安哥司酮

[align=center][b]基于HPLC的乳痛安口服主要成分含量研究[/b][/align][align=center]邰晓鹏[sup]1[/sup]，臧恒昌[sup]*[/sup][/align][b]摘要 目的:[/b]利用HPLC方法建立乳痛安口服液中蒲公英主要的成分咖啡酸、夏枯草的主要成分迷迭香酸、连翘的主要成分连翘苷含量测定方法，意在探究一种稳定可靠的检测方法，以用于医院内部自制制剂乳痛安口服液含量测定。[b]方法：[/b]配置好乳痛安口服液供试液和咖啡酸、迷迭香酸以及连翘苷标准对照品溶液，确定合适的色谱条件后依次进行线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、加样回收率试验、样品含量测定以及阴性对照试验的实验操作，对实验结果进行分析处理。[b]结果:[/b]从乳痛安口服液样品的高效液相色谱图中可以看出，在选定HPLC条件下，医院内部自制的乳痛安口服液中的咖啡酸、迷迭香酸与连翘苷与其他成分分离良好，并得出咖啡酸、迷迭香酸及连翘苷的在一定范围内线性关系良好，口服液稳定性良好，仪器精密度良好。[b]结论：[/b]本研究建立乳痛安口服液三种主要成分的HPLC含量测定方法，相对于原有的乳痛安口服液仅做定性鉴别质量标准有较大改善，方法学试验结果满足分析要求，表明所建立的高效液相色谱方法稳定可靠，可用于医院内部自制制剂乳痛安口服液含量测定，为提高医院内部自制制剂乳痛安口服[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量标准提供参考。关键词：乳痛安口服液；高效液相色谱；含量测定[b] [/b][align=center][b]Study on the Content of Main Components [/b][/align][align=center][b]inRutongan Orally Treated by HPLC[/b][/align][align=center]Xiao-pengtai[sup]1[/sup]，Zang-hengchang[sup]1*[/sup][/align][b]Abstract Objective[/b]: The method for the determination of the content of forsythin, the main component of dandelion in Rutongan oral liquid, and the main component of rosmarinic acid in Prunella vulgaris and the forsythia suspensa by HPLC, was established to explore a stable and reliable detection method. It is used for the determination of the content of the oral preparation of homemade milk emulsion in the hospital. [b]Methods:[/b] Prepare a solution of Rutongan oral solution and caffeic acid, rosmarinic acid, and forsythin standard reference solution. In order to determine the appropriate chromatographic conditions and then perform the linear relationship investigation, precision test, stability test, sample recovery test, sample content determination, and negative control experiment , and the results were analyzed and processed. [b]Results: [/b]From the highperformance liquid chromatograms of Rutongan oral liquid sample, it can be seen that caffeic acid, rosmarinic acid, and forsythin in the hospital's own homemade Rutongan oral liquid and other ingredients under selected HPLC conditions The separation was good, and it was found that the caffeic acid, rosmarinic acid, and forsythin had a good linear relationship within a certain range, the oral liquid had good stability, and the instrument precision was good. [b]Conclusion: [/b]This study establishes HPLC method for the determination of the three main components of Ru Tong An Oral Solution. Compared with the original Ru Tong An Oral Solution, it only has a qualitative improvement in the quality standard for qualitative identification. The method test results meet the analysis requirements. It shows that the established HPLC method is stable and reliable, and it can be used for the determination of the homemade preparation of the hospital's selfmade Ru Tong An oral liquid, and provides reference for improving the quality standard of the hospital's homemade self-made Ru Tong An oral liquid.[b]Keywords:[/b]Rutongan oral liquid High performance liquid chromatography Determination of content[b]1 研究简介1.1 乳痛安口服液简介[/b]乳痛安口服液原名乳痛灵口服液，色棕黄，澄清、味微甜，具主要功效为理气、散结等，在临床科室中主要用于治疗乳腺增生、乳腺炎等相关疾病，且疗效确切。李芝[sup][/sup]研究乳痛安口服液用于大鼠乳腺增生的治疗，结果表明乳痛安口服液可影响大鼠体内生殖激素分泌水平，从而使乳腺增生恢复正常。史栋栋[sup][/sup]通过中药尿液药理学筛选发现咖啡酸具有抑制乳腺癌细胞MCF-7的活性。窦景云[sup][/sup]研究发现夏枯草具有较明显的抗肿瘤作用。[b]1.2 HPLC原理[/b]HPLC是色谱法一个重要分支，因其较高的精密度而广泛应用于中药有效成分含量测定，具有高压、高效、快速、灵敏度高、应用范围广等特点。[b]1.3 HPLC用于医院制剂含量测定[/b]黄力[sup][/sup]利用HPLC测定医院自制制剂药物中水杨酸与氯霉素含量，所建方法可同时测定两种成分的含量，操作简便。梁萍等[sup][/sup]为提高制剂质量，对其含量进行HPLC测定，着色剂在医院制剂中应用广泛。杨江丰[sup][/sup]利用高效液相色谱技术同时测定医院自制制剂中柠檬酸、苹果绿等5中食用色素含量。王继森[sup][/sup]对其含量进行HPLC测定，经方法学验证后可作为该制剂质量提升的依据。[b]2 材料2.1 样品[/b]收集3批乳痛安口服液样品（批号分别为20150715, 20150722, 20150729），所有样品均由泰安市中心医院提供。[b]2.2 试剂[/b]连翘苷对照品（中国食品药品检定研究所批号110821-200406），咖啡酸对照品(中国食品药品检定研究所批号110885-2001102)、迷迭香酸对照品(中国食品药品检定研兖所批号111871-201505)、甲醇、乙腈均为色谱纯(赛默飞世尔科技有限公司)、甲酸(天津市永大化学试剂有限公司20140412) 超纯水。[b]2.3 仪器[/b]日本岛津高效液相色谱仪（LC-10A），美国Agilent 1200型高校液相色谱仪，TG3288型分析天平（上海天平仪器厂）。[b]3 方法3.1 咖啡酸和迷迭香酸方法学考察及含量测定3.1.1供试品溶液的制备[/b]精密量取医院内部自制制剂乳痛安口服液5 ml，置25 ml的棕色量瓶之中，加甲醇定容并摇匀，过滤后取续滤液并用0.22 μm微孔滤膜过滤，备用。[b]3.1.2对照品溶液的制备[/b]精密称取咖啡酸对照品与迷迭香酸对照品适量，加甲醇配制成为咖啡酸浓度为5 ugml-1，迷迭香酸浓度为10 μgml-1的混合标准品溶液，用0.22 μm的微孔滤膜过滤，备用。[b]3.1.3色谱条件[/b]色谱柱为 Athena C18 120A（250 mm×4.6 mm,5 μm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1%甲酸水-甲醇进行梯度洗脱，详见表3-1；进样量10 μl；检测波长为330 nm；柱温40 ℃，流速为1 ml/min。[img=,690,570]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010902238644_5706_1669358_3.jpg!w690x570.jpg[/img][b]3.1.6稳定性试验[/b]收集医院内部自制制剂乳痛安口服液样品（20150715），按照“3.1.1”条件下配置成供试品溶液，放置在暗处、室温下。按照“3.1.3”色谱条件下分别于0 h、3 h、6 h、9 h、24 h、48 h进样10 μl，记录医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸与迷迭香酸面积，并计算48 h内RSD值。[b]3.1.7加样回收率试验[/b]精密吸取同一已知咖啡酸咖啡酸与迷迭香酸含量的医院内部自制制剂乳痛安口服液1 ml，再分别准确加入10 μg/ml咖啡酸对照品与迷迭香酸对照品溶液0.5 ml、1 ml、1.5 ml。按3.1.1项方法制备成供试品溶液后，按3.1.3项下色谱条件进样平行测定，进样量10 μL，测定医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸与迷迭香酸峰面积积分值并计算结果。[b]3.1.8样品的含量测定[/b]吸取供试品溶液10 μL，注入液相色谱仪，按3.1.3项的色谱条件进样并记录峰面积，利用3.1.4项下的线性关系计算相应的咖啡酸与迷迭香酸含量。[b]3.1.9阴性对照试验[/b]依处方称取药材，其中剔除夏枯草、蒲公英，按乳痛安口服液配置规程制作不含咖啡酸、迷迭香酸的阴性对照品，按3.1.3项下色谱条件进样，进样量10 μL，得阴性对照高效液相图。[b]3.2 连翘苷方法学考察及含量测定3.2.1供试品溶液的制备[/b]精密量取医院内部自制制剂乳痛安口服液5ml,置25ml容量瓶中，加甲醇适量，振摇溶解并定容至刻度，摇匀，放置，滤过，弃初滤液，取续滤液作为供试品溶液。[b] 3.2.2对照品溶液的制备[/b]精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇溶解得浓度为0.5 mg/ml的对照品溶液，用0.22 um的微孔滤膜过滤，备用。[b] 3.2.3色谱条件[/b]Diamonsil C18(150x4.6mm，5μm) 柱温:25℃ 流动相:乙腈一水(25:75) 流速:1.0m/min 进样量:10μL 检测波长:277nm 数据采集时间:20min.[b]3.2.4 线性关系考察[/b] 精密吸取连翘苷对照品溶液适量，以甲醇溶解并稀释得1mg/ml连翘苷储备液。精密吸取上述1mg/ml连翘苷储备液，以甲醇进行适当稀释得浓度梯度为0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml的对照品溶液。按“3.2.3”项下色谱条件分别进样10μL，测定峰面积积分值，进行线性回归分析。[b]3.2.5稳定性试验[/b]收集医院内部自制制剂乳痛安口服液样品（150722），按3.1.1项方法制备成供试品溶液，置于室温下，按3.2.3项下色谱条件分别于0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h进行HPLC分析，进样量10 μL，测定乳痛安口服液中连翘苷峰面积并计算RSD值。[b]3.2.6精密度试验[/b]取0.05 mg/ml、0.25 mg/ml、0.5 mg/ml三个浓度的连翘苷对照品溶液，按3.2.3项下色谱条件各重复进样4次，进样量10 μL，测定医院内部自制制剂乳痛安口服液中连翘苷峰面积积分值并计算RSD值。[b]3.2.7加样回收率试验[/b]精密吸取同一已知连翘苷含量的乳痛安口服液1ml,再分别准确加入0.5mg/ml连翘苷对照品溶液0.5ml、1m1、1.5ml。按3.1.1项方法制备成供试品溶液后，按3.2.3项下色谱条件进样平行测定，进样量10μL，测定医院内部自制制剂乳痛安口服液中连翘苷峰面积积分值并计算结果。[b]3.2.8阴性对照试验[/b]依处方称取药材，其中剔除连翘，按乳痛安口服液配置规程制作不含连翘苷的阴性对照品，按3.1.3项下色谱条件进样，进样量10 μL，得阴性对照高效液相图。[b]3.2.9样品的含量测定[/b]精密吸取3个批次（批号150715, 150722, 150729）的医院内部自制制剂乳痛安口服液各5 ml，按3.2.1项方法制备成供试品溶液后，按3.2.3项下色谱条件进样测定，进样量10 μL，测定医院内部自制制剂乳痛安口服液中连翘苷峰面积积分值并按3.2.4所建立标准曲线定量连翘苷含量。[b]4结果与讨论[/b]图4-1与图4-2为选定色谱条件下咖啡酸与迷迭香酸标准品与医院内部自制制剂乳痛安口服液样品高效液相色谱图，从图中可以看出，在选定的HPLC条件下，医院内部自制乳痛安口服液中咖啡酸、迷迭香酸与其他成分分离良好，咖啡酸保留时间约为15min，迷迭香酸保留时间约为38.5min,证明选定的液相色谱方法可靠，可用于医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸与迷迭香酸含量测定。[img=,690,595]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010903300390_4720_1669358_3.jpg!w690x595.jpg[/img][b]4.1 咖啡酸方法学实验结果及含量测定4.1.1咖啡酸线性关系考察结果[/b]以医院内部自制乳痛安口服液中咖啡酸峰面积积分值对标准品浓度进行线性回归，所得回归方程为Y= 8.5726X -0.8（回归系数R2= 1），证明医院内部自制乳痛安口服液中咖啡酸在10~100 μg/ml范围内线性关系良好，咖啡酸对照品不同浓度下的峰面积如表4-1所示，咖啡酸对照品标准曲线如图4-3所示。[img=,690,587]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010904476757_7540_1669358_3.jpg!w690x587.jpg[/img][b]4.1.3精密度试验结果[/b]10 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml三个浓度的咖啡酸对照品溶液峰面积RSD值分别为1.1%、1.1%、0.98%，表明仪器精密度良好。[b]4.1.4加样回收率试验结果[/b]医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸的平均回收率为100.12%，见表4-3，回收率高。[img=,690,563]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010905395659_1310_1669358_3.jpg!w690x563.jpg[/img][b]4.2 迷迭香酸方法学实验结果及含量测定结果4.2.1 线性关系考察结果[/b]以迷迭香酸峰面积积分制对浓度进行线性回归，不同浓度的迷迭香酸峰面积如表4-5所示，线性关系回归方程为Y= 8.8993X +4.0679（回归系数R2= 0.9999），迷迭香酸浓度范围在10~100 ug/ml时线性关系良好，如图4-4迷迭香酸标准曲线，即此方法可用于医院内部自制乳痛安口服液中迷迭香酸含量测定。[img=,690,563]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010906511971_4264_1669358_3.jpg!w690x563.jpg[/img][b]4.2.3精密度试验结果[/b]10 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml三个浓度的迷迭香酸对照品溶液峰面积RSD值分别为1.1%、1.2%、0.96%，表明仪器精密度良好。[b]4.2.4 加样回收率试验结果[/b]医院内部自制制剂乳痛安口服液中迷迭香酸的平均回收率为100.16%，见表4-7，加样回收率高。[img=,690,580]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010907489879_7658_1669358_3.jpg!w690x580.jpg[/img][b]4.2.6 阴性对照结果[img=,690,439]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010908530066_2062_1669358_3.jpg!w690x439.jpg[/img][img=,690,448]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010909528743_2907_1669358_3.jpg!w690x448.jpg[/img][img=,690,469]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010910311538_2163_1669358_3.jpg!w690x469.jpg[/img][img=,690,395]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010911225097_5280_1669358_3.jpg!w690x395.jpg[/img][img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010912077942_8280_1669358_3.jpg!w690x388.jpg[/img][b]4.3.5 阴性对照试验结果[/b]如图4-9所示，连翘苷阴性对照高效液相图没有测得连翘苷。[img=,690,569]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808010913033496_1251_1669358_3.jpg!w690x569.jpg[/img][b]4 结论与讨论[/b]医院内部自制制剂乳痛安口服液中蒲公英主要成分咖啡酸、夏枯草主要成分迷迭香酸、连翘中主要成分连翘苷是具有代表性的三种成分，本研究建立乳痛安口服液三种主要成分的HPLC含量测定方法，相对于原有的乳痛安口服液仅做定性鉴别质量标准有较大改善。本研究优化色谱条件，建立乳痛安口服液中三种主要成分含量测定方法，并系统地验证所建立的方法的可行性，以期提升原有乳痛安口服[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量标准，经过试验条件的摸索，医院内部自制乳痛安口服液中咖啡酸与迷迭香酸色谱条件为0.1%甲酸与甲醇梯度洗脱，医院内部自制乳痛安口服液中连翘苷色谱条件为乙腈一水（25:75），所建立的方法能够较好地将咖啡酸、迷迭香酸、连翘苷与其他成分分开，可用于乳痛安口服液三种主要成分含量测定，线性关系分别为咖啡酸Y= 8.5726X -0.8（R2= 1），迷迭香酸Y= 8.8993X +4.0679（R2= 0.9999），连翘苷Y= 1262.3X -0.1622（R2= 0.9999），研究结果满足分析要求，表明所建立的高效液相色谱方法稳定可靠。[b][b]参考文献[/b][/b] 李芝. 乳痛安口服液治疗大鼠乳腺增生病实验研究［J］.泰山医学院学报，2010，31（12）：937-939. 史栋栋，况媛媛，王贵明,等.细胞代谢组学用于羽扇豆醇干预人乳腺癌细胞MCF-7的机理探究. 色谱，2014，03（02）：56-64. 窦景云, 等.夏枯草药理作用及临床应用研究进展. 现代医药卫生，2013，29（7）：1039-1041. 黄力,袁涌,单婷婷,等. 高效液相色谱法同时测定医院制剂药物中的水杨酸和氯霉素的含量. 中国药品标准,2006,(03):70-72. 梁萍,彭建彪. HPLC法测定医院制剂气血双补胶囊中阿魏酸的含量. 中国民族民间医药,2016,25(09):9-10. 杨江丰. 高效液相色谱色测定医院制剂中合成色素的含量. 宁波高等专科学校学报,2001,(S1):121-122. 王继森,朱蓉,张亿,张姮婕. 医院制剂苯甲酸水杨酸软膏中主药含量检测方法改进. 中国药事,2014,28(10):1137-1139.作者简介：邰晓鹏，硕士研究生，研究方向中药制剂方向。*通讯作者：臧恒昌，教授，博士生导师，研究方向为过程控制与优化，Email: zanghcw@126.com，Tel: 0531-88380268[/b]

问题：请问谁有安杰伦150位进洋器，抓小瓶的爪是三个还是四个？回复：4个爪子http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_668908_3114888_3.jpg

[align=center][b]基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]法快速测定乳痛安口服液中主要成分含量[/b][/align][align=center]邰晓鹏[sup]1[/sup]，臧恒昌[sup]*[/sup][/align][b]摘要目的:[/b]本研究就医院内部自制乳痛安口服液为研究对象，针对现有乳痛安口服[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量标准中检查项缺乏主要成分含量鉴别的问题，拟通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术测定样品中主要成分含量，以提升现有质量标准。[b]方法：[/b]利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术建立乳痛安口服液中三种主要成分咖啡酸、迷迭香酸、连翘苷等含量测定的PLS模型，以建立的高效液相方法测定的医院内部自制制剂乳痛安口服液的含量为一级数据，通过校正集与验证集的划分、光谱预处理，建模区间的选择、利用参数评价等各种方法，最终建立的医院内部自制制剂乳痛安口服液的定量分析模型。[b]结果：[/b]最终得到用于分析乳痛安口服液定量分析模型评价参数分别为：咖啡酸RMESC=0.873 μg/ml，RMESP=0.686 μg/ml, R[sub]C[/sub]=0.9852，R[sub]P[/sub]=0.9899；迷迭香酸 RMSEC=2.40 μg/ml，RMSEP=2.87 μg/ml，Rc=0.9810， R[sub]P[/sub]=0.9839；连翘苷RMSEC=0.00528mg/ml，RMSEP=0.00697mg/ml，R[sub]C[/sub]=0.9856，R[sub]P[/sub]=0.9823，得到的模型预测能力较好，能够用于乳痛安口服液中三种主要成分含量快速测定。[b]结论：[/b]本研究利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术建立的定量分析模型，可用于医院内部自制乳痛安口服液主要成分的快速测定，为医院内部自制乳痛安口服[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量标准的提升提供了一定的参考。[b]关键词：[/b]乳痛安口服液；含量测定；[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术[align=center]RapidDetermination of Main Components in Rutongan Oral Liquid by Near InfraredSpectroscopy[/align][align=center]Xiao-pengtai[sup]1[/sup]，Zang-hengchang[sup]1*[/sup][/align][b]Abstract Objective[/b]: In this study, the hospital's internal self-made Ru Tonganoral liquid as the research object, aiming at the lack of identification ofmain components in the existing quality standards of the milk-Qian'an oralliquid, it is intended to determine the content of the main components in thesample by near-infrared spectroscopy. To improve the existing qualitystandards.[b]Methods:[/b]The near-infraredspectroscopy technique was used to establish a PLS model for determining thecontents of caffeic acid, rosmarinic acid, and forsythin in the three maincomponents of Ru Tong'an Oral Liquid. The level of hospitalized self-preparedpreparations of Rutongan oral liquid measured by the established HPLC methodwas first-class data. Through a variety of methods such as the division ofcalibration set and verification set, spectral preprocessing, selection ofmodeling intervals, and evaluation of parameters, a quantitative analysis modelof the hospital's self-prepared formulation, Rutongan oral liquid, was finallyestablished. [b]Results: [/b]The finalevaluation parameters used in the quantitative analysis model for analysis ofRu Tongan Oral Solution were: caffeic acid RMESC = 0.873 μg/ml, RMESP = 0.686μg/ml, RC = 0.9852, RP = 0.9899 rosemary acid RMSEC = 2.40 μg /ml, RMSEP =2.87 μg/ml, Rc = 0.9810, RP = 0.9839 Forsythin RMSEC = 0.00528 mg/ml, RMSEP =0.00697 mg/ml, RC = 0.9856, RP = 0.9823, the obtained model has better predictionability and can be used to quickly determine the contents of the three maincomponents in Ru Tong'an Oral Liquid. [b]Conclusion:[/b]Inthis study, the quantitative analysis model established by near-infraredspectroscopy analysis technology can be used to quickly determine the maincomponents of the self-made milk pain oral liquid in the hospital, whichprovides a certain reference for the improvement of the quality standard of theinternal homemade milk pain relief oral liquid.[b]Keywords: [/b]Rutongan Oral Liquid ContentDetermination Near Infrared Spectroscopy Technology[b]1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术简介[/b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的区域是可见光谱区与中红外之间的780 nm~2526 nm之间，近红外光反应含氢基团倍频与合频的吸收，由于含氢基团的有机化合物的种类非常多，因此[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术在很多的行业中具有广泛应用，几乎可以分析所有的有机化合物和混合物[sup][/sup]。在利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术的过程中常应用化学计量学的方法寻找并确定被测物性质与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]间的函数关系，后经过校正得到模型，从而实现[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的应用[sup][/sup]。由于中药中有机物质成分较多，因此常利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术进行中药的定性和定量分析，吴利敏[sup][/sup]等人用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术快速鉴别五味子产地的研究，所建立的模型评价参数均较好，具有可应用性。胡甜[sup][/sup]等人采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术对参枝苓口服液的生产过程进行了研究，为实现了参枝苓口服液生产过程的实时监控的；陈厚柳[sup][/sup]等人利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术结合移动窗口标准偏差法对银杏叶提取和层析过程进行了研究，达到在线控制的目的 倪开岭[sup][/sup]等人采用PLS结合[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术建立疏血通注射液浸提过程中总固体含量的快速测定，可用于指导生产。[b]2 材料和仪器2.1样品和试剂[/b]选取不同批次已经过原标准检验合格的医院内部自制乳痛安口服液，由山东省泰安市中心医院制剂室提供。[b]2.2仪器和软件[/b]日本岛津高效液相色谱仪（LC-10A）；Agilent 1200型高校液相色谱仪；MicroNIR 1700微型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析仪（美国Viavi Solutions公司）；石英比色皿（绍兴市安德光学化学元件厂）；TQ Analyst软件用于光谱预处理与定量模型的建立[b]3 方法3.1 样品收集与处理[/b]收集四批（生产批号分别为150922、151013、151015、151018）共70个医院内部自制制剂乳痛安口服液样品。[b]3.2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]采集[/b]利用MicroNIR 1700微型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]（配有透射采样附件）采集70个医院内部自制制剂乳痛安口服液样品的原始[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]，光谱扫描范围900~1700 nm，光程5 mm，积分次数：50，积分时间32000μs，以空白光路作为100%校正。[b]3.3 乳痛安口服液三种主要成分定量分析模型的建立[/b]通过对采集的医院内部自制制剂乳痛安口服液的校正集与验证集的划分，光谱预处理方法的依次选择，建模波段的不断优化，利用PLS将医院内部自制乳痛安口服液主要成分液相一级数据与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]相关联，建立医院内部自制乳痛安口服液三种主要成分含量的定量分析模型，以R、RMSEC、RMSECV、RMSEP评价所建立的定分分析模型的性能。[b]3.3.1一级数据的获取[/b]收集70份已经做过液相色谱的医院内部自制制剂乳痛安口服液，按确定好的液相色谱条件进样，记录峰面积，利用所建立的相应线性关系计算三者的含量，作为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]模型建立的一级数据。[b]3.3.2校正集、验证集样品的划分[/b]本研究采用随机划分的方法，将70个医院内部自制制剂乳痛安口服液按随机划分的方法将其划分为校正集与验证集，校正集用来使用于定量分析模型的建立，验证集用来使用于验证下一步所建立的模型的预测能力。[b]3.3.3光谱预处理方法的选择[/b]本研究中应用的TQ软件中光谱预处理方法包括S-G卷积求导和Norris求导两种方法。本研究中选用的光谱预处理方法包括导数、平滑方法对原始光谱进行预处理，从而建立医院内部自制乳痛安口服液中连翘苷含量的PLS定量分析模型。[b]3.3.4光谱最优区间的选择[/b]在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]建模过程中，特征变量或特征波长的选择能够剔除无关变量，降低模型的复杂程度，使建立的模型更加稳健、提高模型预测能力。本研究选择全波段（900-1700 nm）和TQ推荐建模波段建立医院内部自制乳痛安口服液中三种主要成分含量的PLS模型。[b]3.3.5定量分析模型的建立与评价[/b]本文采用的校正方法是偏最小二乘回归法，PLS不仅对光谱矩阵进行分解，消除无用信息，同时对浓度矩阵做同样的处理，并且PLS在分解的过程中考虑了光谱矩阵和浓度矩阵的对应关系，使建立的模型更加可靠。本研究利用医院内部制剂乳痛安口服液校正集样品建立PLS模型。[b]4 结果与讨论4.1 样品[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url][/b]采集的70个医院内部自制制剂乳痛安口服液样品的原始[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]如图4-1所示[align=center][img=,505,272]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241434459369_3289_3237657_3.jpg!w505x272.jpg[/img][/align][align=left]从原始光谱中可以看出光谱重叠严重，不同样品光谱相似性极高，需要利用化学计量学方法对医院内部自制制剂乳痛安口服液的原始光谱进行下一步的预处理。[/align][b][/b][align=left][b]4.2 咖啡酸定量分析模型的建立[/b][/align][align=left][b]4.2.1 HPLC测定咖啡酸含量结果[/b][/align][align=left]HPLC法测定不同批号的乳痛安口服液中咖啡酸含量如表4-1所示[/align][align=center][img=,600,331]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241436156398_2033_3237657_3.jpg!w600x331.jpg[/img][/align][align=center][img=,575,480]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241436297142_8877_3237657_3.jpg!w575x480.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.2异常样本的剔除[/b]样本中异常值的存在会在一定程度对建模的效果有干扰，本研究中选用马氏距离方法判别异常点的存在，该方法是浓度异常样本判别的一种方法，异常样本判断结果如图4-2所示，从图中可以看出1号和66号样本可作为异常值剔除。[/align][align=center][img=,598,233]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241437210907_5659_3237657_3.jpg!w598x233.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.3样品集划分结果[/b]医院内部自制制剂乳痛安口服液的校正集与验证集划分结果如表4-2所示，从下面的表中可以看出医院内部自制制剂乳痛安口服液的验证集浓度范围包含于其校正集浓度范围之中，并且校正集与验证集的浓度均值也很相近，从图4-3可看出，医院内部自制制剂乳痛安口服液的验证集均匀地分布于校正集之中，证明样品集采用的划分方法合理。[/align][align=center][img=,639,385]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241438126579_7623_3237657_3.jpg!w639x385.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.4光谱预处理结果[/b][/align][align=center][b][img=,601,265]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241439168323_8720_3237657_3.jpg!w601x265.jpg[/img][/b][/align][align=center][b][img=,567,271]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241439284191_2107_3237657_3.jpg!w567x271.jpg[/img][/b][/align][align=left][b]结果如表4-3所示，从表中可以看出医院内部自制制剂乳痛安口服液的原始光谱建模结果较差，需要通过预处理提取建模有效信息，经MSC或SNV预处理后，模型参数提升，经过得到的结果对比决定最终选择二阶导数+Norris（7点平滑+3点差分宽度）+MSC为最佳预处理方法，其RMESC与RMSEP值较其他预处理方法偏小，模型相关系数较其他方法较高，接近于1，具体参数为RMESC=0.873 μg/ml，RMESP=0.686 μg/ml, R[sub]C[/sub]=0.9852，R[sub]P[/sub]=0.9899, 预处理后光谱图如图4-4所示。[/b][/align][align=center][b][img=,555,355]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241440211414_4355_3237657_3.jpg!w555x355.jpg[/img][/b][/align][align=left][b][b][/b][/b][/align][b][/b][align=left][b]4.2.5 光谱区间选择结果[/b][/align][align=left]本研究比较全波段光谱建模效果与TQ推荐波段建模效果，结果见表4-4，TQ推荐波段为1548-1598 nm与1549-1442 nm，从表中可知，TQ推荐波段建模效果不如全波段建模，可能是推荐波段丢失有效信息较多。[/align][align=center][img=,609,182]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241441540560_2843_3237657_3.jpg!w609x182.jpg[/img][/align][align=center][img=,599,539]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241442070720_8723_3237657_3.jpg!w599x539.jpg[/img][/align][align=center][img=,600,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241442196256_190_3237657_3.jpg!w600x249.jpg[/img][/align][align=left][b]4.2.6 主因子数的选择[/b]主因子数的选择对建模结果也有较大影响，主因子数过多可能存在过多噪音，影响模型结果，如选取的主因子数过少，则会丢失较多有效信息，拟合不充分，本研究在最佳预处理方法与最佳建模波段的基础上选用交互验证方法，以预测残差平方和（PRESS）为依据，见图4-6，比较主因子数为6、7、8时对建模结果的影响，如表4-5所示，经比较主因子数为8时建模效果最优，模型如图4-7所示。[/align][align=center][img=,594,391]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241443420245_7203_3237657_3.jpg!w594x391.jpg[/img][/align][align=center][img=,448,646]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241444225425_8834_3237657_3.jpg!w448x646.jpg[/img][/align][align=center]图4-7 不同主因子数建模结果（A主因子为6，B为7,C为8）[/align][align=left][b]4.2.7 咖啡酸定量分析模型的建立与评价[/b]综上所述，本研究以马氏距离为依据，剔除1号和66号异常样本样本数据，以二阶导数+Norris（7点平滑+3点差分宽度）+MSC为最佳预处理方法，全波段建模时建立乳痛安口服液中咖啡酸含量最佳PLS模型，模型RMESC=0.873 μg/ml，RMESP=0.686 μg/ml, R[sub]C[/sub]=0.9852，R[sub]P[/sub]=0.9899, 建模结果如图4-8所示。[/align][align=center][img=,547,252]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241445326325_663_3237657_3.jpg!w547x252.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3 迷迭香酸定量分析模型的建立4.3.1 HPLC测定迷迭香酸含量结果[/b] HPLC法测定不同批号的乳痛安口服液中迷迭香酸含量如表4-6所示[/align][align=center][img=,598,575]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241446384611_6293_3237657_3.jpg!w598x575.jpg[/img][/align][align=center][img=,586,235]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241446539287_4900_3237657_3.jpg!w586x235.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3.2异常样本的剔除[/b]同样以马氏距离方法判断，如图4-9所示，从图中可以看出1号和66号样本可作为异常值剔除。[/align][align=center][img=,566,242]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241447518631_7790_3237657_3.jpg!w566x242.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3.3校正集验证集样本划分结果[/b]本研究利用TQ随机划分校正集与验证集，其中校正集52个样品，验证集16个样品，校正集与验证集划分结果如表4-7所示，校正集浓度范围包含验证集浓度范围，且校正集与验证集浓度均值相近，从图4-10校正集与验证集主成分得分图中可以明显看出样品集的划分合理。[/align][align=center][img=,597,119]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241448558611_3305_3237657_3.jpg!w597x119.jpg[/img][/align][align=center][img=,589,287]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241449107893_2292_3237657_3.jpg!w589x287.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3.4光谱预处理结果[/b]本研究通过对比原始光谱经无预处理、一阶导数、二阶导数、SG平滑四种预处理方法单独或组合应用对建模结果的影响，如表4-8所示，因此本研究最终确定的最佳光谱预处理方法为一阶导数+SG5点平滑+MSC，如图4-11所示，模型参数如下：RMSEC=2.40 μg/ml，RMSEP=2.87 μg/ml，R[sub]C[/sub]=0.9811，R[sub]P[/sub]=0.9839。[/align][align=center][img=,586,317]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241450058648_6602_3237657_3.jpg!w586x317.jpg[/img][/align][align=center][img=,564,306]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241450194541_595_3237657_3.jpg!w564x306.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3.5光谱区间选择结果[/b]TQ 推荐最佳光谱区间为1066-1177 nm、1004-1040 nm，分别利用推荐波段与组合运用建立模型，与全波段建模结果对比如表4-9 所示，从表中可以看出，全波段建模效果最优，分析TQ推荐波段丢失了部分有效信息，从而使建模结果较差。[/align][align=center][img=,590,195]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241452477360_7764_3237657_3.jpg!w590x195.jpg[/img][/align][align=left][b]4.3.6迷迭香酸定量分析模型的建立与评价[/b]综上所述，本研究选择二阶导数SG5点平滑为预处理方法，主成分数为10时，全波段建模所得模型为医院自制乳痛安口服液迷迭香酸含量定量分析模型。模型校正集相关参数RMSEC=2.40 μg/ml，R[sub]C[/sub]=0.981，验证集相关参数为RMSEP=2.87 μg/ml，R[sub]P[/sub]=0.9839, 所建模型预测能力较好。[b]4.4连翘苷定量分析模型的建立4.4.1 HPLC测定连翘苷含量结果[/b]HPLC法测定乳痛安口服液中连翘苷含量如表4-10所示。[/align][align=center][img=,562,663]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241454410144_9553_3237657_3.jpg!w562x663.jpg[/img][/align][align=center][img=,601,131]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241455019691_5499_3237657_3.jpg!w601x131.jpg[/img][/align][align=left][b]4.4.2校正集验证集样本划分结果 [/b]根据对医院内部自制制剂乳痛安口服液样本的随机划分结果，校正集与验证集浓度范围如表4-11所示，从划分结果可知医院内部自制制剂乳痛安口服液的校正集样品浓度范围包含验证集样品浓度范围，且校正集与验证集浓度均值相近，样品集划分合理。[/align][align=center][img=,590,105]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241455521481_4380_3237657_3.jpg!w590x105.jpg[/img][/align][align=left][b]4.4.3光谱预处理结果[/b]对比无预处理、一阶导数、二阶导数、SG平滑四种预处理方法对建模结果的影响，如表4-12所示，从表中可以看出原始光谱经过预处理后基线漂移现象消除，经过对比发现原始光谱经二阶导数SG7点平滑处理后，所建立的连翘苷含量定量分析模型评价参数与其他方法相比较优，R[sub]C[/sub]=0.9890，R[sub]P[/sub]=0.9834，RMSEC=0.0046 mg/ml，RMSEP=0.00802 mg/ml，模型的预测能力还是比较理想，预处理后光谱如图4-13所示。[/align][align=center][img=,586,321]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241457188331_515_3237657_3.jpg!w586x321.jpg[/img][/align][align=center][img=,491,307]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241457575960_3810_3237657_3.jpg!w491x307.jpg[/img][/align][align=left][b]4.4.4光谱区间选择结果[/b]本研究中TQ建议波段为1201.89-1047.00nm，比较建议波段建模结果与全波段建模结果如表4-13所示。[/align][align=center][img=,591,137]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241459094801_8900_3237657_3.jpg!w591x137.jpg[/img][/align][align=left]从上表中可以看出全波段建模结果与建议波段建模结果相近，但与全波段建模相比，建议波段的RMSECV与RMSEP值差异较小，且全波段建模模型的主因子数10，选取的主因子过多，可能存在过拟合的现象，而推荐波段建模主因子数为5，认为选择较合理，留一法交互验证PRESS结果图如图4-14所示。[/align][align=center][img=,376,236]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241459532781_5909_3237657_3.jpg!w376x236.jpg[/img][/align][align=left][b]4.4.5连翘苷定量分析模型的建立与评价[/b]综上所述，本研究选择二阶导数SG7点平滑为预处理方法，光谱区间为1047-1202 nm，主成分数为5时建立所建模型为最佳连翘苷含量定量分析模型，模型校正集与验证集相关系数在0.98以上，模型预测能力较高，可用于乳痛安口服液中连翘苷含量的快速分析，建模结果见图4-15。[/align][align=center][img=,616,325]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807241500363169_2920_3237657_3.jpg!w616x325.jpg[/img][/align][align=left][b]5 结论与讨论[/b]本研究建立了微型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]用于快速测定医院内部自制制剂乳痛安口服液中蒲公英主要成分咖啡酸、夏枯草主要成分迷迭香酸、连翘中主要成分连翘苷的定量分析模型。通过对比几种预处理方法对医院内部自制制剂乳痛安口服液的建模结果影响，结果表明医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸最佳预处理方法为二阶导数+Norris（7点平滑+3点差分宽度）+MSC为最佳预处理方法，全波段建模时建立医院内部自制制剂乳痛安口服液中咖啡酸含量最佳PLS模型，结果表明主因子数为8时模型最优，相关参数为RMESC=0.873 μg/ml，RMESP=0.686 μg/ml, R[sub]C[/sub]=0.9852，R[sub]P[/sub]=0.9899；乳痛安口服液中迷迭香酸最佳预处理方法为二阶导数SG5点平滑，主成分数为10时，全波段建模所得模型为最佳模型，模型校正集相关参数RMSEC=2.40 μg/ml，R[sub]C[/sub]=0.981，验证集相关参数为RMSEP=2.87μg/ml，R[sub]P[/sub]=0.9839；乳痛安口服液中连翘苷最佳预处理方法为二阶导数+S-G7点平滑，在最佳预处理方法的基础上对比全波段与TQ推荐波段建模参数的差异翘苷最佳建模波段为1047-1202 nm，所建模型R[sub]C[/sub]=0.9856，R[sub]P[/sub]=0.9823，RMSEC=0.00528mg/ml，RMSEP=0.00697 mg/ml。从所建立的模型可以直观地看出乳痛安口服液中咖啡酸、迷迭香酸、连翘苷含量差异较大，且迷迭香酸与连翘苷含量分布不均匀，说明产品一致性有待改善提高。[b]参考文献[/b] 董芹. 基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术的透明质酸分子量及含量快速检测研究. 山东大学,2011. 熊英. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的原理及应用. 中山大学研究生学刊(自然科学.医学版),2013,34(02):16-30. 吴利敏. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]法快速检测某些中药及中成药品质的应用研究. 西南大学,2013. 胡甜. 参枝苓口服液生产过程[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术过程控制应用研究. 山东大学,2016. 陈厚柳. 银杏叶提取和层析过程在线质量控制方法研究. 浙江大学,2015. 倪开岭,吴春艳,刘雪松. 基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的疏血通注射液浸提过程总固体含量分析. 中国现代应用药学,2015,32(08):970-975.[/align][align=left][b][/b][/align]