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氯舒隆

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氯舒隆相关的方案

  • 岛津:GCMSMS法测定蔬菜水果中氯谷隆残留
    本文采用岛津GCMS-TQ8050结合SHIMADZU-GL WondaPak QuEChERS前处理包建立了黄瓜中的氯谷隆等217种农残同时检测的方法。该方法简单方便,分析速度快,抗干扰能力强,检出限低,重现性好,回收率高,能够有效的监测蔬菜水果中217种农残的含量。
  • TSKgel CM-STAT色谱柱对鼠腹水纯化而来的单克隆抗体(IgG1)异构体的高分辨率分析
    从老鼠腹水中纯化而来的单克隆抗体往往含有一些异构体。即使在SDS-PAGE 电泳分析中只显从老鼠腹水中纯化而来的单克隆抗体往往含有一些异构体。即使在SDS-PAGE 电泳分析中只显示一条带,但当使用等电聚焦电泳时却可以观察到多条带的存在。TSKgel CM-STAT是一款适合于分析抗体异构体的高分辨率、非多孔、弱阳离子交换色谱柱。在本数据中介绍了使用TSKgel CM-STAT 色谱柱进行鼠腹水由来的单克隆抗体异构体分析的应用。同时,我们将通过TSKgel CM-STAT色谱柱分离获得的不同组分进一步使用等电聚焦电泳进行了鉴定。结果表明,TSKgel CM-STAT色谱柱确实适合于异构体的分析,并且可以适用于毫克级别的微量、高分离度的样品制备。
  • 用于单克隆抗体完整结构或亚基精确质量数测定的一体化工作流程
    单克隆抗体 (mAb) 型药物代表了发展迅速的一类生物药物,对这类药物需要进行深入表征,以便获得临床试验和后续上市的批准。鉴于单克隆抗体具有分子量大及存在翻译后修饰(糖基化)的特征,精确质量数测定是单克隆抗体分析表征中最具挑战性的步骤。这些特性也使得修饰位置的测定更加复杂。?为了应对抗体质量数测定相关的挑战,人们使用了大量补充方法。可以用 PNGase F 处理抗体去除 N-糖链,后用 IdeS 等蛋白酶酶解获得抗体片段,也可还原单克隆抗体,以生成轻链和重链,随后进行质量数测定。这些技术可以各种组合加以应用。样品前处理可能费时费力,而且重现性不佳。本应用简报展示了如何使用 Agilent AssayMAP Bravo 的自动化功能简化这些方法,减少引入人为误差的可能性,提高重现性,并实现更长的无人值守时间。
  • 用于单克隆抗体完整结构或亚基精确质量数测定的一体化工作流程
    单克隆抗体 (mAb) 型药物代表了发展迅速的一类生物药物,对这类药物需要进行深入表征,以便获得临床试验和后续上市的批准。鉴于单克隆抗体具有分子量大及存在翻译后修饰(糖基化)的特征,精确质量数测定是单克隆抗体分析表征中最具挑战性的步骤。这些特性也使得修饰位置的测定更加复杂。为了应对抗体质量数测定相关的挑战,人们使用了大量补充方法。可以用 PNGase F 处理抗体去除 N-糖链,后用 IdeS 等蛋白酶酶解获得抗体片段,也可还原单克隆抗体,以生成轻链和重链,随后进行质量数测定。这些技术可以各种组合加以应用。样品前处理可能费时费力,而且重现性不佳。本应用简报展示了如何使用 Agilent AssayMAP Bravo 的自动化功能简化这些方法,减少引入人为误差的可能性,提高重现性,并实现更长的无人值守时间。
  • 使用Qpix系统自动筛选颜色克隆——Molecular Devices
    在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程中,过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。Molecular Devices QPix400系列微生物克隆筛选系统提供了一个自动化的解决方案,尤其针对蓝白克隆筛选,通过白光成像提供了准确高效的克隆转化检测方法。这个解决方案整合了QPix Software2.0蓝白筛选模块、QPix颜色滤片以及可调平板适配器。本文重点描述了使用QPix420系统进行颜色克隆筛选实验的结果,通过DNA测序进一步验证了挑取克隆的准确性。优势?通过白光高效监控转化效率?准确区分白色、蓝色或浅蓝色等颜色?智能化软件选择模块,可以自动或自定义筛选
  • 绿谷隆农残筛查的整体解决方案以及方法包介绍-三重四极杆串接气质
    方法包是赛默飞世尔科技色谱质谱部应用部门针对客户需求提出的简易仪器使用流程,方法包内所涉及的化合物均为常见的能在 GC/MS 上检测的化合物,如农药残留、多环芳烃、多氯联苯、多溴联苯和多溴联苯醚、邻苯二甲酸酯等。方法包的作用就是能使客户更快更简便得使用仪器,尽快上手。方法包包括进样方法,数据处理方法(TraceFinder 方法文件夹),相关应用文章,相关标准,色谱柱信息,前处理方法,数据文件等,客户可以直接调用进样方法和数据处理方法完成绿谷隆等化合物的定性定量分析。
  • 依据日本肯定列表使用 SPE 柱及 LCMS/MS 对肉类样品中的氯舒隆
    相当于美国FDA 的日本厚生劳动省(MHLW) 于2006 年5 月29 日起开始实施日本肯定列表制度,用以限定食品中的农业化学品[1]。此项法规的颁布旨在禁止含有超过最大残留限量(MRL) 农业化学品的化学污染食品流入市场。农业化学品包括农药、饲料添加剂和兽药。该法规适用于所有国产和进口食品,涉及近800 种化学品。由于日本是西太平洋/ 大洋洲地区的最大进口国,所以大多数食品出口国必须遵守此准则。此法规的检验方案采用经典的SPE 柱和LC/MS 或GC/MS 技术,要求农业化学品的残留量不超出MRL(通常为0.01 ppm)。本文描述了不同肉类基质中45 种中性、碱性和酸性兽药的分析,残留量均低于日本肯定列表规定的MRL (0.01 ppm)。通过采用Hydromatrix 硅藻土、Bond Elut Plexa SPE 柱、Pursuit C18 HPLC 色谱柱及MS 检测,安捷伦提供了肉中兽药测定的完整解决方案。
  • 米拉贝隆缓释片的体内外相关性溶出方法研究
    目的:流通池模拟难溶性药物米拉贝隆缓释制剂的溶出,建立米拉贝隆体内和体外的相关性(IVIVC)模型,开发具有预测能力的体外溶出方法。方法:Loo-Riegelman法对三种不同释放速率制剂的体内血药浓度进行反卷积分获得相应的累积吸收百分数(Fabs%),建立体外溶出目标曲线。以纯水为试验介质,流速4.0mLmin-1的试验条件下进行制剂R(贝坦利®,50mg)和制剂T1、T2(50mg)的溶出试验,通过高效液相色谱法测定溶出度,梯形面积法获得制剂的累积溶出百分数(Fdiss%)。结果:立了米拉贝隆缓释制剂体内累积吸收与体外溶出度之间的A级 IVIVC(回归系数大于0.9), 制剂的外部预测误差在规定范围内。结论:研究建立的米拉贝隆缓释制剂IVIVC模型经验证具有较好的预测能力,该方法拥有的良好区分力及线性模型也可以为质量控。
  • 基于新型Fc受体色谱技术表征单克隆抗体
    迄今为止,经临床批准的大多数单克隆抗体类生物治疗药物,主要是IgG1形式,其次是IgG2和IgG4形式。糖基化是导致单克隆抗体翻译后修饰异质性的主要原因,会影响药物的治疗作用机制(MOA)。同时,糖基化也是影响药物溶解度、动力学、稳定性和疗效的关键因素之一。因此,监测聚糖的关键质量属性(CQA)在药物开发阶段显得至关重要。IgG与其细胞Fc受体(FcR)的结合亲和力取决于其IgG亚类和Fc区的糖基化修饰。并且,N-聚糖的结构也与抗体ADCC活性密切相关,因此需要对单克隆抗体制剂及其生物类似药进行糖基化修饰的监测。东曹生命科学(Tosoh Bioscience)开发出了一种基于Fcγ IIIa的亲和色谱法来评价单克隆抗体糖型差异的全新方法。在文章中,首先简要概述了Fc受体的功能。然后,阐述了基于FcR的亲和色谱的原理、新型FcR色谱柱根据抗体N-聚糖分离多种单克隆抗体具有高选择性。最后,我们举例介绍了FcR色谱柱在细胞株筛选、糖工程监测、工艺开发和生产过程监控中的应用。
  • 噻苯隆对薄皮甜瓜风味品质的影响
    甜瓜是我国主要的园艺作物, 在我国果蔬生产和消费中占据重要地位,不仅是带动农民就业増收的高效园艺作物, 也是满足城乡居民生活需求的重要时令水果, 在全球水果产量排名中位列第7 。在我国, 随着设施农业的发展, 甜瓜设施栽培的面积已占甜瓜栽培总面积的48%,由于甜瓜自身复杂的性型及栽培环境条件的限制, 在设施甜瓜种植中植物生长调节剂噻苯隆作为坐果剂被广泛应用。然而, 随着以噻苯隆为代表的植物生长调节剂的广泛使用, 甜瓜出现风味变淡、口感欠佳的现象已引起消费者的关注, 这些风味品质的变化与植物生长调节剂噻苯隆的使用和残留有关吗? 其影响的程度和可能的机制是什么? 这已成为我国农产品质量安全领域理论和甜瓜产业上一个急需解决的问题。
  • 理加联合:利用树木年轮宽度资料重建川西卧龙地区过去159年夏季温度的变化
    根据川西卧龙地区林线位置岷江冷杉(Abies faxoniana)的年轮宽度资料, 分析了该地区树木年轮宽度与气候要素的关系, 并重建了该地区1850年以来夏季(6–8月份)温度的变化历史。结果表明: 川西卧龙地区在过去159年来的温度变化上, 最为明显的特征是20世纪40年代以来的显著变暖趋势, 而在20世纪40年代以前的温度明显偏低, 主要的低温时期在1850–1870年和1890–1930年。该温度序列的冷暖期与附近地区的冰芯、冰川进退资料, 以及对于夏季温度响应敏感的树轮年表都有着较好的对应关系, 这表明重建序列记录了可靠的区域尺度的温度信号。对重建温度序列的小波分析表明, 较为明显的有2–8年和10–16年的周期, 而这些周期可能与厄尔尼诺-南方涛动气候系统和太阳活动周期有一定的关系。
  • 芯片毛细管电泳 ZipChip 对单克隆抗体的原态分析
    高分辨率的对完全原态下(fully native)的单克隆抗体的电荷变异体的分离,对 mAb 和 ADC (抗体药物结合物)的分析均能提供非常好的准确度和灵敏度
  • 【应用资料下载】CloneSelect单细胞分离系统与传统单细胞克隆方法的比较研究
    有限稀释是一个普遍接受的建立单克隆性的方法,它基于统计概率因此只有很少一部分( 10-30% )的微孔能被接种单个细胞。流式细胞分选是另一种传统的克隆方法,它可以高效地接种单个细胞至微孔内,但是液体剪切力会对被分选细胞的活率造成不可忽视的影响1-2 。此外,仪器维护和培训产生的高昂成本对一些资源有限的用户造成障碍。因此,急需高性价比的细胞株开发流程和高效的克隆方法。CloneSelect™ Single-Cell Printer™ f.sight™ ( f.sight )被开发用于满足这些需求, 它可以柔和地接种单个细胞至微孔,同时记录整个细胞接种过程,提供单克隆性的图像证据以及优异的接种后细胞生长用于细胞株开发。
  • 如何使用荧光检测方法筛选细菌克隆-Molecular Devices-Qpix 400
    98%。QPix400 系列的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量,因为通过对荧光蛋白表达的定量,实现了有目的性筛选,确保只挑感兴趣的克隆。QPix 已成为市场上微生物克隆筛选系统的领导者,它可以提供多组荧光滤光片,兼容大多数的荧光克隆载体。基于荧光的重组克隆筛选方法使重组基因表达的筛选更加容易,提供了一个更加准确的筛选方法。
  • SPE-HPLC大米中苄嘧磺隆残留量测定
    摘要 苄嘧磺隆是选择性内吸传导型除草剂。药剂在水中迅速扩散,经杂草根部和叶片吸收后转移到其它部位,阻碍支链氨基酸生物合成。敏感杂草生长机能受阻、幼嫩组织过早发黄,抑制叶部、根部生长。能有效防治稻田1年生及多年生阔叶杂草和莎草,能被杂草根、叶吸收并传到其他部位。对水稻安全,适用于稻田防除1年生及多年生阔叶杂草和莎草,效果良好。 建立了SPE-HPLC测定大米中苄嘧磺隆残留量的检测方法。试样中残留的苄嘧磺隆用二氯甲烷提取,提取液经正己烷净化后,用C18固相萃取柱和氟罗里硅土固相萃取柱,用配有紫外检测器的液相色谱检测,回收率稳定。
  • 环氧树脂中无机氯和总氯的测定
    氯含量是环氧树脂的一种重要指标,根据其在树脂中的存在形式可分为无机氯、易皂化 氯和总氯。各种类型的氯在一定温度下均能和胺类等固化剂反应生成相应的可电离的物质, 形成偶极子,对于环氧树脂硬化物性能产生不良的影响。因此,检测环氧树脂原料、半成品 及成品中氯含量,可对其制造工艺和产品品控提供数据依据和技术支持。
  • 高弹性MC尼龙的制备及其断裂表面表征
    本文详细研究了浇铸过程中离心分担率对单体浇铸尼龙(MC尼龙)粘度平均分子量的影响。特性粘度随离心分担率的增大而增大,也就是说,在聚合过程中,MC尼龙的粘均分子量随离心分担率的增大而增大。随着离心分担率的增加,MC尼龙的结晶度变化不大。采用Linseis PT10装置,在氮气流动条件下进行了差示扫描量热分析(DSC)。样品在密闭铝锅中沉淀,室温至300℃,升温速率为20℃/min,用PT1000-Linseis热重分析仪在50-600℃范围内,升温速率为10℃/min进行热重分析。经SEM测试,MC尼龙拉伸断裂表面为典型的韧性断裂表面。拉伸过程中沿拉伸剪切方向出现窄颈现象的均匀性,也证明了MC尼龙的韧性断裂是拉伸的。
  • 新型MAbPac HIC-10 色谱柱高效分离蛋白药物(单克隆抗体药物)
    利用生物兼容高效液相色谱仪,选择合适的疏水作用色谱柱(HIC)分别对融合蛋白和单克隆抗体样品中结构异构体的杂质蛋白与主成分进行有效的分离。
  • 不经显微操作进行体细胞克隆(徒手克隆)
    不需显微操作体细胞核移植的利益和前景远大。当前的成果包括降低装备费用,简化预备工作及实验技术要求低。任何做过胚胎方面试验和口吸管方面工作的人都能很快掌握。尽管用卵母细胞试验的直接工作没有显著减少,但降低了这些工作的技术难度。此外,与早期的技术相比,预备工作如制作工具可以省略。然而,应该注意到产生三倍体需要较多的卵母细胞。无透明带的胚胎可能有利于嵌合体的制作,克隆方法的简化也将有利于核移植的自动化。在卵母细胞成熟期间,用于建立该方法的供体细胞是贴壁的原代培养的颗粒细胞,这些细胞并不是都很适合做供体。随着方法的进一步改进,可能能用不同器官组织的传代细胞和血清饥饿培养的细胞。
  • 莱伯泰科:饲料中苄嘧磺隆残留量测定-win12手动固相萃取仪器
    摘要: 苄嘧磺隆是选择性内吸传导型除草剂。药剂在水中迅速扩散,经杂草根部和叶片吸收后转移到其它部位,阻碍支链氨基酸生物合成。敏感杂草生长机能受阻、幼嫩组织过早发黄,抑制叶部、根部生长。能有效防治稻田1年生及多年生阔叶杂草和莎草,能被杂草根、叶吸收并传到其他部位。对水稻安全,适用于稻田防除1年生及多年生阔叶杂草和莎草,效果良好。建立了SPE-HPLC测定饲料中苄嘧磺隆残留量的检测方法。饲料试样中残留的苄嘧磺隆用二氯甲烷提取,提取液经正己烷净化后,用C18固相萃取柱和氟罗里硅土固相萃取柱,用配有紫外检测器的液相色谱检测,回收率稳定。
  • 曲安西龙片的测定
    【含量测定】取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于曲安西龙16mg),置100ml量瓶中,加甲醇适量,超声处理10min使曲安西龙溶解,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml,置50ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,测定。色谱条件:检测波长:UV 238 nm流动相:乙腈-水(18:82)洗脱方式:等度进样量:20 ul
  • 关于如何提高细胞株筛选中单克隆细胞活性的探讨
    轻柔分选:鞘液压力2psi,提高分选细胞活性灵活分选:可根据荧光信号筛选,也可以不染色直接铺板无菌分选:一次性芯片,保证样本之间完全隔离;仪器体积小巧,可置于超净台中高效分选:96孔板分选不到1min,384孔板4min以内,单克隆率超过95%轻松分选:仪器操作简单,无需专人操作维护
  • 饲料中苄嘧磺隆残留量测定-win12手动固相萃取仪器
    摘要: 苄嘧磺隆是选择性内吸传导型除草剂。药剂在水中迅速扩散,经杂草根部和叶片吸收后转移到其它部位,阻碍支链氨基酸生物合成。敏感杂草生长机能受阻、幼嫩组织过早发黄,抑制叶部、根部生长。能有效防治稻田1年生及多年生阔叶杂草和莎草,能被杂草根、叶吸收并传到其他部位。对水稻安全,适用于稻田防除1年生及多年生阔叶杂草和莎草,效果良好。建立了SPE-HPLC测定饲料中苄嘧磺隆残留量的检测方法。饲料试样中残留的苄嘧磺隆用二氯甲烷提取,提取液经正己烷净化后,用C18固相萃取柱和氟罗里硅土固相萃取柱,用配有紫外检测器的液相色谱检测,回收率稳定。
  • Polpharma Biologics子公司Bioceros为单克隆抗体表征建立专用内部实验室
    运用RapiFluor-MS技术的沃特世UNIFI生物制药平台解决方案是采用成熟分析方法开展工业规模高通量应用的理想之选,这套解决方案能够满足实验室支持生物学家开展上游、下游加工或克隆筛选研究的各项需求。
  • 高效液相色谱法测定吡嘧磺隆原药含量
    吡嘧磺隆属于磺酰脲类除草剂,具备活性高、用量少、选择性强的特点,在现代农业中广泛使用。本方案参考GB 22618-2008《吡嘧磺隆原药》使用福立 LC 5090高效液相色谱仪搭载紫外检测器对对该农药含量进行测定,测得某吡嘧磺隆原药样品中吡嘧磺隆含量为99.89%。
  • 华谱科仪方法转换液相色谱法分析中药材穿山龙
    本文参考2020版《中国药典》中记载的中药材穿山龙液相色谱分析方法,筛选合适的色谱柱,并参照0512通则进行UHPLC方法转换。实验结果显示,可以实现穿山龙样品中薯蓣皂苷与杂质峰的良好分离,目标峰峰形良好,薯蓣皂苷峰理论塔板数大于3000,满足药典要求。
  • GCMS负化学电离法测定环境水中得克隆残留量
    本文使用岛津GCMS-QP2020 NX气质联用仪结合负化学离子源(NCI),建立了环境水中得克隆类物质残留量的检测方法。样品经溶剂提取、复合硅胶柱净化、溶液浓缩后上机测试。实验结果表明:在0.5~50 ng/mL浓度范围内,得克隆组分线性良好,线性相关系数均在0.9997以上,仪器检出限在0.10~0.17 ng/mL之间。取浓度为1.0 ng/mL标准溶液,连续进样6次,得克隆化合物峰面积相对标准偏差小于8%,重复性良好。在空白地表水样品中进行50 ng/L和100 ng/L两个不同浓度加标实验,回收率在87.5%-109%之间。该方法灵敏度高,适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中得克隆含量的测定。
  • GCMSMS测定环境水中得克隆残留量
    本文使用岛津GCMS-TQ8050 NX三重四极杆气质联用仪结合BEIS离子源,建立了环境水中得克隆类物质残留量的检测方法。样品经溶剂提取、复合硅胶柱净化、溶液浓缩后上机测试。实验结果表明:在0.2~50 ng/mL浓度范围内,得克隆组分线性良好,线性相关系数均在0.9996以上,仪器检出限在0.044~0.096 ng/mL之间。取浓度为0.2 ng/mL标准溶液,连续进样7次,得克隆化合物峰面积相对标准偏差小于7%。在空白地表水样品中进行1 ng/L浓度加标实验,平均回收率在86-118%之间。该方法灵敏度高,重复性良好,适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中得克隆含量的测定。
  • 高效液相色谱法测定棉花中农残噻苯隆
    噻苯隆(Thidiazuron)别名脱叶脲,是一种常见的植物生长调节剂,对于棉花而言,有助于其在生长过程中脱叶。尽管在我国,噻苯隆在棉花上已登记允许使用,但为保障棉花品质,减少农残对人体、环境危害,依旧需严格测定棉花噻苯隆农药残留。《GB/T 32718-2016 棉花 噻苯隆残留量的测定方法》中规定了棉花中噻苯隆的高效液相色谱法测定要求。参考该标准,福立仪器开发了液相色谱快速测定棉花中噻苯隆,本方法中噻苯隆定量限为0.02mg/kg,小于《GB/T 32718-2016 棉花 噻苯隆残留量的测定方法》中测定低限0.04mg/kg;加标回收率达87-87.1%,符合该标准中回收率大于80%的要求;同时棉花样品中未检出噻苯隆残留。
  • PCR扩增产物的克隆—TA克隆法
    实验方法原理TA克隆 系统由Invitrogen公司(San Diego,CA)发展而来的商业性试剂盒,它用于PCR 产物的克隆 和测序。其原理是利用Taq酶能够在PCR 产物的3' 末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3' T突出端的载体,在连接酶作用下,可以快速地、一步到位地把PCR 产物直接插入到质粒载体的多克隆 位点(MCS)中。 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性,即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接率低,一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。 T4噬菌体DNA 连接酶催化DNA 连接反应分为3 步:首先,T4 DNA 连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物;然后,酶-ATP复合物再结合到具有5' 磷酸基和3' 羟基切口的DNA上,使DNA腺苷化;最hou产生一个新的磷酸二酯键,把切口封起来。连接反应通常将两个不同大小的片断相连。因为DNA片断有两个端点,所以切割时出现两种可能,一种是单酶切,另一种是双酶切,这两种酶切方法在基因工程操作中都经常用到。对于单酶切来说,载体与供体的末端都相同,连接可以在任何末端之间进行,这样就导致了大量的自连接产物。为了减少自环的高本底,可对载体进行5' 除磷酸处理,原理是连接酶只能连接DNA片断的3' OH末端与5' 端,所以除磷后载体不会自环。一旦有外源片断插入时,由外源片断提供5' 端就能与载体进行连接。通过这种方法可大大减少由载体的自环造成的高本底。对于双酶切来说,无论载体与供体同一片段上都有不同的末端,这样就避免了载体与供体的自环,能使有效连接产物大大增加。双酶切的另一个特点是能将供体分子定向连接到载体上。 连接反应的温度在37℃时有利于连接酶的活性。但是在这个温度下粘末端的氢键结合是不稳定的。因此采取折中的温度,即12-16℃,连接12-16h(过夜),这样既可最da限度地发挥连接酶的活性,又兼顾到短暂配对结构的稳定。Taq DNA酶扩增的PCR产物,其DNA双链前后末端都有一个游离的A碱基,可以与pGEM-T Easy Vector 末端游离的T碱基互补形成环状重组T质粒。

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