白芷酸

参加中国食品药品检定研究院组织的，乳粉中蛋白质、脂肪、亚麻酸、亚油酸的测定能力验证，有参加的朋友希望互相交流学习！交流群 113894479 这个是我们乳粉中蛋白质、脂肪、亚麻酸、亚油酸的测定能力验证的群，看见的朋友赶紧加一下！！！！

有没有参加NIFDC-PT-029乳粉中蛋白质、脂肪、亚麻酸和亚油酸测定的同学啊 交流群 113894479，我建的讨论群

[size=16px][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]目的[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 建立祁白芷超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url](UPLC)指纹图谱,采用超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对共有峰进行成分鉴定,测定各批次祁白芷抗氧化活性,并探讨祁白芷的化学成分与抗氧化活性的谱效关系。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]方法[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立28批祁白芷的指纹图谱,确认共有峰并进行相似度评价,并对共有峰进行UPLC-Q-TOF-MS分析。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率为抗氧化指标,测定其抗氧化活性。采用灰色关联度和偏最小二乘回归分析祁白芷共有峰与抗氧化活性的谱效关系。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]结果[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 建立了28批祁白芷药材的指纹图谱,其相似度为0.910~0.997。聚类分析可将不同加工方式的祁白芷分为熏硫和无硫两大类,当平方欧氏距离为 10 时,可将无硫祁白芷进一步分为两类,与商品规格等级分类相符。其共标定13个共有峰,利用对照品对比和UPLC-Q-TOF-MS解析指认出共有峰分别为奎宁酸、二氢山芹醇、水合氧化前胡素、白当归素、花椒毒素、佛手柑内酯、异茴芹内酯、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、8-氧甲基异欧前胡内酯、异欧前胡素、镰叶芹酮。通过清除DPPH自由基实验发现,28批祁白芷均有抗氧化能力,谱效分析结果显示,奎宁酸、佛手柑内酯、氧化前胡素、珊瑚菜素、异欧前胡素、镰叶芹酮等与抗氧化能力呈正相关。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]结论[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 本研究建立了基于化学成分和抗氧化活性的祁白芷质量评价模式,为阐明祁白芷药材中抗氧化活性成分及质量控制提供参考。[/color][/font][/size]

摘要：中药白芷具有广泛的药理作用，其主要有效成分香豆素类化合物的分离提取和结构鉴定已有了长足发展。现代色谱技术在中药白芷研究中的广泛运用，使白芷的定量分析方法体系、质量指标体系和提取工艺优化等研究有了新的进展，文章对近5年的有关文献作了综述。　　关键词：色谱法；白芷；化学成分；质量；鉴定　　Research Development of Angelica dahurica by Chromatography 　　MENG Lanzhen， NIE Hong， XU Zhenxia， XIONG Aihua， LIU Jianjun　　（1.Department of Pharmacology of Pharmacy, College of Jinan University，Guangzhou 510632，China； 2.The Test Technology Center of Pharmacy, College of Jinan University, Guangzhou 510632, China）　　Abstract:The Angelica dahurica has been claimed to be effective on many diseases，and also there are great development for the isolation and instrumental analyses of its main effective components. The application of chromatography technology greatly advanced and accelerated the research of Angelica dahurica.　　Key words:Chromatography；Angelica dahurica；Development research　　白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.）Benth. et Hook. f. 或杭白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.） Benth. et Hook. f. var. formosana （Boiss.） Shan et Yuan 的干燥根。性温，味辛。具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功效。可用于治疗感冒头痛、眉棱骨痛、烧伤等症。色谱法（chromatography）或称层析法，其原理是利用不同组分在两相中的吸附能力、分配系数、离子交换能力或分子大小等性质的微小差别，经过连续多次在两相间的质量交换，使不同的组分得到分离，是分离分析多组混合物的分析方法，在各个学科领域中的应用日益普遍［1］。从经典的平板色谱到柱色谱，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]技术（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、超临界流体色谱法（SFC）到毛细管电泳法（CE）、色谱-光谱连用等现代色谱技术已广泛运用于中药白芷的研究。[b]　　1 白芷中化学成分的提取分离[/b]　　1.1 化学成分的分离结合现代光谱技术，近年陆续从白芷中发现了新结构的香豆素类化合物，如从日本白芷中分离得到七种新的bifuranocoumarins［2］，从韩国白芷的茎部首次发现6［（1S），2（R）2，3二羟基1甲氧基3甲基丁酸］7甲氧基香豆素［3］，从根部得到两种新的呋喃香豆素化合物［4］。国内游小琳等［5］首次发现白芷水溶性成分中丁二酸，葡萄糖，蔗糖等6个化学成分。聂红等［6］运用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]（GCMS）技术发现白芷的水蒸气蒸馏所得的油状物的主要成分为甲基环癸烷（22.4%）、1十二烷醇（8.6％）等。　　1.2有效成分的提取刘文等［7］认为采用超临界流体CO2萃取白芷中欧前胡素速度快，HPLC法测定精度高。刘红梅等运用GCMS技术对白芷中香豆素类成分的最佳超临界流体CO2萃取工艺（萃取温度50℃，萃取压力21 MPa、萃取时间3.0 ｈ，分离压力6.5 MPa，粉碎度20目）的超临界样品进行了分析鉴定，主要成分氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素的相对含量分别达到42.40％，22.14％和12.12％［ 8，9］。　　高速逆流色谱法［10］（HighSpeed CounterCurrent Chromatography）是一种可以在短时间内实现高效分离和分析的方法，具有无固体载体，可以避免分离样品与固体载体表面产生化学反应而变性和不可逆吸附等优点，已广泛应用于天然药物研究。Liu等［11］用该法成功分离测定了白芷中的欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡内酯，其上相固定相为正己烷甲醇水（5∶5∶5，V/V），下相流动相前150 min正己烷甲醇水（5∶5∶5，V/V），后150 min正己烷甲醇水（5∶7∶3，V/V）体积以线性递增，鉴定各峰分离物，纯度达到了98％以上。运用该技术还分离了丹参中的丹酚酸B［12］、川芎中的川芎嗪［13］，天麻中的天麻素［14］等多种化学成分。　　高效毛细管电泳法（High Performance Capillary Electrophoresis）为近年来发展最快的一种分离分析技术，具有分离效率高、分析速度快和样品用量少等特点。毛细管胶束电动色谱（Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography）为它的一个重要分支，具有分离效果好，速度快，操作简单，费用低等优点，已迅速进入药物分析领域。其原理是向载体中加入表面活性剂，活性剂浓度大于临界值时，则在毛细管内形成胶束，被分析物受到电渗流和胶束相与水相之间分配的双重影响而实现分离。Wang［15］等成功的采用该法简单快速的从白芷中分离得到欧前胡素、异欧前胡素和东莨菪苷元（7羟6甲氧香豆素）。该技术还应用于测定西洋参中人参皂苷Rb1，Re的含量［16］，分离鉴定槐属植物苦豆子、苦参、山豆根中喹嗪烷类生物碱［17］，最近联用电化学检测器首次分离测定木犀科植物女贞叶和果实中的D甘露糖、蔗糖、葡萄糖和果糖［18］。[b]　　2 白芷的质量控制及鉴定[/b]　　HPLC被广泛应用于白芷的质量控制和鉴定：人工四倍体白芷主要有效成分欧前胡素的含量较原二倍体白芷成倍提高［19］；不同产地白芷中2种香豆素总量存在较大差异［20］；提取挥发油后欧前胡素损失较大［21］；建立了白芷药材质量的控制方法，其色谱条件：流动相甲醇水（70∶30），检测波长254 nm，欧前胡素在0.974～3.896 μg，异欧前胡素在0.360～2.640 μg范围内线性关系良好［22］。或同时检定出欧前胡素、异欧前胡素、比克白芷素及水化氧化前胡素，且其中的欧前胡素和异欧前胡素含量分别不得低于0.1%和0.04%［23］。王梦月等［24］证实白芷果实中总香豆素含量最高，茎中最低；以晒干法的含量最高。抽苔白芷中香豆素的含量不及白芷含量的50%，不能作白芷药用。[b]　　3 体内白芷有效成分的测定[/b]　　白芷的活性成分白当归素，是一种醛糖还原酶抑制剂，可用于治疗糖尿病性白内障。Kwon等［25］研究分析它的肾代谢产物。尿样经液液提取，GCMS、HPLCDAD以及H1核磁共振波谱等分析，发现两种主要代谢物分别是白当归素侧链经C脱甲基或O脱烷而产生，另一代谢物认为可能是由白当归素被羟基化而产生。　　Kazuhisa等［26］利用柱切换HPLC法快速检测大鼠血浆中的白当归素和水化氧化前胡素。血浆样品用过氯酸脱蛋白，离心后上清液制备成供试品。流动相为乙睛水（20∶80），流速1 ml/min，检测波长260 nm，柱温40℃。龚志南等［27,28］用HPLC测大鼠胃液、肠液、血液和脑组织中香豆素类化合物的含量，以考查其药动学参数，评价提取工艺指标和最佳剂型。[b]　　4 结语[/b]　　综上所述，现代色谱技术应用于白芷的研究，可以快速、高效地分离纯化有效成分［11，15］，优化提取工艺［7～9］，建立准确、重复性好的质量标准［19～24］等，但在指纹图谱方面的研究还未见报道。可见色谱技术以其分离效能高、分析速度快、定量结果准、易于自动化等优点，成为中药与天然药物有效成分的确定、鉴定等定性与定量工作以及分离纯化过程中最有效的方法。可以预见色谱技术必然会更广泛地应用于中药的制备和质量控制过程中，加速中药生产工艺的现代化进程。　　目前色谱技术应用于白芷等中药研究存在的问题有：一方面中药成分复杂、质量影响因素多，单用一种色谱技术研究中药捉襟见肘，如GC不适用于分析热不稳定性和不能气化的成分；HPLC则对强极性组分分离效果不好，色谱柱容易受污染，仪器运转费用高；新兴的高速逆流色谱法和高效毛细管电泳法，可以很好的为中药药效学评价及定性定量分析等提供技术支持，但在国内尚未普及和系统化。因此要求色谱技术在自身不断完善的基础上，结合其他学科的高新技术，推陈出新，以便更好地为我国中药现代化服务。另一方面该技术在中药活性成分筛选与作用机理研究方面期待突破性的进展。生物色谱法是生命科学和色谱分离技术结合形成的高新技术［29，30］，这种模型既具有很好的生物相关性又克服了成分分离与效应脱节的弊端，已成功应用于药物活性成分的筛选和作用机理的研究［31～32］，如果联用二极管列阵和高分辨率质谱等技术，将实现中药中微量活性成分的分离纯化和结构鉴定及活性测定的高度一体化。

http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/09/06/A1378379551.jpg 氨基酸是蛋白质的基础组成单位，通过研究蛋白质中氨基酸的性质和组成来预测蛋白质的结构和功能，蛋白质氨基酸残基组成分析主要是通过氨基酸分析仪来完成的，本文推荐了2个基于氨基酸组成进行蛋白质预测软件。基于氨基酸组成的蛋白质预测软件根据组成蛋白质的20种氨基酸的物理和化学性质可以辨析电泳等实验中的未知蛋白质，也可以分析已知蛋白质的物化性质。ExPASy工具包包涵的程序：AACompIdent：与把氨基酸序列在SWISS-PROT库中搜索不同，AACompIdent工具利用未知蛋白的氨基酸组成去确认具有相同组成的已知蛋白。该程序分析时需提交的相关信息包括：蛋白质的氨基酸组成、等电点pI和分子量(如果知道)、正确的物种分类及特别的关键词。此外，用户还需在六种氨基酸“组合”中作出选择，这影响到分析如何进行。例如，某种“组合”会把残基Asp/Asn(D/N)和Gln/Glu(Q/E)组合成 Asx(B)和Glx(Z);或者某种残基会在分析中被完全除去。对数据库中的每一个蛋白序列，算法会对其氨基酸组成与所查询的氨基酸组成的差异打分。由电子邮件返回的结果被组织成三级列表：第一张列表中的蛋白都基于特定的物种分类而不考虑pI和分子量;第二张列表包含了不考虑物种分类、pI和分子量的全体蛋白;第三张列表中的蛋白不但基于特定物种分类，并且将 pI和分子量也考虑在内。虽然计算所得结果各不相同，但零分表明了该序列与提出的组成完全相符。AACompSim：AACompIdent的一个变种，AACompSim提供类似的分析，但与前者以实验所得的氨基酸组成为依据进行搜索不同，后者使用SWISS-PROT中的序列为依据。有报道称，氨基酸组成在物种之间是十分保守的(Cordwell等，1995)，并且通过分析氨基酸的组成，研究者能从低于25%序列相似性的蛋白之间发现弱相似性(Hobohm和Sander，1995)。因此，在“传统的”数据库搜索基础上辅以组成分析，能为蛋白质之间关系提供更多见解。PROSEARCH：PROPSEARCH也提供基于氨基酸组成的蛋白质辨识功能。用144种不同的物化性质来分析蛋白质，包括分子量、巨大残基的含量、平均疏水性、平均电荷等，把查询序列的这些属性构成的“查询向量”与SWISS-PROT和PIR中预先计算好的各个已知蛋白质的属性向量进行比较。这个工具能有效的发现同一蛋白质家族的成员。可以通过Web使用这个工具，用户只需输入查询序列本身。分子量搜索(MOWSE)分子量搜索(MolecularWeightSearch，MOWSE)算法利用了通过质谱(MS)技术获得的信息。利用完整蛋白质的分子量及其被特定蛋白酶消化后产物的分子量，一种未知蛋白质能被准确无误地确认，给出由若干实验才能决定的结果。由于未知蛋白无需再全部或部分测序，这一方法显著地减少了实验时间。MOWSE的输入是一个纯文本文件，包含一张实验测定的肽段列表，分子量范围在0.7到4.0Kda之间。计算过程基于在OWL非冗余蛋白质序列库中包含的信息。打分基于在一定分子量范围内蛋白中一个片段分子量出现的次数。输出的结果是得分最佳的30个蛋白的列表，包括它们在OWL中的条目名称、相符肽段序列、和其它统计信息。模拟研究得出在使用5个或更少输入肽段分子量时，准确率为99%。该搜索服务可通过向mowse@daresburg.ac.uk发送电子邮件实现。为获得更多关于查询格式的细节信息，可以相该地址发送电子邮件，并在消息正文中写上“help”这个词。蛋白质氨基酸组成分析用盐酸在110 ℃将蛋白或多肽水解成游离的氨基酸，用氨基酸分析仪测定各氨基酸的含量。采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法，对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。仪器基本结构同普通HPLC相似，但针对氨基酸分析进行了细节优化(例如氮气保护、惰性管路、在线脱气、洗脱梯度及柱温梯度控制等等)通常细分为两种系统：蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统)，利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸，速度较快，基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸，速度较慢，基线一般不如钠盐系统好。分析效果：从目前已知的氨基酸分析方法比较来看，除灵敏度(即最低检测限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC：0.5 pmol;氨基酸分析仪：10 pmol)，其他如分离度、重现性、操作简便性、运行成本等方面，都优于其他分析方法。蛋白质氨基酸残基组成分析的主要步骤包括：首先是蛋白被水解为氨基酸，其次是采用离子色谱等方法进行游离的氨基酸含量和组成的分析。总之利用蛋白可以分析氨基酸，利用氨基酸也可以研究蛋白质。

蛋白质与多肽蛋白质粉 人类的营养物质有许多种类，最为重要的为蛋白质，碳水化合物和脂肪，其它则是微量营养物质，如维生素、电解质和微量元素等。虽然每一种营养物质对人体来说都是不可或缺的，但绝大多数的营养学家都会有充分的理由认为，真正最重要的营养物质是蛋白质。一、蛋白质是构成人体的基本物质。 蛋白质是由氨基酸通过肽链相连而构成的，它是人体包括骨骼、肌肉、皮肤和脑的重要物质基础，同时氨基酸也是生成核酸的基本物质。我们知道，核酸既形成遗传密码，也是体内储存能量的基本物质。因而从根本上说，人体是由蛋白质组成的。构成人体蛋白质的生理功能概括有如下三个方面：1）人体组织的主要构成成份：如肌肉、骨骼、血液、皮肤、神经、肝、心等等。2）具有特殊生理功能：可以这样说，人类的一切生理活动都与蛋白质有关。如酶蛋白能催化机体的一切化学反应，包括蛋白质、脂肪、碳水化合物的消化等；载脂蛋白运送脂肪；血红蛋白运送氧；激素蛋白调节代谢与生理活动包括情感；血浆白蛋白调节渗透压、运输金属离子、胆红素和抗生素等。3）供给机体能量：成年人每日约需要更新400g蛋白质，每克蛋白质彻底分解能释放出约4 Kcal的热量。4）为机体提供氮原料：人体内所必需的嘧啶、嘌呤、肌酸、胆碱、肾上腺素、肉碱、牛磺酸等，都是以多肽、氨基酸为原料的。表1. 世界粮食组织（FAD）和世界卫生组织（WHO）根据中国人的体质和膳食结构推荐的中国人蛋白质的摄入量（RNLs）。年 龄蛋白质RNL（g/d） 初生—6个月 1.5-3 1岁 35 3岁 45 5岁 55 7岁 60 9岁 65 10-16岁 75-85 成年女性 65 成年男性 75 妊娠 +15 乳母 +20 根据统计资料：由于贫困、工作紧张、精神压力、减肥节食、以及肠胃疾病、癌症、贫血、肾病、各种结核病、肝硬化、腹水、烧伤、失血等，以及老龄人均不同程度地存在着蛋白质的摄入不足。 上世纪80年代以来，我国营养学家对7个省18个贫困地区，1万名学龄前儿童进行了为期4年的连续调查，发现营养不良现象非常严重，其中蛋白质的摄入量不足WHO规定的60%。近年社会医学工作调查，在发达地区由于生活节奏加快，精神压力异常增加，以及办公室白领阶层的减肥节食，也导致蛋白质摄入不足，代谢异常的人群增加。二、蛋白质缺乏的体征和临床症状 单纯的蛋白质营养不良又叫加西长病，这或许是来源于非洲的单词，单纯的能量不足时叫消瘦；临床上通常把这两种现象叫单纯性蛋白质能量营养不良症或PEM。单纯的PEM症在临床上较少见到，但在慢性消耗性疾病患者中则常见，尤其是在癌症患者和艾滋病的患者中几乎占到90%以上。 现代都市和贫困地区存在着相当数量的蛋白质营养不良族群，他们的临床表现主要是能量损失或不足，如体力不支、睡眠不安、怕冷、怕热、性冷淡、无法进行正常的体力劳动和运动，其次为肌肉组织萎缩、皮肤松驰；腿部、脸部易水肿、脂肪肝、无名皮疹、伤口愈合不良、记忆力下降、视力减弱等。再者免疫力低下易感冒、感染。在做血检时通常会发现这些族群的血浆蛋白处于正常值的下限，其中白蛋白、转铁蛋白、甲状腺素结合前体蛋白和视轴蛋白（retinol-binding protein）均处于低水平时，患者易于感染各种疾病并且出现早衰症状，如果是儿童则感染后死亡率增加30%-40%，对于这类人群WHO的专家最好的建议就是迅速补充优质（或全价）的蛋白质。三、优质蛋白质和劣质蛋白质的区别。 要弄清楚何为优质蛋白质？何为劣质蛋白质？我们要引入什么是必需氨基酸的概念。营养生理学家、生化学家发现构成人体蛋白质的氨基酸共有21种，而这些氨基酸中其中有4种是可以由体内含碳和含氮底物自己合成的，被称为非必需氨基酸，还有10个必需的氨基酸，是人类机体无法制造需要从饮食中摄取的，另有7个是介于这两者之间的被称为条件必需氨基酸。表2. 必需、条件必需和非必需氨基酸 必需氨基酸条件必需氨基酸 非必需氨基酸 亮氨酸牛黄酸 丙氨酸 异亮氨酸酪氨酸 谷氨酸 缬氨酸甘氨酸 天冬氨酸 赖氨酸丝氨酸 天冬酰胺 苯丙氨酸（酪氨酸）脯氨酸 蛋氨酸（半胱氨酸）谷氨酰酸 苏氨酸 胱氨酸 色氨酸 组氨酸 精氨酸 虽然蛋白质广泛存在于许多动物性和植物性食物中，但是必需氨基酸的构成异差很大，WHO把“蛋白质其组成恰好符合人体需要”的蛋白质称为理想蛋白质，在自然界这种理想的蛋白质普遍认为是鸡蛋蛋白，因此就把鸡蛋蛋白作为衡量蛋白质优劣的参照蛋白，科学家把它作为一把尺子来衡量各种蛋白质，并制定出标准，以4种必需氨基酸为最低限来决定其优劣，即色氨酸、苏氨酸、赖氨酸或者蛋氨酸（半胱氨酸）。 通过比较科学发现，肉、鱼、蛋、牛奶、乳酪含有优质蛋白，大豆、花生、豌豆也含有较多的高质量蛋白。进一步研究发现它们都不够完美，因而要求大家对优质的动物性蛋白和植物性蛋白进行了科学搭配才是最完美的全价蛋白质（complete protein）。表3. 部分高质量蛋白

传说一、据说北宋初年，南方有一富商的女儿，每逢行经腹痛剧烈，致形体日衰。富商带她欲往京都寻求名医，到汴梁时女儿经期适至，腹痛难忍。正遇一采药老人，仔细询问病情后，老人从药篓中取出白芷一束相赠，嘱咐洗净水煎饮服。富商谢过，按法煎制，一煎服了痛缓，二煎服了痛止，再服几剂，来月行经安然无恙。从此，妇女行经不舒，煎服白芷，在民间广为使用。

大家好，氨基酸分析仪与蛋白质测序仪有主要区别在什么地方呢？目前实验室需要进行氨基酸的测序分析，究竟买一台蛋白质测序仪好呢，还是氨基酸分析仪好呢？价格大概有多少呢？这些仪器有没有国产的呢 QQ：2392795357

我是做蛋白质SDS-PAGE电泳的。蛋白质样品用碘乙酸溶液处理后如何除去过量的碘乙酸？1、取约1 mg的总蛋白样品放入离心管中，加入1ml 6M 的尿素溶液，得到1 mg/mL的蛋白溶液。2、加入20微升1M的巯基乙醇到上述离心管中，震荡混合5秒钟。3、将上述离心管恒温在37oC条件下反应1小时 (以还原蛋白中的双硫键)。4、加入25µ L 1M新鲜配制在1M NaOH中的碘乙酸，在避光、室温条件下放置30 分钟。（烷基化将巯基保护起来） 接下来我准备做SDS-PAGE还原电泳，我不清楚样品中的过量碘乙酸对电泳有没有影响？应该怎么除掉？求高人指点！[em0808][em0808][em0808][em0808][em0808]

工厂生产时,怀疑盐酸溶液中有蛋白质,我应该怎么判定和测定呢?

求助6-氨基青霉素烷酸中蛋白质检测 ，也就是6-APA中蛋白质含量检测，有做过的给说下吧，谢谢

请问测蛋白质，氨基酸的仪器，有没有样品处理不用消解或者简单一点的？

蛋白质是饲料中最主要的营养指标之一，动物通过从饲料中攫取蛋白质，在其肠道中被分解成氨基酸而被机体吸收，从而合成自身的蛋白质，满足机体自身的生长发育的需要，因此，饲料中充足的蛋白源有利于动物机体充分发挥生长潜能

优质蛋白质含有的必需氨基酸种类齐全，且比例跟人体相近，易被吸收利用，能更好地提高免疫力，保护健康。饮食中最好有豆、奶、蛋、鱼、虾、肉、禽。

请问各位高手，蛋白质在280nm有紫外吸收，那么其水解后的氨基酸的紫外吸收会发生变化么 是变强还是变弱了。。

蛋白质的英文名词来源于希腊文，其含义是“第一”和“基本的”。反映了蛋白质是生命活动中最基本的和最重要的物质。蛋白质由碳、氢、氧、氮4种主要元素组成，有的蛋白质还含有硫、磷等其他元素。如血红蛋白含有铁、甲状腺球蛋白含有碘等。蛋白质的基本结构单位是氨基酸。氨基酸的特点是在分子一端含有氮和氢元素组成的化学基团——氨基。动物不能合成氨基，只有植物有利用硝酸盐合成氨基的能力。所以在动物饲养中，要依靠含有氨基酸、蛋白质的饲料，使家畜、家畜等生产蛋白质（净肉）。 蛋白质由一长串氨基酸链组成。一般都很长，如血红蛋白是由580个氨基酸组成。但氨基酸种类只有20种，在蛋白质中按严格的顺序排列，构成多种多样的生物专一性的蛋白质。由于人体不能合成氨基酸，只能从食物中获得蛋白质，并在肠内将蛋白质分解成各种氨基酸，这些氨基酸被吸收后，重新合成人体的特殊蛋白质。合成蛋白质的主要器官是肝脏。 从蛋白质这个名字看，好像蛋白质来源离不开蛋。其实动物、植物以及其他生物体都含有蛋白质。虽然最常党见的蛋白质——蛋清是白色的。但并非所有蛋白质都是白色的。血液上的血红蛋白是红色的，绿色植物的叶绿蛋白是绿色的。 同碳水化物和脂肪相比，蛋白质的两个代谢特点，一是它主要在代谢中发挥作用，而不是分解后为人体提供能量；二是蛋白质代谢的起点和终点都是蛋白质，即起点是人体的异蛋白质（如鱼的蛋白质，鸡肉蛋白质等），而终点则成了人体特有的蛋白质。蛋白质由氨基酸组成，是另一种重要的供能物质，每克蛋白质提供4卡路里的热量。但蛋白质的更主要的作用是生长发育和新陈代谢。过量的摄入蛋白质会增加肾脏的负担。因此蛋白的摄入要根据营养状况、生长发育要求达到供求平衡。通常蛋白摄入所产生的热量约占总热量的20%左右为宜。

[font=宋体]白芷以根入药，夏、秋间叶黄时采挖，除去须根及泥沙，晒干或低温干燥，切片，生用。[/font][font=宋体]味辛，性温，归肺、胃、大肠经，有解表散寒，祛风止痛，宣通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓的功效。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]解表散寒[/color][/font][/b][font=宋体]白芷辛散温通，祛风解表散寒之力较温和，而以止痛、通鼻窍见长，常与防风、羌活、川芎等祛风散寒止痛药同用，治疗外感风寒，头身疼痛，鼻塞流涕之症，如九味羌活汤（《此事难知》）。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]祛风止痛[/color][/font][/b][font=宋体][/font][font=宋体]白芷辛散温通，长于止痛，且善入足阳明胃经，常用于治疗阳明经头额痛以及牙龈肿痛。单用白芷可治疗外感风寒引起的阳明头痛，眉棱骨痛，头风痛等症，即都梁丸（《百一选方》）；或与防风、细辛、川芎等祛风止痛药同用，如川芎茶调散（《和剂局方》）；治疗外感风热者，可配伍薄荷、菊花、蔓荆子等药。治疗风冷牙痛，可与配伍细辛、全蝎、川芎等同用，如一捻金散（《御药院方》）；治疗风热牙痛，可配伍石膏、荆芥穗等药，如风热散（《仙拈集》）。若风寒湿痹，关节疼痛，屈伸不利者，可与苍术、草乌、川芎等药同用，如神仙飞步丹（《袖珍方》）。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]宣通鼻窍[/color][/font][/b][font=宋体][/font][font=宋体]白芷祛风、散寒、燥湿，可宣利肺气，升阳明清气，通鼻窍而止疼痛，常与苍耳子、辛夷等散风寒、通鼻窍药同用，治疗鼻鼽、鼻渊等鼻科疾病引起的鼻塞不通，流涕不止，前额疼痛，如苍耳子散（《济生方》）。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]燥湿止带[/color][/font][/b][font=宋体][/font][font=宋体]白芷辛温香燥，善除阳明经湿邪而燥湿止带。常与鹿角霜、白术、山药等温阳散寒、健脾除湿药同用治疗寒湿下注，白带过多者；常与车前子、黄柏等清热利湿、燥湿药同用治疗湿热下注，带下黄赤者。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]消肿排脓[/color][/font][/b][font=宋体][/font][font=宋体]白芷辛散温通，对于疮疡初起，红肿热痛者，有散结消肿止痛的功效，常与金银花、当归等药配伍，如仙方活命饮（《校注妇人良方》）；若脓成难溃者，常与益气补血药同用，共奏托毒排脓之功，如《外科正宗》托里消毒散、《医宗金鉴》托里透脓散，其均与人参、黄芪、当归等药同用。[/font][font=宋体]此外，本品祛风止痒，可用治皮肤风湿瘙痒。[/font][font=宋体]本品辛香温燥，阴虚血热者忌服。[/font]

用高氯酸和三氯乙酸沉淀乳蛋白质，哪个效果更好?

蛋白质合成中的质量控制 近期Nucleic Acids Research在线发表了上海生化与细胞所王恩多研究组的研究论文：人细胞质亮氨酰-tRNA合成酶编校非对应氨基酸的模块式途径。为了防止潜在的蛋白质错误合成，某些氨基酰-tRNA合成酶具有编校功能去除错误活化的氨基酸或者错误接载的氨基酰化tRNA，通过控制蛋白质的生物合成原料的质量，对蛋白质合成进行质量控制。该实验室已经证明亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)能够通过不依赖-或依赖tRNA转移前编校途径水解误活化的非对应氨基酸，即使误活化的氨基酸转移到tRNA分子上也可以通过转移后编校途径将其水解。 LeuRS通过多条编校途径在反应的各个步骤清除错误的反应产物和中间物。王恩多研究组的博士研究生陈鑫和马晶晶成功地首次在大肠杆菌基因表达体系中得到了高活力的人胞质亮氨酰-tRNA合成酶(hcLeuRS)和亮氨酸tRNA，建立了一个高效的测定hcLeuRS合成和编校活力方法和体外研究体系。发现hcLeuRS对不同的非对应氨基酸的胁迫采取不同的编校策略对产物进行质量控制，虽然亮氨酸的类似物正缬氨酸(Nva)和2-氨基丁酸(ABA)都能被错误地载入tRNA分子的3’端，但主要通过转移后的编校途径去除Nva，去除ABA则偏爱转移前的编校途径。转移后编校作为tRNA氨基酰化最后的一个质量控制的检查点对于避免氨基酸的错误掺入发挥着至关重要的作用。该研究结果将有助于更加深入、全面地认识生物进化过程中产生的模块式编校途径在保持遗传信息由RNA传递到蛋白质的精确性发挥着重要作用。该研究得到中国科学院，科技部重大科学研究计划，国家自然科学基金委，上海市科委的资助。

（一）蛋白质的盐析 取1.5mL蛋白质溶液，加入等体积饱和硫酸铵溶液（浓度为50%饱和），微微摇动试管，使溶液混合均匀后，静置数分钟，球蛋白即析出呈絮状沉淀（如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵），用滤纸滤取上清液，滤液中再加入固体硫酸铵粉末至不再溶解，析出的即为清蛋白，再加水稀释，观察沉淀是否溶解。 （二）蛋白质的沉淀 1．用重金属盐沉淀蛋白质 取三支试管，各加1mL蛋白质溶液，分别各加3滴6%醋酸铅溶液、3滴2%硫酸铜溶液和3滴1%硝酸银溶液，观察蛋白质沉淀的析出。 2．用有机酸沉淀蛋白质 取二支试管，各加1mL蛋白质溶液，并加5%醋酸溶液使之呈酸性（该沉淀反应最好在弱酸中进行）。然后分别滴加饱和苦味酸、饱鞣酸溶液，直至沉淀产生为止。 用10%三氯醋酸溶液、3%磺柳酸溶液进行类似实验（用量同前），观察现象。

本人想测定麦汁中的有机酸，想去除麦汁中蛋白质和糖。应该采用什么方法？帮帮忙!!谢谢！

人类的营养物质有许多种类，最为重要的为蛋白质，碳水化合物和脂肪，其它则是微量营养物质，如维生素、电解质和微量元素等。虽然每一种营养物质对人体来说都是不可或缺的，但绝大多数的营养学家都会有充分的理由认为，真正最重要的营养物质是蛋白质。一、蛋白质是构成人体的基本物质。蛋白质是由氨基酸通过肽链相连而构成的，它是人体包括骨骼、肌肉、皮肤和脑的重要物质基础，同时氨基酸也是生成核酸的基本物质。我们知道，核酸既形成遗传密码，也是体内储存能量的基本物质。因而从根本上说，人体是由蛋白质组成的。构成人体蛋白质的生理功能概括有如下三个方面：1）人体组织的主要构成成份：如肌肉、骨骼、血液、皮肤、神经、肝、心等等。2）具有特殊生理功能：可以这样说，人类的一切生理活动都与蛋白质有关。如酶蛋白能催化机体的一切化学反应，包括蛋白质、脂肪、碳水化合物的消化等；载脂蛋白运送脂肪；血红蛋白运送氧；激素蛋白调节代谢与生理活动包括情感；血浆白蛋白调节渗透压、运输金属离子、胆红素和抗生素等。3）供给机体能量：成年人每日约需要更新400g蛋白质，每克蛋白质彻底分解能释放出约4 Kcal的热量。4）为机体提供氮原料：人体内所必需的嘧啶、嘌呤、肌酸、胆碱、肾上腺素、肉碱、牛磺酸等，都是以多肽、氨基酸为原料的。表1. 世界粮食组织（FAD）和世界卫生组织（WHO）根据中国人的体质和膳食结构推荐的中国人蛋白质的摄入量（RNLs）。年 龄 蛋白质RNL（g/d）初生—6个月 1.5-31岁 353岁 455岁 557岁 609岁 6510-16岁 75-85成年女性 65成年男性 75妊娠 +15乳母 +20根据统计资料：由于贫困、工作紧张、精神压力、减肥节食、以及肠胃疾病、癌症、贫血、肾病、各种结核病、肝硬化、腹水、烧伤、失血等，以及老龄人均不同程度地存在着蛋白质的摄入不足。上世纪80年代以来，我国营养学家对7个省18个贫困地区，1万名学龄前儿童进行了为期4年的连续调查，发现营养不良现象非常严重，其中蛋白质的摄入量不足WHO规定的60%。近年社会医学工作调查，在发达地区由于生活节奏加快，精神压力异常增加，以及办公室白领阶层的减肥节食，也导致蛋白质摄入不足，代谢异常的人群增加。二、蛋白质缺乏的体征和临床症状单纯的蛋白质营养不良又叫加西长病，这或许是来源于非洲的单词，单纯的能量不足时叫消瘦；临床上通常把这两种现象叫单纯性蛋白质能量营养不良症或PEM。单纯的PEM症在临床上较少见到，但在慢性消耗性疾病患者中则常见，尤其是在癌症患者和艾滋病的患者中几乎占到90%以上。现代都市和贫困地区存在着相当数量的蛋白质营养不良族群，他们的临床表现主要是能量损失或不足，如体力不支、睡眠不安、怕冷、怕热、性冷淡、无法进行正常的体力劳动和运动，其次为肌肉组织萎缩、皮肤松驰；腿部、脸部易水肿、脂肪肝、无名皮疹、伤口愈合不良、记忆力下降、视力减弱等。再者免疫力低下易感冒、感染。在做血检时通常会发现这些族群的血浆蛋白处于正常值的下限，其中白蛋白、转铁蛋白、甲状腺素结合前体蛋白和视轴蛋白（retinol-binding protein）均处于低水平时，患者易于感染各种疾病并且出现早衰症状，如果是儿童则感染后死亡率增加30%-40%，对于这类人群WHO的专家最好的建议就是迅速补充优质（或全价）的蛋白质。

求助:请问哪位大师知道测油脂中蛋白质的前处理方法呀,谢谢

具体操作，大蒜浸提液在90℃下水浴2h，检测其中一种水溶性非蛋白质氨基酸的含量，该物质的出峰时间是5.14min。在这个图上看不出峰来，是不是要除杂，或者是采取柱前衍生化法。跪求给位色谱前辈指导！

http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09503.gif蛋白质(protein)是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。 因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质是由长条的氨基酸所构成。人体本身可以产生的氨基酸叫做非必需氨基酸。有八种氨基酸，叫做必需氨基酸，是人体所不能产生的，必须由饮食所提供。　　很多高蛋白的食物都来源于动物，像猪肉、鸡肉、鱼、牛奶、干酪、酸奶和鸡蛋，这些可以提供人体必须的全部氨基酸。当然，这并不是给其他来自植物的蛋白质食品打折扣，我们所获取的蛋白质大概有三分之一来自谷类、豆类、水果和蔬菜。 有些植物可能某些必须氨基酸的含量比较低。多种植物食品的结合才能提供每餐所必须的营养，谷物类所含的必须的氨基赖氨酸很低，而豆类所含的氨基蛋氨酸则很低。　　通过结合豆类食品和谷物食品(例如面包片上放豆子，小扁豆和米饭一起吃)，或者种子坚果和谷物(例如豌豆、黄油、三明治)，身体便在一餐饭中获得了足够数量的多种氨基酸。 很多人都以为每顿饭都要包含所有的必须氨基酸，但这样其实是不必要的。如果一个人每天吃了一些含蛋白质的食物，那么这些充足的氨基酸便会在体内循环，已选择出那些身体所必须的氨基酸。只要饮食能够提供超过24小时必须氨基酸的最少量，就没有蛋白质缺乏的危险。这对乳蛋素食者来说是非常简单的，因为他们吃鸡蛋、牛奶、干酪和酸奶，都含有丰富数量的必须氨基酸。只有不吃任何动物食品的严格的素食主义者，才会有体内蛋白质过低的危险。　　豆奶、坚果、豆荚和谷物都可以为严格的素食主义者提供足够的蛋白质，但我还是建议素食运动员要请教运动营养专家来确保自己活得充足的营养。 每天摄入充足的蛋白质并不困难，事实上运动员和经常锻炼的人通过规律的饮食和甜点可以获得他们所需要的营养。　　富含蛋白质食物包括：牲畜的奶，牛奶、羊奶、马奶等;畜肉，牛、羊、猪、狗肉等;禽肉，鸡、鸭、鹅、鹌鹑、驼鸟等;蛋类，鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋等及鱼、虾、蟹等;还有大豆类，黄豆、大青豆和黑豆等，其中黄豆的营养价值最高，它是婴幼儿食品中优质的蛋白质来源;此外芝麻、瓜子、核桃、杏仁、松子等干果类蛋白质的含量均较高。　　食物中以豆类、花生、肉类、乳类、蛋类、鱼虾类含蛋白质较高，而谷类含量较少，蔬菜水果中更少。人体对蛋白质的需要不仅取决于蛋白质的含量，而且还取决于蛋白质中所含必需氨基酸的种类及比例。由于动物蛋白质所含氨基酸的种类和比例较符合人体需要，所以动物性蛋白质比植物性蛋白质营养价值高。　　在植物性食物中，米、面粉所含蛋白质缺少赖氨酸，豆类蛋白质则缺少蛋氨酸和胱氨酸，　　故食混合性食物可互相取长补短，大大提高混合蛋白质的利用率，若再适量补充动物性蛋白质，可大大提高膳食中蛋白质的营养价值。虽然人乳、牛乳、鸡蛋中的蛋白质含量较低，但它们所含的必需氨基酸量基本上与人体相符，所以营养价值较高，是膳食中最好的食品。

[size=10.5pt][color=#0000ff][font=微软雅黑]什么是大豆蛋白质？[/font][/color][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆蛋白质是一种植物性蛋白质。大豆蛋白质的氨基酸组成与牛奶蛋白质相近，除蛋氨酸略低外，其余必需氨基酸含量均较丰富，是植物性的完全蛋白质，在营养价值上，可与动物蛋白等同，在基因结构上也是最接近人体氨基酸，所以是最具营养的植物蛋白质。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆蛋白质是由一系列氨基酸通过肽键结合而成的高分子有机聚合物，它主要由清蛋白和球蛋白组成，其中清蛋白约占5%，球蛋白约占90%。[/font][/size][size=10.5pt][font=微软雅黑]大豆蛋白也有缺点，怕高温，气味怪。大豆蛋白的食用温度最好不要用鲜开始，100℃的开水会破坏大豆蛋白质结构，会降低其营养价值。同时，大豆蛋白含有的大豆异黄酮等等物质让大豆蛋白质的冲食具有一定的腥味。[/font][/size]

市售的白芷调味品是属于哪种？谢谢！

本人最近要做蛋白质中氨基酸HPLC -UV 分析，不知有否同仁能否提供帮助以及提供建议，多谢！

一，蛋白质（包括酶）的提取　　大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。（一）水溶液提取法　　稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。1、pH值　　蛋白质，酶是具有等电点的两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化，从而导致蛋白质构象的不可逆变化，一般来说，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液。2、盐浓度　　稀浓度可促进蛋白质的溶，称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。（二）有机溶剂提取法　　一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解磷脂的能力强；二是丁醇兼具亲水性，在溶解度范围内（度为10%，40度为6.6%）不会引起酶的变性失活。另外，丁醇提取法的pH及温度选择范围较广，也适用于动植物及微生物材料。