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菊糖酶

仪器信息网菊糖酶专题为您提供2024年最新菊糖酶价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括菊糖酶参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的菊糖酶您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合菊糖酶相关的耗材配件、试剂标物,还有菊糖酶相关的最新资讯、资料,以及菊糖酶相关的解决方案。

菊糖酶相关的论坛

  • 【讨论】饲用木聚糖酶活测定的问题

    在做饲用木聚糖酶酶活测定时,采用国标法结果很不稳定,同一样品隔几天测结果相差很大;标准曲线做了三次K值均呈下降趋势,相关系数倒是蛮好的。我怀疑是DNS试剂的问题,在整个配制过程中唯一不同的地方就是用滤纸过滤代替烧结玻璃过滤器过滤,请问影响大不?请各位帮忙分析下,谢谢!

  • 【天瑞论文奖+第三届原创】糖酶的新近发展

    糖酶的新近发展摘要:简要介绍了糖酶中淀粉酶、乳糖酶、纤维素酶作用机理和应用前景;详细介绍了α-葡萄糖苷酶的理化性质、作用机理、研究现状以及展望了其应用前景。关键词:糖酶;α-葡萄糖苷酶;研究现状;应用前景酶制剂作为一类绿色食品添加剂,用于改善食品品质和食品制造工艺,其应用已越来越普遍,品种也不断增多。其中,糖酶(carbohydrases)是一种应用相当广泛的酶类。它通过裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键,使多糖降解成较小的分子;也能催化糖单位结构重排,形成新的糖类化合物,这类反应被称为转糖苷作用;此外,一些酯酶能作用于酯化的糖类,这类反应在改变果胶物质的功能性质上是很重要的。 本文大致介绍了糖酶中淀粉酶(amylase)、乳糖酶(lactase)、纤维素酶(cellulose)。主要介绍了α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase),一种新型的糖苷酶。1.淀粉酶淀粉是由葡萄糖通过α-1 ,4糖苷键和α-1,6糖苷键连接而成的高分子化合物,而糖酶广泛分布于自然界,能裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键,使多糖降解成为较小的分子,两者具体作用方式如下图所示。 淀粉工业中常用的糖酶有以下四类:(1)α-淀粉酶(液化酶,α-Amylase,α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶,EC3.2.1.1),主要来自芽胞杆菌和曲霉,它是一种内切型淀粉酶,作用于淀粉是从淀粉分子的内部任意切开α-1,4-糖苷键,使淀粉分子迅速降解,失去粘性和碘的呈色反应,同时使降解物的还原力增强。(2)β-淀粉酶(β-Amylase,α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶,EC3.2.1.2),在工业上应用的酶制剂主要来自植物(如大麦)和微生物(芽孢杆菌)。作为外切型淀粉酶,它作用于淀粉时从还原端以麦芽糖为单位切断α-1,4-糖苷键,但产物不是α型的麦芽糖,而是[font

  • 【“仪”起享奥运】烘焙酶助力实现清洁标签--木聚糖酶

    [align=left][font=宋体, SimSun][size=16px][b][font=宋体, SimSun]加工助剂在加工过程中发挥改善产品品质的功能,却在最终产品中没有残留,因为它们在加工过程中经常被销毁或移除。依据法规要求,这种物质不需要列在产品标签上,因此,使用加工助剂来代替化学添加剂为食品清洁标签提供了一种新途径。[/font][font=宋体, SimSun]酶制剂是一类最常用的加工助剂,在烘焙过程中,发挥改善功能的烘焙酶被高温烘烤所破坏,所以不必在标签上声明。因此,烘焙酶为烘焙食品带来了实现清洁标签的机会。[/font]木聚糖酶[i][/i]增加烘焙食品中的纤维含量[/b][/size][/font][/align][font=宋体, SimSun][size=16px]纤维有益于人体健康,所以很多面包师都试图增加烘焙产品中的纤维含量。然而,像麸皮这样的纤维,吸收了大量的水分,且吸收速度比面团中的其他成分较慢。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=16px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=16px]当纤维吸收水分后,面团变紧,导致操作不便。面团无法扩张,限制了酵母的作用,进而会导致面包质劣,且不能很好地成型。针对上述问题,木聚糖酶可切断大纤维链间的糖苷键[i][/i],以释放低分子量的糖和水。这有助于慢慢地软化面团,重新分配水分,增强气室延展性和稳定性,提高面团可操作性。[/size][/font][size=16px][/size][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#48494d][/color][/size][/font]

  • 体外抑制蔗糖酶活性,求老师指导指导,感恩,

    根据文献等比例缩小体积,全部的反应均在96孔板上反应,先加入10μL底物(2%蔗糖溶液),后加入各浓度梯度的样品溶液20μL,反应5min后,加入蔗糖酶溶液10μL,反应20min后,加入无水乙醇20μL灭酶,灭酶后加入20μLDNS,最后用pbs稀释测定吸光度。(1)蔗糖酶用的是来自酵母菌的,我看文献用的都是鼠小肠里的(2)蔗糖酶一开始用的20U/mL,DNS测定后吸光度太大,且各个样品几乎没有抑制率,今天换2U/mL,样品和阿卡波糖均几乎没有抑制率。(3)究竟DNS测定这个是否存在问题,求老师指导。

  • 乳制品的天然甜味帝斯曼乳糖酶

    乳制品的天然甜味帝斯曼乳糖酶

    乳制品的天然甜味帝斯曼乳糖酶健康是金,可以带来金钱和财富;健康是神圣的人权,是人们生存、发展、享乐的基本条件。随着健康意识的不断提升,人们开始用水果、低糖、无糖等健康产品来代替含糖量较高的食品和饮料,并希望通过各种方式减少糖分摄入。天然、简单、健康的低糖产品已成为一种主流的消费趋势。当今的食品行业日新月异,过去人们视为有益的成分现在也可能会损害消费者的健康。长期以来,生产商一直在不遗余力地减少甚至完全消除产品中的脂肪,然而最近他们开始将注意力转向糖分问题。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508292317_563484_1751239_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508292318_563486_1751239_3.png  减少糖分摄入被认为是预防超重、肥胖和龋齿的重要方式。此外,由于糖分摄入过多会增加罹患心脏病和糖尿病的风险,因此减少摄入还有利于身体健康。从摄入渠道来看,软饮料,谷类甜点,果汁、膳食、乳制品甜点,糖果4类食品中糖分含量位列前四。为减少糖分摄入,消费者需要口味和质量能够与糖相媲美的替代品;而生产商则需要在满足消费者日益增长的天然健康产品需求与保持产品口感之间寻求平衡。这为乳制品生产创新提供了众多机遇。讨论:帝斯曼乳糖酶是什么东东,和普通的乳糖酶有什么区别呢??谈谈您的看法,赢取积分

  • 糖酶解液跑氨基柱为什么不好跑呀?

    糖酶解液跑氨基柱为什么不好跑呀?

    请问,为什么糖酶解液用来跑氨基柱为什么不好跑呀?本来应该有最少6个峰的,可是只有一个峰,基线挺平的如图1,而用3K的超滤膜过滤蛋白后还是不行如图2,只是那个峰稍微高了一点,也不知道那个峰为什么会更高?其它峰怎么不见呢?[img=,690,480]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101355036548_5671_1658948_3.png!w690x480.jpg[/img][img=,690,478]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910101355074842_3095_1658948_3.png!w690x478.jpg[/img]

  • 测定土壤蔗糖酶时可以将土样放在离心管反应吗

    测定土样蔗糖酶时要在三角瓶中放置24小时,然后要6000rpm离心,这样就必须从三角瓶中移到离心管里,不用水冲洗的前提下有没有办法将三角瓶里的反应溶液倒干净,有没有必要倒干净,如果没法倒干净,直接将土样和测定的反应液放置在离心管里放置24小时,然后直接离心可以吗?

  • 【求助】GB/T23874-2009饲料添加剂木聚糖酶活力测定中4.6木聚糖溶液浓度为100mg/ml,有错误吗?

    GB/T23874-2009饲料添加剂木聚糖酶活力测定中4.6木聚糖溶液浓度为100mg/ml,有错误吗?因为其描述为:4.6木聚糖溶液浓度为100mg/ml:称取木聚糖(sigmaX0627)1.00g,加入0.32g氢氧化钠,再加入90ml水,磁力搅拌,同时缓慢加热,直至木聚糖完全溶解。然后停止加热,继续搅拌30min,加入0.5 ml冰乙酸。继续磁力搅拌,测定器pH,若PH为5.50,用乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100ml。大家帮忙计算一下,国标上这样写的浓度是不是应该为10mg/ml啊?是不是国标出错了。另外sigmaX0627国内无现货,可以用别的代码的sigma药品啊?可以推荐下吗?急急急急急急

  • 【原创大赛】用试剂盒方法(酶法)测定食品中葡聚糖含量(范本贴)

    用试剂盒方法(酶法)测定食品中葡聚糖含量摘要:描述了用试剂盒(酶法)测定食品中葡聚糖含量的方法前言: β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒细胞壁中的多糖,是籽粒细胞壁的主要成分,化学名称为(1,3)(1,4) -β-D-葡聚糖,其含量以大麦和燕麦中较高其主要功能有:降低胆固醇,降血脂,调节血糖,提高免疫力,抗肿瘤和预防心血管疾病等。还有研究发现,它可以缓解和减轻肥胖症状。 β-葡聚糖测定方法包括酶测定法、荧光法、高效液相色谱法等,其中酶测定法因其反应专一性,测定准确可靠,而被采用为国际测定方法。酶法的方法过程如下:样品经水合和糊化,用地衣酶(β一葡聚糖酶)将样品中的β一葡聚糖酶解成β-葡基-寡聚糖。经调整体积和过滤分离后,用β一葡萄糖苷酶将这些可溶的B-葡基-寡聚糖水解成葡萄糖。葡萄糖用葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢,后者用过氧化酶分解,以便在苯酚存在下,生色基4一氨基非那宗存在下形成适于比色分析的光吸收络合物,在紫外分光光度计下测定。 本文采用爱尔兰的Megazyme公司提供的测定(1,3)(1,4) -β-D-葡聚糖试剂盒,借鉴了EBC法3.11.1、AOAC法995.16,AACC法32-23方法,建立了测定相关制品中β-葡聚糖的测定方法。

  • 【讨论】酶制剂的酶活测定方法及影响因素

    酶制剂的酶活测定方法及影响因素随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步,酶制剂在饲料工业中的应用越来越普遍。由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用,提高饲料消化率,改善动物生产性能,降低生产成本,因此日益受到饲料界的重视。但是,由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确,分离提纯困难等多种原因,使这类产品有国家标准的不多,即使有国标也存在一些问题。给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。本文简要介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素,仅供广大饲料工作者提供参考。1 酶制剂的定义及分类所谓的酶制剂就是通过产酶微生物发酵工程或含酶的动、植物组织提取技术生产加工而成,具有一种或多种底物清楚的酶催化活性,有助于改善动物对饲料营养成分的消化、吸收等,并有功效的生物学评定依据,符合安全性要求,作饲料添加剂用的酶制剂产品(NY/T 722-2003)。工业上应用的酶制剂大多为水解酶,按作用底物的不同,可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。按动物体内是否分泌,分为消化酶和非消化酶两大类。消化酶指动物自身能够分泌的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等,在幼龄动物或特殊生理阶段时,动物也存在消化酶分泌不足需要外源供给的情况。非消化酶是指动物自身不能够分泌或很少分泌,必须由外源供给的酶,这类酶能消化动物自身不能消化的物质或降解一些抗营养因子,主要有植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。2 常见的酶活测定方法通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手段来进行评价,它可以用来筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量等,酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用最为广泛的一种方法。其操作相对简单,检测所用时间短,便于生产实践应用。酶活测定结果虽不能完全反映酶的使用效果,但通过检测至少可以避免使用劣质的酶制剂。我国饲料工业标准中已经确立了饲用植酸酶(GB/T 18634)、纤维素酶(NY/T912)、β-葡聚糖酶(NY/T 911)的测定方法。另外,许多企事业单位为了生产研究的需要也制定了很多用于各种酶制剂活力的测定方法。目前测定酶制剂活性的方法主要有:2.1 比色法比色法是以反应生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法,根据原理不同可分为还原糖法和色原底物法。2.1.1 还原糖法 这种方法是通过酶作用于化学合成或从自然界提取出来的底物来进行测定的。非淀粉多糖酶与底物在特定的条件(温度、pH值和底物浓度)下反应,反应产物为还原糖,在与显色剂反应后,通过比色确定还原糖的生成量,同时制作标准曲线。酶的活性表示为单位时间产生一定浓度的产物所需要的酶量(mg 或mL)。该法可适用于大部分酶活力的测定,如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶等的测定。根据显色剂的不同又可分为DNS 法、钒钼酸铵法和地衣酚法。其中DNS 法由于操作简单、显色稳定,是目前众多实验室和饲料企业在测定非淀粉多糖酶时应用最多的测定方法。2.1.2 色原底物法 原理是利用人工合成的含色原基团的底物在酶的作用下释放出有色物质,利用分光光度计比色测定有色物质的含量计算酶活。如木聚糖酶活力的测定。该法操作简单、重现性好,但酶作用于合成底物与天然底物的效果有一定区别,用合成底物测定的酶活并不能代表酶制剂在应用于天然饲料时所能发挥的酶活大小。2.2 黏度法这种方法是根据酶能够降低一定浓度的标准底物(控制pH值、温度等条件)的黏度的能力来确定酶的活性。利用的底物主要有化学合成的底物(如CMC 用于纤维素酶的测定) 和自然提取的底物(如小麦阿拉伯木聚糖用于木聚糖酶的测定)。测定的酶的活性值是通过与同时测定的标准酶活性的比较,来确定酶的活性。该法可用于木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活测定。这种方法的特点是通过降低底物的粘度来反映酶的活性,这也正是酶在体内起作用的重要特征。该法虽然灵敏度较高,但重现性差,操作复杂费时,应用难于普及。2.3 免疫学法用于酶活性分析的免疫学法包括ELISA 法和免疫凝胶扩散法。这两种方法是根据酶与抗体之间发生反应,然后ELISA 法通过第二步反应,凝胶扩散法则通过印染过程来确定酶的活性。这些方法非常灵敏,能够检测到极低水平的酶蛋白。但它们的缺点是对于每个产品的酶需要特殊的抗体,另外抗体能够与非酶蛋白质发生反应。由于抗体本身所用的蛋白质是特定的,因此,由不同生产者生产的同种类型的酶之间是没有交叉性的。另外,采用实验动物的敏感性也值得探讨。2.4 凝胶扩散法这种方法是将酶作用的底物与某种凝胶混合后倒入培养皿中,凝固之后,在凝胶上切开一条凿,倒入标准酶液和测试酶液。培养一定时间后,在切开的凝胶周围能够看到水解区域,区域的大小与酶的含量成正比。在某些情况下,还可以再加入其他试剂来显示水解的区域。如木聚糖酶活力的测定。这种方法虽然简单,但培养时间长。因为这种方法是根据区域的大小来确定酶的活性,所以其准确性要低于其他非扩散的方法。2.5 比浊法以酵母或酵母细胞壁在缓冲溶液中的浊度或吸光度的降低来表示酶活力,如β-葡聚糖酶活力的测定。2.6 体外模拟消化技术酶活测定毕竟不能反映外源酶在机体内真实的作用效果,因此,对于体外法评定饲料营养价值的研究不断增加。体外法评定饲料营养价值是通过模拟消化道内温度、pH、消化酶分泌、胃肠运动和养分吸收等参数,在体外建立一套与畜禽消化道内环境接近的操作程序,对饲料及酶制剂进行营养价值预测和评定。常用的体外模拟消化技术包括:①胃蛋白酶—胰酶法;②胃蛋白酶—小肠液法;③胃蛋白酶—胰酶—瘤胃液法;④胃蛋白酶—胰酶—碳水化合物酶法。由于不同的饲料用酶是不同的微生物通过发酵过程产生的,酶产品的酶学性质差别较大。并且各种微生物所分泌的酶的最佳pH 值、温度和对底物的亲和性都不相同。而目前,饲用酶除植酸酶、纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶有正式颁布的国标或行标酶活测定方法外,其他饲用酶制剂目前都还没有一个统一的定义及检测标准。因此,饲料厂家在比较不同厂家的酶制剂时,在没有统一的测定方法情况下,应首先确定自己认可的检测方法,然后在完全相同的测定条件进行检测,这样得出的结论才具有可比性。3 酶制剂活性测定影响因素的分析饲用酶制剂活性测定的主要影响因素有温度、pH、作用时间、底物等4大要素以及一些非定义要素,如酶液稀释度、标准曲线、显色剂、缓冲液等,下面就这几方面进行归纳分析一下:3.1 影响饲用酶制剂活性测定的四大要素所谓的酶活性就是指在特定的系统和条件下测到的反应速度。为了确保酶制剂测定结果的一致性,饲用酶制剂活性单位定义中对影响酶活大小的主要条件进行了规定,其中包括温度、pH 值、时间和底物,这些都是酶活力测定系统中最重要的因素,对酶促反应速度影响很大。3.1.1 温度对酶活测定的影响 酶制剂对温度非常敏感,在检测过程中对温度的控制则显得非常重要。温度对酶活性影响主要表现在两个方面:一方面,是当温度升高时,酶与底物的反应速率加快;另一方面,由于随着温度的升高将使酶的稳定性下降,部分酶蛋白分子逐渐变性而失去活性,引起酶反应速率下降。温度的这两种影响的综合作用而产生酶反应的“最适温度”。对于不同的酶制剂在不同的情况下最适温度是有一定的差别。研究木聚糖酶时发现,在30℃~40℃条件下酶活较稳定,50℃后随着温度的升高,酶活力开始下降,90℃时基本失活。研究纤维素酶最适酶解条件时发现,在36℃~58℃之间纤维素酶相对酶活随着温度升高而升高,当温度在58℃~62℃之间时,相对酶活性没有明显变化,曲线近似呈水平状态,在40℃、45℃、50℃条件下,其相对酶活分别为56%、70%、80%,而当温度大于58℃以上时相对酶活不再升高。同时,酶在不同条件下适宜温度也可能要受到酶的纯度、底物、激活剂、抑制剂以及酶促反应时间等因素的影响。3.1.2 pH 对酶活测定的影响 pH 值在酶活测定时对测定结果影响很大,各种酶制剂在一定条件下都有其特定的最适酶解pH,酶的最适pH 会随着底物种类和浓度、缓冲液种类和浓度的不同而改变,因此最适pH 也只有在一定条件下才有意义。pH 影响酶活力的原因可能有以下几个方面:① 过酸或过碱可以使酶的空间结构破坏,引起酶构象的改变,也影响酶活性部位催化基团和结合基团的解离状态,酶活性丧失;② 当pH 改变不是很剧烈时,酶虽未变性,但酶活受到了影响。pH 影响了底物的解离状态,或者使底物不能和酶结合,或者结合后不能生成产物。pH 影响酶分子活性部位上有关基团的解离,从而影响与底物的结合或催化,使酶活性降低可能影响到中间络合的解离状态,不利于酶解生成产物;③ pH 影响维持酶分子空间结构的有关基团解离,从而影响了酶活性部位的构象,进而影响酶的活性;④ pH 影响底物的带电状态。这些都直接影响酶和底物的亲和力,影响酶解反应速度。有文献报道,很多酶最适酶解pH 都在3.0~6.0。研究不同pH 值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的影响发现,在pH 值3.6 以下,随着pH 值的增大,木聚糖酶的活性逐渐升高;pH 值为3.6 时,木聚糖酶的活性最高,且在3.

  • 【原创大赛】固定化酶法的比较

    【原创大赛】固定化酶法的比较

    1 引言南瓜食品是世界上公认的特效保健食品。由于原料来源广泛便宜,生产投资少、见效快,市场前景广阔,具有巨大的经济效益。南瓜粉是一种高钙、高锌、高钾、低钠食品, 特别适合于中老年人、糖尿病和高血压患者食用。南瓜粉防治糖尿病已被国内外所公认。研究证实,绝大部分Ⅱ型糖尿病患者服用南瓜粉后,可以使血糖降低,说明南瓜粉具有降血糖和升胰岛素的作用。南瓜防治糖尿病是在环丙基氨酸、果胶及几种微量元素和维生素等成分共同作用下实现的。因为南瓜粉是一种高钾低钠食品,而钾在人体内起着调节渗透与平衡的作用,高钾低钠饮食对预防心血管疾病、治疗浮肿有明显效果,所以南瓜粉适合于高血压和肾病患者食用。采用酶法水解南瓜中的可溶性糖,可使其降解为寡糖。为了进一步增加产率,提高成本,酶固定化技术应用到了南瓜食品加工工业中。酶的固定化可回收及重复利用。因而固定化酶一般可以被认为是不溶性酶。与水溶性酶相比,固定化酶易于将固定化酶与底物、产物分开, 方便后续的分离和纯化;可以在较长时间内连续生产;酶的稳定性和最适温度提高, 最适pH值改变, 对温度和pH值适应范围增大, 对抑制剂和蛋白酶敏感性降低;酶反应条件容易控制;较水溶性酶更适合于多酶反应;可以增加产物的收率, 提高产物质量;酶的使用效率高,使用成本低;适于产业化、连续化、自动化生产。本文采用3种不同的固定化酶法对α-淀粉酶和低聚糖酶进行固定化,选择最佳固定化方法。2 材料与方法2.1 主要材料南瓜,市售日本南瓜;α-淀粉酶3700U/mL,北京奥博星生物技术有限责任公司;低聚糖酶20000CU/g,武汉鑫华远科技有限公司;海藻酸钠,AR,天津市光复精细化工研究所;3- 氨基丙基三乙氧基硅烷,AR,佛山市道宁化工有限公司。2.2酶的固定化方法的选择本试验首先选用3种固定化酶法,即海藻酸钠包埋法、共价交联法和大孔硅球吸附法对α- 淀粉酶进行固定,通过单因素试验得到了3种固定化方法的最佳方案和最大固定化率,之后选用最佳方法对低聚糖酶进行固定,并通过试验得到低聚糖酶的最佳固定条件。2.2.1包埋法固定α- 淀粉酶的单因素试验包埋法包埋固定化法是把酶定位于聚合物材料的格子结构或微胶囊结构中这样可以防止酶蛋白释放, 但是底物仍能渗人格子内与酶相接触。包埋材料主要有琼脂、琼脂糖、卡拉胶、海藻酸钠、聚丙烯酞胺、纤维素等。因为海藻酸钠具有无毒、安全、价格低廉、材料易得的特点,故本试验采用海藻酸钠作为包埋材料。2.2.1.1 海藻酸钠的浓度的选择分别配制浓度为3%、4%、5%、6%、7%的海藻酸钠溶液,使之在沸水浴中搅拌溶解,加入等体积酶含量为0.45 mg/mL的α-淀粉酶液,搅拌均匀。静置1 h后,滴入至2%的CaCl2溶液中,形成直径为5 mm左右的海藻酸钙凝胶珠,在4℃下静置固化1 h[

  • 了解食品中的乳糖

    乳糖不耐受人群可以选择零乳糖的牛奶、含有乳糖酶的奶粉、酸奶、奶酪等。另外,羊奶的乳糖含量比较低,乳糖不耐受人群也可以尝试。

  • 【求助】我测多酚氧化酶和蔗糖酶遇到了问题

    在做标准曲线的时候,我用不加样品的空白调零后,再测定这个空白,为什么吸光值不是0,而是负数? 还有啊, 多酚氧化酶的测定,需使催化成的没食子素溶于乙醚进行测定,标准溶液也要用乙醚萃取吗?还是直接比色就行, 我两种都有试过,但加了乙醚萃取的测出的值极不相关,不太确定 请教下高手啊-----------

  • 转基因低乳糖奶牛

    如何看待转基因低乳糖奶牛?http://www.foodmate.net/news/guonei/2013/03/227695.html对转基因的安全性近年来一直是讨论的热点问题,如果可以用常规的加工方法(加乳糖酶)生产同样质量的牛奶,还有必要去引进转基因产品吗?希望大家能讨论下。

  • 【求助】森林土壤酶/微生物

    [em63] 求做森林土壤实验的一些资料,目前测了尿酶/过氧化氢酶/蔗糖酶,求其他酶的实验方法,还有微生物的测定方法,有其他的分析指标也可以!非常感谢各位大侠~~ abs823@163.com

  • 长期摄入果糖好吗?

    很多饮品中都在使用果糖,那么果糖到底有危害吗? 果糖是一种单糖,在自然界中主要存在于水果和蜂蜜等食品中,在植物中也有存在,尤以菊科植物为多。在各种天然糖中,果糖的甜度最高,其甜度大约是蔗糖的1.8倍。在蜂蜜中果糖约含49%。在体内,果糖可以转化为葡萄糖或合成糖元,但葡萄糖和糖元不能逆向转化为果糖,机体的果糖主要由肠道的二糖酶将蔗糖分解为葡萄糖和果糖而来。由于果糖可绕过糖酵解中的限速酶,故肝脏中的分解速度快于葡萄糖,且不受胰岛素的影响。正是由于果糖的这些特点,人们往往放松了对果糖的戒备。特别是一些糖尿病患者利用蜂蜜作为甜味剂,认为蜂蜜中的果糖不会造成血糖升高,以此作为养生的佳品。实际上,果糖吃多了危害性更大。在我们的血液中果糖的含量非常少,主要的糖是葡萄糖,我们平时所说的血糖也是指血液中葡萄糖含量。那么我们每天摄入的果糖哪儿去了?当果糖进入体内后,在肠道与肠粘膜上皮细胞载体蛋白结合后,能顺利地被吸收转化,果糖转化的主要场所是肝脏,可分别转化成糖原、葡萄糖和脂肪。所以,血液中果糖的含量不多。从这一点来看,果糖摄入过多后,同样会导致血糖的变化,并不是糖尿病患者安全的甜味剂。果糖不仅可以转化成葡萄糖,还可转化成脂肪,并引起脂肪合成增多。与葡萄糖相比,果糖转化合成脂肪更容易。在人体内有一种物质叫做磷酸果糖激酶,又被称为糖酵解的限制酶,对糖的酵解有调节作用,而果糖则不受磷酸果糖激酶的控制,因而很容易转化为合成脂肪需要的甘油部分。当果糖摄入量少时,果糖能转变为葡萄糖,使肝脏中糖原的储存量增加。但是,当果糖摄入量大时,果糖就成为合成脂肪不受限制的原料。在导致人体肥胖的因素中,可以说果糖的危害性甚至超过了葡萄糖和蔗糖。

  • 【分享】生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用

    【分享】生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用

    生物质谱在糖蛋白结构分析中的应用项目完成人:桑志红 蔡 耘项目完成单位:国家生物医学分析中心 随着人们对糖蛋白参与生命活动机理的日益深入了解,对天然糖蛋白及重组糖蛋白类药物的分析越来越受到重视。重组糖蛋白类药物的质量控制更是直接关系到药物的疗效及至人类的健康。九十年代以来,随着带有反射功能的基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和纳升电喷雾串联质谱(nano-ESI-Q-TOF)等具有软电离方式的现代质谱 技术的发展,质谱以其高灵敏度和强有力的分析混合物的能力,提供了生物大分子的分子量、序列、一级结构信息以及结构转换、修饰等方面的信息,使糖基化分析有了重要的进展。 通常研究糖蛋白的方法是把蛋白链上的寡糖切下来,分别研究蛋白部分和寡糖部分的结构,因此无法研究与两部分共同相关的结构问题,也不能区分不同糖基化位点上切下来的寡糖。自90年代初,国外有人开始用质谱法研究糖蛋白的结构,同时描述了各个位点的不均一性。我们用建立的现代生物质谱技术研究糖蛋白一级结构的方法,将其应用与基因重组糖蛋白的结构分析。为糖蛋白结构分析及基因重组糖蛋白类药物的质量控制提供新的手段。一、 生物质谱研究糖蛋白结构方法的建立实验所用仪器为:1.德国BRUKER 公司的REFLEXIII型基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱仪,N2激光器,波长337nm,线性飞行距离150cm,加速电压2kv。2.英国Micromass 公司Q-TOF型电喷雾串联质谱仪。源温80°C,气体流速40L/h,枪头电压650V,检测频率2.4S,氩气碰撞池压力6*10-5mbar。1. 基质的选择,在MALDI-TOF-MS分析中,基质起着相当重要的作用。不同的基质对不同类的物质响应不同,a-氰基-4-羟基肉桂酸用于测定糖蛋白核糖核酸酶B效果相对较好。2. 糖蛋白分子量的测定,糖蛋白核糖核酸酶B由124个氨基酸组成,在34位Asn处连有一个高甘露糖型N-糖链。由于糖链的微不均一性,与普通蛋白质及核酸不同,其分子离子峰在MALDI-TOF-MS 质谱图上表现为一簇峰,各峰之间约相差一个糖基。正是由于这种微不均一性,使得其分子离子峰变宽,灵敏度降低。糖链分子量越大,峰越宽,灵敏度越低,所以一般只有糖链较短,蛋白的质量不太大的糖蛋白才能测定其平均分子量。用MALDI-TOF可直接测定糖蛋白核糖核酸酶B的平均分子量为 15208.6Da。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103211511_284179_1604317_3.jpg3. 糖含量的测定,采用O聚糖酶及内糖苷键酶F分别作用于核糖核酸酶 B,只有内糖苷键酶F能够是其分子量发生变化,表明核糖核酸酶B分子中不存在O-连接糖链存在着N-连接糖链。内糖苷键酶F切断N-糖链五糖核心最内侧的GlcNAc-GlcNAc糖苷键,得到含一个GlcNAc的肽链,减去GlcNAc,可以计算出准确的肽链分子量T=13695.6,与糖蛋白平均分子量之差为糖链的平均分子量G=1513.4,平均糖含量为:(糖链大小/糖蛋白分子量)×100%=9.95%。4. 糖基化位点的确定,研究糖基化类型及糖基化位点的策略:采用蛋白酶酶解与糖苷内切酶酶解相结合的方法,通过酶切前后含糖肽片的位移,结合网上数据库检索,可以确定糖基化类型和糖基化位点。以不同类型的糖苷内切酶作用于糖蛋白(N-糖苷键酶或O-糖苷键酶),在MALDITOF-MS 上观察其质量的变化,可以直接确定糖蛋白中是否含有响应类型的糖链,这是我们确定糖蛋白中糖苷键类型的基础。我们采用先将核糖核酸酶B还原烷基化,加Glu-C酶切,产物再用内糖苷肩酶F酶切,可观察到含糖肽段出现位移,将核糖核酸酶B的肽质量指纹图进行数据库检索,证实发生位移的肽段中含有N-糖链特异连接位点,由此确定34位Asn为糖基化位点。另外我们采用内糖苷键酶F及肽-N-聚糖酶F两种酶进行差位酶切法对含糖肽段进行验证,两种酶酶切后分子离子峰的差值除以GlcNAc的质量,结果就是N-糖基化位点的个数5. 质谱测定氨基酸序列, 我们对核糖核酸酶B肽质量指纹谱中的含糖肽段进行了串联质谱测定,首先在一级质谱图中选择离子4972.23,在串联质谱的碰撞活化室以氩气与其碰撞产生碎片,从碎片的质荷比推算出此肽片中的一段氨基酸序列,检索结果为核糖核酸酶B,从而判断其理论序列是否一致。6. 糖链结构的研究,凝集素对糖肽的亲和提取,进一步分析糖肽序列及糖链结构的关键是含糖肽段的提取。核糖核酸酶B中糖链为高甘露糖型,我们选用对其有特异性吸附的伴刀豆球蛋白对其进行提取利用这种简捷的亲和质谱的方法,对糖肽段进行了分析。建立了亲和质谱分析糖肽类物质的方法,为今后糖肽序列分析及糖链结构分析奠定了基础。二、基因重组糖蛋白人促红细胞生成素(rhEPO)的结构分析。 利用以上建立的方法,我们对样品重组人促红细胞生成素进行了分析,断定此样品为非完全糖基化,样品中只存在N-连接的糖链,无O-糖链。应用酶切法用肽-N-聚糖酶处理后,得到两个含糖肽段,进行数据库检索,测得38位及83位为N-糖基化位点,与文献报道相符,结果可靠。因此,该项课

  • 中文文献4篇 壳聚糖 降解

    【序号】:1【作者】: 陈江燕邬国铭【题名】:纤维素酶对壳聚糖降解作用的研究【期刊】:广东医学院学报【年、卷、期、起止页码】:2003年02期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2003&filename=GDYY200302005&v=MDk1MDV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNtVmIzQklpblNkN0c0SHRMTXJZOUZZWVI4ZVgxTHU=【序号】:2【作者】: 刘天富戚秋鹏【题名】:不同取代度的羟丙基壳聚糖生物降解性研究【期刊】:中国海洋药物【年、卷、期、起止页码】:2004年01期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2004&filename=HYYW200401008&v=MDg4MTQzbVc3ckxMVFRTZWJHNEh0WE1ybzlGYklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnk=【序号】:3【作者】: 新型【题名】:天津工业生物所壳聚糖酶酶解机制研究取得新进展【期刊】:化工新型材料【年、卷、期、起止页码】:2016年08期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2016&filename=HGXC201608100&v=MTcwNTVGWklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnkzblVMdk5MU3JUYmJHNEg5Zk1wNDU=【序号】:4【作者】: 杨贵杰高星爱【题名】:壳聚糖降解酶及伽马辐射降解壳聚糖的研究概述【期刊】:安徽农学通报【年、卷、期、起止页码】:2014年22期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2015&filename=AHNB201422016&v=MjE4NzRxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNuVzd2T0pDWEZiTEc0SDlYT3JZOUVZb1I4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDM=

  • 【原创大赛】壳聚糖为载体固定猪胰脂肪酶(PPL)的方法研究

    之前,小编采用几丁质作为载体固定化PPL,但是固定化后的PPL没有活性,这次换了一种类似的载体,而这次奇迹粗线了,终于测出了酶活,特此在这里跟大家一起分享。1.实验部分壳聚糖可溶于稀的盐酸,稀的醋酸等,实验选用稀的醋酸来溶解壳聚糖。壳聚糖小球的制备称取不同质量的壳聚糖粉末,加入到一定体积的含1.5%(V/V)醋酸溶液中,在40℃下搅拌2小时,使壳聚糖粉末完全溶解,得到澄清透明的像胶水一样的粘稠液体。配制1mol/L的NaOH溶液,其中含30%的甲醇。待壳聚糖溶液冷却至室温时,用注射器吸取壳聚糖溶液,逐滴加入氢氧化钠-甲醇溶液中,同时轻轻搅拌,使壳聚糖小球析出,形成白色半透明的壳聚糖小球。滴完后,倒掉碱液,将壳聚糖小球用大量纯水冲洗,直至洗液呈中性。再将壳聚糖小球浸泡在纯水中,于冰箱上层保存。壳聚糖小球的活化称取1g壳聚糖小球(湿重),用4ml含不同质量浓度的戊二醛,0.02mol/L的pH=8.0的磷酸钾缓冲溶液,在25℃下,于恒温摇床中以200rpm的转速活化4h。将活化好的壳聚糖小球用大量的纯水进行冲洗,直至没有戊二醛残留。洗好后,将小球浸泡在纯水中,置于冰箱上层保存。PPL的固定化 称取1g活化的壳聚糖小球(湿重)于10ml的烧瓶中,加入2ml通过双水相纯化过的PEG层的PPL,于摇床中4℃,200rpm进行固定化。将PPL固定化一定时间后,取出小球,用适量pH=7.0的0.1mol/L磷酸钠缓冲溶液洗去其表面残留的蛋白质,测试洗液的蛋白含量,以及固定化PPL的酶活。2.结果与讨论2.1 壳聚糖浓度的选择通过大量查阅文献以后,决定用1.5%的醋酸溶解壳聚糖。实验考察了不同壳聚糖浓度,对壳聚糖小球成球的影响,以及制作出的小球经过不同戊二醛浓度活化以后固定PPL的能力。壳聚糖含量NaOH-CH3OH成球情况1.0%1M是1.5%1M是2.0%[font='Ti

  • 中文文献5篇 论文4篇 壳聚糖 降解

    【序号】:1【作者】: 钟建业【题名】:壳聚糖酶法降解研究【期刊】:福建农林大学【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD2009&filename=2009170357.nh&v=MDQ4NjM3RjdLL0h0TEpxSkViUElSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnlya1Y3dlBWMTI=【序号】:2【作者】: 邓倩莹李立华【题名】:溶菌酶、过氧化氢对壳聚糖降解性能的影响【期刊】:化学世界【年、卷、期、起止页码】:2005年06期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2005&filename=HXSS200506006&v=MDcwNTRxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeXJsVXIvTUxUWFlmYkc0SHRUTXFZOUZZb1I4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDM=【序号】:3【作者】: 谌凯【题名】:壳聚糖三维材料的降解及其降解速率的调控【期刊】:浙江大学【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&dbname=CDFD1214&filename=1011239096.nh&v=MDYyOTBSb0Z5cmdWTDNMVkYyNkg3RzdGOUhGcVpFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmU=【序号】:4【作者】: 赵超越【题名】:壳聚糖电化学降解及其动力学研究【期刊】:广西工学院【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD2011&filename=1011285989.nh&v=MTg0MzRFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmVSb0Z5cmhVTHpOVkYyNkg3R3dHOWpFcHA=【序号】:5【作者】: 蔡泉源【题名】:壳聚糖及透明质酸的电化学降解研究【期刊】:南京理工大学【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CDFD&dbname=CDFD1214&filename=1012320974.nh&v=MzA0NDBlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTDJmWmVSb0Z5cmhWcjdCVkYyNkhMQzZIdGpMcTVFYlBJUjg=

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