸价不合格产品具有一定的毒性，会影响人体健康。 　　抽检结果还显示，有14批次不合格产品表现为菌落总数、真菌和大肠菌群等微生物指标超标。其中由汕头市百宜食品有限公司生产的皇室核桃营养麦片(600g/包，2011-10-23)以及由桂林周氏顺发食品有限公司生产的“周氏”牌牛奶加钙即溶燕麦片(700g/包，2011-10-27)被检测出大肠菌群超标。 　　据相关专家介绍，菌落总数和真菌可用以判定食品被细菌污染的程度，大肠菌群可用以判定食品是否被肠道致病菌所污染，三者均是衡量食品卫生状况的重要微生物指标。

目前，食品中大肠菌群计数的常规方法是GB4789.3-2016《国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》，其中第二法平板计数法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数，被广泛使用。该方法前期试剂准备和后期清洗消毒工作量较大, 操作繁琐，检测效率不高；对操作人员经验要求较高；在检测量大时, 易出现交叉污染、检测结果准确性降低等问题。本文以GB4789.3-2016第二法平板计数法为参考方法，依据ISO16140-2:2016中的性能指标验证要求，对大肠菌群测试片方法进行包容性、排他性试验。选用40株标准菌株，培养后对测试片上的菌落形态进行观察，16株目标菌在大肠菌群测试片上均长出红色有气泡的典型菌落，24株非目标菌中的23株在测试片上均未观察到菌落生长，只有阿巴特图巴沙门氏菌ATCC 35640 在测试片上形成非典型的菌落，测试片的包容性和排他性均非常良好。

日前，一项刊登在国际杂志Nature Communications上的研究报告中，来自格拉斯格大学的科学家们通过研究发现，肠道菌群的健康和平衡对于细菌感染的进展至关重要。文章中，研究者表示，致病菌常常会利用来自宿主肠道菌群的信号来扩散并且加速感染进程。柠檬酸杆菌是一种感染小鼠和人类的致病菌，文章中研究者通过对柠檬酸杆菌进行研究发现，其能利用宿主肠道菌群所产生的信号分子来诱发疾病进程，并且引发长效感染。这项研究中，研究热人员首次在宿主机体内阐明了柠檬酸杆菌感染的过程（并非在实验条件下），这或许也能够帮助理解宿主肠道菌群在该过程中扮演的关键角色。研究者发现，细菌能利用肠道菌群产生的特殊化学物质来增强感染过程，并且诱发一些严重的疾病；研究者认为，本文研究阐明了健康的肠道营养和微生物菌群对诸如大肠菌群（柠檬酸杆菌）等细菌感染的易感性和疾病进展的重要性。研究者Andrew Roe说道，本文中我们重点理解了细菌诱发动物感染性疾病发生的准确分子机制，通过对柠檬酸杆菌进行研究，我们阐明了肠道菌群在细菌感染过程中扮演的关键角色，以及诸如大肠杆菌等细菌如何利用宿主信号来扩散并增加感染风险。后期研究人员还需要进行深入研究来探讨肠道菌群在细菌感染过程中扮演的关键角色，这或许对于开发抵御致病菌感染的新型疗法至关重要。

记者昨日从国家质检总局网站获悉，近期，国家质检总局组织了涉及日用消费品、食品等26类产品质量国家监督抽查，抽查发现，产品抽样合格率为88.4%.我省有5批次产品被检不合格，其中，扭扭虾味条大肠菌群实测值是标准值的100倍以上。 　　黑名单 　　●厦门广懋国际有限公司2010年10月生产的莱美牌被套，规格245cm×220cm,一等品，pH值项目不合格。 　　●龙岩天虹纺织装饰用品有限公司2012年1月生产的天虹牌床单，规格230cm×270cm,一等品，pH值项目不合格。 　　●福建省龙岩市豪迪化工有限公司2012年5月31日生产的豪迪拍高固透明底漆，PU-JD1000,游离二异氰酸酯含量总和指数不合格。 　　●龙海市远东食品有限公司2012年6月18日生产的蓝草香牌蛋皮米酥，称重销售，检测出过氧化值、羰基价超标。 　　●石狮德祥食品有限公司2012年6月12日生产的扭扭牌虾味条(膨化食品油炸型)，320g/包，检测出大肠菌群超标，实测值超标100倍以上。

肠道菌群是一类生活在机体肠道中的微生物群落的总称，也是近年来微生物学、医学、基因学等领域最引人关注的研究焦点之一。研究方向涵盖肠道菌群功能基础研究、肠道菌群与多种慢病的人群关联研究、肠道菌群的成像表征前沿技术研究、肠道菌群的临床治疗研究以及肠道菌群的产业转化等多个维度。2023年8月，两篇来自于中国的关于肠道微生物菌群的精彩研究工作先后发表于Science杂志。科学家发现：疾病相关的菌源同工酶可作为新的药物靶点，为治疗糖尿病等疾病提供了新思路；肠道菌群可通过调控宿主lncRNA，来影响宿主脂代谢，从而为靶向菌群和lncRNA治疗代谢性疾病提供了新线索。为促进肠道菌群及相关领域科研工作者的合作和交流，由Science/AAAS和北京大学医学部主办，中国生物物理学会肠道菌群分会协办的Science Café in China暨“第135期北大医学青年科技沙龙”将于2023年9月28日在北京大学医学部召开。本期Café主题肠道微生物菌群研究的突破和展望Gut microbiota: Advances and Perspectives时间2023年9月28日 上午9:00-11:40本次沙龙的语言为汉语，将以在线直播的方式进行，请感兴趣的读者扫码报名参加！长按并识别二维码进行报名特邀嘉宾乔杰，北京大学Bill Moran，Science系列期刊出版人王嘉东，北京大学医学部刘双江，中国科学院微生物研究所特约主持人钟超，北京大学医学部述评专家房中则，天津医科大学专家介绍及报告摘要姜长涛，北京大学长聘教授、博雅特聘教授，基础医学院副院长，国家杰出青年科学基金获得者、科学探索奖获得者。从事肠道共生菌与代谢性疾病研究。提出“代谢性疾病肠治”新理论，首次提出肠道菌源宿主同工酶新概念，发现降解尼古丁的肠道共生菌，揭示宿主反向调控肠道菌群代谢的新范式；近5年在Science (2023)、Nature (2022)、Nature Medicine (2019, 2018, 2017)、Cell Metabolism (2021a, 2021b, 2019) 等杂志发表SCI论文二十余篇，获授权发明专利7项。获北京市自然科学一等奖（第一完成人）、科学探索奖、中国青年科技奖、谈家桢生命科学创新奖、树兰医学青年奖、北美华人糖尿病学会（CADA）青年科学家奖、茅以升北京青年科技奖等奖励；主持国自然重点项目、重大研究计划及国家重点研发计划等基金，作为PI获创新研究群体项目。报告题目：肠道菌源宿主同工酶在代谢性疾病精准治疗中的作用Unlocking the Potential of Microbial-Host-Isozyme for Precision Treatment of Metabolic DiseasesScience文章链接：https://www.science.org/doi/10.1126/science.add5787 王宇浩，研究员。博士毕业于美国德克萨斯大学西南医学中心，现为浙江大学医学院转化医学研究院研究员，浙江大学医学院附属第一医院双聘教授。课题组致力于探索肠道菌群和宿主间的共生关系和相互影响，重点考察肠道菌群调控宿主代谢和免疫的分子机制，研究成果多次发表于Science (2017, 2019, 2023) 等国际权威期刊，数次获著名期刊点评和亮点报道，其中一项被美国胃肠病协会评为年度最佳肠道微生态研究之一。报告题目：肠道菌群与宿主脂代谢调控Gut microbiota regulation of host lipid metabolismScience文章链接：https://www.science.org/doi/10.1126/science.ade0522 王娟，副教授。毕业于中国协和医科大学，获得医学博士学位；现任北京大学医学部基础医学院副教授，北大孤独症研究中心秘书长；长期致力于孤独症谱系障碍发病机制的系统生物学研究，发表多篇孤独症相关多组学研究论文。2020年在Science Advances发表孤独症儿童肠道菌群存在解毒功能缺陷可能与发病机制有关。报告题目：孤独症谱系障碍患者的肠脑轴机制探索Gut- microbe- brain Axis of Autism Spectrum DisordersScience文章链接：https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.aba3760Science Café in China活动简介《科学》咖啡沙龙中国系列是由Science/AAAS主办的公益科学交流会。每期选定一个主题，由近期在Science系列期刊上发文的作者以线上报告的形式分享、介绍研究工作，以期待与同行的学术交流，思想碰撞。同时帮助更多其他领域研究者甚至产业界相关工程技术人员了解前沿进展，探讨学术与产业融合的机会。

夏令时节是各类冷饮产品的销售旺季，上海市消保委近期对上海流通领域的冰淇淋进行了比较试验。检测显示，22件样品中，有10件不符合标准。其中，冰雪皇后(DQ)、酷圣石、多乐星等多个知名品牌因大肠菌群超标等原因上了“黑榜”。 　　据专家分析，大肠菌群超标的主要原因是二次污染。如加工器具没有定期清洗消毒，操作人员在上完卫生间后洗手不彻底，个人卫生状况未达标，直接影响最终产品的卫生状况。 　　不合格率近五成 　　据了解，此次受检的冰淇淋分为两大类：普通冰淇淋和软冰淇淋。普通冰淇淋是经过相关工艺制成的体积膨胀的冷冻食品。一般是由工厂生产的工业化预包装产品，直接销售给顾客或者在售卖现场重新分装销售给顾客的产品。软冰淇淋是指在制作售卖现场，用冰淇淋浆料或冰淇淋粉加水调和后，经凝冻成半流态状，无需硬化，体积膨胀，有一定堆起性的产品。 　　本次受检的22件样品从本市22家各类零售点中随机购买，其中普通冰淇淋9件、软冰淇淋13件。检测显示，22件样品中，有10件样品不符合标准，不符合率为45.5%。其中，普通冰淇淋9件中有4件样品不符合标准，不符合率为44.4% 软冰淇淋类13件中有6件不符合标准，不符合率为46.2% 不符合指标主要为菌落总数与大肠菌群。 　　酷圣石菌落总数超标 　　菌落总数是食品中常见的卫生指标，本次比较试验中有2件样品超标，占受检样品的9.1%，分别为上海酷圣石冰淇淋有限公司太平洋 [5.40-2.88%股吧研报]店销售的“酷圣石(COLD STONE)”原味冰淇淋，实测值:32000CFU/ml(国家标准要求≤25000CFU/ml) 上海松庆餐饮管理有限公司静安店的“巴斯罗缤 (Baskin Robbins)”冻奶酪冰淇淋，实测值:51000CFU/ml(国家标准要求≤25000CFU/ml)。 　　据专家分析，菌落总数超标有以下几点原因：一是冷链环节。部分食品原料富含营养物质(例如乳制品)，特别容易造成微生物的生长，尽管冰淇淋的制作与销售都在较低的温度下完成，但由于制售过程中涉及较多冷链环节，如工作人员操作不到位，容易使得最终产品中含有较大数量的细菌。二是环境的影响。许多现制现售冰淇淋零售店都设立在商场内，且柜台都是敞开式的，使得环境中的细菌能够轻易进入到产品中。 　　部分企业食安意识淡薄 　　在本次试验结果中，大肠菌群超标现象尤为突出，共有8件产品该项指标不符合标准，占受检样品的36.4%。 　　上海麦科餐饮管理有限公司丰和路店销售的“多乐星(DOUNT KING)”香草圣代冰淇淋，实测值≥24000MPN/100g(行业标准要求1000MPN/100g) 上海明古连食品贸易有限公司销售的“安徒生[Andersen’s(OF DENMARK) Ice Cream]”原味香草冰淇淋，实测值4600MPN/100ml(国家标准要求≤450MPN/100ml) 上海适达餐饮管理有限公司徐家汇 [9.02-0.88%股吧研报]路店销售的“冰雪皇后(DQ)”暴风雪白杯，实测值4600MPN/100ml)(国家标准要求≤450MPN /100ml) 统一多拿滋(上海)食品有限公司美罗城店销售的“美仕多(MisterDonut)”香草冰淇淋，实测值2400MPN/100g(国家标准要求1000MPN/100g)。 在本次比较试验中，发现部分企业食品安全意识淡薄，这也是造成本次卫生指标严重超标的原因之一。这些企业仅对冰淇淋的浆料进行管控，而最终产品的卫生质量没有加以控制。因此，市消保委建议相关部门和行业组织应加强对企业的监管培训力度，督促企业建立和实施严格的食品安全管理制度。

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 12月24日，中国仪器仪表行业协会官网发布关于成立《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》团体标准起草工作组的通知。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/e78d99c1-dbec-4bcb-8492-91f5fba8d214.jpg" title=" 企业微信截图_20201225104600.jpg" alt=" 企业微信截图_20201225104600.jpg" / /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/18138437-6b45-4d90-87a8-ec28a2cba009.jpg" title=" 通知.jpg" alt=" 通知.jpg" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 各有关单位： /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 根据《关于& lt 菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪& gt 团体标准项目建议书的批复》（中仪协[2019] 017号），《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》项目已经列入中国仪器仪表行业协会的团体标准制定计划。该团体标准由中国仪器仪表行业协会归口管理，青岛佳明测控科技股份有限公司牵头起草。主要参与单位有吉林市光大分析技术有限责任公司等。现征集参与标准起草单位并成立标准起草工作组，请有关单位指派熟悉相关标准内容的技术人员参加，报名表（见附件）签字盖章后于2020年12月30日前扫描电子版发送至中国仪器仪表行业协会。 !--菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪-- /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 联系人：马雅娟 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 电话：13611013933 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 地址：北京市西城区百万庄大街16号1号楼6层 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 电子邮箱：mayj@cima.org.cn /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 附件： /p p style=" line-height: 16px " img style=" vertical-align: middle margin-right: 2px " src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_doc.gif" / a style=" font-size:12px color:#0066cc " href=" https://img1.17img.cn/17img/files/202012/attachment/ce9bdb3e-7cf9-4497-a3c3-3a4140fe9054.doc" title=" 《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》起草工作组报名表.doc.doc" 《菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌酶底物法水质自动分析仪》起草工作组报名表.doc.doc /a /p p style=" line-height: 16px " img style=" vertical-align: middle margin-right: 2px " src=" /admincms/ueditor1/dialogs/attachment/fileTypeImages/icon_pdf.gif" / a style=" font-size:12px color:#0066cc " href=" https://img1.17img.cn/17img/files/202012/attachment/d365221d-896f-4078-b98f-c6d531851c2a.pdf" title=" 关于成立团体标准起草工作组的通知.pdf.pdf" 关于成立团体标准起草工作组的通知.pdf.pdf /a /p

近日，国家质检总局公布一批不合格进口食品名单，其中，由台湾统一企业(股份)公司生产的两批泡面查出大肠菌群超标，台湾广吉食品股份有限公司的8批次MOMO婴幼儿谷物辅助食品，超范围添加柠檬酸亚铁钠。产地主要是澳大利亚、泰国的30余批蜂蜜产品中，为菌落总数超标、果糖和葡萄糖含量不合格。从哈萨克斯坦进口的蜂蜜检出被农业部列为禁止使用的药物呋喃唑酮 永旺特慧优国际贸易(上海)有限公司从日本进口的意大利面二氧化硫超标 锦江麦德龙现购自运有限公司从法国进口的科瑞西洋梨白兰地甲醇超标。

p & nbsp & nbsp 12月11日，山西省食药监局公布了10大类170批次食品监督抽检结果，检出不合格样品9批次，涉及饮料8批次、方便食品1批次。 /p p 　　通报显示，8批次饮料全部为饮用水，来自临猗县峨嵋润泽泉纯净水厂、稷山县黄花源饮用水有限公司、稷山县秦井天然饮品有限公司、晋中津美饮业有限公司、运城市方大银蝶泉饮品有限公司、夏县怡鑫源饮品有限公司、临县观音圣泉饮品有限公司、夏县禹洋水业有限公司8家生产企业。其中有6批次检出铜绿假单胞菌，2批次检出大肠菌群和铜绿假单胞菌。 /p p 　　铜绿假单胞菌是常见的细菌之一，常存在于潮湿的环境，如土壤、水、空气中，该菌是一种条件致病菌，在机体抵抗力降低等特定条件下可致病。饮用水中铜绿假单胞菌不合格原因可能是：一是原料水体受到感染；二是生产过程中卫生控制不严格，杀菌不彻底，从业人员未经消毒的手直接与饮用水或容器内壁接触；三是包装材料清洗消毒有缺陷。 br/ /p p 　　大肠菌群是国内外通用的食品污染常用指示菌之一。食品中检出大肠菌群，提示被致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌）污染的可能性较大。大肠菌群超标的原因可能是由于产品的加工原料、包材受污染，或生产过程中产品受人员、生产设备、环境的污染，或者有灭菌工艺的产品灭菌不彻底等原因导致。 br/ /p p 　　另外，大同市华林有限责任公司振华南街超市销售的标称桂林周氏顺发食品有限公司生产的手工纯香黑芝麻糊检出霉菌超标。 br/ /p p 　　霉菌在自然界很常见，霉菌可使食品腐败变质，破坏食品的色、香、味，降低食品的食用价值。霉菌超标可能是加工用原料受霉菌污染，或者生产过程中卫生条件控制不严，样品储运条件控制不当导致。 br/ /p p 　　针对抽检中发现的不合格产品，山西省食药监局已按照《中华人民共和国 strong class=" keylink" 食品安全法 /strong 》的规定，责成相关市局及时进行核查处置，采取封存、下架、召回不合格产品等措施防控食品安全风险，督促企业查找原因，消除隐患。消费者如果在市场上发现被通报的不合格食品，可拨打12331投诉举报。 br/ /p p br/ br/ /p

大肠菌群平板计数法的常见问题有哪些？1、VRBA培养相关问题（1）所用器皿是否需要灭菌？答：不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌，但要求一定要清洗干净，表面无污渍、无残留。煮沸完成后，取下锥形瓶，用一般常用的卫生纸（软纸）覆盖瓶口，用橡皮筋缠绕，待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时，须点燃酒精灯，稍微灼烧锥形瓶口。（2）如何保持“煮沸2min”？答：可以用电磁炉或电热板进行加热煮沸，在该培养基即将煮沸时调低温度。实际操作时，不需要严格按照此要求进行，加热煮沸数秒即可。原因：本培养基很难保持煮沸2min，一旦煮沸，则培养基很快上涌、翻腾，若不调低温度或立刻采取其他措施，则培养基可在数秒内喷涌出来，严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围（实验室危险因子之一）。（3）若培养基未用完，是否可以冷藏起来下次用？答：不可以。4789.28中已规定，固体培养基最多允许熔融1次（指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用）。且VRBA培养基冷却后，再次熔融时非常容易喷涌，若温度控制不当，底部培养基熔融后很快就会发生喷涌（即培养基未完全熔融就会发生喷涌现象）。（4）倾注完成后是否需要“覆盖一层”？如何覆盖？答：一般情况下不需要覆盖。在实际操作过程中，若检验员初次接触该食品（或食品品类），则有必要在倾注培养基后再覆盖一层（原因是不清楚该样品是否会发生蔓延）。而如此往复测试几次后，若该样品或食品品类均不存在蔓延现象，则以后的实验中都不需要进行覆盖。若重复多次测试后都有蔓延现象，则以后的检验中zuihao都进行覆盖，zuihao是在原培养基已凝固或半凝固（不会发生晃动）时再倾注一层培养基（“一层”是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿）。 2、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群？答：建议新手们认真按照标准进行证实试验，此证实试验简单易操作，每一次VRBA上有菌落生长都进行证实试验，如此往复3-4次，对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心。3、两个梯度都长了菌，如何选取？答：选取15-150CFU之间的平板（指的是VRBA平板上所有菌落数在此范围），挑取可疑菌落进行证实试验。详细举例说明：若有两个连续梯度的4个平板上菌落数均在15-150之间，则4个平板上的菌落都要挑取进行证实试验，实际操作时，可灵活操作，如：1:10的两个平板上的菌落数分别为120、123，1:100的两个平板的菌落数分别为16、18，严格来讲必须至少在每个平板上分别挑取5个可疑菌落、5个典型菌落进行证实试验，如此需要40根GBLB肉汤管。建议使用镍合金接种环（即传统的接种环，而不是一次性塑料接种环），因为VRBA上生长的菌落（无论典型或可疑）大部分长在底层、且菌落一般较大，被培养基覆盖，传统的接种环较细，用以刮去上层培养基较方便，挑取菌落也较方便。 4、如何进行证实试验？菌落选取数量？答：同上所述，建议新手们VRBA上的所有不同形态的菌落都进行证实试验。每种不同形态都挑取5-10个进行证实试验（若BGLB管足够，建议多挑取几个进行试验）。注意：A.每种可疑菌落挑取5个，每个菌落放入1管GBLB管中；B.“产气者，记为大肠菌群阳性管”，就要求在实验前须认真筛选BGLB管，凡产气的GBLB管应弃去不用。 5、结果如何计算？答：首先，在VRBA培养24h后进行计数，分别计数可疑大肠菌群和典型大肠菌群（何为可疑、何为典型？同“2”，检验员多进行几次实验后自然很清楚典型的大肠菌群是何种形态）的数量。假如在1:10的平板上可疑大肠菌群有10个，典型大肠菌群有6个；其次，进行证实试验，挑取上述可疑和典型大肠菌群各5个（或者全部挑取），假如10个可疑大肠菌群中有3个证实为阳性，6个典型大肠菌群中有5个证实为阳性，则计算方法如下：最终大肠菌群数=经证实的大肠菌群数=可疑大肠菌群经证实的数量+典型大肠菌群经证实的数量=10×（6/10）×10+6×（5/6）×10=110。 6、若平板上很多菌落，最终证实全部为阴性，结果如何计算？答：根据第3条,选取适宜菌落数的平板挑取菌落进行证实试验，若证实全部为阴性，则需要再挑取更低稀释度的平板上的菌落（建议可疑和典型菌落分别挑取10个）进行证实试验，若第二次证实试验均呈阴性，以＜1乘以zuidi稀释度进行计算，如：1:10的平板菌落数分别为120、123，1:100的平板上菌落数分别为16、18，首先挑取1:100的两个平板上的菌落进行证实试验，若全部为阴性，再挑取1:10的两个平板上的菌落进行证实试验，若1:10的平板上的菌落数证实为阴性，则最终计算过程为＜1x10，最终结果为＜10；若1:10的的平板上的菌落有阳性管，则按照第5条进行计算。中国微生物菌种查询网专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

上海市消保委日前通报了2013年度连锁咖啡店糕点质量和卫生状况。检测表明，香啡缤两家门店的糕点先后被检测出大肠菌群超标问题。 　　近年来，连锁咖啡店已成为商务洽谈、朋友聚会的首选之地，其店内所售的糕点也深受消费者欢迎。为此，市消保委对本市连锁咖啡店出售的糕点开展了社会监督工作。 　　市消保委在本市15家知名连锁咖啡店内随机购买了40件糕点，并委托检测机构对其质量情况进行了检测。检测结果表明，多家企业的糕点大肠菌群超标。如上海邦美蜀咖啡有限公司(店招：猫屎咖啡)销售的黑森林蛋糕大肠菌群实测值为2400(MPN/100g)，上海香啡缤餐饮有限公司陕西北路分店(店招：香啡缤)销售的皇家巧克力蛋糕大肠菌群实测值为930(MPN/100g)，均远高于≤300(MPN/100g)的国家标准。 　　市消保委在对15家门店产品的销售环境温度(冷藏柜温度)测量时发现，部分需冷藏储存的产品，实际冷藏温度超过了产品标签要求，还有一些产品标称需冷藏保存，而门店却没有冷藏柜。此外，诸如门店销售员工不佩戴口罩、收钱后直接用手端取或用桌布擦拭盛糕点的盘子、反复使用同一双一次性手套拿取糕点及未在特定的加工区域内对食品进行切分等不规范操作问题，均易造成产品污染。 　　对于部分企业产品大肠菌群数值超标，市消保委第一时间提请相关企业予以重视，并进行了跟踪检测。结果显示，上海香啡缤餐饮有限公司银城中路店(店招：香啡缤)芝加哥芝士蛋糕大肠菌群依旧超标。就本次社会监督中反映出的问题，市消保委已对相关企业提出劝喻，要求杜绝质量隐患。 文章转载自：新浪网

各相关单位：根据《宁夏质量技术协会团体标准管理办法》的相关规定，宁夏质量技术协会经专家研究审核，决定对《食品接触用PET瓶盖中大肠菌群检验-滤膜法》《食品接触用PET瓶盖中菌落总数和霉菌检验-滤膜法》《食品接触用PET瓶盖中金黄色葡萄球菌检验》《一次性卫生用品中大肠埃希氏菌O157:H7快速检测方法-实时荧光PCR法》《一次性卫生用品中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌检验-多重实时荧光PCR法》《产可得然胶土壤杆菌菌株诱变筛选技术规程》《可得然胶含量快速检测方法-微孔板法》《产可得然胶土壤杆菌菌株冻干保存技术规程》团体标准批准立项，现予以公示。请参与起草单位严格按照《宁夏质量技术协会团体标准管理办法》团体标准制定工作要求，严把质量关，加强组织协调，增强本标准的适用性和有效性，确保标准高质量，按期完成标准编制工作。标准制定过程中如有问题，请联系宁夏质量技术协会秘书处。联系人：杨老师电 话：0951-8762976地 址：宁夏银川市兴庆区玉皇阁南街292号

饮用水质离不开大肠杆菌在线监测仪【霍尔德HED-DC9000】来自人们粪的病原体微生物如大肠杆菌，是导致水源污染的关键病菌，饮用水检测出大肠杆菌意味着水受到了粪的污染，粪中或许带有除大肠杆菌外的其他更多的病菌，目前全球各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪污染较好的指示菌。国家标准中，运用总大肠菌群作为粪污染的指标。总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃发育时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪水污染的程度，而且间接地表明有肠道病菌存在的可能。山东霍尔德电子生产的大肠杆菌在线监测仪采用国际标准的方法，酶与细菌培养反应后光信号变化成正比这一原理，反映出样品中细菌总量或大肠菌群的多少。系统广泛用于饮用水水源安全、应急评估及多细菌的测定，能对水污染事件进行预警，同时可预警一般性水体污染事件以及食物中毒事件。 大肠杆菌在线监测仪的技术参数：测量方法酶底物法检测参数总大肠菌群或耐热大肠杆菌、菌落总数。测量范围测量范围： 1MPN/1L—1×1011MPN/L重复性10%分辨率1%测量时间小于12小时清洗维护测量前后自动进行清洗消毒测量间隔连续或者任意选择，可设置校准周期三个月人机操作超大屏幕彩色液晶触摸屏，分辨率：800x600数据存储1年以上报警信号温度报警，机械故障报警，检测结果误差报警。输出RS232，RS485，4-20mA，正常工作条件环境温度：0～40℃。电源要求：220V AC±10%，50Hz±5%。功率：200W电源要求：220V AC±10%,50Hz±5%功率：不大于200W外界环境：无显著震动及电磁干扰，避免阳光直射尺寸500mm×1650mm×321mm（W×H×D）

型号推荐：程控定量封口机-一块定量检测水中大肠杆菌数量的仪器2024实时更新，在水质监测的迫切需求下，程控定量封口机以其独特的优势，为水样中细菌微生物的快速、准确检测开辟了新的途径。它不仅能够针对绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群等多种致病菌进行高效检测，还具备野外携带、应急响应及定量检测的能力，成为水质安全的重要保障。 一、高效精准，细菌微生物无所遁形 程控定量封口机集成了先进的检测技术，能够迅速且准确地识别水样中的各类细菌微生物，包括绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群、粪大肠杆菌及大肠埃希菌等。其高效的检测速度，使得水质监测工作更加及时有效。 二、便携应急，适应多种监测场景 该封口机设计紧凑，轻便易携，非常适合野外作业和应急响应。无论是在偏远的山区水源地，还是突发的水污染事件现场，都能迅速投入使用，为水质安全提供第一时间的检测保障。 三、定量检测，科学评估水质状况 除了快速检测外，程控定量封口机还具备定量检测的功能。它能够精确测量水样中细菌微生物的数量，为水质评估提供科学的数据支持。这一特性使得水质监测结果更加准确可靠，为水质管理决策提供了有力依据。 四、方法优势无需在无菌室内操作。2.手工操作时间小于 1 分钟。3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。4.24小时即可完成定性定量分析，无需验证试验。 程控定量封口机以其高效精准、便携应急及定量检测的特点，在水质监测领域发挥了重要作用。它不仅提升了水质监测的效率和准确性，还满足了野外和应急响应的需求，为水质安全保障提供了坚实的技术支持。随着技术的不断进步和应用领域的拓展，相信该设备将在未来发挥更加广泛和重要的作用。

凛凛寒冬，外卖受到大家的欢迎，于是肠胃迎来了“黑夜”食品中的菌群过多是导致肚子疼的原因，那么如何检测食品中的菌群数量呢？均质是获得菌群的方法之一，均质也称匀浆，是使悬浮液(或乳化液)体系中的分散物微粒化、均匀化的处理过程，这种处理同时起降低分散物尺度和提高分散物分布均匀性的作用。均质中常用拍打式均质器又称无菌均质器，可以从固体样品中直接提取细菌。均质方法：需将原始样品（大的需要剪成约 10×10mm 块状）和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中，经过叶片的拍打锤击产生压力、引起振荡、加速混合、从而达到溶液中微生物成分处于均匀分布状态，即可完成样品的处理。效果说明：有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。均质后的样品可作为代表原样本，进行后续分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，确保卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。WIGGENS拍打式均质器HG400Pro均质效果苹果脆皮肠鱼油胶囊HG400 Pro* 容量:50-400ml* 拍击速度:1-10次/秒* 均质时间：1s - 59min 59S* 可以自动并排停靠叶片* 配有安全滴水盘，防止液体外流

近日，一批品名为森活健康小麦胚芽的固体饮料经文锦渡口岸进口，深圳文锦渡检验检疫局工作人员对该批货物送检，检出其大肠菌群含量为2400MPN/100g，超出我国食品卫生标准(GB7101-2003)限量要求(90MPN/100g)近27倍。 　　据悉，该批不合格货物共计82箱、重342.3千克、货值1747.36美元。文锦渡局已按有关规定对该批食品作退货处理。

近十年来，肠道微生物组已成为生命科学研究领域的热点，但目前大部分研究都集中在使用二代测序技术进行物种和功能的解析，宏基因组的拼接质量不高并且很难实现菌株水平的功能差异分析。有鉴于此，中科院微生物研究所王军课题组和动物研究所宋默识课题组合作，建立了ONT三代测序和Illumina二代测序数据混合组装和后续分析流程。在mock community上的验证表明，三代和二代测序数据的混合组装从完整度、准确程度以及编码密度方面均比单纯二代或者三代测序组装更有优势。图1本研究的技术路线（a）,利用三代测序进行SV的深度解析，以及横断面/时间序列中SV的组成、动态分析，最终进行SV对代谢功能的影响判定。(b)混合组装能够有效提高N50，并组装出大量的基因组（c），其中发现更多的insertion、deletion和inversion。图2肠道微生物中与SVs相关的功能研究结果。(a,b,c) SV影响基因富集结果 (d-i) SV影响单菌种内不同菌株与代谢产物以及血糖的关联。图3肠道菌群汇中与病毒和CRISPR相关的研究结果该研究基于三代ONT序列，提高了宏基因组装的质量、SV的发现能力，发现了大量包括插入突变和基因倒位在内的结构变异对于菌株水平上基因功能的影响，以及噬菌体、CRISPR-spacer等系统的深度挖掘。这项研究是课题组利用三代Nanopore测序技术解析肠道病毒组（Cao et al., Medicine in Microecology, 2020,4:100012 Cao et al. Gut Microbes, 2021, 13），近期发表的真菌组分析方法（Lu et al, Molecular Ecology, doi:10.1111/mec.16534）和靶向RNA检测病原微生物（Zhao et al., Advanced Science, 2021, 8, 2102593）之后，在利用三代Nanopore测序技术探索肠道微生物研究领域的新进展。这一发现，对未来更精细的精准医学领域的发展提供了理论启发。中国科学院微生物研究所王军研究员、中科院动物研究所宋默识研究员为本文的共同通讯作者。中国微生物研究所助理研究员陈亮、赵娜、博士生曹佳宝、硕士研究生刘小林、助理研究员徐嘉悦为该论文的共同第一作者。该研究得到了国家重点研发计划项目、国家自然科学基金项目、中国科学院战略性先导科技专项、北京市自然科学基金项目等多项资金的资助。文章链接：https://www.nature.com/articles/s41467-022-30857-9

日期: 2018年7月26日时间: 14:00 – 16:00地点: 网络讲座语言: 简体中文 胆汁酸代谢的调控是肝细胞的主要功能之一。在各种理化因素所导致的肝损伤模型中，胆汁酸代谢异常是肝脏病变的基本特征。胆汁酸由胆固醇为原料在肝细胞中合成产生，合成后的胆汁酸与甘氨酸或牛磺酸结合，形成结合型胆汁酸并分泌在胆囊中储存。 现代研究表明，胆汁酸还是重要的信号调节分子，游离型和结合型胆汁酸可以激动转录因子Farnesoid X receptor（FXR），而FXR不仅对胆汁酸的合成、分泌与转运具有重要的调节作用，而且在糖、脂和能量代谢调节中扮演重要角色。 本讲座将详细阐述胆汁酸的肝肠循环，以肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝癌为例论述血清胆汁酸的显著提高与人的肝脏疾病直接相关，最后以胆汁酸-肠道菌群之间对话出错导致肝癌的发生作综述。 讲座概要： 1.详细阐述胆汁酸的肝肠循环2.论述血清胆汁酸的显著提高与人类肝脏疾病的直接关系3.综述胆汁酸-肠道菌群之间对话出错可导致肝癌的发生 主讲者：王洋 博士（麦特绘谱生物科技(上海)有限公司技术支持） 毕业后就职于麦特绘谱（上海）科技有限公司，致力于开发和推广代谢组学技术方法（LC-MS/MS、 GC-TOF/MS），精通代谢组学技术在生物医药领域尤其是肝病研究及中医药研究中的应用，在代谢组学科研课题和项目设计上实战经验丰富，多次协助客户成功申请国家及地方的基金。 登录沃特世官网并搜索“胆汁酸-肠道菌群互作在肝病中的发现与应用”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加。收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前通过电子邮件给您发送讲座登录链接。为了确保您成功接收邮件，请尽量避免使用网易邮箱（163.com&126.com）注册，谢谢！

南方医科大学研究团队发表相关论文，英文题目：GinsenosideRg1 mitigates morphine dependence via regulation of gut microbiota,tryptophan metabolism, and serotonergic system function。中文题目：人参皂苷Rg1通过调节肠道菌群、色氨酸代谢和血清素能系统功能减轻吗啡依赖研究背景吗啡依赖是一种毁灭性的神经精神疾病，可能与肠道菌群失调密切相关。人参皂苷Rg1(Rg1)是从人参根中提取的活性成分，对神经系统具有潜在的保健作用。然而，它在物质使用障碍中的作用仍不清楚。该文探索了Rg1在对抗吗啡依赖中的潜在调节作用。研究结果1.人参皂甙 Rg1 抑制吗啡诱导的小鼠的条件位置偏好（CPP）调理训练后各组小鼠体重略有增加，但是未观察到显著差异（图1C）。使用Smart3.0软件在15分钟内跟踪小鼠头部并记录它们的轨迹和停留时间。对照组和其他组之间的轨迹或CPP分数没有显着差异。在吗啡注射后在白室中花费的时间与基线相比以及在盐水处理后在白室中花费的时间显着增加（图1C，D），表明吗啡成功诱导CPP在实验小鼠中。MRH和MRL组与模型组相比，MRL和MRH小鼠在药物配对隔室的停留时间和轨迹显着减少。然而，在单独用人参皂甙Rg1治疗的小鼠中，没有观察到CPP评分和活动途径的变化。2.人参皂甙Rg1改善CPP小鼠肠道菌群失调阿片类药物成瘾通常与肠道菌群失调有关。为了进一步探索Rg1介导的抗成瘾机制，对粪便进行了16S rRNA 基因扩增子测序，以评估有或没有Rg1处理的CPP小鼠肠道微生物群的组成。维恩图显示了对照组和其他组小鼠共有476个OTU（图2A）。然而，对照组有1108个OTU，M组有1304个，MM组有19个，MRL组有548个，MRH组有1702个，CR组有195个。这些数据暗示了吗啡治疗诱导的肠道微生物群紊乱和人参皂苷Rg1给药后的部分恢复。值得注意的是，使用Chao1指数进行的α多样性分析显示，Rg1阻止了吗啡引起的细菌丰富度下降（图2B）；然而，各组之间的香农指数没有差异（图2C）。通过Bray-Curtis主坐标分析(PCoA)研究肠道菌群的整体结构表明，吗啡组的细菌组成发生了变化，与对照组不同，表明肠道菌群失调吗啡处理诱导了微生物群（图2D）。然而，MRL、MRH、MM和CR组显示了四种不同的细菌组成簇。值得注意的是，MRL中的微生物群与MRH组中的微生物群更紧密地聚集在一起。我们在门水平上进一步分析了每组的肠道细菌组成。人参皂甙Rg1显着增加吗啡诱导的拟杆菌门和厚壁菌门相对丰度的降低（图2E），并显着降低吗啡诱导的蓝藻和变形杆菌的相对丰度增加。在家族水平上的进一步分析显示，吗啡处理导致随着叶绿体和线粒体的增加，拟杆菌属、Sutterellaceae和Tannerellaceae的相对丰度急剧下降。在MRL和MRH组中，吗啡诱导的丰度变化不同程度地逆转（图2F，G）。此外，Kruskal-WallisH检验用于评估指定组之间在物种水平上的差异的显着性，并观察到15个优势物种（图2H）。考虑到报告显示吗啡依赖模型中拟杆菌属的丰度低于对照，我们专注于拟杆菌属物种B.vulgatus、B.xylanisolvens和B.acidifaciens。吗啡显着降低了B.acidifaciens、B.vulgatus和B.xylanisolvens 的丰度。值得注意的是，B.vulgatus的相对丰度在Rg1给药后显着增加（图2I）。除了16SrRNA 测序外，我们还用B.vulgatus特异性引物进行了定量PCR，证实吗啡显着降低了丰度，人参皂苷Rg1处理后丰度显着增加（图2J）。图片图片图23.人参皂甙 Rg1抑制肠道微生物群衍生的水平和CPP小鼠血清色氨酸代谢物在药物依赖期间，肠道代谢谱发生变化，宿主代谢途径可能发生改变。我们假设人参皂苷Rg1可能通过肠道微生物发酵过程中产生的代谢物影响CPP。基于这一理论，我们使用非靶向代谢组学来识别可能在小鼠血清和肠道中改变的关键代谢物和代谢途径。MRL组和MRH组对吗啡诱导的CPP的疗效没有观察到统计学差异；然而，行为分析数据显示，MRH组的疗效优于MRL组。因此，我们选择MRH组作为非靶向代谢组学分析的代表性药物干预组。在血清和粪便中分别鉴定出1955和559种代谢物。偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型分别在血清和粪便中的CONTROL、MODEL和MRH组中显示出显着的聚类分离(图3A、G)。热图分析显示，CPP导致代谢物发生显着变化，小鼠粪便和血清中共有177种代谢物（96种上调和81种下调）和69种代谢物（44种上调和25种下调）分别显着改变（图3D和J)。此外，对代谢物途径的分析表明，与对照组相比，CPP小鼠的以下途径发生了显着变化：色氨酸、α-亚麻酸、甘油磷脂、精氨酸和脯氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢。值得注意的是，色氨酸代谢受到粪便和血清中吗啡的显着影响（图3B和H）。将MRH与MODEL组进行比较，在人参皂苷Rg1处理后，粪便和血清中的195种代谢物（94种上调和101种下调）和115种代谢物（60种上调和55种下调）分别显着改变（图3E和K）。代谢组学图显示色氨酸代谢受到Rg1补充的显着影响（图3C和I）。色氨酸代谢在微生物组-肠-脑轴中起关键作用。在这种情况下，我们专注于色氨酸代谢相关的代谢物。具体而言，色氨酸代谢相关代谢物的热图分析表明，参与色氨酸代谢的四种主要中间代谢物L-色氨酸、吲哚、N' -甲酰基犬尿氨酸和血清素是对吗啡的反应最显着增加的代谢物，它们的水平在Rg1处理后，粪便或血清中的含量降低。具体来说，我们发现与模型组相比，Rg1处理的肠道色氨酸和血浆血清素水平下调（图3F和L）。4.人参皂甙 Rg1 改善 CPP 小鼠海马 5-羟色胺能系统的变化血清色氨酸浓度会影响大脑的血清素系统。我们推测宿主色氨酸代谢物的变化可能与CPP小鼠的海马血清素能系统和其他神经递质有关。为了验证这一假设，使用酶联免疫吸附法检测海马和外周血清中谷氨酸、多巴胺、γ-GABA和5-HT的表达水平。在海马中，相对于对照组，CPP小鼠表现出显着升高的多巴胺水平和降低的γ-GABA水平（图4C）。然而，组间谷氨酸和血清素的浓度没有差异（图4A）。与M组相比，MRH组海马中GABA含量增加。此外，在MRL和MRH小鼠中观察到多巴胺水平显着下降。注射吗啡后血清中血清素和多巴胺水平升高，γ-GABA水平降低。所有CPP诱导的变化都被Rg1处理逆转（图4B、D、S2B）。为了进一步探索Rg1介导的抗成瘾机制，我们使用qPCR检测了小鼠海马中奖赏相关基因mRNA的相对转录水平，包括脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养酪氨酸激酶受体2型(TrkB)和血清素受体。与Rg1治疗组的转录水平相比，吗啡组中5-羟色胺受体（5-HTR1B和5-HTR2A）、BDNF和TrkB的转录水平因人参皂苷Rg1给药而下调（图4E、F）。这些数据表明人参皂甙Rg1可能通过抑制血清素系统来改善吗啡依赖。5.肠道微生物组的调控影响人参皂甙 Rg1 对吗啡诱导的小鼠 CPP 的抑制作用为了研究肠道菌群失调对吗啡诱导的小鼠行为的影响，我们在进行吗啡依赖性CPP训练之前，给BALB/cSPF 小鼠施用了不可吸收的抗菌剂或无菌水的混合物7天，然后进行CPP测试（图5A）。ATM治疗后各组小鼠体重下降，调理训练后略有增加；然而，各组之间没有观察到差异（图5B）。ABX与对照组相比，同时给予多种抗生素后，所有抗生素治疗小鼠在药箱中的停留时间均增加。此外，与ABX组相比，AM组在药物配对隔室中的停留时间明显增加。令人惊讶的是，小鼠在AMRL、AMRH和AMM组的药物配对隔室中的停留时间与AM组没有显着差异（图5D）。我们在鼠标头部轨迹中观察到相同的现象（图5C）。为了评估抗生素暴露后小鼠肠道微生物群发生的变化，通过16SrRNA 基因测序测定了粪便细菌组成。抗生素治疗极大地改变了微生物组并减少了细菌负荷（图5E）。为了研究肠道菌群失调对吗啡诱导的小鼠行为的影响，我们使用了维恩图显示了对照组和其他抗生素治疗小鼠共享的476个OTU；然而，1606个OTU是对照组独有的，48-68个OTU是其他六个抗生素治疗组独有的。随后用抗生素混合物治疗导致肠道微生物群显着消耗，细菌多样性显着降低。PCoA显示抗生素治疗的小鼠与对照小鼠相比具有显着不同的微生物群落（图5F）。但ABX、AM、AMRL、AMRH、AMM和AR组的细菌多样性没有显着变化，说明抗生素治疗根除大部分共生菌，吗啡和人参皂苷Rg1治疗后没有显着变化.我们在ABX小鼠的粪便中发现了几种细菌门，这些细菌门相对于对照组的粪便发生了改变（图5G）。优势门不同，伴随着Proteobacteria的丰度显着增加，而Verrucomicrobiota、Cyanobacteria、Firmicutes和Deferribacterota的丰度在抗生素处理后下降。然而，用抗生素治疗小鼠并没有改变拟杆菌的相对丰度，尽管抗生素治疗耗尽了肠道微生物组成。最后，我们用B.vulgatus特异性引物进行了定量PCR，并证实与对照组相比，抗生素治疗组的细菌显着减少了数百至数千倍（图5H）。此外，吗啡和人参皂甙Rg1并没有改变B.vulgatus对抗生素的反应。6.肠道微生物组的消耗影响色氨酸代谢并抑制 Rg1 诱导的基因表达接下来检测了抗生素混合物治疗对吗啡诱导的CPP小鼠代谢物和代谢途径的影响。偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型显示，在粪便中的代谢物方面，对照组和ABX组之间的簇显着分离（图6A）。值得注意的是，抗生素治疗后ABX、AM和AMRH组之间没有明显的代谢物聚集。我们专注于色氨酸代谢途径，并观察到参与色氨酸代谢的代谢物被ATM显着改变。然而，在ABX、AM和AMRH中未观察到显着变化。因此，这些数据表明抗生素治疗强烈降低了粪便中色氨酸代谢物的水平（图6C），并且由吗啡和Rg1引起的代谢改变被消除。此外，在血清中，PLS-DA结果显示四组（对照组、ABX、AM和AMRH）的代谢物谱不同（图6B）。ATM显着改变了色氨酸代谢物。值得注意的是，与 ABX小鼠相比，注射吗啡的小鼠的代谢物发生了相当大的变化。具体而言，与 AM组相比，色氨酸代谢物在Rg1处理后没有显示出显着变化（图6D）。我们发现 Rg1治疗组和模型组在ABX治疗后肠道色氨酸和血浆血清素水平没有差异（图6E和F）。随后，我们发现微生物组消耗抵消了 Rg1在CPP小鼠海马体中诱导的变化（图6G-L）。Rg1治疗未能逆转5-HT、多巴胺、5-HTR1B/5-HTR2A 和BDNF-TrkB信号通路。7.B.vulgatus 协同增强人参皂苷 Rg1 抑制吗啡诱导的小鼠 CPP因为肠道B.vulgatus 减少和增加与吗啡诱导的CPP增加和Rg1降低CPP一致，并且在抗生素处理的小鼠中消除了人参皂苷Rg1对CPP的改善，我们探讨了B.vulgatus 是否在吗啡中起作用依赖。作为典型的拟杆菌属物种，普通拟杆菌是小鼠肠道中的主要细菌物种，我们试图确定普通拟杆菌是否会影响CPP进展。我们首先使用抗生素治疗来消耗肠道微生物群，然后再用B.vulgatus 定植。在吗啡诱导的CPP小鼠模型中检查B.vulgatus 对吗啡成瘾的影响（图7A）。抗生素治疗或B.vulgatus 移植没有显着改变体重（图7B）。单独使用B.vulgatus (AMBV) 进行灌胃显着降低了白框中的停留时间和轨迹百分比，而吗啡则增加了该百分比（图7C、7D）。值得注意的是，与B.vulgatus 和人参皂苷Rg1(AMBVR)共同治疗的小鼠在药物配对隔室中的停留时间和轨迹百分比显着降低。这些数据清楚地表明AMBVR在抑制CPP方面比AMBV取得了更好的功效。值得注意的是，在我们的研究中，用“吗啡”微生物组(AMF)进行肠道再定殖并没有诱导CPP行为。8.B.vulgatus 可以改变肠道微生物组成小鼠粪便样本的16SrRNA 基因测序揭示了用活的B.vulgatus灌胃肠道微生物群组成的变化。拟杆菌门的相对丰度从AM组的不到20%增加到AMBV组的40%和AMBVR组的60%（图7E）。定量PCR证实，与对照组相比，AMBV和AMBVR组灌胃后肠道中的细菌显着过度生长数百至数万倍（图7F）。这些数据表明，人参皂甙Rg1提高了CPP小鼠中普通双歧杆菌的丰度。9.B.vulgatus 改变了肠道微生物群衍生和宿主色氨酸代谢物对小鼠的粪便和血清进行了代谢组学分析。偏最小二乘判别分析(PLS-DA)显示AM、AMBV和AMBVR组之间完全分离（图8A和D）。热图分析显示，仅用B.vulgatus灌胃导致CPP小鼠代谢物发生显着变化，粪便中有332种代谢物（211种上调和121种下调），血清中有82种代谢物（58种上调和24种下调）。我们对具有已知KEGGID 的332和82种显着不同的代谢物进行了KEGG途径富集分析，并分别鉴定了14和11种富含色氨酸代谢的代谢物。同时，将AMBVR与AM组进行比较，粪便中的313种代谢物（237种上调和76种下调）和血清中的82种代谢物（44种上调和38种下调）在与普通芽孢杆菌和人参皂甙Rg1共同处理后显着改变。在粪便中发现了13种代谢物，血清中发现了11种代谢物富集到色氨酸代谢，AMBV和AMBVR都改变了肠道微生物群衍生和宿主色氨酸代谢。我们随后检查了粪便和血清中由AMBV和AMBVR改变的色氨酸代谢物的相对丰度（图8B，C）。用B.vulgatus 灌胃下调色氨酸和血清素水平（图8E-I和9B）。10.B.vulgatus 协同增强人参皂甙-Rg1 诱导的吗啡诱导的海马 5-羟色胺能变化的抑制作用最后，为了证实人参皂甙Rg1通过影响肠道微生物群衍生的色氨酸代谢-血清素途径来减轻吗啡依赖，我们测定了海马和血清中5-HT、多巴胺和GABA的水平。CPP小鼠中血清素和多巴胺的血浆浓度较低，而GABA的血浆浓度高于单独用普通双歧杆菌灌胃或与Rg1共同治疗的小鼠（图9A-D）。值得注意的是，AMBVR小鼠的海马5-HT浓度显着低于AM小鼠。qPCR进一步证实了血清素受体和BDNF-TrkB的mRNA水平升高。我们观察到5-HTR1B、5-HTR2A和BDNF-TrkB的表达被B.vulgatus 定植和Rg1处理有效抑制（图9E、F）。研究结论该研究表明人参皂苷Rg1对吗啡依赖的改善作用与肠道微生物群有关。此外，我们发现微生物组的消耗和拟杆菌的补充可以影响吗啡依赖性并影响Rg1的功效，伴随着色氨酸代谢和5-羟色胺的变化。该研究结果提供了一个新的框架来理解中药通过肠道微生物群-色氨酸代谢和血清素能系统拮抗吗啡成瘾的机制，可能会带来新的诊断和治疗策略。

p style=" text-indent: 2em " 近年来，随着利用菌群重建治疗菌群失调相关性疾病的临床证据不断增加，菌群移植已经成为全球临床医学、微生物学和转化医学的研究热点。菌群移植可以分为整体菌群移植和选择性菌群移植（SMT），前者即粪菌移植（FMT），已于2013年被列入美国临床医学指南用于治疗复发性难辨梭状芽孢杆菌感染（CDI）。不同于传统的手工FMT，洗涤菌群移植（WMT）是基于智能化粪菌分离系统（GenFMTer）及严格相关漂洗过程的FMT，是FMT发展过程中的新技术。 /p p style=" text-indent: 2em " strong 从粪菌移植到洗涤菌群移植 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 2014年4月，“粪菌移植”从方法学上发展为WMT。WMT方法学共识已于2020年在《中国医学杂志》发表，具体概念是指在高级别实验室条件下，基于智能粪菌分离系统，对健康供体的粪便进行菌群分离、漂洗、定量、储存，并作相应的转运、选择合适的患者给入途径等过程。 /p p style=" text-indent: 2em " 相比于传统的手工FMT，WMT在不降低临床疗效的前提下，还可显著降低临床不良反应事件的发生率，提高治疗的安全性，这是因为WMT的微滤系统结合多次离心洗涤的过程可去除未消化的食物残渣、真菌、寄生虫卵和部分促炎代谢产物。 /p p style=" text-indent: 2em " 相关动物研究表明，与经手工方法制备去除的上清液相比，将离心洗涤后的上清液注射至小鼠腹腔，可显著降低毒性反应的发生率。基于中国菌群移植平台提供的真实世界数据，对比“洗涤”和“手工”制备过程，WMT后总不良反应事件发生率（包括发热、腹泻、腹痛、腹胀、恶心、呕吐等）在溃疡性结肠炎患者中从38.7%降低至 12.3%；在克罗恩病患者中从21.7%降低至4.26%。此外，WMT在解决伦理、美学因素导致的医患对FMT的排斥问题上也有重要作用。 /p p style=" text-indent: 2em " strong 最重要的前提是安全性 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 菌群移植的安全性一直备受重视。今年10月，《食物药理学与治疗学》杂志发表系统性综述从全球角度回顾了过去20年FMT的安全性数据，明确菌群移植用于临床治疗产生的不良反应事件主要分成两类，一类是微生态相关不良反应事件, 另一类是移植途径相关不良反应事件。该研究报道了FMT相关严重不良事件发生率为1.4%，0.99%为微生态相关不良反应事件，并且严重不良事件均发生于肠黏膜屏障（MBI）受损患者。 /p p style=" text-indent: 2em " 与此概念一致，2019年，美国食品药品监督管理局报道了两例源自供体的致病微生物（产超广谱b内酰胺酶大肠杆菌）所致的菌群移植相关严重不良事件，即微生态相关不良反应事件，其中出现了1例死亡病例。 /p p style=" text-indent: 2em " 11月《临床传染病》杂志也报道了一起因FMT传播产志贺毒素大肠杆菌的微生态相关不良反应事件。通过对供体筛查、实验室制备流程等方面的严格质控减少微生态相关不良反应事件。 /p p style=" text-indent: 2em " 在新型冠状病毒流行期间，多名专家提出更加严格的供体筛查必要性，在原有疾病史、血液及粪便样本的检测基础上新增新冠肺炎相关临床症状和流行病学史调查，高危地区或国家辅以RT-PCR检测，严格监控冻存样品安全，避免新型冠状病毒感染者成为供体。 /p p style=" text-indent: 2em " 鉴于此，2019年，WMT南京共识会议对移植途径的选择做了详细推荐，移植途径的选择主要取决于患者的基本情况和实际需求。经内镜肠道植管术因安全、高效、多用途等优势，成为WMT常用的移植途径，患者满意度高达95%以上。 /p p style=" text-indent: 2em " strong 适应证逐步拓展 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 由于菌群失调导致的疾病发生、发展及合并状态，统称菌群失调相关性疾病。除常规治疗指南制定的第三次复发性难辨梭状芽孢杆菌感染外，菌群移植在治疗指南之外的多种疾病中均显示出了重要价值。 /p p style=" text-indent: 2em " 截止到今年12月10日，在美国临床试验注册网站进行注册的关于菌群移植的临床试验已经超过350项，涉及治疗难辨梭状芽孢杆菌感染、炎症性肠病、肠易激综合征、糖尿病、自闭症、肝性脑病、癫痫、肥胖症、营养与代谢异常、移植物抗宿主病、肿瘤并发症等疾病、疾病亚类或特定状态，适应证从最初的复发性难辨梭状芽孢杆菌感染扩展到菌群失调相关性疾病。 /p p style=" text-indent: 2em " 目前，已注册的临床试验以FMT治疗难辨梭状芽孢杆菌感染和炎症性肠病为主，但是FMT在肝胆疾病、脑肠轴疾病以及肿瘤免疫治疗中发挥的作用已经成为新的研究热点。 /p p style=" text-indent: 2em " strong 仍须进一步探索 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 2019年WMT南京共识的发表推动了粪菌移植方法学的标准化，有利于指导全球传统FMT向更加安全、可控的WMT发展，从而使得更多的患者受益于这项新技术。 /p p style=" text-indent: 2em " 但WMT安全性仍需更多研究加以验证，以期建立规范的质控标准。菌群移植目前已被证明可用于治疗多种菌群失调相关性疾病，为菌群和宿主之间的因果作用提供了重要证据，同时其适应证范围还在进一步扩大。 /p p style=" text-indent: 2em " 近年来，国内外针对菌群移植相关的临床研究发展非常迅速，但仍然存在一定局限性，需要进一步丰富医生和研究者的知识结构，菌群移植的应用范围才能有效拓展，其重要价值才能更好、更快、更完整地体现。 /p p br/ /p