当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

喹西特

仪器信息网喹西特专题为您提供2024年最新喹西特价格报价、厂家品牌的相关信息， 包括喹西特参数、型号等，不管是国产，还是进口品牌的喹西特您都可以在这里找到。 除此之外，仪器信息网还免费为您整合喹西特相关的耗材配件、试剂标物，还有喹西特相关的最新资讯、资料，以及喹西特相关的解决方案。

喹西特相关的论坛

  • 梅特勒电位滴定仪预馈液时间怎么看？

    梅特勒电位滴定仪预馈液时间怎样从打印出来的表格中看？今天将测试数据打印出来，我设置的预馈液时间为10s，而在打印出来的数据表格中怎么看不出来？三阶段预馈液所用时间分别为15s，24s？

  • 【极限体验】Ultimate XB C18柱指认植物中喹宁酸类化合物（10月份）

    【极限体验】Ultimate XB C18柱指认植物中喹宁酸类化合物（10月份）

    【背景介绍】喹宁酸类化合物具有多种具有多种生物活性，如抗组胺、抗氧化、肝保护、抗菌等。而且，其单取代、双取代或三取代化合物在体内化外都显示出良好的抗HIV病毒活性，具有很好的开发前景。【喹定酸类化合物结构】二取代类喹宁酸类化合物是指在R1和R2、R1和R3、或者R2和R3两个位置均有取代的化合物。取代基可能为咖啡酰基（A）、芥子酰基（B）、阿魏酰基（C）等基团的自由组合，即R1、R2、R3可能为A、B、C的排列组合，R4可能为氢也可能为甲基或者乙基等基团。由于R1、R2、R3所处取代位置的化学环境相似，所以在结构鉴定过程中，取代位置容易混淆。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110042032_321102_1745326_3.jpg【文章内容】本文通过自己制备的部分单体化合物，利用此类化合物在液相中保留时间的不同，对某植物中存在的部分喹宁酸类化合物（10个：G1~G9）进行指认（涉及保密，本文只透露2个化合物（G4、G7）的相关内容）。对于明确此植物的化学成为具有重要的指导意义。【仪器试剂】水：重蒸水甲醇：色谱纯，天津大茂 乙酸：分析纯，天津大茂 HPLC：Waters 高效液相Waters 996 DAD检测器Waters Model 600 controller液相色谱【色谱条件】 色谱柱：Ultimate XB-C18柱（5μm, 4.6x250mm）流动相：60%甲醇/水（V：V），水含0.01%乙酸流速：1.0ml/min柱温：常温（约25度）；检测波长：全波长检测；进样量：10微升；【样品制备】涉及保密，此处略去，见谅。重点在色谱行为。【色谱行为】 某植物样品——总样分析色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110062154_321549_1745326_3.jpg指认的G4峰：3，4-二咖啡酰基喹宁酸甲酯http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110062155_321550_1745326_3.jpg指认的G7峰：3-咖啡酰基-5-芥子酰基喹宁酸甲酯http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110062156_321551_1745326_3.jpg【结果与讨论】1. 本实验对某植物中所含的喹宁酸类化合物进行了指认（约10个），明确了该植物中含有的化学成分，为以后工作的开展奠定了一定的基础。同时，从色谱图中可见，还有部分化合物由于量小未进行指认，这部分工作将是以后工作的重点；2. G4和G7的色谱图虽然可见一些含量很少的小杂质，但并不影响此次实验分析。由于双取代基团的存在，使得它们的紫外吸收峰并不“干脆”，如果是单取代吸收，将在230nm和320nm处显示两个“干脆尖锐”的紫外吸收峰。这一点，有利于识别单取代和双取代喹宁酸类化合物。3. 另外，不得不反复提出，在进样量不同的时候，通过DAD检测器得出的紫外吸收值有所变化。这提示我们，DAD检测器得出的紫外吸收只应该做为一个参考值，需要引起注意。4. 总样分析色谱图中，由于出峰时间过短及流动相等条件摸索不到位，部分峰形没有完全分离，此部分工作将继续进行。尽管如此，Ultimate XB-C18柱在分析的过程中，表现出了分离度好、柱效高、柱压稳定等优秀性能，让人满意。后续开展的工作，如果涉及指纹图谱类似的相关实验内容，Ultimate XB-C18柱将成为种子选手，绝对首发。

  • 【求助】4-羟基喹唑啉的分析

    求助：4-羟基喹唑啉分析方法最近要做这个物质的分析，看TCI上给的是（T），是滴定的条件。想问问能不能用色谱条件做呢？问一下大家，希望大家指点一下，谢谢。

  • 【讨论】动物常用喹诺酮类抗菌药物分析进展

    [size=4] 喹诺酮为一类具有4一喹诺酮环结构的药物。第一代药物萘啶酸(1962)，第二代药物吡哌酸和氟甲喹(1974)，抗菌作用较弱，国内较少使用。第j代为氟喹诺酮类(具有6一氟一 7一哌嗪一4一诺酮环结构)。喹诺酮类药物结构相似，取代位点较多，抗菌谱较广，活性高，从其结构一活性关系上探索开发新品种己成为喹诺酮类药物的研究热点，因而发展迅速， [/size][size=4] 尤以人药领域的喹诺酮类药物发展为最陕。最近几年又推出了数十种之多的新品种，其中有些还未命名，只给出了试验编号。 [/size][size=4] 喹诺酮类药物广泛地用于畜禽的细菌、霉形体病防治，已投人使用或即将进人兽医领域的药物有10多种，主要有两类，一类从人医用移植转化而来，如诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星等。另一类是动物专用品种，己批准上市的兽医专用喹诺酮类药物有恩诺沙星(德国拜耳公司)、沙拉沙星(美国雅培公司)、单诺沙星(美国辉瑞公司)、二氟沙星(美国雅培公司)、倍诺沙星(日本武田制药)，奥比沙星(日本大日本制药)和麻保沙星(瑞士罗氏公司)，其中，后三种在我国还未见上市。 [/size][size=4] 诺酮类药物与细菌DNA复制所需的DNA一~rase的亚基A(Subunit)结合而抑制DNA复制化，此外由于细菌细胞具有强烈的穿透力，故具有强大的杀菌作用。这些药物的抗菌作用与疗效可与第j代头孢菌素媲美，已成为兽用抗菌药物中最活跃的研究领域之一，随之而来的这类药物的分析分析显得十分重要，相关文章也比较多，但大多数文章，例如彭六保等从四代喹诺酮类药物分类综述了该类药物的分析进展，其针对性不强；还有一些文章，如王玉忠、张加玲等从各种分析方法进行综述，与上面存在同样的问题。所以本文仅对兽医常用的九种喹诺酮类药物分析进展综述，以期对兽药临床及生产具有一定的帮助。现将常用的分析方法方法介绍如下。 [/size]

  • 鸡肉中喹诺酮类抗生素的测定《GBT 21312-2007》

    鸡肉中喹诺酮类抗生素的测定《GBT 21312-2007》

    [align=center][img=,500,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414050499_4164_932_3.jpg!w640x394.jpg[/img][/align][b]实验背景[/b]2017年8月23日，美国快餐连锁巨头麦当劳在官网宣布，将要求全球肉鸡供应商自2018年开始逐步停止使用人类抗生素，麦当劳针对的鸡肉是不含有世界卫生组织（WHO）认定的人类医学药物HPCIA（最高优先级的重要抗菌药物）。停用宣言中，首当其冲的HPCIA，其实只是世界卫生组织人类抗菌药物清单中的一类。世界卫生组织在2016年公布的第5版重要的人类抗菌药物清单（critically important antimicrobials for human medicine，CIA）中，HPCIA包括[b]喹诺酮类、头孢菌素类、大环内酯类和酮内酯类，糖肽以及多粘菌素[/b]共五种。其中，喹诺酮类在动物中主要用于治疗沙门氏菌和大肠杆菌的感染。本实验主要针对鸡肉中[b]喹诺酮类[/b]抗生素的残留测定。[b]参考标准[/b]《GBT 21312-2007 动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱 质谱法》[b] 样品净化 [/b]活化：Welchrom BRP(200mg/6mL)6mL甲醇，6mL水上样：将待净化样以2-3mL/min的速度通过小柱，弃液淋洗：先用2mL5%甲醇水溶液（体积比）淋洗，将小柱抽干洗脱：6mL甲醇洗脱，收集，氮气吹干，用1mL0.2%甲酸水溶液（体积比）溶解，1000r/min旋涡混合1min，过0.22μm滤膜，HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析。[b] 仪器条件01 UPLC条件[/b][align=center][img=,600,144]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414174192_7330_932_3.png!w411x99.jpg[/img][/align][b]02 质谱条件[/b][align=center][img=,600,319]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414241518_7677_932_3.png!w428x228.jpg[/img][/align][align=center][b]实验图谱及结果[/b][/align][align=center][img=,600,206]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414360220_6597_932_3.jpg!w690x237.jpg[/img][/align][align=center][b]喹诺酮类样品加标5μg/kg液相色谱串联质谱质量色谱图[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][img=,600,466]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414418846_1005_932_3.png!w690x536.jpg[/img][/align][align=center][b][img=,600,290]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910121414475282_1767_932_3.png!w687x333.jpg[/img][/b][/align][align=center][b]喹诺酮类药物加标回收实验结果(n=6)[/b][/align][b][/b][color=#595959][b]结论：[/b]月旭BRP小柱和UHPLC色谱柱可以用于该项目的检测。[/color]

  • 求助：关于氟喹诺酮类药物在猪肉组织中的基质增强效应？

    有没有哪位大侠做过氟喹诺酮类药物的残留检测啊，我是使用WATERS的HLB小柱，甲醇－水活化，50mM乙酸氨溶解样品，上样，用2％甲酸水，甲醇淋洗，然后5％甲醇氨洗脱，加了内标校正，回收率高达130－190％，很吓人请大侠们给俺点建议，咋办呢？ [em61] [em61]

  • 【转帖】新兽药“喹烯酮”获甘肃省科技进步一等奖

    4月28日，在甘肃省召开的科学技术奖励大会上，中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所主持完成的“新兽药‘喹烯酮’的研制与产业化”荣获甘肃省科技进步一等奖。　　“喹烯酮”是目前我国第一个拥有自主知识产权的兽用化学药物饲料添加新产品，也是建国以来第一个获得国家一类新兽药证书的兽用化学药物。该产品填补了国内外对新型、高效、无毒、无残留兽用化学药物需求的空白，具有显著促生长效果，对猪、鸡、鱼增重率分别提高15%、18%和30%，使畜禽的腹泻发病率降低50%～70％。“喹烯酮”可完全替代目前国内广泛使用的毒性大、残留量高的动物促生长剂喹乙醇，现已在33个省市区的猪、鸡、鸭和水产动物上推广使用。　　“喹烯酮”的应用，有利于安全性动物源食品生产，可增强我国动物性食品的出口创汇能力，促进我国养殖业的健康持续发展，目前已成为我国畜牧养殖业广泛使用的兽药新产品。

  • 【原创大赛】抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析

    【原创大赛】抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析

    抗生素头孢喹肟的动物体内药动学分析 头孢喹肟是目前唯一一个动物专用第四代头孢类抗生素，具有抗菌谱广，抗菌活性强的特点，适用于非肠道用药；源于基本头孢菌素结构的化学修饰提供了头孢喹肟的两性离子性质。头孢喹肟的这一特性可以促进其迅速跨生物膜渗透作用（包括细菌细胞壁的孔蛋白），从而增强生物利用度，较第二代和第三代头孢菌素抗菌谱更广。它对临床重要细菌的染色体和质粒编码的β-内酰胺酶高度稳定。被用于治疗动物呼吸道的疾病，牛的急性乳腺炎和腐蹄病，小牛败血症，猪子宫炎，乳房炎，无乳综合征，马驹败血病，其也是治疗羊的各类疾病的药物。 材料和方法: 头孢喹肟,、色谱乙腈、色谱甲醇、三氟乙酸（TFA）、去离子水。 岛津高效液相色谱仪、SPD-10AVP UV-VIS检测器268纳米处进行检测、柱温箱40°C、Phenomenex Gemini C18色谱柱 (250 mm ×4.6 mm; 5u m)。 流动相为乙腈和0.1％三氟乙酸水溶液，以0.9 ml/min的流速进行洗脱。 标准溶液配制： 头孢喹肟的储备溶液通过直接称量干燥后的标准物质溶解于水中，浓度1mg/ ml，并将该溶液保存于-70℃。头孢喹肟标准溶液通过加入空白血浆配制成溶度为0, 0.02, 0.04, 0.10, 0.40, 1, 2, 4, 10,和 12 ug/ml的溶液。 样品制备：200ul血浆中加入1.5毫升微量离心管中，加入等体积的甲醇使蛋白质沉淀，离心（4000转/min）10分钟后，300ul的上清离心液移入新鲜小瓶中，加入150ul去离子水混合，再吸取50ul上清液进样分析。 液相方法的验证： 选择性-选择性通过分析空白血浆、加入头孢喹肟的血浆、从羊服用头孢喹肟药代动力学研究中获得的血浆样品进行评价，无内源性化合物对目标化合物的干扰。 线性标准曲线-本方法的线性通过在0.02-12ug/ml的范围内的校正曲线评价。 灵敏度-通过进样 0.01ug/ml-0.1 ug/ml评价其信噪比。 精密度和准确度-头孢喹肟样品分低中高浓度分别进样分析，每个浓度分别进样六次日间、日内测定。 回收率-为了计算头孢喹肟的绝对回收率分别加入 0.4ug/ml, 2ug/ml, 和10ug/ml浓度样品，每个浓度分别重复6次进行加入和提取。 稳定性-标准

  • 江苏省分析测试协会关于《地表水体中喹诺酮类液相色谱-质谱联用检测法》团体标准的立项公告

    各有关单位：依据《中华人民共和国标准化法》《团体标准管理规定》等文件精神，按照《江苏省分析测试协会团体标准管理办法》的有关规定，我会秘书处组织相关专家对南通大学等单位申报的《地表水体中喹诺酮类[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用检测法》团体标准进行了立项评审。经专家评审，《地表水体中喹诺酮类[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用检测法》团体标准符合立项条件，现批准立项，特此公告。如有单位或个人对该团体标准项目存在异议，请在公告之日起10个工作日内将书面意见反馈至江苏省分析测试协会秘书处。联系人： 周 明电 话：13770810997E-mail：jsfxcsxh@163.com[align=right]江苏省分析测试协会[/align][align=right]2022年9月19日[/align][url=http://file2.foodmate.net/wenku2022/wfx202209220939.zip]附件[/url]：江苏省分析测试关于《地表水体中喹诺酮类[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用检测法》团体标准的立项公告.pdf

  • 求助：液相喹乙醇代谢物回收率低

    waters液相色谱，做水产喹乙醇代谢物实验，回收率只有40%，该如何解决 呢？----您好，已转到 LC 版。下次发帖记得到对应的技术版面，新手版面的浏览量小 ，可能耽误您的问题。

  • 【“仪”起享奥运】常见菜也是药--秋葵

    [font='PingFang SC', system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif][size=17px] 秋葵的花和根部具有利咽解毒的功效。在中医理论中，咽喉肿痛多由热毒上攻所致，而秋葵的这些部位能够清热解毒，缓解咽喉不适，是治疗咽喉炎、扁桃体炎等疾病的良方。[/size][/font][font='PingFang SC', system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif][size=17px] 秋葵的根部还具有通淋利尿的作用。对于小便淋涩、尿频尿急等泌尿系统症状，秋葵根部能够帮助疏通尿道，促进尿液排出，缓解患者的痛苦。[/size][/font][font='PingFang SC', system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif][size=17px] 秋葵的种子，在中医中被称为“秋葵子”，具有催乳和调经的功效。对于产后乳汁稀少的女性，适量食用秋葵子可以促进乳汁分泌；而对于月经不调的女性，秋葵子也能起到调理作用，帮助恢复正常的月经周期。[/size][/font][font='PingFang SC', system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif][size=17px] 除了药用价值外，秋葵还富含多种营养成分。它含有丰富的维生素A、维生素C以及类胡萝卜素等抗氧化物质，能够清除体内自由基，延缓衰老；同时，秋葵还含有丰富的果胶和膳食纤维，有助于促进肠胃蠕动，改善便秘问题。此外，秋葵中的钙、铁等微量元素也是人体必需的营养物质，对于维持人体健康具有重要作用。[/size][/font]在日常生活中，秋葵既可以作为蔬菜直接食用，也可以用于药膳制作。将秋葵与枸杞、红枣等中药材搭配食用，可以起到滋补身体、增强体质的作用；而将秋葵的根、叶等部位用于煎汤或泡茶饮用，则可以发挥其药用价值，治疗相关疾病。 也需要注意秋葵的禁忌：脾胃虚寒[i][/i]者慎食，因其性凉易加重体寒；肾结石及高尿酸患者应避免，因其含草酸可能加重病情；过敏体质者需注意，其粘液蛋白和细绒毛可能引起过敏；同时，应避免与寒性食材同食，以免引发腹泻等不适。烹制秋葵时不宜加水炒制，也不宜用铜或铁质器皿盛装，以免变色或影响口感。

  • 喹硫平杂质的作用

    喹硫平杂质的作用

    喹硫平杂质主要在制药工艺中扮演质量控制的角色。在药物制备过程中，有时会产生一些不希望的化合物，这些化合物被称为杂质。它们可能来自原料、副反应、分解产物等。喹硫平是一种用于治疗精神障碍的药物，如精神分裂症。在其制备过程中可能会产生杂质。这些杂质如果未被充分去除，可能会影响药物的安全性和有效性。例如，一些杂质可能会引发过敏反应，降低药物的效力，或增加潜在的毒性效应。因此，对喹硫平的纯度要求非常高，其杂质的含量必须控制在严格的范围内。在药品的质量控制过程中，CATO标准品对杂质的检测和分析非常重要。它可以确保药品在整个生产和储存过程中保持一致的质量和安全性。此外，对喹硫平杂质的研究也有助于优化其制药流程，从而提高其生产效率和产品质量。[img=,610,528]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402052054525835_779_6381668_3.png!w610x528.jpg[/img]

  • 喹唑啉类化合物的液相色谱质谱分析

    [color=#444444]有谁用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]分析过喹唑啉类化合物？该类化合物在甲醇中溶解性较差，我不知道该如何配制做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的溶液？[/color]

  • 【原创大赛】【仪器应用】饲料中喹乙醇的测定

    【原创大赛】【仪器应用】饲料中喹乙醇的测定

    喹乙醇（Olaquindox），又名喹酰胺醇，化学名为N-羟乙基-3-甲基-乙-喹啉酰胺-1，4-二氧化物。喹乙醇是动物饲料添加剂。喹乙醇为一种化学合成喹恶啉类广谱抗菌药物，其抗菌作用强，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用。合理使用喹乙醇，可以预防和治疗动物疫病，促进养殖业的发展，使用不当、使用过量或违规使用，其副作用和毒性将直接造成动物的群体危害。近年来，喹乙醇超范围滥用现象蔓延，家禽喹乙醇中毒事件时有发生，水产养殖环节发生大面积死鱼事件。虽然猪对喹乙醇远不如鸡、鸭那么敏感，但若配合饲料中添加量超过200mg/kg，亦会导致中毒。此外，喹乙醇超剂量应用还会增加其在动物组织中的残留量，从而增大细菌耐药性或对人的身体健康造成危害，　　为加强喹乙醇安全监管，有效打击违规作用喹乙醇行为，保障畜牧业和水产养殖业健康发展，确保畜禽产品和水产品质量安全，十分有必要开展饲料中喹乙醇检测。1、适用范围适用于饲料中喹乙醇的检测。2、提取将1.0 g 饲料（已粉碎均匀）置于50 mL 塑料离心管中，加入10 mL 5% 甲醇水溶液，避光振荡30 min，超声20 min，6,000 rpm 下离心10 min ；取5 mL 上清液，待净化。3、净化ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)a 活化： 2 mL 甲醇活化，2 mL 水平衡，流出液弃去；b 上样： 将待净化液加入小柱，流出液弃去；c 淋洗： 2 mL 0.1M HCl，流出液弃去，将小柱抽干；d 洗脱： 3 mL 40% 甲醇水溶液洗脱，收集流出液至2 mL，供HPLC 分析。4、色谱条件色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)流动相：甲醇/ 水= 15/85 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：UV 260 nm5、添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507271420_557379_2452211_3.png添加水平为10 mg/kg 饲料中喹乙醇检测的液相色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507271421_557380_2452211_3.png

  • 氟喹诺酮

    我现在检测牛肉中氟喹诺酮类物质的含量，对照浓度为0.05μg/ml，标液为4μg/ml，取2g牛肉加入100μl的标液再加入20ml磷酸盐缓冲溶剂，振荡离心，取5ml上清液过HLB的固相萃取柱，最后用2ml流动相洗脱上机检测，回收率特别低，怎么才可以提高回收率呢？

  • 喹乙醇的测定问题

    按GB/T20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢残留量的测定 液相色谱-串联质谱法，检测猪肉中喹乙醇时，发现试剂空白中、样品中都含喹乙醇，子离子与母离子都与标液相符合，这是怎么回事？如何解决？

  • 哪位亲知道 氧化喹硫磷、甲喹硫磷 的CAS号吗？

    《GB/T 5009.20-2003 食品中有机磷农药残留量的测定》提到“氧化喹硫磷（po-quinalphos）”和“甲喹硫磷（methdathion）”，但是找了很久也不知道这是什么，只能请各位帮忙了，有哪位大大可以提供这两种农药的CAS号？

  • 喹硫磷检测中遇到的问题

    氧化喹硫磷，甲喹硫磷，还有喹硫磷，有没有知道这三种物质的分子式或者化学结构，这三种物质有什么联系吗？谢谢各位版友。

  • 【原创大赛】QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定蜂蜜中11种喹诺酮类药物残留的优化研究

    [align=center]QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定蜂蜜中11种喹诺酮类药物残留的优化研究[/align][align=center][/align][摘要]目的 优化改进QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱（UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS）测定蜂蜜中11种喹诺酮类药物残留的方法。方法 样品均质，冰乙酸-乙腈-水体系振荡提取后，加入DSC-18+PSA吸附剂，振荡提取后测定。结果 各目标化合物在1.0μg/L-100.0μg/L浓度范围内线性关系良好，相关系数r均大于0.995。在3个添加水平的回收率为72.4%-104.2%，相对标准偏差为1.9%-8.1%。结论 该方法快速，简便，准确，适合大批量测定蜂蜜中喹诺酮类药物残留 。[关键词][size=16px] [/size]QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法，蜂蜜，喹诺酮类药物蜂蜜是昆虫蜜蜂从开花植物的花卉中采得的花蜜在蜂巢中酿制的蜜，可以止咳，调节神经系统，促进睡眠，提高免疫力，是生活中重要的天然食品。然而，近年来，一些蜜蜂养殖场为了追求较高的利益，在饲养蜜蜂时使用喹诺酮类抗生素来降低蜜蜂的发病率和死亡率。喹诺酮类药物是一类由萘啶酸发展起来的人工合成的含4-喹诺酮基本结构的广谱抗菌药，它具有价格低廉、广谱、高效、低毒等特点，被广泛应用于预防和治疗蜜蜂下痢病，但过量滥用会导致蜂蜜中抗生素残留问题严重，长期食用可致重症肌无力症状加重，呼吸肌无力而危及生命，且有潜在的致癌性和遗传毒性，对人体健康造成危害。因此，建立一种能够快速、准确测定蜂蜜中喹诺酮类药物残留的方法具有一定的必要性。目前，蜂蜜中喹诺酮类药物的检测方法主要是液相色谱法，高效液相色谱法-质谱/质谱法，前处理大部分需要过HLB固相萃取柱，前处理周期长，效率低，不适合日常大批量检测工作的要求。本文通过实验，建立了快速测定蜂蜜中喹诺酮类药物的方法，该方法高效、准确、简便，适用于蜂蜜中喹诺酮类药物的大批量检测。1.材料与方法1.1仪器与试剂TQ-S Waters高效液相色谱串联质谱仪(Waters 公司，美国）、C18色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Waters公司，美国）、多位试管涡旋振荡器（德国Heidolph Multi Reax）漩涡混匀器（SCILOGEX [size=12px][color=black]MX-S[/color][/size]）；电子天平（感量0.001 g赛多利斯BT-223S）；甲醇（色谱纯，美国Merck）、乙腈（色谱纯，美国Fisher），Discovery＠DSC-18吸附剂冰乙酸-乙腈-水溶液：1mL冰乙酸、15mL水，均置于100mL量筒中，混匀后加入乙腈至100mL。0.1%甲酸水溶液：准确量取100μL甲酸于100mL量筒中，加水定容至刻度。喹诺酮类药物标准物质：氧氟沙星、培氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、环丙沙星、恩诺沙星、二氟沙星、奥索利酸、氟甲喹、单诺沙星、沙拉沙星（农业部环境保护科研监测所，201905）1.2方法1.2.1样品前处理准确称取混匀后的蜂蜜样品2g（精确到0.01g）于50mL塑料离心管中，加入10mL含冰乙酸-乙腈-水溶液，立即涡旋振荡20min ，以免样品聚团或结块，8000r/min离心5min，取上清液6mL，加入已准确称取C18+PSA（200mg+75mg）吸附剂的15mL离心管中，涡旋振荡5min，8000r/min离心5min，取上清液1mL，加入1mL0.1%甲酸水溶液稀释后用于测定。1.2.2 液相色谱条件Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），柱温：40℃，流速：0.2 mL，进样体积：5μL，流动相：A：40%甲醇-乙腈，B：0.1%甲酸水溶液。梯度洗脱程序见表1。[align=center]表1 11中喹诺酮类药物的洗脱程序[/align][table][tr][td][align=center]时间[/align][/td][td][align=center]40%甲醇-乙腈（%）[/align][/td][td][align=center]0.1%甲酸水溶液（%）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.2[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]84[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3.0[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]84[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4.2[/align][/td][td][align=center]35[/align][/td][td][align=center]65[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]80[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]6.5[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]7.0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]7.5[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]8.0[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][/tr][/table]1.2.3 质谱条件电喷雾电离正离子模式（ESI+），采用多反应离子检测（MRM），毛细管电压 3.3kV离子源温度：150℃，脱溶剂气温度：500℃，脱溶剂气流量：700L/h，锥孔反吹气流量：150L/H。目标物质谱参数见表2[align=center]表2 11种喹诺酮类抗生素的主要质谱条件[/align][table][tr][td][align=center]化合物[/align][/td][td][align=center]保留时间（min）[/align][/td][td][align=center]母离子[/align][/td][td][align=center]子离子[/align][/td][td][align=center]碰撞能量（V）[/align][/td][td][align=center]锥孔电压[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]恩诺沙星[/align][/td][td][align=center]2.30[/align][/td][td][align=center]360.2[/align][/td][td][align=center]316.1*[/align][align=center]245[/align][/td][td][align=center]25[/align][align=center]20[/align][/td][td][align=center]32[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]诺氟沙星[/align][/td][td][align=center]2.13[/align][/td][td][align=center]320[/align][/td][td][align=center]271.1*[/align][align=center]233[/align][/td][td][align=center]25[/align][align=center]20[/align][/td][td][align=center]32[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]培氟沙星[/align][/td][td][align=center]2.15[/align][/td][td][align=center]334.1[/align][/td][td][align=center]316.1*[/align][align=center]270.1[/align][/td][td][align=center]19[/align][align=center]19[/align][/td][td][align=center]34[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]环丙沙星[/align][/td][td][align=center]2.19[/align][/td][td][align=center]332.1[/align][/td][td][align=center]314.1*[/align][align=center]288.1[/align][/td][td][align=center]18[/align][align=center]22[/align][/td][td][align=center]32[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氧氟沙星[/align][/td][td][align=center]2.12[/align][/td][td][align=center]362.1[/align][/td][td][align=center]318.1*[/align][align=center]261.1[/align][/td][td][align=center]25[/align][align=center]20[/align][/td][td][align=center]32[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]沙拉沙星[/align][/td][td][align=center]2.70[/align][/td][td][align=center]386.2[/align][/td][td][align=center]342.1*[/align][align=center]299.1[/align][/td][td][align=center]27[/align][align=center]18[/align][/td][td][align=center]37[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]洛美沙星[/align][/td][td][align=center]2.34[/align][/td][td][align=center]352.1[/align][/td][td][align=center]265.2*[/align][align=center]308.1[/align][/td][td][align=center]22[/align][align=center]16[/align][/td][td][align=center]31[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]奥索利酸[/align][/td][td][align=center]3.46[/align][/td][td][align=center]262[/align][/td][td][align=center]244*[/align][align=center]216[/align][/td][td][align=center]30[/align][align=center]19[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氟甲喹[/align][/td][td][align=center]4.52[/align][/td][td][align=center]262[/align][/td][td][align=center]244*[/align][align=center]202[/align][/td][td][align=center]32[/align][align=center]21[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]单诺沙星[/align][/td][td][align=center]2.30[/align][/td][td][align=center]358.2[/align][/td][td][align=center]314.1*[/align][align=center]96.0[/align][/td][td][align=center]25[/align][align=center]20[/align][/td][td][align=center]32[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]二氟沙星[/align][/td][td][align=center]2.70[/align][/td][td][align=center]400.2[/align][/td][td][align=center]356.1*[/align][align=center]299[/align][/td][td][align=center]27[/align][align=center]21[/align][/td][td][align=center]37[/align][/td][/tr][/table]1.2.4标准溶液的配置分别将11种喹诺酮类药物标准溶液（100μg/mL）用甲醇稀释，配成浓度为10μg/mL的标准储备液。再将11种标准储备液用甲醇稀释，配成1μg/mL混合标准使用液。准确吸取混合标准使用液2μL、5μL、10μL、20μL、50μL、100μL,用空白基质提取液定容至1mL，配置成2、5、10、20、50、100μg/L混合标准系列。在1.2.2和1.2.3的仪器条件下依次对标准空白、标准系列、样品空白、样品进行测定，以系列中各类化合物含量为横坐标，以其定量离子峰面积为纵坐标，得到标准曲线及回归方程，根据样品响应计算各目标化合物含量。2.结果分析2.1前处理方法的选择目前对于喹诺酮类药物的净化多采用HLB固相萃取柱净化，但是该方法操作繁琐，耗时长，所以我们对现在应用比较广泛的QuEChERS技术进行了探索。由于喹诺酮类药物中大多含有可质子化的氮原子和可离解的羟基，呈现出酸性或碱性，所以选择含有冰乙酸的乙腈水溶液作为提取剂。吸附剂的用量和种类对净化效果有直接影响，过量会吸附目标化合物，回收率降低，不足时吸附效果不佳，净化不完全，本实验考察不同质量C18、PSA、C18+PSA分散固相萃取粉末对100μg/Kg阴性加标样品回收率，结果显示使用C18净化时，质量为250mg有较好的回收率，5种化合物70.7%-127.5%之间，但有6种化合物回收率在小于65.7%，使用PSA净化时，质量为150mg有较好的回收率，5种化合物80.7%-131.2%之间，但有6种化合物回收率在小于45.7%，使用C18+PSA净化时，质量为200mg+75mg回收率范围80.6-107.5%，所以最终确定使用吸附剂C18+PSA（200mg+75mg）。2.2 基质效应用空白样品基质加标与纯溶剂标准评价基质效应，利用公式[17]计算基质效应（ME），(n=3)，A为空白基质配制的工作溶液，B为纯初始流动相配制的相同浓度的标准溶液，比值大于0为基质增强作用，比值小于0为基质抑制作用，|比值|≦20%可以认为受基质影响不显著，配置高中低（20、200、500μg/Kg）三种浓度的工作溶液及标准溶液，结果表明，不同11种化合物基质效应不同，强弱与目标化合物浓度也有关，其中二氟沙星（56.0~37.3%）、沙拉沙星（50.3%~27.4%）、奥索利酸（20.4%~19.5%）、氟甲喹（36.7%~24.3%）表现为基质增强作用，氧氟沙星（-32.3%~-21.7%）、培氟沙星（-30.3%~-17.7%）、诺氟沙星（-44.2%~-40.1%）、洛美沙星（-31.3%~-26.6%）、环丙沙星（-38.1%~-35.1%）、恩诺沙星（-30.5%~-27.4%）。表现为基质抑制作用，单诺沙星（－13.3%~7.8%），基质效应影响不显著。为准确测定各化合物含量，本实验采用基质匹配标准曲线进行校正。2.3质谱条件的优化质谱的锥孔电压、碰撞能量对11种喹诺酮类药物的裂解有重要影响。采用流动注射分析法对目标物单独进样，在正离子检测模式下进行一级质谱分析，得到最大响应值的母离子峰。在MS/MS模式下，找到该母离子对应的子离子，采用多反应检测模式（MRM）进行分析。11种喹诺酮类药物的优化质谱条件见表2.2.4液相条件的优化色谱条件主要是对流动相和梯度进行了优化。通过比较了甲醇、乙腈、水、0.1%甲酸作为流动相对各目标物的峰型及响应的影响。结果显示：选择乙腈-水作为流动相时各物质能够分离，峰型也不拖尾，而且大多数化合物在甲醇中有更强的响应，故有机相用40%甲醇-乙腈。在水相中加入0.1%甲酸可以提高离子化效率，改善峰型的对称性。所以最终确定流动相为40%甲醇-乙腈和 0.1%甲酸水溶液。针对11种化合物出峰时间，对梯度进行优化调整，优化后的梯度洗脱程序，使待测物尽可能性质相近的化合物得到有效分离。如图1[align=center]图1 1 1种喹诺酮类药物总离子流图[/align]2.5线性范围、检出限和定量限在本仪器条件下标准工作液进行测定，各目标化合物在2-100μg/L均有良好的线性关系，称取2g阴性样品加入10μL标准使用液，配置成5μg/Kg的加标样品，按本法处理测定，得到各化合物的平均信噪比S/N。以信噪比为3时所对应的浓度为本法检出限，以信噪比为10时所对应的浓度为本法定量限，结果见表3。[align=center]表3 11种喹诺酮类药物的线性回归方程、相关系数、检出限和定量限[/align][table][tr][td][align=center]化合物[/align][/td][td][align=center]线性方程[/align][/td][td][align=center]相关系数(r)[/align][/td][td][align=center]检出限（μg/Kg）[/align][/td][td][align=center]定量限（μg/Kg）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]恩诺沙星[/align][/td][td]Y=82018.5*X-18633.3[/td][td][align=center]0.9963[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]诺氟沙星[/align][/td][td]Y=70183.7*X-19621.7[/td][td][align=center]0.9961[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]培氟沙星[/align][/td][td]Y=78055.9*X-23284.3[/td][td][align=center]0.9957[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]环丙沙星[/align][/td][td]Y=71254.6*X-26876.2[/td][td][align=center]0.9964[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氧氟沙星[/align][/td][td]Y=51001.3*X-12512.4[/td][td][align=center]0.9973[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]沙拉沙星[/align][/td][td]Y=67581.1*X-11862.8[/td][td][align=center]0.9977[/align][/td][td][align=center]1.0[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]洛美沙星[/align][/td][td]Y=86076.5*X-8133.87[/td][td][align=center]0.9981[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]奥索利酸[/align][/td][td]Y=66252.9*X-17198.8[/td][td][align=center]0.9971[/align][/td][td][align=center]1.0[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氟甲喹[/align][/td][td]Y=67621.2*X-20909.4[/td][td][align=center]0.9952[/align][/td][td][align=center]1.0[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]单诺沙星[/align][/td][td]Y=38875.6*X-11684.4[/td][td][align=center]0.9991[/align][/td][td][align=center]2.0[/align][/td][td][align=center]6.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]二氟沙星[/align][/td][td]Y=78567.6*X-15286.1[/td][td][align=center]0.9974[/align][/td][td][align=center]1.0[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][/tr][/table]2.6回收率和精密度取阴性样品加入适量标准工作液，分别进行50.0μg/Kg，200.0μg/Kg，500.0μg/Kg 3个添加水平的回收率和精密度实验，每个添加水平做6个平行实验，其平均回收率和精密度结果见表4,。从表中结果可知，回收率范围在72.4%-107.6%，相对标准偏差为1.9%-8.1%，重现性良好，符合分析要求。[align=center]表4 11种喹诺酮类药物的回收率和相对标准偏差[/align][table][tr][td=1,2][align=center]化合物[/align][/td][td=2,1][align=center]添加水平（5.0μg/Kg）[/align][/td][td=2,1][align=center]添加水平(10.0μg/Kg)[/align][/td][td=2,1][align=center]添加水平(20.0μg/Kg)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]平均回收率[/align][align=center]（%）[/align][/td][td][align=center]相对标准[/align][align=center]偏差（%）[/align][/td][td][align=center]平均回收率（%）[/align][/td][td][align=center]相对标准[/align][align=center]偏差（%）[/align][/td][td][align=center]平均回收率[/align][align=center]（%）[/align][/td][td][align=center]相对标准[/align][align=center]偏差（%）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]恩诺沙星[/align][/td][td][align=center]79.8[/align][/td][td][align=center]3.1[/align][/td][td][align=center]85.4[/align][/td][td][align=center]4.8[/align][/td][td][align=center]79.9[/align][/td][td][align=center]3.9[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]诺氟沙星[/align][/td][td][align=center]87.0[/align][/td][td][align=center]2.6[/align][/td][td][align=center]89.5[/align][/td][td][align=center]5.5[/align][/td][td][align=center]82.8[/align][/td][td][align=center]4.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]培氟沙星[/align][/td][td][align=center]90.6[/align][/td][td][align=center]1.9[/align][/td][td][align=center]84.3[/align][/td][td][align=center]6.7[/align][/td][td][align=center]80.9[/align][/td][td][align=center]6.1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]环丙沙星[/align][/td][td][align=center]72.4[/align][/td][td][align=center]2.3[/align][/td][td][align=center]97.6[/align][/td][td][align=center]5.1[/align][/td][td][align=center]86.8[/align][/td][td][align=center]2.9[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氧氟沙星[/align][/td][td][align=center]81.7[/align][/td][td][align=center]7.7[/align][/td][td][align=center]104.2[/align][/td][td][align=center]2.8[/align][/td][td][align=center]93.4[/align][/td][td][align=center]7.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]沙拉沙星[/align][/td][td][align=center]96.4[/align][/td][td][align=center]8.1[/align][/td][td][align=center]92.2[/align][/td][td][align=center]4.6[/align][/td][td][align=center]81.7[/align][/td][td][align=center]5.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]洛美沙星[/align][/td][td][align=center]102.5[/align][/td][td][align=center]4.5[/align][/td][td][align=center]80.2[/align][/td][td][align=center]6.7[/align][/td][td][align=center]85.2[/align][/td][td][align=center]4.1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]奥索利酸[/align][/td][td][align=center]90.2[/align][/td][td][align=center]5.6[/align][/td][td][align=center]87.5[/align][/td][td][align=center]5.0[/align][/td][td][align=center]107.6[/align][/td][td][align=center]6.3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]氟甲喹[/align][/td][td][align=center]85.4[/align][/td][td][align=center]3.9[/align][/td][td][align=center]79.3[/align][/td][td][align=center]3.4[/align][/td][td][align=center]93.8[/align][/td][td][align=center]7.2[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]单诺沙星[/align][/td][td][align=center]80.8[/align][/td][td][align=center]4.2[/align][/td][td][align=center]86.5[/align][/td][td][align=center]3.1[/align][/td][td][align=center]88.9[/align][/td][td][align=center]6.9[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]二氟沙星[/align][/td][td][align=center]75.3[/align][/td][td][align=center]7.8[/align][/td][td][align=center]78.7[/align][/td][td][align=center]5.9[/align][/td][td][align=center]90.6[/align][/td][td][align=center]6.4[/align][/td][/tr][/table]2.7实际样品检测应用本方法，对本地市场销售的35批次蜂蜜样品进行检测，诺氟沙星检出1份，结果为40.8μg/Kg，检出率为2.9%；环丙沙星检出1份，结果为8.2μg/Kg，检出率为2.9%，其余项目均未检出。3.结论本文优化改进QuEChERS-UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS测定蜂蜜中11种喹诺酮类药物残留的方法，采用C18+PSA作为吸附净化剂，操作简单且，对蜂蜜基质有较好的净化效果和较好的回收率，优化的色谱条件，对11种化合物有较好的色谱分离，避免了共流出物对待测物的基质影响，甲醇乙腈混合流动相有利于提高喹诺酮类化合物在正离子模式下的响应，，研究对比了各化合物的基质效应，使用机制匹配曲线使操作简单，定性定量更加准确可靠，在1.0-100.0μg/L浓度范围内线性关系良好，相关系数r均大于0.995，回收率为72.4%-104.2%，相对标准偏差为1.9%-8.1%。本法适用于应于大批量快速测定蜂蜜中11种喹诺酮类药物残留工作的需要。

  • 迪马产品应用有奖问答10.13（已完结）——格列喹酮片

    迪马产品应用有奖问答10.13（已完结）——格列喹酮片

    10，抽取5个版友）；中奖名单：大川之子,纵横四海(注册ID：chuangu120)莫名其妙(注册ID：moyueqiu)吕梁山（注册ID：shih20j07）zengzhengce163(注册ID：zengzhengce163)m3071659（注册ID：m3071659）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610131507_613976_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610131507_613977_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================格列喹酮片方法：HPLC基质：标准溶液应用编号：101461化合物：格列喹酮固定相：Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18(2) 5u 150 x 4.6mm样品前处理：【有关物质】 取本品细粉适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1 ml中约含2 mg的溶液，滤过，滤液作为供试品溶液；精密量取1 ml，置100 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。色谱条件：检测波长：UV 310 nm 流动相： 磷酸二氢铵溶液（取磷酸二氢铵1.725 g，加水300 ml使溶解，用磷酸调p H至3.5±0.05）-乙腈（3:5） 洗脱方式：等度 进样量：20 ul文章出处：P813关键字：格列喹酮片，2010版中国药典，HPLC，有关物质，钻石二代，Diamonsil C18(2)谱图：有关物质http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/geleikuitong-dz.GIFhttp://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/geleikuitong-gs.GIF图例：1. 格列喹酮

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ，All Rights Reserved版权所有，未经书面授权，页面内容不得以任何形式进行复制