扩链剂

酮肟基硅烷扩链/交联低模量有机硅密封胶的制备及性能【作者中文名】 徐晓明 高传花 林薇薇 陶小乐 郑苏秦 钟文德 郑强 【文献出处】 有机硅氟资讯, 2008年 02期

文中所提外源性雌激素主要指“乙二烯雌酚、乙二基已烯雌酚、已烷雌酚”。 2011年9月14日，香港发布G/TBT/N/HKG/40号通报：立法委员会食品安全及环境卫生事务委员会文件：修订食品中有害物质法规（第132AF章），禁止奶粉、炼乳和复原奶中含有某些物质。 该文件建议修订有害物质法规（第132AF章），使其附表2中关于违禁物质的限制范围扩大至涵盖奶粉、炼乳和复原奶。目前第132AF章中"奶"的定义不包括奶粉、炼乳和复原奶，从风险评估角度来看，奶粉、炼乳和复原奶中含有禁止的外源性激素是不可接受的。婴儿配方奶粉是婴儿的主要食物来源，公众希望政府能够采取更加严格的控制措施，此次修订将填补这一漏洞。 该草案暂定2011年10月12日提交至立法委员会，拟生效日期暂定为2012年1月1日，意见反馈截至日期为通报后60天。

大连对疫情扩散事件追责：公安机关已对8名责任人采取强制措施，纪委监委已对20多名涉嫌失职渎职干部立案调查.

PCR相关经验分享PCR常见问题-分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性)问题1：无扩增产物 现象：正对照有条带，而样品则无 原因: 1.模板:含有抑制物，含量低 2.Buffer对样品不合适 3.引物设计不当或者发生降解 4.反应条件：退火温度太高，延伸时间太短 对策: 1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2.更换Buffer或调整浓度 3.重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物 4.降低退火温度、延长延伸时间 问题2：非特异性扩增 现象：条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带 原因： 1.引物特异性差 2.模板或引物浓度过高 3.酶量过多 4.Mg2+浓度偏高 5.退火温度偏低 6.循环次数过多 对策： 1.重新设计引物或者使用巢式PCR 2.适当降低模板或引物浓度 3.适当减少酶量 4.降低镁离子浓度 5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法 6.减少循环次数 问题3：拖尾 现象：产物在凝胶上呈Smear状态。 原因： 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg 2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策： 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数 问题4：假阳性 现象：空白对照出现目的扩增产物 原因： 靶序列或扩增产物 的交*污染 对策： 1.操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外； 2.除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管 及加样枪头等均应一次性使用。 3.各种试剂最好先进行分装，然后低温贮存 PCR引物设计的黄金法则 （转自tiangen）1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区2.引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA 聚合酶进行反应。3.引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。 GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为55~80℃，其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳。4.引物3′端要避开密码子的第3位。 如扩增编码区域，引物3′端不要终止于密码子的第3位，因密码子的第3位易发生简并，会影响扩增的特异性与效率。5.引物3′端不能选择A，最好选择T。 引物3′端错配时，不同碱基引发效率存在着很大的差异，当末位的碱基为A时，即使在错配的情况下，也能有引发链的合成，而当末位链为T时，错配的引发效率大大降低，G、C错配的引发效率介于A、T之间，所以3′端最好选择T。6. 碱基要随机分布。 引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，因这样会使引物在GC富集序列区错误引发。7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。 引物自身不应存在互补序列，否则引物自身会折叠成发夹结构（Hairpin）使引物本身复性。这种二级结构会因空间位阻而影响引物与模板的复性结合。引物自身不能有连续4个碱基的互补。 两引物之间也不应具有互补性，尤其应避免3′ 端的互补重叠以防止引物二聚体（Dimer与Cross dimer）的形成。引物之间不能有连续4个碱基的互补。 引物二聚体及发夹结构如果不可避免的话，应尽量使其△G值不要过高（应小于4.5kcal/mol）。否则易导致产生引物二聚体带，并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行。8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高，而3′ 端△G值较低。 △G值是指DNA 双链形成所需的自由能，它反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性，△G值越大，则双链越稳定。应当选用5′ 端和中间△G值相对较高，而3′ 端△G值较低（绝对值不超过9）的引物。引物3′ 端的△G 值过高，容易在错配位点形成双链结构并引发DNA 聚合反应。（不同位置的△G值可以用Oligo 6软件进行分析）9.引物的5′端可以修饰，而3′端不可修饰。 引物的5′ 端决定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。因此，可以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5′ 端修饰包括：加酶切位点；标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等；引入蛋白质结合DNA序列；引入点突变、插入突变、缺失突变序列；引入启动子序列等。 引物的延伸是从3′ 端开始的，不能进行任何修饰。3′ 端也不能有形成任何二级结构可能。10. 扩增产物的单链不能形成二级结构。 某些引物无效的主要原因是扩增产物单链二级结构的影响，选择扩增片段时最好避开二级结构区域。用有关软件（比如RNAstructure）可以预测估计mRNA的稳定二级结构，有助于选择模板。实验表明，待扩区域自由能（△G°）小于

随着国际贸易日益全球化，标准检测认证在推动产业链升级、规范市场发展、提升监管效能等方面重要性日渐凸显，机遇与挑战并存。从需求侧来看，一方面我国经济于温和复苏中展现韧性活力，居民物质消费水平升级、政策强化市场监管，检测认证在助推中国迈向“质量强国、制造强国”中的作用日益突出，另一方面存量市场竞争加剧，“买方市场”趋势凸显，客户形成决策时所考虑的因素较多，检测认证机构获客难度加大，具备前瞻性思维的机构已迈入数字化转型行列以顺应供需变革，借助数字化、AI等新兴技术增加与客户的触点、扩大客户基数，借助市场全量洞察获取新兴增量市场，摆脱当前低客单价窘境。　　探迹大数据研究院结合竞争格局、市场分布、技术革新、头部企业的动态信号及标杆案例，向企业主清晰深入地展示近期中国检测认证市场的变化方向和机会点，并进一步展望检测认证行业未来增长方向，形成以下5大观点：　　报告核心观点：　　观点1：外资龙头竞争与公信力风险加剧挑战，需由被动获客转向主动开拓，扩大客户基数谋求发展　　观点2：广东省成“发证&获证”企业数双料第一，工业行业获证数最多，普及率高，市场机会增加　　观点3：中小企业靠低价竞争维生，重点应以产品个性化、服务体验升级、提升销售力巩固竞争优势　　观点4：企业重点引入数字化技术，加强区域联动，提升资源储备与整合效益，实现业务增值，向“一站式”服务方向发展　　观点5：以数字化视角提效经营各环节，智能销售是检测认证机构突破行业竞争内卷，实现逆势增长的良药　　01检测认证行业竞争格局与机会点　　千禧年后，国内检测认证市场迈入高速推广阶段，到近年来向着专业化、智能化、规模化方向发展。尽管行业增速放缓，但从市场表现来看，工业类认证势头迅猛，不少新兴行业同样具备增长机会，以下将一一分析：　　行业变化 ：增长放缓，制造业撑起质量认证“半壁江山”　　在"机构管理办法”、“放管服’、“供给侧改革”要求下，中国检测认证从机构数量到获证组织再到认证组织数都得到了跨越式的发展。探迹大数据研究院市场洞察显示，截至2024年3月，全国共有68,455家检测认证服务相关企业，比2019年增加7344家，进一步加剧竞争态势，2024年市场规模有望突破5300亿元。　　据市场监督总局数据，截止2024年1月1日，全国共有有效认证证书约为376万张，其中证书获取量最高的地区为广东省，从地域来看，经济发展状况与行业规模呈正相关，GDP领跑全国的广东省认证发展潜力仍十分巨大。从下游行业来看，制造业撑起质量认证的“半壁江山”，企业获证证书比例最高的类型是自愿性工业产品，数量高达1,056,983，占比达57.81%，且伴随着高质量发展的宏观需求，工业企业认证未来发展空间不容小觑。　　中国制造业连续14年规模全球第一，通过数据可知当前检测认证行业服务的大方向仍是制造业，占比达到41%。竞争高度市场化，民营企业占比高达85.19%，龙头企业通过兼并收购布局新行业、新区域、新领域业务扩大市场影响力。　　行业地区分布 ：??广东为“发证&获证”双料第一　　据探迹大数据研究院数据显示，在省份分布方面，广东省为检测认证行业集聚地，2024年广东省检测认证企业数量最多，为16965家，成“发证&获证”企业数双料第一。　　从行业注册资本数据来看，注册资本在500万以下的企业占比超过33%，其中A类纳税人占比48%。行业整体水平偏低，机构存在乱象，导致待审核方对中小认证企业公信力存疑，企业经营管理风险极高。更多客户青睐大品牌、综合性实力强、技术更专业的大型机构，中小企业以迎合客户业务需求为主，客单价低，竞争能力较弱，亟需寻找新出路。　　行业竞争格局 ：??整体呈小散弱格局，“扎堆融资”扩大市占率　　行业靠低价竞争维生，呈现小散弱，受需求、技术和地理约束较大，有6成以上选择融资，在已透露具体融资金额的企业中，融资数量最多的是融资金额在5000万元以内的企业，占比26.6%。融资完成后，不少企业开启了新一轮投资扩建，主要用于研发团队扩展、市场推广、新品研发等。2024年获得政策扶持的检测认证机构中80.4%为高新技术企业，行业整体技术引进能力强、技术水平领先。　　公开数据显示，民营检测机构单份报告平均收入约为400元，低于业内600元的平均价格。低价竞争下，检测认证机构业绩和利润普遍面临下滑，现金流状况也不理想，面临被市场淘汰的危险，为规避这一情况，除设立有效评审机制外，企业应主动开拓市场，用数字化获客方式提升客户基数，开辟新的业绩增长点。　　02检测认证行业的机遇性与危机性　　行业驱动因素 ： 外围技术加速价值探索　　2013-2023年，各类仪器设备数量逐年增长，年复合增长率12.6%，设备数量增速超过机构数量增速。智能检测技术与装备应用的升级推动在线检测、计量等领域仪器仪表更新，制造装备与检验测试设备互联互通，实现自动化、智能化的检测流程，提高检验检测效率和精准度，同时提升人效。　　行业驱动因素 ：??公众意识及政府监管力度提升　　长期来看，社消总额仍将保持增长，人们对于消费品、食品等的质量、健康、性能要求日益提高，将倒逼生产企业提高产品质量，从而带来更多的检测认证需求。此外政府部门监管层面力度加大，通过强制认证、标准制修订、完善技术规范等手段助推企业通过检测认证提升产品质量和品牌信誉。　　行业制约因素 ：??外资竞争与行业内卷，挤压本土机构空间　　由于我国检测认证行业起步较晚，外国龙头企业以先进检测设备、雄厚的品牌力、主导国际标准等优势强势抢占市场，上百年的积累让本土机构很难在短期内赶超。此外同行恶意竞争，存在报告隐患，许多机构被取缔，经营风险加剧，同样损害了行业公信力。「活下来」才有可能「活得好」，为避免市场被蚕食殆尽，不少机构加快数字化商业模式创新，不断拓展服务边界以升级品牌力，引入数字化手段提升销售力，缩短从线索获取到成交转化的每个环节，进一步赋能行业精细化运营及降本增效，以期在多变市场环境中获取确定性。　　面临获客成本、运营成本与同行恶意竞争等挑战，为顺应合规发展趋势，不少企业短期内选择以数字化主动获客方式抢占市场，例如承接失效机构客群、筛选更多有新办资质与续办资质需求的客户，获取产品车间检测需求、量具校准需求的客户，扩大客群基数，见效迅速，开启数智竞争“新形态”。　　03检测认证行业突围之路　　检测认证机构面临市场过剩和同质化竞争加剧，业绩和利润普遍下滑，现金流状况也不理想，区域能力过剩，新客户获取较为困难。机遇和挑战并存，这些困境迫使民营检测认证机构主动探索，进行自我革新和转型。借力数字化提升服务和核心竞争力，增加业务收入和市场份额，主动求新求变的企业仍在脱颖而出。　　行业趋势洞察一 ：??创新经营方式，创造业务价值　　业务升级改造。企业应主动开拓B端合作，提升业务增值价值，尝试跨行业、跨区域经营，向“一站式”服务以及“一体化”解决方案方向发展。不断提升市场友好度与市场粘性。　　行业趋势洞察二 ：??巩固数字化竞争力，关注新兴行业增量市场　　销售力是检测认证机构最强劲的增长引擎，代表着机构发展的未来。靠广撒网的形式并不能带来更多转化，而是要通过精细化运营才能精准获客，让对的产品找到有需求的客户，才是增长的最终方向。企业盈利能力弱，巩固核心竞争力更需要做好销售渠道建设，短期内构建起销售力。探迹销售云能帮助机构实现高性价比获客、提升触达客户能力和销售团队搭建能力，还能够承接失效机构业务，一键触达异常证书客群，还可结合机构撤销时间、证书暂停日期、违规认证处罚等维度精准筛选，更有明确推荐信息了解沟通切入点。　　传统检测认证领域增长受限，不少机构选择新能源、生物技术等高成长细分赛道锻造自身长板，推动业务增速上行。或使用探迹体系认证版率先开发具备市场潜力的检测项目，快速形成符合新兴赛道检测认证要求的规模化产能，开拓业务范围，为机构打造强大核心竞争力。　　行业趋势洞察三 ： 变革商业模式　　市场需求锐减、老客户流失，只靠被动获客势必成为发展瓶颈。检测认证机构的数字化程度将会成为后期竞争淘汰的重要筹码，数字化商业模式主要体现在价值创造、经营、支持和获取四个环节的创新，通过良好的产品基础、出色的销售团队、良好的内部运营等进行全方位规划才能提升绩效和运营水平。　　行业趋势洞察四 ： 智能销售降本增效　　随着竞争白热化，具备高性价比的获客能力是检测认证机构实现业绩增长的关键所在，对补齐短板、锻造长板、建立新模式以突破经营各关键环节的发展桎梏提供坚实支撑。此外，以数字化手段优化经营各环节，短期内实现业绩和销售管理水平的提升，企业间的差距也由此拉开。　　2024年各行各业将迎来复苏新阶段，面对不确定与未知，检测认证企业更需意识到保持定力的重要性，外部的困难也是求新取变的内在驱动力，变革既需要决心，更需要方法，对于检测认证这样一个上百年的成熟产业，不可能一朝一夕崛起为龙头，销售环节的效益最大化是目前企业突出内卷重围的重要手段，有了业绩快速增长的今天，才有本土新势力弯道超车的明天。[size=14px][color=#707d8a][ 来源：国际在线 ][/color][/size][size=14px][color=#707d8a][i]编辑：张圣斌[/i][/color][/size]

DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶的作用下，以单链为模版，根据碱基互补配对原则复制成新的单链，与模版配对成为双链分子挎贝。在体外实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计与模板DNA的5’端结合的两条引物，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制，多次重复“变性解链—退火—合成延伸”的循环就可以以几何级数大量扩增特定的基因。

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法，1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PCR则是源于由Saiki和Mullis等人于1988年发表在Science上的一篇论文，Mullis当时服务于Perkin Elmer（PE）公司，因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。后来PE被Applied Biosystems Inc.（ABI）公司收购、分拆、再转卖，而PCR的专利和倍受信赖的PCR仪器生产和销售就留在ABI名下。到如今，PCR方法愈发趋向自动化，并从中衍生出更多的新技术方法，可以说，PCR技术是支撑现代分子生物学发展的一块重要基石。这种技术的广泛应用催生了一个庞大的市场，多个公司均有各种类型的商品化PCR仪出售。PCR的专利目前依然掌握在ABI和Roche（罗氏）两大公司手中，去年业界颇为引人瞩目ABI诉MJ公司侵犯侵犯PCR仪知识产权案最终以MJ败诉并宣布破产、最终被Bio-rad收购暂告一段落。其后还会不会有后继的故事还需拭目以待。 PCR原理 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶的作用下，以单链为模版，根据碱基互补配对原则复制成新的单链，与模版配对成为双链分子挎贝。在体外实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计与模板DNA的5’端结合的两条引物，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制，多次重复“变性解链—退火—合成延伸”的循环就可以以几何级数大量扩增特定的基因。 发现耐热DNA聚合酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该类酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。 从PCR原理可以看出，PCR仪的关键是升降温的步骤。现在偶尔还能听到一些前辈们笑谈早年的PCR实验如何在3个水浴锅中完成的趣闻。经过不断改进，今天的PCR已经越来越完善和智能化。出于市场推广的战略需要，各厂家的PCR仪型号不同，着力宣传的技术指标和参数也不尽统一，编者在这里简单列出选购时我们认为应该考虑的常用指标，希望有助于大家选购PCR仪的选购技巧。PCR仪介绍及其选购 PCR仪的种类总体来说可以分为两大类：PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪，普通的PCR扩增仪又衍生出带梯度PCR功能的梯度PCR仪、和带原位扩增功能的原位PCR仪等等。1996年由ABI公司首先推出将扩增和检测融为一体的实时荧光定量PCR仪，此后很多公司如Eppendorf、ROCHE、Corbett、MJ等等都先后推出不同款式的定量PCR仪。

一、实验目的 本实验目的了解PCR反应用来扩增DNA 特异性片段实验的的基本原理、实验方法和操作步骤，熟练掌握PCR反应基本体系配制和实验条件的设定。 二、实验原理 PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域，它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分析，还可用于突变体和重组体的构建，基因表达调控的研究，基因多态性的分析，遗传病和传染病诊断，肿瘤机制探查，法医鉴定等方面。PCR技术已成为方法学上的一次革命，它必将大大推动分子生物学各学科的研究发展。PCR是一种利用两种与相反链杂交并附着于靶DNA两侧的寡核苷酸引物经酶促合成特异的DNA 片段的体外方法，由高温变性，低温退火和适温延伸等几步反应组成一个循环，然后反复进行，使目的的DNA 得以迅速扩增，主要过程如图6。置待扩增DNA 于高温下解链成为单链DNA 模板;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温条件下分别与目的片段两侧的两条链互补结合;DNA聚合酶在72 ℃将单核苷酸从引物3"端开始掺入，沿模板5"—3"方向延伸，合成DNA 新链。由于每一循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，所以PCR 产物以指数方式增加，经25—30次周期之后，理论上可增加109倍，实际上可增加107倍。PCR技术具有操作简便、省时、灵敏度高特异性强和对原始材料质量要求低等优点，但由于所用的TaqDNA 聚合酶缺乏5"—3"核酶外切酶活性，不能纠正反应中发生的错误核苷酸掺入，估计每9000个核苷酸会导致一个掺入错误，不过Innis M·A 发现，错误掺入的碱基有终止链延伸的作用倾向，使得错误不会扩大。PCR技术应用广泛，不可能有这样一套条件满足所有的实验，但本实验所介绍的方法可适应于大多数DNA 扩增反应，即使有的不适应，至少也确定了一个共同的起点，在此基础上可以作多种变化。不过下列因素在实验应用时应予以特别注意，以求取得满意结果。1. 模板：单、双链DNA 和RNA都可以作为PCR样品，若起始材料是RNA，须先通过逆转录得取第一条cDNA。虽然PCR 可以仅用极微量的样品，但为了保证反应的特异性，一般宜用ng 量级的克隆DNA，ug 级的染色体DNA，待扩增样品质量要求较低，但不能混合有任何蛋白酶、核酸酶，Taq DNA聚合酶的抑制剂以及能结合DNA 的蛋白质。2. 引物：引物是决定PCR 结果的关键，下列原则有助于引物的合理设计。(1)尽可能选择碱基随机分布，GC 含量类似于被扩增片段的引物，尽量避免具有多聚嘌呤、多聚嘧啶或其它异常序列的引物。(2)避免具有明显二级结构(尤其是在引物3"—末端)的序列。(3)防止引物间的互补，特别要注意避免具有3"末端重叠的序列。(4)引物的长度约为20个碱基，较长引物较好，但成本增加，短引物则特异性降低。(5)引物浓度不宜偏高，过高易形成二聚体，而且扩增微量靶目标或起始材料是粗制品，容易产生非特异产物。3. 缓冲液：PCR缓冲液的变化通常会影响扩增结果，特别是MgCl2，其浓度对专一性和扩增量有重大影响，通常最适浓度为1.5 mM左右(每种dNTP 的浓度为0.2 mM时)，浓度过高，使反应特异性降低;浓度过低，使产物产量降低。四种dNTP 浓度通常每种都是0.05 mM—0.2 mM。过高的浓度会导致错误掺入，浓度过低，则影响反应产物的产量。四种dNTP浓度应大体相同，其中一种若偏高，会诱发错误掺入，降低合成速度，过早终止延伸反应。另外dNTP 能与Mg2+结合，使游离Mg2+浓度降低，所以如果dNTP 的浓度有很大改变，MgCl2浓度也要改变。Taq聚合酶是一种耐高温聚合酶，用量通常是1—4 单位/100 ul，浓度过高，产生过多的非特异片段。4. 循环参数：PCR 循环是把起始材料加热到90—95 ℃，保持短时间使双链DNA 解链;然后冷却至37—55 ℃，使引物与模板退火;再升温至70—75 ℃，在TaqDNA聚合酶的作用下掺入单核苷酸，使引物沿模板延伸。解链不完全是导致PCR 失败的最主要原因。用DNA扩增仪时，94 ℃保持1 分钟可使模板的起始物完全变性。若用低于94 ℃的条件，则应适当延长时间。引物与模板退火温度由引物的长度及G+C含量决定。适时间退火(1—2)分钟有利于产物的特异性。引物延伸在70—75 ℃保温的时间可根据扩增DNA片段的长短来调节。正常情况下，每分钟可延伸1 Kb 的长度，常规PCR 一般为25—40个循环，若循环加长，则由于酶活性降低，聚合时间延长，引物及单核苷酸减少等原因，反应后期容易产生错误掺入，所以在满足产物得率前提下，应尽量减少周期次数。三、材料(一)仪器与器皿PRC 扩增仪(PE2400)，琼脂糖凝胶电泳设备，微量取样器，一次性指形管，凝胶成像仪 玻片(二)试剂与材料1. 琼脂糖凝胶电泳试剂1)电泳缓冲液：Tris—乙酸0.04 mol/L PH8.0 0.002 mol/L EDTA2)加样缓冲液：0.25%溴酚兰40% w/v蔗糖3)溴化乙锭溶液：0.05 mg/ml溴化乙锭/水4)琼脂糖2. TaqDNA 多聚酶3. 5′反应缓冲液：125 mmol/L Tris-HCl pH8.2;10 mmol/L MgCl2;0.5 mg/ml gelatin;125 mmol/L(NH4)2SO4; Formamide 25%4. 混合dNTP 液(dATP dGTP dTTP dCTP各2 mmol/L)5. DNA 模板(每2 ml 中含有10 fg 待扩增DNA)6. 引物 1 (25 pmol/L)，5’加入EcoRI 粘性末端碱基7. 引物 2 (25 pmol/L)，5’加入HindIII 粘性末端碱基8. 无菌水四、实验步骤1. 按顺序在200 ml 指形管中加入以下试剂与样品：(因购入的试剂批次不同，加样时有 所差别，以预实验结果为准。)1) ddH2O 74 ml2) 10′Buffer 10 ml3) MgCl2 6 ml(10′Buffer 如已加入MgCl2，则不必加)4) dNTP 2 ml5) 引物1 2 ml6) 引物2 2 ml7) 模板 2 ml8) Taq DNA聚合酶2 ml总体积共100 ml(也可以配成40 ml 的反应体系)2. 在PCR 扩增仪上按以下反应条件编入程序：(以下为参考值，因扩增的DNA片段不同，各类PCR 扩增仪程序设定各不相同，编程过程视扩增的DNA 片段的要求及仪器而定参数，见示范。)预变性 94 ℃ 2 分种循环条件(30 次)变性 94 ℃ 40 秒复性 55 ℃ 35 秒延伸 72 ℃ 2 分10 秒延长延伸 72 ℃ 7 分钟编完反应程序，置反应管于PCR扩增仪的反应孔中，开动机器，扩增循环反应开始。3. PCR 扩增完毕，配2%琼脂糖凝胶，取15 ml 反应液及相适应的PCR mark 分别点样， 加样缓冲液应为40%W/V 蔗糖，电泳观察结果。4. 凝胶成像仪或紫外灯下观察实验结果，是否已扩增到实验设计的DNA 片段。注意事项： 要想得到预期的实验结果，PCR的反应条件和很多参数有着密切的关系，都应引起注意。在实验设计中我们要考虑到模板浓度的大小，设计引物时也要主要引物长度适当以及恰当的GC含量，在PCR体系中引物浓度，dNTPs浓度相对要均衡，选取的taq enzyme，缓冲液的离子含量也是影响产物的结果，另外就是要根据产物大小设定适当的变性时间，退火温度及时间，延伸的时间。

新购置了用于橡胶分析的密炼机、开炼机、混炼机和平板硫化机，但是实验室需要的条件一直无法找到，找厂家也不能拿到满意的答复，郁闷中~这些仪器的功率有多大啊，这些是实验室设计中需要的，找不到，找不到，郁闷中~

过了冬至，开始“数九”。近几天北方的大幅降温伴随着降雪，更增添了一份冬日气息。上世纪八九十年代，北方城市里大雪刚停，马路上热火朝天的除雪场面便成了一道风景：不同单位职工拿着扫帚扛着铁锹，“各扫门前雪”。大家共同努力，既改善了环境，又锻炼了身体，人们可能不太在意，受益良多还有精神上的充实。　　时过境迁，如今的街头除雪，效率和质量皆不逊于、甚至超过了从前的群众劳动。经济发展、城市扩容、人口流动、分工细化，带来了生产方式剧变，我们也不必再沿袭从前的生活模式。不过，专业化分工遍地开花，同时使产业链迅速扩大，让生产者和消费者之间产生的距离越来越远，由于回溯体系不健全，我们并不知道吃下的一粒米还有多少农药残留，也不知道喝下的某一批次蒙牛纯牛奶是否会黄曲霉毒素超标。　　对于这些产品的约束主要来自于监督和惩罚机制。假如机制足够健全，企业的责任就可以精确追溯，其无视食品安全付出的代价高到难以承受，自然会站在与消费者相同的立场之上，责任与逐利也可以在市场经济条件下实现统一。而目前频发的食品安全问题凸显出，我们只在形式上逐步实现了市场经济的专业化分工，而其背后的交易准则还未真正建立，以至于缺少诚信的基础。　　“三聚氰胺事件”之后，重新制订乳品安全国家标准成为共识。新国标出台后，标准偏低引起舆论哗然，《人民日报》还曾刊文质疑新国标被国内部分乳企“绑架”：在乳品新标准制订过程中，一些参与专家称，“内部待议稿上显示，巴氏奶标准初稿的起草单位是蒙牛乳业集团，生鲜乳标准由伊利集团起草，酸奶标准则由光明集团起草”。今年4月，中国奶业协会发出倡议，“保食品安全，不哄抬物价”。　　颇具讽刺意味的是，年终岁尾，蒙牛乳业(眉山)有限公司生产的一批产品被检出黄曲霉毒素M1超标140%；三元、伊利两家奶业巨头计划部分乳制品从明年元旦起开始涨价，有形成“价格联盟”之嫌。　　中国乳业这一年的波澜不断，从侧面反映出我国建设市场经济的诸多不易。即便在这样一个竞争比较充分的行业里，生产链条某环节的监督保障缺失、大企业操纵市场等情况也会时常出现，制约发展。

根据国内外重大火灾数据统计调查分析，发生重大火灾的起因及轰燃与建筑物内大量使用易燃性装饰材料有关。据统计，50%以上的原因是由于纺织品不阻燃而引起。特别是窗帘，帷幔、墙布等垂直悬挂的纺织品，一旦起火，极易形成火势上下迅速蔓延扩散。中国消防法明确规定，酒店等大型公共场所的窗帘必须具有B1级的阻燃功能。该阻燃标准对阻燃窗帘的基本要求是：l 不影响窗帘的手感，垂感；l 对人体无害无毒，保持窗帘原有风格；l 阻燃的水洗有效性，一般要求水洗10次以上。【阻燃窗帘的特征及实现方法】阻燃窗帘的主要特征是具有很高的极限氧指数的窗帘。窗帘的密度越高，纤维的毛羽越小，窗帘的阻燃效果越好。窗帘的阻燃效果的工艺实现途径：l 纤维的改性（用改性阻燃纤维是最好的选择，具有永久性阻燃的特征）；l 后整理助剂（常用的阻燃剂有：含磷化合物、含磷和氮化合物、铵盐、金属盐、硼酸及其化合物、氧化锆、锑等金属氧化物等）；l 阻燃贴合涂层【阻燃窗帘的测评点】l 着火性：自燃点，闪点、氧指数等；l 燃烧速度：火焰扩散速度，炭化长度面积、火焰滴定等；l 延燃性：续燃时间、残燃时间等；l 发热性：燃烧热能、温度等；l 毒性：气体成分

有些人喝了酒面红如关公，有些人却丝毫没有改变，有人说喝酒红脸是好事，代表血液循环好，也有人说面不改色的人才是真正能喝酒的人，究竟红脸和白脸，哪种情况更健康呢? 脸红的原因 很多人以为是酒精导致的，其实不然，是乙醛引起的。乙醛具有让毛细血管扩张的功能，而脸部毛细血管的扩张才是脸红的原因。所以喝酒脸红的人意味着能迅速将乙醇转化成乙醛，也就是说有他们有高效的乙醇脱氢酶。不过我们不能忘了还有一种酶，乙醛脱氢酶。 喝酒脸红的人是只有前一个酶没有后一个酶，所以体内迅速累积乙醛而迟迟不能代谢，因此会长时间涨红了脸。不过大家都有经验，当1-2个小时后红色就会渐渐腿去，这是靠肝脏里的P450慢慢将乙醛转化成乙酸，然后进入TCA循环而被代谢。 哪种脸更伤肝? 有一点要提醒大家，喝酒脸红的人其实不容易伤肝脏，而喝酒脸白的人特别容易伤肝脏。红脸的人大家一般少劝酒，因此喝得少，酒后发困，睡上15-30分钟就又精神抖擞了。而白脸的则往往不知自己的地线，在高度兴奋中饮酒过量，直到烂醉。他们体内的酒精由于没有高活性的酶处理而发生积累，导致肝脏损伤。酒精性肝损伤一般只发生在这些人身上。红脸的人可以连续几餐即便喝吐了也喝酒，而白脸的人需要更多时间的休息，因为酒精的代谢需要一两天的时间。 顺便提一下，根据有关研究江浙两省的人(古代吴国和越国的后代)似乎是红脸基因的起源地，也就是说这些人多数带有高活性的乙醇脱氢酶。而北方人多数是白脸型的。那么如果你是北方出生的，又是红脸型的，说明什么呢?答案是明显的，因为红脸基因是显性基因。 “白脸”更能喝? 那么喝酒比较厉害的人是怎么回事呢?这些人往往越喝脸越白，到一个点突然不行了，烂醉如泥。那是因为这样的人高活性的乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶均没有，主要靠肝脏里的P450慢慢氧化(因为P450是特异性比较低的一群氧化酶)。那么，这样的人为什么会给人很能喝酒的感觉呢?那时因为他们靠体液来稀释酒精，个头越大感觉越能喝酒。在正常情况下，酒精浓度要超过0.1%他们才会昏迷，对大多数南方人来说是半斤白酒，而北方人由于体型大，可以喝到8两到一斤白酒。但不管什么人，如果他是脸越喝越白型的，最好不要超过半斤，不然有急性酒精中毒的可能性。 如果一个人即有高活性的乙醇脱氢酶又有高活性的乙醛脱氢酶会怎样呢?他/她就是传说中的酒篓子。如何判断他/她是不是酒篓子呢?看是不是大量出汗。因为如果两个酶都高活性，酒精迅速变成乙酸进入TCA循环而发热，所以大量发热而出汗。碰到这样的人你只能自认倒霉，就是十个八个正常人也斗不过他。好在这样的人不多，大概10万分之一左右吧。

仪器简介PCR是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类。PCR技术原理该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链。◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆列举部分仪器的个别参数，仅供参考：技术参数：样品台容量:96X0.2ml PCR管、 96孔PCR板、8排/12排PCR管工作原理：TE半导体系加热致冷技术屏幕：彩色触摸屏（5.7英寸）温度控制范围：4℃-105℃ 升降温速度：≥4.0℃/秒 温度均匀性：≤0.3℃ 温控精度：≤0.1℃ (@55℃) / ≤0.2℃(@90℃以上)温度显示精度：0.1℃程序温控方式：Block模式和Tube模式变温速度可调范围：0.1-4.0℃程序可储存数：最大可存250个程序，可通过U盘扩展存贮最大循环数：99循环，可套嵌两级，可做巢式PCR实验时间递增/递减：0-9分59秒，可做Long PCR实验温度递增/递减：0.1-9.9℃，可做Touch down实验断电保护/暂停功能：有Soak功能：有运行状态显示功能：[color=

学会红脸白脸集一脸 　　在京剧里，演员面部化装，以各种人物不同，在脸上涂有特定的谱式和色彩以寓褒贬。其中红色表示忠勇，黑色表示刚烈，白色表示奸诈。不同的脸谱显示了不同的角色特征。关系学中红白脸相间借用京剧脸谱的名称，但它要比京剧中简单化的脸谱复杂得多。 　　任何一种单一的方法只能解决与人相关的特定问题，都有不可避免的副作用。对人太宽厚了，便约束不住，结果无法无天；对人太严格了，则万马齐喑，毫无生气，有一利必有一弊，不能两全。 　　高明的企业领导深谙此理，为避此弊，莫不运用红白脸相间之策。有时两人连档唱双簧，一个唱红脸，一个唱白脸；有更高明者，可像高明的演员，根据角色需要变换脸谱。 　　会单打独唱红白脸相间术的高手要算清朝的乾隆皇帝了。乾隆，靠着人才济济的智力优势，靠着康熙、雍正给他奠定的丰厚基业，也靠着他本人红白脸相间的韬略雄才，做起了中国历史上福气最好的大皇帝。他在位61年。他晚年写诗自诩的是“十全大武功”，用汉、满、蒙、回四体文字把《十全记》镌刻在避暑山庄里乐滋滋地自我品尝，这些还不够，后来干脆称自己是“十全老人”。 　　上述只是他的武功。他的文治也是两手齐备，红白脸间有。他会唱红脸，对知识分子采用怀柔政策。他规定见了大学士，皇族的老老少少们都要行半跪礼，称“老先生”。如果这位大学士还兼着“师傅”，就称之为“老师”，自称“门生”或“晚生”，如此种种，不胜枚举。 　　乾隆对这些知识分子真是恩爱有加，他甚至亲笔谕旨：“儒林是史传所必须写入的，只要是经明学粹的学者，就不必拘泥于他的品级。像顾栋高这一类人，切不可使他们淹没无闻呵！”遵皇帝旨意，史馆里特设《儒林传》名目，来专门编写大知识分子的学术生平。平时，乾隆对上送的奏章，凡见到鄙视“书生”、“书气”的议论总是要予以批驳，说：“修己治人之道，备载于书，因此，‘书气’二字，尤可宝贵，没有书气，就成了市井俗气。”而且还说：“我自己就天天读书论道，因此，也不过书生！”为笼络读书人，竟达到如此境地，红脸唱得似乎前无古人。

申请了简易扩项，再申请扩项，需要间隔多长时间有要求吗？因有急需要用的项目，简易扩项和扩项可以同时申请吗?

公司最近想开展中短链氯化石蜡的检测扩项，器。请教大家一下具体方法和仪器类型

莲子的功效与作用：[color=#333333]莲子，为莲的干燥成熟种子，分布于我国南北各省。含有丰富的蛋白质、淀粉、磷脂、生物碱、类黄酮以及多种维生素等营养保健成分，具有补脾止泻，止带，益肾涩精，养心安神之功效。而且其铁的含量也非常丰富，具有治疗贫血、减轻疲劳的作用。[/color][b]1.清热降火[/b]莲子能够帮助清热降火。特别是对于心火旺盛的人来说，吃莲子能够有效降心火、清心安神，另外对于因为上火引起的口舌生疮也有很好的调理作用。[b]2.降血压[/b]莲子能够帮助降低血压。莲子中含有的大量的矿物元素，其中以钾元素最多，钾元素能够有效维持心脏功能，参与身体的新陈代谢，降低中老年人中风的危险，另外还能够帮助扩张外周血管，有效帮助降血压。[b]3.促进睡眠[/b][color=#333333][/color]莲子能够帮助促进睡眠。莲子中含有的维生素、微量元素丰富，具有很好的调节情感、放松情绪的作用，经常吃莲子能够有效镇静安神，促进入睡，提高睡眠质量。经常失眠、多梦的人可以在睡前吃莲子来帮助促进睡眠。[b]4.改善肌肉弹性[/b]莲子能够有利于保持肌肉的伸缩性。莲子中含有大量的蛋白质、脂肪以及微量元素、荷叶碱等物质能够有效促进凝血，维持肌肉的伸缩性。[b]5.补精[/b]莲子能够有利于精子的形成，提高男性的生育能力。莲子中含有的丰富的磷是细胞核蛋白的主要组成部分，能够帮助机体进行正常的代谢，有效维持酸碱平衡，促进精子[color=#333333]的形成。[/color]

近日我参加了国联资源网在博鳌开的一个链商节聚会，在这里谈谈自己对链商节的感受。在链商节主论坛上，中国人力资源研究会副秘书李直上台开口第一句话便是：“上台之前我发现自己忘记了带领带，我带的领带是中国设备协会会长借给我的，我要谢谢他！这其实就是链商节的意义，让互相不认识、不熟悉的人，通过链商节建立了情谊，成为了朋友。”李直的亲身经历让我感受颇深，沟通交流不仅仅局限于语言上，还可以是微不足道的一个举动。其次的感受就是了解了很多不同行业的信息。记得当时国家发展改革委员会宏观院原副院长刘福垣说：“中国房地产行业还有很多的发展空间，给农民工盖的房子都还没盖起来呢！，在未来三五十年，房地产的发展要靠农民工住房支撑。”，现场微博墙上一位博友说，“农民工的住房是房地产的又一颗救命稻草！”我是做建材生意的，以前对房地产行业也比较关心，但是没想到农民工住房对房地产业影响也会有这么大，让我十分感慨啊！ 第三个感受就是，链商节的联谊晚宴活动是建立交情的好机会。参加宴会的多是企业一把手，通过上台表演节目，酒会上的觥筹交错之间就把交情建立了起来，我们一群人当中，有一个算是我们行业下游公司的老总，因找不到销售渠道手里积压了一些库存。在晚宴的酒桌上，找到不少的买家，虽然没有签订协议，但是交情却已经建立起来了。最后再说一下，举办链商节的海南博鳌真不错，我是北方人，海南的景色、温度、还有人文风情都让我觉得很惬意，算是我一年之中难得的一个休闲商务的机会了。

肽 链 设 计简 介 　　多肽是复杂的大分子, 因此每条序列在物理和化学特性上都是独特的。有些多肽合成很困难, 另有些多肽虽然合成相对容易, 但纯化困难。最常见的问题是许多肽不溶于水溶液, 因此在纯化中, 这些疏水肽必须溶于非水溶剂中，或特殊的缓冲液, 而这些溶剂或缓冲液很可能不适合应用于生物实验系统, 因此研究人员不能使用该多肽达到自己的目的, 因此下面是对于研究人员设计多肽的一些建议。合成困难肽的选择1. 减少序列长度　　由于肽的长度增加导致粗产物纯度降低, 小于15个残基的肽能较容易得到。当肽链长度增加到20个残基以上时, 正确产物的量就是一个主要考虑的问题。在许多实验中, 降低残基数低于20往往能得到更好的结果。2. 减少疏水残基数　　疏水残基占明显优势的肽，尤其在距C端7-12个残基的区域，常常引起合成困难。这通常被认为是由于合成中形成b折叠片，这样产生不完全配对。在这些例子中, 用1个或几个极性残基置换, 或加入Gly或Pro以打开肽结构可能会有帮助。3. 减少"困难"残基　　有多个Cys、Met、Arg、Try残基通常难于合成。Ser通常可作为Cys的非氧化替换。改善可溶性的选择1. 改变N端或C端　　对于酸性肽 (即pH值为7时带负电荷), 我们推荐乙酰化(N端乙酰化, C端保持自由羧基), 以增加负电荷。而对于碱性肽 (即pH值为7时带正电荷), 我们推荐氨基化 (N端自由氨基, C端氨基化), 以增加正电荷。2. 缩短或加长序列　　某些序列含有大量疏水氨基酸, 如Trp、Phe、Val、Ile、Leu、Met、Tyr和Ala等, 当这些疏水残基大于50%通常难于溶解。为了增加肽的极性, 加长序列可能会有帮助。另外一种选择是通过减少疏水残基的方法降低肽链的长度以增加极性。肽链极性越高, 就越有可能溶于水。3. 加入可溶性残基　　对于某些肽链而言, 加上一些极性氨基酸能改善可溶性。我们推荐给酸性肽的N端或C端加上Glu-Glu。给碱性肽的N端或C端加上Lys-Lys。如果不能加入带电荷基团, 可以将Ser-Gly-Ser加到N端或C端。但是, 肽链的两端不能改变时, 该方法则不可行。4. 通过置换一个或多个残基改变序列　　肽链的可溶性可通过改变序列内某些残基来改善。通常单个残基的替换就能显著改善其疏水性, 而这种改变通常是较为保守的, 如用Gly代替Ala。5. 通过选用不同"框架"来改变序列　　如果能用某个序列来制备许多长度一定的相互串连或重叠的多肽, 则可以用改变各个多肽起始点的方法来实现改变序列的目的。其原理是: 在同一多肽的亲水和疏水残基间创造新的更好的平衡, 或将同一多肽内的"困难"残基(比如2个Cys)放进两个不同的多肽而不是集于同一分子内。特殊氨基酸残基对肽链特性影响的一些要点　　对于由遗传密码编码的二十种氨基酸及蛋白质中常见的其他氨基酸, 按其特性可以用几种方法进行分类。下面列出了最常见的氨基酸的三字母代码和单字母代码，以及不同的分类方法。氨基酸的代码丙氨酸　　　Ala　A　　甲硫氨酸　　　Met　M半胱氨酸　　Cys　C　　天门冬酰胺　　Asn　N天门冬氨酸　Asp　D　　脯氨酸　　　　Pro　P谷氨酸　　　Glu　E　　谷氨酰胺　　　Gln　Q苯丙氨酸　　Phe　F　　精氨酸　　　　Arg　R甘氨酸　　　Gly　G　　丝氨酸　　　　Ser　S组氨酸　　　His　H　　苏氨酸　　　　Thr　T异亮氨酸　　Ile　I　　 缬氨酸　　　　Val　V赖氨酸　　　Lys　K　　色氨酸　　　　Trp　W亮氨酸　　　Leu　L　　酪氨酸　　　　Tyr　Y蛋白质中常见的其他氨基酸羟脯氨酸胱氨酸焦谷氨酸肽链设计中常见的其它氨基酸1. α-氨基丁酸 (Cys的置换物)2. β-氨基丙氨酸 (Ala的直链异构物)3. 正亮氨酸 (亮氨酸的线性侧链异构物)氨基酸按其亲水性、疏水性可分亲水性氨基酸: D, E, H, K, Q, R, S, T, 羟脯氨酸, 焦谷氨酸疏水性氨基酸: A, F, I, L, M, P, V, W, Y, α-氨基丁酸, β-氨基丙氨酸, 正亮氨酸C和G属于未定类其它的分类方法在温和条件下氧化的氨基酸--C, M脱氨或脱羧基的氨基酸--N, Q蛋白制备中易降解的氨基酸--M, W带正电荷的氨基酸--K, R, H带负电荷的氨基酸--D, E　　当下列疏水氨基酸, 即Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Met, Phe, Trp存在于C端时,通常引起合成及纯化的困难, 这主要是因为它们难溶于水。如果您看见这些氨基酸, 即Cys、His、Pro 普遍存在于序列中或在C端时, 则在常规的固相合成中需要特殊的固相支持物。在用普通的固相支持物时, 在二肽阶段, 由于环化引起的损失非常高。在许多例子中, 甚至导致所有链从固相支持物上损失, 但是若C端为氨基化Pro时, 或者用特殊的PEG-聚苯乙烯固相支持物时, 能使产量大为提高, 则不会发生这种现象。

昨天上午，北京新冠肺炎疫情防控工作领导小组第一〇七次会议暨首都严格进京管理联防联控协调机制第五十八次会议召开，研究调度疫情防控工作。会议强调，要继续抓好社区防控，严格集中观察点规范管理，统筹做好健康监测、核酸检测、安全管理、人文关怀等工作。严格落实校园防疫措施，保障师生安全健康。各级各类医疗机构发挥“探头”作用，加强各类传染病监测，同步抓好院感防控。抓严抓实冷链食品监管，从业人员严格按规范进行操作，定期开展核酸检测，消毒措施要严格到位，所有入市交易冷链食品必须纳入追溯平台。要加强节日期间宣传提示，引导市民和游客文明健康旅游，自觉遵守防疫规定，科学佩戴口罩、保持社交距离。会议强调，要坚持应接尽接和自愿原则相结合，全面推进疫苗接种提速扩面。各部门盯紧重点人群、围绕重点行业全面摸排、查漏补缺，提升疫苗接种完成率。

怎么将标尺范围扩大？比如将氢谱从零扩大到16点几？谢谢

我公司已经拿到EMC和安规实验室CNAS认可，现在新组建化学实验室，所以想向各位大侠求助几个问题：（1）我们公司信息（包括注册地址、法人等）全部没有变，是不是可以在原来CNAS基础上面扩大项目就好；（2）我们化学实验室虽然成立只有一个月，但质量方针等都是公司统一的，是不是已经满足质量体系运行超过6个月的CNAS认可规则，是不是可以提出申请CNAS扩项认可？（3）如何提供适宜的能力验证计划，比对计划和测量审核的证明？另外一个问题：我公司是书面签名，也可以根据客户要求提供电子签名，但不知电子签名在中国是不是同样具有法律效力？多谢！多谢！！！

在一些疾病的康复过程中，往往要用到很多的仪器，包括很多医学上目前无法根治的疾病。 在脑瘫儿童在进行医疗康复时，要用到多种仪器和辅助器具，通过训练逐渐进行康复。儿童专用轮椅、儿童站立架、助行器等是辅助器具，能够辅助脑瘫儿童进行活动。而训练仪器和专用设备，则包括痉挛肌治疗仪、肌兴奋治疗仪、体操棒与抛接球、训练浪桥、手平衡协调训练器等。 痉挛肌低频治疗仪是为脑瘫等上运动神经元病损而引起的肌肉痉挛患者而设计的产品。用来缓解肌张力高的患者的痉挛症状，降低肌张力，诱发患者主动运动功能。肌兴奋治疗仪是快速提高肌力，改善患者肢体运动功能的一种有效而先进的仪器。能有效的引起肌肉收缩，使毛细血管扩张，促进血液循环，从而改善肌肉营养状况。

问题1:不出现扩增条带 引物：引物质量是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。对策为：①选定合适的引物合成单位；②引物的浓度不仅要看OD值，最好用引物原液做琼脂糖凝胶电泳，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应与引物合成单位协商解决，如一条引物亮度高，一条引物亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度；③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏而导致变质降解失效；④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。 Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 靶序列变异：如靶序列发生突变或缺失，影响引物与模板特异性结合，或因靶序列某段缺失使引物与模板失去互补序列，其PCR扩增是不会成功的。问题2:出现非特异性扩增带 PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带出现的原因：一是引物与靶序列不完全互补，或引物聚合形成二聚体；二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。 其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。对策为：必要时重新设计引物；减低酶量或调换另一来源的酶；降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数；适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。问题3:出现片状拖带或涂抹带 PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。可能由于Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，GC含量过高引起。对策为：适当降低Mg2+浓度；增加模板量；减少循环次数；加入添加剂甘油或Qiagen公司的Q-solution。问题4:污染的监测——对照试验 1.阳性对照：应设有阳性对照，它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好，经各种鉴定是该产物的标本，如以重组质粒为阳性对照，其含量宜低不宜高(100个拷贝以下)。 2.阴性对照：每次PCR实验务必做阴性对照。它包括①标本对照：被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照，被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照；②试剂对照：在PCR试剂中不加模板DNA或RNA进行PCR扩增，以监测试剂是否污染。 3.重复性试验 4.选择不同区域的引物进行PCR扩增问题5:污染的处理 （一）环境污染 1．稀酸处理法 2．紫外照射(UV)法 （二）反应液污染，可采用下列方法之一处理： 1．DNase I法 2．内切酶法 3．紫外照射法 4．Gama射线辐射法 （三）尿嘧啶糖苷酶(UNG)法 由于UV照射的去污染作用对500bp以下的片段效果不好，而临床用于检测的PCR扩增片段通常为300bp左右，因此UNG的预防作用日益受到重视和肯定。 （四）固相捕获法 用于去除标本中污染的核酸和杂质。 （五）RS-PCR法(RNA-specificPCR) 也称为链特异性PCR，主要指用于RNA模板的特异性PCR法，该法可明显降低假阳性而不影响PCR的敏感性。 （六）抗污染引物法 该对引物扩增时通过病毒DNA克隆如入质粒的位点，这一区域只存在于完整的原病毒中。如果重组质粒污染了标本，就不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。只有原病毒DNA才能被引物扩增，因此只要出现预期大小的扩增带就可以证明标本是阳性的，该法试用于环状靶分子系列。

食品安全问题很大一部分来自于源头的疏忽，究其原因，中国有两亿多农户，在分散地生产各种食品和原料，包括鸡、鸭、鱼、肉、蛋、蔬菜等，大部分是以分散方式生产出来的。这就难免有人在市场经济利益驱动下越轨，再加上数量庞大、素质有限的中小型食品生产企业，监管很难到位。此外，农民并非缺乏科学种田的意识，也不是不知道过量农药化肥的危害，但他们最缺乏有效的组织管理、标准控制，只有利用市场机制将农民组织起来，使他们从标准化生产中获得更高、更稳定的收益，他们才会有动力去学习、贯彻现代农业标准。　　这些问题只有通过建立产业链来解决，运用统一、规范、协调、选优的原理，把科研成果和实践经验转化成具有可操作性的标准，指导和规范农业生产活动，以确保农副产品及其加工品的质量达到一定的要求，从而在源头上确保食品安全。　　新希望集团产业链的构建战略抛弃了以往的单打独斗，走了一条联合企业的发展道路。从2005年开始，新希望先后控股了山东六和、北京千喜鹤、陕西石羊等农牧业龙头企业，整合的力度相当大。通过打通“三链一网”(“三链”是指生猪、禽类、奶业三大畜禽养殖产业链，“一网”是指农村电子商务网)，建立包括养殖、饲料、屠宰、加工和销售等完整环节的现代畜禽产业链体系，通过信息技术实现从传统的饲料供应商向农业综合服务商转型。　　以新希望农牧体系中的千喜鹤集团为例，新希望集团与千喜鹤强强联合，率先打造饲料、育种、养殖、屠宰、加工紧密型产业链，确保了原料肉的安全。目前新希望已经与河北宽城满族自治县达成了意向，准备在那里建立年出栏百万头的无公害生猪养殖小区。到2010年，计划在全国建立20个~30个年出栏30万头的无公害生猪养殖小区。这些将为全国消费者提供无公害标准的猪肉及猪肉制品，建立一个可靠的、安全的生猪养殖溯源系统。　　打通整个产业链，不仅能够把流失在各个环节的利润捡回来，还能从源头上控制食品安全，确保食品的可追溯性，从而为消费者提供真正安全的食品。　　新希望集团有产业链保障的食品安全蓝图是：若干年后，居民购买猪肉肯定会选择品牌，不会和现在一样，随便买都一样。相比之下，产业链保障下的每一块猪肉都是可追溯的：祖宗三代是什么血统，在哪个养猪场养大的，什么时候吃过什么，用过什么药。这才是真真正正、彻底的放心肉。

是否有同行用的PE的7300DV的ICP,有沒有出現經常連不上主機，和操作過程中出現無法連接情況，錯誤提示“主機電源中斷”實際電源是正常的情況。是什麽原因，如何解決？

一般计算扩展不确定度有百分比，浓度等单位，那扩展不确定度有效数字保留几位比较合适？

全球最先进的激光导热系数分析仪模块化设计—随时升级，体积更小大功率能量源—测量更准确6样品自动分析—节约宝贵时间高真空设计—测量更精确应用多晶石墨石墨非常适合评估激光法热导仪的性能优劣。对多晶石墨进行的测试曲线显示材料在室温附近导热系数达到最大，热扩散系数随温度增加递减。材料比热可通过参比法测得，测试显示比热与热扩散系数增减趋势相反。铜、铝分别测量了纯铜和纯铝的热扩散系数，测试结果如下图，热扩散系数的测量值与文献值之间的偏差小于 2%。体现了Linseis仪器性能的卓越。石墨（Isotropic）用LFA1000测量了蛤同性石墨的热扩散系数，与日本AIST机构的数据比较，偏差小于2%。德国林赛斯 （LINSEIS Messgeräte GmbH） 林赛斯总部位于德国巴伐利亚州泽尔布(Selb),是一家有超过50年丰富专业经验的世界领先（热）分析仪器设备生产商，公司专门致力于研究、开发、生产热分析科学仪器，其产品的技术和质量方面一直处于业界领先地位。

光伏行业产能过剩预警已久，但在头部企业带领下，光伏行业扩产步伐却越发激进。据不完全统计，2023年上半年就有60家光伏企业抛出超2000亿元的融资计划，其中通威、天合、TCL中环、晶科及晶澳等头部企业更是豪掷百亿级扩产项目。业内热火朝天，业外也心驰神往。受全球景气周期及国际环境的影响，各行各业几近饱和，一些行业甚至处于萎缩趋势，各路产业资本急于寻求新的机会。