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  • 【原创大赛】近红外光谱分析技术用于美洛西林钠舒巴坦钠药物混合过程在线混合均匀度终点监测

    【原创大赛】近红外光谱分析技术用于美洛西林钠舒巴坦钠药物混合过程在线混合均匀度终点监测

    [align=center][b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术用于美洛西林钠舒巴坦钠药物混合过程在线混合均匀度终点监测[/b][/align][align=left][b]摘要: [/b]利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]技术,对美洛西林钠、舒巴坦钠混合过程进行了在线监测。在研究中,分别建立了基于MBSD法的定性分析模型和基于舒巴坦钠百分含量的定量分析模型,通过3个平行实验的在线混合过程,结果显示MBSD法和舒巴坦钠百分含量测定法均能有效的监测其混合过程,有效的证明了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分析技术用于舒巴坦钠、美洛西林钠混合在线监测的可行性。[/align][b]关键词[/b]:[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url];分析模型;混合均匀度;在线监测自从2004年美国食品与药品监督管理局提出“过程分析技术”以来,全球的药品生产企业正在向着更高技术含量的生产方式和质量控制方式进军。近红外(Near infrared,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url])光谱分析技术因其快速,无损的特点成为“过程分析技术”的重要组成部分,是制药企业进行产品中间体质量控制的重要方法之一。传统的检测方法为高效液相色谱法,紫外可见分光光度法等需要停止混合操作时才能取样检测,并且等待检测结果所需的时间也比较长,工作效率比较低,而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱可以进行在线检测,连续记录不同混合时间内混合物的光谱图,建立数学模型对采集数据进行分析,从而判断各组分之间是否已经达到质量均一,工作效率大幅度的提高。本研究利用 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url] 光谱分析技术在线监测美洛西林钠舒巴坦钠的药物混合过程,从而实现混合终点的准确判断。[b]1 材料1.1试剂[/b]美洛西林钠(13102041,山东瑞阳制药有限公司)舒巴坦钠(SS201310-26,江西东风制药有限公司)[b]1.2仪器和软件[/b]AntarisII型傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url](美国ThermoFisher公司),附有积分球采样模块;RESULT采样软件;电子分析天平(Sartorius BT224S,德国);TQ数据处理软件;表面皿;药匙;自制搅拌器。[b]2 方法2.1样品的准备[/b]精密称取舒巴坦钠固体原料药10.00g,美洛西林钠固体原料药40.00g,以备进行在线混合光谱的采集。平行制备3批样品,进行混合光谱的采集。[b]2.2模型的建立[/b]目前,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分析技术用于混合过程在线监测的方法可分为活性药物成分(API)定量分析模型监测和基于移动块标准偏差(MBSD)的定性分析模型监测。前者为基于API药物含量的定量监测模型,当达到混合终点时,API的含量趋于一定值,可以依据模型监测的含量是否达到理论值并趋于稳定进行混合终点的监测;后者为基于光谱的标准偏差的定性监测模型。MBSD法的基本原理为:连续采集的若干张光谱间的标准偏差变化率趋于稳定并小于限定的一阈值时可认为达到了混合终点。其具体的计算步骤为:首先确定用于计算光谱标准偏差的光谱的条数n(即移动块的宽度),当[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分析仪器采集到n张光谱后计算n张光谱的峰面积(或最大峰高、平均峰高等)的标准差,当采集到n+1张光谱时将第一张光谱移除,计算最近n张光谱的标准差,如此类推,最终得到随时间变化的光谱的标准偏差,根据标准差的变化进行混合终点的监测。本研究中建立了舒巴坦钠含量的定量分析模型和基于MBSD法的定性分析模型同时对用于混合终点的判断。[b]2.3在线混合光谱的采集[/b]将称取的美洛西林钠、舒巴坦钠原料药样品放入表面皿中,然后将表面皿放在Antaris II型傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]积分球采样模块的上面,采用积分球漫反射采样方式进行光谱的采集。在运行在线混合工作流的同时采用自制的搅拌器进行样品的混合,采集得到混合过程的原始光谱,同时监测混合过程。波长范围10000-4000cm[sup]-1[/sup],每张光谱扫描次数4,混合过程中每间隔5s进行一张光谱的采集,光谱分辨率为8.0cm[sup]-1[/sup],每4个小时进行背景光谱的采集。每张[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱由1557个变量点组成。[b]2.4定量定性分析模型用于终点判断数据分析[/b]将在线混合过程进行监测,得到在线混合过程数据进行分析,以便了解混合全过程信息以及混合过程的监测。[b]2.5混合终点分析[/b]当得到混合终点时分别采集混合后的样品6处的原始[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱,利用舒巴坦钠的定量分析模型预测混合终点时不同样品点处的舒巴坦钠的含量,判别是否混合均匀。[b]3 实验结果3.1分析模型的建立[/b]本研究中分别建立了在线混合过程的舒巴坦钠定量监测模型和基于移动块标准偏差的定性监测模型。[b]3.1.1 定性分析模型的建立[/b]目前混合均匀度在线监测常用的方法为MBSD法,本研究中MBSD法定性建模的参数为:选择的3个光谱区间包括全光谱、5275.6-4806.3cm[sup]-1[/sup](称为Region1)及7096.76-6344.66cm[sup]-1[/sup](称为Region2);用于计算光谱偏差的光谱的条数为5(即移动块的宽度为5)。[b]3.1.2 定量分析模型的建立[/b]本研究中所建立的定量分析模型用于监测混合过程中舒巴坦钠的百分含量的变化,因为本实验中舒巴坦钠和美洛西林钠两者间的混合比为4:1,当达到混合终点时,舒巴坦钠的百分含量应该在20%左右。其模型的具体参数见上一章中得到的舒巴坦钠百分含量的定量分析模型。[b]3.2混合在线过程数据分析[/b]本研究中平行进行了3次混合过程的在线监测,分别对3次实验结果进行分析,以充分了解混合监测过程。[b]3.2.1 第一批实验结果分析3.2.1.1 原始光谱图[/b]图1给出了混合过程中采集得到的208张原始光谱,由图中可知,处于下面的光谱较稀疏,可能属于混合刚开始的阶段,光谱会有较大的差异;处于上面的光谱较密集,其原因为随着混合的不断进行,光谱间差异越来越小,所以光谱较集中。[align=center][img=,498,274]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141912_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图1 第一批混合过程原始光谱[/align][align=center] [/align][b]3.2.1.2 在线混合过程结果分析[/b]图2为定性分析模型中得到的3个光谱区间的峰面图,其中M1为全光谱建模的峰面积变化,M2为Region 1(5275.6-4806.3cm-1)的峰面积变化,M2为Region 2(7096.76-6344.66cm-1)的峰面积变化,由峰面积的变化图可知,混合过程的前100s其变化较为明显,M1不断升高,M2和M3(7096.76-6344.66cm-1)不断下降,之后峰面积值趋于稳定。[align=center][img=,525,234]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141913_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图2 光谱区间峰面积图[/align]图3为舒巴坦钠含量及标准偏差变化图,由图中显示在混合的初期阶段,尤其是前100s左右,四个表征混合均匀度的参数均有着较大的变化趋势,在200-300s间四个参数有稍微较小的波动,此后随着混合过程的不断进行,表征混合均匀度的四个参数变化范围均变小,模型给出的舒巴坦钠的百分含量在20%左右,舒巴坦钠和美洛西林钠混合较为均匀,达到了混合终点。由图可知前100s是混合的主要阶段,此阶段舒巴坦钠的百分含量和标准偏差均有着明显的变化。[align=center][img=,538,292]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141914_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图 3 含量和标准偏差变化图[/align][align=center](a舒巴坦钠百分含量变化 b全光谱峰面积标准差 c Region1峰面积标准差 d Region2峰面积标准差)[/align][align=left] 当达到混合终点时分别采集表面皿下6个点的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱,根据建立的模型测定其舒巴坦钠的百分含量,看混合是否均匀。表2给出了用所建模型得到的6个点的舒巴坦钠的百分含量值,6个点舒巴坦钠的百分含量值在20%左右,说明混合较为均一,但是最大的值达到了22.41%,可能是由于混合装置过于简陋,加上是人为搅拌进行混合,不能达到很好的混合,部分地方没有进行很好的混合。从实验的可行性方面,初步证实了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]技术用于美洛西林钠舒巴坦钠混合的可行性。[/align][align=center]表1混合后不同点舒巴坦钠百分含量值[/align][align=center] [img=,570,70]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141915_01_1626619_3.png[/img][/align][b]3.2.2 第二批实验结果分析3.2.2.1 原始光谱图[/b]图4给出了第二批混合过程中采集得到的203张原始光谱,其混合过程原始光谱的特征和第一批混合过程较为相似,混合初期光谱变化较为明显,随着混合的进行,光谱差异变小,光谱较为密集。[align=center][img=,488,280]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141915_02_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图4 第二批混合过程原始光谱[/align][align=left] [b]3.2.2.2 在线混合过程结果分析[/b][/align]图5为各个光谱波段峰面积的变化图,由图中显示开始的100s内峰面积有着较大的变化幅度,随着混合的不断进行,峰面积的变化趋势不断减小并逐渐趋于稳定。[align=center][img=,516,307]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141916_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图5 光谱区间峰面积图[/align][align=center](a 全光谱峰面积 bRegion 1峰面积 cRegion 2峰面积)[/align]图6为舒巴坦钠含量及标准偏差变化图,由图可知在混合的初期阶段大约0-100 s时,舒巴坦钠百分含量值及峰面积的标准偏差值有着明显的变化,全光谱峰面积的标准偏差(Full Range STD)在200-400 s间有较为明显的波段,此后随着混合过程的不断进行,四个参数变化范围均变小,模型给出的舒巴坦钠的百分含量在20%左右。由此可知前100 s是混合的主要阶段,此阶段舒巴坦钠的百分含量和标准偏差均有着明显的变化。[align=center][img=,551,327]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141917_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图6 含量和标准偏差变化图[/align][align=center](a 舒巴坦钠百分含量 b 全光谱峰面积标准偏差 c Region 1峰面积标准偏差 d Region 2峰面积标准偏差)[/align]当达到混合终点时,采集表面皿底部6处的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱,检测混合过程是否达到均一,表2列出来了6处的舒巴坦钠的百分含量值,由表2可知达到混合结束后得到的6处的舒巴坦钠的百分含量均在20%左右,说明混合较为均匀。同时,由于实验条件的限制加上搅拌时人为因素的影响等,各点之间含量也着较大的差异。[align=center]表2 舒巴坦钠百分含量[/align][align=center] [img=,566,84]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141918_01_1626619_3.png[/img][/align][b]3.2.3 第三批实验结果分析3.2.3.1 原始光谱图[/b]图7给出了混合过程中采集得到的207张原始光谱,由图中可知,得到的原始光谱图与第一批和第二批有着相似的结果,即混合的初期光谱差异大,因此光谱较为稀疏(偏下方的光谱),随着混合的进行,光谱间差异变小,光谱变得密集(偏上方的光谱)。[align=center][img=,505,262]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141919_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图7 第三批混合过程原始光谱[/align][b]3.2.3.2 在线混合过程结果分析[/b]图8给出了混合过程中3个光谱区间峰面积的变化趋势值,由图中可知0-100s间三个光谱区间的峰面积有着明显的变化,100-200s间峰面积有着明显的变化,但是变化幅度没有前100s大,200s以后峰面积变化趋势变小。说明前200s是混合的主要阶段,峰面积变化较为明显。[align=center][img=,519,343]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141919_02_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图 8 光谱区间峰面积图[/align][align=center](a 全光谱峰面积 bRegion 1峰面积 cRegion 2峰面积)[/align]图9为舒巴坦钠百分含量及光谱峰面积的标准偏差随时间变化的趋势图,其变化趋势和峰面积的变化趋势相似,前100s变化幅度较大,100-200s间也有较为明显的变化,但是变化幅度不是很明显,200s后舒巴坦钠的百分含量和峰面积的标准偏差均趋于稳定,说明此时光谱差异变小,混合趋于均匀。[align=center][img=,529,352]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141920_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图9 含量和标准偏差变化图[/align][align=center](a舒巴坦钠百分含量变化 b全光谱峰面积标准差 c Region1峰面积标准差 d Region2峰面积标准差)[/align]表3为达到混合终点时采集表面皿底部的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱得到的不同点的舒巴坦钠的百分含量值,由表中显示6个点的舒巴坦钠的百分含量值在20%左右,但是6个点之间舒巴坦钠百分含量间存在较大的差异,测得的最小值为17.80%,其原因可能是一方面由于实验条件的限制混合不够均匀,一方面用于舒巴坦钠含量测定的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]定量分析模型也有一定的偏差,可能引起含量检测的差异存在。[align=center]表3 混合后不同点舒巴坦钠百分含量值[/align][align=center] [img=,564,66]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141921_01_1626619_3.png[/img][/align][b]3.3小结[/b]通过3个混合平行实验的进行可知所建立的基于MBSD法的定性分析模型和基于舒巴坦钠百分含量的定量分析模型能够有效的监测舒巴坦钠、美洛西林钠的混合过程。由舒巴坦钠百分含量和标准偏差变化图可知两者的变化有着相关性,当舒巴坦钠的百分含量变化幅度大时,其标准偏差的变化幅度也较大,因此两者均可以用于混合过程的在线监测,证实了实验的可行性。[b]4 结论和讨论[/b]本研究采用AntarisII傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]对美洛西林钠、舒巴坦钠混合过程进行了在线监测。在研究中,分别建立了基于MBSD法的定性分析模型和基于舒巴坦钠百分含量的定量分析模型,然后Antaris II傅里叶变换[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱仪[/color][/url]漫反射采样方式采集混合过程中的光谱,实时监测混合过程的进行。通过3个平行实验的在线混合过程,结果显示MBSD法和舒巴坦钠百分含量测定法均能有效的监测其混合过程,有效的证明了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分析技术用于舒巴坦钠、美洛西林钠混合在线监测的可行性。此外,MBSD法因为无需进行一级数据的采集,方法较为简单且容易理解,目前常用于混合过程的在线监测。本研究中有效证实了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分析技术在舒巴坦钠美洛西林钠样品在线混合过程中应用的可行性,在样品的在线混合监测中有着重要的应用价值和应用前景。该技术能够克服传统方法费时、繁琐等缺点,而且可以实现过程的实时在线监测,让生产者充分了解整个生产过程中的参数变化。 [b]参考文献[/b]陆婉珍, 褚小立. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url])和过程分析技术(PAT). 现代科学仪器, 2007(004):13-17.SieslerH, Ozaki Y, Kawata S, et al. Near-infrared spectroscopy: principles .Instruments, Applications, 2002:35-181.Bhushan,K.R.,et al.Detection of breastcancer microcalcifications using a dual-modality SPECT/[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url] fluorescent probe. J Am Chem Soc, 2008. 130(52):17648-17649.贾燕花. [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术在化学药品生产过程控制应用初探. 北京协和医学院, 2011.Fevotte.G,et al.Applications of [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]spectroscopy to monitoring and analyzing the solid state during industrialcrystallization processes . Int J Pharm, 2004, 273(1):159-169.张敏.盐酸林可霉素多晶型分子构象对其红外光谱行为的影响.中国抗生素杂志, 2005, 30(009):529-532.Blanco M,R Goz"01ez Ba,E.Bertran,Monitoring powder blending in pharmaceutical processes by use of nearinfrared spectroscopy . Talanta, 2002, 56(1):203-212,田科雄.不同装载系数和混合时间对添加剂预混料混合均匀度的影响.河北畜牧兽医, 2004, 20(9):52-53.孙栋. 基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析技术的几种固体粉末混合均匀度快速检测研究. 山东大学硕士学位论文, 2012年.

  • 【原创大赛】【仪器故事】昙花一现的NASBA-ECL

    【原创大赛】【仪器故事】昙花一现的NASBA-ECL

    【仪器故事】昙花一现的NASBA-ECL1背景以下内容摘自百度文库(链接地址:https://wenku.baidu.com/view/16614297daef5ef7ba0d3c93.html)NASBA(Nucleicacidsequence-basedamplification)技术是一项以RNA为模板的快速等温扩增技术,这项技术特别适用于RNA分子的检测。其特点是整个扩增过程在恒温条件下进行,因此不需要特殊(如PCR仪)的控温装置,大大避免了PCR扩增过程中复杂的温度变化。借助NASBA技术平台,开发了世界上第一个成熟而广泛适用的禽流感早期快速诊断系统。此系统包括对禽流感各亚型包括高致病性病毒的特异性检测,为世界上多个国家地区用于禽流感的早期常规筛查和疫情防控,推动了国内外禽流感疫情监控的发展。该技术平台技术以NASBA病毒检测系统为中心,在确保高灵敏度、高准确率的前提下,使检测周期缩短至半天;且无需特殊的昂贵仪器,检测人员无需特殊技能;它是一个速度快、成本低并且实现了全自动检测的诊断系统,更重要的是此高效灵敏的设备适用于资源有限的高感染区,如:条件落后的基层偏远地区。这些地区也往往是疫情爆发的最前沿。该技术的应用显著减少了大面积筛查时的工作量和成本。由于该技术是恒温扩增,加上标准化的操作步骤,使不同实验室所得实验结果具有很高的可比性。NASBA技术平台的优越性包括:1.NASBA不会受到抗体存在的影响,能够区分接种疫苗的生物体中目的病毒存在与否。2.NASBA在禽流感检测中能够区分致病菌株和非致病菌株。3.对禽流感H5N1病毒的检测,已经充分的证明:NASBA的灵敏度可以与病毒检测“金标准”——病毒分离法相媲美。4.与NASBA相比,病毒培养方法操作繁琐、实验时间长,操作严格。即使熟练的技术人员至少需要14天的时间完成整个过程。5.使用NASBA技术,在最适实验条件下15小时能够扩增10[sup]12[/sup]倍,远远高于PCR的10[sup]9[/sup]倍的扩增效果。实验结果显示,NASBA技术比目前商品化的免疫检测试剂盒敏感至少1000倍,比常规PCR方法也敏感许多,与现行的病毒培养的检测方法灵敏度相当。但是病毒培养通常需要至少几天以上的时间才能得到结果,而NASBA技术常规仅需要4-6小时就可以准确地得到结果,便于尽早采取防治措施。英国与联合国兽医参考实验室(VeterinaryLabAgency)合作并验证,采用NASBA技术对来自不同地区、不同时期爆发的禽流感病毒进行检测,结果显示,NASBA-H5、NASBA-H7、NASBA-AIV均可准确无误地检出病毒。NASBA技术操作简便,自动化水平高,可以减少人为造成的误差。而且还是一种高通量方法,可以同时检测50个样本,非常适用于大规模样品的筛查,节省基层使用时的检测成本。NASBA技术的扩增产物为RNA分子,使用者可以根据需要选择不同的检测方法,如电化学发光法和酶联法等。而且,与PCR的产物DNA分子不同,RNA分子不易对实验仪器和环境造成污染,避免了产物交叉污染实验仪器、操作环境导致的假阳性结果。适用于NASBA技术的样品范围很广,除动物组织,血液、体液样本外,还可对环境样本进行监测,如禽类饲养场所、交易场所、运输工具等等,因此为监测和控制禽流感的传播提供了有效的依据和手段。2动机2004年国内发生多起高致病性禽流感疫情,给国人的健康及畜牧业的发展带来了严重威胁,不仅家禽发生疫情,同时也有人感染病例。在此情况下,如何快速诊断禽流感疫情摆在面前,经过调研初步定下两套方案:第一套方案:传统的PCR扩增系统,采购全进口的PCR仪+电泳仪+凝胶成像系统,约需40万元,意向品牌为BIO-RAD,当时系统为较为流行的品牌的配置;如果增加核酸提取系统,约需增加30万元。第二套方案:新型的NASBA扩增系统,当时有些疾控中心采购了该系统,据说效果不错,整套系统68万元。两套方案各自其优缺点:PCR系统灵敏度较低,但试剂采购方面较为灵活,既可以采购商品化的试剂盒,也可以采购各单品种试剂自行配制混合液;同时可利用的检测标准很多,可委托生物工程公司合成引物后开展多个项目的检测,拓展性很好。NASBA系统灵敏度很高,据业务代表称可以将5~10份样品混合成1份检测,相对来说单个样品的检测成本更低。但只能采购商品化的试剂盒,拓展性不好,可利用的检测标准也只有禽流感一个系列。两套方案都有支持者,最后老大拍板决定还是购买更先进的NASBA。3蜜月2005年设备终于采购到位,到了好几大箱的东西,除了ECL化学发光阅读器外,还有干燥箱、水浴锅、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]和几个试剂盒。安装时问了工程师才知道,原来干燥箱、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]都是用于核酸提取的,水浴锅是用于扩增的,ECL化学发光阅读器是用于检测的。操作流程简述如下:3.1核酸提取3.1.1原理:样品中加入裂解液使RNA游离,加入硅土进行吸附,然后洗去杂质,最后加入洗脱液将硅土中的RNA洗下。3.1.2实际操作:裂解:向0.1mL样品(如拭子上清液)中加入0.9mL裂解液混匀;吸附:加入0.05mL硅土悬浮液混匀,室温孵育10 min,以12000r/min离心30 s,移去上清;洗涤:加入1 mL洗涤液混匀,以12000 r/min离心30 s,移去上清;加入1 mL70%乙醇混匀,以12000r/min离心30 s,移去上清;加入1mL70%乙醇混匀,以12000 r/min离心30 s,移去上清;加入1 mL无水乙醇混匀,以12000 r/min离心30 s,移去上清;干燥:将离心管敞口置于干燥箱内,56℃干燥10min;洗脱:每管加入0.05 mL洗脱液并混匀,56℃孵育10min;以12000 r/min离心2 min,将上清转移入另一支离心管,即为所提取的核酸。3.2核酸扩增3.2.1原理:NASBA体系中含有T7RNA聚合酶、RNaseH、AMV逆转录酶、NTP、dNTP、引物(P1和P2)以及反应缓冲液。NASBA整个反应分为两相:非循环相和循环箱。在非循环相,引物P1与模板RNA退火,AMV逆转录酶催化合成一条cDNA链,形成RNA-DNA杂交分子,RNaseH水解杂交分子上的RNA,留下一条单链DNA。引物P2随后与这条DNA链的5’末端退火,AMV逆转录酶催化合成第二条DNA链。T7RNA聚合酶识别双链DNA中的启动子区,催化DNA转录为RNA,由每一分子可产生100拷贝RNA。新合成的RNA进入循环相,成为反转录的模板。它们首先与引物P2结合,由AMV逆转录酶催化合成一条DNA链,形成RNA-DNA杂交分子,RNaseH水解RNA,留下一条单链DNA,引物P1退火,逆转录酶再催化合成一条新的含有T7RNA聚合酶启动子的DNA片段,T7RNA聚合酶再以此DNA为模板成更多拷贝的RNA,如此循环反复,RNA拷贝数被不断放大。3.2.2实际操作:向试管中加入5μL核酸、10μL扩增试剂,于65℃孵育5min;取出于41℃孵育5min;然后加入5μL酶溶液并混合均匀,继续于41℃孵育5min;取出试管稍作离心,继续于41℃孵育90min。3.3检测及判定3.3.1原理:扩增产物可利用ECL化学发光技术进行检测。扩增反应完成后,用生物素标记的捕获探针和5’标记有电化学发光剂(TAG)的ECL检测探针与RNA产物共同作用形成复合物,被寡核苷酸饱和的磁珠携带到电极处,低电压作用下钌离子的氧化还原反应可产生光子。然后在TPA作用下,钌离子再生。因为在此过程中产生光信号的强度与吸附于电极的RNA产物正相关,所以用电化学反光检测仪测定620nm处的发光强度可对RNA定量。3.3.2实际操作:取(N+2)个5mL聚丙烯试管进行编号,其中1号作参照,2号作试剂空白;除1号管外,各加入杂交溶液20μL;2号管加入检测稀释液5μL,其余管各加入扩增产物5μL,封口膜封管,振荡混合;所有试管于41℃孵育30min;除1号管外,其余试管各加入分析缓冲液0.3mL;振荡仪器调试参照液至不透明,然后加IRS 0.25mL至1号管;将所有试管放入进样器,建立程序开始检测;判定:测定值/仪器参照液读数≥0.15,判定为阳性;否则判定为阴性。3.4体会对于初涉分子生物学的菜鸟,NASBA技术确实比较方便,一是扩增不需要昂贵的设备,只需要2个水浴锅即可;二是检测实现了自动化,只需将反应体系配制完成后,放进进样器,建立程序即可自动检测;三是扩增效率确实比较高,我们曾经在10份样品制成的混样中检出阳性样品,后来对这10份样品进行逐一检测,其中也只有1份样品是阳性的。4龃龉使用了一段时间后,也发现了NASBA存在一些问题,诸如:4.1对环境温度要求非常严格。仪器说明书上写明使用温度为15℃~25℃,一开始以为是推荐值,后来发现这玩意儿在玩真的,室温一旦超过临界值,仪器就报警且停止工作,除非将室温调整到该范围内。从此以后,只要在夏天或冬天开展NASBA检测,我们就必须至少提前数小时将检测室空调打开,否则根本玩不转。4.2检测速度慢。经测试,NASBA检测一个样品需1.5min,对于检测几个样品来说影响不大,但在大规模筛查时就不一样了。我们有一次检测300份样品,以5:1混样,实际检测60份混样,为了判定参照液是否稳定,特地在最后一份样品后安排了一次测试,结果发现测试值居然只有最开始的60%左右。向厂方提出疑义,答复是NASBA的灵敏度非常高,一般的样品要么测试值非常低(阴性样品),要么测试值非常高(阳性样品),参照液测试值下降不影响最终结果的判定。尽管实际检测也未发现有临界值样品,但心中总是留下一个疙瘩。4.3软件界面简陋。仪器是2005年购入的,当时Windows XP已发布4年,而随机软件居然还是DOS版本,操作相当不便。4.4扩展性不强。当时配套的试剂仅有禽流感、蓝耳病等几个病种,远不如PCR试剂丰富,而且检测标准也只有GB/T 19439-2004《H5亚型禽流感病毒NASBA检测方法》及GB/T19440-2004《禽流感病毒NASBA检测方法》,实验室想在NASBA检测项目上通过认证非常困难。5分手2007年国内蓝耳病疫情频发,为了摸清本地疫情情况,准备开展一次大规模检测,采样数量500份左右,需要2个检测试剂盒。向区域代理下了订单后,久久等不到试剂,反复沟通打了不下几十个电话才搞清楚,原来NASBA试剂的订购流程如下:客户向区域代理下单——区域代理每周一次向国内总代下单——国内总代向香港工厂下单——香港工厂接单后安排生产——香港工厂进行质量检测合格后将试剂发给客户。一开始我对这个流程还是有些不相信的,不过等了将近两个月接到HK Express的快递后,我才不得不相信这些试剂真是香港直接寄过来的!众所周知,疫情来了那就如消防队员扑灭火灾一样,实验室必须在接到样品后的第一时间开展检测,但大陆居然没有NASBA试剂的现货,一盒都没有,我求爷爷求奶奶让他们提供一盒应急,居然也没有!他们都是在接到客户订单后,然后通知工厂按订单生产的,前后耗时近两个月!如果真的发生疫情,这台仪器又能起什么作用!基于NASBA试剂的供应流程之慢,我们只能将这台只用了两年,耗资68万元的NASBA系统束之高阁,另外建立PCR平台开展实验,这也是我从事实验室工作近20年遇到的设备采购中最遗憾的一件事。最后的几句话:写下此文,我的心情是比较低沉的,初衷并不是想贬低设备,出自国际大品牌的设备自有其优越性,但由于试剂供应的问题,目前在我们行业几乎均是束之高阁,很令人遗憾。希望厂家能改进试剂生产供应流程,增加品种,焕发昔日荣光。最后附上一张该设备的照片,纪念那逝去的十年光阴。[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810241140300373_5908_1627156_3.jpg!w690x920.jpg[/img]

  • 瘦肉精变相,“健美牛”引发中毒,如何检测变相瘦肉精?

    瘦肉精变相,“健美牛”引发中毒,如何检测变相瘦肉精?

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/12/201212061810_410165_1866875_3.jpg媒体报道称,2012年8月,湖南株洲曾出现含有瘦肉精的“健美牛”,这起食用含有瘦肉精牛肉引发集体食物中毒,共发病85例。而上海市药监局近年来的检测数据显示,生猪养殖中从违禁添加盐酸克伦特罗(瘦肉精的一种)已转向使用莱克多巴胺等替代品,牛养殖中违禁添加瘦肉精呈也上升趋势。瘦肉精种类:  盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride)  莱克多巴胺(Ractopamine)  沙丁胺醇(Salbutamol)  硫酸沙丁胺醇(Salbutamol Sulfate)  盐酸多巴胺(Dopamine Hydrochloride)  西马特罗(Cimaterol)  硫酸特布他林(Terbutaline Sulfate)  苯乙醇胺A(Phenylethanolamine A)  班布特罗(Bambuterol)  盐酸齐帕特罗(Zilpaterol Hydrochloride)  盐酸氯丙那林(Clorprenaline Hydrochloride)  马布特罗(Mabuterol)  西布特罗(Cimbuterol)  溴布特罗(Brombuterol)  酒石酸阿福特罗(Arformoterol Tartrate)  富马酸福莫特罗[color=#0

  • 烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测解决方案

    在众多的甜味剂中,由于人工合成甜味剂(糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜等)产生的热量少,对肥胖、高血压、糖尿病、龋齿等患者有益,加之又具有高效、经济等优点,因此在食品工业中被广泛应用。国内外多项研究表明,只要生产厂家严格按照国家规定的标准使用人工合成甜味剂,对消费者的健康就不会造成危害。但如果超量使用,则会危害人体健康,为此国家对甜味剂的使用范围及用量进行了严格规定。方法优势:迪马科技应用实验室建立的烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测解决方案,使用反相固相萃取柱ProElut C18进行前处理净化,有效去除干扰物,选用对三种甜味剂均具有良好保留效果的极性改性反相色谱柱Suprsil C18-EP进行色谱分析,实现12分钟内三种甜味剂的完全分离。该方法具有操作简便,回收率结果理想,重现性好的优点。可供广大食品分析工作者采用作为烘焙食品中甜味剂的检测方法。样品准备(1) 取2 g样品,加入20 mL甲醇,充分混匀,超声提取15 min;(2) 取出上层清液,再向残渣中加入20 mL甲醇,充分混匀,超声提取15 min,合并上清液;(3) 向上清液中加入1 mL水,在35 ℃条件下减压蒸馏至近干,加入2 mL水,待净化。

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    奥林巴斯显微镜各型号汇总对比本文是在汇集各个常规的奥林巴斯推出的型号和参数,旨在帮助实验室观察研究人员对于奥林巴斯显微镜有个更加深入的了解: 产品名称详细参数奥林巴斯显微镜CX22显微镜类型:教学级显微镜;观察头:双目观察筒, 镜筒倾角为30度, 瞳间距48-75mm;目镜:10×, 视场数F.N. 18(防霉处理);物镜:平场消色差;4×N.A.0.10 W.D. 22.0mm;10×N.A.0.25 W.D. 10.5mm;40.. 奥林巴斯显微镜CX31显微镜类型:教学级显微镜;观察头:三目, 视场数20, 镜筒倾角为30度, 瞳间距48-75mm, 光路选择(50双目/50摄像);调焦:载物台垂直运动由滚柱(齿条—小齿轮)机构导向, 采用粗微同轴旋钮, 粗调行程每一圈为36.8mm,奥林巴斯显微镜BX53显微镜类型:研究级显微镜;观察头:宽视野(视野数为22): 宽视野双目镜筒,倾角为30度 宽视野可倾斜式双目镜筒,倾角为5度-35度 宽视野三目镜筒,倾角为30度 宽视野人机工程(倾斜/伸缩式)双目镜筒,倾角为0度-25. 奥林巴斯显微镜BX51显微镜类型:研究级显微镜(正置);观察头:宽视野(视野数为22):·宽视野双目镜筒, 倾角为30度·宽视野可倾斜式双目镜筒, 倾角为5度-35度·宽视野三目镜筒, 倾角为30度·宽视野人机工程(倾斜/.. 奥林巴斯显微镜BX43显微镜类型:临床用的万能研究级显微镜;观察头:宽视野(视场数22): 宽视场三目观察筒, 倾角30度; 宽视场人机工程学双目观察筒, 倾角0~25度. 超宽视野(视场数26.5): 超宽视场三目观察筒, 倾角24度;调焦:聚焦: .. 奥林巴斯显微镜SZ51显微镜类型:体视显微镜(解剖镜);观察头:观察筒倾角: 45度;目镜:"ComfortView"WHSZ系列, 无铅;物镜:辅助物镜: 用螺丝在框架底部固定(M48螺纹×0.75);调焦:调焦旋钮: 左/右单轴水平旋钮, 结合瞳间距高低放.. 奥林巴斯显微镜SZ61显微镜类型:体视显微镜(解剖镜);观察头:观察筒倾角: 45度;目镜:"ComfortView"WHSZ系列, 无铅;物镜:辅助物镜: 用螺丝在框架底部固定(M48螺纹×0.75);调焦:调焦旋钮: 左/右单轴水平旋钮, 结合瞳间距高低放.. 奥林巴斯显微镜CX41显微镜类型:教学级显微镜;观察头:U-CBI30-2, 双目; U-CTR30-2, 三目, 视场数: 20, 镜筒倾角为30度, 瞳间距48-75mm, 光路选择(50双目/50摄像);物镜:平场消色差物镜, 4x、0.10、22.0mm; 10x、0.25、10.5mm; 40... 奥林巴斯显微镜CkX41(临床级)显微镜类型:倒置显微镜;观察头:双目镜筒:U-CBI30-2: 倾斜30度双目观察筒, 瞳间距在48~75mm, 左目筒可进行屈光度调节(F.N.20);U-CBI30-2: 倾斜30度双目观察筒, 瞳间距在48~75mm, 左目筒可进行屈光... OLYMPUS显微镜SZ61TRC显微镜类型:体视显微镜(解剖镜);观察头:观察筒倾角: 45度;目镜:"ComfortView"WHSZ系列, 无铅;物镜:辅助物镜: 用螺丝在框架底部固定(M48螺纹×0.75);调焦:调焦旋钮: 左/右单轴水平旋钮, 结合瞳间距高低放 奥林巴斯显微镜BX41(临床用 显微镜类型:临床用的万能研究级显微镜;观察头:宽视野(视场数22): 宽视场双目观察筒, 倾角30度;宽视场可变倾角双目观察筒, 倾角5~35度.超宽视野(视场数26.5): 超宽视场三目观察筒, 倾角24度.;调焦...奥林巴斯显微镜CKX31(临床级)显微镜类型:倒置显微镜;观察头:双目镜筒: 固定式双目镜筒, 镜筒倾角为45度. 瞳距可在48-75mm范围内进行调节, 右筒备有螺旋面, 可调节屈光度.;目镜:10×(F.N.20);调焦:通过物镜转盘的上下移动进行调焦(载物..奥林巴斯显微镜BX51(临床级 显微镜类型:临床用的万能研究级显微镜;观察头:宽视野(视场数22): 宽视场三目观察筒, 倾角30度; 宽视场人机工程学双目观察筒, 倾角0~25度.超宽视野(视场数26.5): 超宽视场三目观察筒, 倾角24度.;调焦:.. 奥林巴斯显微镜BX51IX51 显微镜类型:研究级显微镜(倒置);观察头:可倾斜式双目: U-TBI90: 35度-85度连续可调倾角(眼点高度406-471mm), 瞳间距调节范围50-76mm, 屈光度调节功能, 正立像, F.N.22双目: U-BI90CT: 内置对中望远镜, 瞳... 通过对比不难发现,不同的型号所对应的产品的参数性能

  • 奥林巴斯IX83显微镜中的贵族

    我们都知道奥林巴斯显微镜一直都是以光学著称的,奥林巴斯显微镜出现过很多款实惠的显微镜,一直以来都受到人们的喜爱。但是奥林巴斯显微镜家族也有贵族,这个“贵”主要体现在奥林巴斯显微镜的价格上,下面我们来看看这一款“贵族”产品。奥林巴斯IX83被誉为是奥林巴斯显微镜中的贵族,根据目前市场最新的报价,奥林巴斯IX83显微镜报价为63.8万,它优异的性能和它的价格是符合的,下面我们来一起看看它的参数。首先照明系统上来讲,采用电动0:100/50:50/100:0(左侧端口:观察端口),照明灯采用独特的倾斜结构,倾斜的角度为30度。方便操作者观察,还有一定的减震功能。聚光镜架(采用88mm的钮动距离,重新聚焦结构)视场光阑可以调节,4个滤色片架。它的光源是采用12V 100W卤素灯,光线非常的充足,有利于观察。高色彩重现LED光源带复眼透镜的L形荧光照明器:带可更换FS部件的L形设计L形荧光照明器:带可更换FS和AS部件的L形设计。荧光照明器:直形设计,带有视场光阑,荧光光源:130W汞灯光纤照明,100W汞灯复消色差灯箱和变压器,100W汞灯灯箱和变压器,75W氲灯箱和变压器 。聚光镜也跟普通的显微镜有着很大的区别,主要运用电动长工作距离聚光镜:W.D.27mm,NA0.55,7孔位电动聚光镜转盘(3孔用于30mm,2孔用于38mm),长工作距离万能聚光镜:NA0.55,W.D.27mm,5孔位聚光镜转盘(3孔用于30mm,2孔用于38mm),长工作距离浮雕相衬聚光镜NA0.55,W.D.45mm,4孔位聚光镜转盘(用于50mm,浮雕相衬光学元件)超长工作距离聚光镜:NA0.3,W.D.73mm,4孔位聚光镜转盘(用于29mm)。它的观察镜头有四种模式可以选择,可以根据自身的需要来选择合适的模式,从而实现最佳的效果。主要是有以下几种模式,宽视野(FN22)、宽视野倾斜双目镜筒、宽视野双目镜筒、宽视野三目镜筒。以上这些内容只是简单的介绍了奥林巴斯IX83显微镜的一些参数,这些参数并不完整,还有很多需要补充的地方。如果你还想 了解更多的情况,请您留意网站内更新的文章,我们下次会详细的介绍奥林巴斯IX83显微镜的具体参数。文章转载于网络更多文章资讯:电子倍增式相机EMCCD(http://www.microimaging.com.cn/EMCCD/)日本成茂公司显微操作(http://www.microimaging.com.cn/narishige/)

  • 【转帖】梁山好汉能拿多少枚奥运金牌

    水泊梁山108人的大名单中,不乏混饭吃的冗员,像宋清便是凭裙带关系而排名第76位,还让其掌管梁山排设筵席之肥差。那“摸着天”杜迁则是空长个头,却本事平平。但梁山众好汉中确有一批身怀绝技者,许多还具有从事体育运动的天赋,具备在奥运会上争金夺银的实力。由此,笔者倒是想起一个趣味话题:假如让梁山好汉组成一个代表团,他们究竟能拿到多少枚奥运金牌? 梁山好汉中第一个能拿奥运金牌的应该是“没羽箭”张清。这张清擅长飞蝗石绝技,飞石打将,百中百发,曾经用飞石接连打伤“金枪手”徐宁、“双鞭”呼延灼、“大刀”关胜等十五员梁山战将。凭张清飞石百发百中的手感,完全能拿下男子射击飞碟双多向及飞碟双向这两枚金牌。 梁山好汉的第二个夺金强项是射箭。那花荣箭法高超,有百步穿杨的功夫,故时人把他比作西汉名将李广,送其一个“小李广”的绰号。花荣多次用箭法建立奇功,三打祝家庄时,花荣便一箭射落祝家庄的指挥灯,使祝家庄兵马自乱。后遇见“小温侯”吕方与“赛仁贵”郭盛直打斗得两支戟绒条搅结难分,又引弓搭箭将绒条射断。以花荣的箭术,拿下一枚射箭个人赛金牌应该不成问题。 田径是中国代表队夺金的弱强,却是梁山好汉揽金的一大优势项目。那“神行太保”戴宗,绑上两个甲马,一日便行五百里;若是绑上四个,便可日奔八百里。凭着如此神速与耐力,他一人便可包揽男子20公里、50公里竞走,男子1500米、5000米、10000米及马拉松这六枚金牌。再说“鼓上蚤”时迁,既然轻巧得像是在大鼓上蹦来蹦去的跳蚤,让他练上几天撑杆跳高,估计比赛时这杆能撑多高,他就能跳多高,说不准还会先站在那横杆上做几个怪相才下得杆去。梁山的另一个田径好手是“活闪婆”王定六,他跳得实在太快,只能用“闪”来形容,若让他参加男子110米跨栏角逐,刘翔与古巴的罗伯斯只好去争银牌了。 水上项目更是梁山好汉的拿手好戏,那“混江龙”李俊、“阮氏三雄”、“船火儿”张横、“浪里白条”张顺、“出洞蛟”童威、“翻江蜃”童猛,均是一身水中好功夫,这八员大将联手出马,拿下游泳、水球、赛艇中的十枚左右金牌大概不是一句虚话。 举重是中国队的强项,梁山好汉中也有一名举重健将。若能将那“花和尚”鲁智深“倒拔垂杨柳”的功力转引至举重上,拿下某个级别的男子举重金牌,自然不在话下。而以武松梁山第一散打高手的武艺与打虎的霸气,练练拳击,当可夺得一枚拳击项目的金牌。 梁山好汉中还有夺金实力的是“浪子”燕青与“没面目”焦挺。燕青善于相扑,曾打败过摆擂台两年未遇对手的“擎天柱”,若改练摔跤,则可能难遇敌手。焦挺则善于柔道,当年李逵与其相遇时,便被连摔两跤。 屈指一算,这梁山好汉代表团大抵能拿下25枚左右金牌。只是可惜由男子一统天下,无一女将能出马,与中国队的“阴盛阳衰”截然相反。但我们有理由相信,作为本届奥运会东道主的中国代表团,能夺取的奥运金牌数应该远在虚拟的梁山好汉代表团之上

  • 美国Biotipsci PCR(qPCR)媲美ABI八联管、盖,比ABI便宜百分之30

    美国Biotipsci PCR(qPCR)媲美ABI八联管、盖,比ABI便宜百分之30

    [img=,685,315]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706121642_01_3194653_3.png[/img]美国Biotipsci [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url](q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]) 八联管,媲美ABI荧光定量八联管八联盖 • 美国进口• 兼容绝大多数常用 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 仪• PP材质,超薄壁,高热传递效率,更短的循环时间• 生产车间先进洁净• 无DNase或RNase• 可121℃高压灭菌Biotipsci 八联管规格可选:0.1ml、0.2ml八联管样式可选:单管、八联管(每管连单盖)、八联管(管盖分开,为八联管、八联盖)颜色可选: 无色、蓝、绿、紫、红、黄、乳白美国Biotipsci 高透光盖膜,媲美ABI封板膜 1、高透光度粘性盖膜用于微孔板时,可降低孔间污染和样品蒸发的几率。• 压力敏感的粘性盖膜对每个孔均提供了密封• 不影响样品读数• 按压密封:对准反应板后按压密封• 简单易用——不会粘在手套上2、防止宝贵样品的损失使用这种光学透明的粘性盖膜将样品密封于微孔板的孔内。这将会降低样品孔之间交叉污染的可能性,有助于确保一致的实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]数据。3、使用方便只需从粘性盖膜上撕下衬垫,将其紧紧的贴在微孔板上方即可。将微孔板叠在一起,按正常方法读取样品,但样品污染的几率更低。

  • 奥美拉唑和奥美拉唑钠对照品

    102%(对照为奥美拉唑钠),后来领导指示我们用奥美拉唑对照再来用液相检测奥美拉唑钠,含量又和奥美拉唑钠对照算出来的结果差很多(奥美拉唑钠和奥美拉唑的转换系数考虑在内了),大家帮忙分析一下是什么原因啊

  • 【分享】八大离奇基因实验:纳粹试图制造双胞胎城市

    北京时间11月19日消息,据国外媒体报道,自从人类认识基因和遗传的基本原理以来,就从来没有间断过对基因奥秘的进一步探索。科学家们也一直在通过各种实验试图改变或优化各种遗传基因。近日,国外媒体评出了人类历史上八大奇怪基因实验,其中包括纳粹科学家试图制造双胞胎城市、杂交蜘蛛山羊等。  [B]1、纳粹科学家试图制造双胞胎城市[/B][IMG]http://i3.sinaimg.cn/IT/2009/1119/2009111991447.jpg[/IMG]纳粹科学家试图制造双胞胎城市  约瑟夫-门格勒是纳粹德国著名的人类学和基因学专家,他也因为臭名昭著的双胞胎人体基因实验而被称为“死亡天使”。当时,门格勒的主要任务就为希特勒的第三帝国创造一个新的优等民族。从1943年到1945年间,他常驻奥斯威辛集中营,利用集中营的犹太双胞胎进行人体和基因实验,试图找到能够改变染色体并制造双胞胎的方法,他希望通过这种方法人为地提高雅利安人种的出生率。一些历史学家认为,门格勒的基因实验可能已经取得了部分成果。许多年来,科学家们对于巴西坎迪多哥多伊镇双胞胎出生率之高感到十分神秘,但一直未能找到答案。在坎迪多哥多伊镇,大约每5个怀孕妇女中就会有一个妇女生出双胞胎,而且生出的双胞胎婴儿大部分都是金发碧睛。而这正是纳粹科学家所坚信的优等民族的特征,门格勒对这个小镇也相当感兴趣,他也曾试图制造一个与坎迪多哥多伊镇类似的双胞胎城市。据坎迪多哥多伊镇当地居民介绍,直到上世纪60年代初期,门格勒还曾频繁造访该镇。最初,他是以兽医的身份出现,后来他又在小镇上行医,主要行医对象为小镇的妇女。战后为了逃避法律制裁,门格勒在一直在阿根廷、巴西和巴拉圭等地漂泊。直到1979年去世,门格勒制造优等民族和双胞胎城市的梦想最终未能实现。

  • 奥林巴斯显微镜

    追溯“显微镜”的历史,可知显微镜起源于荷兰的眼镜制作师父子的发明。之后,显微镜在英国和德国经过不断地改良得到了进一步的发展。在19世纪后期的日本,显微镜是作为“放大镜”来制造和销售的。在性能上,它根本无法与欧洲的显微镜相比,因此,当时研究细菌学的学者们不得不依赖于价格昂贵的进口显微镜。奥林巴斯的创始人——山下长抱着“无论如何都要制造出日本的国产显微镜”这一梦想,于1919年成立了公司,开始了实现梦想的挑战。与此同时,山下长也走上了“艰苦奋斗的13年”的征途。 作为一种仪器。奥林巴斯显微镜它运用最先进的UIS2光学系统(无限远校正系统),同时运用了照明装置,可以在夜间可见度较低的情况下进行作业。照明装置采用了内置透射光柯勒照明,6V20W卤素灯 100-240V 50/60Hz通用。调焦系统是载物台垂直运动,粗调行程每一圈为20mm,微调最小距离2.5微米。换镜转盘用的是固定4孔物镜转盘,观察筒是双目观察筒,镜筒倾角为30°,瞳间距48-75mm,载物台明装置是钢丝传动,尺寸为120mm × 132mm,活动范围为X轴向76mm × Y轴向30mm,单片标本夹。聚光镜则是阿贝聚光镜,数值孔径1.25(浸油时),内装式孔径光阑。

  • 【讨论】液相色谱分析白酒中的阿斯巴甜、安赛蜜、糖精钠的方法

    分析白酒中的添加剂,还没有可依据的国家方法标准,试验以下方法,请大家讨论方法的可行性分析白酒中的添加剂(阿斯巴甜、安赛蜜、糖精钠)安捷伦1120液相色谱柱子:C18柱柱温:40℃流动相:甲醇:水=30:70流速:0.8mL/分钟波长:214nm通过试验,此方法对三种添加剂都有相应,分离度开始不错,峰型也可,长时间后不是很理想,保留时间总是在变,峰型越来越馒头状,峰上有怪峰。请教大侠们怎么样能提高分离度,改变峰型,稳定保留时间?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/04/201004161741_212748_1608710_3.gif[/img]

  • 钠镁子辣、钠镁子辣,农夫山泉喝不怕!

    钠镁子辣、钠镁子辣,农夫山泉喝不怕!

    今天做降水,顺便分析了一下农夫山泉的钠和镁含量!方法是采用的《水和废水水质分析方法》(第四版)中的钾、钠、钙、镁的测定,由于时间原因,目前只测了一下钠和镁的含量。下周准备有时间再测一下铁和锰的含量。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305092049_439165_1611705_3.jpg取10毫升样品加到50毫升的容量瓶里面,测定钠是需要加1+1硝酸2毫升,硝酸铯3毫升;测定镁是需要加1+1硝酸1毫升,硝酸镧1毫升,然后定容到50.http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305092052_439166_1611705_3.jpg下面是结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305092056_439167_1611705_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305092101_439169_1611705_3.jpg钠的测定含量是1.74㎎/L镁的测定含量是0.399㎎/L*50ml / 10ml=1.99㎎/L这个结果应该按照什么标准去评判?

  • 科学家观察到酶“编辑”DNA过程 有助纠正遗传疾病

    科学家观察到酶是如何“编辑”DNA的 有望用以纠正人类遗传疾病 科技日报讯 (记者陈丹)一个国际研究小组在了解酶如何“编辑”基因方面取得了重要进展:观察到了一类被称为CRISPR的酶绑定并改变DNA(脱氧核糖核酸)结构的过程。这项发表于5月27日(北京时间)美国《国家科学院学报》上的研究成果有望为纠正人类的遗传疾病铺平道路。 CRISPR意即“成簇的规律间隔的短回文重复”,在上世纪80年代才首次为人们所认知。到目前为止,已发现40%已测序细菌和90%已测序古细菌的基因组存在这种重复序列,而且细菌已开发出一套可以探测和切断外来DNA的免疫策略。其机理大致如此:CRISPR序列与很多病毒、噬菌体或者质粒的DNA序列同源,受到攻击的细菌会以相匹配的DNA为目标进行自然防御。它们所采用的手段,就是利用一种名为Cas9的内切酶,裂解外来DNA。 基因工程师们意识到,如果将细菌的CRISPR-Cas9系统插入其它生物体细胞,它们也能够对目标DNA进行切割。就在去年,这一革命性的基因编辑技术收获了一系列成果:多个研究团队已经成功对人体、小鼠、斑马鱼、大米、小麦等细胞中的基因进行删除、添加、激活或抑制等操作,从而证明该技术的广泛适用性。 不过,人类基因组有30亿个碱基对,要准确锁定某个目标DNA,工作量大致相当于从一套23卷的《百科全书》中找出一个拼错的单词。因此,研究人员为Cas9这把“基因剪刀”找了一个与目标基因匹配的RNA(核糖核酸)作为“导航仪”。在这个靶向过程中,Cas9拉开DNA链,并插入RNA,使之形成了一个被称为R环的特定序列结构。 在最新研究中,英国布里斯托尔大学和立陶宛生物技术研究所的科学家使用经过特别改装的显微镜对R环模型进行了检测。显微镜下的单个DNA分子被磁场拉伸着,通过改变DNA受到的扭力,他们能够直接观测由单个CRISPR酶介导R环形成的过程。这使得这个过程中以前不为人知的一些步骤毕现无疑,也让研究人员能够探讨DNA碱基对序列对R环形成的影响。 布里斯托尔大学生物化学系教授马克·斯兹克泽尔昆说:“我们进行的单分子实验加深了有关DNA序列对R环形成的影响的认识。这将有助于未来合理地重新设计CRISPR酶,以提高其精确度,将脱靶效应(即在不需要的地方引起基因变异)降至最低。这对我们最终利用这些工具来纠正患者的遗传疾病至关重要。” 总编辑圈点: 不知基因谁裁出,免疫系统似剪刀。Cas9蛋白酶,本来是原始生命用来防御生物入侵的防御性武器,但却被人类变成进攻利器。它在人类手中犹如火箭弹,威力巨大,使用方便。但它精确度有限,容易误切人类不希望影响的基因段。科学家们此次通过改造显微镜,看清了Cas9破拆单个DNA的全过程。这样,人们就能将火箭弹改造成导弹,指哪儿打哪儿。曾经让患者绝望的遗传病,未来或许一针下去就解决了。来源:中国科技网-科技日报 作者:陈丹 2014年05月28日

  • 光片照明(SPIM)显微镜———淋巴管形成机制

    [b]小鼠胚胎初始淋巴管形成的多步机制[/b]Rene′ Ha¨ gerling1,7, Cathrin Pollmann1,7,Martin Andreas1, Christian Schmidt1,Harri Nurmi2, Ralf H Adams3, Kari Alitalo2,Volker Andresen4, Stefan Schulte-Merker5,6and Friedemann Kiefer1,* [i][b]The EMBO Journal[/b][/i] (2013), 1-16在哺乳动物发育过程中,主静脉血管中的一个内部细胞亚群开始表达淋巴管特异基因,进而发育出初级的淋巴结构,被共同命名为淋巴囊。淋巴内皮细胞的出芽,扩展,膨胀被认为是淋巴内皮细胞从主静脉中产生的基础,但是淋巴管形成的确切机制仍然不为人所了解。使用选择性光片照明显微镜Ultramicroscope来观察进行整体免疫染色的小鼠胚胎,我们观察到细胞分辨率的完整的发育中的血管系统。本文中,我们报道了可以被检测到的最早的淋巴内皮细胞松散的连接在主静脉和浅表的脉管丛。下一步的淋巴内皮细胞聚集导致了两个清晰的,未被预先确认的淋巴结构,背部外周纵向淋巴管和腹侧初级胸导管,它们在后期阶段形成了一个与主静脉的直接连接。我们发现血管内皮生长因子C和基质组分CCBE1对于淋巴内皮细胞出芽和迁移是必不可少的。总之,我们提供了一个明显更加细节化的视角和早期淋巴管发育的新颖模型。[img=,591,756]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal1.jpg[/img]图1. 初始淋巴祖细胞从主静脉中产生。(A-D)受精后9.5/9.75(A,C)和10.5(B,D)天小鼠胚胎血管系统的整体染色。PECAM-1优先染动脉、静脉血管中的内源粘蛋白。Prox1识别的淋巴内皮细胞。(A)中框出了胸颈静脉区,淋巴内皮细胞。DA,背主动脉;ISA,节间动脉;PAAs,咽弓动脉。标尺100um。E 图示箭头穿越一对主静脉之一。静脉内皮细胞,蓝色;发育中的心脏,暗绿;浅表静脉丛的位置被标示出来。CCV,一般主静脉;SV,静脉窦;H,心脏;ISV,节间血管。(F)成对CCV和导流入心脏的SV的三维重构。移开一半对称主静脉后的ISVs和生肌刀(M)。蓝色箭头指示静脉血的流动。(G)胸颈静脉区的横切面。DA,ISA和动脉丛标记红色;CV,ISV和sVP标记蓝色。NT,神经管;DRG,背根神经节;iLECs,初始淋巴内皮细胞。(H-K)整体免疫染色胚胎的图片左侧标注的蛋白分布的光学切片的3维重建。E,受精后几天的发育阶段(H,I,K横切面;J矢状切面)。白色箭头,新出现的iLECs;点线,CV的背根。标尺100um。(L-O)在E10.0和E10.25期间出现的最早iLECs的图解。Prox1+细胞,绿色,黄色为细胞核。以绿色表面表明在CCV移开分支中的Prox1表达区。[img=,591,330]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal2.jpg[/img]图2. 淋巴内皮细胞从CV的出芽伴随着细胞和核的形状改变,以及一个蛋白标记开关的表达。(A,B)整体免疫染色胚胎的CCV中左侧标注蛋白的矢状视图。受精后的发育阶段(E);iLECs初始淋巴内皮细胞;头盖处,左;尾部,右。标尺100um。CV的上出口,从鳞状到纺锤状的LEC形状改变(箭头指示CV根中的Prox1+ ECs)。白色箭头,iLECs间极薄的连接;红色箭头,照亮的静脉血管中频繁的发现红细胞(但iLECs中从没有)。(B)也可以看到相应的图解1O。(C)在E10.5阶段,出现的iLECs中的VEGFR-3及其联合受体Nrp2水平被上调,而CV和iLECs中的Lyve-1水平保持不变。***P0.001,NS,不显著。(D,E)随着iLECs的出现核的形状从圆形转变为椭圆形。通过核表面重构描述了CCV内部和外部的Prox1+细胞核以及对球率和椭球率做散点图(E)。标尺100um。(F-H)矢状(F)和横切面(G,H)视图中整体免疫染色小鼠胚胎的CCV内部和外部的Prox1+细胞核表面重构。(F,G)通过热成像赋以伪色标记的Prox1表达强度图,例如,最高强度的表达标记为红色,低强度表达标记为蓝色。(H)通过图像的叠加进行细胞的解剖学定位软件包:Imaris Vantage,标尺100um。[img=,591,785]http://qd-china.com//bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal3.jpg[/img]图3. iLECs在节间血管主要分支的水平上浓缩来形成照亮的外周纵向淋巴管(PLLV)。(A-D)每张图所展示蛋白的整体免疫染色胚胎光学切片的矢状图重构。E,受精后的发育天数;头盖的,左;尾端的,右。(A)在iLECs出现的早期阶段,iLECs以扇形模式分布,从CCV向头部和尾部扩展。虚线,iLECs检测的边界。(A-D)iLECs在节间血管第一侧枝的水平上立即浓缩形成PLLV。长的阴影线指示了CCV和SV的位置;短的阴影线,iLECs浓缩和PLLV形成的区域。(E-H)图解iLECs的位置,在E10.5和E10.7阶段出现在CV的背部。CCV之外的Prox1+iLECs以淡绿色标记,CV内的Prox1+细胞和心肌以深绿色标记。在CCV移开的分支中的Prox1表达域(P1ED)以淡绿色表面显示。浅表静脉丛作为iLECs的一个可能的备选来源,其位置标注为蓝色(G,H)。sVP内的Prox1+内皮细胞被标注为红色。sVP,浅表静脉丛;标尺100um。 [img=,591,846]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal4.jpg[/img]图4. CV和PLLV之间的LECs聚集并形成不断增长的更大的被照亮结构并最终形成原始的胸导管。来自整体免疫染色的小鼠胚胎光学切片的图中标注蛋白的(A-C)矢状图和(D)截面图。(A)箭头指示了位于CV和PLLV之间的LECs快速和不断进行的聚集,这导致了更大照明结构pTD的形成(B-D)。(C,D)浅表淋巴管sLECs开始从PLLV背侧和pTD旁边伸展。PLLV和pTD在pTD头盖端连接到一起。(F-H)图示了导致pTD成形的细胞聚集和浓缩事件。(I)在E11.5阶段,sLECs中的VEGFR-3和它的联合受体Nrp2水平上调,而Lyve-1水平与CV和iLECs相比强烈下调。***P0.001。发育阶段(E);头盖,左,尾端,右。ACV,前主静脉;CCV,一般主静脉;PCV,后主静脉;ISV,节间静脉;PLLV,外周纵向淋巴管;pTD,原始胸导管;sLECs,浅表淋巴结。标尺100um。[img=,591,734]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal5.jpg[/img]图5. 通过最高水平表达的Prox1表征的pTD和CV间新形成的成对的接触点。(A-C)整体免疫染色胚胎的矢状图。新形成中的pTD快速巩固进一个巨大的照明结构,头颅部以U形连接到PLLV(左侧A,B)。CV和pTD间的两个连接表达最高水平的Prox1(箭头)。(B-E)一个总是位于pTD和CV连接间的作为锁骨下动脉的短暂存在的侧枝被星号标记出来。(C)红色箭头:pTD内堆积的红细胞。箭头标注pTD连接端对面的Prox1+细胞。(D,E)通过pTD和CV连接区域的单个平面(光学切片)。(F-H)图示pTD和CV间接触点的发育,接触点处高表达的Prox1+细胞标记为暗绿色和红色的细胞核。标尺100um。[img=,591,963]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal6.jpg[/img]图6. 不同的淋巴内皮细胞群表达不同的标记蛋白组。(A-G)所示发育阶段的免疫染色胚胎的横向冷冻切片。可见的抗原被以每幅图上所标记的相应颜色标记。典型例证标记表达的面板在(I)中汇总。(A)在E10.0阶段的LECs细胞中没有粘蛋白的表达,在E11.0阶段首先被检测到并在E12.0的LECs中变得丰富。注意CV中的Prox1+细胞在所有阶段都是阴性。在E11.5阶段,Nrp2在CV和pTD内中等强度的表达,而CV外的iLECs强烈的表现为阳性。(C)内皮粘蛋白在iLECs中只有短暂的留存。(D)在CV和pTD的Prox1+ ECs中Lyve-1强烈表达,而在展示的sLECs中仅有残留的表达(箭头)。(E)在所有血管结构中,整合蛋白α6有中等程度的表达。(F)在E11.5阶段,神经生长因子Netrin-4在BECs中强烈表达,在CV中很弱的表达,在pTD内中等程度的表达,但在iLECs中(箭头)没有被检测到。(G,H)Unc5B在iLECs(G,箭头)和sLECs(H,箭头)中强烈表达,而在pTD中表达微弱。 (H)来自整体免疫染色的小鼠胚胎的Prox1 (绿) 和Unc5B (蓝)光学切片的矢状重构. (I)在妊娠中期,不同LEC群中标注蛋白的表达。数据来自免疫染色的冷冻切片或整体免疫染色。表示的结构和细胞群: CV, 主静脉 iLECs, 初始LECs (第一轮从CV中出现的纺锤状LE,松散连接的细胞) sLECS, 浅表LECs (从PLLV (背侧)中伸出的LECs) pTD, 初始胸导管. CV*, 对CV背侧Prox1+细胞的表达限制。标尺100um。 [img=,591,781]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal7.jpg[/img]图7. CCBE1缺陷导致的Prox1+细胞从CV分离的失败,并导致初始淋巴结构的快速损失。 (A, B, F, G) 对标注蛋白进行整体免疫染色的野生型(A) 和Ccbe1_/_ (B, F, G)胚胎的3D重构。(A, B)E10.5阶段的矢状图. (B) 在CCBE1-缺陷胚胎中,在CV和初始PLLV中检测到丰富的Prox1+细胞,紧邻浅表静脉丛。与野生型胚胎(A)相比,CCV和PLLV间没有纺锤状的iLECs。 (B, F) Prox1+细胞描绘出CCV和SV的边界, 当非典型的,大的,照明的分支从CV(箭头)中出现。(G) 含大量VEGFR-3+的异形分支从CV(箭头)和ISVs(箭头)中伸展。(C-E)图示野生型(C)和CCBE1-缺陷型(D, E)胚胎中的Prox1+ cells。含大量VEGFR-3+的静脉内皮标注为深蓝色。sVP, 浅表静脉丛。标尺100um。[img=,295,591]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal8.jpg[/img]Figure 8VEGF-C(血管内皮因子C)缺陷的小鼠胚胎中的Prox1+内皮细胞因为不能离开它们起源处的血管从而标记了LECs的静脉来源。E10.75阶段野生型(A, B)和Vegfc_/_型(C-F)胚胎的矢状图3D重构,对标注蛋白做了整体免疫染色。在VEGF-C缺陷胚胎中,Prox1+内皮细胞不能离开静脉血管导致没有出现发育中的淋巴结构。(E, F) 除了CV(箭)中的Prox1+ 细胞, 在腹侧sVP(箭头)处更大的静脉血管中捕获了第二群Prox1t淋巴初始组织 。(G, H) 图示了野生型 (G) 和VEGF-C缺陷型(H)胚胎中的Prox1+细胞。NE, 神经元的Prox1+表达条纹。sVP, 浅表静脉丛。标尺100 um。[img]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal9.jpg[/img]Figure 9. 在iLECs外出和淋巴管形成过程中,CCBE1和VEGF-C协同的相互作用。对E10.5阶段所标注蛋白整体免疫染色的野生型(A-C), Vegfct/_ (D-F), Ccbe1t/_ (G-I) 和 Vegfct/_/Ccbe1t/_ (J-L) 胚胎矢状图的3维重构。CCV和ISVs的根部用虚线标注,Prox1+细胞用箭头标注。与野生型同窝小崽相比,Vegfct/_胚胎(A-C)表现出iLECs从CCV中迁出的下降(D, E)。与之相反,Ccbe1t/_胚胎中,受损的ISVs形成被检测到。而且,不典型的,照亮的分支出现在Prox1+和高水平VEGFR-3表达的主静脉根部(G-I). (J-L) 在复合的杂合胚胎中,这种表型非常夸张地表明了VEGF-C 和CCBE1在淋巴管形成过程中的协同作用。标尺100um。

  • 硫代卡巴肼

    有没有人知道硫代卡巴肼的分析方法,或者提点见意

  • 【求助】石墨炉测试钾、钠、镁、钙

    最近要测有机物中钾、钠、镁、钙含量,此有机物溶于酒精,我想将样品用酒精溶解后直接用石墨炉进样,但是以前没做过这几个元素,不知升温曲线如何设置,想请教有经验的人指教一二!非常感谢!

  • 求教帕纳科荧光仪晶体超时处理办法

    帕纳科荧光仪型号:Axios 报警信息:3.36.1.1.0xtalmill time out 联系售后工程师让自己用手转转齿轮或重新插拔一下传感器,这几样都做了当时可以过去,过不了几小时又出现同样的报警,报警时仪器不能测样,问过两个工程师一个说要买晶体电机一个说不是电机的问题,无语了,有处理这个故障的大侠没,帮忙分析一下,拜托了

  • 听艳妹说,分坛人气不旺,俺来发点话题吧~~~~~~标题要长,才能吸引人气~~~~~~~~

    今天艳妹说,她晚上要去吃烤鸭昨天正好看到家不远的地方,有个新开的饭馆,打了横幅,烤鸭特价108一只,决定了,今天晚上也去吃哎,想吃上海第一烤鸭,大董的烤鸭,约了你妹的2个月了,还没约上呢....就只好就近解解馋了那话题就说说烤鸭吧烤鸭,主要有2种吃法一种是广式的,直接连皮带骨头带肉,切长条块,蘸着梅子酱(甜口)或者烤鸭酱咸口)吃一种是京式的,皮管皮片了吃,肉可以片在皮上,也可以单独割下来,炒着吃,剃掉肉的鸭架子,可以熬个鸭架汤,那就是一鸭二吃或者三次,吃片皮鸭也有2种吃法,一种是常见的,蘸了甜面酱,和黄瓜条,葱白条裹了面饼一起吃,还有种就是直接用片皮蘸了白糖吃各位看官,你们喜欢哪种吃法,说说看呗

  • 腊八蒜你吃了没

    [align=center][img=,582,362]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912111042024102_7148_676_3.png!w582x362.jpg[/img][/align]腊八蒜的功效也有它的短处,腊八蒜的功效因为有刺激胃酸分泌的作用。因此,患有胃溃疡及胃酸分泌过多者不宜食用。此外,腊八蒜的功效对已经患有较严重腹泻者也极为不利,因为腊八蒜的功效会加重对肠黏膜的刺激,进而加重腹泻的症状。腊八蒜的功效-腊八蒜的副作用:腊八蒜的功效并没有毒,蒜里面含有丰富的维生素,与醋酸结合有健体之功效,但吃多了会产生抗物酶,这就会使腊八蒜的功效让人精神疲惫。

  • 6.1 HPLC法测定盐酸纳美芬的含量及其有关物质

    6.1  HPLC法测定盐酸纳美芬的含量及其有关物质

    作者:钟武; 郑志兵; 肖军海; 任珅; 李松; 军事医学科学院毒物药物研究所; 军事医学科学院毒物药物研究所 北京;摘要:目的:建立高效液相色谱法测定新药盐酸纳美芬及其注射剂的含量及其有关物质。方法:采用迪马公司C18钻石色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05 mol·L-1的磷酸缓冲液(20:80),其中1 000 mL缓冲液中含有7.8 g磷酸二氢钠和2 mL的三乙胺,用85%的磷酸调节pH为4.2±0.02;流速:1.0 mL·min-1;检测波长为210 nm。结果:HPLC法测定的线性范围为21-126μg·mL-1,r=1.000,最低检测限为0.2 ng,本方法的重复性和精密度良好(RSD2%),平均回收率为99.30%-99.42%。结论:采用HPLC法测定盐酸纳美芬及其注射液的含量和有关物质,方法简便,结果准确。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207161705_377929_2379123_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207161705_377930_2379123_3.jpg

  • 【资料】奥林巴斯生物显微镜CX31使用说明书

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