马普替林

以超临界流体作流动相，以固体吸附剂（如硅胶）或键合在载体（或毛细管壁）上的有机高分子聚合物作固定相的色谱方法。常用流动相为超临界状态下的CO2、氧化亚氮、乙烷、三氟甲烷等。CO2最常用，因为它的临界温度低（31℃）、临界压力适中（7.29MP）、无毒、便宜，但其缺点是极性太低，对一些极性化合物的溶解能力较差，所以，通常要用另一台输液泵往流动相中添加1~5％的甲醇等极性有机改性剂。SFC所用色谱柱既有液相色谱的填充柱，又有气相色谱的毛细管柱，但由于超临界流体的强溶解能力，所使用的毛细管填充柱的固定相必须进行交联。从理论上讲，SFC既可以象液相色谱一样分析高沸点和难挥发样品，也可象气相色谱一样分析挥发性成分。不过，超临界流体色谱更重要的应用是用来作分离和制备，即超临界流体萃取。

[align=center][b]超临界流体色谱的介绍和应用[/b][/align][align=center][b]西安国联质量检测技术股份有限公司[/b][/align][align=center][b]安平中心：薛凯路[/b][/align]超临界流体作为流动相的色谱方法，是20世纪80年代以来发展迅速的一个色谱分支，所谓超临界流体，是指在高于临界压力和临界温度时的一种物质状态。它既不是气体，也不是液体，但它兼有气体的低粘度、液体的高密度以及介于气、液之间较高的扩散系数等特性。从理论上说SFC既可以分析GC法难以处理的高沸点、不挥发性样品，又有比HPLC法更高的柱效和更短的分离时间，且可使用二者常用的检测器，也可与MS、FT-IR光谱仪等在线联接，因而可以方便地进行定性、定量分析。在中药药物分析领域已有愈来愈多的应用。SFC超临界流体色谱法在手性化合物的分析中越来越多使用。1.原理什么是超临界流体，对于某些纯物质来说，具有三相点和临界点，如图所示，从图中可以看出，物质在三相点，气、液、固三态处于平衡状态，当处于临界温度和临界压力以上时，则不论施加多大压力，气体也不会液化，此时即非气体，也非液体，而是以超临界流体形式存在。[align=center][img=,296,236]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709081543_01_2904018_3.png[/img][/align]2.流动相和添加剂CO2的超临界流体性质化学反应性低, 惰性，无毒性，安全，临界点:T=31℃ , P=73 bar(1066psi)，超临界CO2 理化性质类似于正己烷，易获得，成本低廉常作为弱洗脱剂。强洗脱剂一般为醇类，常用甲醇，乙醇，异丙醇。为了得到较好的峰形，有时候常常使用添加剂如：氨水等等。3. 手性柱正相直链淀粉衍生物 CHIRALPAK AD / AD-H CHIRALPAK AS / AS-H纤维素衍生物 CHIRALCEL OD / OD-H CHIRALCEL OJ / OJ -H CHIRALCEL OA, OB, OC CHIRALCEL OF, OG, OK CHIRALCEL CA-1[b]反相[/b]CHIRALPAK[sup][/sup] AD -RHCHIRALPAK[sup][/sup] AS -RHCHIRALCEL[sup][/sup] OD-RH CHIRALCEL[sup][/sup] OJ -RH[b]共价键合型－新产品[/b] CHIRALPAK[sup] [/sup]IA CHIRALPAK[sup][/sup] IB[b]其它[/b] CROWNPAK[sup][/sup] [b]CR (＋), (－)[/b] CHIRALPAK[sup][/sup] OT(＋), OP (＋) CHIRALPAK[sup][/sup] WH, MA (＋) CHIRALPAK[sup] [/sup] QD-AX CHIRALPAK [sup][/sup] QN-AX4. Thar 80 主要部件主要有进样器，溶剂泵，CO2泵，检测器，背压器等部件，具体如图所示。[align=center][img=,690,467]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709081543_02_2904018_3.png[/img] [/align][align=center] [img=,437,609]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709081544_01_2904018_3.png[/img][/align]5. 总结SFC仪器较特殊的两点1.保持一定温度：二氧化碳流经的管路有温控措施，将温度控制在35℃。2.保持一定压力：有一个限流器（或称备压装置）。为了保持在整个系统中二氧化碳一直保持超临界流体状态，一般反压设置为100bar。3.粘度近于气体，比液体低得多，可减少柱过程阻力，采用细长色谱柱以增加柱效 。（优于HPLC）4.扩散系数在气体和液体之间，具有较快的传质速度，使分析速度加快,峰型变窄，增加检测灵敏度 。（优于GC）

[align=center][size=29px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中的梯度淋洗[/size][/align][align=center][/align]1 等度淋洗与梯度淋洗进行高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析时，常用两种洗脱方式，即等度淋洗与梯度淋洗。其中等度淋洗在分析全过程中流动相的组成不变。而梯度淋洗中流动相组成随运行过程是变化的（例如氢氧根体系中氢氧化钾浓度由15mM增至50mM）。下图为几种不同的梯度形状。其中曲线梯度较为不常见。[img=,690,396]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270935486413_397_1809927_3.jpg!w690x396.jpg[/img]目前许多实验室对梯度淋洗有很大偏见。他们偏爱等度淋洗的原因有以下几点：①一些实验室尚不具备支持梯度淋洗的色谱仪（只有一个泵且没比例阀）。②梯度淋洗更复杂，似乎更难建立新方法。③某些HPLC检测器(如示差折光检测器)不能使用梯度淋洗。④每次运行梯度淋洗后需重新平衡色谱柱，耗时较长。⑤不同设备的分离结果可能不同，所以梯度淋洗法移植时会出现保留时间差异。⑥梯度淋洗中的基线噪声和基线漂移更大，更容易受到试剂纯度的影响。⑦某些色谱柱或流动相不适于梯度淋洗。实际上，梯度淋洗分离方法的建立和日常操作与等度淋洗相比并不太难。而且很多分离只适于使用梯度淋洗。2 梯度淋洗的优势用等度淋洗时，由于流动相全程保持不变，如果待分析物，的保留差异很大，则会出现弱保留组分扎堆洗脱且强保留组分很晚才洗脱，从而无法获得满意的分离。[font='times new roman']为了比较等度淋洗与梯度淋洗的不同，我们使用同一根色谱柱分离相同的样品，下图是等度淋洗与梯度淋洗的对比谱图，上半部分为等度[/font][font='times new roman']淋洗曲线，下半部分为梯度淋洗曲线。通[/font][font='times new roman']过对比我们可以发现，等度淋洗时[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰分离度不太理想，[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰保留时间过长，而在梯度淋洗时，为了改善[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰的分离，我们采用较低的淋洗液浓度，为了快速洗脱强保留的[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰，我们在[/font][font='times new roman']6[/font][font='times new roman']号峰后提高了淋洗液浓度，使得[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰由原来的[/font][font='times new roman']80[/font][font='times new roman']分钟提前到[/font][font='times new roman']40[/font][font='times new roman']分钟。由此可见，梯度淋洗可有效改善弱保留组份分离度，快速洗脱强保留组份。此外，等度淋洗时，弱保留组份峰形比较窄而强保留组份峰形较宽，梯度淋洗时增强洗脱能力可以使强保留组份也获得尖锐的峰形。[/font][align=center][img=,690,390]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936062924_2978_1809927_3.jpg!w690x390.jpg[/img][/align]3 使用梯度淋洗时的注意点3.1 基线漂移[align=left]在[font='times new roman']HPLC[/font]中，不同流动相（水、甲醇、乙腈）对于紫外吸收的程度不同，导致梯度淋洗时产生基线漂移，且不可避免。[/align][align=left]在碳酸盐体系[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中，抑制产物是碳酸，碳酸浓度不同其电导也不同。故梯度淋洗会产生基线漂移，且不可避免。[/align][align=left]对于氢氧根淋洗液和甲烷磺酸淋洗液，抑制产物是水，理论上在梯度淋洗时不会产生基线漂移；而实际上由于试剂纯度以及抑制不完全等原因，也是存在基线漂移的。[/align]3.2 流动相平衡每次梯度淋洗结束时，流动相的组成已经与分析开始时大不相同了。为了下一次的梯度淋洗，必须用初始浓度的流动相对色谱柱进行彻底平衡后，再进行梯度淋洗。色谱柱平衡时间不足时，色谱图早期被洗脱的峰的保留时间会发生改变，而后期被洗脱的峰通常不受影响。3.3 流动相浓度的滞后现象当确定了梯度淋洗程序后，开始梯度淋洗，但由于实现梯度淋洗的仪器设备结构或电子控制系统等多种原因，使得我们实际观测到底梯度淋洗向后平移了一段时间，此现象称为梯度系统的滞后时间。使用相同的梯度淋洗程序，对于同一个样品，在不同的色谱仪上进行梯度淋洗，由于仪器结构、电路控制以及管线长度的差异，表现出的滞后时间往往不同。4 梯度淋洗的类型传统上，梯度淋洗分为高压梯度（也叫内梯度）和低压梯度（也叫外梯度）。另外，在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]领域提出淋洗液发生器的概念后，使用淋洗液发生器时也可以进行梯度淋洗。4.1 高压梯度（内梯度）高压梯度又称内梯度，采用多个高压泵将不同的流动相增压后送入混合室混合后送入色谱柱。流动相中有几种变化组分就称为几元梯度。二元梯度淋洗需要两台高压输液泵；三元梯度淋洗需要三台高压输液泵；每台高压输液泵的输出量由程序控制，按照设定程序将不同量的溶剂送到混合室混合，产生任意形式的梯度淋洗曲线。高压梯度通常以二元高压梯度最为常见。下图为二元高压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931283755_4332_1809927_3.jpeg[/img]泵A和泵B出来的流动相在混合器里面混合的时候，都是处于高压状态，这时候，流动相对气体溶解度较高，流动相中不容易析出气泡，从而避免导致[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]压力波动、流速不准、基线波动等种种问题。4.2 低压梯度（外梯度）低压梯度又称外梯度，是在常压下将流动相的不同组分混合后再用高压输液泵送入色谱柱的方法，利用电磁比例阀控制不同溶剂的流量变化，使溶剂按不同比例被输送入到混合室中混合，然后用一台高压输液泵将混合好的流动相输送到色谱柱中。低压梯度通常以四元低压梯度最为常见。流动相对气体的溶解度较低，如果流动相中溶解的气体比较多的话，在混合时就可能有小气泡形成，导致压力波动等种种问题。气泡永远是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的天敌。下图为四元低压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931284761_9930_1809927_3.jpeg[/img]低压梯度一定要配脱气机，先对流动相进行在线脱气，才能用电磁比例阀进行混合，要不然很容易产生气泡。而高压梯度一般情况下可以不用配在线脱气机就能在线混合，运行梯度方法。高压梯度的优势：优势1：混合精确性高从上面的介绍可以看到，两种梯度体系的混合方式完全不同。高压梯度相当直观，通过分别控制两个泵的流速，就能够准确控制两种流动相的比例。比如在1ml/min的流速下，要达到A：B两种流动相70：30的混合比例，那就设置A泵流速0.7ml/min，B泵流速0.3ml/min就可以了。当然这些都是系统和软件自动完成的。只要做到泵流速准确，比例就能准确。而低压梯度则通过电磁比例阀来控制混合比例，那比例阀又是如何工作的呢？一般来说，比例阀是通过控制入口通道分别打开时间的长短来控制混合比例的。举个例子可能更容易理解，仍然是A：B两种流动相70：30的混合比例。为了达到这个效果，B、C、D三个通道都关闭，A通道打开7ms，这时候进入系统的都是A；然后，A、C、D关闭，B通道打开3ms，这时候进入系统的都是B。这样就得到了70/30的流动相的比例。大家能感觉出来，进入系统的流动相其实是一段A、一段B这样的。如果两种流动相比例比较悬殊（比如某组分只占有1%），这种混合方式的误差相对比较大。优势2：延迟体积小使用高压梯度时，流动相混合后，经过混合器、压力传感器、阻尼器，放空阀，然后进入进样器。反观低压梯度，流动相混合后要经过整个泵头(包括主动入口阀、两个泵腔、出口阀、管路等等)，才能到达进样器。一般来说，我们把流动相从混合开始，最后到达柱头这段体积叫延迟体积。流动相梯度的变化要到色谱柱头，才能够对分离产生影响，所以有一定的延迟。延迟体积越大，梯度的变化到达柱头的时间越长，导致分析时间越长。我们可以看到，高压梯度先天地决定了其延迟体积远小于低压梯度。这就决定了在色谱分析时间要求很短的梯度方法中，比如各种小粒径的色谱柱的快速分析方法，都采用高压梯度方法。不同品牌、类型的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]之间的延迟体积差异，是方法转移后出现结果跟以前不一样了的最大的原因之一。低压梯度的优势：高压梯度这么多优势，但在实际上，还是低压梯度用得更多一些。低压梯度的优势是：便宜。低压梯度只需要一个输液泵就能运行梯度条件，，高压梯度最低需要两个泵才能运行梯度。在运行方法条件不是很苛刻的时候，低压梯度能达到跟高压梯度一样的分析效果，而价格可能要便宜得多。而且只有一个泵，后期保养成本也低。因为便宜，所以市场保有量更大，很多标准方法都是在低压梯度下开发的。用高压梯度需要进行方法移植。如果用一些三元甚至更高元梯度的方法，四元低压梯度可以直接拿来用，高压梯度需要购置三个甚至四个泵，成本进一步提高。四元低压梯度可以在进样程序中直接设置走完序列后冲洗瓶子；而高压梯度要达成这样的方法，需要购置阀控或者更多的泵。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]淋洗液发生器产生的梯度淋洗[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]使用的流动相以酸碱盐的水溶液为主，传统的配制方法是称量试剂并溶解定容。淋洗液发生器通过电解在线产生高纯度淋洗液，并支持梯度程序，是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]发展中的重大跨越。此处以[font='times new roman']KOH[/font]淋洗液发生器为例介绍淋洗液发生器的原理。淋洗液发生器通电时，阳极电解产生氢离子及氧气，氢离子和罐中的氢氧根离子反应生成水，导致罐中钾离子（阳离子）比氢氧根离子（阴离子）数量多。多出来的钾离子在电场及渗析作用的驱动下通过阳离子膜到达氢氧化钾发生室。阴极在氢氧化钾发生室的底部，电解产生氢氧根离子和氢气。[align=center][img=,591,290]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936253224_254_1809927_3.jpg!w591x290.jpg[/img][/align]随着超纯水不断流入氢氧化钾发生室，钾离子和氢氧根离子以及氢气随着水流入[font='times new roman']CR-ATC[/font][font='times new roman']（主要作用是去除杂质阴离子）[/font]和脱气盒，在脱气盒中氢气被去除。所产生的KOH溶液的浓度由施加电流与去离子水的流速决定。根据法拉第电解定律，在恒定流速下，施加电流和所产生的KOH浓度之间呈正比，可通过控制所加的电流得到准确浓度的KOH淋洗液，因此也可以实现梯度淋洗。操作鼠标即可设置淋洗液的浓度梯度，有效地简化了操作和缩短了运行时间，使其与等度淋洗一样方便，此项技术被称为“只加水”[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]技术。5 总结进行梯度淋洗可以达到以下目的：缩短分析周期；提高分离能力；峰型得到改善；增加灵敏度，但通常会引起基线漂移。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中，使用淋洗液发生器产生的梯度淋洗精度通常高于高压及低压梯度，推荐使用。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]中，高压梯度及低压梯度各有优势，可根据实验室条件及预算进行选配。6 参考文献牟世芬，朱岩，刘克纳.《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]方法及应用》（第三版）化学工业出版社于世林.《图解高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术与应用》科学出版社R.施奈德，J.L.格莱吉克 著 王杰 赵岚峰 王树力 丁洁 译 《实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立》（第二版）科学出版社青岛睿谱分析仪器有限公司 《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]实用手册》张新庆 “二元泵和四元泵哪个好”gz号

以四硼酸钠为淋洗液在国产仪器上实现梯度淋洗，同时分析部分有机酸和常见阴离子，谱图如下：[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/02/200902210811_134438_1608336_3.jpg[/img]条件 色谱仪：Portable 800 色谱柱：YSA-8 抑制器：WLK-6A阴离子抑制器 泵：P3000高压梯度泵+动态混合器 淋洗液：0-30mM四硼酸钠梯度 流速：1.5-2mL/min梯度 电流：150mA组份名称F、乙酸、丙酸、羟基乙酸、甲酸、丙酮酸、ClO2、BrO3、Cl、NO2、PO4、Br、NO3、苹果酸、SO4、草酸共16种。

[align=center]等度淋洗还是梯度淋洗[/align]本篇从[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]等度淋洗与梯度淋洗的区别、优势、操作难易、谱图分析等角度介绍两种淋洗模式，用真实的分析数据说话，无论有无使用经验都能毫无阻碍的阅读。阅读的同时可带着这两个问题思考：为什么要选择梯度？梯度会让操作更麻烦吗？以阴离子分析为例做具体说明，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析阴离子时常采用氢氧根淋洗液或碳酸根/碳酸氢根淋洗液，顾名思义等度淋洗为在分析过程中淋洗液组成和浓度都不变，采取手动配置淋洗液时只需要配制一种，只需要一个高压泵即可完成，对仪器管路简单，能满足大部分分析需求。但对一些样品存在难以解决的问题，例如同时分离强弱保留组分共存的样品，使用低浓度淋洗液，强保留组分洗脱时间很长甚至不能被洗脱，若提高淋洗液浓度将强保留组分快速洗出，则很大可能会影响或干扰弱保留组分的分离；这个合适的“度”并不好掌握，于是梯度淋洗应运而生。梯度淋洗则可以设置梯度程序，常使用的是浓度梯度，即在不同时间设置不同的淋洗液浓度。在起始阶段选择较低的淋洗液浓度，将弱保留组分洗脱后即可升至高浓度，将强保留组分快速洗出，实现强弱保留组分的同时分析。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530495069_9000_5638282_3.jpg[/img][/align]梯度曲线以红色虚线表示，根据谱图可知，梯度淋洗在起始浓度使用10mM氢氧化钾淋洗液，10-30min浓度线性增加到30mM，30-40min维持30mM的浓度，在最后阶段回到起始浓度10mM。不但大大缩短了磷酸根的洗脱时间，峰形变得更尖锐对称。并且将弱保留的组分的分离度提高。不同样品选择合适的梯度程序可以改善分离条件，提高分离度，减少分析时间，提高分析效率。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中保留时间越长，峰形越宽，使用梯度淋洗能保持峰形的尖锐，提高峰的对称性有利于定量分析。因此有更高的分析需求，复杂的分析样品或需要摸索最佳分离条件的用户，或等度淋洗无法解决的情况下，配备淋洗液发生器并使用梯度淋洗将是不二之选，先进的淋洗模式将助力科研的速度。下面以青岛睿谱INTELLIC工作站的浓度梯度设置界面为例：在左侧梯度程序设置中用鼠标任意建立和修改相应梯度程序（支持20行），同时在右侧会实时根据设置的梯度程序生成更直观的梯度曲线；并且在进行分析时的实时曲线中也叠加显示此梯度曲线。将淋洗液信息一目了然，可根据谱图对梯度曲线及时进行优化。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530502377_5311_5638282_3.png[/img][/align]实现梯度淋洗的最简单方法是使用淋洗液发生器，仪器上方的淋洗液瓶只加入脱气之后的超纯水，只需用鼠标点击即可设置相应的淋洗液浓度，在线产生纯净的浓度精准的淋洗液。一方面操作简便省去了配制溶液的手动步骤，自动化程度大大增加。另一方面整个流程避免了使用化学试剂带来的误差和危害，使分析结果的重复性大大提高，实现了只使用水进行分析的绿色化学。下面是几张梯度程序应用的实际案例谱图：[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530505053_5413_5638282_3.png[/img][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530502803_843_5638282_3.png[/img][/align]细心的人除了能从这两张不同的谱图中看出应用的场景外，第二张图能明显的看出因淋洗液浓度变化而导致的基线漂移，那为什么第一张图使用梯度浓度更高而基线漂移却不那么明显呢？先说原因，梯度淋洗时开启CR-TC并施加合适电流即可大大降低基线漂移和噪声，并能使背景电导进一步降低。这里先简单介绍部件，下篇将详细介绍其原理与应用。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530504102_7148_5638282_3.jpg[/img][/align][align=center][font='等线 light'][size=13px]淋洗液发生器实拍图（未接C[/size][/font][font='等线 light'][size=13px]R-TC[/size][/font][font='等线 light'][size=13px]）[/size][/font][/align]使用梯度淋洗的三要素：氢氧根体系色谱柱、淋洗液发生器、自动再生电解抑制器，在青岛睿谱已经实现国产化自主化，在提升国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]器性能的路上不断前进。青岛睿谱分析仪器有限公司研发生产的淋洗液发生器将淋洗液罐、CR-TC、脱气盒单独设立一个机箱，与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]主机连接方便，可轻松实现氢氧根淋洗液的梯度淋洗，经过验证，搭配自家WLK-12A抑制器可有效抑制70mM氢氧根淋洗液而不发生明显基线漂移。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209281530505782_3893_5638282_3.png[/img][/align]知识拓展：氢氧根体系色谱柱与碳酸盐体系色谱柱的区别固定相：碳酸盐体系色谱柱功能基为烷基季铵盐，对碳酸盐的亲和力较强，对氢氧根的亲和力弱；相应的氢氧根体系色谱柱使用的是对氢氧根亲和力更高的固定相。分离和检测角度看氢氧根做淋洗离子经过抑制器抑制后的背景电导更低，噪声更小，非常适合进行痕量分析，还可使用高浓度淋洗液分离强保留组分。而某些特定领域碳酸盐体系也具有一定优势，如测定磷酸盐；对上述内容若有疑问或建议，欢迎大家留言讨论现在您已经对等度淋洗和梯度淋洗有了初步的了解，如果需要更深一步的了解梯度淋洗，请看下篇：梯度淋洗进阶篇——CR-TC（连续再生捕获柱）

氟马替尼和伊马替尼皆为靶向治疗药物，伊马替尼（原称STI571）是一种治疗普通种类癌症的药物。其甲磺酸盐目前由诺华公司在市面上销售，在中国商品名称“格列卫”。它被用于治疗慢性粒细胞性白血病（CML），胃肠道间质瘤（胃肠道间质瘤）和其他一些疾病。到2011年，该药已被FDA批准用于治疗10个不同的癌症。对于慢性粒细胞白血病，酪氨酸激酶ABL被锁定在其活化形式。它导致慢性粒细胞白血病的异常表型为：过度增殖和白细胞计数高。伊马替尼可与酪氨酸激酶活性位置结合，并阻止其活动。甲磺酸氟马替尼是江苏豪森药业股份有限公司组织多家单位研究开发的氨基嘧啶类化合物甲磺酸氟马替尼是针对Bcr-abl设计的格列卫的结构修饰药物。药理实验显示疗效明显优于imatinib（格列卫），目前的数据支持甲磺酸氟马替尼进入临床进一步试验。本临床研究已得到中国食品药品监督管理局的批准并已被伦理委员会审阅通过。伦理委员会将保证所有参与者的权利得到保护。质谱图是某质谱解析爱好朋友提供的，觉得这个稍微难一点，所以很提人胃口，所以解析起来可能更有点意思！！！氟马替尼质谱图（ESI+）：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409261650_515869_2359621_3.jpg氟马替尼可能的质谱裂解途径：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409261649_515868_2359621_3.png 氟马替尼分子量为562，质子化产物为563,585为其加钠峰，545碎片离子为脱水峰，结构中的酮式会与烯醇式互变，经过氢重排脱水，523与准分子离子相差40为脱去两分子的HF而生成，503为在523的基础上再失去一分子HF生成，基峰为463是与脂肪胺相连的苯环上苄基断裂，同时电荷转移，七元环的卓鎓离子更具有稳定性个人认为脂肪环上的N原子的碱性强一点所以其具有较强的质子亲和力，所以质子化发生位置可能就是在脂肪环的N原子上，除了苄基的断裂还有一种断裂方式就是与苯环相连的C-C键的断裂，从而得到449的碎片离子，423碎片离子是463碎片离子失去两分子的HF而生成的，285为酰胺键断裂电荷转移，由此推断可能质子化位置在酰胺N原子上，277亦为酰胺键断裂只不过正电荷定域在左侧，C-N键断裂会得到263的离子，由于游离基中心的诱导 该离子再失去氢自由基得到262的碎片离子，嘧啶与吡啶相连的氨基经过H重排发生1.3-键断裂，后得到173的碎片离子，58，99，100的离子均来自N脂肪环，C-N键断裂，失去氢自由基，以及开环所生成。依马替尼质谱图（ESI+）：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409261651_515870_2359621_3.jpg依马替尼可能的质谱裂解途径：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409261659_515871_2359621_3.png伊马替尼在结构上与氟马替尼的差异不大，毕竟氟马替尼是伊马替尼的结构修饰药，所以结构上比伊马替尼在苯环上多了三氟甲基取代基，另外则是甲基吡啶环变成甲基苯环，伊马替尼分子量为493，准分子离子加氢峰为494，准分子离子加钠峰为516，离子都具有很高的丰度，476为烯醇互变引起脱水得到的，这个过程与氟马替尼一致，394为苄基断裂，380为与苯环相连的C-C键的断裂得到的 ，262为与苯环相连酰胺键的CN键断裂生成的离子，217为酰胺键断裂电荷转移得到的，后失去CO中性分子得到189碎片离子，222为酰胺键断裂，以及苄基断裂生成卓鎓的离子，235为262失去HCN得到，低质量端为含氮脂肪环产生的离子。注：参加原创不是目的，目的是和各位质谱解析爱好者，更深入、广泛的交流学习，分享自己的心得，同时认识到自己的不足！

[b][font='Times New Roman'][font=宋体]解答：[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]超临界流体色谱法（[/font]supercritical fluid chromatography[font=宋体]， [/font][font=Times New Roman]SFC[/font][font=宋体]）是以超临界流体作为流动相的色谱技术。原理即为使用超临界流体作为流动相，借助超临界流体的特性达到分离组分的目的。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]所谓超临界流体是指既不是气体也不是液体的一类物质，它们的聚集状态为介于气体和液体之间的流体，物理临界点温度通常高于沸点和三相点。从热力学上看，超临界流体的密度是气体的[/font]100~1000[font=宋体]倍，[/font][/font][font=宋体]与[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]液体相近，具有和液体相似的溶解能力及与溶质的作用力[/font][/font][font=宋体]；[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]从动力学上看，超临界流体的黏度要比液体低，可以使用比常规液相色谱更大的线速度[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]扩散系数是液体的[/font]10~100[font=宋体]倍，传质速率高。[/font][/font][font=宋体]（[/font][font='Times New Roman']3[/font][font=宋体]）[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]由于超临界流体的以上特性，超临界流体色谱法可获得比常规液相色谱更高的柱效和更快的分析速度。[/font][/font][font=宋体]但由于[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]超临界流体自身稳定性不佳，使用条件苛刻，重现性不佳，成本高昂等一系列原因，导致[/font][/font][font=宋体]其[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]发展空间受到限制。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img=,256,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103172141563611_2040_3389662_3.jpg!w256x256.jpg[/img][/font][/font]

2，才能使99%的弱碱保持不电离。Xtimate极端条件下耐受性试验ph11.5流动相极端条件下一个月的耐受试验中,Xtimate的柱效没有明显下降.（第三方检测）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912091531_189032_1628076_3.jpg无与伦比的峰形　　中性条件下测定碱性易拖尾物质，极佳的峰形，归因于有机无机杂化层的存在更彻底地消除了硅胶表面硅醇基的不对称吸附的影响。封尾不良的色谱柱产品测阿米替林峰形http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912091534_189033_1628076_3.jpg双封尾超纯硅胶基质的色谱柱产品测阿米替林峰形（Ultimate“极限”柱谱图）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912091535_189034_1628076_3.jpgXtimate测定阿米替林谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912091536_189035_1628076_3.jpg

我做了，这三种次膦酸盐混合物的固体磷核磁，哪位高手帮忙分析一下 ，图谱所能表示的信息！我的目的是想看出这三种次膦酸盐的含量！本人不太懂核磁，希望能说的具体点谢谢！[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912201424_190919_1919836_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912201425_190920_1919836_3.jpg[/img]

邻甲苯胺及其同分异构体的分离The Separation of O-Toluidine and Its isomers摘要：为了实现邻甲苯胺及其同分异构体的完全分离，首先，作者将邻甲苯胺及其同分异构体乙酰化，然后采用气相色谱-质谱联用方法，通过改进色谱条件，使其取得了完全分离。试验表明采用气-质联用方法可以实现邻甲苯胺及其同分异构体的完全分离。关键词：邻甲苯胺；分离；异构体；乙酰化Abstract: In order to achieve the complete separation of o-toluidine and its isomers, firstly, o-toluidine and its isomers were acetylation, and then the authors used gas chromatography-mass spectrometry methods, by improving the chromatographic conditions, so as to achieve their completely separation. The results showed that the gas-chromatography-mass spectrometry method can achieve the completely separation of o-toluidine and its isomers.Keywords: o-toluidine; separation; isomers; acetylation1 前言在禁用偶氮染料检测过程中，邻甲苯胺是经常被检出者之一。邻甲苯胺有两个同分异构体，分别是间甲苯胺和对甲苯胺。其中，邻甲苯胺属于禁用芳香胺，而间甲苯胺和对甲苯胺则不属于禁用芳香胺。三个化合物的沸点非常接近，分别为：邻甲苯胺（200±2℃）、间甲苯胺（203±3℃）、对甲苯胺（201±1℃）。而且三者的质谱图很相似，只是分子极性上略有差别，故造成在用气相色谱-质谱联用方法检测到邻甲苯胺时经常出现假阳性结果。如不采用薄层色谱、液相色谱等其它分析手段共同鉴别，是无法判断是否假阳性结果的。但是要排除假阳性结果，就需要重新寻找条件，而且更换仪器费时费力，且多数实验室不一定同时具备这些设备，这就给我们的日常检测工作带来了很多的麻烦和不便。本文作者结合自身知识和经验，对常见的邻甲苯胺及其异构体分离问题进行了研究。通过查阅相关资料，作者发现邻甲基乙酰苯胺（296℃）、间甲基乙酰苯胺（303℃）和对甲基乙酰苯胺（307℃）三者的沸点相差较大，所以作者首先通过试验将邻甲苯胺及其异构体分别乙酰化，然后通过改进色谱条件，使以上化合物达到了完全分离，提高了检测效率，减少了检测过程中的假阳性检出。 2 试验2.1 仪器与试剂气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）：Agilent 7890A/5975C，美国Agilent公司毛细管柱：DB-17MS柱（30m×0.25mm×0.25μm）叔丁基甲醚、乙酸酐、无水碳酸钠和无水碳酸钾均为分析纯 旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂邻甲苯胺及其同分异构体均为德国Dr.Ehrenstorfer公司。2.2 试剂配制标准品溶液：用叔丁基甲醚为溶剂，分别称取适量邻甲苯胺、间甲苯胺和对甲苯胺标准品配成合适浓度的单标溶液及混合溶液。碳酸钾溶液：0.1mol.L-1水溶液，取13.8g[font