使用配备C18色谱柱的超高效合相色谱快速分离营养保健品中的维生素K1异构体和维生素K2
维生素K1(叶绿醌)是一种人体必需的营养成分,主要由植物(尤其是绿叶蔬菜)产生。天然产物中的维生素K1主要以反式结构存在,而膳食补充剂通常使用合成的维生素K1,其中可能含有相当数量的顺式结构。反式维生素K1具有生物活性,而顺式K1并不具备。我们迫切需要一种能够分离反式和顺式维生素K1异构体的方法,以便真正地评估补充剂成分的营养价值。目前用于分离维生素K1异构体的HPLC方法需要使用C30色谱柱。HPLC方法的典型运行时间大约为20min,并且有些方法还需要使用氯化溶剂。超高效合相色谱(UltraPerformance Convergence Chromatography™ ,UPC² ® )是 一种分离技术,它利用压缩CO2处于或接近超临界状态时的特有属性 (即低粘度和高扩散性)以及亚2 µ m颗粒填充色谱柱,显著提高了分离效率、速度和选择性。 本应用纪要介绍了一种快速分离维生素K1反式和顺式异构体以及四烯甲萘醌(MK-4,维生素K2的一种常见形式)的方法,该方法使用UPC² 和ACQUITY UPC² HSS C18 SB色谱柱,在3min内即可完成分离。维生素K1异构体和MK-4的结构如图1所示。与目前所使用的基于LC的维生素K1反式和顺式异构体分析方法比相比,此UPC² 方法更加快速、简单(无需使用C30色谱柱),并且所消耗的有机溶剂更少。