苄氨基

急！急！急！腺嘌呤及6-卞氨基嘌呤的测试方法

请问刚买不久的氨基柱，在溶剂峰的位置出现负峰，旁边有两个小峰是什么原因？

氨基酸分析，标准品里边的a-Aaa是什么

在做羟脯氨酸检测时，需要用到对二甲氨基苯甲醛这个药品，但是这个药品网查是白色结晶，但我们实际的药品是紫色的结晶，是什么原因导致的变色？现在的紫色结晶是什么？

氨基酸分析，用的是安捷伦的分析包。做的是植物组织中游离氨基酸。具体为：衍生剂OPA，FMOC以及AAA的色谱柱，保护柱。现在出现峰型拖尾分叉等各种问题。论坛里有谁使用过安捷伦的方法的，大家使用的时候怎么维护的呢，一根保护柱大概能做多少样品呢。求大神们支招，感激涕零具体为，色谱柱为AAA的氨基酸分析专用柱，保护柱是配套的一起买的。荧光检测器，流动相A：40mM磷酸二氢钠（色谱级，自配,过0.22滤膜），B为乙腈：甲醇：水=45:45:10(过0.22），流速为2ml/min。现在出现问题，拖尾，峰展宽，峰头变平，峰变胖，分不开等等。太多问题了出现问题的图谱[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/12/202012051701095746_5820_4178238_3.png[/img]

茶叶中游离氨基酸含量占干重2-5%, 由于它与茶叶的滋味, 茶叶的药理作用及营养辅助作用密切相关, 所以在茶叶品质鉴定以及茶树品种特性鉴别中乃是一个重要的理化指标，本文报道了在英国Biochrom 30+型氨基酸分析仪上, 采用4.6*200mm分离柱和标准生理体液分析方法,一次完成茶叶中茶氨酸及其它游离氨基酸的测定。该方法重现性好,分辨率高,取得了令人满意的分析结果。

我们实验室留样的氨基酸突然变黄了老大催我要求我找出原因?我拿那变黄的氨基酸去做菌检没有菌,我又拿那样品以同样的条件放置又没有变.这是4月的事情了,是梅雨季节原因吗?我晕啊请教

水中挥发酚测定中4-[font=宋体]氨基安替吡啉溶液与酚在水溶液中生成的红色染料萃取至三氯甲烷中[/font][font=宋体]，颜色由红变黄。发生什么反应？[/font]

最近看到欧盟非食品快速预警系统有关于纺织品对氨基偶氮苯的召回。据我了解，一些欧洲的买家在RSL中会有一个测试项目叫 Carcinogenic dye 致癌性染料，其中有一项是分散黄23查阅了一些资料，分散黄23中有对氨基偶氮苯的结构单元现在的问题是：1：测试Carcinogenic的标准是DIN 54231，这个标准中没有提到还原裂解的前处理。2：现在普遍采用的测试偶氮染料中的对氨基偶氮苯的测试标准是LFGB B 82.02-9，通过控制还原条件，防止将其进一步还原成苯胺和苯二胺。会不会有这种情况，测试Carcinogenic的时候检出分散黄23，但是82.02-9确没有检出对氨基偶氮苯？欢迎大家讨论。

测定水质中的硫化物，所配的试剂中，有一个是对氨基二甲基苯胺，买的是国外的试剂，用过一段时间后发现里面全都变的如黑沥青似的黏黏的，不知道是保存的哪个环节出了问题？（我们用的是黑色塑料瓶子，拧的很严，通风，干燥．）[em0810]

试剂氨基钠的制备近白色或浅灰色固体。性质与氢氧化钠相似，是一碱性试剂。常用于脱卤化氢制备烯或炔类化合物，也可以用于Claise反应。久贮不当会大大影响活性，特别是氨基钠变成黄色或棕色后，表示已经有氧化物生成，可能发生爆炸。遇到此情况可用苯或甲苯将其覆盖，慢慢加入稀醇予以销毁。因此，氨基钠应该用时制备，不要久贮。在贮存或使用时，应注意防水，因遇水可引起爆炸。 制备方法如下： 取一500mL三口瓶，分别安装搅拌、导气管和带有钠石灰干燥管的冷凝管，导气管上接氢氧化钠干燥塔，再与氨气钢瓶连接。外用干冰和丙酮冷却，通入氨气使其冷却为液体氨，待液体氨达200mL时(大约为瓶的0.5体积，在反应过程中，要经常补加一些液体氨)，取去导气管，瓶口用塞子塞住，并将干冰浴中的干冰换以木屑。加入0.2g硝酸铁。再取10g洁净的金属钠切成小块，在缓慢搅拌下，每次用铁丝刺一小块钠直接加入液体氨中。待钠全部作用，溶液由蓝变灰后，再加入另一小块钠。直到钠全部加完，并完全成氨基钠后(即由蓝溶液变为灰色悬浮物)，反应即告完成。可直接用于下步反应。 如果氨基钠用于其他溶剂中反应，可将溶剂加入液氨中，让氨气挥发，最后在水浴中加热，逐渐除去残留的氨气。 整个制备的实验，应该在通风橱中进行。

今天我们聊一款小众的色谱柱-氨基色谱柱，如果大家在实际使用过程中有遇到，可以参考。在高效液相色谱（HPLC）中，氨基色谱柱（NH2柱）是一种常用于正相和亲水性相互作用液相色谱（HILIC）的色谱柱。它通常用于分离糖类、脂溶性维生素、核苷酸和水溶性维生素等物质。 01.氨基色谱柱的组成 1）色谱柱管：色谱柱管通常是由不锈钢制成管状结构，用于容纳填料。 2）填料：通常由硅胶或聚合物基质组成。在氨基色谱柱中，填料是在硅胶或聚合物基质上键合了氨基（-NH2）官能团的球形颗粒。这些颗粒具有均匀的孔径分布，允许不同大小的分子进入孔隙内部。氨基官能团提供了亲水性相互作用和弱阴离子交换的特性，适合于分离极性化合物。 02.氨基色谱柱的分离机制 1）HILIC模式：在这种模式下，氨基色谱柱用作亲水性相互作用色谱柱，适用于糖类、糖醇等化合物的分析。流动相通常是水和有机溶剂（如乙腈）的混合物，通过调整流动相中水和有机溶剂的比例，可以控制分析物的保留行为。在HILIC模式下，氨基色谱柱的氨基提供了与极性化合物相互作用的位点，通过氢键和偶极-偶极相互作用实现保留 。 2）弱阴离子交换模式：在酸性流动相条件下，填料表面带正电荷，适用于水溶性维生素或核苷酸类的分析。这种模式下，氨基色谱柱的氨基官能团可以作为弱阴离子交换位点，通过离子交换作用保留带负电荷的分析物 。 3）正相模式：氨基色谱柱也可以在正相色谱中使用，分析酸性物质、烃类化合物、维生素A和D等。在正相色谱中，通常使用非极性流动相，氨基柱的氨基官能团可以与分析物形成氢键或其他极性相互作用 。（较少） 03.氨基色谱柱使用的注意事项 1）使用前： a. 检查色谱柱包装和标签：确保色谱柱没有物理损伤，确认色谱柱的规格和填料类型符合实验需求。 b. 阅读说明书：[font=&]仔细阅读色谱柱的使用说明书，了解色谱柱的pH稳定性范围、最大操作压力等参数。 c. 系统冲洗：使用适当的溶剂冲洗色谱系统，确保系统中没有气泡和污染物。 d. 色谱柱平衡：柱子需要用流动相平衡，直到基线稳定。HILIC模式下，通常需要平衡4～5小时。（有些甚至过夜平衡）注：如果上一个试验是无机盐的流动相试验，需要对仪器进行充分的冲洗，怕产生盐析；同理，如果是做了氨基柱的试验换成无机盐试验，也是要充分冲洗。 2）使用中： a. 流动相组成：确保流动相组成适合分析物和色谱柱，严格控制pH值在色谱柱的允许范围内（通常是pH 2-8）。注：如果是是无机盐与有机相的混合流动相，要注意加入的先后顺序，可能会有结晶析出 b. 样品溶解性：样品应在流动相中完全溶解，避免在柱上沉淀。 c. 流速控制：设置合适的流速，以获得最佳分离效果。 d. 样品负载：避免超载，以保持色谱峰形和分辨率。 e. 温度控制：根据需要调整柱温，以优化分离效果。 3）使用后： a. 柱子清洗：分析完成后，使用适当的溶剂冲洗色谱柱，以去除可能的污染物。 注：如果是含有无机盐-有机相的流动相 这个冲洗要先含有较多水的有机相进行冲洗（如95%水-乙腈），除盐→然后再转到高有机相冲洗（如95%乙腈水），除杂→再过渡置换成保存溶液 一般不要使用100%水冲洗色谱柱，氨基会水解。 b. 柱子保存：短期内如果不用，可以用与流动相相同组成的溶剂保存。长期不用，建议用色谱柱出厂时的保存液（如100%异丙醇）保存。 c.记录使用情况：记录色谱柱的使用情况，包括分析的样品、使用条件和色谱柱表现，以便于追踪柱效和寿命。 04.氨基色谱柱使用的局限性 1）pH值限制：氨基色谱柱的氨基官能团对pH值较为敏感，通常推荐的pH值使用范围是2-8。超出这个范围可能会加速氨基官能团的水解，从而缩短色谱柱的使用寿命。 2）溶剂兼容性：在反相条件下使用时，需要注意流动相中水的比例和pH值，因为高比例的水和极端的pH值可能导致官能团水解。 3）样品极性：氨基色谱柱对极性化合物的分离效果较好，但对非极性化合物的分离能力相对较弱。 4）样品负载：样品浓度和负载量不宜过高，以避免超载现象，导致色谱峰形变宽和分辨率下降。 5）温度敏感性：虽然适当的温度升高可以提高某些极性化合物的溶解度和分离效率，但过高的温度可能会加速色谱柱的老化。 6）缓冲盐类：如果流动相中含有缓冲盐，需要特别注意在分析前后使用不含盐的流动相进行适当的过渡，以避免盐类在柱内的析出。 7）保存溶剂：新购买的氨基柱的保存溶剂可能与使用的流动相不互溶（可能出厂保存在正相溶剂中，一般要用异丙醇置换），需要使用适当的溶剂进行过渡。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410081129146844_2050_3203140_3.png!w490x14.jpg 总结一下：氨基色谱柱（NH2柱）在高效液相色谱（HPLC）中的角色有点像个分类专家，它通过分子的极性来区分它们。这种色谱柱是由不锈钢管和特殊填料构成的，填料上的氨基官能团能够与极性分子亲和，帮助我们把不同的分子分开。使用时，得注意几点：首先，pH值要控制在2到8之间，这样氨基官能团才能稳定工作。其次，样品要在流动相中溶解得好，免得在柱子里堵路。流速和温度也要适当调整，以保证分离效果。用完以后，别忘了用合适的溶剂冲洗，短期保存可以用流动相，长期的话最好用出厂时的保存液。氨基色谱柱虽然对极性分子分离有一手，但对非极性分子就不太灵了，而且它的分辨率和灵敏度可能不如其他类型的色谱柱。所以，如果你的样品极性很强，氨基色谱柱是个好选择，但要是分子大小差不多，或者你需要高分辨率和灵敏度，那就可能得考虑其他色谱柱了。总的来说，氨基色谱柱是个实用的工具，特别适合分析那些对环境条件敏感的极性分子。

头孢氨苄胶囊有关物质中a-苯甘氨酸和7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸（7-ADCA）的计算问题：药典要求用外标法以峰面积计算，平均装量与药品规格是否要参与计算？本人认为不需要，原因是规格只是针对头孢氨苄主成分的理论量，而不是a-苯甘氨酸和7-ADCA，不能以标示量的方式计算。但讨论过程中别的同事认为平均装量与药品规格要参与计算，理由是要计算每粒中的量。似乎也有道理。

我在用茚三酮法测定氨基酸时，做标准曲线的时候，要求用100度沸水浴，我用了油浴，但是分析数据发现不成线性，而且吸光度值偏低，后来我又用水浴做了一遍，结果就很好。我在做的时候除了加热方式不一样，其它都相同，为什么油浴和水浴会有区别呢？我搞不明白，请专家指教！

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。 对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一遍，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。 氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。 有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。 我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

用4-氨基安替比林测大气中的酚类化合物，做标线，线性相关系数才1个久，截距是个负数。。做了好几遍了，线性都不好，截距也不接近于零，我是不是哪些地方没有注意呢，做标线的过程中需要注意些什么吗？

首先，我要开门见山的承认，我是某氨基酸分析仪代理公司的员工。此帖若与各位大虾的见解不同，还请指正。对论坛中有关氨基酸分析的帖子粗略浏览了一边，发现两个特点：一是到论坛中来发帖子的主要还是使用HPLC来做氨基酸分析，二是提到的专用氨基酸分析仪似乎只有“日立”。氨基酸分析无疑具有极高的价值（极端一些的说，大部分蛋白分析都是应该被氨基酸分析所取代的），同时也有相当的难度。正因为如此，国内的氨基酸分析发展才表现出一方面发展势头很好，另一方面真正把氨基酸分析工作做好的又不多。较HPLC而言，专用的氨基酸分析仪方法简单、单样成本低、干扰少、稳定性好，尽管仪器本身比HPLC要贵得多，也势必成为今后氨基酸分析的主力。有一篇帖子提到，“日立的氨基酸分析仪是世界上最好的”，真不知他/她是如何得来这个结论。没有调查就没有发言权，没有比较，如何能得出结论？做氨基酸分析的人基本都是知道日立的，因为日立做氨基酸分析仪已有几十年；然而，除了日立，他们还知道哪些氨基酸分析仪厂家呢？诸多原因导致欧美的氨基酸分析仪迟迟未能进入中国市场，而凭借日元贷款项目和援助项目的独有优势，日立在中国用户心目中已经悄然建立起“氨基酸分析仪＝日立”的心里暗示。但日立的氨基酸分析仪真的这么好吗？在北京一家同时拥有四种氨基酸分析仪（现在为3种）的单位，他们对日立L－8800的看法是“一般”，“分离效果和长期稳定性不如××仪器”……我不能说以偏概全，但对比总是难能可贵。我并非要写些东西来宣传我们的产品，因为好的东西总是需要经历一段必不可少的市场认可周期，但对于从事氨基酸分析工作的广大用户，他们需要中国的氨基酸分析仪市场是一个充满竞争的市场，而不是一家独“show”的市场，只有充分的竞争才能为他们带来技术更高、性价比更优的仪器。

氨基酸分析技术的特点与内涵文章来源：国家产品质量安全与法信息中心网 添加时间：2009-7-19 3:13:19 点击：1510摘要：在传统蛋白质分析技术基础上，结合现代分析仪器技术发展优势，针对氨基酸分析技术难点及存在问题，概括比较分析评价当前氨基酸分析技术特点。关键词：蛋白质 氨基酸 分析技术 研究进展1 前言迄今为止，自然界中已发现180多种氨基酸，其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种，称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式，一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中；另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。蛋白质在乳中含量为3.0%~3.5%，是乳的主要成分，对乳品的理化特性和营养价值有重要的影响。由于国标法对蛋白的检测是通过检测样品含氮量而得到的，实际上是将样品消化分解，经蒸馏碱吸收后，测定的挥发性“氨基氮”，因而部分不法商贩用添加外源动植物蛋白粉或脲等含氮化合物（虚“氮”）来增加原料乳的氮含量，钻传统检测方法表征“虚氮”的漏洞，以蒙混过关。这些掺入水解动物蛋白或者含氮化合物的乳粉因其氨基酸的组成不合理，根本不能代表动、植物蛋白，不易消化，所以营养价值低下，导致人体吸收利用率降低，严重地影响到婴幼儿的生长发育和智力水平。因此，对氨基酸分析方法的研究与改进逐渐得到各国家、全社会的高度重视。在一般情况下，质量监督检验单位在市场上抽到产品进行检验所得的数据中，蛋白质含量实际上是用总氮含量表示的，所以在加工企业常规检验时、含氮化合物、水解动物蛋白等杂蛋白是测不出来的，因此需要建立快速分析、测定乳制品中蛋白质、氨基酸的检测方法，保障乳制品的质量与安全。,1958年，Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸，实现了氨基酸分析的自动化。其后，人们不断地发展新的氨基酸分析方法，柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、蛋白质芯片技术等相继应用于氨基酸分析。现已是多种氨基酸分析方法并存、互补。本文就目前应用于氨基酸分析的主要方法作一比较分析。,,2 氨基酸分析技术的光谱分析优势及特点利用光谱探针方法定量分析蛋白质的研究在国际上十分活跃，其中，对有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法和金属离子-有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法的研究倍受重视。 2.1 有机染料结合分光光度技术因为有机染料结合分光光度法测定蛋白质操作简便，比较灵敏，又不需特别的仪器，方法应用比较广泛。现在研究较多的可作为探针的染料分子中，大部分都含有带正电荷的亲水性基团如羟基、磺酸基、酚羟基及不带电荷的疏水性基团，如苯环。这类方法的基础是在溶液pH小于等电点时，蛋白质的肽键亚胺和N端氨基质子化成阳离子，若有阴离子染料存在时，由于电荷作用，蛋白质便与染料结合沉淀或改变结合染料的光吸收特性，借染料颜色的减褪或变化的程度测定蛋白质的含量。已经应用的染料有酸性橙红、考马斯亮蓝G-250、溴甲酚绿、溴甲酚紫、埃铬青R和溴酚蓝。2.2金属离子-有机染料结合分光光度技术近几年发展了利用金属离子和有机染料特别是荧光染料形成配合物体系结合光光度法来测定蛋白质含量。金属离子与含有-OH或C=O的有机染料相遇时，氧原子中的孤对电子可顺利进人杂化轨道，形成稳定的配合体系，在酸性条件下，该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时，互相极化产生静电作用而结合成新的大分子团，改变了原体系的光谱性能，从而能定量测定蛋白质的含量。该方法具有灵敏度高、线性范围广、干扰离子少、操作简单、快速及适用于常规应用等特点。2.3 荧光光度分析技术荧光法是定量测定蛋白质的另一种常用方法通常比分光光度法更灵敏。常用的方法有内源荧光法、荧光探针法、荧光偏振、时间分辨荧光法及激光诱导时间分辨免疫分析法。2.3.1 内源荧光分析技术蛋白质中存在着Tyr、Trp、phe残基，能够吸收270~300 nm的紫外光而发出紫外荧光。当测定体系中加入小分子配体（SM）时，SM与蛋白质发生相互作用，会导致蛋白质荧光的猝灭，利用SM对蛋白质内源荧光的猝灭这一现象可以确定蛋白质与SM的作用类型及其结合部位等。2.3.2 外源荧光分析技术对于蛋白质的研究仅利用其内源荧光是不够的，需要通过外源荧光性质的研究才能获得更多关于蛋白质分子的各种信息，这就使得荧光探针对蛋白质分析有着极其重要的意义，这已成为蛋白质微量检测及溶液的构相分析中不可缺少的手段之一。在外源荧光法中，又可分为有机荧光探针法和稀土荧光探针法。作为一个好的荧光探针应满足以下条件：探针分子与蛋白质分子的某一微区必需有特异性的结合，并且结合比较牢固；探针的荧光必须对环境条件敏感；蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。在满足这些条件的基础上可进行蛋白质的测定和与金属离子结合的计量化学等。与光度法类似，蛋白质在和某些具有荧光特性的染料结合后，能引起荧光强度的变化，并且在一定浓度范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的测定。利用这些化合物在不同蛋白质分子中量子产率、峰位及谱带的变化，就可探测蛋白质分子结合区的极性、疏水性的大小，从而推论构象的稳定情况及变化等。2.3.3 荧光偏振分析技术利用荧光体在转动扩散速度上的差异而导致偏振荧光的差别，建立了荧光偏振测定法。利用荧光偏振还可以研究：酶与荧光底物的结合程度；蛋白质聚合与解离；蛋白质从螺旋到无规卷曲的研究。,3 氨基酸分析技术的色谱分析优势及特点3.1 柱后衍生高效阳离子交换色谱分析技术高效阳离子交换色谱（HPCEC）-柱后茚三酮衍生光度检测分离测定氨基酸是一种经典的氨基酸分析方法。此方法是利用氨基酸在酸性条件下形成阳离子而在阳离子交换柱中分离，分离后的氨基酸用茚三酮衍生、紫外可见光检测器检测。该方法以阳离子交换树脂为固定相、酸性缓冲液流动相，在柱后流出液中加入茚三酮使氨基酸生成具有可见光吸收的衍生物进行检测，具有重现性好、仪器稳定、结果可靠、适合于大量常规样品分析等优点。另外，由于衍生化反应发生在氨基酸与其物质分离之后，因而避免了其他物质的干扰，适合复杂样品中氨基酸的分析。其缺点是仪器复杂、体积大、费用高。此外，由于脯氨酸的测定波长在440nm，而其他氨基酸的测定波长为570nm，因脯氨酸不能和其他氨基酸同时测定。氨基酸分析自动仪就是基于阳离子交换色谱分离、柱后茚三酮衍生光度检测技术设计的。商品化的自动氨基酸分析仪是在20世纪60年代初问世，目前的自动氨基酸分析仪已实现了程控自动化和数据处理电脑化，分析时间已缩短至1 h以内。氨基酸自动分析仪实际上属专门用来分析氨基酸的高效液相色谱仪，其优点是高压、快速、灵敏，试剂和样品用量少、重现性好、分析结果稳定。广泛用于食品、医学、农业以及微生物等领域。3.2 柱前衍生反相高效液相色谱分析技术近20年来，柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分析氨基酸得到了迅速发展，逐渐取代柱后衍生高效阳离子交换色谱（HPCEC）在许多领域中的应用。RP-HPLC分析方法更加快速灵敏。与专业氨基酸分析的自动分析仪不同，HPLC仪适用性更广、更灵活。RP-HPLC要求将氨基酸在柱前转化为适于反相色谱分离并能被灵敏检测的衍生物，柱前衍生的关键在于衍生试剂的选择。选择衍生试剂的标准是能与各氨基酸定量反应，每种氨基酸只生成一种化合物且产物有一定的稳定性，不产生或易于排除干扰物，操作简单，色谱分离分辨率高、检测灵敏度高，分析时间短，便于实现自动化和使产物能在不同型号的高效液相色谱仪上测定。目前比较常用的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛（OPA）、异硫氰酸苯酯（PITC）、氯甲酸芴甲酯（FMOC-Cl）及丹酰氯（Dansyl-Cl）。衍生后的氨基酸一般键合在C18柱上，利用液液分配原理进行分离。流动相多以乙酸盐或磷酸盐缓冲液为主，以乙腈、甲醇或四氢氟喃为调节剂。由于氨基酸衍生物仍保留着两性化合物的特点，除改变调节剂之外，还可通过调节缓冲液pH值、离子强度、柱温等使之达到理想的分离。当然，不同衍生物所选用的柱型、流动相以及氨基酸的洗脱时间和顺序不尽相同。柱前衍生反相高效液相色谱法可用于分析蛋白质水解液、生理体液和食品等样品中的氨基酸。当与质谱技术结合时，采用电离喷雾质谱（ESI-MS）或电离喷雾串联质谱（ESI-MS/MS）联用技术方式，借助计算机的联机检索，可以实现高通量筛选和鉴定蛋白质混合体系。目前，，蛋白质组研究的高效液相色谱-质谱联用的方式有一维色谱-质谱联用技术、多维色谱-质谱联用技术以及亲和色谱-质谱联用技术等。一维色谱-质谱技术仅能分析一些不太复杂的蛋白质体系，而对复杂的多肽混合物常不能满足分离的要求。多维色谱分离的方法在某种程度上满足了对复杂蛋白质混合分离鉴定的要求。,,,3.3 两种氨基酸直接分析技术大多数氨基酸不具备生色团，因此无法利用分光光度法直接检测，故需采用化学衍生技术，使之生成可在紫外或可见光区有吸收的化合物，或者采用荧光法检测。但对于分析工作者来讲，尤其是在新化合物研制的过程中，面对多种未知的降解物，如采

最近看了一些文献，发现做氨基酸的方法非常多，这里罗列几种，不知道各位主要用哪种？由于大多数的氨基酸在紫外区没有吸收或只有微弱的吸收，为提高检测灵敏度和分离度，需要对氨基酸进行衍生化，这样才能被紫外或荧光检测器所检测。另外氨基酸极性非常大，无法用反相分析，通过衍生化也可以变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离。1、 HPLC 柱前衍生柱前衍生：邻苯二甲醛(OPA)衍生一级氨基酸、9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)衍生二级氨基酸色谱柱：AAA专用柱检测器：DAD（338nm OPA-氨基酸；262nm FMOC-氨基酸）2、 HPLC柱前衍生柱前衍生：异硫氰酸苯酯（PITC）色谱柱：AAA专用柱检测器：UV 254nm3、 HPLC柱前衍生柱前衍生：2,4-二硝基氟苯(DNFB）色谱柱：AAA专用柱检测器：UV 360nm4、 HPLC柱前衍生柱前衍生： 6氨基喹啉基N羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC）色谱柱：反相柱（C18）检测器：UV 248 nm5、 HPLC 柱后衍生柱后衍生：邻苯二甲醛(OPA) 色谱柱：AAA专用柱检测器：荧光或紫外6、 离子色谱法：HPAEC-IPAD（高效阴离子交换分离-积分脉冲安培检测）7、氨基酸分析仪

最近我们在滴定对氨基苯酚时问到了个头疼的问题，根据国标称取试样约0.25-0.30g（精确至0.0001g），置于250mL烧杯中，加入150mL水、10mL盐酸、10ml溴化钾，使样品完全溶解。冷却至10℃～15℃，然后将滴定管尖端插入溶液中，在不断搅拌下，用亚硝酸钠标准滴定溶液进行滴定，滴定近终点时把滴定管尖端提离液面，继续滴定直至使淀粉-碘化钾试纸呈现微蓝色润圈，并保持3min不变即为终点，在相同条件下做空白试验。在我滴第一滴时，整个溶液就显蓝色，严重时显蓝紫色。再滴定时蓝色会逐渐消失. 我刚开始以为是碘离子和淀粉。我重新称取样品溶解，直接加入碘溶液，溶液不变蓝，证明样品里没有淀粉，如果样品里没有淀粉，就证明变蓝的不是碘离子。所以我想请教大家什么物质在酸性条件下，与亚硝酸钠溶液发生反应会变蓝色，继续滴定蓝色会消失？

请问各路大神，我做挥发酚按照《503-2009》 的方法提纯颜色发橙色有浑浊的4-氨基安替比林溶液，提纯后清澈了，可是颜色还是黄色，不能达到淡黄色，空白值都在0.103~0.13X左右这是怎么回事，还有，必须空白要用 无酚水 吗？直接用超纯水会导致空白变高吗？蒸馏后的空白会比不蒸馏的空白数值高，这种情况对吗？请各路大神帮我提出一些可行的解决方案吧！谢谢了！毕竟每次萃取法只有一次比色机会啊！

大家好： 我测定饮用水中的挥发酚时，用的是4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法。我们实验室买的4-氨基安替吡啉是科密欧产的，第一次做标曲的时候，标准曲线线性比较好，可是空白管的吸光度值为0.351，空白值偏高。用三氯甲烷将4-氨基安替吡啉溶液萃取3遍后，溶液几乎无色，空白管的吸光度值为0.036。可问题是虽然空白管的吸光度值降低，也导致标准管重低浓中都不显色，标准曲线不成线性。反复做标准曲线几次，均出现相同情况。问：1，这样是不是说明实验室的4-氨基安替吡啉试剂已经完全变质，不能再继续使用？ 2，想问下大家有做这个试验的，哪个厂家的4-氨基安替吡啉试剂比较好一些，显色效果比较好，另外应该怎么保存才能不变质？

如题：对氨基苯磺酰胺与对氨基苯磺酸在亚硝酸盐的测定中有区别吗？为什么水中亚硝酸盐的测定GB/T5750。5-2006中用到的是对氨基苯磺酰胺；而食品GB/T5009.34-2008中用到的却要求是对氨基苯磺酸.我们检测水的时候也是用对氨基苯磺酸,你们说对检测结果会有影响吗

请教氨基态氮与氨基酸是同一种物质吗？

2-氨基-4-氨基苯甲醚和2-硝基-4-氨基苯甲醚,这2个东西,我用非极性柱,换了几种不同型号的柱子,用甲醇,乙腈,四氢呋喃不同溶剂做流动相都分不开,我记得在氨基上可以上个什么保护基团,好像是十六烷基磺酸钠什么的,具体怎么搞忘了,请哪位高人指教...

常用的氨基保护基1 叔丁氧羰基(tert-butoxycarbonyl) 缩写t-Boc 在以下条件稳定：H2/Pd或碱 除去条件： HBr+CH3COOH或CF3COOH2 苄氧羰基(carbobenzoxy) 缩写CBz 在以下条件稳定：CF3COOH或碱除去条件：HBr+CH3COOH或H2/Pd3 2-联苯基-2-丙氧羰基(2-biphenyl-2-propoxycarbonyl) 缩写BPoc 在以下条件稳定：碱除去条件：CF3COOH或HCOOH，CF3COOH或HBr4 邻苯二甲酰亚胺基(phthaloyl)在以下条件稳定：Na-NH3,H2/Ph,HCl或HBr+CH3COOH除去条件：NH2NH2-H2O5 对甲苯磺酰基(p-toluenesulfonyl) 缩写Tosyl 在以下条件稳定：HBr+CH3COOH或碱除去条件：Na-NH36 三苯甲基(triphenylmethyl) 缩写Trityl在以下条件稳定：碱除去条件：H2/Pd或CF3COOH（80%）7 甲酰基(formyl)在以下条件稳定：H2/Pd或Na-NH3除去条件：NH2NH2+醇+碱8 三氟乙酰基(trifluoroacetyl)在以下条件稳定：除去条件：温和碱性条件

测定亚氨基二乙腈中氨基乙腈，用什么色谱柱？DB-1可以吗？亚氨基二乙腈中氨基乙腈是一种重要的精细化工中间体，主要用于合成除草剂草甘膦。

怎么分离亚氨基二乙酸和氨基三乙酸，样品中氨基三乙酸含量少