柯桠素

牙膏壳用金属的好还是用塑料的好？

各位大虾 请问高良姜素、槲皮素、芦丁、杨梅酮、莰菲醇、芹菜素、松属素、柯因等标样 怎样保存呀 谢了！[em61]

牙釉质绝大部分由磷酸钙类物质组成，此外还含有其他多种微量元素，这些其他元素会与磷酸钙中钙、磷或者羟基发生置换，或者吸附于磷灰石晶体表面，从而影响釉质磷灰石的物理化学特性。这里的研究对象为23名5～12周岁的无龋儿童，其中男10名，女13名。收集了他们因乳牙滞留而拔除的乳前牙和乳磨牙23颗，其中乳前牙13颗，乳磨牙10颗，各标本牙冠完整，无裂纹、龋坏、白斑及釉质发育不全。标本均用0.9%氯化钠溶液洗干净，去除附着的软组织、色素、菌斑，然后置于0.9%氯化钠溶液中，再加入1%麝香草酚，置于4℃环境下保存。将乳牙标本沿牙体长轴方向PEB2086HV1.1以唇舌方向对半切后用环氧树脂包埋，然后经过粗磨、细磨、抛光，再用无水乙醇冲洗干燥后超声清洗。在超声清洗后干净的样本上喷镀一层厚度约为20nm的碳膜，用电子探针的能谱仪进行无标样定量分析，分析条件为：加速电压15kV;吸收电流3×10-8A;束斑直径50ym。检测时，以乳牙唇、舌侧釉质表面冠根向中点为观察起始点，沿着与釉质表面垂直的方向向内每隔50t/m测定一个点，直至釉质表面下200)u,m处。应用SPSS统计学软件，采用配对￡检验和方差分析。采用电子探针测定的男、女釉质9种化学元素的含量。由表中可知，男、女间9种主要元素含量的差异无统计学意义（P值均大于o．05）。乳前牙与乳磨牙间釉质化学元素含量的比较。由表中可知，乳前牙与乳磨牙间7种化学元素含量的差异均无统计学意义（P值均大于0.05）。以上结果表明，虽然存在性别和牙萌出时间的不同，但乳牙的主要化学成分基本相同。乳牙釉质表面下各深度间釉质化学元素含量的比较。由表中可知，乳牙釉质的钙、磷含量随深度的增加逐渐降低，表面100Um下，钙、磷元素的含量显著下降（P值均小于0.01）。镁在釉质中的分布也均表现为由表及里逐渐减少。钠、硫、硅、铝等元素在釉质各深度间的分布较为均匀，其含量的差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。牙釉质钙、磷成分在表层100)um以下含量明显降低，这一方面说明乳牙表层釉质反应较为活跃，不断进行脱矿与再矿化反应；另一方面也说明乳牙表层釉质可能受到口腔唾液环境的影响，矿化程度增加。在机体内，镁是多种酶的激活剂，是物质合成和代谢所必须的物质。本研究显示：(1)乳前牙与乳磨牙釉质的镁含量虽有不同，但差异无统计学意义（P值大于0.05）。(2)乳牙釉质镁含量随表面下深度增加呈减少的趋势，表层镁含量显著高于釉质内部(P值均小于0.01)，而其下各层镁含量的差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。这可能是由于乳牙釉质表层本身化学性质较恒牙活跃，易发生化学元素的互相置换。(3)从龋病易感性的角度来看，乳牙釉质表层镁含量较高也说明乳牙釉质更易受到龋蚀破坏。原文来自http://www.mpbocaitong.com/

关于35家餐饮服务单位经营的食品中检出罂粟壳成分的通告（2016年第10号） 2016年01月20日近期，国家食品药品监督管理总局在组织开展打击食品违法添加执法行动中，发现35家餐饮服务单位经营的食品中含有罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因等罂粟壳成分，存在涉嫌违法添加行为。现将调查处置情况通告如下：一、移送公安机关并已提起公诉的5家，分别为：安徽省宿州市周黑鸭宿蒙路口店、宿州市埇桥区慧鹏周黑鸭经营店；广东省惠州市惠阳区老铁烤鱼；重庆市合川区小沔镇有名面馆、合川区小沔镇天下第一粉。二、移送公安机关立案侦查的共20家，分别为：辽宁省锦州市凌河区蒋家牛肉板面馆；上海市金山区加鑫饭店、金山区友芹食品店、金山区张堰镇泰山村董吉凯大排档、闵行区圣贤饭店、金山区古莲路南京汤包馆老鸭粉丝汤；江苏省无锡市南长区宜线宏小吃店、仪征市新城镇业仓熟食店；浙江省杭州市西湖区长桥农贸市场北门小唐卤味城；湖南省娄底市新化县孟公山里娃粉面馆、株洲市攸县吉兴餐馆；重庆市巫山县霸王鱼鸡餐馆、巫山县蒋记油爆虾餐馆、江北区文老六火锅、北部新区姚家火锅、北部新区渝香堂火锅馆、荣昌区昌元街道大龙老火锅店；四川省巴中市南江县南江镇聪颖家常菜餐馆、宜宾市屏山县牛馆家食府、眉山市仁寿县文宫镇金氏酸萝卜鱼火锅店。三、食品药品监管部门正在立案调查的10家，分别为：北京市房山区良乡滇南福喜小吃店、西城区谢世荣炸鸡店、北京胡大餐饮有限公司、北京珍宝餐饮管理有限公司、东城区宝和居饭馆；上海市嘉定区安亭镇原烧鸡公火锅店；浙江省温州市瓯海区梧田成全小吃店；山东省潍坊市临朐县忆家心火锅；湖南省娄底市娄星区洋溪粉面馆、娄底市娄星区李忠民清汤羊肉粉店。四、在食品中添加罂粟壳或罂粟粉，违反食品安全法第三十四条第一项关于“禁止生产经营用非食品原料生产的食品或者添加食品添加剂以外的化学物质和其他可能危害人体健康物质的食品”的规定，按照《最高人民法院、最高人民检察院关于办理危害食品安全刑事案件适用法律若干问题的解释》（法释〔2013〕12号），涉嫌构成生产、销售有毒、有害食品罪。上述餐饮服务单位中，已有25家被移送公安机关进行刑事犯罪侦查。五、各有关地区食品药品监管部门要继续深入开展调查取证，尽快查清违法事实，对存在违法添加行为的，依法严惩，情节严重的，吊销许可证；涉嫌犯罪的，一律移送公安机关。同时，要与公安机关密切配合，深挖违法添加物质来源，依法严惩各环节违法犯罪分子。案件查处情况于2016年2月19日前上报国家食品药品监督管理总局。六、餐饮服务单位在日常经营活动中，要严格落实原料采购进货查验、索证索票等食品安全制度，确保所购食品原料安全可靠。食品药品监管部门要加强对火锅店、麻辣烫、炸鸡店、拉面馆等餐饮服务单位监督检查，发现违法添加罂粟壳、罂粟粉等非食用物质行为的，依法严厉查处。七、国家食品药品监督管理总局提醒广大消费者，发现餐饮服务单位涉嫌在食品中添加罂粟壳、罂粟粉等非食品原料的，可向当地食品药品监管部门或12331热线投诉举报。特此通告。附件：1.移送公安机关并已提起公诉的餐饮服务单位名单2.移送公安机关立案侦查的餐饮服务单位名单3.食品药品监管部门立案调查的餐饮服务单位名单食品药品监管总局

[color=#333333]大豆中基本不含维生素C，而每100克豆芽中含9~21毫克。大豆发芽后，部分蛋白质会分解为多种人体必需的氨基酸，更有利于吸收，并且其中的一些抗营养因子也有所分解，吃后不易引起胀气。炒豆芽时加点醋有助保护维生素C。[/color]

想请教一下各位大神，可吸附有机卤素用对氯苯酚做质控，大家有什么推荐的厂家牌子么？质控一直都做不准，吸附燃烧后都达不到标准说的0.5mg/l，加标也不合格，怎么处理的呀大家，谢谢各位！！！

有做“检科院ACAS-PT231(2016)奶粉中黄曲霉毒素B1测定”的老师吗？请交流一下呀！

请问各位：大家做水质 可吸附卤素所用的管式炉都是什么牌子的呀？现在打算做这个项目，管式炉不知道买哪家的，有没有现在有的还不错的推荐，谢谢

关于色谱系统的反压什么是反压(Back Pressure)？流动相流经管路及色谱柱时会有阻力,即，所谓的反压, 又称，系统压力Waters习惯用的压力单位是Psi(磅/平方英吋)其它单位有：Bar，Mpa（1Bar=0.1Mpa=14.5Psi）影响色谱系统反压的因素：流动相的粘度是产生反压的主要原因,粘度越大,反压越高；流速对反压的影响是线性关系,流速越大,反压越高；温度对反压的影响是反比关系,温度升高,反压降低；反压与色谱柱长度成正比；反压与填料颗粒度的平方成反比；3.5μm填料比5μm填料反压高；反压与管路直径的四次方成反比(1/D4)；反压与管路的长度成正比；HPLC系统压力问题分析（1）问题:系统压力高可能的原因:温度太低流速太高流动相粘度大管路堵塞仪器或色谱柱堵塞压力传感器问题HPLC系统压力问题分析（2）问题:压力低或没有压力可能原因:温度太高;流速太低泵关闭或保险丝断了泵未输送流动相系统内有渗漏处所用溶剂不正确自动进样器在Purge时卡住HPLC系统压力问题分析（3）问题:压力不稳可能原因:压力传感器问题；泵排气不充分；泵失效；流动相未正确脱气；所用溶剂不混溶或易挥发；

21日，国家食品药品监督管理总局发出通告，称在近日组织的打击食品违法添加执法行动中，发现全国35家餐饮服务单位经营的食品中含有罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因等罂粟壳成分，存在涉嫌违法添加行为。大家工作中是否也从事这些违法添加物质的检测呢？依照的是哪个标准？检测中又有怎样的难点呢？欢迎来分享！一、移送公安机关并已提起公诉的5家，分别为：移送公安机关并已提起公诉的餐饮服务单位名单序号产品名称餐饮服务单位名称餐饮服务单位地址检出添加物质1鸭头、鸭脖周黑鸭宿蒙路口店安徽省宿州市埇桥区宿蒙路口苏果超市门东旁罂粟碱、吗啡、那可丁2鸭腿、鸭锁骨宿州市埇桥区慧鹏周黑鸭经营店安徽省宿州市埇桥区大泽路北头吗啡3草果粉香料广东省惠州市惠阳区老铁烤鱼广东省惠州市惠阳区淡水白云坑市场信诺百货一楼罂粟碱、吗啡汤底罂粟碱4肥肠臊子重庆市合川区小沔镇有名面馆重庆市合川区小沔镇行政街45号罂粟碱、吗啡、那可丁5香料重庆市合川区小沔镇天下第一粉重庆市合川区小沔镇行政街46号罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因　二、移送公安机关立案侦查的共20家，分别为：移送公安机关立案侦查的餐饮服务单位名单序号食品名称餐饮服务单位名称餐饮服务单位地址检出违法添加成分1牛肉汤锦州市凌河区蒋家牛肉板面馆辽宁省锦州市凌河区重庆路四段5-67号罂粟碱2火锅底料金山区加鑫饭店上海市金山区石化街道柳城路86号罂粟碱、吗啡、那可丁3龙虾调料（自制）金山区友芹食品店上海市金山区金山卫镇板桥西路1388号好又多超市东1-2门面吗啡4孜然粉（2015年配制）金山区张堰镇泰山村董吉凯大排档上海市金山区张堰镇泰山村4118号罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁孜然粉（2014年配制）上海市金山区张堰镇泰山村4118号吗啡、可待因5复合调料闵行区圣贤饭店上海市闵行区龙柏街道航东路288弄1号罂粟碱6自制面卤金山区古莲路南京汤包馆老鸭粉丝汤上海市宝山区古莲路328号市场内60B （经营场所）罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁自制面卤上海市宝山区盛桥镇盛桥四村33号101室 （居住场所）罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁7米线专用调料无锡市南长区宜线宏小吃店江苏省无锡市南禅寺商城115-24罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因8老鹅卤汁仪征市新城镇业仓熟食店江苏省仪征市新城镇新农东街1号吗啡9卤味汤底杭州市西湖区长桥农贸市场北门小唐卤味城浙江省杭州市长桥农贸市场北门小唐卤味城罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁10自制香料粉娄底市新化县孟公山里娃粉面馆湖南省娄底市新化县孟公镇老屋村罂粟碱、那可丁、蒂巴因11桂子粉株洲市攸县吉兴餐馆湖南省株洲市攸县坤龙国际酒店隔壁吉兴大排档罂粟碱、那可丁12火锅底料巫山县霸王鱼鸡餐馆重庆市巫山县高唐街道中心市场9号罂粟碱13火锅底料巫山县蒋记油爆虾餐馆重庆市巫山县高唐街道宁江路549号-550号罂粟碱14火锅底料江北区文老六火锅重庆市江北区三钢二路29.31.33号附4层2号那可丁15火锅底料北部新区姚家火锅重庆市北部新区东湖南路313号罂粟碱火锅汤料（红汤）那可丁16火锅底料北部新区渝香堂火锅馆重庆市北部新区汽博中心叠彩城金渝大道88号罂粟碱、那可丁17火锅底料荣昌区昌元街道大龙老火锅店重庆市荣昌区昌元街道后西二街53-55号罂粟碱18鑫润大壳香粉巴中市南江县南江镇聪颖家常菜餐馆四川省巴中市南江县南磷路电力公司对面罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因19自制翘脚牛肉底粉宜宾市屏山县牛馆家食府四川省宜宾市屏山县屏山镇君山大道路西段257号罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因20火锅底料眉山市仁寿县文宫镇金氏酸萝卜鱼火锅店四川省眉山市仁寿县文宫镇成仁大道罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因　三、食品药品监管部门正在立案调查的10家，分别为：食品药品监管部门立案调查的餐饮服务单位名单序号产品名称餐饮服务单位名称餐饮服务单位地址检出添加物质1老汤北京市房山区良乡滇南福喜小吃店北京市房山区拱辰街道政通路西里小区2号楼102底商罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因2腌制料、腌制生鸡、炸鸡用油、炸鸡北京西城区谢世荣炸鸡店北京市西城区西便门东里12号楼下一层南侧罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因3烤鱼粉北京胡大餐饮有限公司北京市东城区东内大街233号罂粟碱、那可丁4香料粉北京珍宝餐饮管理有限公司北京市东城区东直门内大街288号35号房-1罂粟碱、那可丁5牛蛙料北京市东城区宝和居饭馆北京市东城区东内

测定玩具中的可迁移元素。如果样品测定值，比空白还要低这个合理吗？出现负值是什么原因呀。下边是我做的样品的结果[img=,690,1226]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/04/202204161457384416_7563_5556702_3.png[/img]

名称：罂粟壳类别：收涩药拼音：YING SU QIAO拉丁：Pericarpium Papaveris别名：御米壳、栗壳、烟斗斗、鸦片烟果果药用部位：成熟蒴果的外壳药材性状：本品呈椭圆形或瓶状卵形，多已破碎成片状，直径1.5～5cm，长3～7cm。外表面黄白色、浅棕色至淡紫色，平滑，略有光泽，有纵向或横向的割痕。顶端有6～14条放射状排列呈圆盘状的残留柱头；基部有短柄。体轻，质脆。内表面淡黄色，微有光泽,有纵向排列的假隔膜，棕黄色，上面密布略突起的棕褐色小点。气微清香，味微苦。栽培要点：产地：我国各地均产采收加工：秋季将已割取浆汁后的成熟果实摘下。破开，除去种子及枝梗，干燥。地道沿革：性味归经：平；酸、涩；归肺、大肠、肾经；毒功能主治：敛肺、涩肠、止痛。用于久咳、久泻，脱肛，脘腹疼痛。用法用量：内服：煎汤，3～10g；或入丸、散。禁忌：咳嗽、泻痢初起，或久痢积滞未消者慎服。本品易成瘾，不宜常服；儿童禁用。

我们采用了直接切成小颗粒，然后用乙醇溶液溶解，再萃取。可是没有出峰。所以我希望大家能告诉我怎么提取，以及胡萝卜的用量应该是多少呀（维生素A 是很微量的成分）？

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昆虫病原细菌广泛存在自然界，在不同的环境条件下，对昆虫数量的调节起着重要的作用。其中特别是某些芽孢杆菌已发展成为微生物杀虫剂，具有控制农林害虫的巨大潜力，是一种很有发展前途的防治害虫的新途径，在综合防治中越来越引起人们的重视。 自从19世纪末期开始研究家蚕、蜜蜂细菌病害的近一百年间，发现并被描述的昆虫病原细菌约有90多个种和亚种，它们大多属于真细菌纲（Eubacteria）的芽孢杆菌科（Bacilliacene）、假单孢菌科（Pseudomonadacea）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）。从防治害虫的角度来说，在这三科中以芽孢杆菌科最为重要。此科包括有两个属：芽孢杆菌属（Bacillus）和芽孢梭菌属（Clostridium）。在芽孢杆菌属中的乳状病芽孢杆菌（Bac.popillia）、缓死芽孢杆菌（Bac.lentimorbus）、苏云金芽孢杆菌（Bac.thuringiensis）的某些亚种以及球形芽孢杆菌（Bac.spuericus）,目前在国内外均已发展成为防治农林害虫及卫生害虫的微生物杀虫剂。而且，迄今为止，昆虫病原细菌的主要研究力量也仍然集中在这些细菌上。 但是在这些众多的病原细菌中，真正能够开发成为一种具有实际应用价值杀虫剂的却并不多，目前应用最广泛的主要是形成芽孢的病原细菌。如乳状病芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64035]苏云金芽孢杆菌[/url]

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[color=blue][center][b]我很俗，因为你太雅 文/闻禾Saturday, December 17, 2005[/b][/center] 昨天下班后和阳光聊了一会儿天，因为阳光急着回家给老婆做饭，所以聊天时间不长，聊资不丰富，但聊点也不少，诸如贫富、比色、赛光芒等有差距的事项均受到了一定的冲击，也可以叫做污蔑或者埋汰。肆无忌惮，信口开河，侃侃随便，没有谁来威吓：谁让你们在此胡说八道！网聊，就是好，不怕说错话，说错话了也不怕。 点击聊点，可以看到其中有个关于“雅俗”的话题。还是因为阳光急着要回家给老婆做饭，回家晚了怕老婆施刑头顶清水、膝跪擀面杖之家法，当然我也不可能没有恻隐之心。大家心里也都清楚，别看阳光一出家门，就神采飞扬地撒欢，一泻万里亿里地呼啸，可回到家里，阳光的雄威可就彻底被屏蔽吸附了，熊熊光芒立刻收藏，无边能量胸中埋葬。鉴于以上因素，相关“俗雅”的问题，同样也没能纵深展开深入聊开去。 也许应了那句开弓没有回头箭的话，也许是因为我感知系统滞后严重，今天早晨跑来跑去的思维神经突然又和该话题发生了碰撞，纠缠一起，绕来绕去绕做一团，想起昨天我对阳光坦荡我的俗不可耐，承认我被丢弃在俗不见底的深渊，天天在俗的环境里浸润、吸收、溶胀、溶解、扩散，直至俗成一体；承认在我纯俗的心灵村庄里，演绎庸俗人生的俗事俗物俗情俗景，播撒俗的良种，丰收俗的后裔……。可是我到底有多俗？俗可不可以被量化？有没有一个程度？就这样几个有关俗的问题，紧紧掐住了我的思维神经，问题不睬神经窒息前的求救，卡掐的力量在逐渐加码…… 那么我到底有多俗呢？有没有什么标准？尺度？或者判据？我的眼界不够宽阔，在我的经历中，俗只是个相对的概念。俗既然是相对的，就一定要翻出俗的另一面，雅了—— 当然，我不可能自我标榜自己庸俗，谁都喜欢在别人的眼瞳里自己的形象是高雅的，至少应该是雅的，只要懂得雅、俗待遇的人，无论自己真雅与否，都希望自己站在雅的行列里。而我为了追求一种实事求是，而且自己最清楚藏在自己内心深处的各种俗欲，所以我知道我雅不了，但是我也有一定的尊严，虽然我的尊严是被庸俗化了的，完全可能无人顾及我有没有尊严，也许人们认为我这样的人不该有尊严，但在我心灵的一个小小小角落里，尊严始终影影绰绰，若隐若现。可怜我总在俗物缠绕的生存空间里吸俗，尊严的所剩无几也可以理解，但总比荡然无存不同吧。 论道我的庸俗，突然一个高贵雅致的偶像鱼贯而现，她是我此生认为最“白莲”、最“荷花”、最“藕”的女孩，在与她长多而深入交谈的铺垫烘托下，她那款款盈盈的话语，已经把她镶成珍珠，缀在我心头最珍贵的地方，那时候我几乎将她供奉在“出淤泥而不染”的牌位上顶礼摩拜，一叩三首。在我的心里，将她定格于被锈蚀而千疮百孔的我的世界里唯一幸存的、完美无瑕的人间碧玉，很多年来，我都为她的言行深深感动、默默佩服，自惭形秽。无论何时，不管何地，我都对她“一往情深”，在和我们共同认识的人聊谈时，只要涉及到她，我所有的语言和我所有的心情都会把我的“大拇哥”托起来，传出去。虽然关于她的另一面的故事，也经常从不同的渠道吹到耳际，但我确信我的“眼见为实”，拒绝接受一切丑化她形象的任何“谣传”或只言半语，就这样我将至纯至美强加到她的身上。我宁愿她一直这样至纯至美，我宁愿一直保存这种带着浓厚感情色彩的近乎人对神、钝对智一样的却完完全全是俗对雅的崇拜，我宁愿我们之间没有比较紧密的工作关系，如果高雅只不过是一种假象，那么我宁愿将这种假象永存。我愿意在我认识或意识的天地里，有一块儿被束之高阁的地方，将我自己不曾拥有的、但却渴望拥有的东西，我的敬慕与崇拜存放……可是我还是醒了，虽然我好想沉醉其中，特别想永葆醉态。经历了对雅的顶级认识，才逐渐认识到世界上根本就没有绝对的东西，就像化学反应，永远没有完全进行到底的那一刻，雅、俗之间同样存在着某种平衡，如不互相转化，则就是表现形式各异而已。或许雅的外衣，俗的躯体；雅的表现，俗的实质；雅的语言，俗的行为……，或许正好相反。世界本身就是个雅俗共混的庞杂体系，分类不过是一种极限体现，也就是说在什么趋近于什么的时候的某种状态或者结果。混沌世界已成过去，雅和俗在不同阶层的眼睛里也就有了个性的、或者相似的条款、构架。人不可能纯雅，也不可能完俗，人是个平衡体系，雅和俗与骨肉血水一样共存，当然对不同的人而言，分配系数是不一样的。回头再望，我已是俗至深处不识俗，柴米油盐酱茶醋。只因人俗，才有今天这篇论俗的文字。 [/color]

谁有上海食品药品检验所自建的罂粟壳的检验方法呀？有的话请传我一份，谢谢了！！！邮箱yinhua970@163.com

液氩的压力对哪些元素的强度影响较大？？？

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[align=center][size=20px]食品添加剂 甲壳素[/size][/align][align=center]林夷畅[/align]1 概述甲壳素又称几丁质、甲壳质或壳多糖，英文名是chitin。甲壳素在1811年被Braconnot首次从蘑菇中分离出来。1.%2 结构甲壳素是以(β1→4)糖苷键连接的由N-乙酰-D-葡萄糖胺残基组成的匀质多糖，是一种天然生物高分子。分子式为(C[font='等线'][size=13px]8[/size][/font]H[font='等线'][size=13px]13[/size][/font]NO[font='等线'][size=13px]5[/size][/font])[font='等线'][size=13px]n[/size][/font]，其中n是聚合度，范围是1000~3000。2.%2 相关化合物甲壳素的结构与纤维素非常相似，它们仅有的差异是在C-2位用乙酰氨基替换羟基。几丁质形成类似于纤维素的长纤维。纤维素和甲壳素的功能也非常相似，在生物体中都是主要起结构支持作用，但纤维素存在于植物中，甲壳素主要存在于节肢动物和菌类中。甲壳素和纤维素一样不能被脊椎动物所降解。纤维素是自然界中最丰富的糖类，甲壳素是仅次于纤维素的第二丰富的多糖类。壳聚糖（chitosan），又称脱乙酰甲壳素、可溶性甲壳素，是甲壳素的脱乙酰化产物。由于现存的技术尚不能将甲壳素完全脱去乙酰基变成100%的壳聚糖，也很难将两者完全分离开，故现有壳聚糖商品通常是甲壳素与壳聚糖的混合物，但要求壳聚糖含量在60%以上，作为功能性食品基料的壳聚糖要求壳聚糖含量在85%以上。甲壳素衍生物是甲壳素或壳聚糖经化学修饰而获得的产品。甲壳素和壳聚糖含有羟基和氨基，因此，通过多种化学反应可以实现其结构的化学修饰。壳聚糖衍生物克服了壳聚糖仅溶于酸，易降解，在有机溶剂中易沉淀，物理与化学稳定性差的弱点，从而大大拓展了甲壳素的应用领域。化学改性的方法[1]包括主链水解、酰化反应、烷基化反应、羧基化反应、硅烷化反应、接枝共聚反应、酯化反应、壳聚糖季铵盐反应、与金属形成壳聚糖金属配合物等。1.3 理化性质甲壳素是白色或微黄色无定形半透明固体，无臭、无味，化学性质稳定，不溶于水、乙醇、乙醚、盐类和稀酸、稀碱，能溶于醋酸、乳酸、柠檬酸、麸酸、无水甲酸和浓无机酸，与浓烧碱溶液作用，形成玻璃状胶体的壳聚糖。在浓酸或浓碱中发生水解而成α-氨基葡萄糖。经脱乙酰基后形成的壳聚糖，虽然也不溶于水、碱溶液和有机溶剂中，但可溶于稀酸溶液中，包括无机稀酸（盐酸、硝酸等）和有机稀酸（醋酸、乳酸、甲酸、抗坏血酸、苹果酸等）中，这就是壳聚糖被称为可溶性甲壳素的原因。1.4 在自然界的分布甲壳素是自然界仅次于纤维素的第二丰富的多糖，是将近一百万种节肢动物，如昆虫、虾类、螃蟹外壳的主要成分，虾壳约含15%~30%，蟹壳约含15%~20%。甲壳动物的外壳，如虾壳、蟹壳都由两部分组成，其表面是薄而透明的角质层，主要成份是钙，内部则是较厚的甲壳素层。甲壳素也是菌类，如蘑菇、灵芝、酵母、地衣等的细胞壁的组成部分。鱿鱼、乌鱼的骨骼都含有甲壳素。绿藻、水母及乌贼体内也含有。据估计，生物圈中始终存在着至少100亿吨的甲壳素，每年的生物合成量超过10亿吨，是一种巨大的可再生资源。3 甲壳素的生产甲壳素是从各种动物或菌类的废弃物，主要是甲壳动物的外壳（虾壳、蟹壳等）中提取制得，促进了对资源的综合利用。甲壳素的制备方法主要有酸碱法、酶解法、发酵法等。3.1 酸碱法酸碱法也称为化学法，主要步骤是：先用酸除去甲壳中的钙以及其他无机盐，再用碱除去蛋白质。所用的酸主要包括HCl、HNO[font='等线'][size=13px]3[/size][/font]、H[font='等线'][size=13px]2[/size][/font]SO[font='等线'][size=13px]3[/size][/font]、CH[font='等线'][size=13px]3[/size][/font]COOH、HCOOH和柠檬酸等, 其HCl的使用最为普遍 所用的碱主要为NaOH等。酸碱法所用的原料包括虾壳、蟹壳、南极磷虾虾壳[2]、小龙虾（克氏原螯虾）[3]壳、白星花金龟[4]、鲤鱼鱼鳞[5]、蝉蜕[6]、尖尾东鳖甲[7]、黄粉虫虫粕[8]等。酸碱法的缺点是需要强酸和强碱。下面详细描述一种典型的工艺：首先，将虾、蟹壳中的肉质剔去，洗净，烘干，粉碎。然后将其浸泡在盐酸中，一般要几天，直至不冒气泡为止，过滤，水洗至中性，此时甲壳中的钙等无机盐被除去，而呈柔软状。再用氢氧化钠溶液浸泡数小时，水洗，以除去蛋白质。酸、碱处理可重复1~2次，彻底除去碳酸钙、磷酸盐等无机盐、蛋白质、色素、角质层和脂肪等杂质。然后用1%的KMnO[font='等线'][size=13px]4[/size][/font]溶液浸泡经碱煮后的软甲壳，通过氧化作用除去甲壳上的有机色素。水洗后，再浸入1%的亚硫酸氢钠溶液10分钟，除去残留的高锰酸钾，然后加入少量盐酸，使溶液呈酸性，继续浸泡20分钟，以除去附在甲壳上的二氧化锰，此时甲壳应呈白色，即得不溶性甲壳素，充分水洗，干燥，即得纯净的甲壳质。也可将甲壳粉碎后先用2%稀碱液煮解蛋白质约1.5小时并过滤，再在不溶物中加5%~10%盐酸使碳酸钙变成氯化钙而溶解除去，再离心分离、水洗、干燥而成。已有报道用此法从蚕蛹[9]和黑皱鳃金龟[10]中提取甲壳素。3.2 酶解法酶解法采用生物酶对原料进行处理。所用的酶包括碱性蛋白酶、胰蛋白酶、水解酶、脂肪酶、酯酶等。3.3 发酵法发酵法是利用一些细菌和真菌发酵体产生的有机酸或蛋白酶来去除蛋白质和钙盐，从而制取甲壳素。所用的微生物包括乳酸菌、芽孢杆菌以及其他菌类，也可以使用混合菌。2.4 其他生产方法生产甲壳素的其他方法有EDTA法，离子液体提取法，热甘油预处理法等。也可以联合使用两种生产方法。此外，有些酿造工业的副产物也是甲壳素的原料。例如使用黑曲霉发酵生产柠檬酸的残液，以及使用鲁毛霉、布拉克须霉和卵孢接霉发酵的发酵液中都能提供一定量的脱乙酰甲壳质。2.5 甲壳素转化为壳聚糖产生的甲壳素可进一步用于制取壳聚糖。在很多工艺流程中，甲壳素就地转化为壳聚糖。将甲壳素置于高压皂化锅内，加入40%~60%氢氧化钠溶液进行蒸煮，温度为100~180℃，压力0.5~1 MPa，时间8~12 h，脱乙酰度可达70%～90%。皂化反应完成后，沥干碱液，水洗至中性，烘干，即可得壳聚糖。通过超声协同甲壳素脱乙酰基酶脱去乙酰基，再过滤、水洗、烘干得到壳聚糖，壳聚糖脱乙酰度高达91.09%，相对得率81.87%[11]。3 甲壳素的应用甲壳素以及甲壳素制造的产品，因其独特的物理、化学性质，具有防潮、耐晒、防霉、耐腐蚀等优良特性，用途十分广泛。3.1 防腐作用甲壳素作为食品添加剂，具有防腐作用。醋酸、乳酸、柠檬酸、麸酸等常在工业制程中用以溶解甲壳素，其溶解度与酸浓度呈正比。以醋酸为例，10 g/L甲壳素需溶于1%醋酸中。一旦溶解，即可以进一步以水稀释。甲壳素的脱乙酰度影响其成膜的能力。较高脱乙酰度者，水溶液干燥后较易形成膜。用于肉或肉制品表面成膜，即有防腐作用。也可用甲壳素溶液浸泡食品，可降低生菌数，并增加商品寿命，达到防腐的效果。其制作过程需使用黏度低、脱乙酰度高的甲壳素。但亦有工艺说明，如以浸泡方式操作，其甲壳素的浓度应尽量提高，以便于浸泡后的剂量能有足够的防菌及保湿能力。但因浓度过高时黏度亦提高，故必须以特殊方式降低黏度，不使其凝聚成膜。日本丸大火腿是用甲壳素防腐的一个实例，其制作过程中添加甲壳素约200 mg/kg，可抑制不良霉菌的滋长。日本朝日化学、Asama Chemical以及其下游厂商，均以甲壳素为保鲜剂提供酱菜，以利降低盐分的使用。3.2 食品添加剂甲壳素作为食品添加剂，除了防腐作用，也可作为增稠剂、稳定剂，具有防变色和除涩的功能。用于果汁、果酒、果酱、乳酸菌饮料、氢化植物油、其他油脂或油脂制品、冷冻饮品、花生酱、蛋黄酱、沙拉酱、冰淇淋、植脂性粉末、食醋、啤酒和麦芽饮料等。甲壳素和脱乙酰甲壳素可以作为果汁澄清剂。由于果汁溶液多半呈弱酸性，壳聚糖分子上存在游离的氨基带正电，能够和酸、多酚类的物质进行反应，进而对胶态颗粒絮凝沉淀，达到澄清果汁的效果，并且不会影响营养成分和风味。目前大多用酶法或过滤法来澄清果汁，成本高且周期长，使用甲壳素和壳聚糖具有操作方便、成本低的优点。3.3 在医疗方面的应用甲壳素无毒，并具有生物相容性，在医疗方面有广泛的应用。甲壳素有一定协助溶菌作用，还能作为血液抗凝剂，创伤愈合剂等。脱乙酰甲壳素可调节机体免疫功能、抑制胃溃疡，还通过阻断膳食脂肪和胆固醇的吸收而降低胆固醇，降低血脂、血糖、血压。甲壳质的水解产物氨基葡萄糖盐用于治疗肠炎、结肠溃疡和肺炎。应用甲壳素或氨基葡萄糖作为某些肿瘤的化疗剂，效果很好。硫酸葡萄糖胺，是一种能缓解关节疼痛、支持关节运动、起到润滑作用的药物。甲壳素可作为药剂辅料、医用缝合线等。其中作为辅料可用作缓释剂、润滑剂、包衣剂。通过直接压片、湿法制粒或包衣可制备相应药物的微粒剂、片剂、胶囊剂、微膜剂等。也可用于制作药物载体。可制成透析膜、超滤膜和反渗透膜；与纤维等交链复合体可作成分子筛。与戊二醛等作交联剂，可与许多酶或微生物细胞固定化，如固定化天冬酰胺酶。甲壳素可用于制作手术缝合线、人造皮肤、人造血管、人工肾、伤口敷料、止血海绵、接触眼镜等，使用效果良好。3.4 重要的化工原料甲壳素是制取壳聚糖、氨基葡萄糖系列产品的重要原料。这一系列产品在医药、化工、保健食品等方面具有十分广泛的用途。甲壳素可用作制人造纤维和塑料等的原料。3.5 环境保护甲壳素与其衍生物对多种金属，特别是一些会造成严重环境污染的有害金属，如汞、镉、铜、镍、铬等都有很好的螯合能力，所以在净水、污水处理等方面很有前途。可作为絮凝剂，用于废水处理。也可以用来净化放射性污染，因为许多放射性污染的造成系属于放射性的过渡族元素的衍生物，可以使用甲壳素移除。3.6 纺织业可用于纺织品的防皱和防缩处理；直接染料或硫化染料的固色；其他织物的整理剂。甲壳素可以制成高聚物型的染料。3.7 化妆品工业甲壳素可作为阳离子增稠剂，其溶液呈无色半透明黏稠液，失水后能形成薄膜，用于皮肤、头发，均可形成薄膜，具有护肤、护发、定型的功能，因此可以配制膏霜、面膜、摩丝、发胶等产品。甲壳素和抗氧化成分的结合具有清除自由基的作用，可用于防止太阳辐射对光老化和皱纹的有害影响。壳聚糖是亲水胶体，可以与蛋白质等相互作用形成保护膜，从而起到保湿的作用。能够在头发表面形成一层覆盖膜，不易沾染灰尘，是一种理想的固发原料。8.%2 农业甲壳素及壳聚糖通过提高植物根、茎、叶的生长速率，从而使得农作物的产量和品质得到很好的改善。壳聚糖针对植物的氮代谢具有独特的调节功能这一特性，从而增加了低含量的蛋白作物提高储存蛋白含量的作用。甲壳素及壳聚糖中丰富的C和N元素，使得当其被微生物分解利用后可以用它来作为植物生长的养分，这不仅使得土壤中的微生物体系得到了改善，还可以抑制放线菌等病原菌的生长，也可以加快有益微生物的生长。3.9 其他方面的应用甲壳素还有许多其他方面的应用。例如，几丁质可用于几丁质酶的分析，要求纯化后才能使用作为几丁质酶的底物。可用作色谱载体。甲壳素对锆、铌、铷等都是有效的收集剂，可增大矿石的利用程度。在造纸工业中，甲壳素可用作施胶剂、助留剂和增强剂。甲壳素在照相技术中也有应用，可制备照相感光乳剂，一种无液定影与显影的照相法即是采用耐磨且具有感光能力的甲壳素。甲壳素还可用于涂料印花的固着，木材的胶合以及防雨篷布的上浆等。4 甲壳素的限量目前，规定甲壳素作为食品添加剂的限量标准的现行国标是GB 2760—2014。其CNS号为20.018。这个国家标准规定了9类食品中甲壳素作为食品添加剂的最大使用量，如下表所示。[table][tr][td]食品分类号[/td][td]食品名称[/td][td]最大使用量/(g/kg)[/td][td]备注[/td][/tr][tr][td]02.01.01.02[/td][td]氢化植物油[/td][td]2.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]02.05[/td][td]其他油脂或油脂制品(仅限植脂末)[/td][td]2.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]03.0[/td][td]冷冻饮品(03.04食用冰除外)[/td][td]2.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]04.01.02.05[/td][td]果酱[/td][td]5.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]04.05.02.04[/td][td]坚果与籽类的泥(酱),包括花生酱等[/td][td]2.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]12.03[/td][td]醋[/td][td]1.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]12.10.02.01[/td][td]蛋黄酱、沙拉酱[/td][td]2.0[/td][td][/td][/tr][tr][td]14.03.01.03[/td][td]乳酸菌饮料[/td][td]2.5[/td][td]固体饮料按稀释倍 数增加使用量[/td][/tr][tr][td]15.03.05[/td][td]啤酒和麦芽饮料[/td][td]0.4[/td][td][/td][/tr][/table]虽然国家标准已经规定了几种食品中甲壳素的限量，但是，目前，国标（GB 5009系列）尚未规定食品中甲壳素的测定方法。5 对食品添加剂甲壳素的要求现行国标GB 1886.312-2020对作为食品添加剂的甲壳素提出了若干要求。该标准适用于以虾壳、蟹壳、鲎壳、鱿鱼骨、乌鱼骨等为主要原料，经脱钙、脱蛋白等工艺加工制得的食品添加剂甲壳素。5.1 感官要求感官要求应符合下表的规定。[table][tr][td]项目[/td][td]要求[/td][td]检验方法[/td][/tr][tr][td]色泽[/td][td]白色至浅黄色或浅红色[/td][td=1,4]取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘内，在自然光线下观察其色泽和组织状态，嗅其气味[/td][/tr][tr][td]状态[/td][td]片状或粉末状[/td][/tr][tr][td]气味[/td][td]具有本身固有特征气味、无异味[/td][/tr][tr][td]杂质[/td][td]无正常视力可见的外来杂质[/td][/tr][/table]5.2 理化指标理化指标应符合下表的规定。[table][tr][td]项目[/td][td]指标[/td][td]检验方法[/td][/tr][tr][td]水分，w[font='等线']/[/font][font='等线']% [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]10.0[/td][td]GB 5009.3第一法 直接干燥法[/td][/tr][tr][td]pH(10 g/L水溶液)[/td][td]6.5~8.5[/td][td]GB/T 9724[font='等线'][size=13px]a[/size][/font][/td][/tr][tr][td]总灰分，w[font='等线']/[/font][font='等线']% [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]1.0[/td][td]GB 5009.4[/td][/tr][tr][td]铅(Pb)/(mg/kg)[font='等线'] [/font][font='等线'] [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]2.0[/td][td]GB 5009.12或GB 5009.75[/td][/tr][tr][td]总砷(以As计)/(mg/kg)[font='等线'] [/font][font='等线'] [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]1.0[/td][td]GB 5009.11或GB 5009.76[/td][/tr][tr][td]镉(Cd)/(mg/kg)[font='等线'] [/font][font='等线'] [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]1.0[/td][td]GB 5009.15[/td][/tr][tr][td]重金属(以Pb计)/(mg/kg)[font='等线'] [/font][font='等线'] [/font][font='等线']≤[/font][/td][td]10[/td][td]GB 5009.74[/td][/tr][tr][td=3,1][font='等线'][size=13px]a[/size][/font]磁力搅拌１h。[/td][/tr][/table]5.3 鉴别试验试验所用到的试剂和材料需按照该标准进行配制。称取1.0 g试样，精确至0.01 g，加入200 mL水，混合，试样应不溶解。称取1.0 g试样，精确至0.01 g，加入200 mL 1%乙酸溶液，混合，试样应不溶解。称取0.2 g试样，精确至0.01 g，加入5 mL 0.2%蒽酮硫酸溶液和1 mL水，水浴加热，试样溶液应呈蓝色至绿色。称取1.0 g试样，精确至0.01 g，加入10 mL盐酸，置于90 ℃~100 ℃水浴中放置4 h，过滤，滤液用氢氧化钠溶液中和，作为试样溶液。吸取1 mL试样溶液，加入1 mL茚三酮溶液，加热，溶液应呈紫红色。参考文献[font='等线'][size=13px]1. 戴鹏, 郑金路, 刘炳荣, 王甘英, 刘峰. 甲壳素与壳聚糖的化学改性及应用. 高分子通报, 2020, (07), 1-17.[/size][/font][font='等线'][size=13px]2. 韩银双, 张忭忭, 刘志东, 刘宝林, 林娜. 南极磷虾甲壳素研究进展. 食品安全质量检测学报, 2021, 12(03), 866-872.[/size][/font][font='等线'][size=13px]3. 徐文思, 李柏花, 张梦媛, 杨祺福, 杨品红, 周顺祥. 小龙虾及其副产物加工利用研究进展. 农产品加工, 2021, (01), 60-63+68.[/size][/font][font='等线'][size=13px]4. 李小万, 王萍莉. 从白星花金龟中提取甲壳素的工艺研究. [/size][/font][font='等线'][size=13px]世界中医药[/size][/font][font='等线'][size=13px], 2018, 13(08), 2027-2031.[/size][/font][font='等线'][size=13px]5. 高倩倩. 鲤鱼鱼鳞中甲壳素的提取. 食品研究与开发, 2018, 39(04), 84-90.[/size][/font][font='等线'][size=13px]6. 杨佳红, 靳玲侠, 张继林, 李琛. 利用蝉蜕提取甲壳素的工艺研究. 化工设计通讯, 2016, 42(06), 80-81.[/size][/font][font='等线'][size=13px]7. 张建英, 贾龙, 张大治, 喜巧红. 从尖尾东鳖甲中提取甲壳素的研究. 食品研究与开发, 2016, 37(09), 66-71.[/size][/font][font='等线'][size=13px]8. 高素红, 吉志新, 宋士涛, 温晓蕾, 暴瑞欣, 王熙. 黄粉虫虫[/size][/font][font='等线'][size=13px]粕中甲壳素的提取工艺[/size][/font][font='等线'][size=13px]. 河北科技师范学院学报, 2016, 30(02), 48-54.[/size][/font][font='等线'][size=13px]9. 蒋艳忠, 蒋琳. 蚕蛹甲壳素的提取工艺研究. 中国食品添加剂, 2015, (03), 88-91.[/size][/font][font='等线'][size=13px]10. 张建英, 贾龙, 杨贵军, 石晓莉. 黑皱鳃金龟甲壳素提取工艺研究. 环境昆虫学报, 2015, 37(04), 818-826.[/size][/font][font='等线'][size=13px]11. 窦勇, 胡佩红. 超声协同CDA酶法制备龙虾壳聚糖. 食品与发酵工业, 2014, 40(11), 127-131.[/size][/font]

最近我从鸭血中提取的胆碱酯酶对乐果、氧化乐果、辛硫磷、对硫磷等含硫农药不敏感，而对呋喃丹、敌敌畏等不含硫农药相当敏感。即使克百威（呋喃丹）与丁硫克百威（好年冬）结构很相似，只是因为丁硫克百威多了硫元素，该酶对丁硫克百威的检出限高了近50倍，想跟高人交流其中的原因！并求能提高酶对含硫农药敏感性的解决办法！

所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆，其目的在于对目的DNA进行进一步分析，或者进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。 一、试剂准备1．LB液体培养基：胰化蛋白胨（细菌培养用）10g，酵母提取物（细菌培养用） 5g，NaCl 10g，加ddH2O 至1000ml，完全溶解，分装小瓶，15lbf/in2高压灭菌20min。2．1.5%琼脂LB固体培养基: 称取1.5g琼脂粉放入300ml锥形瓶,加100ml LB，15 lbf/in2 高压灭菌20min，稍冷却，制备平皿。3．IPTG、X-Gal4．0.1M MgCl2 ：15 lbf/in2高压灭菌20min，0℃冰浴备用。5．0.1M CaCl2（以20%甘油水溶液配制）：15 lbf/in2高压灭菌20min，0℃冰浴备用。6．限制性核酸内切酶、T4 DNA连接酶。二、目的DNA片段和载体的制备选择适宜的限制性核酸内切酶，消化已知目的DNA和载体，获得线性DNA，用于重组。根据目的DNA和载体的具体情况，选择一种或者两种适当的限制酶切割，分别产生对称性粘性末端（用一种限制性内切酶进行消化而产生带有互补突出端）、不对称粘性末端（用两种不同的限制性内切酶进行消化而产生带有非互补突出端）、平端。在亚克隆时，首选不对称相容末端连接，次选对称性粘性相容性末端连接，由于平末端连接效率较低，通常很少采用。但有时目的片段的末端与载体不匹配 ，一般先将不匹配末端补平，然后再以平末端连接。（实验操作同前述） 三、利用T4 DNA连接酶进行目的DNA片段和载体的体外连接（一）连接要求和结果外源DNA片段末端性质 连接要求 连接结果 不对称粘性末端 两种限制酶消化后，需纯化载体以提高连接效率 载体与外源DNA连接处的限制酶切位点常可保留；非重组克隆的背景较低；外源DNA可以定向插入到载体中。 对称性粘性末端 线形载体DNA常需磷酸酶脱磷处理 载体与外源DNA连接处的限制酶切位点常可保留；重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝；外源DNA会以两个方向插入到载体中。 平端 要求高浓度的DNA和连接酶 载体与外源DNA连接处的限制酶切位点消失；重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝；非重组克隆的背景较高 。 带有相同末端(平端或粘端)的外源DNA片段必须克隆到具有匹配末端的线性质粒载体中,但是在连接反应时,外源DNA和质粒都可能发生环化,也有可能形成串联寡聚物。因此，必须仔细调整连接反应中两个DNA 的浓度，以便使“正确”连接产物的数量达到最佳水平，此外还常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制载体DNA的自身环化。利用T4 DNA连接酶进行目的DNA片段和载体的体外连接反应，也就是在双链DNA 5’磷酸和相邻的3’羟基之间形成新的共价键。如载体的两条链都带有5’磷酸（未脱磷），可形成4个新的磷酸二酯键；如载体DNA已脱磷，则只能形成2个新的磷酸二酯键，此时产生的重组DNA带有两个单链缺口，在导入感受态细胞后可被修复。（二）T4 DNA连接酶对目的DNA片段和载体连接的一般方案1．连接反应一般在灭菌的0.5ml离心管中进行。2．10μl体积反应体系中：取载体50-100ng，加入一定比例的外源DNA 分子（一般线性载体DNA分子与外源DNA分子摩尔数为1∶1-1∶5），补足ddH2O 至8μl。3．轻轻混匀，稍加离心，56℃水浴5min后，迅速转入冰浴。4．加入含ATP的10×Buffer 1μl，T4 DNA连接酶合适单位， 用ddH2O 补至10μl，稍加离心，在适当温度（一般14-16℃水浴）连接8-14hr。四、连接产物的转化1.感受态细胞的制备⑴ 保存于-70℃的DH5α（或其他菌种）用接种环划菌于1.5%琼脂平板上，37℃恒温倒置培养至单菌落出现（约14-16 hr）。⑵ 挑取单菌落，接种于2.0ml LB液体培养基中，37℃恒温，250g振荡培养过夜（约12hr）。⑶ 取0.5ml 过夜培养液，接种于100ml LB液体培养基中，37℃振荡培养2-2.5hr，至OD600为0.4-0.5时，放置于4℃冰箱冷却1-2hr。（注：以下操作均应在冰浴中进行。）⑷ 将培养液分入两个50ml离心管中，4℃离心，4000g×10min，弃去上清，用冰浴的0.1M MgCl2 25ml悬浮30min。⑸ 4℃离心,4000g×10min，弃去上清，加入冰浴的0.1M CaCl2-甘油溶液1ml悬浮。⑹ 以100μl/管分装入1.5ml离心管中，-70℃冻存备用。注：此法制备感受态细胞，可使每微克超螺旋质粒DNA产生5×106-2×107个菌落，这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要，制备的感受态细胞可贮存于-70℃，但保存时间过长会使转化效率在一定程度上受到影响，一般三个月以内转化效率无多大改变。2. 连接产物的转化⑴ 取100μl贮存于-70℃钙化菌，冰浴化开；⑵ 加入适量连接产物（一般不超过10μl，轻轻混匀，冰浴20min；⑶ 于42℃热休克90s，迅速转移至冰浴中，继续冰浴2-3min；⑷ 加入LB液体培养基200μl，于37℃缓摇孵育45min；⑸ 将培养物适量涂于1.5%琼脂LB平板（根据质粒性质添加抗生素或/和X-Gal/IPTG），待胶表面没有液体流动时，37℃温箱倒置培养12-16hr。

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9月24日消息，欧盟将对葛兰素史克公司的糖尿病药物文迪雅（Avandia）采取退市措施，而美国有关当局则因该药有导心脏病发作的风险，对其销售进行严格限制。这基本决定了这种一度很赚钱的药品的商业命运。 　　文迪雅（Avandia）曾经是糖尿病治疗的首选药品，也是葛兰素销量第二的药品，这次裁决将解决围绕着Avandia的安全性所进行的为期三年的激烈争论，该争论对医学行业和葛兰素的声誉均造成了不良的影响，而美国食品和药品管理局的官员对这种药物也持有不同的观点。 　　欧盟和美国的举措将为较新的糖尿病治疗药物获得市场份额扫清障碍。分析师称，默克公司（MErck & Co）的药物Januvia、阿斯利康公司（AstraZeneca）的Plc和百时美施贵宝公司（Bristol-Myers Squibb）的OnGLyza将从中受益，它们的销量最有可能得到增长。

我们的元素分析仪elementar的，近期测样压差过大进气压约1500，出气压1000，请教各位大神，应如何排查？